SU1097282A1

SU1097282A1 - Method of differencial diagnosis of thyrotoxicosis

Info

Publication number: SU1097282A1
Application number: SU823544572A
Authority: SU
Inventors: Клариса Васильевна Седенко; Виктор Исаакович Шепотиновский; Зоя Ивановна Микашинович
Original assignee: Ростовский Ордена Дружбы Народов Медицинский Институт
Priority date: 1982-12-13
Filing date: 1982-12-13
Publication date: 1984-06-15

Abstract

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТИРЕОТОКСИКОЗА путем биохимического исследовани в крови ферментов, отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности и ускорени способа, в лейкоцитах и эритроцитах определ ют активность пируватдегидрогеназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ДЦГ) и при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%, ЛДГ в лейкоцитах на 2630% и повьшении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ «а 56-58%, ЛДГ на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-35%, ЛДГ на 40-46% - тиреотоксикоз II-III степени.THE METHOD OF DIFFERENTIAL DIAGNOSTICS OF TYREOTOXYCOSIS by biochemically reconstituted blood samples using a pattern of anatomy of an animal, which in order to increase the sensitivity and speed up the method, leukocytes and erythrocytes determine the activity of pyruvate dehydrogenase (GD) and lactate dehydrogenase and determine the activity of pyruvate dehydrogenase (GD) and lactate dehydrogenase and determine effec- 37% and in erythrocytes by 13-14%, LDH in leukocytes by 2630% and increase in LDH activity in erythrocytes by 36-92% compared with the norm diagnose thyrotoxicosis of 1 degree, and with a decrease in leukocyte activity P DG "a 56-58%, LDH by 57-60%, in erythrocytes PDG by 33-35%, LDH by 40-46% - thyrotoxicosis II-III degree.

Description

ОABOUT

vlvl

N9N9

С N9 Изобретение относитс к медицине, преимущественно дл совершенствовани метода диагностики нарушений функции щитовидной железы. Известен способ диагностики тирео токсикоза путем биохимического иссле довани крови, в частности изучени гликопротеидного обмена С О. Известен также способ диагностики нарушений функции щитовидной железы на основе определени активности сывороточных глютамикоаланиново и глютамикоаспарагиновой трансаминаз Г21 Недостатком известных способов вл етс отсутствие специфичности и невозможность вы влени начальных стадий тиреотоксикоза. Цель изобретени - повышение чувствительности и ускорение способа диагностики тиреотоксикоза. Указанна цель достигаетс тем, что согласно способу дифференциально диагностики тиреотоксикоза путем биохимического исследовани в крови ферментов в лейкоцитах и эритроцитах .определ ют активность пируватдегидро геназы (ПДГ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и при снижении активности ПДГ .в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%, ЛДГ в лейкоцитах на 26-30% и повышении активности ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой диагностируют тиреотоксикоз 1 степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58%, ЛДГ на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-35%, ЛДГ на 40-46% - тиреотоксикоз II-II1 степени. Способ осуществл етс следующим образом. У больного забирают из вены 5 мл крови в пробирку, содержащую 0,04 мл гепарина и 1,5 мл физиологического раствора. Путем центрифугировани ил отстаивани при комнатной температуре в течение 10-20 мин отдел ют плаз му, из которой центрифугированием при 1000 об/мкн в течение 10-12 мин выдел ют фракцию лейкоцитов. Лейкоциты освобождают от примеси эритроцитов с добавлением хлористого аммони и последующим центрифугированием Лейкоциты промывают физиологическим раствором и осаждают центрифугированием при указанных выше параметрах. Эритроциты очищают от примеси дру гих форменных элементов путем 2-3кратного отмывани физиологическим раствором с последующим центрифугированием . После последнего центрифугировани приготавливают лизат лейкоцитов в 1,5 мл дистиллированной воды и гемолизат эритроцитов в разведении 1:20. Активность ПДГ и ЛДГ определ ют с помощью тетразолиевого метода. Дл этого 0,4 мл лизата или гемолизата инкубируют в.среде, содержащей пируват (дл определени ПДГ) или лактат (дл ЛДГ) и активаторы: магний, АТФ, фосфатный буфер с рН 7,4 и 1 мл 0,1%-ного тетразолиевого синего, Спектрофотометрически при длине волны 570 нм смотр т изменение плотности против воды. Результаты выражают в ед./мл. Дл определени ЛДГ в инкубационную среду помимо активаторов добавл ют 0,02М НАД. Установлено, что у больных с первой степенью т жести тиреотоксикоза активность ЛДГ в лейкоцитах вы вл етс в пределах 108-116 ед/мл, а в эритроцитах 566-630 ед./мл, в то врем как у практически здоровых людей эти предельные границы ,активности фермента в лейкоцитах и эритроцитах 155-158 и 416-482 ед./мл соответственно . Активность ПДГ в лейкоцитах у больных с первой степенью тиреотоксикоза вы вл етс в пределах 2733 ед. /мл и в эритроцитах 232-245 ед./мл, в то врем как дл практически здоро .вых людей эти предельные границы актив нести фермента в лейкоцитах и эритроцитах 43-51 и 269-285 ед./мл. соответственно . Таким образом, при снижении активности ПДГ в лейкоцитах на 35-37% и в эритроцитах на 13-14%0 ЛДГ в лейкоцитах на 26-30% и повьш1ение ЛДГ в эритроцитах на 36-92% по сравнению с нормой став т диагноз: тиреотоксикоз I степени, а при снижении в лейкоцитах активности ПДГ на 56-58%, ЛДГ - на 57-60%, в эритроцитах ПДГ на 33-3-5%, ЛДГ на 40-46% став т диагноз: тиреотоксикоз II-III степени. Пример 1. Больна Г. 36 лет, поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на общую слабость, сердцебиение, раздражительность, потливость , бессоницу. Боли ноющего характера в области сердца. В течение последнего года стали по вл тьс несколько раз в неделю приступы учащенного сердцебиени .C N9 The invention relates to medicine, primarily for improving the method of diagnosing thyroid dysfunction. A known method for the diagnosis of thyroid toxicosis by biochemical blood tests, in particular the study of glycoprotein metabolism C O. There is also known a method for diagnosing thyroid gland disorders based on the determination of the activity of serum glutamicoalanine and glutamicasparagin transaminase G21. thyrotoxicosis. The purpose of the invention is to increase the sensitivity and speed up the method of diagnosing thyrotoxicosis. This goal is achieved by the fact that, according to the method of differential diagnosis of thyrotoxicosis, biochemical blood tests of enzymes in leukocytes and erythrocytes determine the activity of pyruvate dehydrogenase (PDG) and lactate dehydrogenase (LDH) and with a decrease in the activity of PDG in leukocytes 35-37% and erythrocytes by 13-14%, LDH in leukocytes by 26-30% and increase of LDH activity in erythrocytes by 36-92% compared with the norm diagnose thyrotoxicosis of 1 degree, and with a decrease in leukocyte activity of PDH by 56-58%, LDH is 57-60%, in erythrocytes PDG n a 33-35%, LDH 40-46% - thyrotoxicosis II-II1 degree. The method is carried out as follows. A patient is taken from a vein 5 ml of blood into a test tube containing 0.04 ml of heparin and 1.5 ml of saline. By centrifuging the sludge by settling at room temperature for 10-20 minutes, plasma is separated from which a leukocyte fraction is isolated by centrifugation at 1000 rpm for 10-12 minutes. Leukocytes are freed from the admixture of erythrocytes with the addition of ammonium chloride and subsequent centrifugation. The leukocytes are washed with saline and precipitated by centrifugation at the above parameters. The erythrocytes are purified from the admixture of other formed elements by washing them with a physiological solution 2-3 times, followed by centrifugation. After the last centrifugation, the lysate of leukocytes is prepared in 1.5 ml of distilled water and the erythrocyte hemolysate is diluted 1:20. The activity of PDH and LDH is determined by the tetrazolium method. To do this, 0.4 ml of lysate or hemolysate is incubated with a medium containing pyruvate (for determining PDH) or lactate (for LDH) and activators: magnesium, ATP, phosphate buffer with a pH of 7.4 and 1 ml of 0.1% Tetrazolium blue. Spectrophotometrically at 570 nm shows the change in density against water. Results are expressed in units / ml. To determine LDH, in addition to the activators, 0.02 M of NAD is added to the incubation medium. It has been established that in patients with first degree thyrotoxicosis, LDH activity in leukocytes is within 108-116 units / ml, and in erythrocytes 566-630 units / ml, while in practically healthy people these limits, enzyme activity in leukocytes and erythrocytes of 155-158 and 416-482 units / ml, respectively. PDG activity in leukocytes in patients with the first degree of thyrotoxicosis occurs within 2733 units. / ml and in erythrocytes of 232-245 units / ml, while for practically healthy people these limit limits are active to carry the enzyme in leukocytes and erythrocytes 43-51 and 269-285 units / ml. respectively. Thus, with a decrease in PDG activity in leukocytes by 35-37% and in erythrocytes by 13-14% 0 LDH in leukocytes by 26-30% and an increase in LDH in erythrocytes by 36-92% compared with the norm diagnosed with thyrotoxicosis I degree, and when PDG activity decreases by 56-58% in leukocytes, LDH - by 57-60%, in erythrocytes PDG by 33-3-5%, LDH by 40-46% is diagnosed with II-III thyrotoxicosis . Example 1. Sick G., 36 years old, was admitted to the endocrinology department with complaints of general weakness, palpitations, irritability, sweating, insomnia. Pain whining character in the heart. During the last year, heart palpitations appeared several times a week.

Объективно: кожа влажна , щитовидна железа внешне не изменена, незначительный блеск глаз, пульс 96 уд./мин АД 110/60 мм рт. ст. В св зи с подозрением на тиреотоксикоз из локтевой вены вз то 5 мл крови дл определени в лейкоцитах и эритроцитах активности ПДГ и ЛДГ. Результаты исследований: активность ПДГ в лейкоцитах 28,2 ед./мл, т.е. на 35% ниже, чем у здоровых людей, в эритроцитах 232,4 ед./мл, что на 13% ниже; активность ДЦГ в лейкоцитах 110,3 ед./мл, что на 26% ниже, чем у здоровых людей тогда как в эритроцитах активйость ЛДГ повьпиена до 566,2 ед,/мл, что на. 36% превышает данные, характерные дл группы здоровых людей. Вы вленный характер изменени активности ферментов в клетках крови в сочетании с данными клинического обследовани позволил поставить диагноз нарушени функции щитовидной железы с тиреотоксикозом I степени.Objectively: the skin is moist, the thyroid gland is not externally changed, a slight glitter of the eyes, a pulse of 96 beats / min HELL 110/60 mm Hg. Art. In connection with suspected thyrotoxicosis, 5 ml of blood was taken from the ulnar vein to determine the activity of PDH and LDH in leukocytes and erythrocytes. The research results: the activity of PDG in leukocytes is 28.2 units / ml, i.e. 35% lower than in healthy people, 232.4 units / ml in red blood cells, which is 13% lower; The activity of DCH in leukocytes is 110.3 units / ml, which is 26% lower than in healthy people, whereas in erythrocytes the activity of LDH increases to 566.2 units / ml, which is on. 36% more than the data characteristic for a group of healthy people. The revealed nature of changes in the activity of enzymes in blood cells in combination with clinical examination data made it possible to diagnose thyroid dysfunction with first-degree thyrotoxicosis.

Пример 2. Больна И. 36 лет. Поступила в эндокринологическое отделение с жалобами на раздражительность , потливость, утомл емость, головные боли, сердцебиение. Похудела за последний год на 10 кг. Считает себ больной 3 года.Example 2. Ill I. 36 years. Entered the endocrinology department with complaints of irritability, sweating, fatigue, headaches, palpitations. I lost 10 kg over the last year. He considers himself a patient for 3 years.

Данные обследовани : на ЭКГ диффузные изменени в миокарде, пульс 100 уд./мин. ДД 140/80 мм рт. ст. Лабораторное обследование: активность 1ЩГ и ДЦГ в лейкоцитах соответственно 19 и 65 ед./мл, что на 59,6% и 58,4% ниже,.чем у здоровых людей, в эритроцитах эти величины соответствуют 187 ед./мл и 250 ед./мл, что ниже на 33 и 40%, чем у здоровых людей. На основании лабораторных данных поставлен диагноз: тиреотоксикоз II-1II степени.Examination data: ECG diffuse changes in the myocardium, pulse 100 beats / min. DD 140/80 mm RT. Art. Laboratory examination: the activity of 1CG and DCH in leukocytes is 19 and 65 units / ml, respectively, which is 59.6% and 58.4% lower, than in healthy people, in erythrocytes these values correspond to 187 units / ml and 250 units . / ml, which is lower by 33 and 40% than in healthy people. On the basis of laboratory data diagnosed with thyrotoxicosis II-1II degree.

Предлагаемый способ диагностики тиреотоксикоза в 7 раз более чувствителен , чем известный, и позвол ет вы вл ть нарушени функции щитовидной железы на несколько мес цев ранее в зависимости от индивидуального течени и т жести развити заболевани у каждого больного (в среднем от 5 до 12 мес). Это дает возможность своевременного начала правильного лечени и предупреждени перехода заболевани во II и III стадии.The proposed method for the diagnosis of thyrotoxicosis is 7 times more sensitive than the known method, and it can reveal thyroid dysfunction several months earlier depending on the individual course and severity of the disease in each patient (average 5 to 12 months) . This enables the timely commencement of proper treatment and the prevention of the transition of the disease in stage II and stage III.

Claims

METHOD FOR DIFFERENTIAL DIAGNOSTICS OF THYROTOXICOSIS by means of biochemical studies of enzymes in the blood, characterized in that, in order to increase the sensitivity and accelerate the method, the activity of pyruvate dehydrogenase (PDH) and lactate dehydrogenase (LDH-35 and LDH) is determined in the presence of LDH and % in erythrocytes by 13-14%, LDH in leukocytes by 2630% and an increase in LDH activity in erythrocytes by 36-92% compared with the norm 58%, LDH by 57-60%, in erythrocytes of PDH by 33-35%, LDH by 40-46% - thyrotoxicosis II-III degree. 8

SO ke

00 ke