SE432425B

SE432425B - STEROID INTERMEDIATES FOR USE IN THE PREPARATION OF A TRITIUM LABELED STEROID AND PROCEDURE FOR PREPARING THEREOF

Info

Publication number: SE432425B
Application number: SE7803051A
Authority: SE
Inventors: R Bardoneschi; A Jouquey; D Philibert
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1977-04-01
Filing date: 1978-03-16
Publication date: 1984-04-02
Also published as: JPS62281894A; FR2385737B1; BE865555A; AU516015B2; JPS53124254A; CH629826A5; JPS6126798B2; IT1101860B; IT7848677A0; AU3469178A; FR2385737A1; GB1594197A; SE7803051L; JPS641480B2; CA1122590A; DE2814048A1

Description

770l+ 765 -2 utrustning och fordrar en hel del energi. 770l + 765 -2 equipment and requires a lot of energy.

Det är känt att stärkelse kan lösas med a-amylas under icke-gela-z tinerande betingelser och senare utveckling (se t ex US-PS 3 922 199, 3 922 200, 3 922 198 och 3 922 196) visar att stärkelse kan lösas full- ständigt med u-amylas från bakterier vid temperaturer överstigande stärkelsets "normala" gelatineringstemperatur utan att någon iakttagba1 gelatinering äger rum. _ Dessa på senare tid utvecklade processerna är begränsade till stärkelseuppslamningar på 40 % eller lägre (såvida ej särskild utrust- ning användes) och då man arbetar vid temperaturer väsentligen över den normala gelatineringstemperaturen (t ex vid 75°C för majsstärkelsej är det vidare nödvändigt att först framställa den vattenhaltiga upp- slamningen av stärkelse och enzym vid en lägre temperatur och därefter uppvärma uppslamningen till den slutliga önskade temperaturen, om ge- latinering skall undvikas. Om man tillsätter stärkelse och a-amylas 'direkt till varmvatten, som har en temperatur över den normala gela- tineringstemperaturen för stärkelsen, gelatineras stärkelsen omedel- bart. Då ny granulär stärkelse tillsättes till en vattenhaltig, fly- tande stärkelseuppslamning vid temperaturer så höga som 75°C-85°C elle: t om däröver har det emellertid enligt föreliggande uppfinning över- K raskande visat sig att ingen iakttagbar gelatinering med åtföljande viskositetstopp äger rum. På grund av dessa överraskande fenomen är det möjligt att “bygga upp" halten fast material i en fullständigt flytande (liquefied) stärkelseuppslamning till de tidigare nämnda nivåerna.It is known that starch can be dissolved with α-amylase under non-gelatinizing conditions and later development (see for example US-PS 3,922,199, 3,922,200, 3,922,198 and 3,922,196) shows that starch can be dissolved complete with u-amylase from bacteria at temperatures exceeding the "normal" gelatinization temperature of the starch without any observed gelatinization. These recently developed processes are limited to starch slurries of 40% or less (unless special equipment is used) and when operating at temperatures well above the normal gelatinization temperature (eg at 75 ° C for corn starch, it is further necessary to: first prepare the aqueous slurry of starch and enzyme at a lower temperature and then heat the slurry to the final desired temperature, if gelatinization is to be avoided.If adding starch and α-amylase 'directly to hot water, which has a temperature above the normal gelatinization temperature of the starch, the starch is immediately gelatinized.When new granular starch is added to an aqueous, liquid starch slurry at temperatures as high as 75 ° C-85 ° C or above, however, according to the present invention surprisingly, no detectable gelatinization with concomitant viscosity peaks occurs. Due to these surprising phenomena, it is possible to "build up" the solids content of a completely liquid (liquefied) starch slurry to the previously mentioned levels.

Föreliggande uppfinning avser ett förfarande, varvid vattenhal- tiga uppslamningar av flytande och väsentligen löst stärkelse med exceptionellt höga halter fast material, dvs upp till 70 vikt% eller högre, kan framställas med konventionell utrustning och utan behov av separata indunstningssteg. Enligt föreliggande förfarande utgår man från en vattenhaltig uppslamning av ett stärkelsehydrolysat (med ett D.E. på ca 1 till ca 25) vid en koncentration fast material på 40 vikt% eller lägre. Detta utgångsmaterial kan framställas på kon- ventionellt sätt, såsom genom syrahydrolys, syra-enzymhydrolys, enzym- hydrolys etc. Alternativt kan man utgå från ett torrt stärkelsehydro- lysat och lösa det i vatten till en halt fast material på upp till 40 a. i Till detta utgângsmaterial sättes sedan undan för undan, före- trädesvis i form av successiva portioner, ny granulär stärkelse 1 närvaro av a-amylas från bakterier under förhållanden, som inte fram- 7704765-2 kallar någon iakttagbar gelatinering av stärkelsen med åtföljande snabb viskositetsökning, som är utmärkande för stärkelsensgelatine- ring. Vid början av tillsatsen av ny stärkelse måste temperaturen naturligtvis hållas under den normala gelatineringstemperaturen för att undvika gelatinering. Då ny stärkelse tillsättes och överföres till flytande tillstånd genom inverkan av a-amylas kan temperaturen gradvis höjas upp till temperaturer över stärkelsens "normala" gela- tineringstemperatur utan att man kan iakttaga någon gelatinering och "viskositetstopp". Genom att på detta sätt efterhand tillsätta stär- kelse och omvandla stärkelsen till flytande tillstånd under icke- I gelatinerande betingelser kan uppslamningens innehåll av fast material “byggas upp" till koncentrationer på 70 vikt% eller t o m högre i kon- ventionell utrustning utan några viskositetsproblem. Då det sista av den nya stärkelsen har tillsatts och överförts till väsentligen_ 7 flytande form och lösts av a-amylaset är det önskvärt att temperaturen höjes till minst 90°C (företrädesvis mellan 90°C och lO5°C, även om 'temperaturer på upp till l50°C är lämpliga) för att göra återstående stärkelse flytande och väsentligen löst.The present invention relates to a process in which aqueous slurries of liquid and substantially dissolved starch with exceptionally high levels of solids, i.e. up to 70% by weight or higher, can be prepared with conventional equipment and without the need for separate evaporation steps. The present process is based on an aqueous slurry of a starch hydrolyzate (having a D.E. of about 1 to about 25) at a solids concentration of 40% by weight or less. This starting material can be prepared in a conventional manner, such as by acid hydrolysis, acid enzyme hydrolysis, enzyme hydrolysis, etc. Alternatively, one can start from a dry starch hydrolyzate and dissolve it in water to a solids content of up to 40 a. To this starting material is then added one by one, preferably in successive portions, new granular starch in the presence of α-amylase from bacteria under conditions which do not call for any noticeable gelatinization of the starch with concomitant rapid viscosity increase. which is characteristic of starch gelatinization. At the beginning of the addition of fresh starch, the temperature must of course be kept below the normal gelatinization temperature to avoid gelatinization. When new starch is added and transferred to a liquid state by the action of α-amylase, the temperature can be gradually raised to temperatures above the starch's "normal" gelatinization temperature without any gelatinization and "viscosity peak" being observed. By gradually adding starch and converting the starch to a liquid state under non-gelatinizing conditions, the solids content of the slurry can be "built up" to concentrations of 70% by weight or even higher in conventional equipment without any viscosity problems. When the last of the new starch has been added and transferred to a substantially liquid form and dissolved by the α-amylase, it is desirable that the temperature be raised to at least 90 ° C (preferably between 90 ° C and 105 ° C, although temperatures of up to to 150 ° C are suitable) to make the remaining starch liquid and substantially dissolved.

Under det förfarande, då ny stärkelse tillsättes och göres flytande, kan a-amylas tillsättas om så erfordras. Det mest praktiska är emellertid att ha så mycket a-amylas i utgångsuppslamningen att all den stärkelse, som tillsättes, göres flytande, varigenom man und- viker de extra steg, som tillsats av ytterligare enzymer under proces- sen innebär. Processbetingelserna är sådana att detta lätt kan göras utan menlig inverkan på a-amylaset.During the process, when new starch is added and liquefied, α-amylase can be added if required. However, it is most practical to have so much α-amylase in the starting slurry that all the starch that is added is liquefied, thus avoiding the extra steps involved in adding additional enzymes during the process. The process conditions are such that this can be easily done without adversely affecting the α-amylase.

Temperaturen vid stärkelsetillsatsens början bör vara lämplig för optimal a-amylasverkan utan gelatinering av stärkelsen; en tempe- ratur på 60°C är lämplig för de flesta stärkelsesorter. Eftersom stärkelse efterhand tillsättes och göres flytande, kan temperaturen mea fördel nöjes till ee ss°c een slutligen till 9o°c eller aäröver utan att någon iakttagbar gelatinering äger rum.The temperature at the beginning of the starch addition should be suitable for optimal α-amylase action without gelatinization of the starch; a temperature of 60 ° C is suitable for most starches. Since starch is gradually added and liquefied, the temperature can advantageously be adjusted to ee ss ° c ee finally to 90 ° C or above without any detectable gelatinization taking place.

Valet av d-amylas från bakterier är ej kritiskt men enzymet bör vara ett sådant, som behåller sin aktivitet vid de använda temperatu- rerna. Föredragna källor till lämpliga a-amylaser är vissa arter av Bacillus-mikroorganismen, såsom Bacillus subtilis, Bacillus licheni- formis, Bacillus coagulans och Bacillus amyloliquefaciens. Lämpliga u-amylaser är beskrivna i den österrikiska patentansökningen 4836/70 och i US-PS 3 697 368. Särskilt lämpliga u-amylaser är sådana, som kommer från Bacillus licheniformis såsom beskrives i den österrikiska ansökningen. Särskilt lämpliga är d-amylas, som kommer från Bacillus '1704765-2 4 licheniformis stam NCIB 8061; andra specifika mikroorganismer är stammar av Bacillus licheniformis stammarna NCIB 8059, ATCC 6598, ATCC 6634, ATCC 8480, ATCC 9945A och ATCC 11945. Dessa nämnda enzy- mer är ovanligt verksamma vid omvandling av granulär stärkelse till flytande form; dvs vid liquefaktion av stärkelse i granulär form utan föregående eller samtidig gelatinering. Ett sådant enzym, som är sär- Skilt lämpligt enligt uppfinningen, identifieras med varunamnet "Thermamyl" från Novo Enzyme Corporation, Mamaroneck, New York.The choice of d-amylase from bacteria is not critical, but the enzyme should be one which retains its activity at the temperatures used. Preferred sources of suitable α-amylases are certain species of the Bacillus microorganism, such as Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus coagulans and Bacillus amyloliquefaciens. Suitable u-amylases are described in Austrian patent application 4836/70 and in U.S. Pat. No. 3,697,368. Particularly suitable u-amylases are those derived from Bacillus licheniformis as described in the Austrian application. Particularly suitable are d-amylase, which comes from Bacillus' strain licheniformis NCIB 8061; other specific microorganisms are strains of Bacillus licheniformis strains NCIB 8059, ATCC 6598, ATCC 6634, ATCC 8480, ATCC 9945A and ATCC 11945. These enzymes are unusually effective in converting granular starch to liquid form; ie in liquefaction of starch in granular form without prior or simultaneous gelatinization. Such an enzyme, which is particularly suitable according to the invention, is identified by the trade name "Thermamyl" from Novo Enzyme Corporation, Mamaroneck, New York.

Thermanyl utmärkas av följande egenskaper: a) det är termiskt stabilt, _ b) det är aktivt inom ett brett pH-intervall och c) dess aktivitet och värmestabilitet är mindre beroende än andra a-amylasers aktivitet och värmestabilitet av närvaron av till- satta kakiumjoner- “ En typisk analys av tre olika Thermamyl-beredningar är följande: Thermamyl Thermamyl Thermamyl 60 120 Torr substans, % 35,4 98,8 94,6 a-amylas~aktivitet . , U/g (som Sådan) ll55 2105 9124 Protein, % (torr basis) 26,5 21,2 21,2 Aska, % (torr basis) 60,1 91.2 64,4 Kalcium, % (torr basis) 0,04 0,72 4,9 Natrium, % (torr basis) 12,3 12,2 _ - Andra lämpliga u~amylaser, som finns tillgängliga, är följande: Tabell I Enzgmberedning Företag 'ggrm Aktivitet Rhozyme H~39 Rohm & Haas Pulver 4 874 U/g Takamine HT~l000 Miles pulver 3 769 Ü/g Tenase Miles flytande 2 043 U/ml DekfL0 MM Wallerstein flytande 1 213 U/ml Novo SP-96 Novo. ' pulver- 7 310 U/g Novo B. Subtilis Novo- 8 flytande. 1 599 U/ml Kleistase GMøl6 Daiwa Kasai pulver 26 593 U/g Kleistase Lfl Daiwa Kasai flytande I 918 U/ml Rapidase SP~250 Societe pulver- 11 655 U/g "Rapidase" - France maxamyl Lx eooo, sist-Brocaaes f1ytanae_ 13 300 U/mi 7704765-2 Ett enzyms a-amylasaktivitet bestämmas på följande sätt: Enzymet får reagera med en standardstärkelselösning under reglerade betingelser. Enzymaktiviteten bestämmas av den grad av stärkelsehydrolys, som återspeglas genom en minskning av den jodhållande förmågan, som mätes spektrofotometriskt. Enheten för a-amylasets aktivitet är den enzymmängd, som erfordras för att hydrolysera 10 mg stärkelse per min under försöksbetingelser- na. Metoden kan tillämpas på a-amylaser från bakterier, inkl industriella beredningar, men ej på material, som har betydande- försockrande verkan.Thermanyl is characterized by the following properties: a) it is thermally stable, _ b) it is active within a wide pH range and c) its activity and thermal stability are less dependent than the activity of other α-amylases and thermal stability of the presence of added cacium ions A typical analysis of three different Thermamyl preparations is as follows: Thermamyl Thermamyl Thermamyl 60 120 Dry substance,% 35.4 98.8 94.6 α-amylase activity. , U / g (as Such) ll55 2105 9124 Protein,% (dry basis) 26.5 21.2 21.2 Ash,% (dry basis) 60.1 91.2 64.4 Calcium,% (dry basis) 0, 04 0.72 4.9 Sodium,% (dry basis) 12.3 12.2 _ - Other suitable amylases available are as follows: Table I Enzyme preparation Company 'ggrm Activity Rhozyme H ~ 39 Rohm & Haas Powder 4 874 U / g Takamine HT ~ l000 Miles powder 3 769 Ü / g Tenase Miles liquid 2 043 U / ml DekfL0 MM Wallerstein liquid 1 213 U / ml Novo SP-96 Novo. 'powder- 7 310 U / g Novo B. Subtilis Novo- 8 liquid. 1 599 U / ml Kleistase GMøl6 Daiwa Kasai powder 26 593 U / g Kleistase Lfl Daiwa Kasai liquid I 918 U / ml Rapidase SP ~ 250 Societe powder- 11 655 U / g "Rapidase" - France maxamyl Lx eooo, sist-Brocaaes f1ytanae_ 13,300 U / ml 7704765-2 The α-amylase activity of an enzyme is determined as follows: The enzyme is reacted with a standard starch solution under controlled conditions. The enzyme activity is determined by the degree of starch hydrolysis, which is reflected by a decrease in the iodine-bearing capacity, which is measured spectrophotometrically. The unit of activity of the α-amylase is the amount of enzyme required to hydrolyze 10 mg of starch per minute under the experimental conditions. The method can be applied to α-amylases from bacteria, including industrial preparations, but not to materials that have a significant sweetening effect.

Från 0,3 till 0,5 ml fast prov eller från 0,3 till]§0nlfßmandeprov löses i en tillräcklig mängd 0,0025 M vattenhaltig kalciumklorid för bildning av en enzymlösning innehållande ungefär 0,25 aktivi- tetsenheter per ml. ' En blandning av 10 ml av en l % Linter-stärkelselösning, som bringats till jämvikt vid 60°C och l'ml av det enzymprov, som skall testas, blandas och hålles i ett bad med konstant tempera- tur under exakt 10 min. Ett l ml prov avlägsnas och tillsättes till en blandning av l ml l M vattenhaltig väteklorid och ca 50 ml destillerat vatten. Den jodbindande förmågan hos ett sådant sur- gjort prov bestämmes sedan genom tillsats av 0,3 ml 0,05 % vatten- haltig jodlösning, spädning till 100 ml med destillerat vatten och omsorgsfull omblandning. Lösningens absorbans i förhållande till absorbansen hos destillerat vatten mätes vid 620 mm i en 2 cm cell. (En liknande mätning göres på standardstärkelselös- ningen) för att ge ett nollprov. Enzymaktiviteten i enheter: g eller/ml är lika med: (Absorbans för nollprov - absorbans för prov) X spädningsfaktor X 50 Absorbans för nollprov X 10 X 10 Den mängd u-amylas, som användes är naturligtvis den mängd, som är nödvändig för att överföra all den granulära stärkelsen till fly- tande form, och denna mängd kan i allmänhet variera inom intervallet ca 0,5 till ca 25 aktivitetsenheter per g stärkelse (torr basis), varvid den lägsta mängden beror på den speciella stärkelsesort, som överföres till flytande form. Stärkelsemängder överstigande 25 U/g kan användas men utan praktisk fördel. Såsom nämnts är det lämpligt att tillsätta hela "dosen" a-amylas vid processens början, fastän a-amyls kan tillsättas i små mängder under processen om så erfordras. pH-värdet under liquefaktionen av stärkelsen måste naturligtvis vara sådant att man får optimal aktivitet hos a-amylaset; pH-värdet varierar vanligen 77014765-2 mellan 5 och 7,5, och uppgår företrädesvis till ca 6.From 0.3 to 0.5 ml of solid sample or from 0.3 to 10 ml of oral sample is dissolved in a sufficient amount of 0.0025 M aqueous calcium chloride to form an enzyme solution containing about 0.25 units of activity per ml. A 10 ml mixture of a 1% Linter starch solution equilibrated at 60 ° C and 1 ml of the enzyme sample to be tested is mixed and kept in a constant temperature bath for exactly 10 minutes. A 1 ml sample is removed and added to a mixture of 1 ml of 1 M aqueous hydrogen chloride and about 50 ml of distilled water. The iodine binding capacity of such an acidified sample is then determined by adding 0.3 ml of 0.05% aqueous iodine solution, diluting to 100 ml with distilled water and mixing thoroughly. The absorbance of the solution relative to the absorbance of distilled water is measured at 620 mm in a 2 cm cell. (A similar measurement is made on the standard starch solution) to give a zero sample. The enzyme activity in units: g or / ml is equal to: (Absorbance for zero sample - absorbance for sample) X dilution factor X 50 Absorbance for zero sample X 10 X 10 The amount of u-amylase used is, of course, the amount necessary to transfer all the granular starch to liquid form, and this amount can generally vary in the range of about 0.5 to about 25 activity units per g of starch (dry basis), the lowest amount depending on the particular type of starch which is transferred to liquid form. Starch amounts in excess of 25 U / g can be used but without practical advantage. As mentioned, it is convenient to add the entire "dose" of α-amylase at the beginning of the process, although α-amyls may be added in small amounts during the process if required. The pH value during the liquefaction of the starch must, of course, be such as to obtain optimum activity of the α-amylase; The pH usually varies between 5 and 7.5, and preferably amounts to about 6.

De särskilda villkoren för stärkelsetillsatsens hastighet, den tillsatta mängden vid ett givet ögonblick och temperaturinställningar- na är sådana att man undviker observerbar gelatinering och hindrar att viskositeten blir alltför hög för bekväm hantering..De komplette-, rande stärkelsetillsatserna kan göras vid en tidpunkt, då ett till- räckligt förhållande tidigare tillsatt stärkelse har lösts i sådan grad att den efterföljande tillsatsen ej ger alltför hög viskositet.The special conditions for the speed of the starch additive, the amount added at a given moment and the temperature settings are such as to avoid observable gelatinization and prevent the viscosity from becoming too high for convenient handling. The complementary starch additives can be made at a time when a sufficient ratio of previously added starch has been dissolved to such an extent that the subsequent addition does not give too high a viscosity.

Då man använder konventionell utrustning bör därför förfarandet genom- föras på sådant sätt att man undviker viskositeter som i hög grad överstiger 3000 cP.When using conventional equipment, the procedure should therefore be carried out in such a way as to avoid viscosities which greatly exceed 3000 cP.

Uppfinningen kan med fördel genomföras vid-viskositeter över- stigande ca 3000 cP, om man använder sådan utrustning, som är lämplig för hantering av dessa högre viskositeter; En av de viktigaste för- delarna med föreliggande förfarande ligger emellertid i den energi- besparing, som man uppnår genom att undvika kravet på att använda speciell utrustning, man kan eliminera eller minimera indunstnings- stegen etc. Därför är det att föredraga att förfarandet enligt upp- finningen genomföres med konventionell utrustning.The invention can advantageously be carried out at viscosities exceeding about 3000 cP, if such equipment is used as is suitable for handling these higher viscosities; However, one of the most important advantages of the present process lies in the energy savings achieved by avoiding the requirement to use special equipment, one can eliminate or minimize the evaporation steps, etc. Therefore, it is preferable that the process according to the finding is carried out with conventional equipment.

Vid genomförandet av föreliggande uppfinning sker den väsent- liga omvandlingen till flytande tillstånd och solubiliseringen av uppslamningen med hög halt fast material vid den tidpunkt, då tempe- raturen har nått till ca 80°C-85°C och en sådan produkt kan utvinnas direkt för användning. Det är emellertid önskvärt att man komplette- rar med ett extra slutstegy därtemperaturen höjes till minst 90°C, då kvarvarande stärkelse fullständigt överföres till flytande form och väsentligen löses.In the practice of the present invention, the substantial conversion to the liquid state and the solubilization of the high solids slurry occurs at the time when the temperature has reached about 80 ° C-85 ° C and such a product can be recovered directly for use. However, it is desirable to supplement with an additional final step where the temperature is raised to at least 90 ° C, as the remaining starch is completely transferred to liquid form and substantially dissolved.

Den utvunna uppslamningen med hög halt fast material kan an- vändas "i befintligt skick", dvs inom något av de vanliga användnings- områdena för maltdextriner eller andra flytande stärkelsesorter, eller också kan uppslamningarna användas såsom substrat för ytterligare försockring.The recovered slurry with a high solids content can be used "in its existing state", ie in any of the common uses for malt dextrins or other liquid starches, or the slurries can be used as a substrate for further saccharification.

Om ytterligare försockring önskas vidtager man endast de nöd- vändiga temperatur- och pH-inställningarna, tillsätter lämpligt för- sockrande enzym eller lämpliga försockrande enzymer och låter för- sockringen fortlöpa på konventionellt sätt. Om man exempelvis önskar dextros eller ett dextroshaltigt hydrolysat tillsättes glykoamylas; för framställning av levoluloshaltig syra kan glykosisomeras till- sättas efter eller samtidigt med glykoamylaset; för en produkt med hög maltoshalt kan B-amylas med eller utan a-1-6-glykosidas användas, v '.7'?Û='4765-2 etc. Vidare kan ett eller flera försockrande enzymer (t ex glykoamylas eller B-amylas) tillsättas vid början av eller under liquefaktions- processen förutom d-amylaset av bakterieursprung, vilket ger gott resultat eftersom närvaron av ett sådant enzym ökar stärkelsens lös- lighet.If further sugarsing is desired, only the necessary temperature and pH settings are taken, suitable sugary enzyme or sugars are added and the sugars are allowed to proceed in a conventional manner. For example, if dextrose or a dextrose-containing hydrolyzate is desired, glycoamylase is added; for the production of levolulose-containing acid, glycosomers may be added after or simultaneously with the glycoamylase; for a product with a high maltose content, B-amylase with or without α-1-6-glycosidase can be used, v '.7'? Û = '4765-2 etc. Furthermore, one or more sugarsing enzymes (e.g. glycoamylase or B- amylase) is added at the beginning of or during the liquefaction process in addition to the d-amylase of bacterial origin, which gives good results since the presence of such an enzyme increases the solubility of the starch.

Uppfinningen kan tillämpas på ett stort antal stärkelsetyper, t ex majsstärkelse, vetestärkelse, potatisstärkelse, risstärkelse, olika vaxartade stärkelsesorter, som primärt består av amylopektin, stärkelsetyper med höga amyloshalter etc, liksom stärkelsesorter, som har genomgått fysikalisk och/eller kemisk modifiering eller som harj omvandlats till derivat. Stärkelsehaltiga material såsom finsiktade vetemjöl, andra mjölsorter etc kan också användas.The invention can be applied to a large number of starches, such as corn starch, wheat starch, potato starch, rice starch, various waxy starches, consisting primarily of amylopectin, starches with high amylose contents, etc., as well as starches which have undergone physical or chemical modification and / or converted into derivatives. Starch-containing materials such as fine-grained wheat flour, other flours, etc. can also be used.

Följande exempel belyser uppfinningen; exemplen är ej avsedda att begränsa uppfinningens omfattning. Såvida ej annat angivits avser alla procentangivelser i exempel och krav vikt%. Värdena på torrsub- stansen erhölls med en Zeiss Refractometer.The following examples illustrate the invention; the examples are not intended to limit the scope of the invention. Unless otherwise stated, all percentages in examples and claims refer to% by weight. The values of the dry matter were obtained with a Zeiss Refractometer.

EXEMPEL 1 Detta exempel visar förfarandet enligt uppfinningen inkl ett efterföljande steg, då stärkelseuppslamningen med hög halt fast ma- terial försockras till ett hydrolysat med hög maltoshalt. 400 g potatisstärkelse med 18 % fukt, tillsattes till 600 ml kranvatten, varvid man fick en stärkelsesuspension, med ca 33 % torr substans. Denna suspension försattes med 0,22 g CaCl2, 0,022 g NaCl och 2,5 g Thermamyl 60 d-amylas. pH var 6,2. Temperaturen inställdes på 60°C och produkten hölls vid denna temperatur under omröring i 60 min. Vid slutet av denna tidsperiod hade produkten följande egen- skaper: Torrsubstans totalt 33 % Lösligt material, totalt 25 % Lösligt material, torr basis 75,8 % D.E. för lösligt material 9,1 % viskositet ' se CP vid so°c Temperaturen höjdes.till 75°C under en period på 45 min; vid slutet av denna tidsperiod hade viskositen sjunkit till 30 cP. 500 g stärkelse tillsattes sedan till uppslamningen; ingen iakttagbar gela- tinering ägde rum. Produkten hölls sedan i 60 min vid 75°C, varefter den hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 52 % ,Lösligt material, totalt 49 % Lösligt material, torr basis 94,2 % 7704765-2 D.E. för lösligt material 9,1 % viskositet 400 sp vid 75°c Temperaturen höjdes till 80°C under en period på 20 min, varefte: 500 g stärkelse tillsattes; återigen ägde ingen iakttagbar gelatine- ring rum. Produkten hölls vid .80°C under fortsatt omröring i 90 min,' varefter produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 58 % Lösligt material, totalt 52 % ~Lösligt material, torr basis 89,6 % D.E. för lösligt material 17 viskositet 120 sr vid so°c Temperaturen höjdes sedan till 95°C under en period på 30 min och därefter kylde man till 75°C. Slutprodukten hade följande egen- ^Viskositet skaper: Torrsubstans totalt ' 66,4 % _Lösligt material, totalt 65,9 % Lösligt material, torr basis 99,2 % D.E. för lösligt material 18.2 % Gao sr via 7s°c Temperaturen inställdes sedan på 60°C och pH inställdes på 5,2 och 0,3 g B-amylas (Biozyme M från Amano Pharmaceuticals, Japan) till- sattes. Produkten inkuberades i 12 h och det bildade maltoshaltiga hydrolysatet hade följande sammansättning: Torr substans p 67,2 % D.E. 43,4 Dextros 3,1 %- 'Maltos _ 56,4 % vrå 12,8 s Högre saccarider _ 27,7 % EXEMPEL 2 I detta exempel användes en kommersiellt tillgänglig maltdextrix med ett D.E. på 19,5 ochben halt lösligt material på 98,5 såsom ut- gångsmaterial. 460 g maltdextrin löstes i 600 ml vatten, varvid man erhöll uppslamning med något över 40 % torrsubstans. pH inställdes på 6,2, temperaturen höjdes till 60°C och 0,7 g Thermamyl 60 a-amylas och 0,06 g CaCl2 tillsattes. 400 g potatisstärkelse tillsattes sedan och suspensionen hölls vid 60°C under omröring i.3 h; därefter höjdes temperaturen till 75°C under en period på 30 min och blandningen hölh 9 7?o476s~2 vid denna temperatur i 2 h till. Vid slutet av denna tidsperiod hade produkten följande egenskaper: Torrsubstans totalt I 53 % Lösligt material, torr basis 94,2 % D.E. för lösligt material 18,2 % viskositet vao cp via 7s°c 400 g stärkelse tillsattes sedan vid 75°C och produkten hölls vid denna temperatur i 3 h; temperaturen höjdes sedan till 80°C under en period på 30 min och produkten hölls vid denna temperatur i 1 h. Tem- peraturen höjdes sedan till 95°C under en period på 30 min och däref- ter kylde man till 75°C. Produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 56,1 % Lösligt material, torr basis 97,2 % D.E. för lösligt material 17,4 % viskositet 1140 av via 7s°c EXEMPEL 3 En 34.% vattenhaltig suspension framställdes genom att man till- satte 400 g vaxartad majsstärkelse, som innehöll 14 % fukt, till 600 ml vatten. Detta försattes med 0,15 g CaCl2, 0,015 g NaCl och 0,8 g Thermamyl 60 d-amylas. pH var 6,2. Temperaturen höjdes till 60°C och produkten hölls vid den temperaturen under omröring i l h. Vid slutet av den tidsperioden hade produkten följande egenskaper: Torrsubstans totalt 34,3 % Lösligt material, torr basis 27,6 % D.E. 5,5 % Viskositet 37 cP Temperaturen höjdes till 75°C under en period på 30 min och ytter- ligare 400 g stärkelse tillsattes. Produkten hölls vid denna tempera- tur i 90 min, varefter produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 51 % Lösligt material, torr basis 55 % D.E. _ ' 9,0 % Viskositet 1540 cP Temperaturen inställdes på 85°C under en period på 30 min och 200 g ytterligare stärkelse tillsattes och produkten hölls i 90 min.EXAMPLE 1 This example illustrates the process of the invention including a subsequent step in which the high solids starch slurry is saccharified to a high maltose hydrolyzate. 400 g of potato starch with 18% moisture, was added to 600 ml of tap water, whereby a starch suspension was obtained, with about 33% dry matter. This suspension was added with 0.22 g of CaCl 2, 0.022 g of NaCl and 2.5 g of Thermamyl 60 d-amylase. The pH was 6.2. The temperature was set at 60 ° C and the product was kept at this temperature with stirring for 60 minutes. At the end of this time period, the product had the following properties: Dry matter total 33% Soluble material, total 25% Soluble material, dry basis 75.8% D.E. for soluble material 9.1% viscosity 'see CP at 50 ° C The temperature was raised to 75 ° C for a period of 45 minutes; by the end of this time the viscosity had dropped to 30 cP. 500 g of starch was then added to the slurry; no detectable gelatinization took place. The product was then kept for 60 minutes at 75 ° C, after which it had the following properties: Dry matter total 52%, Soluble material, total 49% Soluble material, dry basis 94.2% 7704765-2 D.E. for soluble material 9.1% viscosity 400 mp at 75 ° C The temperature was raised to 80 ° C over a period of 20 minutes, after which: 500 g of starch was added; again, no detectable gelatinization took place. The product was kept at .80 ° C with continued stirring for 90 minutes, after which the product had the following properties: Dry matter total 58% Soluble material, total 52% ~ Soluble material, dry basis 89.6% D.E. for soluble material 17 viscosity 120 sr at 50 ° C The temperature was then raised to 95 ° C for a period of 30 minutes and then cooled to 75 ° C. The final product had the following intrinsic viscosity: Dry matter total '66.4% Soluble material, total 65.9% Soluble material, dry basis 99.2% D.E. for soluble material 18.2% Gao sr via 7 ° C The temperature was then adjusted to 60 ° C and the pH was adjusted to 5.2 and 0.3 g of β-amylase (Biozyme M from Amano Pharmaceuticals, Japan) was added. The product was incubated for 12 hours and the maltose-containing hydrolyzate formed had the following composition: Dry matter p 67.2% D.E. 43.4 Dextrose 3.1% - 'Maltose _ 56.4% from 12.8 s Higher saccharides _ 27.7% EXAMPLE 2 In this example a commercially available malt dextrice with a D.E. of 19.5 and bone soluble material of 98.5 as starting material. 460 g of malt dextrin were dissolved in 600 ml of water to give a slurry with slightly more than 40% dry matter. The pH was adjusted to 6.2, the temperature was raised to 60 ° C and 0.7 g of Thermamyl 60 α-amylase and 0.06 g of CaCl 2 were added. 400 g of potato starch were then added and the suspension was kept at 60 ° C with stirring for 3 hours; then the temperature was raised to 75 ° C for a period of 30 minutes and the mixture was kept at this temperature for another 2 hours. At the end of this time period, the product had the following properties: Total dry matter I 53% Soluble material, dry basis 94.2% D.E. for soluble material 18.2% viscosity vao cp via 7 ° C 400 g of starch was then added at 75 ° C and the product was kept at this temperature for 3 hours; the temperature was then raised to 80 ° C for a period of 30 minutes and the product was kept at this temperature for 1 hour. The temperature was then raised to 95 ° C for a period of 30 minutes and then cooled to 75 ° C. The product had the following properties: Dry matter total 56.1% Soluble material, dry basis 97.2% D.E. for soluble material 17.4% viscosity 1140 of via 7s ° c EXAMPLE 3 A 34.% aqueous suspension was prepared by adding 400 g of waxy maize starch, containing 14% moisture, to 600 ml of water. This was added with 0.15 g of CaCl 2, 0.015 g of NaCl and 0.8 g of Thermamyl 60 d-amylase. The pH was 6.2. The temperature was raised to 60 ° C and the product was kept at that temperature with stirring for 1 hour. At the end of that time the product had the following properties: Total dry matter 34.3% Soluble material, dry basis 27.6% D.E. 5.5% Viscosity 37 cP The temperature was raised to 75 ° C over a period of 30 minutes and an additional 400 g of starch was added. The product was kept at this temperature for 90 minutes, after which the product had the following properties: Total dry matter 51% Soluble material, dry basis 55% D.E. 9.0% Viscosity 1540 cP The temperature was set at 85 ° C for a period of 30 minutes and 200 g of additional starch was added and the product was kept for 90 minutes.

Produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 53,8 % Lösligt material, torr basis 79 % D.E. 1212 % Viskositet 1350 CP 770-4765-2 Temperaturen inställdes sedan på 95°C under en 30 min period, varefter slutprodukten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 58 % Lösligt material, torr basis 95 % D.E. 13,6 viskositet soo CP via 9s°c EXBMPEL 4 I ~ . _ 400 g majsstärkelse med 12 % fukt tillsattes till 600 ml vatten, varvid man fick en 35 % suspension. Detta försattes med 1,6 g Thermar myl 60 u-amylas, 0,15 g CaCl2 och 0,015 g NaCl. pH var 6,2. Tempera- turen inställdes på 60°C och hölls där i 2,5 h. Vid slutet av denna tidsperiod hade produkten följande egenskaper: Torrsubstans totalt 35,2 % Lösligt material, torr basis 56-% D.E. 7,3 Viskositet 22 cP Medan temperaturen hölls vid 60°C tillsattes ytterligare 100 g majsstärkelse i portioner om 50 g vardera vid 10 min mellanrum. 10 mix efter den andra stärkelsetillsatsen hade produkten följande egenskape: Torrbustans totalt 39 % Lösligt material, torr basis 51 % D.E. « 7,7 viskositet 28 cP ,Temperaturen höjdes till 70°C och åter tillsattes 100 g stärkels i tvâ portioner om 50 g vardera med 10 min-mellanrum. Temperaturen 5 höjdes till 75°C, varefter 100 g ytterligare tillsattes i två portio- ner om vardera 50 g med 15 min mellanrum.The product had the following properties: Dry matter total 53.8% Soluble material, dry basis 79% D.E. 1212% Viscosity 1350 CP 770-4765-2 The temperature was then set at 95 ° C for a period of 30 minutes, after which the final product had the following properties: Total dry matter 58% Soluble material, dry basis 95% D.E. 13.6 viscosity soo CP via 9s ° c EXAMPLE 4 I ~. 400 g of maize starch with 12% moisture were added to 600 ml of water to give a 35% suspension. This was supplemented with 1.6 g of Thermar myl 60 u-amylase, 0.15 g of CaCl 2 and 0.015 g of NaCl. The pH was 6.2. The temperature was set at 60 ° C and kept there for 2.5 hours. At the end of this time period, the product had the following properties: Dry matter total 35.2% Soluble material, dry basis 56-% D.E. 7.3 Viscosity 22 cP While maintaining the temperature at 60 ° C, an additional 100 g of corn starch was added in 50 g portions each at 10 minute intervals. 10 mix after the second starch addition, the product had the following property: Dry bust total 39% Soluble material, dry base 51% D.E. 7.7 viscosity 28 cP, The temperature was raised to 70 ° C and again 100 g of starch was added in two portions of 50 g each at 10 minute intervals. The temperature was raised to 75 ° C, after which an additional 100 g was added in two 50 g portions each 15 minutes apart.

Därefter tillsattes ytterligare 100 g stärkelse i två portioner om 50 g vardera vid 75°C med ett mellanrum på 25 min. 25 min efter den andra tillsatsen hade produkten följande egenskaper: Torrsubstans totalt 51 % Lösligt material, torr basis 87 % n.E. ' _ 12,6 .viskositet 620 cP Temperaturen höjdes sedan till 90°C under en period på 30 min; slutprodukten hade följande egenskaper: _ Torrsubstans totalt 51 % Lösligt material, torr basis 94 % D.E. 13,4 viskositet 920 cP u 7704765-2 EXEMPEL 5 En 34 % vattenhaltig suspension framställdes genom att man till- satte 400 g tapiokastärkelse, som innehöll 13,8 % fukt till 600 ml vatten. Detta försattes med 0,15 g CaCl2, 0,0l5 g NaCl och 0,8 g Thermamyl 60 a-amylas. pH var 6,2. Temperaturen höjdes till 60°C och produkten hölls vid denna temperatur under omröring 1 l h. U Vid slutet avdamatídsperioden hade produkten följande egenskaper: Torrsubstans totalt 34,8 % Lösligt material, torr basis 26,7 % D.E. 3,8 Viskositet 28 cP Temperaturen höjdes till 75°C under en tidsperiod på 30 min och ytterligare 400 g stärkelse tillsattes. Produkten hölls vid tempera- turen i 90 min, varefter den hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 49,3 % Lösligt material, torr basis 53,2 % D.E. l4,6 Viskositet 124 cP Temperaturen inställdes på 85°C under en period på 30 min, och ytterligare 200 g stärkelse tillsattes och produkten hölls vid tempe- raturen i 80 min. Produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 53,8 % Lösligt material, torr basis 89,4 % D.E. 15,2 Viskositet 320 cP Ytterligare 200 g stärkelse tillsattes och produkten hölls vid temperaturen i 90 min. Produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 58,2 % Lösligt material, torr basis 91 % D.E. 15,7 Viskositet _ 620 cP Ytterligare 200 g stärkelse tillsattes och produkten hölls i 90 min. Den hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt _ 60,2 % Lösligt material, torr basis 91,8 % D.E. 1613 Viskositet 872 cP 7704765-2 12 Temperaturen inställdes på 95°C under en period på 30 min, var- efter slutprodukten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt 6 62,3 % Lösligt material, torr basis 94,2 % D.E. 17,5 Viskositet 652 cP EXEMPEL 6 Vid undersökning av alla de testade stärkelsesorterna (dvs pota- tisstärkelse, vaxartad majsstärkelse, normal majsstärkelse, tapioka- stärkelse och en vetestärkelse) visade sig att vetestärkelse (sanno- likt på grund av dess låga gelatineringstemperatur och vetestärkelse- kornets struktur) var svårast att behandla enligt uppfinningen. Då betingelser, som liknar de betingelser, som anges i de föregående exemplen, tillämpades på vetestärkelse inträffade gelatinering med viskositets-"toppar" på 20 000 cP och högre vid temperaturer på ca 75°C, Även om sådana viskositeter kan hanteras om särskild utrustning användes realiseras de största fördelarna med förfarandet enligt upp- finningen genom att man undviker användning av sådan specialutrustninç Det visade sig att uppslamningar av flytande vetestärkelse med hög halt fast material kan framställas enligt uppfinningen utan att man -kan observera gelatinering och åtföljande viskositetstopp om man väsentligt ökar mängden använt a-amylas. Det visade sig särskilt för- delaktigt att använda en kombination av u-amylaser, dvs Thermamyl 60 (från Bacillus licheniformis) och Maxamyl (från Bacillus subtilis).Then an additional 100 g of starch was added in two 50 g portions each at 75 ° C at 25 minute intervals. 25 minutes after the second addition, the product had the following properties: Total dry matter 51% Soluble material, dry basis 87% n.E. 12.6 Viscosity 620 cP The temperature was then raised to 90 ° C over a period of 30 minutes; the final product had the following properties: _ Dry matter total 51% Soluble material, dry basis 94% D.E. 13.4 viscosity 920 cP u 7704765-2 EXAMPLE 5 A 34% aqueous suspension was prepared by adding 400 g of tapioca starch containing 13.8% moisture to 600 ml of water. This was added with 0.15 g of CaCl 2, 0.05 g of NaCl and 0.8 g of Thermamyl 60 α-amylase. The pH was 6.2. The temperature was raised to 60 ° C and the product was kept at this temperature with stirring for 1 l h. U At the end of the damation period, the product had the following properties: Dry matter total 34.8% Soluble material, dry basis 26.7% D.E. 3.8 Viscosity 28 cP The temperature was raised to 75 ° C over a period of 30 minutes and an additional 400 g of starch was added. The product was kept at the temperature for 90 minutes, after which it had the following properties: Total dry matter 49.3% Soluble material, dry basis 53.2% D.E. 14.6 Viscosity 124 cP The temperature was set at 85 ° C for a period of 30 minutes, and an additional 200 g of starch was added and the product was kept at the temperature for 80 minutes. The product had the following properties: Total dry matter 53.8% Soluble material, dry basis 89.4% D.E. 15.2 Viscosity 320 cP An additional 200 g of starch was added and the product was kept at the temperature for 90 minutes. The product had the following properties: Dry matter total 58.2% Soluble material, dry basis 91% D.E. 15.7 Viscosity _ 620 cP An additional 200 g of starch was added and the product was kept for 90 minutes. It had the following properties: Total dry matter _ 60.2% Soluble material, dry basis 91.8% D.E. 1613 Viscosity 872 cP 7704765-2 12 The temperature was set at 95 ° C for a period of 30 minutes, after which the final product had the following properties: Total dry matter 6 62.3% Soluble material, dry basis 94.2% D.E. 17.5 Viscosity 652 cP EXAMPLE 6 When examining all the tested starch varieties (ie potato starch, waxy corn starch, normal corn starch, tapioca starch and a wheat starch) it was found that wheat starch (probably due to its low starch and gelatinization) the structure of the grain) was most difficult to treat according to the invention. When conditions similar to those set forth in the preceding examples were applied to wheat starch, gelatinization with viscosity "peaks" of 20,000 cP and higher occurred at temperatures of about 75 ° C. Although such viscosities can be handled if special equipment is used The greatest advantages of the process according to the invention are avoided by avoiding the use of such special equipment. It was found that slurries of liquid wheat starch with a high solids content can be prepared according to the invention without gelatinization and accompanying viscosity peaks being observed if the amount is significantly increased. used α-amylase. It proved particularly advantageous to use a combination of u-amylases, ie Thermamyl 60 (from Bacillus licheniformis) and Maxamyl (from Bacillus subtilis).

Följande beskrivning avser en lämplig metod för behandling av vete- stärkelse enligt uppfinningen.The following description relates to a suitable method for treating wheat starch according to the invention.

De vattenhaltiga utgångsuppslamningarna framställdes genom att man tillsatte 400 g (vete A)-stärkelse, som innehöll ll,0 % fukt, till 600 ml avmineraliserat vatten och man tillsatte 0,15 g CaCl2, 0,015 g NaCl, 6,4 g Thermamyl 60 och 0,70 g Maxamyl a-amylas, höjde temperaturen till 50°C och höll produkten vid denna temperatur under omröring i 1 h. pH var 6,2. Produkten hade följande egenskaper: Torrsubstans totalt, ' 35,6 % Lösligt material, torr basis 10,5 % Ingen iakttagbar gelatinering eller viskositetsökning ägde rum.The aqueous starting slurries were prepared by adding 400 g of (wheat A) starch containing 11.0% moisture to 600 ml of demineralized water and adding 0.15 g of CaCl 2, 0.015 g of NaCl, 6.4 g of Thermamyl 60 and 0.70 g of Maxamyl α-amylase, raised the temperature to 50 ° C and kept the product at this temperature with stirring for 1 hour. The pH was 6.2. The product had the following properties: Total dry matter, '35.6% Soluble material, dry basis 10.5% No noticeable gelatinization or viscosity increase occurred.

Under detta experiment gjordes inga faktiska mätningar av viskosite- ten men visuella observationer gjordes. Under följande försök obser- verades inga viskositetsökningar.During this experiment, no actual viscosity measurements were made, but visual observations were made. During the following experiments, no viscosity increases were observed.

Temperaturen höjdes till 60°C under en period på 30 min; underThe temperature was raised to 60 ° C for a period of 30 minutes; during

Claims

This time period, an additional 50 g of starch was added when the temperature reached 55 ° C and another 50 g was added when the temperature reached 58 ° C. The product was kept at 60 ° C for 40 minutes, after which it had the following properties: Dry matter_total 40.5% Soluble material, dry basis 19.8% Another portion of 50 g of starch was added and the temperature was raised to 62 ° C and the mixture was kept at this temperature for 15 min. An additional 50 g of starch was then added and the temperature was raised to 65 ° C for a period of 30 minutes, after which an additional 50 g of starch was added. The temperature was maintained at 65 ° C for 15 minutes, after which the product had the following properties: Total dry matter 46.3% Soluble material, dry basis 32.1% The temperature was then raised to 69 ° C for a period of 1 h, after which a further 50 g starch was added. The temperature was then raised to 72 ° C for a period of 15 minutes and the mixture was kept at this temperature for another 15 minutes, after which the product had the following properties: Total dry matter 47.9% Soluble material, dry basis 38.9% The temperature was then raised to 85 ° C for a period of 1 h and the product was kept at this temperature for 30 min. The pH was adjusted to 7.2 and the product was boiled (at 100 ° C) for 10 minutes. The final product had a total dry matter content of 48.8% and gave a negative starch test. A process for the preparation of an aqueous slurry of liquid and dissolved starch having a concentration exceeding 40% of dry matter, characterized by the following steps: * A. First, an aqueous slurry having a solids content not exceeding about 40% is prepared , of a starch hydrolyzate with a DE between 1 and 25, at least a portion of the hydrolyzate being soluble in water, B. then granular starch is subsequently added to the slurry and the added starch is continuously subjected to the action of a d-amylase from bacteria to transfer starch to liquid form. , at the same time the temperature of the pick-up is satisfied to a maximum of 90 ° C. wherein the amount of starch added at any given time, the rate of addition and the temperature of the slurry at any given time are kept low enough during the process to avoid noticeable gelatinization of the starch and to avoid increasing the viscosity of the starch to a level at which it cannot be handled , and C. the process is terminated when a slurry having a concentration exceeding 40% has been obtained, optionally raising the temperature of the final slurry to at least 90 ° C to transfer the remaining starch to a liquid form, and then optionally obtaining the slurry of starch converted to liquid form with a high solids content is subjected to enzymatic saccharification. .

Process according to claim 1, characterized in that the conditions under which the granular starch is added to the slurry are such that an increase in the viscosity of the starch above 3000 cP is avoided at all times during the process.

3. A process according to any one of the preceding claims, characterized in that the granular starch is gradually added to the slurry in the form of successive portions and each portion is substantially transferred to liquid form and dissolved by the u-amylase before the next portion is added. '

Process according to any one of the preceding claims, characterized in that the aqueous starting slurry is prepared by subjecting an aqueous suspension of granular starch with a solids content not exceeding about 40% to the action of α-amyl from bacteria for transition to liquid form and at least partial dissolution of the starch while avoiding gelatinization of the starch. "

5. Process according to any one of claims 1-3, characterized in that the aqueous starting slurry is prepared by dissolving a maltodextrin in water to a concentration of solid material not exceeding about 40%.

A method according to any one of the preceding claims, characterized in that the bacterial cramylase comes from a Bacillus microorganism. 7704765-2 15

7. A method according to claim 6, characterized in that the Q-amylase from bacteria comes from a (Bacillus licheniformis) microorganism. .

A method according to any one of the preceding claims, characterized in that the pH during the conversion of the starch to a liquid state is kept in the range 5-7.5.

9. A method according to claim 8, characterized in that the pH is maintained at about 6,

Process according to any one of the preceding claims, characterized in that step B is accompanied by small increases in temperature from an initial temperature of about 60 ° C to a final temperature of about 85 ° C.

11. ll. Process according to one of the preceding claims, characterized in that the starch used consists of corn starch, potato starch or waxy starch.

Process according to Claim 1, characterized in that the additional saccharification step takes place by heating the slurry with a high solids content to a temperature of about 60 ° C and adjusting the pH of the slurry to about 5.0, adding 8-amylase and that the slurry is incubated for a period of time sufficient to give a high maltose starch hydrolyzate.