SU328746A1 - Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССР - Google Patents
Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССРInfo
- Publication number
- SU328746A1 SU328746A1 SU1479555A SU1479555A SU328746A1 SU 328746 A1 SU328746 A1 SU 328746A1 SU 1479555 A SU1479555 A SU 1479555A SU 1479555 A SU1479555 A SU 1479555A SU 328746 A1 SU328746 A1 SU 328746A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- magnesium
- amylase
- phosphate
- elution
- sulphate
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
- C12N9/2411—Amylases
- C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
- C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
- C12N9/242—Fungal source
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Изобретение относитс к ферментной нромышленносП .
Известен способ иолучепи а-амилазы путем глубинного культивировани их продуцентов , например Aspergillus oryzae, па питательной среде, содержащей крахмал, азотнокислый Натрий, однозамещеипый фосфорнокислый калИ11 , сернокислое железо, сернокислый магний, экстракт из солодовых pocTi;oB, выделенн ферментов нз культуральной жидкости на Ионообменных колонках с последующим элюированием нх.
Известный способ дает низкий выход аамилазы . составл ющей 25-30%; гетерогенность KOiieiHoro npenapaia, содержащего кроме tt-амилазы качественно другой белок, в Частности фермент декстрнназу; потерю нативпого состо ни очниил1ного фермента аамилазы , выражаюи1,уюс в низкой удельной активиости, составл юп1ей 20 ед/мг белка; больщое число операций и их трудоемкость.
С целью получени гомогенной а-амнлазы с больиюй удельной активностью, в пит::гельную среду дополнительно ввод т однозамещен11ый фосфорнокислый и азотнокислый магНИИ , а элюнрование осун1ествл ют фосфатпым буфером.
Крахмал, азотнокислый натрий, сернокислый магний, сернок1 слое железо ввод т в нитательпую среду в колнчества.ч, соответственно равных ЙО; 12; 1,0; (J,0:i г/л.
С целью упрощени способа выделени и очпстки сс-амнлазы, ее элюнрован11е с ионообх1енника производ т 0,1-0,4 Л1 фосфатны.1 буферным раствором с рН 6,8-7,4, содержащим Г),001-0,00003 М СаО.
. Культуру му а}ггного штамма Aspergi lu-s огхгао 3 - 9-15 г,1,-1))Гииив;иот 1лубншнлм методом в колбах на ка-ш.чке 72 чаС на нн1ате.1Ы10й среле слел ющего состава, г/л:
Крахмал
80 К Нор О,
0,1 Mg(NO,), 0,8 МаХО, 12 0,5 КС1
Мо-(ИоРОО 0,7 MgSO,i 1 FeSO.,
0,03
Kyvii-.iypy гриба выраннваьэт нрн . фильтрате 72-часовой кулыуры удельна акiHBHocTb а-амилаз1-.1 8-9 ед/мг белка и 20 ед/мл фнл1,1рата. Оби1,ап активность филь1рата 10000 од.
нанос т на колонку с 10 г ДЭАЭ целлюлозы, фракцию белков, не содержащую а-амилазу, вымывают 0,05 М фосфатным буфером рН 7,15. Эта фракци содержит G80 мг белка.
0,1 М фосфатным буфером рН 7,15 полностью вымываетс фракци , содержаща только сс-амилазу; сс-амилазы составл ет 300 мг, а обща активность 10000 ед., т. е. 100% от количества фермента в диализате. Удельна активность сс-амилазы 35 ед/мг белка . Диализ и хроматографию белка на ДЭу Эцеллюлозс провод5гг ири температуре не выше . Аналогичную картину получают и в случае других указанных вьппе штам.мов, которые также могут быть рекЪмендованы дл промыщленного получени сх-амнлазы.
Предмет изобретени
Claims (4)
1. Способ получени а-амилазы путем глубинного культивировани их продуцентов, папример Aspergillus oryzae, на ннтательной среде , содержащей крахмал, азотнокислый натри11 , одпозамещенный фосфорнокислый калий, сернокислое железо, сернокислый магний, экстракт из солодовых ростков, выделени ферментов из культуральной жидкости на ионообменных колонках с последующим элюировапием их, отличающийс тем, что, с целью
получени гомогенной а-амилазы с больщой удельной активностью, в питательную среду дополнительно ввод т одпозамещенный фосфорнокислый и азотнокислый магний, а элюирование осуществл ют фосфатным буфером.
2. Способ по п. 1, отличающийс те.м, что однозамещенный фосфорнокислый и азогнокпслый магний ввод т в количестве, соответственно равном 0,7 и 0,8 г/л.
3.Снособ но н.п. 1 и 2, отличающийс тем, что крахмал, азотнокислый натрий, сернокислый магний, сернокислое железо ввод т в питательную среду в количествах, соответственно равных 80, 12, 1,0, 0,03 г/л.
4.Способ по п. 1, отличающийс тем, что, с целью упрощени способа выделени
и очистки а-амилазы, ее элюирование с ионообменника производ т 0,1-0,4 М фосфатным буферным раствором с рН 6,8-7,4, содержащим 0,001-0,00003 М СаСЬ.
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU1479555A SU328746A1 (ru) | 1970-10-20 | 1970-10-20 | Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССР |
DE19712151265 DE2151265C3 (de) | 1970-10-20 | 1971-10-14 | Biotechnisches Verfahren zur Herstellung von a-Amylase |
CH1502371A CH561777A5 (ru) | 1970-10-20 | 1971-10-14 | |
HUII000079 HU166872B (ru) | 1970-10-20 | 1971-10-20 | |
US00346785A US3826716A (en) | 1970-10-20 | 1973-04-02 | Method for preparing alpha-amylase |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU1479555A SU328746A1 (ru) | 1970-10-20 | 1970-10-20 | Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССР |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU328746A1 true SU328746A1 (ru) | 1974-01-15 |
Family
ID=20457882
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU1479555A SU328746A1 (ru) | 1970-10-20 | 1970-10-20 | Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССР |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
CH (1) | CH561777A5 (ru) |
HU (1) | HU166872B (ru) |
SU (1) | SU328746A1 (ru) |
-
1970
- 1970-10-20 SU SU1479555A patent/SU328746A1/ru active
-
1971
- 1971-10-14 CH CH1502371A patent/CH561777A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1971-10-20 HU HUII000079 patent/HU166872B/hu unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE2151265A1 (de) | 1972-06-08 |
CH561777A5 (ru) | 1975-05-15 |
DE2151265B2 (de) | 1977-02-03 |
HU166872B (ru) | 1975-06-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Arvidson et al. | Influence of cultivation conditions on the production of extracellular proteins by Staphylococcus aureus | |
Willis et al. | Preparation of the periplasmic binding proteins from Salmonella typhimurium and Escherichia coli | |
Johnson et al. | Substrate conversion by fungal spores entrapped in solid matrices | |
DE2121397A1 (en) | Production of alkaline protease from bacillus licheni - formis | |
Gondé et al. | Fermentation of cellodextrins by different yeast strains | |
US3097145A (en) | Acid protease and the production thereof | |
SU328746A1 (ru) | Г. И. КОКОЕГМЛР.НЛН Лаборатори биохимм!! расгеиий АИ FpysiitiCKofi ССР | |
US3151039A (en) | Milk coagulating enzyme "microbial rennet" and method of preparation thereof | |
Delente et al. | Production of a new thermostable neutral α‐galactosidase from a strain of Bacillus stearothermophilus | |
Uematsu et al. | In vivo and enzymatic conversion of toyocamycin to sangivamycin by Streptomyces rimosus | |
Araki et al. | Purification and characterization of a novel exo-β-mannanase from Aeromonas sp. F-25 | |
DE2745205C2 (de) | Maltase und ihre Verwendung bei Verfahren zur Bestimmung von Amylase | |
Kato et al. | Purification and properties of proteases from a marine-psychrophilic bacterium | |
Mahadevan et al. | The β-glucosidase system of Neurospora crassa: II. Purification and characterization of aryl β-glucosidase | |
KR100249995B1 (ko) | 터모코쿠스 유래 열안정성 프로테아제 | |
US3684658A (en) | Enzymes and process for their preparation | |
US4076589A (en) | Process for the production of dihydroxyacetone | |
US3032474A (en) | Production of l-glutamic acid | |
US4330464A (en) | Isolation of microbial protein with reduced nucleic acid content | |
US2102315A (en) | Process of preparing an enzyme from mold | |
CN1008188B (zh) | 制备新的耐热的转葡糖苷酶方法 | |
Hurley et al. | Some Characteristics of a Proteolytic Enzyme System of Pseudomonas fluorescens a | |
US3832284A (en) | Method for manufacture of alpha-galactosidase by microorganisms | |
Tatsuoka et al. | Purification of lipase produced by Rhizopus | |
SU734261A1 (ru) | Способ выделени рибонуклеазы |