SU324770A1

SU324770A1 - Способ получения рубомицина

Info

Publication number: SU324770A1
Application number: SU1166639A
Authority: SU
Inventors: Н. В. Константинова Е. Б. Кругл В. А. Помазкова М. Г. Бражникова
Priority date: 1967-06-21
Filing date: 1967-06-21
Publication date: 1973-05-25

Description

Изобретение относитс к способам получени айтибиотиков, в частности рубомици.на.

Известен опособ получени рубомицина путем ферментации Actinomyces coeruleorubidus . Указанный опособ не обеспечивает получение препарата достаточно высокого качества с удовлетворительным выходом.

С целью повышени ;вы1хода и качества рубомици-на мицелий экстрагируют органическим растворителем, например ацетоном, при рН около 4,0. Дл очистки антибиотика производ т экстрагирование, например, хлороформом при рН 8,8-8,9 с последующим подкислением экстракта до рН 3,5-3,9. Разделение рубомицина а фракции Л, В и С производ т хроматографированием на колонке с водной кремниевой кислотой с последующииМ элюированием органическим растворителем .

Компонент А выдел ют смесью хлороформа , бензола и метанола в соотношении 100: 10:5. Компонент В выдел ют смесью тех же растворителей, но вз тых в соотношении 100 : 10 : 15. Компонент С выдел ют метаноло:м.

Пример. 20 кг мицели , полученного фильтpo вaниeм 250 л культурадьной -жидкости , экстрагируют двойным количест1вом ацетона , подкисленного сол ной кислотой до рН 4,0. Экстракцию ведут в течение lr:4flfc нриг перемешивани ,после чего экстракт отдел ют

и повтор ют экстракцию одним объемом ацетона , содержащего 10% воды. Объединенный экстракт нейтрализуют до рН упаривают в вакууме и фильтруют, промыва осадок два

,раза по 0,5 л воды, подкисленной до рН 4,0

сол ной кислотой. Фильтрат и промывные

.воды подш,елачивают 10%-ны,м едким натром

до рН 8,9 и три1жды экстрагируют хлороформо-м порци ми по 4,4, 2,2 и 2,2 л. Экстракт

промывают водой, сушат над сернокислым натрием и упаривают в вакууме до 100 мл. К остатку добавл ют 50 мл безводного ацетона , а затем по капл м при перемешивании 0,5 н. раствор хлористого водорода в ацетоне до рН 3,9. Затем добавл ют еще 50 мл ацетона, образовавшийс осадок отфильтровывают , промывают его небольшим количеством безводного ацетона и сушат в вакуумзксикаторе .

Получают 15,6 г рубомицина, содержащего 30% компонента А, 28, комлоне;1та В и 41,5% компонента С. Из маточного раствора после отделени осадка упари ванием в до небольшого объема с последующим

вливанием в дес тикратный объем смеси серного и петролейного эфира выдел ют еще 2,2 г препарата.

ла и метанола (100: 10:5) и нанос т на ;;олонку с водной кремниевой кислотой (250 г кремниевой кислоты с размером частиц 0,1 - 0,25 мм суспендируют в хлороформе и внос т в колонку диаметро.м 4 слг). Элю-цию сначала провод т той же системой растаорителей в количестве 1750 мл со скОростыо 40- 48 мл/час м , собира фракции по 500 -«л. Затем продолжают элюцию 1700 мл смеси хлороформа, бензола и метанола при соотношении КО.М1ПОН6НТОВ 100 : 10 : 15, собира фра кдии по 100 мл. Оставшийс па колонке компонент С злюируют 1100 мл этанола.

Полученные фракции анализируют методо ,м бумажНой хр01матографии в системе ацетон , бензол, вода при соотношении 12:3:2 и однородные фракции объедин ют. Смесь фракций, содержащих ко шонеит А, упаривают в вакууме до 60 мл и осаждают нрепарат дес тикратным объемом лётролейного эфира. Выход 5,38 г. Фракции, содержащие компоненты В и С, упаривают в вакууме досуха , раствор ют остатки соответственно в 60 и 75 мл метанола и провод т осаждение п тнадцатикратны1м объемом этилового эфира . Выход 5,355 г компонента В и 7,283 г компонента С.

П р е д М е т изобретени

Claims

1.СносО;б получени рубомицина путем фер-ментации Actinomyces coeruleorubidus, отличающийс тем, что, с целью повышени выхода и качества целевого продукта, мицелий экстрагируют органическИМ растворителем, например ацетоном, при рН около 4,0 антибиотик очищают экстрагированием, например, хлороформом нри рН 8,8-9,0, экстракт подкисл ют до рН 3,5-3,9, далее рубомицин раздел ют хр01матографироваНием на колонке с водной кремниевой кислотой и элюируют ко мпоненты А, В и С органическим растворителем .

2.Способ по п. 1, отличающийс тем, что ко.мпонент Л выдел ют смесью растворителей хлороформа, бензола и метанола, вз тых в соотношении 100 : 10 : 5.

3.Способ по п. 1, отличающийс тем, что компонент Б выдел ют смесью растворителей хлороформа, бензола и метанола, вз тых в соотнощении 100 : 10 : 15.

-- Г -.-

4. Способ по п. 1, отличающийс тем, что компонент С выдел ют метанолом.