SU1755196A1 - Способ определени концентрации белка в молоке - Google Patents

Abstract

Использование: в медицине, в частности в акушерстве и медицинской биохимии дл  определени  концентрации белка в молоке . Сущность изобретени : молоко разбавл ют раствором бромфенолоього синего, затем измер ют интенсивность флуоресценции в области 540 нм, индуцированной лазерным излучением длиной волны 337,1 нм, мощностью 2-3 мВт, стро т калибровочную кривую, по кбторой определ ют концентрацию белка в молоке. Способ позвол ет проводить исследование в течение 2 мин. 1 табл., 1 ил.

Description

Изобретение относитс  к медицине, в частности : акушерству и медицинской биохимии , и может быть использовано дл  определени  концентрации белка в женском и коровьем молоке.

Известен способ определени  концентрации белка в молоке путем изучени  флуоресценции при 540 нм пробы молока, разбавленной дистиллированной водой в соотношении 1:20.

Однако данный способ недостаточно точен.

Наиболее близок к предлагаемому способ определени  белка, жира и углеводов, заключающийс  в том, что пробу молока обрабатывают смесью хлороформа и метанола (реактив Фолча), подвергают центрифугированию и к полученному осадку добавл ют биуретовый реактив. После перемешивани  смесь оставл ют на 30 мин при комнатной температуре дл  образовани  комплекса сине-фиолетового цвета, после чего провод т фотометрию против биуретового реактива на фотоэлектроколориметре (ФЭК) при зеленом светофильтре.

Недостатками известного способа  вл ютс  сложность и продолжительность вы- полнени .

Цель изобретени  - упрощение и сокращение времени исследовани .

Способ осуществл ют следующим образом .

Дл  проведени  исследовани  молока (женского или от сельскохоз йственных животных ) пробу молока в количестве 0,1 мл помещают в кварцевую ккТвету и разбавл ют 2 мл водного раствора бромфенолового синего (БФС) в концентрации 0,001%. Затем кювету с полученным раствЪром устанавливают в держатель флуоресцентной установки, состо щей из источника лазерного излучени  (ЛГИ-21) и детектора флуоресценции . Возбуждение флуоресценции осуществл ют лазерным светом с длиной волны 337,1 нм, мощностью 3 мВт в течение 60 с. Одновременно с помощью автоматического электронного самописца типа КПС-4 или стрелочного индикатора регистрируют интенсивность флуоресценции в области длины волны 540 нм. Пик интенсивности на

Xi

сл с 

J

о

длине волны 540 нм указывает на относительное содержание белка в пробе молока.

Дл  выражени  количественного содержани  белка в молоке в весовых единицах или процентном отношении стро т стан- дартную (калибровочную) кривую, показывающую зависимость интенсивности флуоресценции, например, альбумина от его концентрации в водном растворе в пределах 1-10 г%. .

Пример1.В кварцевую кювету помещают каплю женского молока объемом 0,1 мл и добавл ют 2 мл 0,001 %-ного водного раствора БФС. Далее провод т облучение полученной смеси лгзерным излучением (длина волны 337, 1 нм, мощность 3 мВт) в течение 60 с и одновременно регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм. Полученные значени  интенсивности флуоресценции перенос т на ка- либровочную кривую, построенную дл  альбумина (см. чертеже). По калибровочной кривой установлено содержание белка в исследуемой пробе молока 3,1 %.

Пример 2. В кварцевую кювету поме- щают каплю коровьего молока, поставл емого на молочную кухню, и добавл ют к ней 2 мл 0,001 %-ного водного раствора БФС, провод т облучение полученной смеси лазерным излучением (длина волны 337,1 нм, мощность 3 мВт) в течение 60 с и одновременно регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм. По калибровочной кривой определ ют концентрацию белка в коровьем молоке, она равна 2,2 г%.

Данные, полученные предлагаемым способом, совпадают с результатами биохимического анализа исследуемых проб на белок и с данными по известному способу. Они представлены в таблице.

Однако врем , затрачиваемое на определение концентрации белка в молоке известными методами,составл ет около 60 мин, тогда как при использовании предлагаемого способа подобное исследование занимает до 2 мин.

Всего проведено 150 исследований проб женского и коровьего молока, показавших высокую достоверность полученных результатов при минимальных затратах времени на, исследование. Это позвол ет с высокой производительностью проводить определение концентрации белка в молоке при массовом обследовании рожениц или в услови х домашней кухни дл  оценки рациона питани  новорожденных, а также в молочной промышленности на поточной системе.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  концентрации белка в молоке путем исследовани  пробы молока с последующим расчетом содержани  белка по калибровочной кривой, отличающийс  тем, что, с целью упрощени  способа и сокращени  времени исследовани , пробу молока разбавл ют 0,01%-ным водным раствором бромфенолового синего, воздействуют на пробу лазерным лучом с длиной волны 337- 1 нм и мощностью 2-3 мВт, регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм и провод т расчет концентрации белка по калибровочной кривой.

   (am eЈ) 100

   Ю(г%)