SU1368779A1 - Колориметрический способ определени количества фосфолипидов в хроматографических фракци х в тонком слое силикагел - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к колориметрическим методам определени  фос- фолипидов в хроматографических фракци х в слое силикагел  и может быть использовано в клинической, экспериментальной и технической биохимии. Целью изобретени   вл етс  упрощение и ускорение способа определени  фос- фолипидов в хроматографических фракци х в тонком слое силикагел , что достигаетс  непосредственным окрашиванием фосфолйшадов в присутствии силикагел . Способ включает обработку анализируемой фракции фосфолипи- дов вместе с силикагелем в центрифужной цробиркё 0,03-0,1 мл 0,5-2%- ного водного раствора дезоксихолата, смесью хлороформа и метанола (1:0,8):

Description

00 Од 00

со

Изобретение относитс  к аналитической химии и к определению фосфо- липидов в хроматографических фракци х в слое силикагел .

Целью изобретени   вл етс  упрощение и ускорение способа определени  .

Способ осуществл етс  следующим образом.

Обнаруженные на хроматографических пластинах п тна фосфолипидов вырезают ножницами .(в случае силуфоло- вых пластинок с алюминиевой подложкой ) или соскабливают Св случае под- ложки из стекла) и помещают анализируемую пробу в центрифужную пробирку . Силикагель смачивают 0,03-0,1 мл 0,5-2%-ного водного раствора дезокси

фужную пробирку. Силикагель смачивают 0,05 мл 1%-ного водного раствора дезоксихолата, отслаивают сили- кагель от пластины, добавл ют 0,4 мл смеси хлороформ:метанол (1:1), встр хивают , вынимают фольгу, добавл ют 0,6 мл молибденового реагента, встр хивают , добавл ют 1 мл хлороформа, встр хивают, центрифугируют при

3000 об/мин в течение 5 мин и определ ют оптическую плотность нижней хлороформной фазы при длине волны 710 нм.

Процент обнарз жени  индивидуальных фосфолипидов и смесей значимо неотличен от 100%, что позвол ет примен ть предлагаемый способ дл  количественного определени  разнообразных

холата, отслаивают стекл нной палоч- кой Силикагель (в случае силуфоло- вых пластинок), добавл ют 0,3-0,5 мл смеси хлороформ:метанол (1:0,8):(1: 1,5), встр хивают, добавл ют 0,2- 0,27 мл 0,,5-2%-ного водного раствора дезоксихолата, встр хивают, вынимают фольгу (в случае силуфоло- вых пластинок), добавл ют 0,6 мл концентрированного молибденового реагента , встр хивают, добавл ют 1 мл хлороформа (или другой объем в зависимости от требуемой чувствительности ), встр хивают и определ ют оптическую плотность нижней хлороформной фазы при длине волны 700-715 нм. Определение концентрации фосфолипида провод т по калибровочному графику.

Пример. Количественное определение различных фосфолипидов.

Участок силуфоловой пластины, содержащий фракцию фосфолипида, вырезают ножницами и перенос т в центриФосфолипидов ,

Claims (1)

1. Формула изобрете ни  

   Колориметрический способ опреде- лени  количества фосфолипидов в хроматографических фракци х в тонком слое силикагел , включающий экстракцию анализируемого материала, окрашивание молибденовым реагентом и фото- метрирование, отличающийс  тем, что, с целью упрощени  и ускорени  способа определени , силика- гель, содержащий анализируемую фракцию фосфолипидов, обрабатывают 0,03- 0,1 мл 0,5-2%-ного водного раствора дезоксихолата, затем добавл ют 0,3- 0,5 мл смеси хлороформ:метанол (1: 0,8):(1:1,5), полученную смесь перемешивают , добавл ют 0,2-0,27 мл 0,5- 2%-ного водного раствора дезоксихолата , после перемешивани  смеси ввод т молибденовый реагент и фото- метрируют нижнюю хлороформную фазу.