SU1727071A1

SU1727071A1 - Способ определени реактивности клеток крови к биогенным моноаминам

Info

Publication number: SU1727071A1
Application number: SU884483438A
Authority: SU
Inventors: Валентина Петровна Кондратьева; Вероника Петровна Терещенко
Original assignee: Институт медицинских проблем Севера СО АМН СССР
Priority date: 1988-09-16
Filing date: 1988-09-16
Publication date: 1992-04-15

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к биофизическим методам исследовани крови. Цель изобретени - упрощение способа и снижение травматичное™. Способ включает забор проб крови и анализ в присутствии моноаминов. Из забранной однократно крови готов т опытную и контрольную пробы клеток крови путем суспен- зировани их в буферном растворе, ввод т в опытную пробу биогенный моноамин, инкубируют обе пробы, добавл ют флуоресцентный зонд, регистрируют свечение зонда на микроскопе ЛЮМАМ, а о реактивности клеток крови к биогенным моноаминам суд т по разности величины флюоресценции зонда в опытной и контрольной пробах. В качестве флюоресцирующего зонда используют 1-анйлино-нафта- лино-8-сульфонат.

Description

Изобретение относитс к медицине, в частности к биофизическим методам исследовани крови.

Цель изобретени - снижение травма- тичности при проведении исследовани , а также упрощение способа.

В гепаринизированный капилл р длит- ной 15 см из пальца обследуемого производ т забор крови, затем микрокапилл р отстаивают под углом в 45° в течение 30 мин, в результате чего происходит разделение клеток. Взвесь лейкоцитов или эритроцитов суспензируют в калий-фосфатном буфере (0,14 М рН 7,4). К 50 мкл суспензии добавл ют 5 мкл адреналина ( М) или серотонина (1,25 мкг, 0,0001 мл) и инкубируют в течение 1 ч при 25°С. Это опытна проба.

В контрольную пробу вместо раствора моноамина добавл ют5 мкл растворител и также инкубируют. Через 1 ч к пробам добавл ют 8,33 мМ флюоресцирующего зонда АН С (1-анилино-нафталино-8-сулъфат) 10 мкл и наход изменение флюоресценции зонда- в 50 клетках под вли нием моноаминов , которое выражаетс либо в тушении флюоресценции зонда, либо в стимул ции этого параметра. Дл возбуждени флюоресценции пробы подаетс свет с длиной волны 365 нм, свечение регистрируетс при 470 нм на микроскопе ЛЮМАМ с помощью ФЭУ, о реактивности клеток к биогенным моноаминам суд т по разности флюоресценции в опытной и контрольной пробах. Разницей в величине флюоресценции выражаетс реактивность, клетки к моноаминам.

VI

чэ

VI о VI

П р и м е р 1. Флюоресценци опытной пробы с адреналином 0,650 мВ, флюоресценци контрольной пробы 0,430 мВ. Разница 0,220 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к адреналину.

П р и м е р 2. Флюоресценци опытной пробы с серотонином 0,880 мВ, флюоресценци контрольной пробы 0,560 мВ. Разница 0,320 мВ служит количественным выражением реактивности клеток в крови к серотонину.

Использование предлагаемого способа оценки реактивности клеток крови к биогенным моноаминам по сравнению с существующими обеспечивает следующие преимущества: исключаетс введение а организм обследуемого моноаминов, что важно дл исключени побочных нежелательных реакций; дл определени реактив- ности клеток к биогенным моноаминам

требуетс минимальное количество крови из пальца обследуемого.

Claims

Формула изобретени

Способ определени реактивности клеток крови к биогенным моноаминам, включающий забор крови, выделение клеток крови и их анализ в присутствии биогенного моноамина, о т л и ч а ю щи и с тем, что, с целью устранени побочных реакций у пациентов и снижени травматичное™, забор крови провод т однократно, затем выделенную взвесь лейкоцитов или эритроцитов суспензируют в.буферном растворе, внос т биогенный амин в опытную пробу, инкубируют в течение 1 ч при 25°С, далее добавл ют 1-анилино-нафталино-8-сульфонат, а реактивность клеток определ ют флуори- метрически по разнице величины флуоресценции опытной и контрольной проб. .