SU1318910A1 - Способ диагностики гломерулонефрита - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине . Цель изобретени  - диагностирование в ранние сроки путем определени  уровн  прекалликреина в крови Дл  этого в пробирку на вод ной бане при 25°С внос т равные части плазмы и суспензии каолина (10 мг/мл). Смесь отбирают в пробирки, содержащие. 0,05 М мединалового буфера, рН 7,6, добавл ют протаминсульфат и инкубируют пробы 15 мин при 35°С. Затем добавл ют 20%-ную трихлоруксусную кислоту (ТХУ). В контрольные пробы протаминсульфат внос т после ТХУ.После осаждени  нерасщепившегос  прота- минсу ьфата ТХУ пробы центрифугируют 45 мин при 5000 об/мин. Затем пробирки с отобранным ТХУ-центрифугатом держат 60-120 с на кип щей вод ной бане, повторно центрифугируют 15 мин при 5000 об/мин. В прозрачном центри- фугате определ ют содержание аргинина . Количество аргинина в пробах служит мерой активированного прекалликреина . Уровень прекалликреина в плазме здорового человека 178,81 t10 мкмоль/л.мин. При уровне ниже 130 мкмоль/л.мин делают вывод об активации калликреин-кининовой системы крови, вызванной наличием аутоиммунного процесса в почке, и диагностируют гломерулонефрит. (Л оэ 00 со

Description

1 1

Изобретение относитс  к медицине и может использоватьс  дл  диагности ки гломерулонефрита.

Цель изобретени  - .диагностирование в ранние строки, что достигаетс  за счет определени  уровн  прекалли- креина в крови.

Способ осуществл ют следующим образом ,

В полиэтиленовую пробирку, помещенную на вод ную баню при 25 С,внос т 0,2 мл плазмы и 0,2 мл суспензии каолина (10 мг/мл). После контакта плазмь с каолином в течение 1 мин отбирают по 0,2 мл смеси в пробирки, содержание 0,4 мл 0,05 М мединапово- го буфера, рН 7,6; Добавл ют 0,2 мл 1%-ного протаминсульфата и инкубируют пробы 15 мин при 35 С, после чего реакцию останавливают, добавл   0,8 мл 20%-ной трихлоруксусной кислоты (ТХУ). В контрольные пробы про- таминсульфат внос т после ТХУ, После осаждени  нерасщепившегос  протамин- сульфата трихлоруксусной кислотой пробы центрифугируют 45 мин при 5000 об/мин.

После этого пробирки с отобранным ТХУ-центрифугатой погружают в кип щую вод ную баню на 60-120 с, охлаждают и повторно центрифугируют при ВОрО об/мин 15 мин, В прозрачном центрифугате определ ют содержание аргинина по реакции Сакагучи, Дл  этого к I мл центрифугата добавл ют 1 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,02%-ного раствора оксихинолина, 1 мл 10%-ного раствора едкого натра. Через 2 мин добавл ют 0,2 мл 1%-ного раствора NaBrO, спуст  15 с - 1 мл 40%-ного раствора мочевины, по истечении 45 с - 1 мл дистиллированной воды. После каждого добавлени  очередного реактива пробы тщательно перемешивают , Спуст  10 мин определ ют оптическую плотность раствора при 508 нм на спектрофотометре или на ФЭКе при светофильтре № 5 в кювете 10 мм, сравнива  опытную пробу с контрольной.

Количество аргинина в пробах служит мерой активированного прекалли- креина.

Активность прекалликреина выражают в микромол х аргинина, отщепленного от протаминсульфата 1 литром плазмы крови за 1 минуту, по формуле

X V,

2

X 1000

, X V

X t.

X М

где Р - количество аргинина в пробе,

МКГ;

V - общий объем пробы, мл; Vj - объем плазмы в пробе, мл; t - врем  инкубации при 35 С,

мин; t, - врем  преинкубации при ,

мин;

М - молекул рна  масса аргинина; 1000 - пересчет на 1 л плазмы,

При расчете уровн  прекалликреина учитываетс  разность между содержанием аргинина в плазме, активированной в течение 1 мин и неактивированной. Уровень прекалликреина в плазме здорового человека составл ет 178,81 111,0 мкмоль/л.мин.

Снижение уровн  прекалликреина ниже 130 мкмоль/л,мин свидетельствует об активации калликреин-кининовой системы крови, вызванной наличием аутоимунного процесса в почке,

Пример, Больной С,, 1968 г, рожд,I № ист.болезни 629. Содержа-ние общего белка, определенное известным методом 81,4 г/л - нормальный уровень. Параллельно исследованный предлагаемым способом уровень прекалликреина 97,3 мкмоль/л.мин понижен . Клинический диагноз: острый гломерулонефрит, т,е, предложенный способ позвол ет провести необходимую диагностику на раннем этапе и раньше назначить патогенетическую

терапию.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ диагностики гломерулонеф- рита путем исследовани  белка плазмы крови, отличающийс  тем, что, с целью диагностировани  в ранние сроки, плазму обрабатьшают каолином, инкубируют полученную смесь с протаминсульфатом, далее добавл ют трихлоруксусную кислоту, полученный супернатант кип т т в течение с, после чего в нем определ ют уровень прекаллекреина и при значении его менее 130 мкмоль/ /л,мин диагностируют гломерулонеф- РИТ,