SU267509A1 - Способ производства /-лизина - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, а именно к способам производства /-лизина с,помощью ферментации .

Известны способы получени  /-лизина путем глубинного выращивани  продуцирующих его микроорганизмов на питательной среде, содержащей углеводы, азотные, фосфорные соли и стимул торы роста, с последующим отделением клеток от культуральной жидкости, например , фильтрацией и выделением /-лизина из культуральной жидкости на ионообменных смолах.

Однако дл  биосинтеза /-лизина используют ограниченный комплекс микроорганизмов.

Целью изобретени   вл етс  расширениекомплекса микроорганизмов, используемых дл  биосинтеза /-лизина.

Дл  этого в качестве микрооргани,змов-продуцентов используют штаммы Bfevibacterium ammoniagenes АТСС № 19350, АТСС%е 19351, АТСС № 19352, АТСС № 19353, АТСС № 19354, АТСС № 19355 и АТСС № 19356.

Микроорганизмы-продуценты /-лизина, например штаммы Brevibacterium ammoniagenes АТСС № 19350, АТСС № 19351, АТСС № 19352, АТСС № 19353, АТСС № 19354, АТСС № 19355 Я АТСС № 19356, требующие дл  своего роста

треонин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, цйстин или цистеин, выращивают в аэробных услови х на питательной среде, содержащей источники углерода - различные углеводы; источники азота - аммиак и соли аммони , например хлористый аммоний, сульфат аммони , нитрат аммони , карбонат аммони , фосфат аммони , ацетат аммони ; стимул торы роста- дрожжевой экстракт, гидролизат казеина , м сной экстракт; неорганические вещества - первичный кислый фосфорнокислый калий , вторичный кислый фосфорнокислый калий , сульфат магни , хлористый натрий, сернокислое железо, сернокислый марганец и углекислый кальций.

Ферментацию провод т в течение 2-5 дней при 24-37°С и рН 5,1-8,5. Затем культуральную жидкость отдел ют от бактериальных клеток одним из известных способов, например

фильтрацией, и пропускают через слой ионообменной смолы, котора  адсорбирует /-лизин. Пример 1. В качестве бактерии, используемой дл  посева, примен ют Brevibacterium ammoniagenes № 4948 АТСС 19350, (штамм,

требующий треонин):

Этот штамм инокулируют в 250 мл среды, используемой дл  посева и имеющей состав в %:

глюкозы 2, пептона 1, дрожжевого экстракта 1 и хлористого натри  0,2.

Выращивание провод т при 30°С в течение 24 час.

Полученные при этом бактерии, служащие дл  посева, инокулируют в количестве 10% по объему в коническую колбу, содержащую 30 мл ферментационной среды следующего состава , %:

Глюкоза7,5

Сульфат аммони 1,5

Первичный кислый фосфорно-кислый калий0,05

Вторичный кислый фосфорно-кислый калий0,05

Сульфат магни 0,025

N-Z-амин0,5

Карбонат кальци 2,0

рН среды равен 7,0, а биодин присутствует в количестве 30,0 мкг на 1 л.

Встр хивание культуры при доступе воздуха провод т при 30°С в течение 4 дней.

Накопление /-лизина 7,2 кг/мл.

Культуральную жидкость отдел ют от бактериальных клеток фильтрацией и пропускают через слой ионообменной смолы, обладающей слабыми щелочными свойствами.

Колонку, заполненную смолой, промывают водой и производ т отмывку адсорбента с помощью 0,15 н. аммиачной воды. Полученные растворы, содержащие /-лИзин, соедин ют вместе и концентрируют.

Затем концентрированный раствор довод т до кислой среды (рН 4,0) и дополнительно концентрируют.

В результате получают 10,5 г кристаллического /-лизин-1-гидрохлориДа со степенью чистоты , соответствующей техническому продукту .

П р и м е р 2. Культивирование Производ т таким же образом и при тех же услови х, как было описано в примере 1, с той лишь разницей , что ферментационна  среда содержит 7,5% фруктозы и 0,5% м сного экстракта вместо глюкозы и N-Z-амина.

В результате получают 6,1 мг/мл /-лизина, содержащегос  в жидкости дл  выращивани  культуры.

Количество /-лизина, накопившегос  в среде дл  выращивани  культуры под воздействием различных штаммов Brevibacterium ammoniagenes , приведено в таблице.

Количество накопившегос  /-лизина jaiJMA

№ 4948 АТСС 19350

(штамм, требующий треонин) № 518 АТСС 19351

(штамм, требующий фенилаланин № 5130 АТСС 19352

(штамм, требующий гистидин) № 5366 АТСС 19353

(штамм, требующий метионин) № 5313, АТСС 19354

(щтамм, требующий цистеин) № 5128 АТСС 19355

(штамм, требующий лейцин) № 5134 АТСС 19356

(щтамм, требующий изолейцин)

Предмет изобретени 

Способ производства /-лизийа путем глубинного выращивани  продуцирующих его микроорганизмов на питательной среде, содержащей углеводы,, азотные, фосфорные соли и стимул торы роста, с последующим отделением Клеток от культуральной жидкости. Например, фильтрацией и выделением /-Лизина из культуральной жидкости на ионообменных смолах, отличающийс  тем, что, с целью расширени  комплекса микроорганизмов, используемых дл  биосинтеза /-лизина, в качестве микроорганизмов-продуцентов используют один из штаммов АТСС № 19350, АТСС № 19351, АТСС № 19352, АТСС № 19353, АТСС № 19354, АТСС № 19355 и АТСС № 19356 рода Brevibacterium ammoniagenes.