SK283372B6

SK283372B6 - Zlúčeniny zo skupiny 15-deoxyspergualínových analógov, spôsob ich prípravy, medziprodukty tohto spôsobu, terapeutický prostriedok a použitie

Info

Publication number: SK283372B6
Application number: SK636-96A
Authority: SK
Inventors: Luc Lebreton; Patrice Renaut; Christine Dumas
Original assignee: Fournier Industrie Et Sante
Priority date: 1995-05-17
Filing date: 1996-05-16
Publication date: 2003-06-03
Also published as: UA42798C2; ZA963775B; NO961891D0; FR2734263B1; DE69603541D1; GR3031684T3; EP0743300B1; HUP9601323A2; HUP9601323A3; FR2734263A1; SK63696A3; DE69603541T2; US5733928A; NZ286582A; AU5208196A; CA2176670A1; CN1143075A; KR960041153A; TW354782B; CZ142396A3

Abstract

Sú opísané zlúčeniny vybrané zo skupiny zahrňujúcej: (i) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-, a R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu, a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm, ktorého konfigurácia môže byť (RS) alebo (R); a (ii) adičné soli odvodené od uvedených zlúčenín. Ďalej je opísaný postup prípravy týchto zlúčenín, medziprodukty tohto postupu a ich použitie na prípravu liečiv a ako farmakologického činidla.ŕ

Description

Oblasť vynálezu

Vynález sa týka nových zlúčenín, ktorých štruktúra je podobná 15-deoxyspergualínu. Ďalej sa vynález týka spôsobu prípravy týchto nových zlúčenín, medziproduktov tohto postupu, terapeutického prostriedku a použitia týchto zlúčenín ako terapeuticky účinných látok, hlavne ako imunosupresív.

Doterajší stav techniky

Z doterajšieho stavu techniky je známy 15-deoxyspergualín (DSG), ktorý má nasledujúci štruktúrny vzorec:

NH0

IIII

H,N ^NH C CH NH NHNK, ¹ III

O OH pričom táto zlúčenina je bežne známa pod medzinárodne nechráneným označením „Gusperimus“. Táto zlúčenina prejavuje významný imunosupresívny účinok. Z doterajšieho stavu techniky sú známe mnohé publikácie, ktoré opisujú túto účinnosť, hlavne je možné citovať sériu článkov na túto tému v publikácii: „Immunomodulating Drugs“ - Annals of the New York Academy of Sciences, Vol. 685, str. 123 až 201.

Je však potrebné uviesť, že tento 15-deoxyspergualín nemá uspokojivú chemickú stabilitu, takže už dlhší čas sú vyvíjané snahy o získanie stabilnejších zlúčenín, napríklad:

i) náhradou α-hydroxyglycínovej skupiny 15-deoxyspergualínu rôznymi α-aminokyselinami alebo ω-kyselinami, ii) modifikáciou časti reťazca obsahujúceho guanidínovú skupinu.

Príklady týchto modifikovaných látok je možné nájsť v európskych zverejnených patentových prihláškach č. EP-A-0 181 592 a EP-A-0 105 193 a vo francúzskej zverejnenej patentovej prihláške č. FR-A-2 698 628.

Modifikácie uvedených zlúčenín, týkajúce sa hydroxyglycínového zvyšku, sú uvádzané napríklad v publikácii J. Antibiot., 38, 886 - 898 a J. Antibiot. 41, 1629 - 1643. Podľa týchto publikácií je zrejmé, že so žiadnou z uvedených štruktúr nie je možné dosiahnuť účinnosť väčšiu ako pri uvedenom DSG. Podobným spôsobom je možné uviesť, že modifikácie vykonané na spermidínovom zvyšku, čo bolo publikované napríklad v J. Antibiot. 40, 1303 - 1315, väčšinou viedli k strate účinnosti, pričom v snahe o získanie účinných zlúčenín sa prítomnosť spermidínovej väzby javí ako nevyhnutná.

Podstata vynálezu

Podľa uvedeného vynálezu bolo zistené, že zlúčeniny, ktoré majú štruktúru podobnú DSG, ale ktoré neobsahujú hydroxyglycínový zvyšok a spermidínový zvyšok, sú napriek tomu schopné prejavovať imunosupresívny účinok, pričom tento účinok môže byť ešte väčší ako pri DSG (to znamená 15-deoxyspergualíne).

Uvedený vynález sa teda týka nových zlúčenín, ktorých všeobecný vzorec je podobný 15-deoxyspergualínu, pričom tieto zlúčeniny sú chemicky stabilné a majú väčší účinok ako doteraz známe zlúčeniny podľa doterajšieho stavu techniky, hlavne zlúčeniny v oblasti imunosupresív.

Podstatný rozdiel medzi zlúčeninami podľa uvedeného vynálezu a známymi zlúčeninami podľa doterajšieho stavu techniky spočíva v podstatnej modifikácii centrálnej časti molekuly, kde je vytvorená skupina karbamátového typu. Okrem toho je nevyhnutné uviesť, že na rozdiel od všetkých doteraz známych zlúčenín podľa doterajšieho stavu techniky, ktoré sú podobné 15-deoxyspergualínu, obsahujú zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu skupinu aminoalkoholového typu namiesto polyamínového spojenia spermidinového typu.

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu sú teda zvolené zo súboru zahrnujúceho:

a) zlúčeniny všeobecného vzorca (I):

v ktorom:

A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-, R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm, ktorého konfigurácia môže byť neurčená (RS) konfigurácia alebo určená (R) konfigurácia, a

b) adičné soli odvodené od uvedených zlúčenín.

Do rozsahu uvedeného vynálezu rovnako patrí postup prípravy zlúčenín uvedeného všeobecného vzorca (I) a ich adičných solí, pričom tento postup zahrnuje nasledujúce stupne, ktoré spočívajú v

i) v odstránení chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

N-*,

Tío

IIII

NH NH A NIT O N «CH R,

II ^R‘ ^R(II), v ktorom

A znamená skupinu -NH-CO- alebo skupinu -CO-NH-, R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu, a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), a prinajmenšom jeden substituent R] znamená chrániacu skupinu amínovej skupiny oxykarbonylového typu , alebo benzylového typu, pričom ostatné substituenty R, prípadne znamenajú atóm vodíka, čo sa vykoná reakčným spracovaním, ktoré je prispôsobené povahe skupiny chrániacej aminoskupinu, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (I) vo forme voľnej bázy, alebo prípadne vo forme niektorej z adičných solí tejto zlúčeniny, prípadne ii) získanie iných adičných solí z tejto voľnej bázy alebo z adičnej soli tejto zlúčeniny získanej postupom podľa stupňa í).

Do rozsahu uvedeného vynálezu rovnako patrí použitie uvedených zlúčenín, vybraných zo súboru zahrnujúceho zlúčeniny všeobecného vzorca (I), ich netoxické adičné soli a zmesi týchto látok, na prípravu terapeutických prostriedkov na liečenie alebo prevenciu porúch imunitného systému alebo malárie alebo na použitie ako farmakologických reakčných činidiel.

Termínom „adičné soli“ sa v texte tohto vynálezu myslia adičné soli s kyselinami, ktoré sa získajú reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca (1) s minerálnou kyselinou alebo s organickou kyselinou. Medzi výhodné minerálne ky seliny, vhodné na prípravu soli, patrí kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná a kyselina sírová. Na prípravu solí je možné rovnako použiť organické kyseliny, pričom medzi tieto výhodné organické kyseliny patrí kyselina fumarová, kyselina maleínová, kyselina metánsulfónová, kyselina šťaveľová, kyselina citrónová a kyselina trifluóroctová.

Ako už bolo uvedené v súvislosti so zlúčeninami všeobecného vzorca (I), majú tieto zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu uhlík označený *C, ktorý v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm. V prípade, že R nepredstavuje atóm vodíka, potom zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa uvedeného vynálezu predstavujú racemické zlúčeniny, ak *C má (R, S) konfiguráciu a enantiomér, ak *C má (R) konfiguráciu, čo vyplýva z pravidiel štrukturálneho určenia zlúčenín uvedených v publikácii autorov Cahn, Ingold and Prelog. V prípade, že R predstavuje atóm vodíka, potom atóm uhlíka označovaný ako *C nie je asymetrický.

V praktických podmienkach sú výhodnými zlúčeninami všeobecného vzorca (I) podľa uvedeného vynálezu, ktoré obsahujú asymetrický atóm *C také zlúčeniny, v ktorých má uvedený uhlíkový atóm (R) konfiguráciu.

Uvedené zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu je možné získať bežne známymi postupmi podľa doterajšieho stavu techniky, pričom sa aplikuje bežný reakčný mechanizmus, hlavne reakcie, ktorými je možné získať skupiny karbamátového typu.

Ako už bolo uvedené, zahrnuje postup prípravy zlúčenín podľa uvedeného vynálezu všeobecného vzorca (I), ktorý bol odporúčaný v predchádzajúcom texte, odstránenie chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca (II). Pri praktickom vyhotovení tohto postupu sú týmito skupinami alebo touto skupinou R_b ktoré je potrebné pri tejto reakcii nahradiť vodíkovými atómami, chrániace skupiny aminoskupiny bežne známeho typu, hlavne z odboru chémie peptidových zlúčenín, ktoré slúžia na prechodné blokovanie „amínových“ skupín, ktoré nie sú celkom substituované.

Na tento účel je možné použiť nasledujúce skupiny, ktoré patria k vhodným skupinám na dosiahnutie daného cieľa podľa vynálezu:

a) skupiny oxykarbonylového typu, ako je napríklad alkoxykarbonylová skupina alebo benzyloxykarbonylová skupina:

BOC: t-butoxykarbonylová skupina (alebo 1,1-dimetyletoxykarbonylová skupina),

FMOC: 9-fluorenylmetoxykarbonylová skupina, Z: benzyloxykarbonylová skupina (alebo fenylmetoxykarbonylová skupina),

Z(p-OMe): 4-metoxybenzyloxykarbonylová skupina,

b) skupiny benzylového typu, ako je napríklad fenylmetylová skupina (Bn).

Z uvedených chrániacich skupín aminoskupiny je výhodnou skupinou podľa uvedeného vynálezu BOC skupina.

Postup prípravy zlúčenín všeobecného vzorca (I) alebo niektorej z ich adičných solí zahrnuje nasledujúce stupne, ktoré zahrnujú:

i) odstránenie chrániacich skupín zo zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

Ií s

R. R (II), v ktorom

R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-, •C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový' atóm s neurčenou konfiguráciou (R,S) alebo s určenou konfiguráciou (R), a prinajmenšom jeden substituent R] znamená chrániacu skupinu amínovej skupiny oxykarbonylového typu alebo benzylového typu, pričom ostatné substituenty R] prípadne znamenajú atóm vodíka, ktoré sa vykoná spracovaním tejto zlúčeniny prispôsobeným povahe chrániacej skupiny aminoskupiny, ako napríklad v prípade, že touto chrániacou skupinou aminoskupiny je skupina alkoxykarbonylového typu, sa toto spracovanie vykoná reakciou so silnou kyselinou, ako je napríklad kyselina trifluóroctová, alebo ak je touto chrániacou skupinou aminoskupiny skupina benzylového typu, potom sa toto spracovanie vykoná katalytickou hydrogenáciou v prítomnosti katalyzátora na báze paládia, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (I) vo forme voľnej bázy alebo vo forme niektorej zjej adičných solí, ii) prípadne nasleduje získanie inej ďalšej adičnej soli z tejto voľnej bázy alebo z jej adičnej soli získanej v predchádzajúcom stupni (i). V tomto stupni (ii) sa konverzia jednej adičnej soli na inú adičnú soľ vykoná prakticky cez zlúčeninu všeobecného vzorca (I) vo forme jej voľnej bázy alebo výmenou opačne nabitého iónu v prítomnosti prebytku kyseliny zodpovedajúcej soli, ktorá sa má získať.

Uvedenú zlúčeninu všeobecného vzorca (II) je možné pripraviť s použitím metódy vybranej z nasledujúcich variantov:

a) Variant A, ktorý· predstavuje postup pozostávajúci z nasledujúcich stupňov:

i) kondenzácia alkoholu všeobecného vzorca (III):

HO N *CH R,

I I

R, R (III), v ktorom znamená:

R atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

Ri predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), s chlórmravčanom alebo so symetrickým uhličitanom, ako je napríklad 4-nitrofenylchlórmravčan, v prítomnosti bázickej zlúčeniny, ako je napríklad trietylamín, v inertnom reakčnom rozpúšťadle a pri teplote miestnosti (to znamená v rozmedzí od asi 15 °C do asi 25 °C), načo potom nasleduje:

ii) reakcia zlúčeniny získanej v uvedenom stupni (i) s amínom všeobecného vzorca (IV):

II II

R.^ -C. .C. ,NH, ^l^NH^X Ν1Γ ^{2 ÍX}NH^X CK₃^ ² (IV), v ktorom

R, znamená chrániace skupiny aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina, v inertnom reakčnom rozpúšťadle a pri teplote pohybujúcej sa v rozmedzí od asi 25 °C do asi 50 °C za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

^R1x,n ⁰

R, (Π), v ktorom:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atóm vodíka alebo metylová skupina, *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), a

R, znamená chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina,

b) Variant B, ktorý predstavuje postup pozostávajúci z nasledujúcich stupňov:

i) reakcia kyseliny všeobecného vzorca (V):

O (V), v ktorom:

R₂ predstavuje chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad benzyloxykarbonylová skupina, s difenylfosforylazidom všeobecného vzorca (VI):

(C₄HjO)₂-P-N₃ o

(VI) v prítomnosti bázickej zlúčeniny, ako je napríklad trietylamín, v rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán, a pri teplote miestnosti, čím sa získa medziprodukt všeobecného vzorca (VII):

O

NH C CH₂ «j ° (VII), ii) takto získaná zlúčenina všeobecného vzorca (VII) sa podrobí prešmyku, známemu pod označením Curtiusova reakcia, pričom súčasne reaguje takto získaný izokyanát s alkoholom všeobecného vzorca (III):

^{Rl R} (III), v ktorom znamená:

R atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

R] predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, ktorá sa odlišuje od skupiny R₂ uvedenej skôr, ako je napríklad BOC skupina, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), v rozpúšťadle, ako je napríklad konkrétne toluén, pri teplote pohybujúcej sa v rozmedzí od asi 80 °C do asi 140 °C a v čase v rozmedzí od 5 do 50 hodín, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (VIII):

T¹ f o (VIII), v ktorom majú R, R_h R₂ a ‘C rovnaký význam ako bolo uvedené, iii) odstránenie chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca (VIII), získanej uvedeným spôsobom, špecifickým spracovaním tejto zlúčeniny, pri ktorom sa nahradí chrániaca skupina R₂ aminoskupiny atómom vodíka, ako napríklad v prípade, keď R₂ znamená benzyloxykarbonylovú skupinu, sa vykoná katalytická hydrogenácia v prítomnosti katalyzátora na báze paládia, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (IX):

T¹ T _HiNx(C_H1)₁,^nh_><nh^,o_X(cHi)/n_X(cHj<.ch^_hXr,

O o (IX), v ktorom R, R₁ a *C majú rovnaký význam ako bolo uvedené, iv) a potom nasleduje reakcia takto získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (IX) v stupni (iii) s kyselinou aminoiminometánsulfónovou v rozpúšťadle, ako je napríklad metanol, pri teplote miestnosti (to znamená pri teplote v rozmedzí približne od 15 °C do 25 °C) a počas 8 až 50 hodín, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

^r‘''nb-'^c'nh-'^(CHí,‘''a^c1<2''nh-'^c'o''^[CH1’⁴^^<CHí’²'' i

^R1 v ktorom:

(II),

R a *C majú rovnaký význam ako bolo uvedené,

A je skupina -CO-NH-, a

R, predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina, s výnimkou dvoch týchto skupín Rj viazaných na guanidínovú skupinu, kde každá predstavuje atóm vodíka, iv') alebo sa vykoná variant uvedeného stupňa (iv), pri ktorom sa do reakcie uvádza zlúčenina všeobecného vzorca (IX) so zlúčeninou všeobecného vzorca (X):

I ^R1^-n<»^CXsX^CH3 (X), v ktorom:

R, predstavuje chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad skupina BOC, v rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán, v prítomnosti bázickej zlúčeniny, hlavne trietylamínu, pričom táto reakcia sa vykonáva pri teplote miestnosti a v čase v rozmedzí od 8 hodín do 100 hodín za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

^R-No

II ^R. ^R(II), v ktorom:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atóm vodíka alebo metylová skupina,

Rj znamená chrániace skupiny aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R, S) alebo s konfiguráciou (R).

Zlúčeninu všeobecného vzorca (III):

Rl - NH - *CH - (CH2)2 - NH - (CH2)4 - OH

I I ^R> ^R (III), v ktorom:

R znamená metylovú skupinu, *C predstavuje uhlíkový atóm s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), a

R, znamená chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad skupina BOC, je možné pripraviť:

a) reakciou 4-aminobutanolu so zlúčeninou všeobecného vzorca:

R₁-NH-^,CH-(CH₂)2-O-S0₂-CH₃

I ch₃ v ktorom:

R] znamená chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad BOC skupina, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca:

Rj - NH - *CH - (CH2)2 - NH - (CH₂)₄ - OH

CH₃ načo sa potom zavedie chrániaca skupina aminoskupiny na voľnú amínovú skupinu, napríklad reakciou s t-butyldikarbonátom (BOC₂O), ak R| znamená skupinu BOC, pričom sa získa požadovaná zlúčenina všeobecného vzorca (III),

b) reakciou halogenidu všeobecného vzorca:

X-(CH₂)₄-O-R₃, v ktorom:

X znamená atóm halogénu, ako je napríklad atóm jódu alebo atóm brómu, a

R₃ predstavuje chrániacu skupinu hydroxylovej skupiny, hlavne tritylovú skupinu, so zlúčeninou všeobecného vzorca:

v ktorom:

R¹ znamená chrániacu skupinu aminoskupiny, ako je napríklad skupina BOC, pričom sa získa zlúčenina všeobecného vzorca:

Rj—NH— · CH—(CH₂)₂—N—(CH₂)₄—0—R₃

U-O načo sa potom podrobí táto zlúčenina selektívnemu odstráneniu chrániacej skupiny za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca:

CH₃ a do tejto zlúčeniny sa potom zavedie chrániaca skupina R! aminoskupiny, napríklad reakciou s t-butyldikarbonátom, ak R! predstavuje skupinu BOC, čím sa získa požadovaná zlúčenina všeobecného vzorca (III).

Zlúčenina všeobecného vzorca (III), v ktorej R znamená metylovú skupinu a R] znamená skupinu BOC, predstavuje novú zlúčeninu, ktorá patrí do rozsahu uvedeného vynálezu.

Zlúčeninu všeobecného vzorca (V):

x(CH₂)_6X χΝΗχ s NH C CHf

COOH (V), v ktorom:

R₂ znamená chrániacu skupinu aminoskupiny, hlavne skupinu Z (to znamená benzyloxykarbonylovú skupinu), je možné získať zo zlúčeniny vzorca:

Br—(CH₂) j—C—NH—CH₂—C00—C₂H_s

II o

následne vykonanými reakciami:

a) s kyanidom za vzniku zlúčeniny vzorca:

N-C— (CH₂) j—C—NH—CH₂—COO—C₂H_S

O

b) s roztokom hydroxidu sodného za vzniku kyseliny vzorca:

NC—(CH₂) ₅—C—NH—CH₂—COOH

c) s vodíkom v prítomnosti hydrogenačného katalyzátora za vzniku amínu vzorca:

h₂n— (CH₂) ₆—c—nh—ch₂—COOH

II o

>

d) a nakoniec s reakčným činidlom na zavedenie chrániacej skupiny aminoskupiny, ako je napríklad benzylchlórmravčan, čím sa získa požadovaná zlúčenina všeobecného vzorca (V), v ktorom R₂ znamená benzyloxykarbonylovú skupinu (Z).

Príklady uskutočnenia vynálezu

15-Deoxyspergualínové analógy, spôsob ich prípravy, medziprodukty tohto spôsobu, použitie týchto zlúčenín a výsledky získané pri vykonávaní farmakologických testov, pri ktorých boli testované zlúčeniny podľa vynálezu a po rovnávané so známymi zlúčeninami podľa doterajšieho stavu techniky, budú v ďalej bližšie vysvetlené a uvedené v nasledujúcich príkladoch vyhotovení, ktoré sú iba ilustratívne a nijako neobmedzujú rozsah tohto vynálezu. Použitá nomenklatúra v týchto príkladoch zodpovedá odporúčanej nomenklatúre v Chemical Abstracts; to znamená ester typu „t-butyL.-oát“ bude uvádzaný ako 1,1-dimetyletylester kyseliny...-ovej.

V tejto príkladovej časti budú najprv uvedené „Prípravy“, ktoré sa vzťahujú na prípravu medziproduktov podľa uvedeného vynálezu, a potom „Príklady“, ktoré opisujú postup prípravy zlúčenín podľa vynálezu.

V prípade, že zlúčeniny vo svojej štruktúre obsahujú asymetrický atóm, potom neuvedenie žiadneho špecifického označenia alebo označenie (R, S) znamená, že ide o v podstate ekvimolekulárnu zmes dvoch enantiomérov (to znamená „racemickú“ zlúčeninu). Ak budú tieto zlúčeniny označené symbolom (R) alebo (S) bezprostredne po identifikácii polohy substituenta, potom toto označenie znamená, že uhlíkový atóm, ku ktorému je pripojený tento substituent, má konfiguráciu (R) alebo konfiguráciu (S), čo zodpovedá pravidlám podľa Cahna, Ingolda a Preloga.

Spektrálne charakteristiky vzťahujúce sa na signály získané metódou nukleárnej magnetickej rezonancie (NMR) sú uvádzané pre protón (’H) a pre izotop uhlíka 13 (^l3C) a znamenajú nasledovné: chemický posun vzhľadom na tetrametylsilánový signál a v zátvorke uvádzaný tvar signálu (s pre singlet, d pre dublet, t pre triplet, q pre kvadruplet, m pre multiplet, bs pre pás signálu) a číslo protónu, na ktorý sa daný signál vzťahuje. Kvôli identifikácii boli ’H NMR spektrá vykonávané pri 300 MHz.

Príprava I

Postup prípravy bis-(l,l-dimetyletyl)esteru kyseliny 3-[[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-21 -[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]-12,15-dioxo-16-oxa-2,4,11,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiovej

Podľa tohto postupu bol 1 gram (čo predstavuje

2.89.10^- ³ mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [3-[[(l, 1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]propyl]-(4-hydroxybutyl)karbamovej rozpustený v 20 mililitroch tetrahydrofúránu (THF), načo bolo pridaných 0,45 gramu (čo predstavuje

4.5.10^- ³ mól) trietylamínu a potom nasledoval prídavok roztoku obsahujúceho 0,58 gramu (čo predstavuje 2,89.10'³mól) 4-nitrofenylchlórmravčanu v 5 mililitroch THF. Takto získaná reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 15 hodín pri teplote miestnosti, načo bol pridaný roztok obsahujúci 1,2 gramu (čo je 2,89.10³ mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 13-amino-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-12-oxo-2,4,ll-triazatridec-2-enovej v 6 mililitroch THF a takto získaná reakčná zmes bola potom zahriata na teplotu 40 °C a premiešavaná pri tejto teplote počas 5 hodín. Po skoncentrovaní tejto reakčnej zmesi za zníženého tlaku bol získaný zvyšok prečistený chromatografickou metódou pri strednom tlaku na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes mctylcyklohexánu a etylacetátu v objemovom pomere 7:3a potom čistý etylacetát a týmto uvedeným spôsobom bol získaný požadovaný produkt vo forme transparentného oleja.

Výťažok: 1 gram (44 %).

’H NMR (CDClj):

1,3-1,9 (m, 50H), 3,05 - 3,55 (m, 1 OH),

3,85 (d, 2H), 4,10 (t, 2H),

4,7-5,3 (bs, 1 H), 5,4 - 5,6 (bs, IH),

6,0 - 6,2 (bs, IH), 8,3 - 8,5 (bs, IH),

11,5 (s, IH).

Príklad 1

Postup prípravy tris(trifluóracetátu) [4-[(3-aminopropyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6-[aminoiminometyl)aminojhexyljacetamidu

Podľa tohto príkladu bola pripravená zmes obsahujúca 1 gram (čo predstavuje 1,27.10^-3 mól) zlúčeniny získanej postupom podľa uvedenej prípravy I v 10 mililitroch dichlórmetánu a 10 mililitroch kyseliny trifluóľoctovej, načo bolo toto reakčné médium premiešavané počas 15 hodín pri teplote miestnosti. Použité rozpúšťadlá boli potom odstránené za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok bol potom prečistený chromatografickou metódou za stredného tlaku (MPLC) na oxide kremičitom typu RP18 (veľkosť čiastočiek 5 až 20 pm), pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes etanolu, vody a kyseliny trifluóroctovej v objemovom pomere 2 : 7,5 : 0,5. Frakcie obsahujúce čistý produkt boli potom skoncentrované za zníženého tlaku, tento podiel bol opätovne rozpustený vo vode a lyofilizovaný, čím bolo získaných 0,78 gramu požadovaného produktu vo forme transparentnej bielej amorfnej pevnej látky.

Výťažok: 84 %.

’H NMR (DMSO-d₆):

1,2 - 1,55 (m, 8H), 1,6-1,75 (m, 4H),

1,8-1,95 (m, 2H), 2,8 - 3,1 (m, 1 OH),

3,55 (d, 2H), 3,95 (t, 2H),

6,7 - 7,4 (m, 4H), 7,55 (t, 1 H),

7,75 - 8,00 (m, 4H), 8,5 - 8,65 (m, 3H).

^I3C NMR (D₂O/dioxan-h₈):

23,05, 24,55, 26,15, 26,20, 26,30, 28,95, 31,05, 37,35, 39,95,41,88, 45,24, 48,18, 65,71, 158,0, 159,0,178,5.

Príklad 1 bis

Postup prípravy tris(hydrochloridu) [4-[(3-aminopropyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6-[aminoiminometyl)aminojhexyljacetamidu

Podľa tohto príkladu bol pripravený roztok obsahujúci

3,5 gramu zlúčeniny podľa príkladu 1 (čo predstavuje

4,8.10^-3 mól) v 7 mililitroch bezvodého etanolu, načo bolo pridaných 10 mililitrov 1,3 M roztoku chlorovodíka v etanole, pričom tento prídavok bol vykonaný po kvapkách pri teplote 0 °C. Po dokončení tohto pridávania bola reakčná zmes premiešavaná počas 30 minút a získaná zrazenina bola potom odfiltrovaná. V ďalšom postupe bola získaná pevná látka premytá bezvodým etanolom, usušená za použitia vákua pri teplote v rozmedzí od 35 °C do 40 °C, čím bol získaný požadovaný produkt (v množstve 1,72 gramu) vo forme hygroskopického bieleho prášku.

Výťažok: 1,72 gramu (72 %). Teplota topenia: 107,5 °C.

Príprava II

Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 3-[[4-(tris)fenyl]metoxy)butyl](fenylmetyl)amino]-l-(R)-metylpropyljkarbamovej

Podľa tohto uskutočnenia bol pripravený roztok obsahujúci 3,77 gramu (čo predstavuje 13,5.10^-3 mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [3-(fenylmetylamino)-l-(R)-metylpropyljkarbamovej kyseliny v 270 mililitroch butanolu, načo bolo pridaných 12 gramov (čo predstavuje 27,1.10^-3mól) l-jód-4-[tris(fenyl)metoxyjbutánu a 3,74 gramov (čo predstavuje 27,1.10^-3 mól) uhličitanu draselného. Táto reakčná zmes bola potom premiešavaná pri teplote v rozme6

1,59 (m, 6H),

3,0 (bs, 2H),

5,70 (s, IH), dzí od 95 °C do 100 °C počas 48 hodín. Po ochladení bola táto reakčná zmes sfiltrovaná a skoncentrovaná za zníženého tlaku. Získaný zvyšok bol potom vložený do dichlórmetánu a premytý vodou. Po skoncentrovaní organickej fázy za zníženého tlaku bol takto získaný produkt prečistený chromatografíckou metódou na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes hexánu a etylacetátu v objemovom pomere 80 : 20, pričom týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme oleja. Výťažok: 6 gramov (75 %).

[a]_D ²⁴=-0,22 (c = 1,8, CHClj). ‘H NMR (CDClj): 1,02 (d, 3 H), 1,40 (s, 9H),

2,38 (m, 3H), 2,55 (m, 1 H), 3,40 (d, IH), 3,6 (d, 2H), 7,21 - 7,43 (m, 20H).

Príprava III Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru (hydrochlorid)kyseliny 3-[[4-hydroxybutyl]amino]-l -(R)-metylpropyl]karbamovej

Podľa tohto uskutočnenia bolo 4,94 gramov (čo predstavuje 8,33.10’³ mól) zlúčeniny pripravenej postupom podľa prípravy II rozpustených v 230 mililitroch 95 %-ného etanolu (to znamená približne zmes etanolu a vody v objemovom pomere 95/5), načo bolo pridaných 4,37 mililitra

4.3 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej HCl v 95 % etanolu a 1 gram 5 %-ného paládia na aktívnom uhlí. Takto pripravená reakčná zmes bola potom hydrogenovaná počas 40 hodín pri atmosférickom tlaku a pri teplote miestnosti. Použitý katalyzátor bol potom odfiltrovaný a filtrát bol skoncentrovaný za zníženého tlaku. Podľa tohto postupu bolo po prečistení, ktoré bolo vykonané chromatografíckou metódou na silikagéli s použitím zmesi chloroformu a metanolu v objemovom pomere 9 : 1 ako eluačného činidla, získaných 2,09 gramu požadovaného produktu. Potom bol tento produkt premytý etyléterom, čím bol získaný požadovaný čistý produkt vo forme bielej kryštalickej pevnej látky.

Výťažok: 1,6 gramov (64 %). Teplota topenia: 135 °C.

[a]_D ²²=-7,6° (c =1, CHClj).

Príprava IV Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [3 -[(4-hydroxybutyl)( 1,1 -dimetylctoxykarbonyljamino] -1 -(R)-metylpropyl]karbamovej

Podľa tohto uskutočnenia bola pripravená zmes, ktorá obsahovala 1,54 gramu (čo predstavuje 5,18.10^-3 mól) zlúčeniny pripravenej postupom podľa prípravy III, 8 mililitrov dioxanu a roztok obsahujúci 0,77 gramu (čo predstavuje 7,26.10^-3 mól) uhličitanu sodného v 5,7 mililitra vody. Táto reakčná zmes bola potom ochladená na teplotu 5 °C, načo bol k tejto reakčnej zmesi pridaný roztok obsahujúci

1,13 gramu (čo predstavuje 5,18.10^-3 mól) diterc.-butyldikarbonátu BOC₂O) v 3 mililitroch dioxanu a táto reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 15 hodín. Po prídavku 10 mililitrov vody bola vykonaná extrakcia etylacetátom a organická fáza bola potom skoncentrovaná za zníženého tlaku. Po prečistení chromatografíckou metódou na silikagéli, s použitím zmesi hexánu a etylacetátu v objemovom pomere 50 : 50 ako eluačného činidla, bol získaný požadovaný produkt vo forme bezfarebného viskózneho oleja. Výťažok: 1,82 gramu (97 %). [a]_D ²²= +4,25 (c = 2, CHClj).

1,44- 1,46 (2s, 18H),

3,20 (m, 4H),

4,41 - 4,56 (2 bs, IH).

'H NMR (CDClj):

0,87 (d, 3H), 1,50- 1,70 (m, 6H) 3,67 (t, 3H),

Príprava V Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [3-[N-[4-[(4-nitrofenoxy)karbonyloxy]butyl]-N-[l,l-dimetyletoxykarbonyljaminoj-1 -(R)-metylpropyl]karbamovej

Podľa tohto uskutočnenia bol pripravený roztok obsahujúci 2,73 gramov (čo predstavuje 7,57.10^-3 mól) zlúčeniny získanej postupom podľa predchádzajúcej prípravy IV v 55 mililitroch toluénu a 0,62 mililitra (čo predstavuje

7.7.10^- ³ mól) pyridínu, načo bolo pridaných 1,6 gramu (čo predstavuje 7,7.10^-3 mól) 4-nitrofenylchlórmravčanu. Táto reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 3 hodín a vytvorené soli boli potom odfiltrované. Získaný filtrát bol skoncentrovaný za zníženého tlaku a potom bol tento podiel prečistený chromatografíckou metódou na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes dichlórmetánu a etylacetátu v objemovom pomere 90 : 10, a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt. Výťažok: 3,1 gramov (78 %).

’H NMR (CDClj):

1,15 (d, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,46 (s, 9H),

1,5 -1,8 (m, 6H), 3,24 (m, 4H), 3,63 (m, IH),

4.30 (t, 2H), 7,39 (d, 2H), 8,28 (d, 2H).

Príprava VI Postup prípravy' bis(l ,l-dimetyletyl)esteru kyseliny 3-[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-21 -[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]-24-(R)-metyl-12,15-dioxo-16-oxa-2,4,11,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiovej

Podľa tohto uskutočnenia bolo 2,8 gramov (čo predstavuje 5,33.10^-3 mól) zlúčeniny získanej podľa uvedenej prípravy V rozpustených v 300 mililitroch THF, načo bolo pridaných 0,85 mililitra (čo predstavuje 6,1.10^-3 mól) trietylamínu a roztok obsahujúci 2,54 gramov (čo predstavuje

6.1.10^- ³ mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 13-amino-3-[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-12-oxo-2,4,l 1 -triazatridec-2-enovej kyseliny v 50 mililitroch tetrahydrofuránu THF. Takto získaná reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 4 hodín pri teplote miestnosti a potom bola skoncentrovaná za zníženého tlaku. Získaný pevný zvyšok bol potom prečistený chromatografíckou metódou na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes hexánu a etylacetátu v objemovom pomere 30 : 70 a potom 10 : 90, a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme svetložltej pevnej látky. Výťažok: 3,85 gramu (90,2 %).

[a]_D ²⁰=+0,4 (c = 2, CHClj).

’H NMR (CDClj): 1,15 (d, 3H), 3,25 (m, 6H),

3,83 (d, 2H), 5,60 (bs, IH),

8.31 (s, IH),

Príklad 2 Postup prípravy tris(trifluóracetátu) [4-[(3-(R)aminobutyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6-(aminoiminometylaminojhexyl] acetamidu

Podľa tohto uskutočnenia bolo 3,7 gramu (čo predstavuje 4,6.10^-3 mól) zlúčeniny získanej postupom podľa uve

1,3 -1,70 (m, 50H),

3,39 (q, 2H),

4,14 (t, 2H),

5,60 (bs, IH),

11,50 (s, IH).

3,63 (m, IH),

4,6 (bs, IH),

6,13 (bs, IH), denej prípravy VI ochladené na teplotu 0 °C v nádobe s guľatým dnom, načo bolo pridaných 37 mililitrov trifluóroctovej kyseliny. Takto získaná reakčná zmes bola premiešavaná počas 15 hodín pri teplote v rozmedzí od 5 do 10 °C, načo bola skoncentrovaná za zníženého tlaku. Získaný surový produkt bol potom prečistený chromatografickou metódou na oxide kremičitom typu RP18 a s použitím zmesi vody, acetonitrilu a trifluóroctovej kyseliny v objemovom pomere 70 : 15 : 15 ako eluačného činidla a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme hygroskopickej bielej pevnej látky.

Výťažok: 3,1 gramu (čo je 92 %). [a]_D ²⁴ = +0,89 (c = 2, CHjOH).

'H NMR (DMSO-d₆):

1,26 (m, 4H),

1,75 (m, 1H),

3,28 (m, 1H),

7,25 (t, 1H),

7,98 (s, 3H),

1,18 (d, 3H),

1,61 (m,4H),

2.85 -3,20 (m, 8H),

3,96 (bs, 2H),

7.86 (t, 1H),

8,62 (s, 2H).

^I3C NMR (D₂O + dioxán):

17,93,22,98, 26,06,26,14, 26,23,28,49,

1,41 (m, 4H),

1,91 (m, 1H),

3,54 (d, 2H),

7,64 (s, 1H),

7,98 (s, 3H),

28,91, 31,13, 39,89,41,79, 44,31,44,52,

Príklad 2bis

Postup prípravy tris(hydrochloridu) [4-[(3-(R)-aminobutyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6-[aminoiminometylamino)hexyl]acetamidu

Podľa tohto uskutočnenia bol pripravený roztok obsahujúci 200 miligramov (čo predstavuje 0,27.10^-3 mól) zlúčeniny, ktorá bola pripravená postupom podľa príkladu 2 a 0,5 mililitra etanolu, načo bolo pridaných 0,235 mililitra 10,4 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej v etanole. Takto získaná zmes bola potom premiešavaná počas 15 minút pri teplote miestnosti a potom boli pridané 2 mililitre diizopropyléteru. Takto získaný vyzrážaný produkt bol potom oddelený dekantovaním, ďalej bol opláchnutý diizopropyléterom a potom bol znova rozpustený v 3 mililitroch vody a lyofilizovaný, čím bol pripravený požadovaný produkt vo forme amorfnej pevnej bielej látky. Výťažok: 117 miligramov (85 %). [ct]_D ^22,5= +1,45 (c = 2, CHjOH).

'H NMR (DMSO-d₆):

1,21 (d, 3H), 1,26 (m, 4H), 1,42 (m, 4H),

1,88 (m, 1 H), 2,04 (m, 1 H),

3,35 - 3,70 (m, 3H),

7,32 (t, 1 H), 7,80 (t, 1 H),

8,24 (s, 3H), 9,16 (s, 2H).

1,64 (m, 4H),

2,89-3,10 (m, 8H),

3,97 (bs, 2H),

7,92 (t, 1H),

Príprava VII

Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [3-[N-[4-hydroxybutyljamino]-1 -(R,S)-metylpropyl]karbamo vej

Podľa tohto uskutočnenia bol pripravený roztok, ktorý obsahoval 6,2 gramov (čo predstavuje 23,25.10^-3 mól) 1,1-dimetyletylesteru [1 -(R,S)-metyl-3-[(metylsulfonyl)oxy]propyljkarbamovej kyseliny, v 40 mililitroch 1,2-dimetoxyetánu, načo bol k tomuto roztoku pridaný roztok obsahujúci

4,14 gramov (čo predstavuje 46,5.10^-3 mól) 4-aminobutanolu v 10 mililitroch 1,2-dimetoxyetánu, pričom tento prídavok bol vykonaný po kvapkách. Takto získaná reakčná zmes bola zahrievaná pri teplote varu pod spätným chladičom počas 18 hodín a potom bola skoncentrovaná za zníženého tlaku. Takto získaný surový produkt bol prečistený chromatografickou metódou na silikagéli s použitím zmesi etylacetátu, etanolu a 33 %-ného vodného roztoku amoniaku v objemovom pomere 6 : 3 : 0,1 ako eluačného činidla a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme oleja.

Výťažok: 2,5 gramu (41,5 %).

'H NMR (CDClj):

1.14 (d, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,5-1,8 (m, 6H),

2,64 (m, 4H), 3,58 (t, 2Η), 3,71 (m, 1H),

4,50 (d, 1H).

Príprava VIII

Postup prípravy 1,1 -dimetyletylesteru kyseliny [3-[N-(4-hydroxybutyl)-N-( 1,1 -dimetyletoxykarbonyljamino]-1 -(R,S)-metylpropyl]karbamovej

Postup podľa tohto uskutočnenia sa vykonával rovnakým spôsobom ako je uvedené v príprave IV, pričom ako východiskové zlúčeniny boli použité zlúčeniny získané postupom podľa prípravy VII a požadovaný produkt bol získaný vo výťažku 70 %.

'H NMR (CDClj):

1.15 (d, 3H), 1,44- 1,46 (s, 18H),

1,5-1,7 (m, 6H), 3,20 (m, 4H), 3,67 (t, 3H),

4,39-4,56 (2 bs, 1H).

Príprava IX

Postup prípravy bis(l,l-dimetyletyl)esteru kyseliny [3-[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-21 -[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]-24-(R,S)-metyl-12,15-dioxo-16-oxa-2,4,11,14,21,25 -hexaazahexakos-2-endiovej

Podľa tohto postupu bolo 1,8 gramu zlúčeniny získanej postupom podľa prípravy VIII, pozri vyššie, rozpustené v 36 mililitroch tetrahydrofuránu THF, načo bolo k tomuto roztoku pridaných 1,1 gramu (čo predstavuje 7,8.10^-3 mól) trietylamínu a 1,10 gramu (čo predstavuje 5,45.10^-3 mól) 4-nitrofenylchlórmravčanu. Takto získaná reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 15 hodín a potom bol pridaný roztok obsahujúci 2,1 gramov (čo predstavuje 5,06.10^-3mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 13-amino-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]- i 2-oxo-2,4,11 -triazatridec-2-cnovej v 30 mililitroch tetrahydrofuránu THF a takto pripravená reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 18 hodín. Týmto spôsobom vznikla pevná látka, ktorá bola odfiltrovaná a roztok bol skoncentrovaný za zníženého tlaku, pričom získaný zvyšok bol prečistený chromatografickou metódou na silikagéli s použitím zmesi metylcyklohexánu a etylacetátu v objemovom pomere 50 : 50 a potom 20 : 80 ako eluačného činidla a týmto uvedeným spôsobom bol získaný požadovaný produkt vo forme oleja.

Výťažok: 0,97 gramu (24,2 %).

'H NMR (CDClj):

I, 15 (d, 3H), 1,20- 1,80 (m, 50H),

3,26 (m, 6H), 3,39 (q, 2H), 3,62 (m, 1 H),

3,83 (d, 2H), 4,12 (m, 2H), 4,60 (bs, 1H), 5,60 (bs, 1H), 6,13 (bs, 1H), 8,30 (t, 1H),

II, 49 (s, ÍH).

Príklad 3

Postup prípravy tris(trifluóracetátu) [4-[(3-(R,S)-aminobutyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6-(aminoiminometylamino)hexyl]acetamidu

Podľa tohto uskutočnenia bolo 0,95 gramov (čo predstavuje 1,18.10^-3 mól) zlúčeniny pripravenej postupom podľa prípravy IX rozpustené v 10 mililitroch dichlórmetánu, načo bolo pridaných 10 mililitrov kyseliny trifluóroctovej.

Takto pripravená reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 24 hodín pri teplote miestnosti, načo bola skoncentrovaná za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok bol vyčistený chromatografickou metódou na silikagéli RP18-type s použitím zmesi acetonitrilu, vody a kyseliny trifluóroctovej v objemovom pomere 15 : 80:5 ako eluačného činidla. Po lyofilizovaní čistých frakcií bol získaný požadovaný produkt vo forme bielej pevnej látky.

Výťažok: 580 miligramov (66 %). 'H NMR (DMSO-d₆):

1,18 (d, 3H),

1,61 (m,4H),

2,85-3,10 (m, 8H),

1,26 (m, 4H),

1,74 (m, IH),

3,28 (m, IH),

3,96 (t, 2H), 7,23 (t, IH),

7,84 (t, 1 H), 7,93 (s, 3H), ^l3C NMR (D₂O + dioxan-h₈):

1,41 (m,4H),

1,91 (m, IH),

3,54 (d, 2H),

7,58 (t, IH),

8,56 (m, 2H).

18,02, 23,09, 26,17, 26,22, 26,30, 28,58,

29,00, 31,24,40,00,41,88, 44,40,44,63,

46,10,48,19,65,72,157,55,159,55,172,82.

Príprava X

Postup prípravy etylesteru N-(6-kyanohexanoyl)glycínu

Podľa tohto uskutočnenia bolo 23,73 gramov (čo predstavuje 84,7.10^-3 mól) etylesteru N-(6-brómhexanoyl)glycínu rozpustených v 200 mililitroch etanolu, načo bolo pridaných 6,5 gramov (čo predstavuje 0,1 mól) práškového kyanidu draselného. Takto získaná reakčná zmes bola zahriata k varu pod spätným chladičom a pri tejto teplote varu pod spätným chladičom bola premiešavaná počas 15 hodín. Po skoncentrovaní tejto reakčnej zmesi za zníženého tlaku bol získaný zvyšok vložený do dichlórmetánu a organická fáza bola premytá vodným roztokom chloridu sodného. Organická fáza bola usušená a skoncentrovaná za zníženého tlaku, čím bol pripravený požadovaný produkt.

Výťažok: 19 gramov (99 %).

'H NMR (CDClj):

1,29 (t, 3H), 1,45 - 1,55 (m, 2H),

1,6 - 1,8 (m, 4H), 1,27 (t, 2H), 2,36 (t, 2H),

4,03 (d, 2H), 4,22 (q, 2H), 5,35 - 6,05 (bs, IH).

Príprava XI

Postup prípravy N-(6-kyanohexanoyl)glycínu

Podľa tohto postupu bola pripravená reakčná zmes obsahujúca 19 gramov (čo predstavuje 84.10^-ämól) zlúčeniny pripravenej postupom podľa prípravy X, ďalej 120 mililitrov 1,2-dimetoxyetánu a 120 mililitrov 1 M roztoku hydroxidu sodného, pričom táto reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 15 minút pri teplote miestnosti. K tejto reakčnej zmesi bolo potom pridaných 100 mililitrov vody a 200 mililitrov dichlórmetánu a táto reakčná zmes bola potom okyslená na hodnotu pH 1 za súčasného chladenia na ľadovom kúpeli. Získaná vodná fáza bola potom niekoľkokrát extrahovaná dichlórmetánom a organické fázy boli spojené, pričom tento spojený podiel bol usušený a skoncentrovaný za zníženého tlaku a týmto uvedeným postupom bola získaná požadovaná zlúčenina vo forme slamovo žltého oleja.

Výťažok: 10,2 gramov (61 %).

‘H NMR (CDClj):

1,45 - 1,55 (m, 2H), 1,6 - 1,8 (m, 4H),

2,3 (t, 2H), 2,36 (t, 2H), 4,08 (d, 2H),

6,15-6,25 (bs, IH).

Príprava XII

Postup prípravy N-(7-aminoheptanoyl)glycínu (sodná soľ)

Pri vykonávaní tohto postupu bolo 8,2 gramov (čo predstavuje 41,4.10^-3 mól) N-(6-kyanohexanoyl)glycínu rozpustených v 100 mililitroch etanolu, načo bolo pridaných 60 mililitrov 1 M roztoku hydroxidu sodného a 800 miligramov Raneyovho niklu. Takto získaná reakčná zmes bola potom premiešavaná pod atmosférou vodíka 3,5.10^s Pa a pri teplote miestnosti počas 8 hodín. Po dokončení tejto reakcie bolo pridaných 20 mililitrov 1 M kyseliny chlorovodíkovej a takto pripravená reakčná zmes bola potom skoncentrovaná za zníženého tlaku, čím bolo pripravených 10,2 gramov bielej pastovitej pevnej látky, ktorá obsahovala požadovanú soľ a chlorid sodný, pričom táto látka bola potom použitá pre ďalší postup bez ďalšieho prečisťovania.

'H NMR (DMSO-d₆):

1,15 -1,6 (m, 8H), 2,08 (t, 2H), 2,56 (t, 2H),

3,32 (d, 2H), 7,1-7,25 (bs, IH).

Príprava XIII

Postup prípravy N-[7-[(fenylmetoxykarbonyl)amino]heptanoyl)glycínu

Podľa tohto postupu boli 2 gramy zlúčeniny získané postupom podľa prípravy XII rozpustené v zmesi 50 mililitrov vody a 50 mililitrov etanolu, načo bolo pridaných 1,06 gramov (čo predstavuje 10^-2mól) uhličitanu sodného a potom 2,34 gramov (čo predstavuje 19,8.10^-3 mól) benzylchlórmravčanu. Takto pripravená reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 15 hodín pri teplote miestnosti, načo bolo toto reakčné médium upravené na hodnotu pH 1 s pomocou 1 M kyseliny chlorovodíkovej a potom bola táto reakčná zmes extrahovaná dichlórmetánom. Organická fáza bola usušená a skoncentrovaná za zníženého tlaku, čím vznikol surový produkt, ktorý bol prečistený chromatografickou metódou na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes etylacetátu, etanolu a vodného roztoku amoniaku v objemovom pomere 6:3: 0,5, a týmto uvedeným postupom bol pripravený požadovaný produkt vo forme pastovitej pevnej látky.

'H NMR (DMSO-d₆):

1,2-1,6 (m, 8H), 2,09 (t, 2H), 2,98 (td, 2H), 3,64 (d, 2H), 5,01 (s, 2H), 7,25 (t, IH),

7,3 - 7,4 (m, 5H), 7,94 (t, 1 H).

Príprava XIV

Postup prípravy 1-(fenylmetyl) 24-(1, l-dimetyletyl)esteru kyseliny 19-[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl]-9,13-dioxo-14-oxa-2,10,12,19,23-pentaazatetrakozandiovej

Podľa tohto postupu bolo 0,5 gramu (čo predstavuje

1,49.10^-3 mól) kyseliny získanej postupom podľa prípravy XIII rozpustených v 25 mililitroch tetrahydrofuránu THF, načo bolo pridaných 0,18 gramu (čo predstavuje 1,8.10^-3mól) trietylamínu a takto získaná reakčná zmes bola potom ochladená na teplotu 0 °C. Potom bolo k tejto reakčnej zmesi pridaných 0,46 gramov (čo predstavuje 1,67.10^-3mól) difenylfosforylnitridu v 5 mililitroch tetrahydrofuránu THF, pričom tento prídavok bol vykonaný po kvapkách, a táto reakčná zmes bola potom premiešavaná pri teplote miestnosti počas 45 minút. Z tejto reakčnej zmesi bolo odstránené rozpúšťadlo za zníženého tlaku a zvyšok bol premiestnený do 2 mililitrov toluénu, načo bolo pridaných 0,18 gramu (čo predstavuje 1,8.10^-3 mól) trietylamínu a 1,04 gramu (čo predstavuje 3,10^-3 mól) 1,1-dimetyl etylesteru kyseliny [3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]aminojpropyl] (4-hydroxybutyl)karbamovej. Táto reakčná zmes bola potom zahrievaná pri teplote varu pod spätným chladičom počas 20 hodín, načo bola skoncentrovaná za zníženého tlaku. Získaný surový produkt bol potom prečistený chromatografickou metódou na silikagéli s použitím zmesi metylcyklohexánu a etylacetátu (gradient objemového pomeru 8 : 2 až 1 : 9) a týmto uvedeným postupom bol pripravený požadovaný produkt vo forme bielej pevnej látky.

Výťažok: 0,4 gramu (39,6 %).

Teplota topenia: 115 °C. ‘H NMR (CDClj):

1,2-1,7 (m, 32H), 3,05 - 3,3 (m, 8H),

4.7- 4,9 (bs, IH),

5.7- 5,9 (bs, IH),

7,3 - 7,4 (m, 6H).

2,15 (t, 2H),

4,05 (t, 2H), 4,5 (t, 2H),

5,08 (s, 2H),

6,4-6,6 (bs, IH),

Príprava XV

Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 22-amino-6-[(1,1 -dimetyletoxyjkarbonylj-12,16-dioxo-11 -oxa-2,6,13,15-tetraazadokozanovej

Podľa tohto postupu bol roztok, ktorý obsahoval 0,33 gramu (Co predstavuje 0,48.10^-3 mól) zlúčeniny získanej postupom podľa prípravy XIV v 15 mililitroch etanolu, podrobený katalytickej hydrogenácii v prítomnosti 30 miligramov 5 %-ného paládia na aktívnom uhlí, čo bolo vykonávané pri atmosférickom tlaku a pri teplote miestnosti počas 5 hodín. Po odfiltrovaní použitého katalyzátora bolo rozpúšťadlo odstránené za zníženého tlaku a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme oleja.

Výťažok: 0,26 gramu (99 %).

'H NMR (CDClj):

1,2-1,75 (m, 32H), 2,2 (t, 2H), 2,8 (t, 2H),

2,85 - 3,3 (m, 8H), 4,07 (t, 2H), 4,53 (t, 2H),

4,7 - 5,4 (bs, IH), 5,7 - 6,1 (bs, IH),

6,4-7,1 (bs, IH).

Príprava XVI

Postup prípravy

-[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino]-21-[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl]-11,15-dioxo-16-oxa-2,4,12,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiovej bi s( 1,1 -dimetyletyl)esteru kyscliny-3Podľa tohto postupu bola pripravená reakčná zmes obsahujúca 0,26 gramu (čo predstavuje 0,477.10^-3 mól) zlúčeniny pripravenej postupom podľa prípravy XV, 0,276 gramu (čo predstavuje 0,95.10^-3 mól) 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [[[(1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]amino](metyltio)metylénjkarbamovej a 200 μΐ trietylamínu v 12 mililitroch tetrahydrofuránu THF, pričom táto reakčná zmes bola potom premiešavaná počas 4 dní pri teplote miestnosti. Po odparení použitého rozpúšťadla, čo bolo vykonané za zníženého tlaku, bol získaný surový produkt prečistený chromatografickou metódou na silikagéli s použitím zmesi metylcyklohexánu a etylacetátu (gradient objemového pomeru bol 7 : 3 až 2 : 8) ako eluačného činidla a týmto uvedeným postupom bol získaný požadovaný produkt vo forme oleja. Výťažok: 0,10 gramu (26,7 %).

’H NMR (CDClj): 1,0-1,8 (m, 50H), 3,05 - 3,3 (m, 6H),

4,55 (t, 2H),

5,7-5,8 (bs, IH),

2,16 (t, 2H),

3,4(td, 2H), 4,07 (t, 2H),

5,2-5,3 (bs, IH),

6,45-6,55 (bs, IH),

8,3 (t, 1 H), 11,5 (s, IH).

Príklad 4

Postup prípravy tris(trifluóracetátu) 7-[(ammoiminometyl)amino]-N-[[4-[(3-aminopropyl)amino]butoxy]karbonylaminometyljheptánamidu

V tomto príklade bol použitý podobný postup ako je postup uvedený v príklade 3, pričom sa vychádzalo zo zlúčeniny získanej postupom podľa prípravy XVI, a požadovaný produkt bol získaný vo výťažku 54 %. 'H NMR (DMSO-d₆);

1,2-1,35 (m, 4H),

1.8- 1,95 (m, 2H),

2.8- 3,1 (m, 8H), 6,85 - 7,4 (bs, 3H), 7,8 - 8,0 (m, 4H), 8,55 - 8,7 (m, 2H).

1,4- 1,7 (m, 8H),

2,06 (t, 2H),

3,96 (t, 2H), 4,32 (t, 2H),

7,55 - 7,7 (m, 2H),

8,33 (t, IH),

Príprava XVII

Postup prípravy l-(fenylmetyl) 24-(1,1 -dimetyletyl)esteru kyseliny 19-[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl] -22-(R)-metyl -9,13-dioxo-14-oxa-2,10,12,19,23 -pentaazatetrakozandiovej

V tomto príklade bol použitý podobný postup ako je postup uvedený v príprave XIV, pričom ako východiskové látky boli použité kyseliny získané podľa prípravy XIII a alkoholu získaného postupom podľa prípravy IV, a týmto spôsobom bol získaný požadovaný produkt vo forme amorfnej pevnej látky. Výťažok: 46 %. [a]_D ²⁴=-2,2 (c = 1,06, CHCI,).

'H NMR (CDClj):

1,15 (d, 3H), 1,2-l,7(m,32H), 2,15 (t, 2H),

3,05 - 3,35 (m, 6H), 3,55 - 3,7 (m, IH),

4,05 (t, 2H),

5,09 (s, 2H), 5,5-5,9 (bs, IH), 7,3 - 7,4 (m, 5H).

4,55 (t, 2H), 4,8 - 4,9 (bs, IH),

5,1 -5,2 (bs, IH),

6,45 - 6,6 (bs, IH),

Príprava XVIII

Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 22-amino-6-[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]-3-(R)-metyl-12,16-dioxo-11 -oxa-2,6,13,15-tetraazadokozanovej

V tomto príklade bol použitý podobný postup ako je postup uvedený v príprave XV, pričom ako východiskové zlúčeniny boli použité zlúčeniny pripravené postupom podľa prípravy XVII, a požadovaný produkt bol získaný vo forme oleja. Výťažok: 99 %. [a]_D ²⁰=-2,1 (c = 1, CHClj).

H NMR (CDClj):

1,15 (d, 3H), 2,77 (t, 2H), 3,55-3,7 (m, IH),

5,7-6,3 (bs, 2H),

4,52 (t, 2H),

Príprava XIX

Postup prípravy 1,1-dimetyletylesteru kyseliny 22-[(aminoiminometyl)amino]-6-[(l, 1 -dimetyletoxy)karbonyl]-3-(R)-metyl-12,16-dioxo-11 -oxa-2,6,13,15 -tetraazadokozano vej

Podľa tohto postupu bolo 0,4 gramu (čo predstavuje 0,716.10^-3 mól) zlúčeniny získanej postupom podľa prípravy XVIII rozpustené v 10 mililitroch metanolu, pričom ďalej bolo pridaných 0,186 gramu (čo je 1,5.10^-3 mól) ami

SK 283372 Β6 noiminometánsulfónovej kyseliny a takto pripravená reakčná zmes bola premiešavaná pri teplote miestnosti počas 3 dní. Po odstránení použitého rozpúšťadla za zníženého tlaku bol získaný surový produkt prečistený chromatografickou metódou na silikagéli, pričom ako eluačné činidlo bola použitá zmes etylacetátu, etanolu a vodného roztoku amoniaku v objemovom pomere 6 : 3 : 0,1 a potom 6:3: : 1), a týmto uvedeným postupom bol pripravený požadovaný produkt vo forme oleja.

Výťažok: 0,37 gramu (86 %). [a]_D ²²=-l (c = 0,89, CHC1₃).

‘H NMR (CDClj):

1,15 (d, 3H), 1,2-1,7 (m, 32H), 2,2 (t, 2H),

2,9 - 3,3 (m, 6H), 3,5 - 3,75 (m, IH),

4,05 (t, 2H), 4,52 (t, 2H), 5,4 - 5,7 (bs, 2H),

6,3-6,5 (bs, IH), 7,05 - 7,3 (bs, 4H),

7,8-8,0 (bs, IH).

Tabuľka 1 (A) 15-deoxyspergualínu (vo forme tris(hydrochloridu)), a (B) zlúčeniny, ktorá zodpovedá uskutočneniu podľa príkladu 16 v EP-A-0 600 762:

Zlúčenina B:

NH

II Q

H₃N^

Z tohto porovnania je zrejmé, že zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu prejavujú lepšiu účinnosť ako látky podľa doterajšieho stavu techniky alebo na dosiahnutie rovnakej účinnosti vyžadujú použitie menších dávok.

Príklad 5

Postup prípravy tris(trifluóracetátu) 7-[(aminoiminometyl)amino]-N-[[4-[(3-(R)-aminobutyl)amino]butoxy]karbonylaminometyljheptánamidu

Pri vykonávaní postupu podľa tohto príkladu bol použitý podobný postup ako je postup podľa príkladu 3, pričom ako východiskové zlúčeniny boli použité zlúčeniny pripravené postupom podľa prípravy XIX, a týmto postupom bol pripravený požadovaný produkt vo forme amorfnej pevnej látky.

Výťažok: 42 %.

[a]_D ²³ = +1,2 (c= 1,CH₃OH). ‘H NMR (DMSO-d₆):

1,18 (d, 3H),

1,4- 1,55 (m, 4H),

1,7 -1,85 (m, 1 H), 2,05 (t, 2H),

1,2-1,35 (m, 4H),

1,55-1,7 (m, 4H),

3,2 - 3,35 (m, IH),

6,8 - 7,5 (bs, 3H),

1.85- 2,0 (m, IH),

2.85- 3,1 (m, 6H),

3,96 (t, 2H),

7,60 (t, IH),

7,95 (s, 4H), 8,35 (t, 1 H), ¹³C NMR (D₂O + dioxan-h₈):

4,32 (t, 2H),

7,68 (t, IH),

8,5 - 8,7 (m, 2H),

NH O

H₂N^NH-^<Ca’^,-A-^CH-N_H^'O-^(CH’*-NH-^(CH’^,I-.CH^^ai

R

Látka í^a)	A	R	*c	Dávka (mg/kg)	Účinnosť (dni)
Príklad 1	-NH-CO-	H		1	53
Príklad 2	-NH-CO-	ch₃	R	0.3	56
Príklad 3	-NH-CO-	ch₃	R,S	1	56
Príklad 4	-CO-NH-	H		0.3	45
Príklad 5	-CO-NH-	ch₃	R	1	58
A(DSG)	porovnávací			43
B	porovnávací		1	46

65,48, 157,52, 159,06, 178,36.

Farmakologické skúšky

Imunosupresívny účinok zlúčenín podľa uvedeného vynálezu bol preukázaný pomocou testu, ktorý je všeobecne známy pod označením reakcia štep verzus hostiteľ. Podľa tohto testu bol u samčekov myší B6D2F1 (C57B1/6 x x DBA/2 prvej generácie hybridov) potlačený imunitný systém intraperitoneálnym (i. p.) podaním (injekčné) cyklofosfamidu. Po troch dňoch (označené ako deň 0 pokusu: D_o) tieto myši dostali 4 x 10⁷ C57B1/6 myších splenocytov intravenóznym podaním. Tieto zvieratá boli potom rozdelené do skupín prinajmenšom s 8 zvieratami, pričom boli denne ošetrované v intervale Dj až D₅ a v intervale D₇ až D_lo intraperitoneálnym podaním ďalej špecifikovaných látok. Kontrolná skupina dostávala iba vehikulum. Úmrtnosť bola sledovaná až do D₆₀. Získané výsledky, ktoré boli vyjadrené ako stredná hodnota úmrtnosti v dňoch pri danej dávke, sú uvedené v ďalej uvedenej tabuľke č. I, pričom hodnoty uvedené v tejto tabuľke sú platnými hodnotami podľa Logrankovho testu (pravdepodobnosť menšia alebo rovnajúca sa 5 %). Kvôli porovnaniu sú v tejto tabuľke č. I rovnako uvedené hodnoty získané pri použití známych látok (alebo látok s podobnou štruktúrou) podľa doterajšieho stavu techniky:

Poznámka:

^(a) Všetky testované zlúčeniny podľa príkladu 1 až príkladu 5 podľa vynálezu boli vo forme tris(trifluóracetátu).

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu sú použiteľné ako terapeuticky účinné látky alebo ako preventívne imunosupresívne činidlá, hlavne pri prevencii odmietnutia vaskulámych alebo nevaskulárnych alogénnych alebo xenogénnych orgánov alebo pri reakcii štep verzus hostiteľ, ku ktorému dochádza pri vaskularizovanom alebo nevaskularizovanom štepe pri liečení geneticky určeného alebo získaného autoimunitného ochorenia (ako je napríklad lupus erythematodes, roztrúsená skleróza, reumatická poly artritída) alebo chronické zápalové ochorenia, ako je napríklad kĺbový reumatizmus a rovnako tak najrôznejších patologických stavov, keď sa objavuje imunitná porucha, ktorá sa javí ako príčina alebo faktor zodpovedný za udržiavanie degradovaného klinického stavu.

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu je možné rovnako podávať v kombinácii s cytotoxickými protinádorovými liekmi, pričom účelom je obmedziť ich vedľajšie účinky a rovnako je možné podávať ich v kombinácii s látkami biotechnologického pôvodu, hlavne s rekombinantnými citokínmi alebo monoklonálnymi a polyklonálnymi protilátkami, pričom účelom je zníženie výskytu ochranných protilátok produkovaných pacientom.

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu je možné použiť na liečenie parazitóz, hlavne sa to týka malárie.

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu je možné podávať perorálne alebo injekčné (hlavne intramuskulárnymi alebo intravenóznymi injekciami), miestne (hlavne vo forme krémov alebo prostriedkov na lokálnu aplikáciu alebo vo forme očných kvapiek), transdermálne, rektálne vo forme čapíkov alebo inhalovaním.

Zlúčeniny podľa uvedeného vynálezu sú hlavne vhodné ako farmakologické činidlá, najmä pre štúdium autoimunitných ochorení.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina zo skupiny 15-deoxyspergualínových analógov, ktorá je vybraná zo skupiny zahrnujúcej: a) zlúčeniny všeobecného vzorca (I):

ho^xCCHi)^n^^ích=>^.ch-^nhx_h

1 | ^R'

Rt R (ΠΙ), v ktorom znamená:

R atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

R_t predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), s chlórmravčanom alebo so symetrickým uhličitanom, v prítomnosti bázickej zlúčeniny, v inertnom reakčnom rozpúšťadle a pri teplote v rozmedzí od 15 °C do 25 °C, načo potom nasleduje:

ii) reakcia zlúčeniny získanej v uvedenom stupni (i) s aminom všeobecného vzorca (IV):

v ktorom:

A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-,

R znamená atóm vodíka alebo skupinu CH₃ a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm, ktorého konfigurácia môže byť (RS) alebo (R), a ii) adičné soli odvodené od uvedených zlúčenín.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, v ktorej R predstavuje metylovú skupinu a asymetrický uhlíkový atóm *C má konfiguráciu (R).
3. Spôsob prípravy zlúčenín všeobecného vzorca (I) alebo jednej z ich adičných solí podľa nároku 1, v y z n a čujúci sa tým, že tento postup zahrnuje nasledujúce stupne, ktoré spočívajú v:

i) odstránení chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

lí s ^R (Π), v ktorom

R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-, a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm s konfiguráciou (R, S) alebo s konfiguráciou (R), a prinajmenšom jeden substituent R, znamená chrániacu skupinu amínovej skupiny oxykarbonylového typu alebo benzylového typu, pričom ostatné substituent}' R] prípadne znamenajú atóm vodíka, ktoré sa vykoná reakčným spracovaním, ktoré je prispôsobené povahe skupiny chrániacej aminoskupinu, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (I) vo forme voľnej bázy alebo prípadne vo forme niektorej z adičných solí tejto zlúčeniny, prípadne ii) získania iných adičných solí z tejto voľnej bázy alebo z adičnej soli získanej postupom podľa stupňa (i).
4. Spôsob podľa nároku 3, vyznačujúci sa t ý m , že rovnako zahrnuje stupne vybrané zo súboru zahrnujúceho:

a) variant A, ktorý predstavuje postup pozostávajúci z nasledujúcich stupňov:

i) kondenzácia alkoholu všeobecného vzorca (III):

II II

NE NH NEI (IV), v ktorom

R, znamená chrániace skupiny aminoskupiny, v inertnom reakčnom rozpúšťadle a pri teplote pohybujúcej sa v rozmedzí od 25 °C do 50 °C za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

I I ^{R1 R} (II), v ktorom:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atóm vodíka alebo metylová skupina, *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), a

Rt znamená chrániace skupiny aminoskupiny, a

b) variant B, ktorý predstavuje postup pozostávajúci z nasledujúcich stupňov:

i) reakcia kyseliny všeobecného vzorca (V):

⁰ (V), v ktorom:

R₂ predstavuje chrániacu skupinu aminoskupiny, s difenylfosforylazidom všeobecného vzorca (VI):

(C_sh_sO)₃-p-N₃ ⁰ (VI) v prítomnosti bázickej zlúčeniny, v rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán, a pri teplote miestnosti, čím sa získa medziprodukt všeobecného vzorca (VII):

β ⁰ (VII), ii) takto získaná zlúčenina všeobecného vzorca (VII) sa podrobí prešmyku, známemu pod označením Curtiusova reakcia, pričom súčasne reaguje takto získaný izokyanát s alkoholom všeobecného vzorca (III):

^{Ri R} (III), v ktorom znamená:

R atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

Ri predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, ktorá sa odlišuje od skupiny R₂ uvedenej skôr, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), v rozpúšťadle, pri teplote pohybujúcej sa v rozmedzí od 80 °C do 140 °C a v čase v rozmedzí od 5 do 50 hodín, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (VIII):

lí í

Ri R (II), v ktorom:

A znamená skupinu -CO-NH-,

R je atóm vodíka alebo metylová skupina,

R] znamená chrániace skupiny aminoskupiny, a *C v prípade, že R nie je atóm vodíka, predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R, S) alebo s konfiguráciou (R).
5. Zlúčenina predstavujúca medziprodukt vhodný na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorá je vybraná zo skupiny zahrnujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

(VIII), v ktorom majú R, R_b R₂ a *C rovnaký význam ako bolo uvedené, iii) odstránenie chrániacej skupiny zo zlúčeniny všeobecného vzorca (VIII), získanej uvedeným spôsobom, špecifickým spracovaním tejto zlúčeniny, pri ktorom sa nahradí chrániaca skupina R₂ aminoskupiny atómom vodíka, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (IX):

T¹ J

O ⁰ (IX), v ktorom R ,Rj a *C majú rovnaký význam ako bolo uvedené, iv) a potom nasleduje reakcia takto získanej zlúčeniny všeobecného vzorca (IX) v stupni (iii) s kyselinou aminoiminometánsulfónovou v rozpúšťadle, vykonávanou pri teplote v rozmedzí približne od 15 °C do 25 °C a v čase v rozmedzí od 8 do 50 hodín, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

11 ⁰ li ii ^R (H), v ktorom:

R a *C majú rovnaký význam ako bolo uvedené,

A je skupina-CO-NH-, a

R] predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, s výnimkou dvoch týchto skupín Rj viazaných na guanidínovú skupinu, kde každá predstavuje atóm vodíka, iv¹) alebo sa vykoná variant uvedeného stupňa (iv), pri ktorom sa do reakcie uvádza zlúčenina všeobecného vzorca (IX) so zlúčeninou všeobecného vzorca (X):

NH

I ^rixn«^c^s/^chí (X), v ktorom:

Ri predstavuje chrániacu skupinu aminoskupiny, v inertnom rozpúšťadle, najmä v tetrahydrofuráne, v prítomnosti bázickej zlúčeniny, pri teplote miestnosti v rozmedzí od 15 do 25 °C a v čase v rozmedzí od 8 hodín do 100 hodín za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (II):

R.^

NO iT

R,R v ktorom (II),

R znamená atóm vodíka alebo metylovú skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- alebo skupinu -NH-CO-, a *C v prípade, že R neznamená atóm vodíka, predstavuje asymetrický uhlíkový atóm s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R), a prinajmenšom jeden substituent R] znamená chrániacu skupinu amínovej skupiny oxykarbonylového typu alebo benzylového typu, pričom ostatné substituenty R, prípadne znamenajú atóm vodíka.
6. Zlúčenina predstavujúca medziprodukt vhodný na prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, ktorá má všeobecný vzorec (III):

^{81 R} (ΠΙ), v ktorom znamená:

R metylovú skupinu,

Ri predstavuje chrániace skupiny aminoskupiny, a *C predstavuje asymetrický atóm uhlíka s konfiguráciou (R,S) alebo s konfiguráciou (R).
7. Použitie imunosupresívnej zlúčeniny vybranej zo skupiny zahrnujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a netoxické adičné soli tejto zlúčeniny podľa nároku 1 na prípravu liečiva na terapeutické použitie na potláčanie imunitných porúch.
8. Použitie zlúčeniny vybranej zo skupiny zahrnujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a netoxické adičné soli tejto zlúčeniny podľa nároku 1 na prípravu liečiva na terapeutické použitie na potláčanie malárie.
9. Použitie zlúčeniny vybranej zo skupiny zahrnujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a netoxické adičné soli tejto zlúčeniny podľa nároku 1 ako farmakologického činidla.
10. Terapeutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje prinajmenšom jednu zlúčeninu vybranú zo skupiny zahrnujúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a ich netoxické adičné soli podľa nároku 1 v kombinácii s fyziologicky prijateľným excipientom.