SU1745096A3

SU1745096A3 - Способ приготовлени сухого бактериального препарата дл производства молочнокислых продуктов

Info

Publication number: SU1745096A3
Application number: SU914898466A
Authority: SU
Inventors: София Суреновна Агамалян; Раиса Арамовна Аракелян; Левон Акопович Ерзинкян; Роза Анушавановна Мадоян; Светлана Айказовна Маликоян; Николай Месропович Оганесян
Original assignee: Ереванский Молодежный Центр "Маштоц"
Priority date: 1991-01-16
Filing date: 1991-01-16
Publication date: 1992-06-30

Abstract

Область использовани : в молочной промышленности, в частности в микробиологической , при приготовлении сухого бактериального препарата дл производства молочно-кислых продуктов. Сущность изобретени : культ ивируют Lactobaclllus acldophilus 317/402, замораживают в течение 2-2.5 ч при (-40Н 50)&deg;С, высушивают в течение 22-24 ч при конечной температуре 37-39&deg;С. 9 табл.

Description

сл

с

Изобретение относитс к микробиологической и пищевой промышленности и может быть использовано в медицине при лечении дисбактериозов и других желудочно-кишечных заболеваний, а также при производстве кисло-молочных продуктов.

Известны различные сухие бактериальные закваски и способы их приготовлени с использованием ацидофильных молочнокислых бактерий.

Влажность известных сухих заквасок 10% и ниже, их можно хранить 5-6 мес. при температуре не выше 10°С.

Известный стандартный сухой препарат лактобактерин выпускаетс Горько- вским заводом в виде таблеток и широко примен етс дл профилактики и лечени дисбактериозов кишечника. В состав сухого

лактобактерина вход т штаммы молочнокислых бактерий L. ferment 90Г-54 и L. plantarum 8R-A3. лактобактерин готовитс из микробной суспензии путем лиофи- лизации из замороженного состо ни . Замораживание осуществл етс при -40°С в течение 5-6 ч. Конечна температура высушивани 42°С, Известный препарат разработан в Горьковском НИИЭМ (Тарасова, 1969) и в Пермском НИИВС (Красик, 1972). Срок годности препарата 6-12 мес. Количество живых клеток в 1 г препарата через 6 мес. хранени составл ет 3,3-3,5 млн., а через 12 мес. 2,1-2,2 млн.

Таким образом, лактобактерин не подлежит длительному хранению, причем активность клеток в результате хранени

V

4 СЛ

о

Ю

о

CJ

значительно падает и снижаютс антагонистические свойства препарата.

Цель изобретени - удлинение срока хранени и повышение качества препарата.

Сущность предлагаемого способа заключаетс в следующем. Дл приготовлени сухого препарата молоко заквашивают молочно-кислыми бактери ми L. acldophllus шт. 317/402 Наринэ. замораживают жидкий препарат в течение 2-2,5 ч при ()0С и высушивают в течение 22-24 ч при конечной температуре 37-39°С.

Пример 1. Приготовление жидкого препарата. Молоко жирностью 3,0±0,2% стерилизуют 15 мин при 1 эти, остужают до 39°С. заквашивают 1,5-2%-ной свежей маточной закваской чистых культур молочнокислых бактерий L. acldophllus и выдерживают в термостате при 37°С в течение 6-7 ч. Сквашенное молоко выдерживают 2-3 ч в холодильнике при 5-8°С.

Молочно-кислые бактерии L. acldophllus шт. 317/402 по морфологическим , биохимическим и культуральным свойствам отличаютс от известных L. acldophllus. Это граммположительные бактерии , обладающие высокой ферментативной активностью, устойчивые к высоким концентраци м фенола, антибиотическим и химиотерапевтическим препаратам, восстанавливающие молоко, содержащее до 0,3% метиленовой сини, обладающие высокими антимикробными, высоковитаминсин- тезирующими и кислотообразующими способност ми. Высокоактивные ацидофильные палочки обладают высокими лечебно-профилактическимии органолептическими свойствами.

Пример 2. Приготовление сухого препарата. Жидкую закваску перемешивают , в стерильных услови х разливают в стекл нные скл нки, которые закрывают резиновыми пробками, а сверху металлическими колпачками дл соблюдени стерильности, и замораживают при -50°С в течение 2-2,5 ч. После замораживани снимают металлические колпачки и резиновые пробки, скл нки закрывают стерильными ватными пробками и под вакуумом жидкий замороженный препарат высушивают в течение 22-24 ч при начальной температуре сушки -30°С и окончательной 37-39°С.

Влажность сухого препарата 2-2,5%, 1 г сухого препарата содержит 3-3,2 млрд. живых клеток. Сухой препарат хранитс в холодильнике при 6-8°С. Срок хранени 2 года.

Обоснование технологических параметров получени сухого препарата приведено в табл. 1-4.

Вли ние продолжительности замораживани жидкого препарата при температуре -50°С на выживаемость клеток в сухом препарате показано в табл. 1.

Из данных табл. 1 видно, что оптимальное врем замораживани 2-2,5 ч. Врем замораживани , указанное в прототипе, губительно вли ет на выживаемость клеток. Вли ние температуры замораживани

0 на выживаемость клеток в сухом препарате (продолжительность замораживани 2 ч) показано в табл. 2.

Из данных табл. 2 видно, что оптимальна температура замораживани -50°С.

5 Вли ние продолжительности высушивани на антимикробные свойства и выживаемость клеток сухого препарата (окончательна температура высушивани 37-39°С)показано в табл. 3.

Как видно из приведенных данных, оп0 тимальное врем высушивани 22-24 ч.

Вли ние окончательной температуры

высушивани на влажность и количество

клеток сухого препарата показано в табл. 4.

Из данных табл 4 видно, что оптималь5 на температура высушивани 37-39°С, когда выживаемость клеток максимальна . При конечной температуре высушивани , указанной в прототипе, наблюдаетс значительна гибель клеток.

0 Исследование сухого препарата.

Дл определени качества сухого препарата изучались следующие основные при- знаки: бактериальна чистота (по микроскопическому препарату); продолжи5 тельность свертывани молока в зависимости от количества сухого препарата и сроков его хранени ; характер сгустка; кислотность сквашиваемого молока; количество живых клеток; антимикробные свойства.

0 При изучении микроскопической картины сухого препарата в поле зрени обнаруживались короткие и длинные палочки молочно-кислых бактерий L acldophllus. Повторные микроорганизмы не обнаружены.

5 В табл. 5 привод тс данные по свертыванию молока, заквашенного сухой культурой при разных сроках хранени .

В результате заквашивани во всех вариантах получаетс однородный сгусток с

50 т гучей консистенцией, с при тным кисломолочным вкусом и ароматом.

Кислотность сгустка, полученного в результате сквашивани молока сухой культурой , колеблетс в пределах от 110. до 180°Т

5 в зависимости от свежести сухого препарата . Так, суха закваска сразу после изготовлени свертывает молоко за 8-9 ч, а кислотность сгустка составл ет 110-120°Т.

Суха культура через 2 года хранени свертывает молоко в течение 22-24 ч и поднимает кислотность до 180°Т. С возрастом суха закваска становитс менее активной, в результате чего продолжительность свертывани увеличиваетс , а кислотность сгустка повышаетс .

Одним из основных признаков качества сухого препарата вл етс количество живых клеток в нем. Количество живых клеток в 1 г препарата при хранении в течение 0,3, 6,9,12 и 24 мес. составл ет 3,0-3,2; 2,4-2,5: 2,1-2,2; 1.9-2.0; 1,7-1,8 и 1.0-1,1 млрд. соответственно .

Антимикробна активность сухого препарата по отношению к тест-культурам Е. coll, Staph. aureus. Klebslella, Salmonella typhlminlum весьма высока (см. табл. 6).

Сравнительное изучение всех основных признаков известного (лактобактерин) и предложенного препаратов показывает, что количество живых клеток в лактобактерине значительно ниже, чем в предложенном сухом препарате (см. табл. 7).

Кроме того, выживаемость клеток в предложенном препарате значительно выше (почти в 600-800 раз), чем в известном.

При исследовании антимикробных свойств известного и предложенного препаратов обнаружено, что лактобактерин по отношению к Staph. aureus антимикробных свойств не про вл ет, а по отношению к Е -coll значительно менее активен чем предложенный препарат.

В табл. 8 приведены полученные результаты .

Испытани жидкого и сухого препарата Наринэ при лечении дисбактериоза кишечника у лиц, подвергшихс воздействию малых доз ионизирующей радиации, проводились на базе Института медицинской радиологии МЗ Армении.

Под наблюдением находились 74 мужчины с дисбактериозом кишечника, принимавших участие в тиквидации последствий аварии на ЧАЭС, в возрасте от 28 до 50 лет, посто нно проживающих на территории республики Армени , которые были распределены на три группы.

Iгруппа - 44 ликвидатора с дисбактериозом I и II степени, получавшие в качестве лечени кисло-молочный продукт Наринэ по 1,0-1,5 л в день за 4-6 приемов.

IIгруппа - 10 ликвидаторов с дисбактериозом I и II степени, получавшие 15-20 раз в сутки сухой лактобактерин производства Горьковского НИИЭМ МЗ РСФСР.

ill группа - 20 ликвидаторов с дисбактериозом I и II степени, получавшие сухую лиофилизированную микробную массу живых антагонистически активных молочнокислых бактерий штамма 317/402 Наринэ. Во флакон с сухой массой добавл ют стакан кип ченой остуженной воды и перемешивают . Препарат принимают внутрь 4 раза по 5 5,0 г в сутки по назначению врача.

Изучение кишечной микрофлоры больных производили до и после лечени , а также в процессе лечени на 15- и 20-е сутки с учетом методических рекомендаций.

0 У обследованных больных до начала лечени были вы влены следующие изменени в кишечной микрофлоре: отсутствие анаэробной микрофлоры бифидо- и лакто- бактерий (менее 10 в 1 г кала) в 100% слу5 чаев, уменьшение количества кишечных палочек до 104-103 у 39 больных (52,7%), увеличение условно-патогенной микрофлоры , в частности энтеробактерий, у 30 больных (40,5%), патогенного стафилококка у 32

0 больных (43,2%). Из энтеробактерий высеивались энтеробактер, клебсиелла, лактозо- отрицательные и гемолитические эшерихии. В группе I к концу лечени в 70,45% (31 человек) случаев наблюдалась нормализа5 ци в составе микрофлоры. У 16 (36,4%) больных Дг перешел в Дч. При этом отмечено уменьшение концентрации условно-патогенной микрофлоры (клебсиелла, энтеробактер, лактозоотрицательные и ге0 молитические эшерихии) до 10 -10 и увеличение концентрации полноценных кишечных палочек. Восстановление количества бифидо- и лактобактерий не отмечалось ,

5 Как показали исследовани , в подавл ющем большинстве случаев коррекци дисбактериоза с помощью кисло-молочного продукта Наринэ достигалась в течение 15- 20 дней. Так, у 23 (52.2%) больных с Дт

0 положительный эффект нас гупил на 15-20-й день, а у 16 (36,3%) больных, имевших Д2, - на 25-30-й день.

У подавл ющего большинства больных положительные изменени в состо нии ки5 шечной микрофлоры и коррекции дисбакте- риозов совпадали с положительной динамикой клинических данных. У п ти (11,3 %) больных с Д1 степень дисбактериоза в процессе лечени не изменилась.

0 В группе II у семи (70%) больных было вы влено Д1, а у трех (30%) - Д2. Положительна динамика у больных этой группы отмечена на 30-е сутки, у трех(30%) больных с Д1 и у одного (10%) больного с Д2. У остал ь5 ных шести (60%) больных коррекци не наблюдалась .

Таким образом, кисло-молочный продукт Наринэ восстанавливает анаэробную защитную флору (бифидо- и лактобактерий) в укороченные сроки, подавл ет рост энтеробактерий и патогенного стафилококка, повышает активность нормальной кишечной палочки.

Основыва сь на положительном эффекте воздействи кисло-молочного продукта Наринэ на микрофлору кишечника у лиц, подвергшихс воздействию малых доз ионизирующей радиации, задались целью получить лиофилизированный препарат данного продукта и изучить его корректирующие свойства.

В группе III у 10 (50%) больных с Д2 на 15-й день исследовани наблюдалось уменьшение условно-патогенной микро- Флоры, в частности протеуса мирабилис, эн- теробактера, клебсиеллы, до 103-10 , увеличение числа полноценных кишечных палочек до 105-106, но восстановлени би- фидо- и лактобактерий йе отмечалось, т.е. Да перешел в Дч. У этих больных коррекци дисбактериоза вы влена на 20-й день исследовани . У восьми (40%) больных с Д1 положительный эффект наступил на 15-20-й день, а у двух (10%) больных с Д1 степень дисбактериоза в процессе лечени не изменилась . У большинства больных положительные изменени в состо нии кишечной микрофлоры и коррекци дисбактериозов совпадали с положительной динамикой клинических испытаний.

Таким образом, на микрофлору кишечника лиц, подвергшихс воздействию малых доз ионизирующей радиации, в

одинаковой степени положительно воздействуют на кисло-молочный продукт Наринэ, так и его лиофилизированный препарат (см. табл. 9).

При сравнительном изучении молочнокислых бактерий штамм 317/402 и лактобак- терина установлена эффективность штамма дл коррекции дисбиотических изменений в микрофлоре кишечника. Срок коррекции

дисбактериоза с помощью молочно-кислых бактерий штамма 317/402 зависел от степени т жести дисбиотических изменений.

Предлагаемый сухой препарат может хранитьс до двух лет, по сравнению с лактебактерином он обладает более высокими антимикробными свойствами, при его использовании выживаемость клеток лучше и молоко свертываетс быстрее.

Claims

Формула изобретени

Способ приготовлени сухого бактериального препарата дл производства молочно-кислых продуктов, предусматривающий культивирование молочно-кислых бактерий

Lactobaclllus acldophilus, замораживание и высушивание, отличающийс тем, что, с целью удлинени срока хранени и повышени качества препарата из Lactobaclllus acidophllus, используют

штамм 317/402, замораживание осуществл ют в течение 2-2.5 ч при (-40)-(50)0С, высушивание провод т в течение 22-24 ч при конечной температуре 37-39°С.

35

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Таблица 4

Таблица 5

Таблица 6

Таблица 7

Примечание -10 (степень разве/уни )

Редактор М.Бандура

Техред М.Моргентал

Заказ 2203ТиражПодписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., 4/5

Таблица 8

Таблица 9

Корректор Э.Лончакова