SU1720596A1 - Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток - Google Patents
Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток Download PDFInfo
- Publication number
- SU1720596A1 SU1720596A1 SU904803717A SU4803717A SU1720596A1 SU 1720596 A1 SU1720596 A1 SU 1720596A1 SU 904803717 A SU904803717 A SU 904803717A SU 4803717 A SU4803717 A SU 4803717A SU 1720596 A1 SU1720596 A1 SU 1720596A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- plants
- obtaining
- sunflower
- regenerants
- callus
- Prior art date
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к биотехнологии , в частности к культивированию изолированных тканей растений и может быть использовано в селекционной практике дл создани новых и улучшени существующих сортов растений. Целью изобретени вл етс повышение выхода растений-регене- рантов и количества зон морфогенеза. Способ предусматривает получение из незрелых зародышей растений регенерантов путем двухэтапного культивировани на модифицированных питательных средах Му- расиге-Скуга и Гамборга Bs. ы fe
Description
Изобретение относитс к биотехнологии , в частности к культивированию изолированных тканей растений, и может быть использовано в селекционной практике дл создани новых и улучшени уже известных сортов растений.
Одним из лимитирующих факторов выращивани изолированных тканей и клеток подсолнечника вл етс низка регенераци растений.
Известны способы получени расте- ний-регенерантов подсолнечника путем пр мого и непр мого соматического эмбриогенеза , основанные на подборе типа эксплантата и оптимального состава среды. Было показано вли ние гормонов 6-бензи- ламинопурина (БАП) и 2,4-дихлорфенокси- уксусной кислоты (2,4-Д) на р д эксплантатов синтетического сорта Sannace, а именно на листь , участки котиледонов , апексы побегов, сегменты гипо- котил . Оказалось, что среда (MS) Murashige and Skoog в сочетании с 2,4-Д и БАП и MS с 2,4-Д не вызывает образовани побегов из каллуса ни дл одного эксплантата , на среде MS с добавкой 1 мг/л БАП наблюдали регенерацию из глобул рного каллуса, полученного при культивировании
VI
чэ О
ел ю
сегментов гипокотил . Недостаток этого метода в том, что он касаетс только одного редкого генотипа.
Известен пр мой соматический эмбриогенез и регенераци растений из незрелых зародышей на среде с повышенным содержанием сахарозы. Через шесть дней начала культивировани показано образование белых соматических зародышей непосредственно из котиледона зиготических, без образовани каллуса. Незрелые зародыши на 7-14-й день после опылени помещали на среды, содержащие MS соли; витамины среды Gamborgs (Bs); различные концентрации сахарозы (3%, 6%, 12%); в качестве добавок - 2,4-Д, дикамба, пиклорам, долил-3-уксусна кислота (ИУК), и а-наф- тил-уксусна кислота (НУК). Показано, что образование соматических зародышей не происходило на средах с 3% сахарозы и использованием в качестве добавок ИУК или НУК. Оптимальными вл лись среды с 6 и 12% сахарозы в сочетании с 1 мг/л 2,4-Д или 3,3 мг/л дикамба. При помещении на данные оптимальные среды зрелых зароды.- шей или тканей асептических проростков (листьев, апексов, гипокотилей) пр мого соматического эмбриогенеза не наблюдалось, Недостатки этого способа в том, что он применим только к определенному типу экс- плантатов, а именно к незрелым зародышам на 7-14 день после опылени (следовательно, малым гибкость), кроме того , степень регенерации полученных всходов остаетс еще не очень достаточной.
Из известных способов наиболее близким по своей сущности вл етс способ регенерации подсолнечника, применимый к восьми сортам подсолнечника, описываю- щий регенерацию из незрелых зародышей на 4-21-й день после опылени . Культивирование по известному способу осуществл етс в три этапа. Первый этап - образовани эмбриогенных каллусов из клеток или тканей путем культивировани в питательной индуцирующей среде, содержащей соли и витамины MS, аминокислоты, 9% сахарозы, гормон цитокининового типа БАП в концентрации 0,5-1 мг/л. Второй этап - культивирование эмбриогенных каллусов дл их роста, развити и прорастани в среде, содержащей соли и витамины MS, аминокислоты, 3% сахарозы, 0,1-0,5 мг/л БАП. Третий этап состоит в перенесении проростков дл их роста и развити на среду , содержащую соли и витамины Bs, 1% сахарозы, гормон ауксинового типа - ИУК в концентрации 0,1-0,2 мг/л.
Недостатки этого способа состо т в необходимости осуществлени изменений сред между первым, вторым и третьим этапами , что ведет к большей веро тности инфицировани , а также невысокой частоте регенерации.
Целью изобретени вл етс повышение выхода растений-регенерантов и количества зон морфогенеза.
Способ предусматривает культивирование эксплантата подсолнечника в питательной индуцирующей среде, содержащей гормоны дл инициации эмбриогенных каллусов и дальнейшее культивирование эмбриогенных каллусов дл их роста, развити и прорастани , позвол ющее получить рас- тени -регенеранты.
Использование способа приводит к множественному образованию побегов из одного зародыша путем непр мого соматического эмбриогенеза.
Способ осуществл етс следующим образом .
Используют восемь генотипов подсолнечника: сорта Передовик, Надежный, Енисей , Ультраскороспелый, Ржаксинский; инбредную линию 36-29; две гибридные линии М 1 65/1 А х НА 234 А х К 3064.
В качестве эксплантата дл индукции каллуса используют незрелые зародыши на 9-21-й день после опылени . Изолированные в асептических услови х незрелые зародыши помещают на питательную среду MSc3% сахарозы, дополненную5 г/л КМОз, 100 мг/л инозитола, 500 мг/л казаминовых кислот, 0,5 мг/л БАП и 5 мг/л НУК с дальнейшим получением морфогенетического каллуса . Каллусную ткань выращивают в термостате при t 26-28° С, далее при фотопериоде 16 ч день - 8 ч ночь при t 26-28° С с перенесением каждые 25-30 дней на свежую питательную среду. Затем после роста каллусной ткани отделенные побеги перенос т на среду дл корнеобразовани , содержащую соли Вб, 0,5% сахарозы, 2 мг/л ИМК, 0,5 мг/л пиридоксина HCI.
П р и м е р 1. Растени подсолнечника сорта Ржаксинский выращивают в теплице в сосудах с почвой. В момент цветени каждое растение отмечают этикеткой с указанием даты цветени . На 9-21-й день после опылени сем нки стерилизуют путем погружени на 1 мин в 50%-ный этанол, далее на 10 мин в 9%-ный раствор продажного хлорамина Б, затем промывают трижды стерильной дистиллированной водой. Изолированные в асептических услови х зародыши размером 0,1-0,8 см помещают на среду, содержащую соли и витамины MS,
3% сахарозы, 4 г/л КМОз, 90 мг/л инозито- ла, 400 мг/л казаминовых кислот, 0,4 мг/л БАП, 4 мг/л НУК. В течение первых 20 дней клеточные культуры выращивают в термостате при t 26-28° С, далее - при фОтопе- риоде 16 ч день - 8 ч ночь при t 26-28° С. Через 25-30 дней выросший каллус пересаживают на свежую питательную среду, одновременно отдел образовавшиес побеги и перенос их на среду дл корнерб- разовани , содержащую соли Bs, 0,5% сахарозы , 1 мг/л ИМК, 0,4 мг/л пиридоксин HCI. В каждом пассаже учитывают количество полученных растений-регенерантов и образовавшихс зон морфогенеза.
П р и м е р 2. Способ осуществл етс аналогично примеру 1, различие состоит в составе питательных сред дл индукции каллуса и корнеобразовани . Питательна индуцирующа среда содержит соли и вита- мины MS, 3 % сахарозы, 5 г/л КМОз, 100 мг/л инозитола, 500 мг/л казаминовых кислот, 0,5 мг/л БАП, 5 мг/л НУК. Втора среда содержит соли Bs, 0,5% сахарозы, 2 мг/л ИМК, 0,5 мг/л пиридоксина HCI.
ПримерЗ. В среду дл индукции каллуса, содержащую соли и витамины MS, 3% сахарозы, добавл ют 6 г/л КМОз, 1tO мг/л инозитола, 600 мг/л казаминовых кислот , 0,6 мг/л БАП и 6 мг/л НУК. Среду дл корнеобразовани , содержащую соли Bs, 0,5 % сахарозы дополн ют Змг/л ИМК и 0,6 мг/л пиридоксин НС.. Остальные приемы осуществл ют аналогично примеру 1.
П р и м е р 4. Незрелые зародыши сорта Енисей, собранные на 9-21-й день после опылени , когда они достигают размеров 0,1-0,8 см. стерилизуют, изолируют в асептических услови х и далее процесс культивировани ведут по примеру 2.
Аналогично провод т испытани с другими генотипами подсолнечника.
Предлагаемый способ ускорил в 1,2 раза по сравнению с известным процесс обра- зовани зон морфогенеза и зачатков побегов путем непр мого соматического эмбриогенеза . Через 12-14 дней наблюдали образование зон морфогенеза и зачатков побегов на индуцирующей питательной среде. Повысилась частота образовани морфогенетических линий в 1,5 раза, увеличилось число множественных зон морфогенеза в 4-6 раз.
Предлагаемый способ позволит получить регенерацию подсолнечника путем непр мого соматического эмбриогенеза.
Claims (1)
- Формула изобретени Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток, включающий эксплантацию незрелых зародышей на модифицированную питательную среду Мурасиге-Скуга, получение на ней морфогенетического каллуса, регенерацию побегов, перенос их на модифицированную питательную среду Гамборга Bs дл корнеобразовани и адаптацию полученных растений к услови м открытого грунта, отличаю щ и и с тем, что , с целью повышени выхода растений-регенерантов и количества зон морфогенеза, получение каллуса и регенерацию побегов осуществл ют в один этап с добавлением в питательную среду 4000-6000 мг/л нитрата кали , 90-110 мг/л инозитола, 400-600 мг/л казаминовых кислот, 0,4-0,6 мг/л 6-бензи- ламинопурина, 4-6 мг/л а-нафтилуксусной кислоты и корнеобразование провод т в присутствии 1-3 мг/л индолилмасл ной кислоты, 0,4-0,6 мг/л пиридоксина HCI.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904803717A SU1720596A1 (ru) | 1990-03-19 | 1990-03-19 | Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904803717A SU1720596A1 (ru) | 1990-03-19 | 1990-03-19 | Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1720596A1 true SU1720596A1 (ru) | 1992-03-23 |
Family
ID=21502642
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU904803717A SU1720596A1 (ru) | 1990-03-19 | 1990-03-19 | Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1720596A1 (ru) |
-
1990
- 1990-03-19 SU SU904803717A patent/SU1720596A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Greco В., Tanzarella O.A., Carrosso G., Blanco A. Callus induction and shoot regeneration In sunflower (Helianthus annuus L) Plant. Sci Lett., 1984, v. 36, № 1, p. 73-78. Murashige T. and Skoog F. A revised medium of rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiol. Plant., 1962, v. 15, p. 473-497. Finer I.I. Direct somatic embriogenesis and plant regeneration from, immature embryos of hybrid sunflower (Helianthus annuus L) on a high sucrose - containing medium. Plant. Cell. Reports., 1987, v. 6, №5, p. 372-374. GamborgO. L, Miller R.A., Ojlma K. Nutrient requirements of suspension cultures of soybean rootcelfs. Exp. Cell. Res., 1968, v. 50, p. 151-158. Патент FR № 2605839. кл. А 01 Н 5/00. 1986. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5008200A (en) | Propagating multiple whole fertile plants from immature leguminous | |
US4666844A (en) | Process for regenerating cereals | |
US4806483A (en) | Process for regenerating corn | |
US4665030A (en) | Process for regenerating corn | |
US4684612A (en) | Process for regenerating soybeans | |
Kawata et al. | Micropropagation of passion fruit from subcultured multiple shoot primordia | |
US4830966A (en) | Process for regenerating corn | |
SU1727514A3 (ru) | Способ регенерации растений подсолнечника | |
CN113557961A (zh) | 一种无花果愈伤组织的培养方法 | |
EP0171593A1 (en) | Sunflower regeneration through embryogenesis and organogenesis | |
EP0170904A1 (en) | Sunflower regeneration through organogenesis | |
CA1305322C (en) | Somatic embryogenesis and plant regeneration of cacao | |
CN112167056A (zh) | 一种绿豆子叶节再生培养方法 | |
WO1993012645A1 (en) | Somatic embryogenesis and plant regeneration of cacao | |
SU1720596A1 (ru) | Способ получени регенерантов подсолнечника в культуре соматических клеток | |
HU203933B (en) | Method for regenerating cotton from cell culture | |
Pniewski et al. | Organogenesis and long-term micropropagation of Polish pea cultivars | |
US4843005A (en) | Process for regenerating corn | |
US4837152A (en) | Process for regenerating soybeans | |
US4681849A (en) | Sunflower induction, maintenance and regeneration media, methods of use and plants regenerated therefrom | |
SU1752284A1 (ru) | Способ клонального микроразмножени гибридов карельской березы | |
CN115843690B (zh) | 一种以金银花花药为外植体的再生方法 | |
CN114467753B (zh) | 一种银鹿枫香的组织培养方法 | |
SU1729337A1 (ru) | Способ первичного семеноводства гибридов кукурузы | |
WO2000016610A1 (en) | A process for the induction of direct in vitro organogenesis in onion |