SU1254386A1 - Способ определени белка в растворе - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к биохимии . Цель изобретени  - упрощение и повышение точности способа. К биуретовому раствору добавл ют определенное количество пробы, хорошо смешивают. Через 30 мин пробы фото- метрируют по отношению к дистиллированной воде при 545 нм. Определ ют удельную зкстинкцию белка, св занного с реактивом. Расчет содержани  белка в опытной пробе провод т с . учетом биуретового реактива, не св завшегос  с белком. to сд 4; со 00 О)

Description

1

Изобретение относитс  к медицинской биохимии, а именно к определе- .нию белка в растворе, и может быть использовано дл  исследовани  биологических жидкостей.

Цель изобретени  - упрощение и повьпиение точности способа за счет учета вклада экстинкции непрореагировавшего биуретового реактива.

Способ состоит в следующем. К биуретовому раствору добавл ют определенное количество пробы, хорошо смешивают. Через 30 мин пробы фото™ метрируют по отношению к воде при 545 нм. Показатели подставл ют в формулу

12543862

не волны 545 нм. Спектрофотометр

устанавливают- на нулевую экстинкцию по дистиллированной воде. При фото- метрировании опытной пробы получают экстинкцию, равную 0,2325 ед. оптической плотности. Подставл   все значени  в формулу (2), получают:

Р п отос; 5+0,05 , ..,.„ 0,05 ,0 Р 0,2325 ,1438-

0,05

15

«0,3232,

или Р 65 г/л белка в плазме крови

При изменении соотношени  объемов пробы и биуретового реактива (0,05 и 3,0 мл) получают экстинкцию опытной пробы 0,3330. Подставл   все значени  в формулу расчета кон- 20 центрации белка (2), получают:

, ----41438 F -М

IAI -Н-,0 V + W

--1

.Ll

(1)

где Р - концентраци  белка, г%;

V - объем биуретового реактива , мл ;

- объем пробы, мл; f - экстинкци  пробы,- - экстинкци  биуретового

реактива.

При использовании стандартного биуретового реактива с М 0,078

формула вид:

1) принимает следующий

у +UJ

ы

4,14581л )

О 3232. (2)

Способ определени  белка применим ко всем растворам и биологическим жидкост м, где отсутствует побочное поглощение света в диапазоне 545 нм (например, гемоглобином): лимфе, ликвору, плазме крови, растворам с добавленньм белком промьшшенного изготовлени .

Пример. Берут 0,05 мл плазмы крови, смешивают с 5,0 мл биуретового реактива и через 30 мин фотомет- рируют на спектрофотометре при длиРедактор М.Циткина

Составитель Н.Гул ева Техред И.Попович

Заказ 4714/48

Тираж 778Подписное

ВНИИПИ Государственногр комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска  наб. , д. 4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие, г. Ужгород, ул. Проектна , 4

Р п отос; 5+0,05 , ..,.„ 0,05 ,0 Р 0,2325 ,1438-

0,05

«0,3232,

15

или Р 65 г/л белка в плазме крови.

При изменении соотношени  объемов пробы и биуретового реактива (0,05 и 3,0 мл) получают экстинкцию опытной пробы 0,3330. Подставл   все значени  в формулу расчета кон- 20 центрации белка (2), получают:

Р 0,3339 ;У/ .4,1438-.

0,3232,

или Р 65 г/л белка в плазме крови.

Таким образом, использование различных соотношений пробы и биуретового реактива дает при определении концентрации белка одно и то же значение.

Claims (1)

1. Формула изобретени- 

   Способ определени  белка в растворе путем добавлени  биуретового реактива и спектрофотометрировани , отличающийс  тем, что, с целью упрощени  и повышени  точности способа, в качестве контрольной пробы используют дистиллированную воду, определ ют удельную экстинкцию белка, св занного с реакти- вом, и расчет содержани  белка в опытной пробе провод т с учетом

   биуретового реактива, не св завшегос  с белком.

   Корректор Т.Колб