EA006509B1 - Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств - Google Patents

Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств Download PDF

Info

Publication number
EA006509B1
EA006509B1 EA200500741A EA200500741A EA006509B1 EA 006509 B1 EA006509 B1 EA 006509B1 EA 200500741 A EA200500741 A EA 200500741A EA 200500741 A EA200500741 A EA 200500741A EA 006509 B1 EA006509 B1 EA 006509B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
bifidobacterium
consortium
bifidobacteria
products
strains
Prior art date
Application number
EA200500741A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200500741A1 (ru
Inventor
Вячеслав Юрьевич Чистяков
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Мир биотехнологий (НПО)"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Мир биотехнологий (НПО)" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Мир биотехнологий (НПО)"
Publication of EA006509B1 publication Critical patent/EA006509B1/ru
Publication of EA200500741A1 publication Critical patent/EA200500741A1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии, касается консорциума штаммов бифидобактерий, который может быть использован для приготовления различных форм бактерийных препаратов, препаратов-пробиотиков на его основе, функциональных продуктов питания, биологически активных добавок, неферментированных продуктов, кисло-молочных продуктов, косметических и гигиенических средств. Для получения консорциума использованы следующие штаммы бифидобактерий: Bifidobacterim bifidum 791-МБ, Bifidobacterim longum В 379М-МБ, Bifidobacterim adolescentis Г 7513-МБ, Bifidobacterim infantis 73-15-МБ, Bifidobacterim breve 79-119-МБ, характерной особенностью которых является высокая антибиотическая и супероксиддисмутазная активность с выраженной антиоксидантной активностью. Супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка микробной массы. Проявляемая специфическая активность, способность к утилизации широкого спектра аминокислот, высокая антибиотикоустойчивость позволили повысить устойчивость консорциума к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте и повышения таким образом его колонизирующей активности.

Description

Изобретение относится к биотехнологии, пищевой промышленности и может быть использовано для получения консорциума бифидобактерий, в производстве продуктов функционального питания и препаратов-пробиотиков, неферментированных продуктов, при приготовлении косметических и гигиенических средств.
Препараты и бифидосодержащие продукты широко используют для лечения и профилактики дисбактериозов различной этиологии, нормализации работы желудочно-кишечного тракта человека и животных, стрессовых влияний, длительной антибиотико-химиотерапии.
Как известно, в кишечнике взрослого человека с наибольшей частотой в биоценозе преобладают виды В|ПбоЬас1епит Ыйбиш, В|ПбоЬас1епит 1опдит, В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8, а виды В|ПбоЬас1епит ίπίαπΐίδ и В|ПбоЬас1епит Ьгеуе - преимущественно у детей грудного возраста.
Известны консорциумы штаммов бифидобактерий различных комбинаций, используемые для приготовления пробиотиков, продуктов лечебного питания, кисло-молочных продуктов, биологически активных добавок и бифидосодержащих ферментированных и неферментированных продуктов зарубежных и отечественных фирм-разработчиков (патент США 6335040, 01.01.2002, заявка США 2002015990, 07.02.2002, ВИ 2109054 С1, 20.04.1998, АО 98/44090, 08.10.1998, ВИ 2196173 С1, 10.01.2003, ВИ 2196174 С1, 10.01.2003).
Наиболее близким аналогом заявленного изобретения является консорциум 5-ти штаммов бифидобактерий: ВШбоЬаЩегшт Ыйбит 791, В|ПбоЬас1епит 1опдитВ 379М, В|ПбоЬас1епит шГапЩ Г73-15, ВШбоЬаЩегшт або1е8сепЙ8 Г 7513, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных пищевых продуктов, биологически активных пищевых добавок и бактерийных препаратов. Штаммы имеют близкие культуральные и физиолого-биохимические свойства, консорциум активно размножается в питательных средах с накоплением производственной биомассы в короткие сроки культивирования, обладает специфической активностью. Готовый продукт содержит в 1 мл 109 живых клеток бактерий. Содержание в 1 дозе препарата не менее 107 живых клеток бифидобактерий (ВИ 2109054 С1, 20.04.1998).
Недостатком известных консорциумов можно считать их слабую устойчивость к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта (кислот, протеолитических ферментов) при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте, что указывает на недостаточную колонизирующую активность и жизнеспособность при прохождении пищеварительного тракта.
Техническим результатом заявленного изобретения является создание консорциума штаммов бифидобактерий, более устойчивого к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте и повышения, таким образом, его колонизирующей активности при прохождении пищеварительного тракта, выраженной антиоксидантной активностью и пробиотическим действием, проявляемым в условиях как ίπ νί\Ό. так и ίπ νίΙΐΌ.
Консорциум получен также путем сочетания пяти штаммов бифидобактерий В|ПбоЬас1епит Ыйбит 791-МБ, ВКПМ Ас-1688; В|ПбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ, ВКПМ Ас-1689; В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ, ВКПМ Ас-1690; , В|ПбоЬас1епит шГапШ 73-15-МБ, ВКПМ Ас-1692; В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ, ВКПМ Ас-1691, характерной особенностью которых является высокая антибиотикоустойчивость с выраженной антиоксидантной активностью: супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка и пробиотическое действие культур, используемых в производстве проявляется при потреблении пищевых продуктов и продуктов функционального питания.
Штамм В|ПбоЬас1епит Ыйбит 791-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит ЫПбит 791 путем последовательного перепассирования на тиогликолевой среде и обезжиренном молоке (50 пассажей), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас - 1688.
Штамм В|ПбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит 1опдит путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1689.
Штамм В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас- 1690.
Штамм В|ПбоЬас1епит шГапЩ 73-15-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит 1пГапΙίδ 73-15 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1692.
Штамм В|ПбоЬас1егцпп Ьгеуе 79-119-МБ получен из коллекционного штамма, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1691.
Созданный консорциум бифидобактерий показал высокую сочетаемость пяти штаммов бифидобактерий между собой, совместное культивирование смешанной популяции всех 5-ти штаммов предполо
- 1 006509 жительно протекает аналогично раздельному культивированию штаммов. В среднем количество клеток по сравнению с исходным количеством увеличивалось в сотни раз за 14-16 ч культивирования при оптимальной температуре. Консорциум сохранил свои специфические свойства в течение 2-х лет.
Культурально-морфологические признаки консорциума
Клетки штаммов микроорганизмов представляют собой грамположительные полиморфные палочки с бифуркацией или утолщением на 1-2-х концах, склонные к образованию скоплений. В жидких питательных средах растут по всей высоте объема, кроме зоны аэробиоза. Логарифмическая фаза заканчивается к 24 ч.
Физиолого-биохимические признаки консорциума
Облигатный анаэроб. Оптимальная температура выращивания 37,5°С, рН питательных сред 7,2-7,4. Каталазу не образует, разжижение желатины отсутствует.
Ферментирует лактозу с образованием уксусной и Ь+ молочной кислоты без образования газа, закисляя среду выращивания до рН 3,9-41. Маннозу, целлобиозу, ксилозу, маннит, сорбит, салицин, инулин, арабинозу не ферментирует.
Кислотообразующая активность: к 24 ч - 105°Т, к 72 ч -160-195°Т (на тиогликолевой среде), на гидролизатно-молочной среде - до 140-160°Т и 200-220°Т, соответственно.
Консорциум активно размножается на средах разного состава. Максимальный титр бифидобактерий консорциума в стерильном обезжиренном молоке без ростовых факторов к 20 ч составляет 2х108 КОЕ/мл. Максимальный титр бифидобактерий на кукурузно-лактозной среде наблюдается к 16 ч и составляет 2х109 КОЕ/мл, на тиогликолевой среде к 16 ч накапливается до 1-3х109 КОЕ/мл.
Бифидобактерии консорциума способны утилизировать свободные аминокислоты в стерильном обезжиренном молоке, такие как валин, метионин, аланин, аргинин, изолейцин, глицин.
ДНК относится к выраженному ГЦ-типу с коэффициентом специфичности 1,57, молярный процент содержания ГЦ в ДНК равен 61,3.
Консорциум проявляет антагонистическую активность по отношению к тест-культурам, полученным из ГИСК им Л.А. Тарасовича: Е. сой В-125, 81арЫ1ососси§ аигеиз 209- Р, шигеллам Зонне, Флекснера. (табл. 1). Консорциум устойчив к амикоцину, бензилпенициллину, гентамицину, стрептомицу, канамицину, тетрациклину, офлоксалину (табл. 2).
Способность консорциума пяти штаммов бифидобактерий ВИц1оЬас1елтпт Ыййит 791-МБ , ΒϊίΐάοЬасТепит 1опдит В 379М-МБ, В1й4оЪас1ег1ит а0о1е§сепЦ§ Г 7513-МБ, В1й4оЪас1ег1ит тГапОз 73-15-МБ, В1й4оЪас1ег1т Ъгеуе 79-119-МБ активно накапливать микробную биомассу на различных питательных средах за 16-20 ч выращивания, высокая антибиотическая и супероксиддисмутазная активность с выраженной антиоксидантной активностью: супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка микробной массы, проявляемая специфическая активность позволили использовать его в приготовлении кисло-молочных, неферментируемых продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств.
Проведенные исследования показали, что при совместном культивировании на тиогликолевой среде при значении рН 7,0-7,3 и кукурузно-лактозной среде при значении рН 6,8-7,0 в стационарных условиях изучаемые штаммы бифидобактерий антагонизма по отношению друг к другу не проявляют. Отмечено, что при совместном развитии отмечается лучшее развитие штаммов В. а0о1е§сепЦ§ Г 5315-МБ, В. Ыййит 791- МБ, В. 1опдит В 379М-МБ и наименьшее - В. тГапйз 73-15- МБ и В. Ъгеуе 79-119- МБ.
Антагонистическую активность консорциума штаммов бифидобактерий определяли методом развивающихся смешанных популяций при совместном выращивании с патогенными тестмикроорганизмами по зоне задержки роста тест-микробов методом штриховых кодов.
Таблица 1
Консорциум Зона задержки роста тест-культур (мм)
Е. со1 8й. 8оппе 8. аигеиз СапсНОа а1Ьисапз
заявляемый
консорциум 24-24,8 21,7-23,2 17,6- 19,2 18,8-20,3
аналог 22,7-23,1 20,4-21,5 18,4-19,0 18,3-19,9
Наибольшее антагонистическое действие консорциум оказывает на 81арЫ1ососси§ аигеиз и 8Ыде11а лопнем, которые наиболее часто являются причиной пищевых отравлений, возникающих при потреблении кисло-молочных продуктов.
Определение уровней устойчивости штаммов бифидобактерий к антибиотикам проводили по методу серийных разведений в жидкой питательной среде для каждого штамма в отдельности. Устойчивость определяли на стерильном обезжиренном молоке. В питательную среду вводили различные концентрации стерильных растворов антибиотиков и 16-часовые культуры бифидобактерий в количестве 5%. В контрольный образец вносили только биомассу изучаемого штамма бифидобактерий. Устойчивость определяли по изменению титруемой кислотности в образцах после 48 ч инкубирования при температуре
- 2 006509
37-38°С. Штамм устойчив к антибиотикам, когда разница между титруемой кислотностью в контрольном и опытном образцах составляет не более 30°Т.
Таблица 2. Антибиотическая устойчивость штаммов бифидобактерий, составляющих заявленный консорциум
Антибиотики, доза единицы измерения активности Титруемая кислотность молока после культивирования со штаммом,0 Т
Мкг/см3 в.в. В. в. в.
вйМит 1оп§ит аскДезсепИз тГапйз Ьгеуе
791-МБ В 379М-МБ Г7513-МБ 73-15-МБ 79-119-МБ
Амикоцин сульфат 10 38-42 69-71 113-119 68-72 73-79
Ампициллин 250 68-72 57-63 54-58 57-63 68-72
Бензилпени-
циллин,ЕД/см3 10000 61-67 68-72 85-91 84-88 93-95
Гентамицин 400 31-33 38-42 38-40,0 33-35 42-46
Доксициллин 10 36-4,0 39-41 32-36 43-49 47-49
Канамицин сульфат 20 95-97 129-131 128-132 120-124 115-117
Левомицитин 50 29-31 38-42 29-31 21-23 26-30
Линкомицин 25 72-76 58-62 77-83 77-79 91-93
Оксациллин 10 29-31 32-36 32-36 23-25 31-33
Олеандомицин 12,5 48-52 59-61 42-46 46-50 55-61
Офлоксалин 20 39-41 48-52 62-66 39-41 32-36
Рифампицин 15 38-42 38-42 45-51 38-42 39-41
Стрептомицин 10 107-116 49-51 50-53 62-66 105-111
Сульфадимезин 50 52-56 47-49 42-46 27-29 40-44
Тетрациклин 10 52-56 43-45 38-40 44-48 39-41
Фурадонин 5 37-39 32-36 34-38 29-31 34-38
Фуразолидон 5 37-38 28-32 27-29 26-30 32-36
Цефазолин 20 38-42 44-48 35-37 29-31 39-41
Экстенциллин
ЕД/см3 24000 39-41 48-52 29-31 23-25 34-38
Эритромицин 25 28-32 33-35 28-32 15-17 29-31
Контроль 93-99 77-83 52-56 81-87 103-109
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что штаммы бифидобактерий устойчивы к наибольшим концентрациям следующих антибиотиков:
В. Ыйбит 791-МБ - к ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину;
В.1опдит В379М-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, олеандомицину, офлаксацину, стрептомицину, экстенциллину;
В.айо1е8сеп118 Г7513-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, олеандомицину, офлаксацину, стрептомицину, экстенциллину;
ВлпГапйз 73-15-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину;
В.Ьгеуе 79-119-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину.
Аналогичное исследование в отношении заявленного консорциума бифидобактерий показал, что он обладает устойчивостью по крайней мере к 6-ти антибиотикам: амикоцину, тетрациклину, бензилпенициллину, гентамицину, канамицину, офлаксацину, стрептомицину.
Условия хранения заявляемого консорциума
Консорциум хранят на питательной среде с массовой долей сухих веществ 14-16% с добавлением защитной среды, содержащей сахарозу, желатозу, лимоннокислый натрий, высушивают сублимационным способом в ампулах. Консорциум хорошо хранится при 6-8°С без потери титра активности в течение года.
Основным производственно-полезным признаком заявляемого консорциума бифибобактерий, отличающим его от известных, следует считать выраженную супероксиддисмутазной активностью, которая составляет 24,9 ед/мг белка, содержащегося в микробной массе.
Выявленная СОД-активность консорциума бифидобактерий свидетельствует о его выраженном пробиотическом действии, которое может проявляться в условиях ш νίνο, так и ш уйго. Высокая активность кислотообразования, антибиотикоустойчивость к широкому спектру основных антибиотиков, способствует эффективному восстановлению нормальной микрофлоры кишечника уже в процессе антибиотикотерапии.
- 3 006509
Полученный консорциум может быть использован в качестве биологически активного начала пробиотической направленности при производстве различных форм бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, кисло-молочных продуктов, неферментированных пищевых продуктов, в приготовлении косметических и гигиенических средств. При этом повышается биологическая ценность продуктов функционального питания и препаратов, приготовляемых на его основе. Употребление в пищу продуктов, использующих заявленный консорциум, способствует колонизации слизистой кишечника, вытеснению патогенной и условно патогенной микрофлоры, коррегированию кишечного дисбактериоза, и восстановлению бифидофлоры.
Использование заявленного консорциума в производстве кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств, например кремов, салфеток, лосьонов тампонов, питательных масок, женских прокладок, мыла, косметического молока и т. п., обеспечивает пробиотический и бактериологический эффект, способствует восстановлению нормальной микрофлоры, кожных и слизистых покровов, а также направлено на расширение арсенала аналогичных средств.
Пример 1. Использование консорциума штаммов бифидобактерий в составе закваски для приготовления кисло-молочных продуктов.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!егшт Ыйбиш 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас!егшт або1езсеп113 Г 7513-МБ, В1йбоЬас!егшт ίηΓαηΙίκ 73-15-МБ, В1йбоЬас!егшт Ьгеуе 79-119-МБ в количестве 0,1 г (1 доза) сухой биомассы вносят по отдельности в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведении до 10-9 Выращивают до появления отдельных колоний в последнем разведении при 37,5-38°С или 1 дозу сухой биомассы каждого штамма вносят в две пробирки с 30 мл питательной среды в каждой. Выращивают до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую культуру каждого из штаммов объемом не более 10% вносят в среду выращивания и культивируют до получения биомассы с содержанием микробных тел не менее 108/мл.
3- й пассаж (продукт): Полученную биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в стерильное молоко и культивируют до образования сгустка, который разливают в емкости и охлаждают. Полученный продукт содержит в 1 мл не менее 108 живых бифидобактерий.
Пример 2. Использование консорциума штаммов бифидобактерий в составе биологически активной добавки.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!етшт Ыйбит 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас1егшт абокзсепЦз Г 7513-МБ, В1йбоЬас!етшт шГапбз 73-15-МБ, В1йбоЬас!епит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 1 08/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
Получение биологически активной добавки
Полученную биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, вносят в питательную среду не более 5% и выращивают до получения биомассы с высоким, не менее 108/мл, титром бифидобактрий. В концентрат можно вносить различные бифидогенные факторы, способствующие стабилизации свойств культуры и лучшей приживляемости штамма в организме. Концентрат, разлитый в емкости, можно непосредственно использовать в качестве биологически активной добавки лечебнопрофилактического действия. Можно получить сухую биологическую активную добавку, для этого к полученной биомассе добавляют защитные среды высушивания (сахарозожелатиновую, обезжиренное молоко), суспензию замораживают при температуре не менее -45°С, лиофилизируют, укупоривают и получают сухой концентрат с содержанием бифидобактерий не менее 1 07/мл, который можно использовать в качестве биологической добавки, внося ее в пищевом сырье непосредственно перед употреблением.
Пример 3. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения бифидосодержащего препарата.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!егшт Ыйбит 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас!етшт абокзсепЦз Г 7513-МБ, В1йбоЬас!етшт ίηΓηηΙίκ 73-15-МБ, В1йбоЬас!егит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5 °С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
Получение бифидосодержащего препарата
К выросшей биомассе консорциума, которая представляет собой жидкий концентрат с высоким, не менее 108/мл, титром бифидобактерий, добавляют защитные среды высушивания (сахарозожелатиновую, обезжиренное молоко), суспензию замораживают при температуре не менее -45°С, лиофилизируют, укупоривают и получают сухой концентрат с содержанием бифидобактерий не менее 108/мл, который мож
- 4 006509 но использовать в качестве бифидосодержащего препарата. Согласно НТД на сухой бифидумбактерин (ФС-1.32 ВС 94) допускается содержание в 1 дозе препарата не менее 107 живых клеток бифидобактерий
Пример 4. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения кваса или сока.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас1егшш Ыйбиш 791-МБ, ВгйбоЬас1епиш 1опдит В 379М-МБ, В|ПбоЬас1егшт або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ, В|ПбоЬас1егшт 1иГапЙ8 73-15-МБ, В1йбоЬас1егшт Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
3- й пассаж (получение продукта): Выросшую биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в хлебный квас или сок после их пастеризации из расчета, чтобы содержание бифидобактерий в 1 мл кваса или сока составило не менее 108/мл. Квас или сок охлаждают и употребляют без последующего брожения.
Пример 5. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения косметического средства.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы ВгйбоЬас1епиш Ыйбиш 791-МБ, ВгйбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ, В1йбоЬас1егшт або1ебсепйб Г 7513-МБ, В1йбоЬас1епит шГапЮ 73-15-МБ, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
3- й пассаж (получение косметического средства): Выросшую биомассу смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в биореактор с тиогликолевой средой и инкубируют при 37,538°С при слабом перемешивании до достижения титра бифидобактерий 1 09 клеток/мл. Впоследствии полученную суспензию клеток разрушают нагреванием в автоклаве. Полученную взвесь биологически активных компонентов охлаждают и смешивают с кремовой основой в соотношении 1:2-1:20 в зависимости от назначения изготовляемого крема.

Claims (1)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    Консорциум бифидобактерий В1йбоЬас1епиш Ыйбит ВКПМ Ас-1688, В1йбоЬас1епит 1опдит ВКПМ Ас-1689, В1йбоЬас1епит або1ебсепйб ВКПМ Ас-1690, В1йбоЬас1епит шГапйб ВКПМ Ас-1692, В1йбоЬас1епит Ьгеуе ВКПМ Ас-1691, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств.
EA200500741A 2004-10-20 2005-05-30 Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств EA200500741A1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004130595/13A RU2261909C1 (ru) 2004-10-20 2004-10-20 КОНСОРЦИУМ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium bifidum 791-МБ, Bifidobacterium longum В 379М-МБ, Bifidobacterium adolescentis Г-7513- МБ, Bifidobacterium infantis 73-15-МБ, Bifidobacterium breve 79-119-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA006509B1 true EA006509B1 (ru) 2005-12-29
EA200500741A1 EA200500741A1 (ru) 2005-12-29

Family

ID=35507805

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200500741A EA200500741A1 (ru) 2004-10-20 2005-05-30 Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств

Country Status (3)

Country Link
EA (1) EA200500741A1 (ru)
RU (1) RU2261909C1 (ru)
UA (1) UA74316C2 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2597827C1 (ru) * 2015-08-28 2016-09-20 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
CN112410241A (zh) * 2019-08-22 2021-02-26 丰华生物科技股份有限公司 用以抗氧化的含乳酸菌菌株或其发酵物的组合物及其用途

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LT5578B (lt) 2007-08-20 2009-06-25 Uab "Bifidum Medical" Maistinio arba farmacinio biopreparato kompozicija
RU2451725C2 (ru) * 2010-05-14 2012-05-27 Татьяна Александровна Левченко ШТАММ Bifidobacterium adolescentis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ
RU2451726C2 (ru) * 2010-05-14 2012-05-27 Татьяна Александровна Левченко ШТАММ Bifidobacterium adolescentis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ
RU2451728C2 (ru) * 2010-05-28 2012-05-27 Татьяна Александровна Левченко ШТАММ Bifidobacterium longum, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ
LT6202B (lt) 2013-08-02 2015-07-27 Null, Null Maistinio arba farmacinio biopreparato kompozicija
CN112167345B (zh) * 2019-07-05 2023-07-25 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 含抗氧化的乳酸菌发酵物的食品组合物以及医药组合物
CN112167346B (zh) * 2019-07-05 2023-07-25 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 用以抗氧化的含乳酸菌菌株的食品组合物以及医药组合物
RU2752891C1 (ru) * 2021-01-12 2021-08-11 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение Бифилайф" Консорциум бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащих продуктов, и штаммы, входящие в состав консорциума
TWI797881B (zh) * 2021-12-08 2023-04-01 豐華生物科技股份有限公司 抗老化組合物及其延緩衰老的用途

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2597827C1 (ru) * 2015-08-28 2016-09-20 Олег Иванович Квасенков Способ получения хлебного кваса
CN112410241A (zh) * 2019-08-22 2021-02-26 丰华生物科技股份有限公司 用以抗氧化的含乳酸菌菌株或其发酵物的组合物及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
RU2261909C1 (ru) 2005-10-10
EA200500741A1 (ru) 2005-12-29
UA74316C2 (ru) 2005-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA006509B1 (ru) Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств
Solomon et al. Substantiation of the technology for fermented sour-milk desserts with bifidogenic properties
WO2006073329A1 (fr) Souche de bifidobacterium lactis 668 utlisee dans des ferments, des produits alimentaires, des medicaments et des produits cosmetiques
RU2261908C1 (ru) ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium bifidum 791-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
RU2303058C2 (ru) Средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом "биобаланс-к"
RU2314337C1 (ru) Штамм bifidobacterium adolescentis два-3, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2268931C1 (ru) ШТАММ Bifidobacterium bifidum 79-37, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНЫХ, ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ И НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ, ЗАКВАСОК, ГИГИЕНИЧЕСКИХ И КОСМЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК И БАКТЕРИЙНЫХ ПРЕПАРАТОВ
RU2261904C1 (ru) ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium adolescentis Г 7513-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
RU2317326C1 (ru) Штамм bifidobacterium longum po-6, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2453593C1 (ru) Штамм lactobacillus helveticus, используемый для получения продукции, содержащей лактобактерии
RU2317327C1 (ru) Штамм bifidobacterium adolescentis два-5, используемый для получения ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2307514C1 (ru) Способ получения кисломолочного продукта типа йогурта
RU2314341C1 (ru) Штамм bifidobacterium longum гв-15, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2261907C1 (ru) ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium longum B 379М-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
RU2752891C1 (ru) Консорциум бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащих продуктов, и штаммы, входящие в состав консорциума
RU2261906C1 (ru) ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium infantis 73-15-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
RU2314342C1 (ru) Штамм bifidobacterium bifidum 79-31, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2180915C1 (ru) Консорциум бифидобактерий и лактобацилл, используемый для приготовления бактериальных препаратов, заквасок для кисломолочных продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, предназначенных для коррекции микрофлоры детей в возрасте до 3-х лет
RU2261905C1 (ru) ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium breve 79-119-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
RU2805505C2 (ru) Консорциум штаммов бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащей продукции
RU2314338C1 (ru) Штамм bifidobacterium longum абд-6, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов
RU2260041C2 (ru) Способ получения пробиотика, штамм streptococcus salivarius subsp. thermophilus вкпм в-7984, штамм streptococcus salivarius subsp. thermophilus вкпм в-7985, используемые для получения пробиотика
RU2180914C1 (ru) Консорциум бифидобактерий и лактобацилл, используемый для приготовления бактериальных препаратов, заквасок для кисломолочных продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, предназначенных для коррекции микрофлоры человека в возрасте от 12 лет и старше
RU2225438C2 (ru) КОНСОРЦИУМ МИКРООРГАНИЗМОВ МВИ-4, СОСТОЯЩИЙ ИЗ Bifidobacterium bifidum B-2, Bifidobacterium infantis BI-7, Bifidobacterium longum BL-5, Bifidobacterium adolescentis MC-42, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ
RU2152993C1 (ru) Штамм bifidobacterium bifidum вкпм ас-1578, используемый для приготовления бактериальных препаратов и продуктов питания

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): MD

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KG TM

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment