SU1350615A1 - Способ определени активности иммунодепрессора биогенной природы - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к фармако-. логино Цель изобретени  - упрощение способа. Определ ют средгшю массу селезенки у интактных мьшей, у мышей, которым ввод т гидрокортизон, и у мышей после введени  им иммунодепрессо- ра и гид окортизона(, Рассчитывают индекс массы селезенки и активность им- мунодепрессора. Масса селезёнки зависит от дозы гидрокортизона, иммуно- депрессора и времени после введе ш  препарата. 2 табл.

Description

t13

Изобретение относитс  к фармакологии и может быть использовано при определении активности иммунодепрес- сивных препаратов биогенной природы, в TOJ1 числе полученных из органов и тканей млекопитающих.

Цель изобретени  - угфощение способа за счет сокращени  числа операций о

Способ осуществл етс  следующим образом.

Животных умерщвл ют под эфирным наркозом, извлекают у них селезенку и определ ют ее вес. Среди селезенок одной группы мышей могут встречатьс  органы с весом, значительно отличающимс  от веса органов в этом же опыте,, Дл  вы влени  выскакивающих значений примен ют метод, основанный на оценке максимальных различий полу- ченных результатов. Эти значени  весов селезенок исключают из анализа.

Средний вес селезенок Р вычисл ют дл  следующих групп: у интактных мы- щей Pj, (контроль 1-ИК); у мышей, koтopым за 20-40 мин до введени  гидрокортизона (ГК) вводили физиологический раствор, РГ (контроль 2-ГК) у мьшей, которым за 20-40 мин до

введени  гидрокортизона личные дозы иммунодепрес Р (опытные группы) «

Средний вес селезенок вычисл ют по формуле и

п

Р : И Р.

-л

где п - количество селезенок в группе ,

Индекс веса селезенки в группе 1 при введении ИД определ ют по формуле

(Рр РГК)/(РИК

Гк

100. (2)

Зависимость 1 от величины испытываемой дозы препарата D; может быть удовлетворительно аппроксимирована линейной функцией вида

Ij5 а„ + a. , (3)

где а И а, - коэффициенты уравнени  линейной регрес- сии с.

Оценку значений коэффициентов управлени  линейной регрессии выполн ют методом наименьших квадратов, Вы152

числ ют активность препарата А - дозу , введение которой позвол ет получить индекс веса сапезенки, равный 50%,

S-Q-O

А 10

(4)

Значимость св зи между 1д и DJ , котора  описываетс  уравнением (З), оценивают по величине коэффициента коррел ции - г. Минимальное значение модул  г, при котором существует значима  св зь между р и DJ с уровнем надежности - Р 0,01, следующее (N - число сравниваемых пар):

ir| 0,882 0,833 0,789 0,750 0,715 N 45678

Вес селезенки в % к интактному контролю Y зависит от дозы ГК (ДГК) и времени после его введени  Т

Y 75,52-0,43-ДГК + 0,56-Т;

(5)

В соответствии с формулой (5) при выполнении способа рекомендуетс  использовать дозу ГК 90-140 мг/кг, врем  между введением иммунодепрессора 20-40 мин, врем  регистрации эффекта 48-72 ч.

Пример, Определ ют биологическую активность ИД, выделенных из печени теленка (препарат 1) и тимуса теленк-а (препараты 2а и 2б).Препарат 26  вл етс  продуктом очистки препарата 2а (сырца) на ионообменной целлюлозе ДЕ-52

. В эксперименте использовали мьшей (самцов или самок) массой 18-20 г, Содержание, корм и уход обычные.

Использовали гидрокортизон фир Гедеон Рихтер, лиофилизированные препараты ИД.

Готовили суспензию ГК в физиологическом растворе (концентраци  4мг/мп) и растворы ИД в стерильном физиологическом растворе. Животных случай- . ным образом (рандомизированно) раздел ли по 6 мьшей в группу о Всего на испытание одной серии препарата необходимо 7-9 групп.В примере использовано 9 групп мышей.

Контроль 1. Мьшам из группы ин- тактного контрол  (ИК) ввод т 0,4 мп физиологического раствора, внутримышечно и спуст  20-40 мин 0,5 мп внут- рибркшинно.

Контроль 2. Мышам из группы с ГК ввод т 0,4 МП физиологического раствора и спуст  20-40 мин внутрибрнгаин- но 0,5 МП ГК (2 мг/мышь).

Семи группам мьшей внутримьшечно ввод т в объеме 0,4 мп различные дозы ИД 0,08; 0,2; 0,4; 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 мг/мьппь„ Через iO-40 мин этим мьтам внутрибркнпинно ввод т 0,5 мл ГК (2 мг/мьппь). Через 72 ч животных под эфирным наркозом декапитировали, извлекали селезенки и взвешивали,

Результапы определени  параметров дл  расчета биологической активности ИД представлены в табл.1 о

Таблица 1

Продолжение табл.1

В табл.2 представлены результаты определени  активности ИД

Таблица 2

1

Определение активности ИД по предлагаемому способу менее трудоемко и занимает меньше времени, в сравнении

с известным способом.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  активностиимму- нодепрессора биогенной природы путем введени  его мышам с последующим забоем и исследованием селезенкиу контроль ных и опытных животных,о т л и ч а ю щ и и с   тем, что, с целью упрощени  способа за счет сокращени  чис- л-а операций, через 20 - 40 мин после внутримьшечного введени  различных доз иммунодепрессора вн-утрибрюшинно ввод т гидрокортизон, через 2-3 сут животных забивают, определ ют вес селезенки, рассчитывают индекс веса селезенки по

   (,)/(Р,,-Р,,

   .) -100,

   Редактор П.Геревш Заказ 5281/46

   Составитель Н.Гул ева Техред М.Моргентал

   Корректор

   Тираж 776Подписное

   ВНИИПИ Государственного комитета СССР

   по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35,( Раушска  наб,, д.4/5

   -Производственно-полиграфическое предпри тие, г.Ужгород, улвПроектна ,4

   а

   -10 15

   L

   ик

   Р.

   индекс веса селезенки;

   средний вес селезенки у интактных мьш1ей;

   средний вес селезенки-у мы

   шей, которым вводили гидрс кортизон ,, но не вводили

   иммунодапрессор; Р - средний вес селезенки у

   ьышей, которым вводили имкунодепрессор и гидрокорти

   зон,

   а активность имт нодепрессора определ ют по формуле

   А К)

   а .

   - активность иммунодепрессора; и а , - параметры регрессионной зависимости индекса веса селезенки от дозы икмунодепрессора.

   Корректор М.Максимишинец