SU1708834A1

SU1708834A1 - Питательна среда дл культивировани энтеробактерий

Info

Publication number: SU1708834A1
Application number: SU904808531A
Authority: SU
Inventors: Любовь Степановна Бузолева; Зинаида Васильевна Пручкина
Original assignee: Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии СО АМН СССР
Priority date: 1990-04-02
Filing date: 1990-04-02
Publication date: 1992-01-30

Abstract

Изобретение относитс к микробиологии, а именно к питательнь1м средам дл культивировани бактерий, и. может быть использовано в микробиологической промышленности. Целью изобретени вл етс упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств. Предложена питательна среда дл культивировани энтеробактерий, содержаща следующие ингредиенты, г: натрий фосфорнокислый двузамещенмый 8,2-8,7; калий фосфорнокислый однозамещенный 2,2-2,7; гумино- ва кислота 0,01-0.04; дистиллированна вода до 1 л. 1 табл.^w'ЁИзобретение относис к микробиологии, а именно к питательным средам дл культивировани , кишечных бактерий, и может быть использовано в микробиологической промышленности дл расширени арсенала заменителей натуральных м сных и рыбных продуктов непищевыми источниками сырь .В микробиологии известны питательные среды дл культивировани кишечных бактерий, в которых используют фермен- толизат биомассы микроорганизмов - дрожжей и бактерий, выращенных на Н-парафиновой нефти и лактопептоне, с добавлением остальных необходимых компонентов.Наиболее близка к предлагаемому магниева среда следующего состава;Раствор А:Пептон, г4.2Хлорид натри , г7,0Дрожжевой гидроли-зат, г20.0Фосфат кали , г1.5Дистиллированна вода, мл890Раствор Б:Хлорид магни , г3,6Дистиллированна вода, мл90Раствор В:Бриллиантовыйзеленый, мл (водныйраствор 0,5%)0,9рН7,4Недостатками известной среды вл ютс многокомпонентность, сложность приготовлени и использование в качестве основного сырь ценных пищевых продуктов (м со, дрожжи, рыба, пептон).Цель изобретени - упрощение состава среды при сохранении ее ростовых свойств.VI о00 00 СА>& J^

Description

Поставленна цель достигаетс тем, что культивирование бактерий провод т в питательной среде, представл ющей собой гуминовую кислоту, растворенную в фосфатном буфере (рН 7,4).

Среду готов т следующим образом. 8,2-8,7 г натри фосфорнокислого однозамещенного , 2,2-2,7 г кали фосфорнокислого однозамещенного, 0,01 - 0,04 г гуминовой кислоты развод т в 100 мл дистиллированной воды, затем довод т объем до 1000 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм в течение 30 глин. Питательна среда имеет светло-коричневый оттенок без специфического запаха, рН среды 7,4.

П р и м е р 1. Готов т среду как описано выше, ингредиенты берут в следующих количествах (минимальные запредельные значени ), г:

Натрий фосфорнокислый

двузамещенный7,9

Калий фосфорнокислый однозамещенный2,0 Гуминова кислота 0,005 Дистиллированна вода, л До 1 После стерилизации в питательную среду дозировано внос т суспензию бактерий штаммов Salmonella enteritidis. Salmonella typhimurlum, Shlgella Sonnei и Shlgella flexnerl дл накоплени биомассы. Пробирки с инокулированной питательной средой инкубируют в термостате при 37°С в течение суток. Затем дл определени прироста бактериальной массы производ т серийные высева бактерий на чашки Петри с соответствующими дифференциально-диагностическими средами (среда Плостерева, висмут-сульфидный агар) с учетом необходимых разведений.

Прим ер 2. Готов т среду в соответствии с примером 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (минимальные предельные значени ), г:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный8 ,2 Калий фосфорнокислый однозамещен ый , 2,2 Гуминова кислота 0,01 Дистиллированна вода, л До 1 Прм учете колоний на чашках Петри (тс15лица)установлено, что при заражающей доае микр. кл/мл количество шигелл за сутки культивировани увеличилось в прототипе до 28 ±6 X 10 микр.кл/мл, а в

предлагаемом варианте среды до 26 ± 5 х х10 , тогда как сальмонелл 222 ± 23 х 10 и 215 ± 26 X 10 соответственно.

Различи сравниваемых показателей в прототипе и в предлагаемой среде недостоверны .

П р и м е р 3. Готов т среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (оптимальный вариант), г: Натрий фосфорнокислый двузамещенный8 ,5 Калий фосфорнокислый однозамещенный2 ,5 Гуминова кислота0,02 Дистиллированна вода, л До 1 При учете колоний на чашках Петри (таблица) установлено, что количество шмгелл за 1 сут культивировани увеличилось, в прототипе до 28 ±6x10 микр.кл/мл, а в предлагаемой среде до 36 ±4x10 сальмонелл 222 ± 23 X 10 и 226 ± 21 х 10 соответственно.

Различи сравниваемых показателей статистически недостоверны.

П р и м е р 4. Готов т среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (максимальные предельные значени ), г:

Натрий фосфорнокислый двузамещенный . г8,7 Калий фосфорнокислый однозамещенный2 ,7 Гуминова кислота 0,04 Дистиллированна вода, л До 1 При учете колоний на чашках Петри (таблица) установлено, что количество шигелл за 1 сут культивировани увеличилось в прототипе до 28 ± 6 х 10, а в-предлагаемой среде до 24 ± 55 х 10 , сальмонелл 222 ± 23 X 10 и 190 ± 18 х 10 соответственно . .

П р и м е р 5. Готов т среду как в примере 1, но ингредиенты берут в следующих количествах (масимальные запредельные значени ингредиентов), г: Натрий фосфорнокислый двузамещенный9 ,0 Калий фосфорнокислый однозамещенный3 ,0

Гуминова кислота0,08

Дистиллированна вода, лДо 1

При учете результатов (таблица) установлено , что количество шигелл за 1 сут культивировани увеличилось в прототипе до 28 ±6 х10, а в предлагаемой среде только до 9 ±1,3 х10, сальмонелл 222х ± 23 х10° и 50 ±10 х10 соответственно. Различи показателей статистически достоверны .

Результаты роста кишечных бактерий на различных питательных средах приведены в таблице.

Из приведенных данных видно, что размножение бактерий происходит в питательной среде, содержащей 0,01 - 0,04 г гуминовой кислоты; 2,2 - 2,7 г кали фосфорнокислого однозамещенного; 8,2 - 8,7 г натри фосфонокислого двузамещенного. Увеличение концентрации ингредиентов в питательной среде не способствует увеличению концентрации бактерий, напротив, количество бактерий уменьшаетс на 68 76 % по сравнению с прототипом.

Таким образом, предлагаема среда по сравнению с известными обеспечивает равнозначное размножение бактерий, прирост бактериальной массы в обоих случа х составл л 4 - 6 %. Ее использование позволит

заменить дефицитные пищевые продукты (м со, рыбу, дрожжи) на дешевое непищевое сырье- гуминовые кислоты.

Процесс приготовлени питательной среды прост, не требует специального оборудовани и реактивов. Применение предлагаемой среды дл культивировани бактерий в микробиологической промышленности и микробиологических исследовани х позвол ет снизить себестоимость целевого продукта.

Claims

Формула изобретени

Питательна среда дл культивировани энтеробактерий, содержаща питательную основу, минеральные соли и дистиллированную воду, отличающа с тем, что, с целью упрощени состава среды при сохранении ее ростовых свойств, в качестве питательной основы, она содержит гуминовую кислоту, а в качестве минеральных солей - фосфорнокислый двузамещенный натрий и фосфорнокислый однозамещенный калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Фосфорнокислый двузамещенный натрий8,2 - 8,7

Фосфорнокислый

однозамещенный калий .2,2-2,7

Гуминова кислота0,01 - 0,04

Дистиллированна

вода, лДо 1