SU1631067A1 - Способ получени докозагексаеновой, эйкозапентаеновой и арахидоновой кислот или их смеси - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к получению жиров и масел, в частности жирных кислот. Дл  получени  эйко- затетраеиовой (арахидоновой)s эйко- запентаеновой и докозагексаеновой кислот на смесь жирных кислот или их концентра, полученный из печени рыб или животных, после перевода в калиевые соли действуют 0,5-6,5 кратным избытком.йода в присутствии иодида и карбоната кали  в спирте или диок- сане дл  получени  иод-лактонов. Полученные иод-лактоиы после оттитро- вывани  избытка иода гипосульфатом натри  экстрагируют этилацетатом или другим малопол рным растворителем из щелочной среды. Растворитель отгон ют , добавл ют гексан, полученный раствор промывают раствором карбоната натри  или кали  в водном спирте. Затем йод-лактоны обрабатывают в растворе ацетонитрила триметилхлор- шта йодсилана дл  перевода в жирные кислоты. После удалени  избытка йода жирные кислоты экстрагируют гексаном или его смесью с эфиром или этил- ацетатом. После отгонки растворител  получают концентрат жирных полинена2 сыщенных кислот. Дл  получени  докозагексаеновой кислоты используют йод в количестве 0,5-1,2 эквивалента, врем  реакции до 15 мин. Йод-лактоны могут быть также обработаны щелочью. При хроматографировании на колонке с силикагелем выдел ют йод-лактон докозагексаеновой кислоты, Йод-лактон этой кислоты может быть получен также при обработке смеси йод-лактонов 0,5-1,0 эквивалента триметилйодсила- на на эквивалент йод-лактон  эйкоза- пентаеновой кислоты. Эйкозапентаено- вую кислоту можно выделить экстракцией после отделени  йод-лактона докозагексаеновой кислоты. Так же может быть выделена арахидонова  кислота. Способ выделени  кислот основан на разной скорости лактонизации и прочности цикла йод-лактона. Реакцию провод т при температуре 0-25°С, врем  реакции 3-300 мин. Содержание в концентрате эйкозапентаеновой кислоты 52%, докозагексаеновой - 46%, выход соответственно 51,9 и 51,4%. Из концентрата может быть получен метиловый эфир докозагексаеновой кислоты с выходом 60,5-62,7% и чистотой 98,1- 98,2%. Выход из рыбьего жира эйкозапентаеновой кислоты 58,2-65,6% с чистотой 95,3-96,2%, докозагексаеновой - 62,3% с чистотой 96,3%, Выход арахидоновой кислоты из жира печени крысы 50% (на исходное количество в жире) с чистотой 98,2%. Выход этиловых эфиров эйкозапептаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира 61,8% с чистотой 98,7% и 63,4% с чистотой 97,6% соответственно. 5 з.п. Л-лы. S СО OS | OKKiSb

Description

Изобретение относитс  к получению /киров и маселs в частности жирных кислот.

Полиеновые жирные кислоты: эйкоза- тетраенова  (арахидонова ), эйкоза- пентаенова  и докозагексаенова   вл ютс  биологически активными соединени ми ,, используемыми в медицине„

Способ  вл етс  простым, позвол ет сократить врем  процесса и увеличить его селективность.

Способ осуществл ют следующим образом .

На смесь жирных кислот, полученных омылением рыбьего жира, например , иваси,или печени крысы, или концентрат кислот действуют после перевода в калиевые соли 0,5-6,5-кратным избытком йода в присутствии йодида и гидрокарбоната кали  в спирте, диок- или тетрагидрофуране дл  полу- йод-лактонов „ Полученные йод- актоны после оттнтровывани  избытка иола гипосульфитом натри  экстрагируют этиладетатом или другим малопол рным растворителем из щелочной среды, Растворитель отгон ют, добавл ют гексан, полученный раствор промывают раствором карбоната натри  или кали  в водном спирте. Йод-лак- тоны обрабатывают в растворе аце- тонитрила триметилхлор- или йодсила- на дл  перевода в жирные кислоты. После удалени  избытка йода жирные кислоты экстрагируют гексаном или его смесью с эфиром или этилацетатом После отгонки растворител  получают концентрат полиненасыщенных жирных кислот.

Индивидуальные кислоты получают следующим способом.

1. Докозагексаенова  кислота, 1.1. Реакцию йод-лактонизации провод т при содержании йода в смеси в количестве 0,5-1,2 эквивалента от стехиометрии , в расчете на количество докозагексаеновой кислоты. Врем  реакции ограничиваетс  1-15 мин. Далее проделывают вышеописанные операции.

1,2, Смесь лактонов полиеновых кислот после реакции йод-лактонизации подвергают действию щелочного агента до перевода йод лактона эйко- запентаеновой в более пол рное соединение , которое эффективно отдел ют от йод-лактона докозагексаеновой кислоты хроматографическими метода

ми. После этого йод-лактон par срывают обычным способом.

Claims (8)

1.3. Раскрытие лактонов привод т при содержании триметилйодсилана в смеси в количестве 0,5-1 эквивалент от стехиометрии в расчете на количество йод1 лактпна эйко апентаеко вой кислоты, В р&зультлге этого йод- лактон докозагексаеновой кислоты

практически остаетс  не раскрытым. Его выдел ют и раскрывают обычным способом„

Может быть применена комбинаци 

с этих вариантов,

2. Эйкозапептаенова  кислота, 2,1. Мирные кислоты, не вступающие в реакцию йод-лактонизации по п. 1.18 выдел ют и подвергают повторной йод- лактонизации по описанному способу.

2,2. Пол рное соединение йод-лак- тона эйкозапентаеновой кислоты по п, 1.2 раскрывают в кислоты обычным способом,

5 2,3, Водно-органический раствор-, содержащий соль эйкозапентаеновой кислоты, полученной после выделени  из смеси йод-лактона докозагексаеновой кислоты по п„ 1,3, подкисл ют.

0

0

5

5

экстрагируют органическими растворител ми , органическую фазу отдел ют, упаривают,

3, Арахидонова  кислота. Традиционным источником арахидоновой кислоты  вл ютс  внутренние органы животных , в липидах которых она содержитс  нар ду с докозагексаеновой кислотой Поскольку арахидонова  кислота имеет ту же скорость образовани  йод-лактонов, что и эйкозапен- таснова , то способы ее выделени  остаютс  такими, как и дл  эйкозапентаеновой кислоты.

Все названные кислоты могут быть также получены при раделении смеси йод-лактонов колоночной хроматографией на сорбенте с дальнейшим индивидуальным раскрытием каждого йод- лактона .

Способ основан на том, что из всех кислот смеси только три указанные кислоты дают иод-лактоны. В конечном продукте количество жирной кислоты соответствует количеству йод- лактона . При повышении температуры от О до 20°С скорость реакции йод-лак- . тонизации увеличиваетс  примерно в Ю раз, При более высокой температуре снижаетс  выход продукта, при по0

5

нижении возрастает врем  реакции. Скорость образовани  йод-лактонов различна дл  разных пслиеновых кислот . Йод-лактон докозагексаеновой кислоты образуетс  в 1,5-20 раз быстрее , чем йод-лактон эйкозапентаеново кислоты. Количество йода на моль кислоты определ ет состав конечной смеси йод-лактонов. При эквивалентном соотношении образуетс  преимущественно йод-лактон докозагексаеновой кислоты, при избытке йода образуютс  и другие йод-лактоны и лактоны докозагексаеновой кислоты.

Замедл ет реакцию йодистый капни, но одновременно повышает выход. При увеличении соотношени  йодистый калий/йод от 0 до 2 скорость реакции йод-лактонизации уменьшаетс  В найденных услови х докозагексаено- ва  кислота может быть получена с чистотой выше 95%.

Реакци  раскрыти  йод-лактонов быстрее всего проходит дл  эйкозапентаеновой кислоты, поэтому при недостатке триметилйодсилана именно этот лактон раскрываетс  в первую очередь что позвол ет получить эйкозапентае- новую кислоту 90-95% чистоты.

Реакции образовани  йод-лактонов арахкдоновой и тйкпзапентаеновой кислот способствуют спирты и диок- сан, тетрагидросЬуран способствует образованию йод-лактонов докотагексае- новой кислоты.

Более высока  устойчивость йод- л акт она докозагексар.новой кислоты по сравнению с другими йод-лактонами позвол ет их разделить хроматогра- фическим методом. С этой целью используют слабощелочной силикагель, более щелочные сорбенты разрушают йод-лактоны эйкозапентаеновой кислоты . При выдержке в щелочной среде йод-лактон эйкозапентаеновой кислоты переходит в более пол рный йод-гид- рин, который лучше отдел етс  от йод- лактона докозагексаеновой кислоты, что позвол ет получить чистую эйкоза- пентаеновую кислоту после реакции с триметилйодсиланом.

Пример 1. Получение концентрата эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира.

Жирногислотный состав рыбьего жира, %: эйкозапентаенова  кислота 19, докозагексаенова  кислота 17.

067

10 г смеси жирных кислот, полученных по стандартной методике, раствор ют при 0 С и перемешивании в 75 мл 16%-ного раствора гилроклрбоката :а ли , добавл ют 20 мл метанола.

Раствор охлаждают до +5°С, затем припивают 120 мл 5%-ного раствора йода в метаноле (по отношению .,. к сумме количества зйкоэапентаено- вой и докозагексаеновой кислот количество йода берут в 2 раза больше, чем требуетс  по стехиометрии),

Иод-лактонизацию провод т при ; 10 С в течение 3 мин при перемешиваНИИ .

I

После реакции йод, не вступающий в реакцию, оттитровывают 40%-ным

0 раствором тиосульфата натри  до исчезновени  бурой окраски, Йод-лактоны из смеси экстрагируют этилаце- татом 2x100 мл, экстракты объедин ют и упаривают. Остаток перераство-

5 р ют в 50 мл гексана и дл  удалени  из смеси лактонов жирных кислот промывают 5%-ным карбонатом кали  в 20%-ном водном изопропаноле мл. Получают 3,7 г смеси йод-лактонов

о с содержанием йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,2% (выход - 71,7% в расчете на количество кислоты в исходной смеси) и йоц-ллктона докоза- гексаеноуой кислоты 45,1% (выход 72 5%)

/ i , J /о .

Смесь лактонов раствор ют в 55 мл сухого (безводного) ацетсннтрила. и приливают раствор 2,5 г триметилйодсилана (количество триметилйодсилана вз то в 1,5 раза большее от стехиометрии в расчете на количество йод- лактонов) в 25 мл безводного ацето- нитрила. Через 23 мин выделившийс  йод оттитровывают 4 %-ным раствором тиосульфата натри  до исчезновени  бурой окраски, затем к смеси добавл - ; ют 70 мл воды, экстрагируют свободные . жирные кислоты смесью гексан-этилС

5

ацетат 3:1 (по объему) мл.

0

Выход 1,9 г смеси жирных кислот с содержанием - эйкозапентаеновой кислоты 52%, (51,9% в расчете на ис- ходное количество), докозагексаеновой кислоты 46%, (51,4%).

Контроль за ходом реакций осуществл ют тонкослойной и газожидкостной хроматографией.

Тонкослойную хроматографию как качественный метод анализа провод т на пластинах 6x6 см с закрепленным слоем силикагел  КСК-2 с размером частиц 3-7 мкмо Пробу липида в количестве 0,1-0,5 мг нанос т на пластинку и хроматографируют в системе бен- зол-этилацетат-уксусна  кислота, 95:5:0,5 (по объему). После этого пластинку высушивают и опрыскивают 5%-ной серной кислотой в эталоне (по объему) и нагревают 5 мин при 100°С Под-лактоны арахидоновой и эйкоза- пентаеновой кислот (Rf 0,5), йод- лактон докозагексаеновой кислоты (Rf 0,6), продукт щелочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты (Rf 0,4), жирные кислоты (Rf 0,15) про вл ютс  в виде черных п тен на белом фоне силикагел . Жирнокислотный состав полученных продуктов провод т газожидкостной хроматографией„

Пример 2, Получение метилового эфира высокочистой докозагексаеновой кислоты из концентрата по- лиеновых кислот.

Жирнокислын состав концентрата, % эйкозапентаенова  кислота 22, доко- загексаенова  кислота 42.

10 г концентрата полиеновых кислот , полученного по ранее указанному методу, раствор ют при перемешивании в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната кали  при 40°С, добавл ют 20 мл этанола и 4,5 г йодида кали . Раствор охлаждают до +5 С и приливают 120 мл 2,5%-ного раствора йода в этаноле (количество йода рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты, от стехиометрического этот показатель равен 0,92; мол рное соотношение в реакции йодистого кали  и йода равно 2).

Перемешивают при температуре 10 С 5 ч.

По окончании реакции йод оттитро- вывают 40%-ным раствором тиосульфата натри  до исчезновени  бурой окраски . Йод-лактоны экстрагируют бензолом , 3x10 мл, экстракты объедин ют упаривают. Остаток раствор ют в 100 мл гексана и промывают дл  удалени  присутствующих кислот 5%-ным раствором карбоната натри  в водном пропаноле, 2x50 мл.

Получают 4,7 г смеси йод-лактонов с содержанием йод-лактона эйкозапен

,

:

т м

6310678

таеновой кислоты 1,0/ и йод--лак г - ;,.: докозагексаеновой кислоты 9.4,3% ход 79,5% от теоретически ного).

Смесь йод-лактонов раствор ют в 80 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 3 г триметилйодсшта- на в 30 мл ацетонитрила (количество триметилйодсклана вз то к 1 , 5 раза больше требуемого по стехиометрии на сумму йод-лактонов эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот). Через 20 мин непрореагированный йод оттчт- с ровывают 40%-ным раствором тиосульфата натри  до исчезновени  бурой окраски. Жирные кислоты экстрагируют гексаном, 3x35 мл, экстракты объедин ют и упаривают. К остатку приливают 100 мл 5%-ного раствора сол ной

10

25

30

35

20

кислоты в метаноле и выдерживают

15 мин при 50 С. После охлаждени  до +20°С к смеси добавл ют 100 мл воды и экстрагируют метиловые эфиры жирных кислот гексанолом мл. После упаривани  получают 2,8 г смеси метиловых эфиров жирных кислот с содержанием метилового эфира э.йко- запентаеновой кислоты 1,0%, метилового эфира докозагексаеновой кислоты 98,1% (выход 62,7% в расчете на исходное количество).

Пример

3. Получение высокочистого метилового эфира докозагексаеновой кислоты из концентрата полиеновых кислот. Жирнокислотиый состав концентрата аналогичен приме - РУ 2.

10 г концентрата полиеновых кислот раствор ют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната кали , добавл ют 20 мл этанола и 1 г йодистого кали . Рас.твор охлаждают до 5 С, после чего приливают 120 мл 2,5%-ного раствора д йода в этаноле (количество йода рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты, от стехиометрического этот показатель равен 0S92, мол рное соотношение в реакции йодистого кали  и йода равно 0,44) при перемешивании при температуре Ю°С 5 мин.

Далее йод-лактоны выдел ют из смеси как в примере 2.

Получают 4Э6 г смеси йод-лактонов

40

50

с содержанием йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 0,9% и йод-лактона докозагексаеновой кислоты (выход 77,8% в расчете на исходное количество кислоты),

Далее йод-лактоны раскрывают в метиловые эфиры полиеновых кислот как в примере 2 с тем же соотношением реагентов.

Получают 2,7 г смеси метиловых эфиров полиеновых кислот с содержанием метилового эфира эйкозалента-- еновой кислоты 0,9% и метилового эфира докозагексаеновой кислоты 98,2%.

Выход 60,5% (в расчете на исходно количество кислоты).

Пример

4. Получение эйкоза- пентаеновой и докозагексаеновой кислот из рыбьего жира. Состав используемого рыбьего жира как в примере 1.

10 г смеси жирных кислот, полученных , как описано ранее, раствор ют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната кали , добавл ют 20 мл про- панола и 9,6 г йодида кали . Раствор охлаждают до 5 С и приливают 120 мл 12%-ного раствора йода в пропаноле (количество йода вз то в 4,9 раза большее, чем требуетс  по стехиометрии на количество эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот; мол рное соотношение йодистого кали  и : юда равно 1) и перемешивают при 0°С 5 ч.

I

После окончани  реакции йод оттитровывают 40%-ным раствором тиосульфата натри  до исчезновени  бурой окраски , добавл ют 100 мл пропанола и 40 мл 4-мол рного раствора трис-(ок- симетил)-аминометапа. Смесь выдерживают 30 мин при 20 С, подкисл ют концентрированной сол ной кислотой до pll 7,0 и экстрагируют липиды хлороформом , мл, объединенные экстракты упаривают. Остаток раствор ют в 50 мл гексана, дл  удалени  жирных кислот промывают 50 мл 10%-ного раствора гидрокарбоната кали  в 40%-ном водном этаноле, затем гекса- новый слой упаривают. Далее продукты раздел ют колоночной хроматографией на силикагеле КСК-2. Колонка - диаметр 3 см, длина 28 см, сорбента 100 г. Раздел емую смесь нанос т на колонку и элюируют вначале чистым г бензолом до полного выхода йод-лак- тона докозагексаеновой кислоты (500 мл), затем смесью бензол-этил- ацетат, 19:1 (по объему), до полного выхода продукта щелочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты (300 мл). Элюаты в обоих случа х объедин ют и упаривают.

0

5

Получают из 1-го злюата ноп-лэктги1 докозагексаеновой кислоты, 2,0 г чистота 96,3%5 выход 81,8% (в расчете , на исходнпе количество кислоты) из 2-го элюата - продукт щелочной обработки йод-лактона эйкозапектаеновой кислоты, 2S1 г, чистота 95,6%, выход 74,5%.

Под-лактон докозагексаеновой кислоты раствор ют в 40 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,3 г триметилнодсилана в 13 мл без-- водного ацетонитрила (количество три- метилподсилана, вз тое на количество йод-лактона, в 1,5 раза больше стехи- ометрического. Через 20 мин непрореа- гировавшнй йод оттитровмвают 40%-ным раствором тиосульфата натри  до исчез- Q новени  бурой окраски добавл ют 50 50 мл воды и экстрагируют смесью гексан-диэтиловын эфир, 1:1 (по объему ), 3x40 мл. Получают 1,1 г смеси жирных кислот с содержанием докозагексаеновой кислоты 96,5Т, выход 62,4% (в расчете на исходное количество кислоты в сырье)„

Продукт щелочной обработки йод- лактона эйкозапентаеновой кислоты раствор ют в 35 мл безводного ацето5

0

5

0

5

0

5

нитрила и прибавл ют суспензию 4 г безводного йодида натри  в 25 мл ацетонитрила . После полного растворени  йодида натри  к смеси добавл ют 1,3 мл тр метилхлорсилана и перемешивают 1 ч при 23°С (количество триметилхлорснлана, вз тое на количество продукта полочной обработки йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты , больше в 2,045 раза стехиометри- ческого). Затем к смеси добавл ют 60 мл воды, непрореагироваший йод от- тйтровывают 40%-ным раствором тио-. сульфата натри  до исчезновени  бурой окраски и экстрагируют кислоты ди- этиловым эфиром, 3x50 мл.Получают 1,3 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 95,9% (выход 65,6% в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты в исходном сырье).

Пример

5. Получение докозагексаеновой кислоты из рыбьего жира. Реакци  йод-лактонизации проводитс  как в примере 4, но в качестве растворител  используют изопропанол - количество йода, вз тое на количество эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот, большее в 6,2 раза

1

от стехиометрического; соотношение йодида кали  и йода равно 1. По окончании реакции йод нейтрализуют 40%- ным раствором тиосульфата натри , экстрагируют йод-лактоны диэтиловым эфиром, 2x100 мл, объединенные экстракты упаривают. Остаток раствор ют в 50 мл гекс на и промывают 5%-ным раствором гидрокарбоната натри  в 50%-ном водном этаноле, 2x50 мл.

Получают 4,2 г смеси йод-лактонов с содержанием йод-лактона эйкозапен- таеновой кислоты 50% (выход 78%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 45%, выход 80%.

Смесь йод-лактонов раствор ют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,2 г триметилйодсила- на в 12 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчи- тано на количество эйкозапентаеновой кислоты и превьшает стехиометричес- ии в 1,2 раза). Через 5 мин йод от- тптровывают 40%-ным раствором тио- с , 1ьфата натри , добавл ют 70 мл воды и экстрагируют липиды из смеси - этилацетатом, 2x70 мл, экстракты объедин ют и упаривают. Остаток раствор ют в 50 мл гексана и промывают дл  удалени  жирных кислот 5%-ным раствором гидрокарбоната кали  в 50%-ном водном этаноле, 2x50 мл. Гек- сановый слой упаривают, остаток раствор ют в 30 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,0 г триметилйодсилана в 10 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество докозагексаеновой кислоты и превышает стехиометрическое в 1,2 раза). Через 20 мин йод оттитровывают 40%- ным раствором тиосульфата натри , добавл ют 40 мл воды и экстрагируют

10

Получают 4,1 г смеси йод-лактонов с содаржанием - йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,6% (выход 80,1%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 46,1% (выход - 80,3%).

Смесь лактонов раствор ют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 0,9 г триметплйодстага в 9 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты и составл ет от стехиометрического 0,9). Через 2 мин непрореагировавший йод нейтрализуют 40%-ным раствором тиосульфата натри , добавл ют 60 мл воды и экстрагируют смесью гексан-этилацетат, 3:1 (по объему), 3x50 мл. Экстракты объедин ют и упаривают. Остаток раствор ют в 50 мл гексана и промывают 5%-ным раствором карбоната кали  в 30%-ном водном этаноле, мл. Объединенные водные слои подкисл ют сол ной кислотой до рН 2 и экстра15

20

25

30

35

40

гируют гексаном, мл.

Получают 1,15 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 96,2% (выход - 58,2%) в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты, содержащейс  в исходном сырье.

Пример 7. Получение арахи- доновой кислоты из печени крысы. Жир- нокислотный состав липидов печени крысы, %: арахидонова  кислота 17, докозагексаенова  кислота 7.

10 г жирных кислот печени крысы, полученных тем же способом, что и кислоты рыбьего жира, раствор ют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната кали , затем добавл ют 20 мл диок- сана и 0,9 г йодида кали . Затем к смеси приливают раствор 0,6 г йода в

жирные кислоты смесью гексан-диэтило- 45 0 мл диоксана (количество йода расвый эфир, 1:1 (по объему), 3x30 мл, экстракты объедин ют и упаривают.

Получают 1,1 г смеси жирных кислот с содержанием докозагексаеновой кислоты 96,3% (выход - 62,3% в расчете на количество докозагексаеновой кислоты в исходном сырье).

Пример

6. Получение эйко-- запентаеновой кислоты из рыбьего жира . Услови  реакции йод-лактонизации и выделени  йод-лактонов как в примере 5 (соотношени  реагентов те же самые ) .

50

55

считано на количество докозагексаеновой кислоты и больше стехиометрического в 1,1 раза; соотношение- йодистого кали  и йода равно 2) и перемешивают при температуре 25°С 5 ч.

Реакционную смесь экстрагируют гексаном, 3х70 мл, гексановые экстракты отдел ют (экстракт содержит почти исключительно йод-лактон докозагексаеновой кислоты), а к водному слою добавл ют последовательно 3,5 г йодистого кали , 100 мл диоксана и 7 г йода (количество йода рассчита 10

106712

Получают 4,1 г смеси йод-лактонов с содаржанием - йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты 52,6% (выход 80,1%), йод-лактона докозагексаеновой кислоты 46,1% (выход - 80,3%).

Смесь лактонов раствор ют в 60 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 0,9 г триметплйодстага в 9 мл безводного ацетонитрила (количество триметилйодсилана рассчитано на количество йод-лактона эйкозапентаеновой кислоты и составл ет от стехиометрического 0,9). Через 2 мин непрореагировавший йод нейтрализуют 40%-ным раствором тиосульфата натри , добавл ют 60 мл воды и экстрагируют смесью гексан-этилацетат, 3:1 (по объему), 3x50 мл. Экстракты объедин ют и упаривают. Остаток раствор ют в 50 мл гексана и промывают 5%-ным раствором карбоната кали  в 30%-ном водном этаноле, мл. Объединенные водные слои подкисл ют сол ной кислотой до рН 2 и экстра15

20

25

0

5

0

гируют гексаном, мл.

Получают 1,15 г смеси жирных кислот с содержанием эйкозапентаеновой кислоты 96,2% (выход - 58,2%) в расчете на количество эйкозапентаеновой кислоты, содержащейс  в исходном сырье.

Пример

7. Получение арахи- доновой кислоты из печени крысы. Жир- нокислотный состав липидов печени крысы, %: арахидонова  кислота 17, докозагексаенова  кислота 7.

10 г жирных кислот печени крысы, полученных тем же способом, что и кислоты рыбьего жира, раствор ют в 75 мл 16%-ного раствора гидрокарбоната кали , затем добавл ют 20 мл диок- сана и 0,9 г йодида кали . Затем к смеси приливают раствор 0,6 г йода в

0

5

считано на количество докозагексаеновой кислоты и больше стехиометрического в 1,1 раза; соотношение- йодистого кали  и йода равно 2) и перемешивают при температуре 25°С 5 ч.

Реакционную смесь экстрагируют гексаном, 3х70 мл, гексановые экстракты отдел ют (экстракт содержит почти исключительно йод-лактон докозагексаеновой кислоты), а к водному слою добавл ют последовательно 3,5 г йодистого кали , 100 мл диоксана и 7 г йода (количество йода рассчитано на количество арахидоновои кислоты , содержащейс  в исходном сырье, больше стехиометрического в 5 раз: мол рное соотношение йодистого кг.-,-и йода равно 0,9) и перемешивают при 10°С 2 ч.

По окончании реакции непрореаги™ ровавший йод оттитровывают 40%-нкм раствором тиосульфата натри , экстрагируют йод-лактоны смесью гексан- этилацетат, 4:1 (по объему), мл экстракты объедин ют и упаривают. Ос таток раствор ют в 50 мл гексана и дл  удалени  жирных кислот промывают 5%-ным раствором гидрокарбоната кали  в 70%-ном водном метаноле, мл.

Получают 2.0 г смеси йод-лакто-- нон с со/юржаннем йод-ллктопа арахг- доновой кислоты 37,6/, выход 72,8% (в расчете на количество арахидог.опо кислоты, содержащейс  п исходно;-; сырье) j йод-лактона докочг.гексае- новой кислоты 10,2%, чькод - ,

Смесь йод-лактонов раст.юр ют ы 30 мл безводного анетоннтри.ча и ппн- ливаюг раствор 0,1 г . Пс.к ;- лана   7 ми бегшоднсгг. ацстоллтргчн (количество трн.че пмодеил-чн;; г.г. - считано на кочпчосгво под-лак тп;;а арахидоновои кислоты и составл ет от стехиометрического 0,86), Через 3 мин йод оттитровывают 40%-пым раствором тиосульфата натри , приливают 50 мл воды и экстрагируют смесь хлороформом дл  извлечени  жирных кислот s 3x50 мл.

Получают 0,87 г смеси жирных кислот с содержанием арахндоновой кислоты 98,2%,выход - 50% (в расчете ла количество арахидоновои кислоты, содержащейс  в исходном сырье); доко- загексаеновой кислоты 1,3%, выход 1,3%.

Пример

8. Получение этилового эфира эйкозапентаеногзой п этилового эф::ра докозагексаеповой кислот. Жирнокислый состав рыбьего жира по примеру 1. Услови  реакции йод-лак- тонизации по пр:гмеру 4.

По окончании реакции йод нейтра- (лизуют раствором тиосульфата и йод- лактоны экстрагируют смесью гексан- диэтиловый эфир, 1:1 (по объему), мл. Экстракты объедин ют и упаривают . Остаток раствор ют в 50 мл гексана и промывают /г л   удалени  жирных кислот 10%-ным раствором

0

0

0

5

0

5

боната кали  в 50%-ном водном метаноле , M. I Затем гсксановый слон упаривают и ра-здел ют йод-лактоны колоночной хроматографией HP с.нлгткл- геле КС К-2 (размер частиц :;о шликер 4 - 100-250 ,) „ Колонка; диаметр 3,5 см. ллннс  30 см, Количество си- лик а гел  150 г. Элюнрующие системы: чистый бензол до полного выхода йод-лактона докозагексаеновон кислоты (800 мл)5 затем бензолзтилацетат, I 9: (по объему), до полного выхода мсд-лслк гона з нк о запей таен ов о и кислоты (400 мл).

Получают 2,3 г йод-лак тона эйко- запентаеновон кислоты, чистота 98,1 %., выход 83s8%j 1,9 г йод-лактсна доко- эагексаеновон кислоть;5 чистота 9758%; выход 80%,

од-ла: тслн эпкозапент.ченовой кис- лоть: раствор ют   30 мл безводного ацетонитрнла и при/киваю г раствор 0,95 г тпнметнлнодсилана в 9 мл безводного ацетоннтрнла (количество тримгтн.дйодс нлан;) , вз тое па количество йод-j -iктона йкозапентаеновой кислоты, составл ет 0,9 от стехиометрического ). 1герсз 3 мин под оттитро- .мг 40 o-Hbit- рлсЛ Вором тиосульфата , добавл ют 50 мл полы и жирные кислоты экстрагируют гексаном, 3f v30 ::, riKCTpaKTiii объедин ют п упаривают , Остлток раствор ют в 30 мл 5%-ного рас.тлорл хлористого водорода в абсолютном этаноле и выдерживают 15 мин при , После охлаждени  до 20 С доОа л ггт 40 мл воды и экстрагируют этиловый эфир зйкозапентаеновон кислоты смесью гексан-этилацетат, 4:1 (по объему), мл.

Получают 1,3 г этилового эфира эйкоэапентаеповой кислоты, чистота 98,7%, выход 61,8% (в расчете на количество кислоп, в сырье).

Под-лактон докозагексаеновой кислоты раствор ют в 30 мл безводного ацетонитрила и приливают раствор 1,0 г триметилнодсилана в 10 мл безводного ацетониттила (количество триметилйодсилан;, вз тое на количество йод-лактона докозагексаеновой кислоты, больше стехиометрического в 1,2 раза). Через 30 мин под оттитровывают 40%-ным раствором тиосульфата натри , добавл ют 50 мл воды и экстрагируют жирные кислоты гексаном , 3x30 мл„ Экстракты объедин ют и упаривают. Остаток раствор ют в

раствора хлористого в абсолютном этаноле и выi5 мин при 50 С. После ох- аждени  до 20°С добавл ют 50 мл воы и экстрагируют этиловый эфир до- озагексаеновой кислоты хлороформом, 60 мл о Хлороформные экстракты объеин ют и упаривают.

Получают is2 r этилового эфира окозагексасповой кислоты, чистота 7„6, выход 63 4% (в расчете на ко- чичество докозагексаеповой кислоты в сырье)„

Как видно из представленных примеров , способ приемлем дл  получени  тзысокочистых полиеновых кислот и их :со1Щ -Н7ватоВс Пртт осуществлении способа используютс  открытые законо- метности, резко сокращают врем  реакций и увеличивают эффективность способа,

Данный способ  вл етс  универсаль- С СГО ПОМОЩЬЮ МОЖНО НС ТОЛЬКО

--,-,-, тттть полис-новые жирные кислоты -5 . - Иродпых смессй5 но и разделить -. между собой При этом широко используютс  экстракционные методы как о лае гсхнологичныс в сравнении с колоночной хооматограЛией, Способ включает1 в себ  р д простых операций,, не требующих сложного аппаратурного оформлени , В то же врем  процесс не трудоемок.

л о р м у л а и э о б р е т е н и  

,. Способ получени  докозагексае- нсьой, эйчозапентаеновой и арахидо- нсвом : ислот или их смеси,, о т л и - ч а ю и и п с   тем, что смесь кислот высоконепредельного жира перевод т в калиевые соли действием гидрокарбоната кали , затем провод т обработку солей дл  получени  подлак- тонов йодом в количестве 0,5-6,5 моль на 1 моль кислоты в исходной смеси в присутствии йодида кали  в количестве 0-2 моль на 1 моль йода при перемешивании в течение 3-300 мин при температуре от 0 до 25 С в пол рном органическом растворителе, который выбирают из группы: метанол, этанол,

0

пропанол, изопроланол, гиокс н, тст- рагидрофуран, титрова иг избу тка выделившегос  йода гипосульфитом натри , экстракцию йод-лактонов непол рным растворителем, который выбирают из группы: бензол, гексан, диэтиловый эфирs хлороформ, этит- аиетат, отгонку раствор . лечие гексана к получе чо гу остатку его промывку раствором гицрокарбонат шти карбоната щелочного металла в водном 20-70л нсы спирте дл  удалени  непрореагировавших тирных кислот, перевод йод-лактонов в ттопиечовые кислоты: докозаг ексае} ов по3 эйкоза- пентаеновую и арахидононую обработкой триметилхлор- или триметилйодси- ланом в растворе в количестве 0,1-1,5 эквивалент-; на

1 эквивалент йод-лакточа, тиг ние выделившегос  йода, экстракцию из последней полиеновых кислот органическим растворителем и упарива- 5 ние растворител  в BaKvyMe,

2. Способ по п. 1, о т л и ч а - ю щ и и с   тем, что при получении смеси йод-лактонов эйкозапентаеповой и докозагексаеноаой кислот состноше- Q ние йод-жирные кислоты выбирают равным 1-6,5.

3„ Способ по п. 1, о т л и ч а - ю щ и и с   тем, что при получении йод-лактона докозагексаеновой кисло- 5 ты соотношение йод-кислота выбирают равным 0,5-1,2 н врем  перемешивани  3-15 мин.

- о Способ по п. 1, о т л к ч а - ю щ и и с   тем, что при получении о эйкозалентаеновоч кислоты 1 эквивалент эйкозапентаеновой кислоты обрабатывают 0,5-1 эквивалентом триметилхлор- или триметилйодсилана,

5,Способ по п, 1, о т л и ч а - 5 ю Щ н и с   тем, что разделение смеси кислот или их йод-лактонов провод т на слабощелочном силикагеле.

6.Способ по п, 1, отличающийс  тем, что при получении

Q йод-лактонов арахидоновой и эйкозапентаеновой кислот в качестве пол рного растворител  используют спирты и диокеан.