SU111195A1 - Способ получени антибиотика полимиксина - Google Patents
Способ получени антибиотика полимиксинаInfo
- Publication number
- SU111195A1 SU111195A1 SU579516A SU579516A SU111195A1 SU 111195 A1 SU111195 A1 SU 111195A1 SU 579516 A SU579516 A SU 579516A SU 579516 A SU579516 A SU 579516A SU 111195 A1 SU111195 A1 SU 111195A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- polymyxin
- units
- antibiotic
- activity
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Изобретением вл етс способ получени антибиотика полимиксина из культуральной жидкости В. Роlymyxa .
Применение предлагаемого способа позвол ет получать препарат высокой эффективности при лечении долго незаживающих ран, вызванных синегнойной палочкой.
Отличительна особенность способа заключаетс в том, что культуральную жидкость обрабатывают щавелевой кислотой, бактериальные к«1етки и выпавшие соли отфильтровывают , а прозрачный фильтрат подщелачивают едким натром, после чего антибиотик адсорбируют из раствора на катиопите КБ-4-П2 и элюируют 0,35 и раствором сол ной кислоты в метаноле, из которого неорганические примеси удал ют адсорбцией на катионите СБС-1, а содержащий антибиотик раствор или нейтрализуют на анионите ЭДЭ-10, упаривают и сушат дл выделени твердой сол нокислой соли полимиксина, или нейтрализуют триэтиламином, добавл ют к полученному раствору сульфат триэтила .мика з метано.ю, выпавший сульфат полпмлкслпа отфильтровывают , промьнзают метанолом и сущат в вакууме.
Пример 1. 90 л культуральной жидкости с активностью 2100 ед/мл определ ют чашечным л1етодом с тест-организмом Escherichia СоИ, обрабатывают npii перемешивании насыщенным раствором щавелевой кислоты (2,6 ./) до достижени полноты осаждени кальци и рН раствора 3,0.
Выпавщий осадок оксалата кальци со взвесью бактериальных клеток отдел ют фильтрованием, а прозрачный раствор нейтрализуют 10%-ным раствором едкого натра (1,75 л) до рП 6,5-7,0.
Прозрачный нативный раствор (96 л с активностью 1750 ед/ли) пропускают через колонку с диаметром 2,5 с.и и высотою 40 см. наполненную 7 г катионита КБ4-П2 в натриевой фор.ме, со скоростью л час1г. Иоиит с адсорбированным на нем полимиксином (92,3-10 ед) промывают 2 л дистиллированной воды до Достижени прозрачной
промывной воды, а затем /и мл метанола , после чего провод т вытеснение антибиотпка 0,35 к раствором сол ной кислоты в метаноле со скоростью 10 лл/час/г ионита.
Полученные 300 мл раствора сол нокислого полимиксина в метаноле нейтрализуют анионитом ЭДЭ-10 в ОН-форме и получают 340 мл раствора активностью 16,3-10 ед/мг.
Всего получают 55,4 10 ед, что составл ет 60% по отношению к полимиксину , сорбированному на ионите . С учетом элюатов более низкой концентрации выход достигает 65%.
300 мл указанного выше раствора сол нокислого полимиксина в метаноле профильтровывают через колонку с диаметром 3 см и высотою 60 см, наполненную 270 г катионита СБС-1 в Н-форме со скоростью 2 мл/час/г катионита. Затем кислый раствор нейтрализуют с помощью анионита ЭДЭ-10 до рН раствора 6,5.
Получают 373 мл раствора с активностью 118-102 ед/мл и 50 мл с активностью 27-10 ед/мл. Пр мой выход антибиотика на стади х обработки ионитами СБС-1 и ЭДЭ-10 90%. Общий выход на этих стади х 94,8%.
Сухой препарат полимиксина из метанольного раствора сол нокислого полимиксина выдел ют так.
1. 170 мл раствора антибиотика после очистки ионитами СБС-1 и ЭДЭ-10 с активностью 118-10 ед/мл упаривают в вакууме при 35-40° до V4 первоначального объема; выпавщий при упаривании неактивный осадок отдел ют фильтрованием, после чего прозрачный концентрат упаривают в вакууме досуха.
Получают 2,34 г сол нокислого полимиксина с активностью 7100 ед/мг. Всего 16,6-106 ед. Выход на стадии упаривани и получени су.кого препарата 83%. Выход сол нокислого полимиксина от антибиотика , сорбированного катионитом из культуральной жидкости, около 45%.
2. К 200 л{л раствора антибиотика с активностью 118- 10 ед/мл добавл ют 2 н раствор триэтиламинсульфата в метаноле (13,5 мл) до полноты осаждени сульфата гголимиксина .
Выпавшую сернокислую соль антибиотика отдел ют фильтрованием, промывают метанолом до отсутстви в промывном метаноле следов хлоргидрата и сульфата триэтиламина и высушивают в вакууме при комнатной температуре. Получают 1,56 г препарата с активностью 10-103 ед/мг. Всего 15,6- 10 ед.
Препарат раствор ют в 30 мл дистиллированной воды, отдел ют фильтрованием небольщой неактивный осадок и из прозрачного раствора добавлением 100 мл метанола осаждают сульфат полимиксина. Последний отдел ют фильтрованием и высушивают в вакзуме при температуре не выше 45°.
Получают сульфата полимиксина 1,52 г с активпостью 10-10 ед/мг. Всего 15,2- 10 ед. Выход на стадии выделени сульфата полимиксина 64,4%. Общий выход иолимиксина от антибиотика, сорбированного катионитом из кзльтуральной жидкости , 36,0%.
Прим,ер 2. 75 л культуральной жидкости с активностью 2300 ед/мл определ ют чащечным методом с тест-организмом Escherichia Coli, обрабатывают при перемешивании насыщенным раствором щавелевой кислоты (2,5 л) до достижени полноты осаждени кальци и рП раствора 3,0. Выпавщий осадок аксалата кальци со взвесью бактериальных клеток отдел ют фильтрованием , а прозрачный нативный раствор нейтрализуют 10%-ным раствором едкого натра (1,75 л) до рН 6,5-7,0.
75 л прозрачного нативного раствора с активностью 1900 ед/мл пропускают через колонку с диаметром 2,5 см и высотою 40 см, наполненную 5 г катионита КБ4-П2 в натриевой форме со скоростью 1 . В фильтрате - 65-10 ед; сорбировано ионитом 77-10 ед.
Ионит с адсорбированным на нем полимиксином промывают 1,8 л дистиллированной воды до достижени прозрачной промывной воды и затем 50 г метанола, после чего провод т вытеснение антибиотика 0,35 н раствором сол ной кислоты в метаноле со скоростью 50 мл/час/г ионита.
Полученные 320 мл раствора сол нокислого полимиксина в метаноле нейтрализуют анионитом ЭДЭ-10, после чего получают 350 мл раствора с активностью 15,2-10 ед/мл и общим содержанием антибиотика 53,2-106 ед, что составл ет 67,2% по отношению к полимиксину, сорбированному на ионите.
С учетом элюатов более низкой концентрации выход достигает 71%. Емкость катионита по отношению к полимиксину 15,4-10 ед/г.
320 мл (обща активность 48,6-10 ед) указанного выше раствора сол нокислого полимиксина в метаноле профильтровывают через колонку высотою 60 см и диаметром 3 см, наполненную 260 г катионита СБС-1 в Н-форме со скоростью 2 мл/час/г катионита.
Получают 365 мл раствора; активность 12,7-10 ед/мл; обща активность 46,3-10 ед. Пр мой выход на стадии обработки СБС-1 95%. Обший выход с учетом слабых промывок 98,0%.
Выделение сухого препарата полимиксина из метанольного раствора сол нокислого полимиксина производитс следующим образом.
1. 200 мл кислого раствора антибиотика (обща активность 25,4-10® ед), очищенного с подгощью ионита СБС-1, нейтрализуют до рН 6,6 фильтрацией через анионит ЭДЭ-10. Объем раствора 225 мл. Активность 11-Ю ед1мл. Обща активность 24,7 - 10 ед.
220 мл нейтрализованного раствора сол нокислого полимиксина концентрируют до /4 первоначального объема в вакууме при температуре 35-40°.
Выпавший при упаривании осадок отдел ют фильтрованием, после чего концентрат высущивают в вакууме досуха.
Получают 3,06 г сол нокислого полимиксина. Активность препарата 6800 ед1 г. Всего 20,8-10 ед. Выход на стадии получени сухого препарата 86%. Выход сол нокислого полимиксина от антибиотика, сорбированного катионитом изкультуральной жидкости, 51,0%.
2. 150 мл кислого раствора антибиотика , полученного после очистки катионитом СБС-1 с активностью 12,7-10 ед1мл нейтрализуют 8 мл триэтиламина до рН 6,5. К нейтрализованному раствору добавл ют 12,5 мл 2 н раствора триэтиламинсульфата в метаноле до полноты осаждени сульфата полимиксина.
Выпавшую сернокислую соль антибиотика отдел ют фильтрованием , промывают метанолом до отсутстви в промывном метаноле следов хлоргидрата и сульфата триэтиламина и высушивают в вакууме при комнатной температуре.
Получают 1,35 г препарата с активностью 9- 10 ед1мг. Всего 12.1-106 ед.
Препарат раствор ют в 25 мл дистиллированной воды, отдел ют фильтрованием небольшой неактивный осадок и из прозрачного раствора добавлением 100 мл метанола выдел ют сульфат полимиксина. Последний отдел ют фильтровани: ем, высушивают в вакууме при температуре не выше 45°.
Получают сульфата 1.3 г активностью 9-10 ед.мг. Всего 11,(3. Выход на стадии выделени сульфата полимиксина 61.4%. Общий выход сульфата полимиксина от антибиотика, сорбированного катионитом из культуральной жидкости , 38%.
Предмет изобретени
Способ получени антибиотика полимиксина из культуральной нсидкости В. Polymyxa. отличающийс тем, что, с целью получени препарата высокой эффективности , культуральную жидкость обрабатыв ают щавелевой кислотой, бактериальные клетки и выпавшие соли отфильтровывают, а прозрачный фильтрат подщелачивают ед№ 111195 КИМ натром, после чего антибиотик адсорбируют из раствора на катионите КБ-4-П2 и элюируют 0,35 н раствором сол ной кислоты в метаноле , из которого неорганические примеси удал ют адсорбцией на катиониге СБС-1, а содержащий антибиотик раствор или нейтрализуют на апионите ЭДЭ-10, упаривают и сушат дл выделени твердои сол нокислой соли полимикси . нейтрализуют триэтилами ° добавл ют к полученному раствору сульфат триэтиламина. в метаноле, выпавший сульфат полимиксина отфильтровывают, промывают метанолом и сзшат в ваку)ме.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU579516A SU111195A1 (ru) | 1957-06-26 | 1957-06-26 | Способ получени антибиотика полимиксина |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU579516A SU111195A1 (ru) | 1957-06-26 | 1957-06-26 | Способ получени антибиотика полимиксина |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU111195A1 true SU111195A1 (ru) | 1957-11-30 |
Family
ID=48383848
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU579516A SU111195A1 (ru) | 1957-06-26 | 1957-06-26 | Способ получени антибиотика полимиксина |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU111195A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2492180C2 (ru) * | 2011-12-07 | 2013-09-10 | Учреждение Российской академии наук Центр "Биоинженерия" РАН | Способ получения фармацевтической субстанции полимиксина в |
-
1957
- 1957-06-26 SU SU579516A patent/SU111195A1/ru active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2492180C2 (ru) * | 2011-12-07 | 2013-09-10 | Учреждение Российской академии наук Центр "Биоинженерия" РАН | Способ получения фармацевтической субстанции полимиксина в |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US2528022A (en) | Purification of antibiotics by ion exchange procedures | |
US2541420A (en) | Purification of streptomycin by carboxylic acid type ion exchange resins | |
CN104892710B (zh) | 一种纯化还原型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法 | |
SU570326A3 (ru) | Способ выделени и очистки гидрохлорида 7-диметиламино-6деметил-6-деокситетрациклина | |
SU111195A1 (ru) | Способ получени антибиотика полимиксина | |
US3132994A (en) | Polymyxin purification | |
RU2492180C2 (ru) | Способ получения фармацевтической субстанции полимиксина в | |
Chaiet et al. | Phosphonomycin: Isolation from fermentation sources | |
SU117525A1 (ru) | Способ концентрировани и выделени стрептомицина | |
SU106451A1 (ru) | Способ извлечени стрептомицина и витамина В12 из нативного раствора стрептомицина | |
SU325757A1 (ru) | Способ стабилизации крови | |
SU654612A1 (ru) | Способ выделени цитохрома | |
RU2056942C1 (ru) | Способ ионообменного умягчения сока ii сатурации свеклосахарного производства | |
US2580195A (en) | Method of purifying 4-aminosalicylic acid | |
SU484682A3 (ru) | Способ получени 3-фтор- аланина | |
SU101164A1 (ru) | Парораспределительный механизм паровоздушного компаунд-насоса | |
SU268653A1 (ru) | Способ очистки теллура от примесей | |
RU2056941C1 (ru) | Способ выделения лизина из культуральной жидкости | |
SU306669A1 (ru) | Способ очистки эритромицина | |
SU538018A1 (ru) | Способ выделени и очистки кислой протеиназы из растворов | |
SU606814A1 (ru) | Способ очистки рассола хлористого натри | |
JPS5849540B2 (ja) | アミノ基とスルホン酸基とを併有する化合物の精製法 | |
DE1492049C3 (de) | Verfahren zur Gewinnung von Cephalosporin C aus einem dieses Antibiotikum neben Cephalosporin N enthaltenden fermentierten Medium | |
SU1540858A1 (ru) | Способ регенерации карбоксильного катионита из кальциевой в натриевую форму | |
SU465814A1 (ru) | Способ получени кристаллического флоримицина высокой степени чистоты |