SU493059A3 - Способ консервировани крови - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  и области гематологии.

Извеотен способ консервировани  врови путем добавлени  к крови ионое рвирующих растворов, содержащих антиноагул нты.

Однако такой способ не обеспечивает длительного хранени  дрови.

С целью увеличени  срока хранени  к ров и, по предложенному способу добавл ют также дигидроойсиацетон в количестве 20-100 мМ на I л нрови.

В качестве антикоагул нтов используют раствор антицоагул нта цитрата декстрозы (АЦД) и раствор антикоагул нта цитрата фосфата декстрозы (ЦФД). Антийоагул нт цитрага декстрозы  вл етс  стерильным раствором лимонной киолоты, цитрата натри  и .декстрозы в воде, пригодной дл 

инъекции. Лимонна  кислота и цитрат натри  обеспечивают ионы цитрата дл  предотвращени  коагул ции крови, а декстроза служит главным источником энергии дл  красных кров ных клеток. В санкционированных рецептурах А1Щ 1,84 г декстрозы предусматриваетс  на 500 мл цельной крови. Декстрозу в этом растворе рассчитывают на основе моногидрата декстрозы, но декстроз могут добавл ть в безводной скорме при использовании 1,68 г безводной декстрозы на 500 мл крови.

Раствор антикоагул нта ЦфД вл етс  стерильным, пригодным дл  инъекций водным раствором лимонной . вислоты, цитрата натри , бифосфата натри  и декстрозы. Лимонна  кислота и цитрат натри  обеспечивают ионы цитрата дл  предотвращени  коагул ции . Деиотроза  вл ето  моногидрагно ее смешивают а количеотве, соотаетсгвующем 1.,79 г на 500 мл крови или 1,63 г, если ее добавл ют в виде

и

безводной девотрозЫв

При использовании водных антйкоагул нтных растворов сахара (а именно АЦЦ и ЦФД) дл  подмешивани  н саеЕв .собранной крови врове-антйкоагул нт- ные растворы хран т под охлаждением но без замораживани  (при температур 1-6°С). При тавих услови х хранени   расные кров ные клетки остаютс  жизнеспособными до 21 дн 

Дигидрооксиацетон ввод т в раствор антивоагул нта первоначально с целью увеличени  или поддержани  содержани  2,3-дифосфоглицера5 (ДФГ) в свежесобранной крови в Дигидроовсиацетон не  вл етс  тойоичньш, он безопасен дл  вливани  Е количествах необходимых дл  этой, цели

Дигидроовсиацетон можно иопользовать в комбинации с аденином или пируватом (ооль или эфир пировиноградной вислоты) или инозином. Желаема  вомбинаци  добавок ввлючаег дигидрооксиацетон с аденином и пируватом , или дйгидроойсиацетон о аденйном , инозином и пируватома При таких комбинаци х как уровни АТФ, так и уровни 2,3 дифосфоглицерат могут улучшатьс  в течение 1-21 дн  хранени  иж может увеличиватьс  врем хранени  от I до 3 недель (|общее врем  хранени  28-42 дн  при .

Дл  сбора и конаервацйи йрови примен ют санкционированные виды контейнеровf стейл. нные или пластмассовые контейнеры,

Раствор антийоагу  йта внутри контейнера содержит антикоагулирующее вещество дл  предотвращени  коагул ции крови и источник сахарной энергии дл  красных кров ных влетов Источником сахарной энергий врасных кров ных клегоа  вл етс  девотрозЗв но могут использовать фруатозу, мак4

нозув галактозу. Количество примен вмой декстрозы может быть 1,7-1,9 г на 500 мл крови. Но можно примен ть дегидрооксиацетон в достаточной концентрации как дополнительный или альтернативный источник энергии дл  красных кров ных влетов.

Блок сбора и консервации должен содержать 5-10 ммолей дегидрооксиацетона на I л врови. Если вонтейнер объемом на 500 мл крови, то необжоди-МО вводить раствор антивоагул нта не более„ чем 50 мл дегидроовсиацетона Там, где дегидрооксиацетон используетс  дл  поддержани  2, обеопечиваетс  источник сахарной энергш, то дегидрооксиацетон примен ют в количестве 30 мМ на I л крови.

Но содержание декстрозы или э БМваленгного сахара в растворе антивоагул нта может снижатьс . Поэтому количеотво сахара ограничиваетс  до г моногидрата декстрозы на I л крови, дегйдроовсиацетон ввод т в количестве 20-100 мМ на I л нроЕИ.

Дегидрооксиацетон может использоватьс  в комбинации с инодином, пируватом или аденином Подход щие воличесува этих веществ приведены в таблице

Могут использоватьс  другие источники ионов пиррата Примером  вл етс  пирринова  (пйровиноградна ) кислота . рН растворов аитйкоагул нта может быть около 5 дл  АЦД и дл  ЦФДг Однако дл  более широкого интервала может примен тьс  рН например,

до 9 (особенно выше 7). Дегидроокоиацетон добавл ют к свежей вроЕИ немедленно после сбора свежей крови.

Одновременно с отбором крови и немедленно после введени  ее в контейнер с ней смешивают от 5 до 50 мМ дегидроонсиацетона на I л врови.

Дегидроонсмацетон должен быть растворен Б стерильном растворе, таком как стерильна  вода или водный раствор антиноагуд нта, содержащий декстрозу или другие ингредиенты. Смесь крови с дегидрооксиацетоном затем хран т при температуре ниже 10°С, а именно от I до 6°С, она может хранитьс  в течение 21 дн ,

В конце этого периода времени кровь будет содержать значительно больше 2,3-ДФГ, чем кровь, сохран ема  при тех же услови х, но без дегидрооксиацетона . Кровь может хранитьс  дольше 21 дн , причем она будет лучше по качеству в отношении содержани  2,3-Д.фГ, чем кровь, сохран ема  стандартным способом (применение антикоагул нтных цитрат - декстрозовых растЕоров или антикоагул нтных цитрат-фосфат-декстрозовых растворов).

Пример I. Безводную лимонную кислоту (7,3 г), дигидрат цитрата натри  (22,0 г), моногидрат декстрозы (24,5 г) и дигидрооксиацетон (12,0 г) раствор ют в пригодной дл  инъекций воде (800 мл), раствор довод т водой до I л и фильтрзшт через фильтр с размером пор 0,8 мМ. Раствор в полости или сосуде дл  крови в отношении 75 мл раствора на 500 мл крови, подлежащей сбору, стерилизуют в автоклаве при 116°С в течение 20 мин.

Пример 2. Дигидрат цитрата натри  (31,0 г), моногидрат бифосфата натри  (0,041 г), гептагидрат двуосновного фосфата натри  (0,344 г), моногидрат декстрозы (25,5г;) и дигидроокоиацетон (12,9 г) раствор ют в пригодной дл  инъекций воде (800 мл) и

6

раствор довод т водой до I л и стерилизуют фильтрацией через фильтр с размерами 0,22 мкм. Примен   асептические методы, раствор помещают в стерильную полость или сосуд дл  крови (причем 70 мл раствора добавл ли на каждые 500 мл крови, подлежащей сбору),

Пример 3. Используют те же приемы, что в примерах I и 2, но и водному раствору добавл ют 51,8 г аденина .

Пример 4. Используют те же приемы, что в примерах 1-3, но и водному раствору добавл ют 9 г пирувата натри .

Пример 5. Используют те же приемы, что в примерах 1-4, но к раствору добавл ют дополнительно 22,1 г дигидрооксиацетона, а декстрозу не добавл ют.

Пример 6. Использу  приемы, описанные выше, дигидроацетон можно вводить в другие антикоагул нты.

АЦД или ЦфД-аденин.

Использование АЦД и аденином может продлить врем  хранени  до 35-42 дней, исход  из выживани  эритроцитов i/г , но при этом уровни ДФГ слегка уменьшаютс  по сравнению с АЦД и ШРД. Обычный уровень аденина равн етс  0,5 мМ на литр крови.

АЦЦ (или UfPJJ) рН 6-8 с аденином или без него. Сохранение рН выше 6 или 7 (щелочной рН 7-9) способствует поддержанию ДФГ. Уровень АТФ падает в течение первой недели (или двух недель ) хранени .

Добавка пирувата помогает предотвратить падение АТФ. Обычным уровнем пирувата  вл етс  0,1 мм на литр крови , это поддерживает уровень ДФГ на три недели.

Инозин поддерживает уровни ДФГ примерно на 4 недели. Концентраци  инозина равн етс  10-15 мМ на I л крови. Инозин при более низком уровне 1 может также добавл тьс  к крови после

2-3 недель хранени . Аденин может добавл тьс  в начале хранени .

Инозин и пируват, действу  совместно , поддеркивают ДФГ уровни на 5 недель .

Пример 7. ЦФД-аденин-аскорбат-дигидрооксиацетон .

Дигидрат цитрата натри  (30,8 г), безводна  декстроза (23,2 г), дигидроонсиацетон (14,7 г), аденин (0,55 г), аскорбинова  кислота (8,1 г) и моногидрат бифосфата натри  (2,22 г) раствор ют в пригодной дл  инъеиций воде (800 мл) и ра створ довод т водой до I л, его стерилизуют фильтравдей через стерильный фильтр (0,22 мкм). Использу  асептические методы, 70 мл раствора помещают в стерильные полости дл  сбора 500 мл крови. Полости упаковывают в металжческие банки под азотом . Рецептуры дл  стерилизации нагревом без разрушени  аскорбата и дигидрооксиацетона раздел ют на две части, которые устойчивы к авток  аву. Перед выт гиванием крови две части вновь соедин ют, использу  пластмассовые полости, соедин емые пластмассовыми трубочками. Одна из этих полостей находитс  в ведущей трубке линии емкостью 15 мл. Друга   вл етс  полостью дл  сбора крови емкостью 500 мл.

%

Дигидрат цитрата натри  (38,3 г), аденин (0,68 г), аскорбинова  кислота (11,1 г) и моногидрат бифосфата натри  (2,76 г) раствор ют в пригодной дл  инъекций воде (800 мл) и раствор довод т водой до I л; 56,4 мл помещают в полость дл  крови емкостью 500 мл.

Раствор дл  наполнени  15 мл ведущей трубки приготавливают путем растворени  безводной декстрозы (105,6 г) и дигидрооксиацетона (0,69 г) в пригодной дл  инъекций воде (800 мл); раствор довод т водой до 1-л;рН 3,8-4,2. 15,4 мл помещают в полость и выдерживают в автоклаве 20 мин при 116°С, затем охлаждают в воде и помещают в металлическую банку под азотом .

Комбинаци  аскорбиновой кислоты и дигидрооксиацетона повышает или поддерживает содержание 2,3-ДГФ красных кров ных клеток до удовлетворительной степени.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ консервировани  крови путем i добавлени  к крови консервирующего раствора, отличающийс  тем, что, с целью увеличени  срока хранени  крови, добавл ют также дигидрооксиацетон в количестве 20-100 мМ на литр кроЕИ.