EA006509B1 - Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств - Google Patents
Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств Download PDFInfo
- Publication number
- EA006509B1 EA006509B1 EA200500741A EA200500741A EA006509B1 EA 006509 B1 EA006509 B1 EA 006509B1 EA 200500741 A EA200500741 A EA 200500741A EA 200500741 A EA200500741 A EA 200500741A EA 006509 B1 EA006509 B1 EA 006509B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- bifidobacterium
- consortium
- bifidobacteria
- products
- strains
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, касается консорциума штаммов бифидобактерий, который может быть использован для приготовления различных форм бактерийных препаратов, препаратов-пробиотиков на его основе, функциональных продуктов питания, биологически активных добавок, неферментированных продуктов, кисло-молочных продуктов, косметических и гигиенических средств. Для получения консорциума использованы следующие штаммы бифидобактерий: Bifidobacterim bifidum 791-МБ, Bifidobacterim longum В 379М-МБ, Bifidobacterim adolescentis Г 7513-МБ, Bifidobacterim infantis 73-15-МБ, Bifidobacterim breve 79-119-МБ, характерной особенностью которых является высокая антибиотическая и супероксиддисмутазная активность с выраженной антиоксидантной активностью. Супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка микробной массы. Проявляемая специфическая активность, способность к утилизации широкого спектра аминокислот, высокая антибиотикоустойчивость позволили повысить устойчивость консорциума к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте и повышения таким образом его колонизирующей активности.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, пищевой промышленности и может быть использовано для получения консорциума бифидобактерий, в производстве продуктов функционального питания и препаратов-пробиотиков, неферментированных продуктов, при приготовлении косметических и гигиенических средств.
Препараты и бифидосодержащие продукты широко используют для лечения и профилактики дисбактериозов различной этиологии, нормализации работы желудочно-кишечного тракта человека и животных, стрессовых влияний, длительной антибиотико-химиотерапии.
Как известно, в кишечнике взрослого человека с наибольшей частотой в биоценозе преобладают виды В|ПбоЬас1епит Ыйбиш, В|ПбоЬас1епит 1опдит, В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8, а виды В|ПбоЬас1епит ίπίαπΐίδ и В|ПбоЬас1епит Ьгеуе - преимущественно у детей грудного возраста.
Известны консорциумы штаммов бифидобактерий различных комбинаций, используемые для приготовления пробиотиков, продуктов лечебного питания, кисло-молочных продуктов, биологически активных добавок и бифидосодержащих ферментированных и неферментированных продуктов зарубежных и отечественных фирм-разработчиков (патент США 6335040, 01.01.2002, заявка США 2002015990, 07.02.2002, ВИ 2109054 С1, 20.04.1998, АО 98/44090, 08.10.1998, ВИ 2196173 С1, 10.01.2003, ВИ 2196174 С1, 10.01.2003).
Наиболее близким аналогом заявленного изобретения является консорциум 5-ти штаммов бифидобактерий: ВШбоЬаЩегшт Ыйбит 791, В|ПбоЬас1епит 1опдитВ 379М, В|ПбоЬас1епит шГапЩ Г73-15, ВШбоЬаЩегшт або1е8сепЙ8 Г 7513, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных пищевых продуктов, биологически активных пищевых добавок и бактерийных препаратов. Штаммы имеют близкие культуральные и физиолого-биохимические свойства, консорциум активно размножается в питательных средах с накоплением производственной биомассы в короткие сроки культивирования, обладает специфической активностью. Готовый продукт содержит в 1 мл 109 живых клеток бактерий. Содержание в 1 дозе препарата не менее 107 живых клеток бифидобактерий (ВИ 2109054 С1, 20.04.1998).
Недостатком известных консорциумов можно считать их слабую устойчивость к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта (кислот, протеолитических ферментов) при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте, что указывает на недостаточную колонизирующую активность и жизнеспособность при прохождении пищеварительного тракта.
Техническим результатом заявленного изобретения является создание консорциума штаммов бифидобактерий, более устойчивого к повреждающим факторам агрессивных сред гастроинтестинального тракта при прохождении бифидобактерий в желудочно-кишечном тракте и повышения, таким образом, его колонизирующей активности при прохождении пищеварительного тракта, выраженной антиоксидантной активностью и пробиотическим действием, проявляемым в условиях как ίπ νί\Ό. так и ίπ νίΙΐΌ.
Консорциум получен также путем сочетания пяти штаммов бифидобактерий В|ПбоЬас1епит Ыйбит 791-МБ, ВКПМ Ас-1688; В|ПбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ, ВКПМ Ас-1689; В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ, ВКПМ Ас-1690; , В|ПбоЬас1епит шГапШ 73-15-МБ, ВКПМ Ас-1692; В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ, ВКПМ Ас-1691, характерной особенностью которых является высокая антибиотикоустойчивость с выраженной антиоксидантной активностью: супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка и пробиотическое действие культур, используемых в производстве проявляется при потреблении пищевых продуктов и продуктов функционального питания.
Штамм В|ПбоЬас1епит Ыйбит 791-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит ЫПбит 791 путем последовательного перепассирования на тиогликолевой среде и обезжиренном молоке (50 пассажей), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас - 1688.
Штамм В|ПбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит 1опдит путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1689.
Штамм В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит або1е8сепЙ8 Г 7513 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас- 1690.
Штамм В|ПбоЬас1епит шГапЩ 73-15-МБ получен из коллекционного штамма В|ПбоЬас1епит 1пГапΙίδ 73-15 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1692.
Штамм В|ПбоЬас1егцпп Ьгеуе 79-119-МБ получен из коллекционного штамма, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119 путем последовательных циклов лиофилизационной сушки и восстановления на тиогликолевой среде (50 циклов сушка-восстановление), депонирован в ВКПМ ВНИИгетика под номером ВКПМ Ас1691.
Созданный консорциум бифидобактерий показал высокую сочетаемость пяти штаммов бифидобактерий между собой, совместное культивирование смешанной популяции всех 5-ти штаммов предполо
- 1 006509 жительно протекает аналогично раздельному культивированию штаммов. В среднем количество клеток по сравнению с исходным количеством увеличивалось в сотни раз за 14-16 ч культивирования при оптимальной температуре. Консорциум сохранил свои специфические свойства в течение 2-х лет.
Культурально-морфологические признаки консорциума
Клетки штаммов микроорганизмов представляют собой грамположительные полиморфные палочки с бифуркацией или утолщением на 1-2-х концах, склонные к образованию скоплений. В жидких питательных средах растут по всей высоте объема, кроме зоны аэробиоза. Логарифмическая фаза заканчивается к 24 ч.
Физиолого-биохимические признаки консорциума
Облигатный анаэроб. Оптимальная температура выращивания 37,5°С, рН питательных сред 7,2-7,4. Каталазу не образует, разжижение желатины отсутствует.
Ферментирует лактозу с образованием уксусной и Ь+ молочной кислоты без образования газа, закисляя среду выращивания до рН 3,9-41. Маннозу, целлобиозу, ксилозу, маннит, сорбит, салицин, инулин, арабинозу не ферментирует.
Кислотообразующая активность: к 24 ч - 105°Т, к 72 ч -160-195°Т (на тиогликолевой среде), на гидролизатно-молочной среде - до 140-160°Т и 200-220°Т, соответственно.
Консорциум активно размножается на средах разного состава. Максимальный титр бифидобактерий консорциума в стерильном обезжиренном молоке без ростовых факторов к 20 ч составляет 2х108 КОЕ/мл. Максимальный титр бифидобактерий на кукурузно-лактозной среде наблюдается к 16 ч и составляет 2х109 КОЕ/мл, на тиогликолевой среде к 16 ч накапливается до 1-3х109 КОЕ/мл.
Бифидобактерии консорциума способны утилизировать свободные аминокислоты в стерильном обезжиренном молоке, такие как валин, метионин, аланин, аргинин, изолейцин, глицин.
ДНК относится к выраженному ГЦ-типу с коэффициентом специфичности 1,57, молярный процент содержания ГЦ в ДНК равен 61,3.
Консорциум проявляет антагонистическую активность по отношению к тест-культурам, полученным из ГИСК им Л.А. Тарасовича: Е. сой В-125, 81арЫ1ососси§ аигеиз 209- Р, шигеллам Зонне, Флекснера. (табл. 1). Консорциум устойчив к амикоцину, бензилпенициллину, гентамицину, стрептомицу, канамицину, тетрациклину, офлоксалину (табл. 2).
Способность консорциума пяти штаммов бифидобактерий ВИц1оЬас1елтпт Ыййит 791-МБ , ΒϊίΐάοЬасТепит 1опдит В 379М-МБ, В1й4оЪас1ег1ит а0о1е§сепЦ§ Г 7513-МБ, В1й4оЪас1ег1ит тГапОз 73-15-МБ, В1й4оЪас1ег1т Ъгеуе 79-119-МБ активно накапливать микробную биомассу на различных питательных средах за 16-20 ч выращивания, высокая антибиотическая и супероксиддисмутазная активность с выраженной антиоксидантной активностью: супероксиддисмутазная активность консорциума не ниже 24,9 ед/мг белка микробной массы, проявляемая специфическая активность позволили использовать его в приготовлении кисло-молочных, неферментируемых продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств.
Проведенные исследования показали, что при совместном культивировании на тиогликолевой среде при значении рН 7,0-7,3 и кукурузно-лактозной среде при значении рН 6,8-7,0 в стационарных условиях изучаемые штаммы бифидобактерий антагонизма по отношению друг к другу не проявляют. Отмечено, что при совместном развитии отмечается лучшее развитие штаммов В. а0о1е§сепЦ§ Г 5315-МБ, В. Ыййит 791- МБ, В. 1опдит В 379М-МБ и наименьшее - В. тГапйз 73-15- МБ и В. Ъгеуе 79-119- МБ.
Антагонистическую активность консорциума штаммов бифидобактерий определяли методом развивающихся смешанных популяций при совместном выращивании с патогенными тестмикроорганизмами по зоне задержки роста тест-микробов методом штриховых кодов.
Таблица 1
Консорциум | Зона задержки роста тест-культур (мм) | |||
Е. со1 | 8й. 8оппе | 8. аигеиз | СапсНОа а1Ьисапз | |
заявляемый | ||||
консорциум | 24-24,8 | 21,7-23,2 | 17,6- 19,2 | 18,8-20,3 |
аналог | 22,7-23,1 | 20,4-21,5 | 18,4-19,0 | 18,3-19,9 |
Наибольшее антагонистическое действие консорциум оказывает на 81арЫ1ососси§ аигеиз и 8Ыде11а лопнем, которые наиболее часто являются причиной пищевых отравлений, возникающих при потреблении кисло-молочных продуктов.
Определение уровней устойчивости штаммов бифидобактерий к антибиотикам проводили по методу серийных разведений в жидкой питательной среде для каждого штамма в отдельности. Устойчивость определяли на стерильном обезжиренном молоке. В питательную среду вводили различные концентрации стерильных растворов антибиотиков и 16-часовые культуры бифидобактерий в количестве 5%. В контрольный образец вносили только биомассу изучаемого штамма бифидобактерий. Устойчивость определяли по изменению титруемой кислотности в образцах после 48 ч инкубирования при температуре
- 2 006509
37-38°С. Штамм устойчив к антибиотикам, когда разница между титруемой кислотностью в контрольном и опытном образцах составляет не более 30°Т.
Таблица 2. Антибиотическая устойчивость штаммов бифидобактерий, составляющих заявленный консорциум
Антибиотики, доза единицы измерения активности | Титруемая кислотность молока после культивирования со штаммом,0 Т | |
Мкг/см3 | в.в. В. в. | в. |
вйМит 1оп§ит аскДезсепИз тГапйз Ьгеуе
791-МБ В 379М-МБ Г7513-МБ 73-15-МБ 79-119-МБ
Амикоцин сульфат 10 | 38-42 | 69-71 | 113-119 | 68-72 | 73-79 | |
Ампициллин | 250 | 68-72 | 57-63 | 54-58 | 57-63 | 68-72 |
Бензилпени- | ||||||
циллин,ЕД/см3 | 10000 | 61-67 | 68-72 | 85-91 | 84-88 | 93-95 |
Гентамицин | 400 | 31-33 | 38-42 | 38-40,0 | 33-35 | 42-46 |
Доксициллин | 10 | 36-4,0 | 39-41 | 32-36 | 43-49 | 47-49 |
Канамицин сульфат 20 | 95-97 | 129-131 | 128-132 | 120-124 | 115-117 | |
Левомицитин | 50 | 29-31 | 38-42 | 29-31 | 21-23 | 26-30 |
Линкомицин | 25 | 72-76 | 58-62 | 77-83 | 77-79 | 91-93 |
Оксациллин | 10 | 29-31 | 32-36 | 32-36 | 23-25 | 31-33 |
Олеандомицин | 12,5 | 48-52 | 59-61 | 42-46 | 46-50 | 55-61 |
Офлоксалин | 20 | 39-41 | 48-52 | 62-66 | 39-41 | 32-36 |
Рифампицин | 15 | 38-42 | 38-42 | 45-51 | 38-42 | 39-41 |
Стрептомицин | 10 | 107-116 | 49-51 | 50-53 | 62-66 | 105-111 |
Сульфадимезин | 50 | 52-56 | 47-49 | 42-46 | 27-29 | 40-44 |
Тетрациклин | 10 | 52-56 | 43-45 | 38-40 | 44-48 | 39-41 |
Фурадонин | 5 | 37-39 | 32-36 | 34-38 | 29-31 | 34-38 |
Фуразолидон | 5 | 37-38 | 28-32 | 27-29 | 26-30 | 32-36 |
Цефазолин | 20 | 38-42 | 44-48 | 35-37 | 29-31 | 39-41 |
Экстенциллин | ||||||
ЕД/см3 | 24000 | 39-41 | 48-52 | 29-31 | 23-25 | 34-38 |
Эритромицин | 25 | 28-32 | 33-35 | 28-32 | 15-17 | 29-31 |
Контроль | 93-99 | 77-83 | 52-56 | 81-87 | 103-109 |
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что штаммы бифидобактерий устойчивы к наибольшим концентрациям следующих антибиотиков:
В. Ыйбит 791-МБ - к ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину;
В.1опдит В379М-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, олеандомицину, офлаксацину, стрептомицину, экстенциллину;
В.айо1е8сеп118 Г7513-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, олеандомицину, офлаксацину, стрептомицину, экстенциллину;
ВлпГапйз 73-15-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину;
В.Ьгеуе 79-119-МБ - к амикоцину, ампициллину, бензилпенициллину, канамицину, линкомицину, стрептомицину.
Аналогичное исследование в отношении заявленного консорциума бифидобактерий показал, что он обладает устойчивостью по крайней мере к 6-ти антибиотикам: амикоцину, тетрациклину, бензилпенициллину, гентамицину, канамицину, офлаксацину, стрептомицину.
Условия хранения заявляемого консорциума
Консорциум хранят на питательной среде с массовой долей сухих веществ 14-16% с добавлением защитной среды, содержащей сахарозу, желатозу, лимоннокислый натрий, высушивают сублимационным способом в ампулах. Консорциум хорошо хранится при 6-8°С без потери титра активности в течение года.
Основным производственно-полезным признаком заявляемого консорциума бифибобактерий, отличающим его от известных, следует считать выраженную супероксиддисмутазной активностью, которая составляет 24,9 ед/мг белка, содержащегося в микробной массе.
Выявленная СОД-активность консорциума бифидобактерий свидетельствует о его выраженном пробиотическом действии, которое может проявляться в условиях ш νίνο, так и ш уйго. Высокая активность кислотообразования, антибиотикоустойчивость к широкому спектру основных антибиотиков, способствует эффективному восстановлению нормальной микрофлоры кишечника уже в процессе антибиотикотерапии.
- 3 006509
Полученный консорциум может быть использован в качестве биологически активного начала пробиотической направленности при производстве различных форм бактерийных препаратов, биологически активных добавок к пище, кисло-молочных продуктов, неферментированных пищевых продуктов, в приготовлении косметических и гигиенических средств. При этом повышается биологическая ценность продуктов функционального питания и препаратов, приготовляемых на его основе. Употребление в пищу продуктов, использующих заявленный консорциум, способствует колонизации слизистой кишечника, вытеснению патогенной и условно патогенной микрофлоры, коррегированию кишечного дисбактериоза, и восстановлению бифидофлоры.
Использование заявленного консорциума в производстве кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств, например кремов, салфеток, лосьонов тампонов, питательных масок, женских прокладок, мыла, косметического молока и т. п., обеспечивает пробиотический и бактериологический эффект, способствует восстановлению нормальной микрофлоры, кожных и слизистых покровов, а также направлено на расширение арсенала аналогичных средств.
Пример 1. Использование консорциума штаммов бифидобактерий в составе закваски для приготовления кисло-молочных продуктов.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!егшт Ыйбиш 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас!егшт або1езсеп113 Г 7513-МБ, В1йбоЬас!егшт ίηΓαηΙίκ 73-15-МБ, В1йбоЬас!егшт Ьгеуе 79-119-МБ в количестве 0,1 г (1 доза) сухой биомассы вносят по отдельности в среду выращивания и титруют методом десятикратных разведении до 10-9 Выращивают до появления отдельных колоний в последнем разведении при 37,5-38°С или 1 дозу сухой биомассы каждого штамма вносят в две пробирки с 30 мл питательной среды в каждой. Выращивают до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую культуру каждого из штаммов объемом не более 10% вносят в среду выращивания и культивируют до получения биомассы с содержанием микробных тел не менее 108/мл.
3- й пассаж (продукт): Полученную биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в стерильное молоко и культивируют до образования сгустка, который разливают в емкости и охлаждают. Полученный продукт содержит в 1 мл не менее 108 живых бифидобактерий.
Пример 2. Использование консорциума штаммов бифидобактерий в составе биологически активной добавки.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!етшт Ыйбит 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас1егшт абокзсепЦз Г 7513-МБ, В1йбоЬас!етшт шГапбз 73-15-МБ, В1йбоЬас!епит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 1 08/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
Получение биологически активной добавки
Полученную биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, вносят в питательную среду не более 5% и выращивают до получения биомассы с высоким, не менее 108/мл, титром бифидобактрий. В концентрат можно вносить различные бифидогенные факторы, способствующие стабилизации свойств культуры и лучшей приживляемости штамма в организме. Концентрат, разлитый в емкости, можно непосредственно использовать в качестве биологически активной добавки лечебнопрофилактического действия. Можно получить сухую биологическую активную добавку, для этого к полученной биомассе добавляют защитные среды высушивания (сахарозожелатиновую, обезжиренное молоко), суспензию замораживают при температуре не менее -45°С, лиофилизируют, укупоривают и получают сухой концентрат с содержанием бифидобактерий не менее 1 07/мл, который можно использовать в качестве биологической добавки, внося ее в пищевом сырье непосредственно перед употреблением.
Пример 3. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения бифидосодержащего препарата.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас!егшт Ыйбит 791-МБ, В1йбоЬас!етшт 1оидит В 379М-МБ, В1йбоЬас!етшт абокзсепЦз Г 7513-МБ, В1йбоЬас!етшт ίηΓηηΙίκ 73-15-МБ, В1йбоЬас!егит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5 °С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
Получение бифидосодержащего препарата
К выросшей биомассе консорциума, которая представляет собой жидкий концентрат с высоким, не менее 108/мл, титром бифидобактерий, добавляют защитные среды высушивания (сахарозожелатиновую, обезжиренное молоко), суспензию замораживают при температуре не менее -45°С, лиофилизируют, укупоривают и получают сухой концентрат с содержанием бифидобактерий не менее 108/мл, который мож
- 4 006509 но использовать в качестве бифидосодержащего препарата. Согласно НТД на сухой бифидумбактерин (ФС-1.32 ВС 94) допускается содержание в 1 дозе препарата не менее 107 живых клеток бифидобактерий
Пример 4. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения кваса или сока.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы В1йбоЬас1егшш Ыйбиш 791-МБ, ВгйбоЬас1епиш 1опдит В 379М-МБ, В|ПбоЬас1егшт або1е8сепЙ8 Г 7513-МБ, В|ПбоЬас1егшт 1иГапЙ8 73-15-МБ, В1йбоЬас1егшт Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
3- й пассаж (получение продукта): Выросшую биомассу каждого из штаммов смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в хлебный квас или сок после их пастеризации из расчета, чтобы содержание бифидобактерий в 1 мл кваса или сока составило не менее 108/мл. Квас или сок охлаждают и употребляют без последующего брожения.
Пример 5. Использование консорциума штаммов бифидобактерий для получения косметического средства.
1- й пассаж: Лиофилизированные штаммы ВгйбоЬас1епиш Ыйбиш 791-МБ, ВгйбоЬас1епит 1опдит В 379М-МБ, В1йбоЬас1егшт або1ебсепйб Г 7513-МБ, В1йбоЬас1епит шГапЮ 73-15-МБ, В|ПбоЬас1епит Ьгеуе 79-119-МБ активизируют путем посева в питательную среду и выращивают при 37-38,5°С до получения биомассы с содержанием клеток не менее 108/мл.
2- й пассаж: Выросшую биомассу каждого из штаммов в объеме не более 10% вносят в питательную среду и культивируют до получения биомассы с количеством клеток не менее 108/мл.
3- й пассаж (получение косметического средства): Выросшую биомассу смешивают, получая консорциум, и в объеме не более 5% вносят в биореактор с тиогликолевой средой и инкубируют при 37,538°С при слабом перемешивании до достижения титра бифидобактерий 1 09 клеток/мл. Впоследствии полученную суспензию клеток разрушают нагреванием в автоклаве. Полученную взвесь биологически активных компонентов охлаждают и смешивают с кремовой основой в соотношении 1:2-1:20 в зависимости от назначения изготовляемого крема.
Claims (1)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯКонсорциум бифидобактерий В1йбоЬас1епиш Ыйбит ВКПМ Ас-1688, В1йбоЬас1епит 1опдит ВКПМ Ас-1689, В1йбоЬас1епит або1ебсепйб ВКПМ Ас-1690, В1йбоЬас1епит шГапйб ВКПМ Ас-1692, В1йбоЬас1епит Ьгеуе ВКПМ Ас-1691, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004130595/13A RU2261909C1 (ru) | 2004-10-20 | 2004-10-20 | КОНСОРЦИУМ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium bifidum 791-МБ, Bifidobacterium longum В 379М-МБ, Bifidobacterium adolescentis Г-7513- МБ, Bifidobacterium infantis 73-15-МБ, Bifidobacterium breve 79-119-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200500741A1 EA200500741A1 (ru) | 2005-12-29 |
EA006509B1 true EA006509B1 (ru) | 2005-12-29 |
Family
ID=35507805
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200500741A EA006509B1 (ru) | 2004-10-20 | 2005-05-30 | Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
EA (1) | EA006509B1 (ru) |
RU (1) | RU2261909C1 (ru) |
UA (1) | UA74316C2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2597827C1 (ru) * | 2015-08-28 | 2016-09-20 | Олег Иванович Квасенков | Способ получения хлебного кваса |
CN112410241A (zh) * | 2019-08-22 | 2021-02-26 | 丰华生物科技股份有限公司 | 用以抗氧化的含乳酸菌菌株或其发酵物的组合物及其用途 |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
LT5578B (lt) | 2007-08-20 | 2009-06-25 | Uab "Bifidum Medical" | Maistinio arba farmacinio biopreparato kompozicija |
RU2451725C2 (ru) * | 2010-05-14 | 2012-05-27 | Татьяна Александровна Левченко | ШТАММ Bifidobacterium adolescentis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ |
RU2451726C2 (ru) * | 2010-05-14 | 2012-05-27 | Татьяна Александровна Левченко | ШТАММ Bifidobacterium adolescentis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ |
RU2451728C2 (ru) * | 2010-05-28 | 2012-05-27 | Татьяна Александровна Левченко | ШТАММ Bifidobacterium longum, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БИФИДОСОДЕРЖАЩЕЙ ПРОДУКЦИИ |
LT6202B (lt) | 2013-08-02 | 2015-07-27 | Null, Null | Maistinio arba farmacinio biopreparato kompozicija |
CN112167346B (zh) * | 2019-07-05 | 2023-07-25 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 用以抗氧化的含乳酸菌菌株的食品组合物以及医药组合物 |
CN112167345B (zh) * | 2019-07-05 | 2023-07-25 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 含抗氧化的乳酸菌发酵物的食品组合物以及医药组合物 |
RU2752891C1 (ru) * | 2021-01-12 | 2021-08-11 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение Бифилайф" | Консорциум бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащих продуктов, и штаммы, входящие в состав консорциума |
TWI797881B (zh) * | 2021-12-08 | 2023-04-01 | 豐華生物科技股份有限公司 | 抗老化組合物及其延緩衰老的用途 |
-
2004
- 2004-10-20 RU RU2004130595/13A patent/RU2261909C1/ru active
-
2005
- 2005-05-30 EA EA200500741A patent/EA006509B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-07-15 UA UAA200507066A patent/UA74316C2/ru unknown
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2597827C1 (ru) * | 2015-08-28 | 2016-09-20 | Олег Иванович Квасенков | Способ получения хлебного кваса |
CN112410241A (zh) * | 2019-08-22 | 2021-02-26 | 丰华生物科技股份有限公司 | 用以抗氧化的含乳酸菌菌株或其发酵物的组合物及其用途 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA200500741A1 (ru) | 2005-12-29 |
RU2261909C1 (ru) | 2005-10-10 |
UA74316C2 (ru) | 2005-11-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA006509B1 (ru) | Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791-мб, bifidobacterium longum в 379м- мб, bifidobacterium adolescentis г 7513-мб, bifidobacterium infantis 73-15-мб, bifidobacterium breve 79-119-мб, используемый для приготовления кисло-молочных, неферментированных продуктов, биологически активных добавок, бифидосодержащих препаратов, косметических и гигиенических средств | |
Solomon et al. | Substantiation of the technology for fermented sour-milk desserts with bifidogenic properties | |
WO2006073329A1 (fr) | Souche de bifidobacterium lactis 668 utlisee dans des ferments, des produits alimentaires, des medicaments et des produits cosmetiques | |
RU2261908C1 (ru) | ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium bifidum 791-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ | |
RU2303058C2 (ru) | Средство для лечения кишечных инфекций, осложненных дисбактериозом "биобаланс-к" | |
RU2314337C1 (ru) | Штамм bifidobacterium adolescentis два-3, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов | |
RU2268931C1 (ru) | ШТАММ Bifidobacterium bifidum 79-37, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНЫХ, ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ И НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ, ЗАКВАСОК, ГИГИЕНИЧЕСКИХ И КОСМЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК И БАКТЕРИЙНЫХ ПРЕПАРАТОВ | |
RU2261904C1 (ru) | ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium adolescentis Г 7513-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ | |
RU2317326C1 (ru) | Штамм bifidobacterium longum po-6, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов | |
RU2317327C1 (ru) | Штамм bifidobacterium adolescentis два-5, используемый для получения ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов | |
RU2307514C1 (ru) | Способ получения кисломолочного продукта типа йогурта | |
RU2261907C1 (ru) | ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium longum B 379М-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ | |
RU2752891C1 (ru) | Консорциум бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащих продуктов, и штаммы, входящие в состав консорциума | |
RU2261906C1 (ru) | ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium infantis 73-15-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ | |
RU2314342C1 (ru) | Штамм bifidobacterium bifidum 79-31, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов | |
RU2180915C1 (ru) | Консорциум бифидобактерий и лактобацилл, используемый для приготовления бактериальных препаратов, заквасок для кисломолочных продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, предназначенных для коррекции микрофлоры детей в возрасте до 3-х лет | |
RU2261905C1 (ru) | ШТАММ БИФИДОБАКТЕРИЙ Bifidobacterium breve 79-119-МБ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛО-МОЛОЧНЫХ, НЕФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПРОДУКТОВ, БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, БИФИДОСОДЕРЖАЩИХ ПРЕПАРАТОВ, КОСМЕТИЧЕСКИХ И ГИГИЕНИЧЕСКИХ СРЕДСТВ | |
RU2805505C2 (ru) | Консорциум штаммов бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащей продукции | |
RU2314338C1 (ru) | Штамм bifidobacterium longum абд-6, используемый для получения кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, заквасок, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов | |
RU2260041C2 (ru) | Способ получения пробиотика, штамм streptococcus salivarius subsp. thermophilus вкпм в-7984, штамм streptococcus salivarius subsp. thermophilus вкпм в-7985, используемые для получения пробиотика | |
RU2180914C1 (ru) | Консорциум бифидобактерий и лактобацилл, используемый для приготовления бактериальных препаратов, заквасок для кисломолочных продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, предназначенных для коррекции микрофлоры человека в возрасте от 12 лет и старше | |
RU2225438C2 (ru) | КОНСОРЦИУМ МИКРООРГАНИЗМОВ МВИ-4, СОСТОЯЩИЙ ИЗ Bifidobacterium bifidum B-2, Bifidobacterium infantis BI-7, Bifidobacterium longum BL-5, Bifidobacterium adolescentis MC-42, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ | |
RU2152993C1 (ru) | Штамм bifidobacterium bifidum вкпм ас-1578, используемый для приготовления бактериальных препаратов и продуктов питания | |
RU2296156C2 (ru) | Штамм bifidobacterium lactis 672, используемый для приготовления кисломолочных лечебно-профилактических продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, пробиотика и косметических средств | |
EA041668B1 (ru) | Консорциум бифидобактерий, используемый для приготовления бифидосодержащих продуктов, и штаммы, входящие в состав консорциума |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): MD |
|
PC4A | Registration of transfer of a eurasian patent by assignment | ||
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ KG TM |
|
PC4A | Registration of transfer of a eurasian patent by assignment |