SU299054A1 - Способ очистки протеазного ингибитора - Google Patents
Способ очистки протеазного ингибитораInfo
- Publication number
- SU299054A1 SU299054A1 SU1119174A SU1119174A SU299054A1 SU 299054 A1 SU299054 A1 SU 299054A1 SU 1119174 A SU1119174 A SU 1119174A SU 1119174 A SU1119174 A SU 1119174A SU 299054 A1 SU299054 A1 SU 299054A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- protease inhibitor
- cleaning
- inhibitor
- magnesium oxide
- activity
- Prior art date
Links
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 title description 4
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title 1
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Chemical compound [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000001376 precipitating Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 229940088623 Biologically Active Substance Drugs 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 210000004072 Lung Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- YCPXWRQRBFJBPZ-UHFFFAOYSA-N 5-Sulfosalicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C1O YCPXWRQRBFJBPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000037197 Anion exchangers Human genes 0.000 description 1
- 108091006437 Anion exchangers Proteins 0.000 description 1
- 101710009148 SERPINA1 Proteins 0.000 description 1
- -1 aliphatic alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000001475 anti-trypsic Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019394 potassium persulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Изобретение относитс к области медицины, в частности касаетс способа очистки растворов протеазного ингибитора, получаемого из легких крупного рогатого скота.
Известен способ получени чистых растворов протеазного ингибитора путем осаждени балластных белков с помощью сульфосалициловой кислоты с последующим удалением избытка ее.
Недостатком данного и других известных методов вл етс то, что осаждающий агент должен быть количественно удален из раствора , что св зано со значительными трудност ми , особенно при работе с анионными обменниками .
Указанные недостатки устранены в предложенном способе.
Предложенный способ отличаетс тем, что сопутствующие белки адсорбируют окисью магни . Это упрощает процесс и уменьшает потери активного вещества.
Полученный из легких крупного рогатого скота неочищенный и содержащий ингибитор водный раствор с активностью от 800 до 1000 антитрипсин - единиц (ATE) на 1 мл, с рН 8,5-9,5 смешивают с 3-10% (преимущественно 5%) окиси магни и механически перемешивают от 1 до 16 час (преимущественно 3 час) при температуре 10-50°С (преимущественно 25°С). Затем окись магни , содержащую протеины и красители, отдел ют путем фильтровани . Окись магни кроме балластных веществ при адсорбции удерживает примерно 10% введенного биологически активного вещества. После отделени окиси магни к полученному фильтрату добавл ют от 2 до 6 (преимущественно 4) объемов низких алифатических спиртов (преимущественно этанола ) или ацетона. При этом осаждающее
вещество целесообразно предварительно охладить до -5°С и смесь дл наиболее полного выпадени биологически активного вещества следует в течение ночи выдержать в холоде. Образуетс мелкий чистый белый
осадок, который отдел ют центрифугированием . Осадок промывают этанолом или ацетоном или раствор ют в апирогенной воде или физиологическом растворе. Активность раствора ингибитора 2500 АТгЕ
на 1 мл, рН 2,5-3,5. Раствор ингибитора стерильно фильтруют, и он может примен тьс в медицине.
Пример. К 650 мл раствора ингибитора с активностью 918 АТгЕ на 1 мл при рН 8,5 добавл ют 32,5 г окиси магни и механически перемешивают в течение 3 час при температуре 25°С. При последующем отделении с помощью нутча получают 580 мл раствора ингибитора с активностью 774 АТгЕ и рН
10,0. Фильтрат обрабатывают при перемешивании 60 мл катиониого обменника Wofatit KPS (товарный знак), отжимают на нутче и добавл ют 4 объема концентрированного этанола при температуре -5°С. Дл более полного осаждени смесь выдерживают на холоде в течение ночи. Осадок отдел ют центрифугированием и раствор ют в 225 мл апирогенного физиологического раствора.
Полученный концентрат ингибитора имеет активность 2502 АТгЕ на 1 мл. Степень чистоты увеличиваетс со 124,2 до 695 ATfE на 1 мл. Выход составл ет 94,2%.
Предмет изобретени
Способ очистки протеазного ингибитора путем осаждени балластных белкбв с последующим отделением осаждающего агента, отличающийс тем, что, с целью упрощени процесса и уменьшени потерь активного вещества , сопутствующие протеины адсорбируют окисью магни .
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU299054A1 true SU299054A1 (ru) |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0399573A2 (en) | Process for recovery of amino acid from aqueous mixtures | |
| JPS60149526A (ja) | 溶血血液の未変性形の主タンパクの調製方法 | |
| HU202282B (en) | Process for separating 2-keto-l-gulonic acid from fermentation juice | |
| SU299054A1 (ru) | Способ очистки протеазного ингибитора | |
| JP3617091B2 (ja) | 塩基性アミノ酸の精製方法 | |
| JPH0648990B2 (ja) | トリプトフアンの精製方法 | |
| Hunter et al. | The specificity of arginase: action upon argininic acid | |
| EP0126887B1 (de) | Verfahren zur Gewinnung von reinem L-Leucin | |
| JPS6338B2 (ru) | ||
| Collings et al. | A modified method for the preparation of renin | |
| US2650242A (en) | Separation of tyrosine and cystine | |
| US20220227702A1 (en) | Improved method of synthesis and purification of citrulline | |
| JPS60133887A (ja) | エラスタ−ゼの製法 | |
| EP0126886B1 (de) | Verfahren zur Trennung von L-Leucin und L-Isoleucin | |
| SU1404513A1 (ru) | Способ получени овомукоида | |
| RU2128512C1 (ru) | Способ выделения цитохрома с | |
| JPH034532B2 (ru) | ||
| SU275027A1 (ru) | Способ получения биологически активных веществ, содержащихся в дрожжевб1х клетках | |
| SU174326A1 (ru) | Способ получения кристаллического гемоглобина | |
| EP0081831B1 (en) | Process for purifying elastase | |
| IE45013B1 (en) | Improvements in or relating to the preparation of insulin | |
| SU1629023A1 (ru) | Способ получени стимул тора роста животных из поджелудочной железы убойных животных | |
| SU626779A1 (ru) | Способ получени инсулина | |
| RU2016899C1 (ru) | Способ получения щелочной фосфатазы | |
| SU271472A1 (ru) | Способ выделения ферментного препарата липазы |