SU1527593A1 - Способ диагностики туберкулеза - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза. Цель изобретени  - повышение точности способа. Провод т забор крови у больных, выдел ют лимфоциты. Затем их смешивают с эритроцитарным фосфатидным туберкулезным диагностикумом, инкубируют и подсчитывают число розеткообразующих клеток, при количестве розеткообразующих клеток 20% и меньше диагностируют туберкулез. По сравнению с прототипом точность диагностики возрастала на 17,5%.

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при диагностике туберкулеза .

Цель изобретени  - повышение точности способа.

Способ осуществл ют следующим образом .

Дл  диагностики туберкулеза в качестве действующего начала в реакции розеткообразовани  используют фосфа- тидный антиген микобактерий туберкулеза , иммобилизованный на эритроцитах , при зтом в качестве диагностического признака учитьшают концентрацию В-розеткообразующих лимфоцитов (В-РОК), и при значении В-РОК не более 20% диагностируют туберкулез.

При постановке реакции розеткообразовани  с фосфатвдным зритроцитарным диагностикумом используют следующее соотношение ингредиентов реакционной смеси, мл: зритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза 2 в концентрации 1,5%;-комплемент 2; взвесь лимфоцитов 0,1; гемолитическа  сыворотка с титром 1/2000 2.

Пример 1. Больна  В. 26 лет поступила с подозрением на туберкулез гениталий. В анамнезе бесплодие, опсоменоре . В 16 лет оперирована по поводу разрыва кисты  ичника с рез- ко выраженным спаечным процессом в брюшной полости. Туберкулезом ранее не болела.

Обследование проведено по следующей схеме. 5 мл гепаринизированной крови из вены больной отстаивают 1 ч при комнатной температуре, после чего отсасывают лимфоциты. К осадку лимфоцитов приливают среду № 199 в количестве , равном 0,7 объема лейкоцитарного сло . Взвесь перемешивают. Параллельно развод т комплемент до- бавлен ем к 0,2 мл сыворотки крови белой мыши 1,8 мл физиологического раствора. Эритроцитарный фосфатидный диагностикум туберкулеза, представл ющий собой эритроциты барана, сен- сибилизированные фосфатидным антигеном микобактерий туберкулеза, развод т физиологическим раствором до 1,5%-ной взвеси. 2 мл этой взвеси смешивают с 2 мл гемолитической кро- личьей сыворотки в субагглютинирую- щей концентрации, вьщерживают при 37°С в течение 30 мин, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин. Осадок раствор ют в 2 мл среды 199, смешивают с 2 мл комплемента белой мьши, выдерживают в течение 30 мин при 37°С, дважды отмывают физиологическим раствором и центрифугируют в том же режиме.

Из осадка берут 0,1 мл эритроци- тон сенсибилизированных фосфатидным антигеном) , смешивают с 0,1 мл лимфоцитов обследуемой (в данной смеси со держитс  100 сенсибилизированных эритроцитов на 1 лимфоцит) и инкубируют 30 мин при 37°С. Далее в смес внос т 0,05 мл глютарового альдегида и 0,25 мл дистиллированной воды, пос ле чего центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин, сливают над- осадочную жидкость, добавл ют 0,5мл среды К 1 99 и готов т мазок дл  микроскопии с окраской по Романовскому.

Под микроскопом просматривают ро- зеткообразующие В-лимфоциты. Учитывают лимфоциты, присоединившие не менее 3 эритроцитов.

При обследовании предварительно устанавливают концентрацию лимфоцитов крови по клиническому анализу крови дл  определени  абсолютного содержани  розеткообразующих В-лимфо- цитов по общеупотребительной {мето- Дике.

В данном примере В-РОК 13%, что меньше граничного значени , равного 20%. Поэтому у обследуемой диагностируют туберкулез . Этот диагноз под- твержден клинико-рентгенологически. На рентгеновских снимках матки и прц датков - облитераци  и множественные обызвествленные лимфоузлы. Проба Коха с положительной очаговой реакцией .

Пример 2. Больна  Б,22 лет. При поступлении диагноз - туберкулезный спондилит по сничного отдела позвоночника, туберкулез легких.

Обследование провод т как в примере 1 .

В результате установлено В-РОК/ 8%, что меньше граничного значени  (20%) и позвол ет диагностировать туберкулез .

После курса химиоретапии и соответствующей подготовки больна  прооперирована . Произ.ведена абсцессото- ми , удаление диска. Диагноз подтвержден бактериологически и рентгенологически .

Пример 3. Донор С. 26 лет, был обследован на донорском пункте ЛПМИ. Обследование проведено как в примере 1.

У данного донора установлено В-РОК 29%, что больше граничного значени  (20%). Поэтому сделан вывод о том, что донор здоров, что подтверждаетс  данными его клинического обследовани  на донорском: пункте.

Использование предлагаемого способа позвол ет повысить точность способа . Так, веро тность правильного диагноза при обследовании 34 больных туберкулезом в предлагаемом способе составл ет 97,1%, тогда как в известном способе эта веро тность составл ет 80,6%. Статистический анализ подтверждает значимость отличий в точности сравниваемых способов при уровне значимости не более 5%, т.е. точность при использовании предлагаемого способа возрастает на 17,5%.

Определенность диагностики в предлагаемом способе характеризуетс  веро тностью отнесени  здорового лица к категории больных лишь 0,05, что вполне соответствует требовани м дл  статистически обоснованного применени  предлагаемого диагностического признака.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ диагностики туберкулеза, включающий забор крови, вьщеление лимфоцитов, инкубацию их с эритроци- тарным диагностикумом, подсчет розеткообразующих клеток, отличающийс  тем, что, с целью повьш1е- ни  точности способа, используют

   51527593

   эритроцитарный диагностикум с иммо-барана и после подсчета розеткообрабипиэацией фосфатвдного антигена ми-зующих клеток диагностируют туберкукобактерий туберкулеза на эритроцитах лез по снижению их от 20% и менее.