SU235244A1

SU235244A1 -

Info

Publication number: SU235244A1
Application number: SU1174004A
Authority: SU
Inventors: С. Ю. Гольдат С. Л. Бринберг Л. В. Смирнова В. Д. Кузнецов А. М. Козина Л. А. Дешиц; научно исследовательский институт антибиотиков Всесоюзный

Description

ШТАММ ЛС-В-241 Ф. У. ACTJNOMyCES ORIENTALIS ПРОДУЦЕНТ ВАНКОМИЦИНА Известен штамм № 685 Actinoinyces orientalis продуцент ванкомицина. Предлагаемый штамм ЛС-В-241 Ф. У. Actinomyces orientalis продуцент ванкомицина иолучен из исходного штамма № 685 Actinomyces orientalis путем селекции и воздействи актинофага N° 1. Штамм ЛС-В-241 отличаетс от исходного продуктивностью, а также некоторыми морфологическими признаками. Штамм ЛС-В-241 Ф. У. Actinomyces orien- 10 talis на гороховой агаризованной среде образует конусообразные складчатые колонии диаметром 4-5 мм, розовато-белого цвета, обильно спорулирующие, имеющие в центре кратерообразное углубление, субстратный мицелий 15 бледно-желтого цвета; на соевой агаризованной среде - сильно спорулирующие конусообразные колонии диаметром 3-4 мм, воздушный мицелий белый, субстрактиый мицелий обильный, желтый; иа среде N° 6, агаризован- 20 ной с кукурузным экстрактом, - колонии диаметром 4-5 мм, конусообразные, розоватобелого цвета, слабо складчатые, вершина конуса срезана, субстратный мицелий бледножелтый , пигмента в среду не выдел ет; на 25 синтетической среде Чапека - колонии диаметром 1,5-2 мм, плоские, плотные, центр колоний с растрескивающейс вершиной, тонкий субстратный мицелий беловато-серого цвета, воздушный мицелий белый; на синтети- 30 ь ческой среде jYo II с крахмалом - колонии диаметром 1 -1,5 мм, паутинообразные, сильно спорулируют, белые, субстратный мицелий белый, пигмента в среду не выдел ет; антибиотическа активность штамма в лабораторных услови х 1000-1200 мкг/мл; в ферментерах 825 мкг/мл. Пример 1. В колбу Эрленмейра емкостью 750 мл иаливают 100 мл посевнойсреды следующего состава, %: со 3 глюкоза2 СаСОз0,25 кукурузный экстракт ( на сз-хой вес)0,1 ( на сырой вес)0,2 Среду засевают споровым материалом штамма ЛС-В-241 Ф. У., хранившегос на пшене, и выращивают посевной материал в течение 72 час при -|-28°С иа качалках со скоростью вращени 220 об/мин. Ферментацию провод т в колбе Эрленмейера объемом 750 мл, содержащую 50 мл ферментационной среды, %: мочевина СаСОз крахмал кашалотовый жир

Крахмал заваривают при 70°С.

Обработку кукурузного экстракта ведут следующим образом: 10 г СаСОз, 200 г кукурузного экстракта и 400 г воды нагревают до кипени , довод т рН до 7,2, кип т т 30 мин. Отсто вшуюс жидкость отфильтровывают. Объем фильтрата довод т до 500 мл.

Среду стерилизуют при 0,8 атм в течение 30 мин текучим паром.

В колбу с ферментационной средой внос т 4% посевного материала. Ферментацию провод т в колбах на качалках, вращающихс со скоростью 220 об/мин при 28°С.

Количественное определение ванкомицина провод т биологическим методом диффузии в агар нри использовании в качестве тест-культуры Вас. subtilis 66-33.

Средн антибиотическа активность культуральной жидкости составл ет 1000- 1200 мкг/мл.

Пример 2. Колбы, содержащие 100 мл посевной среды (состав, как в примере 1), засевают споровым материалом ЛС-В-241 Ф. У. и выращивают культуру 72 час при 28°С в колбах на качалке со скоростью вращени 220 об/мин. В ферментер с 25 л той же среды добавл ют 300 мл мицелиальной культуры, выращенной в колбах. Посевной материал доращивают в аппарате при / 28°С 48 час, а затем передают в ферментер.

В аппарат объемом 100 мл, содержащий 60 л ферментационной среды (состав, как в 0,1 0,25 2,5 0,5

Предмет изобретени

Штамм ЛС-В-241 Ф. У. Actinomyces orientails продуцент ванкомицина, отличающийс тем, что на гороховой агаризованной среде образует конусообразные складчатые колонии диаметром 4-5 мм, розовато-белого цвета, обильно спорулирующие, имеющие в центре

кратерообразное углубление, субстрактный мицелий бледно-желтого цвета; на соевой агаризованной среде - сильно спорулирующие конусообразные колонии диаметром 3-4 мм, воздушный мицелий белый, субстратный мицелий обильный, желтый; на среде № 6, агаризованной с кукурузным экстрактом, - колонии диаметром 4-5 мм, конусообразные, розовато-белого цвета, слабо складчатые, вершина конуса срезана, субстратный мицелий

бледно-желтый, пигмента в среду не выдел ет; на синтетической среде Чапека - колонии диаметром 1,5-2 мм, плоские, плотные, центр колоний с растрескивающейс вершиной, тонкий субстратный мицелий беловато-серого цвета , воздушный мицелий белый; на синтетической среде № 11 с крахмалом - колони диаметром 1 -1,5 мм, паутинообразные, сильно спорулируют, белые, субстратный мицелий белый, пигмента в среду не выдел ет; антибиотическа активность в лабораторных услови х 1000-1200 мкг/мл, в ферментерах- 825 мкг/мл. примере 1), внос т 6 л (10%) посевного материала . Ферментаци продолжаетс 120 час, культуральна жидкость содерл ит 825 мк.г1мл ванкомицин.