SU1515108A1 - Способ определени содержани воды в образцах гемоглобина - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к биохимии и может быть использовано применено в медицинской промышленности. Цель изобретени  - упрощение процесса определени  содержани  воды в образцах гемоглобина. Навеску гемоглобина раствор ют, измер ют спектрометрическую концентрацию белка в полученном растворе и по разности массовой и спектрофотометрической концентраций, отнесенной к массовой концентрации, оценивают содержание воды в исходном образце гемоглобина.

Description

Изобретение может найти применение в медицинской промышленности и при научньтх исследовани х.

Цель изобретени  - упрощение процесса .

Способ заключаетс  в том, что раствор белка спектрофотометрируют на требуемой длине волны, затем по формуле или калибровочному графику рассчитывают истинную концентрацию белка в растворе (например, в процентах), Из веса образца и объема раствора рассчитьгоают его процентную концентрацию , . котора  превышает концентрацию , определенную с помощью спектрофотометра , на вес вход щей в состав кристаллов белка воды. Разность концентраций , отнесенна  к концентрации по весу, представл ет собой количество (г) воды, приход щеес  на 1 г гемоглобина .

Предложенный способ характеризуетс  следующей последовательностью операций:

1)вз тие навески белкового препарата;

2)растворение навески в измеренном объеме жидкости;

3)расчет концентрации (%) полученного раствора;

4)измерение поглощени  исследуемого раствора на длине волны, соответствующей пику поглощени ;

5)расчет истинной концентрации белка по формуле

ел ел

о

00

С(%)

-1

М 10

(1)

где А,- поглощение исследуемого раствора;

- мол рный коэффициент поглощени  раствора;

1 - длина пути света в растворе; М - вес мол  белка; 6) расчет влажности исходного препарата белка по формуле

Св-Сс

(2)

где Cg - концентраци  раствора по весу; CQ - концентраци  раствора по

спектрофотометрическим данным .

Проиллюстрируем способ на примере кристаллического образца человеческого гемоглобина (Met НЪ) -12,3 мг НЬ раствор ют D 10 мМ буферного раствора 0,05 М трис-НС1, рП 6,3. Концентраци  полученного раствора составл ет (из весовых данных) 0,123%,

Кислый Met Hb имеет пик поглощени  при Л 630 им с 1 3,7 па 1 гем (мономер). Величина поглощени  исследуемого раствора составл ет:

,226; 0,222; 0,220; 0,223; ,2227.

Подставл   и формулу (I) значени  ,2227, imM-61,795 г, см, 8 14,8 на тетрамер, получим

С 14,8-1-10 и,иУ15/о.

Содержание воды определ ют по формуле (2)

0 123-0 0915 „ „,, ц ,,/ «

-0 Т23-О 256 г HjO/r белка,

Влажность того же образца, измеренна  другими методами, составл ет:

1)с реактивом Фишера- 0, 280 г белка;

2)гравиметрически - 0,228 белка.

Предлагаемый способ  вл етс  более простым по сравнению с известным, поскольку не требует приготовлени  до- норнительных растворов и занимает значительно меньше времени.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  содержани  воды в образцах гемоглобина, включающий вз тие навески и оценку результатов, отличающийс  тем, что, с целью упрощени  процесса, вз тую навеску раствор ют, измер ют спектро- фотометрическую концентрацию белка, а оценивают содержание воды по разности массовой и снектрофотометричес-, кой концентраций белка по отношению к массовой концентрации.