SK15562003A3

SK15562003A3 - Pyridylmetylaminopyrimidíny, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK15562003A3
Application number: SK1556-2003A
Authority: SK
Inventors: Vittoria Chiesa; Gerhard Grundler; Peter Zimmermann; Stefan Postius; Guido Hanauer; Wolfgang Opferkuch
Original assignee: Altana Pharma Ag
Priority date: 2001-05-18
Filing date: 2002-05-14
Publication date: 2004-05-04
Also published as: HUP0400731A2; WO2002094831A1; EE200300564A; PL364076A1; JP2004529969A; CA2447675A1; CZ20033474A3; AR035967A1; US20040158066A1; EP1395592A1

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka pyridylmetylaminopyrimidínov, ktoré sú vhodné na použitie vo farmaceutickom priemysle ako účinné látky na výrobu liekov.

Doterajší stav techniky

Medzinárodná patentová prihláška WO 96/16656 opisuje zlúčeniny všeobecného vzorca A-X-R, v ktorých A môže byť kondenzovaný imidazolylový radikál a R môže byť nearomatický uhľovodíkový radikál. Európska patentová prihláška EP 632040 opisuje ďalšie kondenzované imidazoly, ktoré nesú ako substituent B 5- alebo 6-členný kondenzovaný alebo nekondenzovaný nesubstituovaný heterocyklus. Medzinárodná patentová prihláška WO 98/28299 opisuje imidazopyridazíny pripojené cez špecifický mostík v polohe 4 na pyridínový kruh substituovaný v polohe 2. Medzinárodná patentová prihláška WO 99/61439 opisuje pyridylmetylaminopyrimidíny substituované špecificky v polohe 4. Všetky zlúčeniny špecifikované vo vyššie uvedených dokumentoch sú vhodné na potlačenie Helicobacter baktérie.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu sú pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I ^R5 _Λ R6

R2

X-B-R7

R1

-2kde

R1 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo halogén,

R2 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo halogén,

R3 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo halogén,

R4 je vodík alebo 1 -4C-aIkyl,

R5 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

R6 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevážne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je cyklický alebo bicyklický radikál, ktorý je substituovaný nitroskupinou a R8 a R9 a je vybraný zo skupiny zahrnujúcej imidazol, imidazopyridazín a imidazopyridín,

A je 1-7C-alkylén,

B je väzba alebo 1-7C-alkylén,

X je O (kyslík), N-1-4C-alkyl, NH alebo S(O)_n a

Y je N, kde

R8 je vodík, 1-4C-alkyl, halogén, nitroskupina, hydroxy-1-4C-alkyl alebo 1-4C-alkylkarbonyloxy-1-4C-alkyl,

R9 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo nitroskupina, a n je 0, 1 alebo 2, a ich soli.

-4C-alkyl je alkylový radikál s nerozvetveným, rozvetveným alebo cyklickým reťazcom s 1 až 4 atómami uhlíka. Príkladmi sú butylový, izobutylový, sek-butylový, ŕerc-butylový, cyklobutylový, propylový, izopropylový, cyklopropylový, cyklopropylmetylový, etylovýa metylový radikál.

Halogénom v zmysle tohto vynálezu je bróm, chlór alebo fluór.

1-4C-alkoxy je radikál, ktorý okrem atómu kyslíka obsahuje jeden z 1-4Calkylových radikálov. Príkladmi sú napríklad cyklopropylmetoxy, metoxy a etoxyradikály.

1-4C-alkoxy, ktorý je úplne alebo prevažne substituovaný fluórom, znamená 1-4C-alkoxy, ktorý má všetky alebo viac ako polovicu vodíkových atómov

-3nahradených atómami fluóru. Príklady zahrnujú 2,2,3,3,3-pentafluórpropoxy, perfluóretoxy, 1,2,2-trifluóretoxy a najmä 1,1,2,2-tetrafluóretoxy, 2,2,2-trifluóretoxy, trifluórmetoxy a najmä difluórmetoxyradikál.

1-7C-Alkylén znamená nerozvetvené alebo rozvetvené 1-7C-alkylénové radikály, napríklad metylénový (-CH₂-), etylénový (-CH₂-CH₂-), trimetylénový (-CH₂-CH₂-CH₂-), tetrametylénový (-CH2-CH₂-CH₂-CH₂-), 1,2-dimetyletylénový [-CH(CH₃)-CH(CH₃)-j, 1,1-dimetyletylénový [-C(CH₃)₂-CH₂-j, 2,2-dimetyletylénový [-CH₂-C(CH₃)₂-j, izopropylidénový [-C(CH₃)₂-j, 1-metyletylénový [-CH(CH₃)-CH₂-], pentametylénový (-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-), hexametylénový (-CH₂-CH₂-CH₂CH₂-CH₂-CH₂-), a heptametylénový (-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-) radikál.

Hydroxy-1-4C-alkyl znamená 1-4C-alkylové radikály substituované hydroxylovou skupinou. Príklady, ktoré môžu byť uvedené zahrnujú 2-hydroxyetylový a 3-hydroxypropylový radikál a najmä hydroxymetylový radikál.

1-4C-Alkylkarbonyloxy-radikály obsahujú okrem atómu kyslíka jednu z 1-4Calkylkarbonylových radikálov. Príkladom je acetoxyradikál [CH₃CO-Oj.

1-4C-Alkylkarbonyloxy-1-4C-alkyl znamená jeden z vyššie uvedených 1-4Calkylových radikálov, ktoré sú substituované jedným z vyššie uvedených 1-4C-alkylkarbonyloxyradikálov. Príkladom je acetoxymetyl [CH₃CO-O-CH₂-j radikál.

Ako príklady radikálov R7 môžeme uviesť 2-metyl-5-nitroimidazol-1-ylový radikál, 2-metyl-4-nitroimidazol-1-ylový radikál, 5-bróm-2-metyl-4-nitroimidazol-1ylový radikál, 4-nitroimidazol-1-ylový radikál, 2-metyl-4,5-dinitroimidazol-1-ylový radikál, 2,4-dinitroimidazol-1-ylový radikál, 2-hydroxymetyl-5-nitroimidazol-1-ylový radikál, 2-acetoxymetyl-5-nitroimidazol-1-ylový radikál, 3-nitroimidazo[1,2-a]pyridín8-ylový radikál, 2-metyl-3-nitroimidazo[1,2-a]pyridín-8-ylový radikál, 3-nitroimidazo[1,2-a]pyridín-6-ylový, 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-7-ylový radikál a 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál.

Vhodnými soľami zlúčenín všeobecného vzorca I sú všetky adičné soli s kyselinami alebo všetky soli so zásadami. Konkrétne môžu byť vyrobené farmakologicky prijateľné solí anorganických a organických kyselín a zásad, ktoré sa bežne používajú vo farmácii. Vhodnými sú vo vode rozpustné a vo vode nerozpustné adičné soli s kyselinami, napríklad s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou bromovodíkovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou dusičnou, kyselinou

-4sírovou, kyselinou octovou, kyselinou citrónovou, kyselinou D-glukónovou, kyselinou benzoovou, kyselinou 2-(4-hydroxy-benzoyl)benzoovou, kyselinou maslovou, kyselinou sulfosalicylovou, kyselinou maleínovou, kyselinou laurovou, kyselinou jablčnou, kyselinou fumárovou, kyselinou jantárovou, kyselinou šťaveľovou, kyselinou vínnou, kyselinou embónovou, kyselinou steárovou, kyselinou toluénsulfónovou, kyselinou metánsulfónovou alebo kyselinou 3-hydroxy-2-naftoovou, pričom tieto kyseliny sa použijú pri príprave solí - v závislosti od toho, či ide o kyselinu jednosýtnu alebo viacsýtnu a v závislosti od toho, aká soľ je požadovaná v ekvimolovom kvantitatívnom pomere alebo v nejakom inom pomere.

Na druhej strane soli so zásadami sú tiež vhodné. Príklady solí so zásadami, ktoré môžu byť uvedené zahrnujú soli s alkalickým kovom (lítium, sodík, draslík) alebo soli s vápnikom, hliníkom, horčíkom, titánom, amóniom, meglumínom alebo guanidíniom, pričom príprava solí tu uvedených sa uskutočňuje použitím zásad v ekvimolových pomeroch alebo v pomeroch, ktoré sú odlišné od ekvimolových pomerov.

Farmakologicky neprijateľné soli, ktoré sa môžu získať napríklad ako produkty procesu počas prípravy zlúčenín podľa vynálezu v priemyselnom meradle, sa konvertujú na farmakologicky prijateľné soli spôsobmi, ktoré sú odborníkovi v danej oblasti techniky známe.

Podľa odborných znalostí môžu zlúčeniny podľa vynálezu, ako aj ich soli, obsahovať, napríklad keď sa izolujú v kryštalickej forme, rôzne množstvá rozpúšťadiel. Do rámca tohto vynálezu sú preto zahrnuté všetky solváty a najmä všetky hydráty zlúčenín všeobecného vzorca I, ako aj všetky solváty a najmä všetky hydráty solí zlúčenín všeobecného vzorca I.

Zlúčeniny podľa vynálezu, ktoré môžeme zdôrazniť, sú zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R1 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo halogén,

R2 je vodík, 1-4C-alkyl alebo halogén,

R3 je vodík alebo halogén,

R4 je vodík alebo 1-4C-alkyl,

R5 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevážne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

-5R6 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je cyklický alebo bicyklický radikál, ktorý je substituovaný nitroskupinou a R8 a R9 a je vybraný zo skupiny zahrnujúcej imidazol a imidazopyridín,

A je metylén,

B je väzba alebo 1-4C-alkylén,

X je O (kyslík), NH alebo S(O)_n a

Y je N, kde

R8 je vodík,

R9 je vodík, n je 0, a ich soli.

Jedno uskutočnenie zlúčenín zasluhujúcich si pozornosť (uskutočnenie a) sú tie zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorých B je väzba a R7 je imidazopyridazínový radikál substituovaný nitroskupinou a radikálmi R8 a R9.

Ďalšie uskutočnenie zlúčenín zasluhujúcich si pozornosť (uskutočnenie b) sú tie zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorých B je etylénový radikál a R7 je imidazolový radikál substituovaný nitroskupinou a radikálmi R8 a R9.

Zlúčeniny podľa vynálezu zasluhujúce si zvláštnu pozornosť sú tie zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

R6 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál alebo 2-metyl-5-nitroimidazol-1ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba alebo 1-2C-alkylén,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

-6Y je N, a ich soli.

Výhodné zlúčeniny z uskutočnenia a sú zlúčeniny všeobecného vzorca ľ

R5

X-B-R7

R2

R6

R1 kde

R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, hydroxyl, metyl, metoxy, etoxy, cyklopropylmetoxy, izobutoxy, trifluór metoxy, difluórmetoxy, trifluórmetyl alebo chlór,

R6 je vodík, metyl, metoxy alebo chlór,

R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

Y je N, a ich soli.

Výhodné zlúčeniny z uskutočnenia b sú zlúčeniny všeobecného vzorca ľ kde

R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

-7R5 je vodík, hydroxyl, metyl, metoxy, etoxy, cyklopropylmetoxy, izobutoxy, trifluórmetoxy, difluórmetoxy, trifluórmetyl alebo chlór,

R6 je vodík, metyl, metoxy alebo chlór,

R7 je 2-metyl-5-nitroimidazo-1-ylový radikál,

A je metylén,

B je etylén,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

Y je N, a ich soli.

Zvlášť výhodné zlúčeniny z uskutočnenia a sú zlúčeniny všeobecného vzorca ľ, kde

R1 je metyl,

R2 je metyl,

R3 je chlór,

R4 je vodík,

R5 je vodík alebo metyl,

R6 je vodík alebo metoxy,

R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba,

X je O (kyslík), a

Y je N, a ich soli.

Zvlášť výhodné zlúčeniny z uskutočnenia b sú zlúčeniny všeobecného vzorca I*, kde

R1 je metyl,

R2 je metyl,

R3 je chlór,

R4 je vodík,

R5 je vodík alebo metyl,

R6 je vodík alebo metoxy,

R7 je 2-metyl-5-nitroimidazo-1 -ylový radikál,

-8A je metylén,

B je etylén,

X je O (kyslík), a

Y je N, a ich soli.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa vynálezu môžu byť syntetizované rôznymi postupmi. V princípe sa zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu pripraviť obvyklým spôsobom reakciou zlúčenín všeobecného vzorca II so zlúčeninami všeobecného vzorca III (v ktorých L je odštiepiteľná skupina, napríklad atóm halogénu, najmä chlóru, alebo mesyloxyskupina).

_(||) L-B-R7 (III)

Reakcia zlúčenín všeobecného vzorca II so zlúčeninami všeobecného vzorca III sa uskutočňuje napríklad spôsobmi, ako sú opísané v príkladoch v časti Príklady uskutočnenia vynálezu, výhodne v inertných bezvodých rozpúšťadlách (ako je napríklad dimetylformamid) v prítomnosti organickej alebo výhodne anorganickej pomocnej bázy (ako je napríklad uhličitan draselný).

Zlúčeniny všeobecného vzorca II a III sú známe (pozri napríklad B. Kohl a ďalší, J. Med. Chem. 1992, 35, 1049-1057; C. Guet a ďalší, J. Chem. Res. Miniprint 1982, 9, 2515-2527; W. M. Galebiewski a ďalší., Bull. Pol. Acad. Sci. Chem. 1990, 38, 17-27; Jen a ďalší, J. Med. Chem. 1977, 20, 1258-1261; D. Scopes a ďalší, J. Med. Chem. 1992, 35, 490-501) alebo sa môžu pripraviť spôsobmi opísanými v príkladoch nižšie v odstavci “Východiskové zlúčeniny” alebo analogicky z príslušných známych zlúčenín obvyklým spôsobom použitím známych procesných krokov.

-9Príklady, ktoré sú uvedené nižšie vynález neobmedzujú. Zlúčeniny podľa vynálezu a východiskové zlúčeniny sa môžu pripraviť spôsobmi analogickými tým, ktoré sú opísané v príkladoch. Skratka t. t. znamená teplotu topenia, kone. znamená “koncentrovaný”, h znamená hodinu(ny), a min znamená minútu(ty). Zlúčeniny nazvané ako konečné produkty a soli týchto zlúčenín sú zvlášť výhodné nárokované zlúčeniny podľa vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Konečné produkty

Príklad 1 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-[4-metoxy-3-metyl-5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín-2-ylnľietyl]amín

1,0 g (3,2 mmol) 6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxy4-metoxy-5-metylpyridínu sa suspendoval v 30 ml bezvodého dimetylformamidu a suspenzia sa potom zahrievala na teplotu 80 °C. Pridalo sa 2,2 g (16,0 mmol) uhličitanu draselného a 0,58 g (2,9 mmol) 6-chlór-3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazínu a zmes sa miešala pri teplote 80 °C 1 hodinu. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes preložila do vody (200 ml) a extrahovala sa so zmesou metylénchlorid/metanol 4:1 (3 * 200 ml). Organické extrakty sa potom sušili nad síranom sodným a skoncentrovali sa. Po vysušení zvyšku vo vákuovej sušiacej skrini pri 40 °C sa izolovalo 0,75 g (55 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bieleho prášku s teplotou topenia 229,5 až 231,5 °C.

Príklad 2 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-{4-metoxy-3-metyl-5-[2-(2-metyl-5-nitroimidazol1 -yl )etoxy] py rid í η-2-yl metylja m í n

2,0 g (6,4 mmol) 6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxy4-metoxy-5-metylpyridínu sa suspendovali v 30 ml bezvodého dimetylformamidu a

-10suspenzia sa zahrievala na teplotu 80 °C. Pridalo sa 4,4 g (32,0 mmol) uhličitanu draselného a zmes sa miešala 1 hodinu. Potom sa pomaly po kvapkách pridal roztok 1,6 g (6,4 mmol) 2-(2-metyl-5-nitroimidazol-1-yl)etylmetánsulfonátu v 10 ml dimetylformamidu a zmes sa miešala pri teplote 80 °C 1 hodinu. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes preložila do vody (200 ml) a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku. Po vysušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C sa izoloval 1,0 g (33,8 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžového prášku s teplotou topenia 182,5 až 184 °C.

Príklad 3 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-{5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín2-ylmetyl}amín

0,5 g (1,9 mmol) 6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxypyridínu sa rozpustilo v 15 ml bezvodého dimetylformamidu. Potom sa pridalo 13 g (9,5 mmol) uhličitanu draselného a 0,33 g (1,7 mmol) 6-chlór-3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazínu. Zmes sa potom miešala pri teplote miestnosti 30 minút a potom sa zahriala na teplotu 80 °C počas 1 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes preložila do vody (250 ml) a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku za vzniku, po sušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C, 0,69 g (95,1 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme oranžovej tuhej látky. Teplota topenia 194 až 198 °C.

Príklad 4 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-{5-[2-(2-metyl-5-nitroimidazol-1-yl)etoxy]pyridín2-ylmetyl}amín

1,5 g (4,3 mmol) 6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxypyridínu sa rozpustilo v 30 ml bezvodého dimetylformamidu pri teplote 80 °C. Potom sa pridali 3,0 g (21,5 mmol) uhličitanu draselného a zmes sa miešala 30 minút. Potom sa pomaly po kvapkách pridal roztok 2,2 g (8,7 mmol) 2-(2-metyl-5-nitroimidazol-1-yl)etylmetánsulfonátu v 10 ml dimetylformamidu a zmes sa miešala pri teplote 80 °C 1 hodinu. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes preložila do

-11 vody (200 ml) a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku za vzniku, po vysušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C, 0,57 g (31,7 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme svetlo-sfarbeného prášku. Teplota topenia 181,5 až 183,5 °C.

Príklad 5

Dihydrochlorid (5“Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-[5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyrídazín6-yloxy)pyridín-2-ylmetyl]amínu

2,0 g (4,7 mmol) (5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-[6-chlór-5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín-2-ylmetyl]amínu sa suspendovali v 500 ml acetónu a suspenzia sa zahrievala do refluxu. Pridalo sa 800 pl (9,4 mmol) koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa miešala pri teplote miestnosti cez noc. Po filtrácii za podtlaku a sušení zrazeniny vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C sa izolovalo 2,2 g (94 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bieleho prášku. Teplota topenia 280 až 281 °C.

Príklad 6

Sulfát (5-chlór-2,6-dimetylpyrimidln-4-yl)-[5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín-2-ylmetyl]amínu

Podobne, ako je opísané v príklade 6, reagovali 2,0 g (4,7 mmol) (5-chlór2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-[6-chlór-5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)-pyridín2-ylmetyl]amínu a 256 μΙ (4,7 mmol) kyseliny sírovej v 500 ml acetónu. Zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku, čím sa poskytlo 2,3 g (95 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky. Teplota topenia 233 až234°C.

Príklad 7 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-[6-chlór-5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín-2-ylmetyl]amín

0,8 g (2,7 mmol) 2-chlór-6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]3-hydroxypyridínu (z príkladu K) sa rozpustilo v 30 ml bezvodého dimetylformamidu.

-12Pridalo sa 1,9 g (13,5 mmol) uhličitanu draselného a zmes sa miešala pri teplote 80 °C 30 minút. Potom sa pridalo 0,67 g (2,7 mmol) 6-chlór-3-nitroimidazo-[1,2-bjpyridazínu a reakčná zmes sa zahrievala na teplotu 80 °C počas 2 hodín. Zmes sa pomaly ochladila na teplotu miestnosti a potom sa pridala do vody (100 ml) a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 50 ml). Organické extrakty sa vysušili nad síranom horečnatým a následne sa skoncentrovali. Následná kryštalizácia surového produktu z diizopropyléteru poskytla 720 mg (58 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme svetlej tuhej látky. Teplota topenia 184 až 186 °C.

Príklad 8 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)-{6-chlór-5-[2-(2-metyl-5-nitroimidazol-1-yl)etoxy]py rid í η-2-yl metylja m í n

0,8 g (2,7 mmol) 2-chlór-6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metylj3-hydroxypyridínu (z príkladu K) sa suspendovalo v 20 ml bezvodého dimetylformamidu, a suspenzia sa zahrievala na teplotu 80 °C. Pridalo sa 1,87 g (13,5 mmol) uhličitanu draselného a zmes sa miešala 30 minút. Potom sa po kvapkách pridal roztok 0,67 g (2,7 mmol) 2-(2-metyl-4-nitroimidazol-1-yl)etylmetánsulfonátu v 10 ml bezvodého dimetylformamidu a reakčná zmes sa miešala pri teplote 80 °C 3 hodiny. Potom sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a následne sa pridala do vody (400 ml), potom sa zrazenina odfiltrovala za podtlaku. Po vysušení zrazeniny vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C sa izolovalo 1,0 g (86 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžovej tuhej látky. Teplota topenia 206 až 208 °C.

Príklad 9 (5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)metyl-[5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)pyridín-2-ylmethyl]amín

0,9 g (3,23 mmol) 6-{[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)metylamino]metyl}-3hydroxypyridínu (z príkladu L) sa rozpustilo v 10 ml bezvodého dimetylformamidu a potom sa pridalo 2,2 g (16,1 mmol) uhličitanu draselného. Zmes sa miešala pri teplote 80 °C 1 hodinu a potom sa pridalo 641 mg (3,23 mmol) 6-chlór- 133-nitroimidazo-[1,2-b]pyridazínu. Reakčná zmes sa zahrievala na teplotu 80 °C počas 2 hodín, potom sa pomaly ochladila na teplotu miestnosti a následne sa pridala do vody (50 ml). Zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku a vysušila sa vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C. Izolovalo sa 2,6 g (79 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžovej tuhej látky. Teplota topenia 183 až 184 °C.

Príklad 10 [6-Bróm-5-(3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-yloxy)-4-(2,2,2-trifIuóretoxy)-pyridín-2ylmetyl]-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amín

Na roztok 0,43 g (1,0 mmol) 2-bróm-6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxy-4-(2,2,2-trifluóretoxy)pyridínu (z príkladu I) v suchom N,Ndimetylformamide (5 ml) sa pôsobilo 0,7 g (5,0 mmol) uhličitanu draselného a reakčná zmes sa miešala pri teplote 80 °C 1 hodinu. Potom sa po kvapkách pridal roztok 0,2 g (1,0 mmol) 6-chlór-3-nitroimidazo[1,2b]pyridazínu v suchom N,Ndimetylformamide (2 ml) pri teplote 80 °C a reakčná zmes sa miešala 8 hodín. Zmes sa potom ochladila na teplotu miestnosti, vliala sa do vody (30 ml) a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili so síranom horečnatým a skoncentrovali sa vo vákuu. Po čistení zvyšku chromatografiou na silikagéli (petroléter/etylacetát = 1:1) a rekryštalizácii z petroléteru sa izolovalo 15 mg (3 %) požadovanej zlúčeniny vo forme béžového prášku s teplotou topenia 180 až 182 °C.

Východiskové zlúčeniny

Príklad A

3-Hydroxy-5-benzyloxy-4-metoxy-5,6-dimetylpyridín g (0,33 mol) 3-hydroxy-4-metoxy-5,6-dimetylpyridínu sa pridalo po častiach do suspenzie 13,2 g (0,33 mol) hydridu sodného (60% suspenzia v tekutom parafíne) v 150 ml bezvodého dimetylformamidu a zmes sa zahrievala na teplotu 60 °C za energického miešania počas 1 hodiny. Potom sa počas 1 hodiny

-14po kvapkách pridal roztok 39,3 ml (0,33 mol) benzylbromidu v bezvodom dimetylformamide. Zmes sa miešala pri teplote 60 °C ďalšiu 1 hodinu a potom sa ochladila na teplotu miestnosti. Zmes sa potom preložila do 500 ml vody a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 200 ml). Organické fázy sa sušili nad síranom sodným a následne sa skoncentrovali. Zvyšok (65,0 g) sa čistil chromatografiou na silikagéli (petroléter/etylacetát = 2:1 + 5% amoniak). Frakcie obsahujúce produkt sa zozbierali a skoncentrovali. Po vysušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C sa izolovalo 50,5 g (63,7 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bieleho prášku. Teplota topenia 152 až 155 °C.

Príklad B

5-Benzyloxy-4-metoxy-2,3-dimetylpyridín N-oxid

40,0 g (0,22 mol) 80% kyseliny m-chlórperoxybenzoovej sa po častiach pridalo do roztoku 50,0 g (0,20 mol) 5-benzyloxy-4-metoxy-5,6-dimetylpyridínu v 200 ml bezvodého dichlórmetánu. Zmes sa ochladila na teplotu 0 °C počas 30 minút. Tá sa potom zahrievala na teplotu miestnosti a miešala počas 15 hodín. Potom sa pridalo 2 x 5,0 g kyseliny m-chlórperoxybenzoovej a zmes sa miešala ďalšie 2 hodiny a následne sa vliala do vody. Organická fáza sa premyla 3 x 50 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a extrahovala sa dichlórmetánom. Organické extrakty sa vysušili nad síranom sodným a následne sa skoncentrovali. To poskytlo 50,0 g (93,6 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme žltého oleja [NMR: δ = 2,15 (s, 3H, Me), 2,22 (s, 3H, Me), 3,81 (s, 3H, OCH₃), 5,18 (s, 2H, OCH₂Ph), 7,30 - 7,51 (m, 5H, Ph), 8,13 (s, 1H, PyH)].

Príklad C

2-Acetyloxymetyl-5-benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridín

50,0 g (0,19 mol) 5-benzyloxy-4-metoxy-2,3-dimetylpyridín N-oxidu sa suspendovalo v 120 ml (1,27 mol) acetanhydridu. Žltý roztok sa miešal pri refluxe cez noc a následne sa skoncentroval na objem približne 20 ml. Zvyšok sa potom rozpustil v 200 ml vody a extrahoval sa so 4 x 100 ml etylacetátu. Organické

- 15extrakty sa premyli nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušili sa nad síranom sodným a nakoniec sa skoncentrovali. Izolovalo sa 54,0 g (92,8 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme hnedého oleja [NMR: δ = 2,02 (s, 3H, COCH₃), 2,22 (s, 3H, Me), 3,84 (s, 3H, OCH₃), 5,12 (s, 2H, OCH₂Ph), 5,22 (s, 2H, CH₂OAc), 7,30 7,51 (m, 5H, Ph), 8,21 (s, 1H, PyH)].

Príklad D

2-Hydroxymetyl-5-benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridín

54,0 g (0,18 mol) 2-acetyloxymetyl-5-benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridínu sa rozpustilo v metanole. Pridalo sa 34,1 ml 30% (0,18 mol) metanolického roztoku metoxidu sodného. Pridalo sa ďalších 100 ml metanolu a hnedá suspenzia sa miešala 30 minút. Zmes sa skoncentrovala, suspendovala v etylacetáte a miešala počas noci. Zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku, premyla etylacetátom a vysušila vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C. Izolovalo sa 28,5 g (61,4 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme svetlo-sfarbenej tuhej látky. Teplota topenia 70 až 73 °C.

Príklad E (5-Benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amín

28,0 g (0,11 mol) 2-hydroxymetyl-5-benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridínu sa suspendovalo v 500 ml bezvodého dichlórmetánu a potom sa suspenzia ochladila na teplotu 0 °C, následne sa pomaly po kvapkách pridalo 8,6 ml (0,12 mol) tionylchloridu. Roztok sa ochladil na teplotu miestnosti a miešal sa 9 hodín. Ten sa potom vylial do 1 I vody, pH sa upravilo na 7,0 použitím nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného, a organická fáza sa oddelila. Vodná fáza sa extrahovala 3 x 200 ml dichlórmetánu a spojené organické extrakty sa sušili nad síranom sodným a potom sa skoncentrovali. Zvyšok (18,0 g; 64,8 mmol) sa rozpustil v 200 ml bezvodého dimetylformamidu a potom sa po kvapkách pri teplote 0 °C pridal k roztoku 17,2 g (0,11 mol) 4-amino-5-chlór-2,6-dimetylpyrimidínu a

-164,8 g (0,12 mol) hydridu sodného (60% v tekutom parafíne) v 400 ml bezvodého dimetylformamidu. Reakčná zmes sa miešala pri teplote 0 °C 1 hodinu a potom sa naliala do 1,2 I vody. Zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku a vysušila vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C. Izolovalo sa 22,9 g (88,8 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme svetlo-sfarbenej tuhej látky. Teplota topenia 113,5 až 116,0 °C.

Príklad F

6-[(5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxy-4-metoxy-5-metylpyridín

5,0 g (12,5 mmol) (5-benzyloxy-4-metoxy-3-metylpyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)aminu sa suspendovalo v 50 ml etanolu, a potom sa pridalo 50 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Zmes sa najskôr miešala pri teplote miestnosti 1 hodinu, potom sa zahrievala na teplotu 80 °C a miešala sa cez noc. pH roztoku sa upravilo na 7,0 použitím 10N roztoku hydroxidu sodného a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C. Izolovalo sa 3,66 g (94,8 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme svetloružovej tuhej látky. Teplota topenia 220 až 223,5 °C.

Príklad G (5-Benzyloxypyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amín

Roztok 4,7 g (29,9 mmol) 4-amino-5-chlór-2,6-dimetylpyrimidínu v 10 ml bezvodého /V-metylpyrolidónu sa po kvapkách pri teplote miestnosti pridal do suspenzie 0,86 g (35,9 mmol) hydridu sodného (60% suspenzia v tekutom parafíne) v 40 ml bezvodého /V-metylpyrolidónu. Zmes sa miešala pri teplote miestnosti 3 hodiny a potom sa ochladila na teplotu 0 °C. Potom sa pomaly po kvapkách pridal roztok 7,0 g (29,9 mmol) 5-benzyloxy-2-chlór-metylpyridínu v 15 ml bezvodého /V-metylpyrolidónu a zmes sa miešala pri teplote 0 °C 5 hodín. Zmes sa potom vliala do 200 ml vody a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku za vzniku, po sušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C, 4,5 g (43,8 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžovej tuhej látky. Teplota topenia 130 až 131 °C.

-17Príklad H

Hydrobromid 6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxypyridínu

3,2 g (9,0 mmol) (5-benzyloxypyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín4-yl)amínu sa suspendovalo v 33% bromovodíku v kyseline octovej a suspenzia sa zahrievala na teplotu 45 °C počas 3 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa tuhé látky odfiltrovali za podtlaku a premyli dichlórmetánom za vzniku, po vysušení vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C, 2,9 g (93,1 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bieleho prášku. Teplota topenia 208 až 209 °C.

Príklad I (5-Benzyloxy-6-chlórpyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amín

2,5 g (15,9 mmol) 4-amino-5-chlór-2,6-dimetylpyrimidínu sa v krátkom čase pridalo k suspenzii 0,7 g (17,5 mmol) hydridu sodného (60% suspenzia v parafínovom oleji) v 30 ml bezvodého dimetylformamidu, a zmes sa miešala cez noc. Potom sa po kvapkách pridal roztok 4,25 g (15,9 mmol) 2-chlórmetyl5-benzyloxy-6-chlóropyridínu v 20 ml bezvodého dimetylformamidu. Reakčná zmes sa potom ochladila na teplotu 5 °C a miešala sa 2 hodiny. Zmes sa potom pridala k 200 ml vody a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 50 ml). Organické extrakty sa vysušili nad síranom horečnatým a skoncentrovali sa. Zvyšok sa čistil silikagélovou chromatografiou (petroléter/etylacetát = 1:1). Tým vzniklo 2,8 g (45 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky.

NMR: δ = 2,28 (s, 3H, Me), 2,35 (s, 3H, Me), 4,58 (d, 2H, CH₂), 5,21 (s, 2H, CI±>Ph), 7,22 (d, 1H, PyH), 7,32 - 7,50 (m, 5H, Ph), 7,62 (d, 1H, PyH), 7,77 (t, 1H, NH).

Príklad J (5-Benzyloxypyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)metylamín

1,1 g (6,2 mmol) (5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)metylamínu sa pridalo v krátkom čase do suspenzie 0,25 g (6,5 mmol) hydridu sodného (60% suspenzia v parafínovm oleji) v 5 ml bezvodého /V-metylpyrolidónu, a zmes sa miešala počas

-181 hodiny. Potom sa po kvapkách pridal roztok 1,5 g (6,2 mmol) 2-chlórmetyl-5benzyloxypyridínu v 5 ml bezvodého /V-metylpyrolidónu a reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 2 hodiny. Tento roztok sa potom vlial do vody a extrahoval sa s etylacetátom (3 x 50 ml). Organické extrakty sa vysušili nad síranom horečnatým a skoncentrovali sa. Zvyšok sa čistil silikagélovou chromatografiou (toluén/dioxán = 4:1). Tá poskytla 2,0 g (61 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme žltého oleja.

Príklad K

2-Chlór-6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxypyridín

2,82 g (6,6 mmol) (5-benzyloxy-6-chlórpyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amínu (z príkladu I) sa suspendovalo v etanole (10 ml) a koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej (20 ml) a zmes sa zahrievala do refluxu 8 hodín. Číry roztok sa potom ochladil na teplotu miestnosti, jeho pH sa upravilo na hodnotu 7,0 za použitia nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a následne sa miešal pri teplote miestnosti 30 minút. Zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku a vysušila vo vákuovej sušiacej skrini pri teplote 40 °C. Izolovalo sa 1,65 g (84 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky.

NMR: δ = 2,28 (s, 3H, Me), 2,32 (s, 3H, Me), 4,57 (d, 2H, CH₂), 7,11 (d, 1H, PyH), 7,30 (d, 1H, PyH), 7,68 (t, 1H, NH), 10,5 (s, 1H, OH).

Príklad L

6-{[(5-Chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)metylamino]metyl}-3-hydroxypyridín

1,6 g (4,4 mmol) (5-benzyloxypyridín-2-ylmetyl)-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidin4-yl)metylamínu (z príkladu J) sa rozpustilo v metanole (25 ml), a pridalo sa 80 μΙ kyseliny chlorovodíkovej (5%-ný roztok vo vode), 160 mg paládia na uhlí (typ 90, Johnson Matthey) a 4,1 ml (43,7 mmol) cyklohexadiénu. Zmes sa zahrievala na teplotu 60 °C 15 minút. Po ochladení na teplotu miestnosti a odstránení katalyzátora filtráciou cez kremelinu sa filtrát pridal do vody a extrahoval sa s etylacetátom (30 ml). Organická fáza sa premyla nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 30 ml). Organické extrakty sa vysušili

-19nad síranom horečnatým a skoncentrovali sa. Nasledujúcou silikagélovou chromatografiou zvyšku (toluén/dioxán = 3:2) sa získalo 909 mg (79 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky. Teplota topenia 137 až 138 °C.

Príklad M

2-Chlór-3-hydroxy-6-metylpyridín g (184 mmol) 3-hydroxy-6-metylpyridínu sa rozpustilo v 80 ml ľadovej kyseliny octovej a po kvapkách sa pridal roztok 32 g (240 mmol) /V-chlórsukcínimidu v 480 ml ľadovej kyseliny octovej. Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti cez noc. Potom sa pridal roztok 21 g (110 mmol) dvojsiričitanu sodného v 160 ml vody a zmes sa miešala pri teplote miestnosti 1 hodinu a potom sa skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustil v 150 ml metanolu, pridalo sa 120 ml (644 mmol) roztoku metoxidu sodného (30%-ný roztok v metanole) a zmes sa miešala pri teplote miestnosti 30 minút. pH roztoku sa potom upravilo na hodnotu 7,0 použitím 2M kyseliny chlorovodíkovej a potom sa roztok skoncentroval. Zvyšok sa vložil do vody (500 ml) a extrahoval s etylacetátom (6 x 100 ml). Organické extrakty sa premyli nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušili sa nad síranom horečnatým a nakoniec sa skoncentrovali. Zvyšok (28 g) sa podrobil chromatografii na silikagéli, frakcie produktu sa zhromaždili a skoncentrovali. To poskytlo 14,7 g (56 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžovej tuhej látky.

NMR: δ = 2,31 (s, 3H, Me), 7,08 (d, 1H, PyH), 7,12 (d, 1H, PyH), 10,3 (s, 1H, OH).

Príklad N

2-Bróm-3-hydroxy-6-metylpyridín g (91,6 mmol) 3-hydroxy-2-metylpyridínu sa rozpustilo v 180 ml pyridínu a po ochladení na teplotu 0 °C sa pomaly po kvapkách pridalo 4,7 ml (91,6 mmol) brómu. Roztok sa zahrieval na teplotu miestnosti a miešal sa 2 hodiny. Suspenzia sa potom skoncentrovala a zrazenina sa odfiltrovala za podtlaku a materský lúh sa extrahoval s etylacetátom. Organické extrakty sa vysušili nad síranom horečnatým a skoncentrovali sa. Zvyšok (20 g) sa čistil silikagélovou chromatografiou (petroléter/-20etylacetát = 4:1). Izolovalo sa 6,3 g (37 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky.

NMR: δ = 2,31 (s, 3H, Me), 7,10 (d, 1H, PyH), 7,20 (d, 1H, PyH), 10,4 (s, 1H, OH).

Príklad O

2-Bróm-6-[(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamino)metyl]-3-hydroxy-4-(2,2,2-trifluóretoxy)pyridín

Na 0,59 g (1,1 mmol) [5-benzyloxy-6-bróm-4-(2,2,2-trifluóretoxy)pyridín-2ylmetyl]-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amínu (z príkladu P) v etanole (10 ml) sa pôsobilo koncentrovanou HCI (10 ml) a reakčná zmes sa refluxovala 3 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa roztok neutralizoval 10N NaOH, vylial sa do vody a extrahoval sa s etylacetátom (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili nad síranom horečnatým a skoncentrovali sa vo vákuu za vzniku 0,45 g (93 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme béžového prášku s teplotou topenia 204 až 205 °C.

Príklad P [5-Benzyloxy-6-bróm-4-(2,2,2-trifluóretoxy)pyridín-2-ylmetyl]-(5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-yl)amín

Na roztok 0,75 g (4,8 mmol) 5-chlór-2,6-dimetylpyrimidín-4-ylamínu v suchom Λ/,/V-dimetylformamide (10 ml) sa pôsobilo 0,23 g (5,8 mmol) hydridu sodného (60%-ná suspenzia v parafíne) pri teplote 0 °C a zmes sa miešala pri tejto teplote 15 minút. Po kvapkách sa pridal roztok 1,9 g (4,8 mmol) 3-benzyloxy-2-bróm-6chlórmetyl-4-(2,2,2-trif!uóretoxy)pyridínu v suchom Λ/,/V-dimetylformamide (5 ml) a teplota sa pomaly nechala zvýšiť na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 30 minút a potom sa naliala do vody (150 ml) a extrahovala sa s etylacetátom (3 x 70 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušili so síranom horečnatým a skoncentrovali sa vo vákuu. Zvyšok sa čistil chromatografiou na silikagéli (petroléter/etylacetát = 3:1) za vzniku 0,61 g (24 %) v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bieleho prášku s teplotou topenia 97 až 98 °C.

-21 Komerčné využitie

Výborná účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I a ich solí proti Helicobacter baktérii umožňuje ich použitie v humánnej medicíne ako účinných zložiek na liečenie ochorení spôsobených baktériou Helicobacter.

Vynález preto ďalej poskytuje spôsob liečenia cicavcov, najmä človeka, ktorí ochoreli na ochorenie spôsobené baktériou Helicobacter. Spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného a farmakologicky prípustného množstva jednej alebo viacerých zlúčenín všeobecného vzorca I a/alebo ich farmakologicky prijateľných solí postihnutému jedincovi.

Vynález ďalej poskytuje zlúčeniny všeobecného vzorca I a ich farmakologicky prijateľné soli na použitie na liečenie ochorení spôsobených baktériou Helicobacter.

Vynález tiež zahrnuje použitie zlúčenín všeobecného vzorca I a ich farmakologicky prijateľných solí vo farmaceutických prostriedkoch, ktoré sa používajú na potlačenie ochorení spôsobených baktériou Helicobacter.

Vynález okrem toho poskytuje farmaceutické prostriedky na potlačenie baktérie Helicobacter, ktoré obsahujú jednu alebo viac zlúčenín všeobecného vzorca I a/alebo ich farmakologicky prijateľné soli.

Ukázalo sa, že medzi kmeňmi Helicobacter, proti ktorým sú zlúčeniny všeobecného vzorca I účinné, sa môže uviesť najmä kmeň Helicobacter pylori, pričom zlúčeniny podľa vynálezu sa vyznačujú najmä vysokou selektivitou pre mikroorganizmy Helicobacter.

Farmaceutické prostriedky sa pripravili bežnými spôsobmi známymi odborníkom v danej oblasti techniky. Ako liečivá sa môžu farmakologicky účinné zlúčeniny všeobecného vzorca I a ich soli (t.j., účinné zložky) použiť buď samostatne alebo výhodne v kombinácii s vhodnými farmaceutickými pomocnými látkami napríklad vo forme nepoťahovaných tabliet, poťahovaných tabliet, kapsúl, emulzií, suspenzií, gélov alebo roztokov, pričom obsah účinných zložiek je výhodne v rozmedzí 0,1 až 95 %.

Voľba vhodných pomocných látok pre požadované farmaceutické prostriedky je známa odborníkom v danej oblasti techniky na základe jeho alebo jej znalostí. Okrem rozpúšťadiel, gélotvorných činidiel, tabletovacích pomocných látok a iných excipientov pre účinné zložky, je možné, napríklad použitie antioxidantov,

-22disperzných činidiel, emulgačných činidiel, činidiel na zabránenie penenia, ochucovacích činidiel, konzervačných látok, solubilizátorov, farbív alebo permeačných promótorov a komplexotvorných činidiel (ako je napríklad cyklodextrín).

Účinné zložky sa môžu podávať napríklad parenterálne alebo výhodne perorálne.

V humánnej medicíne sa vo všeobecnosti účinné zložky podávajú v dennej dávke približne 0,1 až 50, výhodne 1 až 30 mg/kg telesnej hmotnosti, výhodne vo forme dvoch alebo viacerých, najmä 2 až 3 jednotlivých dávok, výhodnejšie v jedinej dennej dávke za účelom dosiahnutia požadovaného výsledku.

Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu tiež podávať v pevnej alebo voľnej kombinácii s látkou, ktorá neutralizuje žalúdočnú kyselinu a/alebo inhibuje sekréciu žalúdočnej kyseliny a/alebo s látkou, ktorá je vhodná na bežné potlačenie Helicobacter pylori.

Príklady neutralizačných činidiel žalúdočnej kyseliny zahrnujú hydrogenuhličitan sodný alebo iné antacidy (ako je napríklad hydroxid hlinitý, hlinitan alebo magaldrát horečnatý). Príklady inhibítorov žalúdočnej kyseliny, ktoré sa môžu spomenúť, zahrnujú H₂ blokátory (ako je napríklad cimetidín, rantidín), inhibítory H⁺/K⁺ ATPázy (ako je napríklad lansoprazol, omeprazol, ezomeprazol, rabeprazol alebo výhodne pantoprazol) a látky známe ako reverzibilné inhibítory H⁺/K⁺ ATPázy (zlúčeniny opísané napríklad v medzinárodných patentových prihláškach WO 00/11000, WO 00/10999, WO 99/55706, WO 99/55705 alebo WO 98/37080 a štrukturálne podobné zlúčeniny).

Ako látky vhodné na bežné potlačenie Helicobacter pylori sa môžu spomenúť najmä bakteriostatické látky, ako je napríklad penicilín G, gentamycín, erytromycín, klaritromycín, azitromycín, nitrofurazón, tinidazol, nitrofurantoín, furazolidón, ampicilín, cefaklor, cefadroxii, cefalexín, cefpodoxím proxetil, cefradín, ceftazidím, ceftriaxón, cefuroxím, ciprofioxacín, clindamycín, doxycyklín, ekabet, gatifloxacín, imipeném, meropeném, mezlociiín, minocyklín, moxifloxacín, norfloxacín, ofloxacín, oxetakaín, paromomycín, pefloxacín, rebamipid, rifampicín, rifaximín, roxatidín, tetracyklín, tiabendazol, trovafloxacín, ritipeném, ekabapid, nitazoxanid,

-23sanfetriném, sitafloxacín, trospektomycín, metronidazol alebo amoxycilín alebo bizmutové soli, ako je napríklad citran bizmutitý.

Biologické testy

Test riedením agarom (určenie inhibície rastu in vitro na agarových platniach)

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sa testovali na účinok proti Helicobacter pylori v súlade so spôsobom opísaným vTomoyuki Iwahi a ďalší (Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1991, 490 až 496), použitím Kolumbijského agaru (Oxoid) počas periódy rastu 4 dni. Testované zlúčeniny poskytli približné hodnoty MIC50 uvedené v tabuľke A nižšie (čísla zlúčenín zodpovedajú číslam príkladov v opise).

Tabuľka A

Zlúčenina č.	Približné hodnoty MIC₅₀(mg/l)
1	0,1
2	0,1
3	0,1
4	0,1

Určenie inhibície rastu in vitro v kvapalnej kultúre

Podstata postupu je založená na zistení nárastu, napríklad Helicobacter pylori v kvapalnej kultúre použitím BHI/6% FCS média. Spôsob zisťuje lineárne zvýšenie fluorescencie v rozmedzí 3x10® až 3x10® buniek.

Bakteriálna kultúra sa distribuovala s počiatočnou hustotou 1x10® až 3x10® mikroorganizmov/ml do MTP s 96 jamkami v 100 μΙ alikvótnych podieloch. K týmto minikultúram sa pridali testované látky v koncentrácii 10⁹ až 10® mol/l v konečnej koncentrácii 1%-ného DMSO. Tieto MTP sa potom inkubovali za mikroaeróbnych podmienok (Anaerokult, Merck) a trepaním pri teplote 37 °C 24 hodín. Po 24

-24hodinovej inkubácii sa minikultúry premiestnili na filtračné MTP a premyli sa dvakrát izotonickým pufrom (odfiltrovali sa podtlakom, zozbierali sa, trepali) a nakoniec sa premiestnili do dvakrát destilovanej vody a pretrepali sa a alikvotná časť sa premiestnila na nové MTP. Táto alikvotná časť sa zmiešala s fluorescenčným farbivom NanoOrange (Molecular Probes) v súlade s inštrukciami výrobcu. Vývoj proteínovej detekcie sa uskutočnil pri teplote 90 °C tlakovým sendvičovým spôsobom. Po ochladení platní, sa merala fluorescencia na platňovom čítači pri 549 nm. Tieto údaje sa použili na vytvorenie kriviek koncentrácia/účinok, z ktorých sa určili parametre látok, IC₅₀ hodnoty. Výpočet sa uskutočnil použitím pôvodnej, sigmoidálnej krivkovej adaptácie pomocou logistického algoritmu. Týmto spôsobom testované zlúčeniny poskytli hodnoty IC50 ako je uvedené v tabuľke B nižšie (čísla zlúčenín zodpovedajú číslam zlúčenín z príkladov).

Tabuľka B

Zlúčenina č.	IC50 (μίτίοΙ/Ι)
1	0,012
2	0,064
3	0,035
4	0,04

Určenie eradikačnej rýchlosti Helicobacter pylorí in vivo

Spôsob testovania

Tarbíky sa nainfikovali v dni 1, 3 a 5 suspenziou, ktorá obsahovala 10⁸ až 10^sHelicobacter pylorí baktérie na živočícha. Po infikácii mali tarbíky 4 týždňovú zotavovaciu fázu, počas ktorej boli baktérie schopné rozšíriť sa do žalúdka. Na začiatku 36-tého dňa sa tarbíkom štyri po sebe nasledujúce dni, trikrát denne o 7:30, 11:30 a 15:00 s použitím trubice podalo placebo alebo testovaná látka. Štyri týždne po poslednom podaní sa tarbíky usmrtili použitím CO₂. Vzorka dutinového

-25tkaniva sa zaviedla do ureázového testovacieho roztoku a inkubovala sa pri teplote 37 °C 24 hodín. Zistili sa zmeny farby roztoku zo žltej na fialovú, ktorá vyplynula zo zvýšenia pH, čo bolo spôsobené tvorbou NH₃ zureázy. Eradikačná rýchlosť sa vypočítala ako percento zvierat, ktorých vzorka žalúdočného tkaniva poskytla negatívny ureázový test.

Podmienky, za ktorých sa zvieratá držali:

Skupiny 5 až 10 tarbíkov na klietku (klietka Macrolon typu IV) sa držali pri okolitej teplote 23 ± 2 °C a relatívnej vlhkosti 50 ± 10 %. Kŕmili sa ad libitum s NAFAG potravou č. 9439 pre potkany a myši (NAFAG AG, CH-2900, Gossau, Switzerland) a počas testu mali voľný prístup k prívodu vody.

Látky a dávky:

Percento rozpustenej látky:	4% metylcelulóza vo vode
Podávaný objem:	10 m/kg
Forma podávania:	trubica
Frekvencia podávania:	3 krát denne
Dĺžka terapie:	4 dni

Podávané zlúčeniny sú uvedené v tabuľke C nižšie, pričom použité čísla zodpovedajú číslam zlúčenín v príkladoch.

Tabuľka C

Zlúčenina č.	Podávaná dávka mg/kg	Eradikačná rýchlosť v %
3	50	100

Ί*Ρ /556-200^

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I

R2

R1

R5 R6 YYx-B-R7 kde

R1 je vodík, 1-4C-alkyl alebo halogén,

R2 je vodík, 1 -4C-alkyl alebo halogén,

R3 je vodík, 1-4C-alkyl alebo halogén,

R4 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R5 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

R6 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je cyklický alebo bicyklický radikál, ktorý je substituovaný nitroskupinou a R8 a R9 a je vybraný zo skupiny zahrnujúcej imidazol, imidazopyridazín a imidazopyridín,

A je 1-7C-alkylén,

B je väzba alebo 1-7C-alkylén,

X je O (kyslík), N-1-4C-alkyl, NH alebo S(0)_n a

Y je N, kde

R8 je vodík, 1-4C-alkyl, halogén, nitro, hydroxy-1-4C-alkyl alebo 1-4C-alkylkarbonyloxy-1-4C-alkyl,

R9 je vodík, 1-4C-alkyl alebo nitroskupina, a n je O, 1 alebo 2,

-27a ich soli, pričom sú vylúčené zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

A je metylén alebo metylén substituovaný jedným alebo dvoma 1-4C-alkylmi R5 a R6 sú vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén

X je naviazané v polohe 4 pyridínového kruhu

a) B je 2-7C-alkylén X je N-1-4C-alkyl

b) B je 1-7C-alkylén X je O (kyslík)

c) B je 1-7C-alkylén X je S a ich soli.
2. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde

R1 je vodík, 1-4C-alkyl alebo halogén,

R2 je vodík, 1-4C-alkyl alebo halogén,

R3 je vodík alebo halogén,

R4 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R5 je vodík, hydroxyl, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

R6 je vodík, 1 -4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je cyklický alebo bicyklický radikál, ktorý je substituovaný nitroskupinou a R8 a R9 a je vybraný zo skupiny zahrnujúcej imidazol a imidazopyridazín,

A je metylén,

B je väzba alebo 1-4C-alkylén,

X je O (kyslík), NH alebo S(O)_n a

Y je N kde

R8 je vodík,

R9 je vodík, n je 0, a ich soli,

-28pričom sú vylúčené zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén X je naviazaný v polohe 4 pyridínového kruhu B je 1-4C-alkylén

a) X je O (kyslík)

b) X je S a ich soli.
3. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde R1 je vodík alebo 1 -
4C-alkyl,

R2 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R3 je halogén,

R4 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R6 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je cyklický alebo bicyklický radikál, ktorý je substituovaný nitroskupinou a R8 a R9 a je vybraný zo skupiny zahrnujúcej imidazol a imidazopyridazín,

A je metylén,

B je väzba alebo 1-4C-alkylén,

X je O (kyslík) a

Y je N kde

R8 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R9 je vodík, a ich soli, pričom sú vylúčené zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén

X je naviazaný v polohe 4 pyridínového kruhu

B je 1-4C-alkyién

X je O (kyslík) a ich soli.

-294. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, kde R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy, trifluórmetyl alebo halogén,

R6 je vodík, 1 -4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál alebo 2-metyl-5-nitroimidazol-1ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba alebo 1-2C-alkylén,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

Y je N, a ich soli, pričom sú vylúčené zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén

X je naviazaný v polohe 4 pyridínového kruhu

B je 1-2C-alkylén

a) X je O (kyslík)

b) X je S a ich soli.
5. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, 2, 3 alebo 4, kde B je väzba a R7 je 3-nitroimidazo[1,2-blpyridazín-6-ylový radikál.
6. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, 2, 3 alebo 4, kde B je etylénový radikál a R7 je 2-metyl-5-nitroimidazol-1-ylový radikál.
7. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, 2, 3 alebo 4, kde B je väzba, R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál a X je O (kyslík).

-308. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, 2, 3 alebo 4, kde B je etylénový radikál, R7 je 2-metyl-5-nitroimidazol-1-ylový radikál a X je O (kyslík).
9. Pyridylmetylaminopyrimidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca I* ^R5\/\ .X-B-R7 R3 R4 p

N. Ä J^R6

A Y

R2 (ľ) kde

R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, hydroxyl, metyl, metoxy, etoxy, cyklopropyl metoxy, izobutoxy, trifluórmetoxy, difluórmetoxy, trifluórmetyl alebo chlór,

R6 je vodík, metyl, metoxy alebo chlór,

R7 je 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6-ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

Y je N, a ich soli.
10. Pyridylmetylaminopyrimidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca ľ ako je určený v nároku 9, kde R1 je vodík alebo metyl,

R2 je vodík alebo metyl,

-31 R3 je vodík alebo chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, hydroxyl, metyl, metoxy, etoxy, cyklopropylmetoxy, izobutoxy, trifluórmetoxy, difluórmetoxy, trifluórmetyl alebo chlór,

R6 je vodík, metyl, metoxy alebo chlór,

R7 je 2-metyl-5-nitroimidazo-1-ylový radikál,

A je metylén,

B je etylén,

X je O (kyslík), NH alebo S, a

Y je N, a ich soli.
11. Pyridylmetylaminopyrímidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca I* ako je určený v nároku 9, kde R1 je 1-4C-alkyl,

R2 je 1-4C-alkyl,

R3 je halogén,

R4 je vodík alebo 1 -4C-alkyl,

R5 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy, úplne alebo prevažne fluórom substituovaný 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R6 je vodík, 1-4C-alkyl, 1-4C-alkoxy alebo halogén,

R7 je 2-metyl-5-nitroimidazo-1-ylový radikál alebo a 3-nitroimidazo[1,2~b]pyridazín6-ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba alebo etylén,

X je O (kyslík) a

Y je N, a ich soli.
12. Pyridylmetylaminopyrímidíny podľa nároku 1 všeobecného vzorca ľ ako je určený v nároku 9, kde R1 je metyl,

-32R2 je metyl,

R3 je chlór,

R4 je vodík alebo metyl,

R5 je vodík, metyl, metoxy, trifluóretoxy alebo chlór,

R6 je vodík, metyl, metoxy alebo bróm,

R7 je 2-metyl-5-nitroimidazo-1-ylový radikál alebo 3-nitroimidazo[1,2-b]pyridazín-6ylový radikál,

A je metylén,

B je väzba alebo etylén,

X je O (kyslík) a

Y je N, a ich soli.
13. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1 a/aiebo ich farmakologicky prijateľné soli spolu s bežnými pomocnými látkami.
14. Pyridylmetylaminopyrimidíny všeobecného vzorca I podľa nároku 1 a/alebo ich farmakologicky prijateľné soli na použitie na potlačenie Helicobacter baktérie.
15. Použitie pyridylmetylaminopyrimidínov všeobecného vzorca I podľa nároku 1 a ich farmakologicky prijateľných solí na výrobu lieku na potlačenie Helicobacter baktérie.