SU455546A3 - Способ выделени аспрагиназы - Google Patents

Description

Изобретение откоситс  к медицине, к производству ферментных препаратов. Известен способ очистки аспарагиназы, при котором предварительно очищениый препарат фермента обрабатывают спиртом при температуре 4°С. Выделенный целевой продукт подвергают дальнейшей очистке. Цель изобретени  - повысить чистоту целевого продукта. Поставленна  цель достигаетс  тем, что осаждение провод т в присутствии глицерина, причем на 5 объемов этаиола берут 1.5-2 объема глицерина и осаждение осуш,ествл юг при температуре О-25°С и рН около 5,0. Пример 1. При температуре О-5°С, перемешива , к 5 см водного раствора сырой а-аопарагииазы при рН 5,5, содержащего 1785 М.Е. аспарагиназы -и 19 мг протеинов (т. е. удельна  активность в 94 М.Е./мг) прибавл ют 1,5 см глицерина, а затем 5 см этилового спирта. Перемешивание продолжают еш,е в течение 2 час 30 мии при той же температуре, а затем выдел ют центр гфугированием образовавшийс  осадок. Анализ полученного осадка производ т после растворени  его в воде. Такпм образом получают смесь, содержащую 1.400 М.Е. а-аспарагиназы и 11 мг протеиноз (т. е. удельна  активность 127 М.Е./мг) Выход - 78,5%: Г1 р и м с р 2. К см водного раствора сырой а-асиирагииазы при рП 5,5, содержащего 5255 М.Е. асиарагииазы и 40,8 мг иротеииов (т.е. удельна  активность в 128,5 М. Е.), о.хлаждеиного иа вод ной бане, прнбавл ют последовательно при иеремешиваиип 2 см глицерина , а затем 5 см этанола. Перемешивание продолжают еще в течение 5 мин, а затем оставл ют lia одну ночь при температуре О-5°С. Затем цопт тифугированием отдел ют осадок, а потом растг ор 1от его в воде дл  анализа. Таким образол получают раствор, содержащий 5100 М.Е. а-аспарагиназы и 23,2 мг протеииов (т. е. удельна  активность 220 М.Е./мг). Выход - 97,20/0. Предмет изобретени  1. Способ выделени  аспарагиназы из растворов иутем осаждени  этаиоло, отличающийс  тем, что, с целью повышеин  чистоты целевого продукта, осаждение провод т в присутствии глицерина. 2. Способ по п. 1, отличающийс  тем, что iia 5 объемов эталона берут 1,5-2 объема глицерина И осаждение осуществл ют при тe.пeратуре О-25°С и рП около 5,0.