SU1482946A1 - Способ получени копропорфирина Ш - Google Patents
Способ получени копропорфирина Ш Download PDFInfo
- Publication number
- SU1482946A1 SU1482946A1 SU874187258A SU4187258A SU1482946A1 SU 1482946 A1 SU1482946 A1 SU 1482946A1 SU 874187258 A SU874187258 A SU 874187258A SU 4187258 A SU4187258 A SU 4187258A SU 1482946 A1 SU1482946 A1 SU 1482946A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- corn extract
- ammonium
- glucose
- nutrient
- fermentation
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относитс к микробиологической промышленности. Цель изобретени - ускорение биосинтеза. Сущность способа сводитс к тому, что продуцент ARTHROBACTER GLOBIFORMIS выращивают в питательной среде, содержащей, мас.%: глюкоза 0,5-1,5
аммоний сернокислый 0,05-0,15
питательна основа 2,0-9,0 и вода остальное. В качестве питательной основы может быть использован кукурузный экстракт (5-6 мас.%) либо смесь кукурузного экстракта (1-6 мас.%) с молочной сывороткой или гидролизатом оболочек БВК (1-3 мас.%). Культивирование ведут до 12 сут, затем отдел ют мицелий и целевой продукт извлекают из фильтрата культуральной жидкости.
Description
Изобретение относитс к микробиологической промышленности и касаетс получени копропорфиринов.
Цель изобретени - ускорение биосинтеза .
Способ осуществл етс следующим образом.
Дл выращивани Arthrobacter glo- biforals используют питательную среду , содержащую, мас,%: глюкоза 0,5- 1,5, серно-кислый аммоний 0,05-0,15, питательна основа 2-,0-9,0 и вода, рН 7,0-7,2. В качестве питательной основы примен ют кукурузный экстракт (5-6 мас.%) или смесь кукурузного экстракта с сухой молочной сывороткой или гидролизатом оболочек белково- витаминного концентрата (БВК). В
смеси концентраци кукурузного экстракта составл ет 1-6 мас.%, а концентраци сыворотки или гидролизата оболочек БВК 1-3 мас.% от объема среды . Выращивание ведут в аэробных услови х, t 28-30 0, в течение 4-12 сут.
По окончании культивировани биомассу клеток отдел ют на центрифуге или сепараторе, а накопившийс в фильтрате культуральной жидкости копропорфирин III адсорбируют на тальке. Тальк отфильтровывают, промывают подкисленной водой с рН 3,0 и копропорфирин III элюируют смесью ацетон - 1 н. НС1 (9:1 об/об). Ацетон отгон ют в вакууме и довод т рН водного раствора копропорфирииа III
4 00
to
CD 4ь Од
до 4,6. Выпавший осадок копропорфи- рнна III отдел ют фильтрованием, промывают дистиллированной водой и высушивают в эксикаторе над концентрированной серной кислотой, этерифи- цируют смесью метанол-концентрированна серна кислота (95:5 об/об), извлекают хлороформом и очищают на колонке с окисью алюмини третьей JQ степени активности (про витель хлороформ ) . Растворитель удал ют упариванием в вакууме, а осадок перекрис- таллизовывают из смеси хлороформ- метанол (1:5 об/об) и получают це- 15 левой продукт в форме тетрзметилово- го эфира.
Способ обеспечивает получение 60-240 мг/л тетраметилового эфира копропорфирина III в расчете на 20 культуральную жидкость.
Использование способа иллюстрируетс следующими примерами.
Пример 1. Готов т питательную среду состава, %: глюкоза 1,0, 25 кукурузный экстракт 5,0, аммоний серно-кнслый 0,1, дистиллированна вода остальное. Среду разливают в ка- чалочные колбы на 750 мл до 100 мл среды в каждую колбу и стерилизуют 30 при 0,5 атм в течение 30 мин. По окончании стерилизации колбы охлаждают до комнатной температуры 18- 20°С и инокулируют культурой A.globi- fomis ВКМ В-658, поддерживаемой в jc пробирках на кос ках МПА. Общий объем среды дл выращивани 1,1 л.
Колбы помещают в термостат при 28-30° С и провод т инкубацию в аэробных услови х на качалке при числе 40 оборотов 180 об/мин.
Через 48 ч ферментации в колбы ежедневно внос т глюкозу в виде 50,0%-ного стерильного водного раствора из расчета 1,0% глюкозы-на объем 45 культуральной жидкости, а также довод т рН среды до 7,0-7,2 10,С%-ным стерильным растворомоNaHCO,.
Через 12 сут выращивани ферментационную жидкость объедин ют и клетки 50 бактерий отдел ют на центрифуге при 6 тыс. об/мин. Получают 1 л густо окрашенного супернатанта. Довод т рН супернатанта до 3,0 добавлением 50,0%-ной уксусной кислоты и внос т 55 в него при перемешивании 200 мл активированной суспензии талька в 3%-ной уксусной кислоте. Суспензию готов т из расчета 2 г талька на
100 мл кислоты. Полноту адсорбции порфиринов на тальк контролируют спектрофотометрически. Через 1 ч тальк отфильтровывают на воронке Бюхнера и промывают на фильтре 3,0%-ным раствором уксусной кислоты. Порфирины элюируют 200 мл смеси аце- тон-1 н.НС (9:1 об/об) до прекращени окрашивани элюирующего раствора . Ацетон отгон ют в вакууме и порфирины осаждают из концентрированного водного раствора доведением его рН до 4,6 с помощью 20,0%-ного раствора едкого натра. Через 24 ч осадок порфиринов отфильтровывают на воронке Бюхнера и промывают охлажденной дистиллированной водой с рН 4,6. Осадок сушат в вакуум-эксикаторе над п тиокисью фосфора в течение 24 ч, а затем помещают в охлажденную смесь метанол-серна кислота (95:5 об/об). Объем этерифицирующей смеси 50 мл. Через 24 ч этерификации, проводимой при комнатной температуре, разбавл ю реакционную массу водой до 100С мл и метиловые эфиры порфиринов извлекают хлороформом (3 раза по 50 мл хлороформа). Хлороформ отгон ют в вакууме до конечного объема 3 мл и хроматографируют порфирины на колонке с окисью алюмини третьей степени активности (размер колонки 2, см) элюент хлороформ. Хлороформ отгон ют в вакууме досуха и кристаллизуют пор фирины из смеси хлороформ-метанол (1:5 об/об).
Вес полученного продукта 202 мг, т.пл. 152 С. Коэффициенты мол рной экстинкции в хлороформе имеют следующие значени : 400 нм (), 499 нм (14М03), 532 нм (ЧО3), 567 нм (7хЮ3), 622 нм ().
Пример 2. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 1,5, кукурузный экстракт 6,0, аммоний сер но-кислый 0,15. Продолжительность 12 сут. Остальное, как в примере 1. Выход копропорфирина III 225 мг/л к.ж
Пример 3. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 1, кукурузный экстракт 1,0, молочна сыво ротка 1,0, аммоний серно-кислый 0,1. Продолжительность ферментации 4 сут. Остальное, как в примере 1. Выход копропорфирина III 103 мг/л к.ж.
Пример 4. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 1,0, кукурузный экстракт 1,0, молочна
сыворотка 3,0, аммоний серно-кислый 0,1. Продолжительность ферментации 6 сут. Остальное, как в примере 1. Выход копропорфирина III 120 мг/л к.ж.
Пример 5. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 1,0, кукурузный экстракт 1,0, гидролизат оболочек белково-витаминного концентрата (БВК) 1,0, аммоний сернокислый - 0,1%. Продолжительность ферментации 6 сут. Остальное, как в примере 1. Выход копропорфирина II 90 мг/л к.ж.
Пример 6. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 1,0, кукурузный экстракт 1,0, гидролизат оболочек БВК 3,0, аммоний серно-кислый 0,1. Продолжительность ферментации 6 сут. Остальное, как в примере 1. Выход-копропорфирина III 106 мг/л к.ж.
П р. и м е р 7. Ферментацию ведут как в примере 1, но в качестве продуцента используют штамм Arthrobac- ter globifomis BKM В-660. Выход копропорфирина 195 мг/л к.ж.
Пример 8. Ферментацию ведут как в примере 1, но в качестве продуцента используют штамм Arthrobacte globiforrais BKM B-661. Выход копропорфирина III 180 мг/л к.ж
Пример 9. Ферментацию ведут на среде состава, %: глюкоза 0,5, аммоний серно-кислый 0,05, кукурузны экстракт 1, молочна сыворотка 1. Продолжительность ферментации 4 сут. Выход копропорфирина III 60мг/л к.ж.
Пример 10. Ферментацию ведут , как в примере 3, но питательна среда дополнительно содержит 3% молочной сыворотки. Продолжительность ферментации 12 сут. Выход копропорфирина III 240 мг/л к.ж.
Пример Т1. Ферментацию ведут , как в примере 2, но питательна среда содержит дополнительно 1% гидролизата оболочек БВК. Продолжительность ферментации 6 сут. Выход копропорфирина III 105 мг/л к.ж.
Пример 12. Ферментацию ведут , как в примере 3, но питательна среда содержит дополнительно 3% гид- 5 ролизата оболочек БВК. Продолжитель- ность ферментации 12 сут. Выход копропорфирина III 230 мг/л к.ж.
Пример 13. Ферментацию ведут , как в примере 1, но концентраци 0 глюкозы составл ет 0,5%, серно-кисло- го аммони 0,05%. Выход копропорфирина III 195 мг/л к.к.
Таким образом, использование предлагаемого способа позвол ет уско- 5 рить процесс биосинтеза (до 12 сут. вместо 17 сут по известному способу).
i
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени копропорфирина III 0 путем культивировани продуцентаArthrobacter globiformis в питательной среде, содержащей глюкозу, питательную основу, соль аммони и воду, с последующим отделением биомассы 5 и выделением целевого продукта из фильтрата культуральной жидкости, отличающийс тем, что, .с целью ускорени биосинтеза, выращивание осуществл ют на среде, со- 0 держащей в качествеtсоли аммони серно-кислый аммоний а в качестве питательной основы - кукурузный экстракт или смесь его с сухой молочной сывороткой или гидролизатом оболочек Q белково-витаминного концентрата при следующем соотношении компонентов, мае.%:ГлюкозаАммоний серно- 0 кислыйПитательна основа Водапри этом кукурузный экстракт исполь- 5 зуют в концентрации 5,0-6,0 мас.%, а при использовании смеси кукурузный экстракт берут в концентрации 1- 6 мас.%, молочную сыворотку или гидролизат оболочек белково-витаминного концентрата - 1-3 мас.% от объема0,5-1,5 0,05-0,152-9 Остальное0среды.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874187258A SU1482946A1 (ru) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | Способ получени копропорфирина Ш |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874187258A SU1482946A1 (ru) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | Способ получени копропорфирина Ш |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1482946A1 true SU1482946A1 (ru) | 1989-05-30 |
Family
ID=21282843
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU874187258A SU1482946A1 (ru) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | Способ получени копропорфирина Ш |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1482946A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2644674C1 (ru) * | 2017-03-24 | 2018-02-13 | Ооо "Нпф "Элест" | Способ получения 3,3',3'',3'''-(3,8,13,17-тетраметилпорфирин-2,7,12,18-тетраил) тетрапропионовой кислоты (копропорфирина) |
-
1987
- 1987-01-30 SU SU874187258A patent/SU1482946A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Быковский В.Я., Зайцева З.И., Полул х О.В. Микробиологический синтез порфиринов. М.: ВНИИСЭНТИ, 1985. Патент DE В 3044969, кл. С 12 N 1/20, опублик. 1983. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2644674C1 (ru) * | 2017-03-24 | 2018-02-13 | Ооо "Нпф "Элест" | Способ получения 3,3',3'',3'''-(3,8,13,17-тетраметилпорфирин-2,7,12,18-тетраил) тетрапропионовой кислоты (копропорфирина) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPH02196780A (ja) | グリコシダーゼ阻害剤サルボスタチンおよびその製法 | |
IL24529A (en) | Process for preparing cephalosporin derivatives | |
US3183172A (en) | Obtaining psilocybin and psilocin from fungal material | |
US5563054A (en) | Process for preparation of benzo[B]thiophene glucuronides | |
SU1482946A1 (ru) | Способ получени копропорфирина Ш | |
SU1151219A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
SU511027A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
SU1069631A3 (ru) | Способ получени тилактона и штамм @ @ @ 12188 дл его получени | |
DE2445581C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von D-Gluconsäure-dlactam | |
SU469266A3 (ru) | Способ плучени 7-амино-дезацетоксицефалоспорановой кислоты | |
US2652356A (en) | Fumagillin and preparation | |
SU736875A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
US3957579A (en) | Method for preparing d-tartaric acid | |
SU980620A3 (ru) | Способ получени сесквитерпенового производного | |
US4770876A (en) | Microbiological production of livestock growth-promoting agent | |
US2938836A (en) | Process of preparing omicron-carbamyl-d-serine | |
SU539538A3 (ru) | Способ получени метаболита "а 27 106 | |
US2695261A (en) | Production of polymyxins a, b, and e | |
US5565561A (en) | Natural substance cyclamenol and chemical derivatives | |
US2885326A (en) | Production of cycloheximide | |
EP0383248B1 (en) | Process for the production of mevalonic acid | |
RU2261915C2 (ru) | Способ получения цитрата кальция | |
US3835170A (en) | Hypotensive agent, oudenone, its salts and processes for production and preparation thereof | |
US3201326A (en) | Process for preparing lysergic acid | |
US3485722A (en) | Fermentative process for producing ergocryptine |