SU1685934A1 - Натриева соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо)этансульфокислоты, обладающа антиагрегационной активностью - Google Patents

Abstract

Изобретение касаетс  замещенных гетероциклических веществ, в частности натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1 ,4-дигидропиридин-4-кар- боксамидо) этансульфокислоты, обладающей антиагрегационной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез соединени  ведут из пентафтор- фенилового эфира 2,6-диметил-3,5-диэ- токсикарбонил-1,4-дигидроизоникотино- вой кислоты и таурина в присутствии три- этиламина в среде диметилформамида при 20°С с последукж ей обработкой раствором NaOH. Выход 85%, т.пл. 189°С (с разл,), брутто-ф-ла Ci6H23N2NaOa. Исследовани  соединени  показывают, что в концентрации 500 мкмоль/л оно ингибиру- ет первичную обратимую агрегацию тромбоцитов более чем на 50%. При этом действующие концентрации соединени  в 30 раз меньше по сравнению с таурином. Остра  токсичность ЛДзо 1500 мг/кг. 1 табл. (Л С

Description

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты формулы

C0NH-CH₂CH₂S0₃N_n С₂Н₅00Су1уС00С₂П₅

Н,С N СИ, н

обладающей антиагрегационной активностью в отношении тромбоцитов человека.

Целью изобретения является поиск в ряду замещенных 1,4-дигидропиридинов соединений, обладающих антиагрегационной активностью и низкой токсичностью.

П р и м е р 1.2-(2,6-Диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислота.

К раствору 9,2 г (0,020 моль) пентафторфенилового эфира 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидроизоникотиновой кислоты в 60 ton ДМФА добавляют 6.3 мл (0,045 моль) триэтиламина и 3,1 г (0,025 моль) таурина. Суспензию перемешивают при комнатной температуре 48 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат упаривают

1685934 А1 в вакууме. Остаток растворяют в 100 мл хлороформа и обрабатывают 70 мл 3%-ного раствора карбоната натрия (ИагСОз). Водный слой отделяют, промывают 50 мл хлороформа и разбавляют 400 мл дистиллированной воды. Водный раствор подкисляют 5%-ной соляной кислотой (HCI) до pH 1, выпавшее масло дважды экстрагируют 100 мл хлороформа, хлороформный слой отделяют и промывают 50 мл дистиллированной воды. Хлороформный раствор упаривают в вакууме и остаток кристаллизуют из смеси уксусной кислоты и воды. После высушивания в вакууме над гидроокисью натрия (NaOH) получают светло-желтый мелкокристаллический продукт.

Выход 2 -(2,6-ди м етил-3,5-диэто кс и ка рбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты 5,5 г (68%), т.пл. > 150°С (разл.).

Найдено, %: С 47,3; Н 6,3; N 7,2. C16H24M2O8S.

Вычислено, %; С 47,5; Н 6,0; N 6,9.

ПМР-спектр (ДМСО-бб). (5; 1,18 (6Н, т„

I = 7,0 Гц, СНз~3,5-сложноэфирных заместителей); 2,18 (6Н, с., 2,6/СНз); 2,42 (2Н, исках.т. частично перекрывающийся с сигналом ДМСО, I = 6.8 Гц, - CH2SO2): 3,21 (2Н, исках, кв., частично перекрывающийся с сигналом Н2О, I = 6,8 Гц, ϊ 1ЧСНг -); 4,05 (4Н, кв., I =7,0 Гц, СН2~3,5-сложноэфирных заместителей); 4,29 (1Н, с., 4-н); 7,28 (1Н, т„ I = 5,8 Гц, - CONH-); 8,72 (1Н, с„ 1-NH); 11,25-12,13 (м.д., 1Н, шир. полоса, SO₃H).

П р и м е р 2. Натриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтокс икарбонил- 1,4-ди гидропиридин-4-карбоксамидо)этансульфокис~ лоты.

К раствору 4,0 г (0,0101моль)2-(2,6-диметил-3,5-диэтокси карбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты в 30 мл этанола при перемешивании добавляют 1н. раствор NaOH до pH 7. Реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси этанола и хлороформа (1:3).

, Выход натриевой соли 2-(2,6-диметил.3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты

3,6 г (85%), т.пл. 189°С (разл.).

Найдено, %: С 44,3: Н 5.2; N 6,3. С1бН2з№№ОзЗ

Вычислено, %: С 45,1; Н 5,4; N 6,6.

ПМР-спектр (ДМСО-de), <5; 1,20(6Н,т„ I = 7,0 Гц, СНз - 3,5-сложноэфирных заместителей); 2,19 (6Н, с., 2,6-СНз); 2,46 (2Н, исках, т.., частично перекрывающийся с сигналом DMCO, I = 6.8 Гц, -CH2SO2); 3,16 (2Н, исках.кв., частично перекрывающийся с сигналом Н2О, I = 6,8 Гц, > NCH2-); 4.04 (4Н, кв., I = 7,0 Гц, СНг-3,5-сложноэфирных заместителей); 4,29 (1Н, с., 4-н); 7,28 (1 Н., т.,

I = 5,5 Гц, - CONH-); 8,22 (м.д., 1Н, с„ 1-NH).

ПримерЗ. Исследование действия натриевой соли 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4~карбоксамидо) этансульфокислоты на агрегацию тромбоцитов человека и на активность Са²⁺ . и Мд²⁺ АТФазы проведено в сравнении с природным метаболитом-таурином (2-аминоэтансульфокислота) и блихайшим структурным аналогом - динатриевой солью

2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4дигидропиридин-4-карбоксамидо) глутаровой кислоты (соединение II).

В опытах используют кровь здоровых доноров в возрасте 25-40 лет, не получавших фармакологических препаратов. Кровь смешивают с 1 /10 объема 3,8%-но'го раствора цитрата натрия и центрифугируют 10 мин при 140 g Xmln для получения обогащенной тромбоцитами плазмы. Последнюю центрифугируют при 1100 g/min в течение 15 мин, получая обедненную тробмоцитами плазму. Все операции проводят всиликонированной посуде. Количество тромбоцитов подсчитывают в. фазово-контрастном микроскопе. Агрегацию изучают нефелометрическим методом, используя агрегометр ФРМ-1 с термостатированной кюветой и магнитной мешалкой. Контролем слухит обедненная тромбоцитами плазма. Объем исследовавшейся плазмы ~

1,3 мл. Индукцию агрегации производят введением в плазму 50-150 мкл раствора АДФ в концентрации 2,0-3,5 мкмоль/л. Изменение светопропускания плазмы под действием индуктора в отсутствии исследовавших соединений принимают за 100%.

Активность Са²⁺Мд²⁺ АТФазы тромбоцитов определяют по приросту неорганического фосфора, отщепившегося от АТФ в оптимальных условиях. Инкубационная среда определенная Са²⁺Мд²* АТФазной активности содерхит, ммоль/л: АТФ 2,5; МдС1г 5,0; уабаин 0,15; ЭГТА 1,0; >рис-|{С1 23,0, pH 7,5. Инкубацию проводят 20 мин при 37°С.

Соединение (I) в концентрации 500 мкмоль/л существенно тормозит способность тромбоцитов к формированию агрегатов, причем, действие соединения (I) в основном затрагивает фазу первичной обратимой агрегации, которая ингибируется более чем на 50% (таблица). Следствием этого является замедление в 1,5 раза реакции высвобождения, В присутствии соеди5 нения (I) по данным микроскопического исследования уменьшается количество тромбоцитов в агрегатах. Об этом же свидетельствует снижение осцилляций на кривых агрегации. При использовании по- 5 роговых концентраций АДФ соединение (I) вызывает снижение максимальной агрегации на 52%. Действующие концентрации соединения (I) в 30 раз ниже по сравнению с таурином. 1(

Соединение (I) обладает так же, как и таурин активирующим эффектом в соотношении Са²⁺Мд²⁺ АТФазы. Это свидетельствует о сходстве молекулярного механизма действия этих веществ на активацию тром- 1Е боцитов. Стимуляция Са²⁺Мд²⁺ АТФазы тромбоцитов соединением (I) до 70% от базальной активности имеет место при его концентрации на порядок ниже концентрации таурина. 2(

Соединение (I) не влияет на свертываемость крови при травмах, что свидетельствует об отсутствии действия на вторичную фазу агрегации.

Соединение (I) является малотоксич- 25 ным, ЛДбо при внутрибрюшинном введении мышам составляет 1500 мг/кг.

Динатриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4карбоксамидо) глутаровой кислоты (соеди- 30 нение II) практически не влияет на агрегацию и Са²⁺Мд²⁺ АТФазную активность тромбоцитов в концентрации 0,5-2 ммоль/л.

Таким образом, особенностью антиагрегационного эффекта соединения (I) является его селективное действие на фазу первичной обратимой агрегации тромбоцитов в отличие от известных соединений с антиагрегантными свойствами (ацетилсалициловая кислота, антагонисты кальция), снижающих в основном скорость вторичной необратимой фазы агрегации. Это указывает на перспективность использования соединения (I) в практической медицине для профилактики заболеваний и синдромов, сопровождающихся гиперреактивностью тромбоцитов. Отсутствие влияния на вторичную фазу агрегации позволит избежать ряд осложнений, возникающих при использовании других антиагрегантов, например геморрагии, при применении ацетилсалициловой кислоты.

Claims (1)

1. Формула изобретения

   Натриевая соль 2-(2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин-4-карбоксамидо) этансульфокислоты формулы _HCnNH-CH,CH₂S0₃Nn .

   C₂H₅00COVc00C,H.

   II Т ^{z J}

   Н₃сЛг Cll₃

   Η обладающая антиагрегационной активностью.

   Соединение Концентрация, ммоль/л Первичная агрегация, % от контроля Скорость первичной агрегации, % от контроля Реакция высвобождения, % от контроля Стимуляция Са²⁺ Мд²⁺ АТФазы, % от базальной активности 1 0,5 48,8 ±11,9 51,7 ±7,9 155,0 ±23,6 23-70 II 1,0 100 100 100 0 Таурин 15,0 60,1 ±6,3 72,6 ±8,1 129.4 ±9,7 20-45 ,