SU395746A1

SU395746A1 - Способ импрегнации нервных тканей азотнокислым серебром

Info

Publication number: SU395746A1
Application number: SU1232855A
Authority: SU
Inventors: В. Коротченко Институт физиологии имени А. А. Богомольца Украинской ССР В.
Priority date: 1968-04-12
Filing date: 1968-04-12
Publication date: 1973-08-28

Description

1

Изобретение относитс к области медидины .

Известен способ импрегна ции нервных тканей азотнокислым серебром, заключающийс в помещении срезов в 20%-ный раствор азотнокислого серебра, последующего помещени их в 20%-ный формалин, и затем в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра.

Цель изобретени - разработка способа, обеспечивающего более полную и избирательную импрегна Цию нервных алементов.

Поставленна цель достигаетс обработкой срезов растворами повтор ющимис циклами с малыми экспозици ми, например от 30 сек до 1,5 мин.

Пример. Кусочки тканей фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине не менее 5-7 суток.

После резки на замораживающем микротоме срезы толщиной 15-30 мк перенос т в дистиллированную воду.

Импрегнируют срезы в 20%-ном растворе азотнокислого cepe6pai при обычном освещении 30 сек дл спинного и головного мозга и 1-1,5 мин дл вегетативных ганглиев и тканей более плотных, чем спинной и головной мозг.

Окраска восстанавливаетс раствором

20%-ного формалина, куда срезы помещают не более чем на 10 сек.

Срезы опускают в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра, нриготовленного следующим образом: к 5-10 см 20%-ного раствора азотнокислого серебра прибавл ют при непрерывном встр хивании но капл м 25%-ный раствор аммиака до тех пор, пока исчезнет коричневый осадок. Дл проведени реакции наливают в часовое стеклышко 4-5 см раствора и на каждый 1 см прибавл ют по 1 капле аммиака. Затем наблюдают под микроскопом. Срезы приобретают слегка желтоватый цвет. В этом растворе срез находитс около 1 мин.

Срез перенос т на 1 сек в аммиачную воду (1 ч. аммиака, 2 ч. дистиллированной воды). После этого срез помещают в 1-3%-ный раствор формалина. Концентраци раствора формалина определ етс в зависимости от степени импрегнации: при слабой импрегнации до 3%, при интенсивной - снижаетс до 1 % (длительность пребывани среза : растворе около 1 мин).

Затем срез снова перенос т в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра. Если через 1-2 мин не достигнута требуема окраска всех нервных элементов, срез снова помещают на 1 сек в аммиачную воду, затем в 1-3%-«ый раствоп формалина на

короткое врем , Яе превышайЩее 1 мин, затем оп ть в 20%-ный раствор аммиачного серебра . Цикл аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра - аммиачна вода 1-3%-ный раствор формалина - аммиачный раствор 20%-н-ого азотнокислого серебра по- втор етс 2-5 раз, регулиру нужную степень импрегнации. При этом учитывают, что аммиачна вода тормозит импрегнацию, а формалин ее стимулирует.

Достигнув требуемую картину импрегнации то ли в аммиачном растворе 20%-ного азотнокислого серебра, то ли в 1-3%-но:м формалине , импрегнацию прекращают помещением срезов в аммиачную воду на I мин.

Срезы промывают в дистиллированной воде 1-3 мин.

В (большинстве случаев inpE этом способе окраски отпадает необходимость помещени срезов в 0,1%-ный раствор хлорного золота, так как импрегнаци соединительно-тканых элементов не происходит.

Срез помещают в 5%-:НЫй раствор гипосульфита на 5 мин.

После 3 мин промывки в дистиллированной воде срез нровод т по спиртам - 70-80- 96%-ной конщентрации, просветл ют и заключают в канадский -бальзам. Через мин хорощо импрегнированный срез готов.

Предмет изобретени

Способ импрегнации нервных тканей аеогнокислым серебром, путем помещени срезов В раствор азотнокислого серебра, последующего помещени их в раствор |формалина и затем В аммиачный раствор азотнокислого серебра, отличающийс тем, что, с целью обеспечени избирательной импрегнации нервных элементов, обработку срезов растворами производ т повтор ющимис Циклами с экспозици ми от 30 сек до 1,5 мин.