SU1451162A1 - Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей - Google Patents
Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей Download PDFInfo
- Publication number
- SU1451162A1 SU1451162A1 SU874231060A SU4231060A SU1451162A1 SU 1451162 A1 SU1451162 A1 SU 1451162A1 SU 874231060 A SU874231060 A SU 874231060A SU 4231060 A SU4231060 A SU 4231060A SU 1451162 A1 SU1451162 A1 SU 1451162A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- medium
- algae
- microalgae
- culture
- diluted
- Prior art date
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологической промьшшенности и может быть использовано при выборе сред дл культивировани подвижных микр о- водорослей и бактерий. Целью изобретени вл етс повышение точности, упрощение и снижение трудоемкости оценки степени оптимальности сред по токсической реакции микроорганизмов . Способ заключаетс в создании контакта между исходной суспензией клеток и испытываемыми средами на микроповерхности в системе из соединенных между собой в нижней части стекл нных сосудов и учете количества переместившихс в разные среды клеток после нескольких часов экспо-; зиции. 3 табл. с W
Description
СП
1
Изобретение относитс к микробиологической промьшшенности и может быть использовано при выборе сред дл культивировани подвижных микроводорослей .
Цель изобретени - повьппение точности и упрощение способа оценки степени оптимальности состава сред по токсической реакции подвижных мик- роводорослей.
Способ позвол ет осуществл ть пр мой подсчет числа клеток и определить вес их сухой биомассы в единице объема исследуемой среды и конт- ролировать физико-химический состав этой среды не только по окончании опыта, но и в динамике, т.е. неоднократно по ходу эксперимента. Способ возможно осзтцествить двум вариантам
При первом варианте осуществлени способа подвижные микроводоросли выращивают до достаточной плотности (10-20-10 кл/мл) на исходной среде в культуральной камере емкостью 500 мл, продуваемой снизу смесью воздуха с COj. После этого в суспензию водорослей через отверстие в крышке камеры вставл ютс стекл нные
трубки типа пипеток с отт нутым кон-
чиком (площадь отберсти кончика 0,15-0,90 мм, емкость трубки 2- 3 мл), целиком заполненные исследу- eMOJi средой и загерметизированные сверху короткой стекл нной палочкой, вставленной в отрезок резиновой трубки , надетой сверху на пипетку. Среды в трубках и в культуральной камере при этом практически не смешиваютс , если только удельный вес сред в труб ках не превьппает значительно удельного веса среды в культуральной камере . Подвижные микроводоросли из камеры переход т в .трубки с исследуемыми средами в количествах, пропор- циональных степени оптимальности данной среды дл их жизнеде тельности . Через 1-2 сут стекл нные трубки вынимают из камеры с культурой и со держимое их анализируют обычными методами (плотность суспензии по числу клеток определ ют подсчетом в камере Гор ева, обща концентраци солей в среде высушиванием 1 мл и взвешиванием сухого остатка, содержание отдельных элементов в среде методом плазменной фотометрии и ТоП,). При втором варианте осуществлени способа .подвижные микроводоросли вы1622
ращивают в любом культуральном сосуде до той же примерно плотности, что и при первом варианте осуществлени способа.
После этого 50 мл суспензии микро водорослей заливают в одно из колен закрепленной на штативе U-образной системы, состо щее из двух загнутых снизу под пр мым углом трубок диаметром 20 мл, соединенных в нижней своей суженной части прозрачной эластичной трубкой пережатой посередине зажимом. Во второе колено системы заливают исследуемую среду любого состава и любого удельного.веса Остатки воздуха из горизонтального участка системы удал ют пальпированием эластичной трубки. После этого зажим в горизонтальной части системы осторожно удал ют и обе среды соедин ютс одна с другой таким образом, что между ними образуетс поверхность раздела фаз достаточно большой площади (10-12 ммМ. Систему можно усложнить, составив ее из трех (Ш-образна система) и более сообщающихс сосудов (через стекл нные трои НИКИ в нижней части). Через поверхность раздела фаз микроводоросли из исходной среды свободно переход т в . колена с исследуемыми средствами в соответствии со степенью оптимальности каждой исследуемой среды дл их жизнеде тельности. В вертикальные .части трубок системы можно вставл ть сверху тонкие стекл нные капилл ры или пластиковые трубочки, через которые культура продуваетс смесью воздуха с С02. Через определенные промежутки времени (обычно раз в сутки ) из трубок отбирают пробы дл определени плотности культуры по числу клеток и по весу сухой биомассы клеток в единице объема суспензии и дл одновременного контрол за тем, насколько сохран етс посто нство каждой из сред в трубках по ее физико-химическим показател м.
Пример 1. Штамм подвижных микроводорослей Dunaliella primolec- ta Butch. № 63, полученный из коллекции Института Ботаники АН УССР, выращивают в культуральной камере емкостью 500 мл, продуваемой снизу смесью воздуха с 0,5% СО до плотности 20«10 кл/мл на среде следующего состава , г/л: NaCl 29,0; KNOj 5,0; KHiP04 0,5; .3НгО 0,75;
г onU
0,38; MgSQ,.7HjO 0,24; раствор микроэлементов А4 1 мл, раствор FeS04 7 в смеси с ЭДТА ( З мг/л и ЭДТА 37 мг/л) 1 мл. Содержание Na в этой среде равно 11,41 г/л, К 2,33 г/л, так как значение рН среды до 7,0 доводили при помощи КОН
После этого в суспензию водорос-.
лей через отверсти в крьппке камеры вставл ют стекл нные трубки типа пи- петок с отт нутым кончиком, запол- нейрые исследуемыми средствами и загерметизированные сверху короткой стекл нной палочкой, вставленной в надетый на пипетку отрезок резиновой трубки.
в табл.1 показан характер иссле- |цуемьк сред и содержание в них основных ионов.
Продолжение табл.1
Характер исследуемой среды
Содержание ионов г/л
Ка
,1 ,398 0,698
ю Основна среда, разбавленна в 8 раз 15
0
В табл.2 приведено среднее число клеток, обнаруженных через 2 сут. в трубках-пипетках с исследуемыми средами.
Таблица 2
Таблиц
Основна среда без NaCl, разбавленна в 4 раза
Основна среда без NaCl, разбавленна в 1,5 раза
Основна среда без NaCl, разбавленна в 4 раза
Основна среда без NaCl, разбавленна в 1,5 раза
Основна среда, разбавленна в В раз
При этом исходные параметры исследуемых сред в трубках, как это
1
Вариант средд,
I Число кле- I ток, 10 кл/мл
Основна среда без NaCl, разбавленна в 4 раза
0,030
30
Основна среда без NaCl, разбавленна в 1,5 раза
Основна среда, разбавленна в 8 раз
Таблица 3
2,08 7,72
3,26 7,75 3,88 7,75
видно из табл.3, сохран ютс практически без изменений.
Таким образом, отсутствие ЦаС1 в среде вл етс фактором, неблагопри тным дл жизнеде тельности Du- naliella primolecta. В случае отсутстви NaCl в среде водоросли отдают предпочтение менее разбавленной по сравнению с исходной среде, т.е. предпочитают среду с более высоким осмотическим давлением.
Пример 2. Штамм водорослей Dunaliella salina Teed. № 10, полученный из коллекции культур института Ботаники АН УССР, выращивают на
14511626
можности свободно перемещатьс из средней трубки в боковые.
Установлено, что через А8 ч культивировани микроводоросли из средней трубки переместились в левую трубку, тогда как среда в правой трубке осталась совершенно прозрачной .
10 Таким образом, исходна , культураль- на среда, разбавленна в 4 раза, становитс неблагопри тной дл жизнеде тельности Dunaliella salina и они из плотной исходной суспензии.в по д. 1 СЛ-ЧХ1 Л И А.- -I л. у х.-.j(. j . -
среде того же состава, что и Dunalie- 15 исках более благопри тных по осве11а primolecta Butch, штамм 63, но содержащей NaCl в количестве не 29,0, а 87,0 г/л. В остальном водоросли выращивают в тех же услови х,
щенности условий перемещаютс только в среду, содержащуюс в левой трубке, т.е. их осмотаксис положителен только по отношению к исходной среде, разФормула
изобретени
что и Dunaliella primolecta до плот- 20 бавленной не более чем в 2 раза. ности 10-10 кл/мл.
Монтируют на штативе Ш-образную систему, состо щую из трех вертикально расположенных трубок, соеди-.
ненных снизу через стекл нный тройник 25 состава среды дл культивировани прозрачным шлангом из силиконовой подвижных микроводорослей, включающий вьфащивание микроводорослей в соСпособ определени оптимального
резины, пережатым межд,у трубками при помощи съемных зажимов, затем в среднюю трубку заливают 50 мл полученной суспензии водорослей, в левую трубку такое же количество чистой осходной среды разбавленной в 2 раза, а в правую - ту же среду, но разбавленную в 4 раза (также 50:мл). После этого, не снима зажимов пальпированием шлангов, удал ют оставшиес в системе пузырьки воздуха, а затем осторожно снимают зажимы. Межд,у исходной суспензией водорослей и исследуемыми средами в результате этого образуютс поверхности непосредственного соприкосновени (раздела фаз), обеспечивающие микроводоросл м возсуде с контрольной средой с последующим контактированием полученной куль30 туры водорослей с исследуемой средой и определением токсической реакдии микроводорослей по отношению к исследуемой среде, отличающий- с тем, что, с целью повьшени
35 точности и упрощени способа, контактирование культуры водорослей с исследуемой средой осуществл ют путем создани поверхности раздела фаз с исследуемой средой, наход щей40 с по крайней мере в одном сообщающемс сосуде с сосудом с контрольной средой, с последующей инкубацией . культуры водорослей.
Составитель Е.Золотухина Редактор М.Недолуженко Техред А.Кравчук Корректор И.Эрдейи
Заказ 7036/20
Тираж 500
ВНШПИ Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5
исках более благопри тных по освещенности условий перемещаютс только в среду, содержащуюс в левой трубке, т.е. их осмотаксис положителен только по отношению к исходной среде, разФормула
изобретени
бавленной не более чем в 2 раза.
.
.
Способ определени оптимального
25 состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей, включающий вьфащивание микроводорослей в сосуде с контрольной средой с последующим контактированием полученной куль30 туры водорослей с исследуемой средой и определением токсической реакдии микроводорослей по отношению к исследуемой среде, отличающий- с тем, что, с целью повьшени
35 точности и упрощени способа, контактирование культуры водорослей с исследуемой средой осуществл ют путем создани поверхности раздела фаз с исследуемой средой, наход щей40 с по крайней мере в одном сообщающемс сосуде с сосудом с контрольной средой, с последующей инкубацией . культуры водорослей.
Подписное
Claims (1)
- Формула изобретенияСпособ определения оптимального 25 состава среды для культивирования подвижных микроводорослей, включающий выращивание микроводорослей в сосуде с контрольной средой с последующим контактированием полученной куль30 туры водорослей с исследуемой средой и определением токсической реакции микроводорослей по отношению к исследуемой среде, отличающийс я тем, что, с целью повышения 35 точности и упрощения способа, контактирование культуры водорослей с исследуемой средой осуществляют путем создания поверхности раздела фаз с исследуемой средой, находящейся по крайней мере в одном сообщающемся сосуде с сосудом с контрольной средой, с последующей инкубацией . культуры водорослей.5 14511Таким образом, отсутствие tiaCl в среде является фактором, неблагоприятным для жизнедеятельности Dunaliella primolecta. В случае отсутствия NaCl в среде водоросли отдают предпочтение менее разбавленной по сравнению с исходной среде, т.е. предпочитают среду с более высоким осмотическим давлением. юПример 2. Штамм водорослей Dunaliella salina Teod. № 10, полученный из коллекции культур института Ботаники АН УССР, выращивают на среде того же состава, что и Dunaliella primolecta Butch, штамм 63, но содержащей NaCl в количестве не 29,0, а 87,0 г/л. В остальном водоросли выращивают в тех же условиях, что и Dunaliella primolecta до плотности 10-105 кл/мл.Монтируют на штативе Ш-образную систему, состоящую из трех вертикально расположенных трубок, соединенных снизу через стеклянный тройник прозрачным шлангом из силиконовой резины, пережатым между трубками при помощи съемных зажимов, затем в среднюю трубку заливают 50 мл полученной суспензии водорослей, в левую трубку такое же количество чистой осходной среды разбавленной в 2 раза, а в правую - ту же среду, но разбавленную в 4 раза (также 50мл). После этого, не снимая зажимов пальпированием шлангов, удаляют оставшиеся в системе пузырьки воздуха, а затем осторожно снимают зажимы. Между исходной суспензией водорослей и исследуемыми средами в результате этого образуются поверхности непосредственного соприкосновения (раздела фаз), обеспечивающие микроводорослям воз-
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874231060A SU1451162A1 (ru) | 1987-04-17 | 1987-04-17 | Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU874231060A SU1451162A1 (ru) | 1987-04-17 | 1987-04-17 | Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1451162A1 true SU1451162A1 (ru) | 1989-01-15 |
Family
ID=21298798
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU874231060A SU1451162A1 (ru) | 1987-04-17 | 1987-04-17 | Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1451162A1 (ru) |
-
1987
- 1987-04-17 SU SU874231060A patent/SU1451162A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Microbiol., J.Gen. Vol. 74, № 81, 1973, 77-91, Physiologia Plantarum, Vol. 22, F 1, 1969, 126-139. Microbiology. J. Gen. Vol. 102, .№ 1, 1977, 199-202. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU614936B2 (en) | Apparatus and methods of culturing motile microorganisms | |
US9018007B2 (en) | Method and device for cell culture in open continuous mode | |
WO1997004074A1 (en) | Dialyzed multiple well tissue culture plate | |
NO860991L (no) | Anordning for omroering av cellekulturer samt anvendelse derav. | |
JP5936808B2 (ja) | 嫌気性環境における微生物の区画化された培養のためのシステムおよび方法 | |
RU2373273C2 (ru) | Устройство для непрерывной культуры с мобильным сосудом, позволяющим выполнять отбор наиболее подходящих вариантов клеток | |
CN101218337B (zh) | 装置 | |
JP2011512148A5 (ru) | ||
Bennett et al. | Colonization potential of bacteria in the rhizosphere | |
Perumal et al. | Isolation and culture of microalgae | |
CN212955180U (zh) | 共培养装置 | |
SU1451162A1 (ru) | Способ определени оптимального состава среды дл культивировани подвижных микроводорослей | |
Theodorou et al. | Anaerobic fungi | |
ES2038965T3 (es) | Procedimiento y dispositivo para el cultivo de celulas. | |
Mitchell et al. | The use of rotifers for the maintenance of monoalgal mass cultures of Spirulina | |
JPH11509420A (ja) | 透析式マルチプルウエル組織培養プレート | |
CN105420176A (zh) | 一种具有高co2耐受性和固定率的微藻选育方法 | |
Walsby | The buoyancy-providing role of gas vacuoles in an aerobic bacterium | |
WO1986000636A1 (en) | Cell growth | |
CN106635796B (zh) | 用于细胞固着培养的装置及固着培养方法 | |
NO850534L (no) | Fremgangsmaate for dyrking av celler | |
US3591460A (en) | Apparatus and means for handling cells | |
Bertola et al. | Continuous cultivation of glucose-limited bean cells (Phaseolus vulgaris L.) in a modified bacterial fermentor | |
CN208617887U (zh) | 一种微藻培养优化设备 | |
de la Broise et al. | Osmotic, biomass, and oxygen effects on the growth rate of Fusarium oxysporum using a dissolved‐oxygen‐controlled turbidostat |