SU115805A1 - Люминесцентный способ определени содержани аминофлуоресцеина в флуоресцеинизоцианате - Google Patents

Description

Флуоресценнизоцианат  вл етс  важным микробиологическим красителем . О его качестве при синтезе суд т по содержанию в нем аминофлуоресцеина . При гидролизе флуоресцеинизоцианат переходит с аминофлуоресцеин , поэтому дл  получени  воспроизводимых результатов при его применении необходимо знать степень его гидролиза.

Описываемый люминесцетный способ позвол ет определить содержание аминофлуоресцеина во флуоресцеипизоцианате и степень гидролиза последнего.

Способ осуществл ют следующим образом.

Приготавливают растворы флуоресцеинизоцианата , аминофлуоресцеина и флуоресцеина с концентраци ми 1,0 мг/л и два буфетных раствора со значением ,5 и 12,0. В п ть колбочек наливают по 10 мл первого буферного раствора и в п ть других по 10 мл второго буферного раствора.

В колбочки с кислыми растворами добавл ют 0,20, 0,15, 0,10 и 0.05 мл раствора аминофлуоресцеина, в колбочки со щелочными растворами добавл ют такие же количества флуоресцеинизоцианата .

С помощью монохроматора, при длине волны 520 |J., измер ют относительные интенсивности флуоресценции всех растворов (принима  отсчет слепого опыта за нуль). Область максимальной интенсивности флуоресцеинизоцианата находитс  в пределах 9,0-12,0 рН, а максимальна  интенсивность развиваетс  при ,4-1,5.

При концентраци х этих веществ в соответствующих растворител х, не превыщающих пороговых, при которых начинаетс  концентрационное тущение, интенсивность флуоресценции пропорциональна их конценраци м . Из полученных экспериментальных данных наход т константы, вход щие в формулы определени  выхода и процентного содержани  аминофлуоресцеина в флуоресцеинизоцианате .

Дл  определени  выхода фл юресценции флуоресцеинизоцианата в две колбочки наливают по 10 лл щелочного буферного раствора, в одну

из них добавл ют 0,1 мл раствора флуоресцеинизоцианата,в другую- такое же количество раствора флуоресцеина . Измер ют относительные интенсивности флуоресценции и по известной формуле вычисл ют величину выхода флуоресценции на флуоресцеинизоцианата .

Дл  определени  процентного содержани  аминофлуоресцеина в флуоресцеинизоцианате готов т растворы анализируемого изоцианата в ацетоне с концентраци ми 1,0 мг1л и 0,1 мг1л. В две колбочки наливают по 10 мл буферного раствора с рН 1,5 и в две другие по 10 мл буферного раствора с ,0. В одну из колбочек с кислым раствором добавл ют 0,1 мл испытуемого раствора флуоресцеинизоцианата с концентрацией 1,0 мг1л и такое же количество испытуемого раствора флуоресцеинизоцианата с концентрацией

0,1 мг1л добавл ют в буферный раствор с ,0.

В колбочку со щелочным раствором добавл ют 0,1 мл раствора флуоресцеина с концентрацией 0,1 мг1л.

Принима  отсчет слепого опыта за нуль, измер ют относительные флуоресценции приготовленных растворов и из полученных данных по известным формулам наход т процентное содержание аминофлуоресцеина в флуоресцеинизоцианате.

Предмет изобретени 

Люминесцетный способ определени  содержани  аминофлуоресцеина в флуоресцеинизоциаиате, отличающийс  тем, что, с целью определени  степени гидролиза флуоресцеинизоцианата , содержание аминофлуоресцеина устанавливают ПС интенсивности флуоресценции испытуемого образца в щелочной и кислой средах.