SA113340439B1 - بولي نكليوتيد يمنح مقاومة مبيدات الأعشاب للذُّرة الرفيعة - Google Patents

بولي نكليوتيد يمنح مقاومة مبيدات الأعشاب للذُّرة الرفيعة Download PDF

Info

Publication number
SA113340439B1
SA113340439B1 SA113340439A SA113340439A SA113340439B1 SA 113340439 B1 SA113340439 B1 SA 113340439B1 SA 113340439 A SA113340439 A SA 113340439A SA 113340439 A SA113340439 A SA 113340439A SA 113340439 B1 SA113340439 B1 SA 113340439B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
polynucleotide
plant
nucleotide sequence
sequence
herbicide
Prior art date
Application number
SA113340439A
Other languages
English (en)
Inventor
دانييل زامبيلي اندريس
اليخاندرو باردو بيدرو
تروسيلو اوريرتي فيسينتي
كاسبار ماركوس
Original Assignee
ادفانتا انترناشونال بي في
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ادفانتا انترناشونال بي في filed Critical ادفانتا انترناشونال بي في
Publication of SA113340439B1 publication Critical patent/SA113340439B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/46—Gramineae or Poaceae, e.g. ryegrass, rice, wheat or maize
    • A01H6/4666—Sorghum, e.g. sudangrass
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/10—Seeds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8278—Sulfonylurea
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1022—Transferases (2.) transferring aldehyde or ketonic groups (2.2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y202/00—Transferases transferring aldehyde or ketonic groups (2.2)
    • C12Y202/01—Transketolases and transaldolases (2.2.1)
    • C12Y202/01006—Acetolactate synthase (2.2.1.6)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

يتعلّق الاختراع الحالي ببذرة ذُرة رفيعة sorghum seed مُشتملة في genome الخاصّ بها على بولي نيوكليوتيد polynucleotide واحد على الأقلّ مُشفِّر encoding لبولي ببتيد polypeptide يحتوي على استبدال من الحمض الأميني alanine إلى الحمض الأميني ثريونين عند الموضع 93 من الوحدة الفرعيَّة الكبيرة لبروتين إنزيم acetohydroxyacid synthase (AHAS) في الذُّرة الرفيعة. أظهر النّبات مقاومة زائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب، على سبيل المثال مبيدات من مجموعة imidazolinones ، و ذلك بالمقارنة مع نباتات الذُّرة الرفيعة من النّوع البرِّي. قد يشتمل نبات الذُّرة الرفيعة في genome الخاصّ به، على نُسخة واحدة، أو اثنتين، أو ثلاثة أو أكثر من نُسَخ البولي نيوكليوتيد polynucleotide المشفِّر للوحدة الفرعيَّة الكبيرة للبروتين المتحوِّل لإنزيم acetohydroxyacid synthase (AHAS) في الذُّرة الرفيعة أو بولي ببتيد الإنزيم acetohydroxyacid synthase (AHAS) للذُّرة الرفيعة موضوع الاختراع الحالي. في هذا الصَّدد، قد يكون نبات الذُّرة الرفيعة مُتحمِّلاً لأيّ مبيد أعشاب لديه القدرة على تثبيط نشاط إنزيم acetohydroxyacid synthas

Description

_— \ _ بولي نكليوتيد يمنح مقاومة مبيدات الأعشاب 5 الرفيعة ‎Polynucleotide increased resistance to herbicides for sorghum plants‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع 53 الرفيعة ‎Sorghum‏ (نوع 53 الرفيعة ‎(Sorghum spp‏ هي عبارة عن جنس من النبات الذي يضم تقريباً ‎٠‏ نوع من الأعشاب 0185565. و يكون موطنها الأصلي المناطق الاستوائية وشبه الاستوائية في شرق أفريقيا وُزرع في كل قارة من أجل إنتاج حبوب ‎com sl‏ التي يتم © استهلاكها بواسطة الإنسان و الحيوان؛ و يتم أيضاً استخدامها كعلف للماشية؛ و في تصنيع المشروبات الكحوليَّة ‎alcoholic‏ و حيث أنها تكون خالية من ‎«gluten‏ فإنٌ 53 الرفيعة تكون مناسبة للأشخاص الذين يُعانون من الذاء البطنيئ ‎disease‏ 061:36. تكون 3 الرفيعة أكثر تحمّلاً للجفاف و زيادة مُحتوى رطوبة ‎A fll‏ عن مُعظم محاصيل الحبوب الأخرى. كما تكون لديها القدرة على ‎al‏ بصورة كاملة في ظروف التربة المتغيّرة و الظروف ‎gad ٠‏ المتغيّرة. و ‎cially‏ فإنها تستجيب بصورة إيجابية ‎(oll‏ حيث تتطلّب ما لا يقل عن ‎You‏ ‏ملليمتر من الماء خلال دورة ‎lla‏ و يتراوح مقدار الريّ ‎BA‏ بين ‎5-0٠0‏ ملليمتر. يجب أن تحتوي ‎BAN‏ على محتوى رطوبة ملائم في وقت الغرس من أجل تحقيق إنبات سريع ومتجانس وبالتالي زرع جيد للمحصول. إن الاحتياج الأكبر للمياه يبدأ بعد ‎"٠‏ يوما من الإنبات و خروج النبات ويستمر حتى تمتلئ الحبوب وتكون المراحل الأكثر أهمية هي تلك التي يتم ‎led‏ ‎Vo‏ تشكيل العنقود الزهري والإزهار» و سوف يؤدي نقص المياه في هذا الوقت إلى قلَّة المحاصيل. ‎ide‏ على ذلك؛ ‎Gl‏ 53 الرفيعة لديها القدرة على البقاء كامنة أثناء فترات الجفاف وتستأئف النمو في ظل الفترات المواتية؛ على الرّغم من أن حالات الإجهاد تلك قد ‎in‏ على الأداء.
د تحتاج )5 الرفيعة ‎sorghum‏ إلى درجات حرارة مرتفعة من أجل النمُوٌ الطبيعي؛ و بالتالي فهي تكون أكثر ‎Gules‏ لدرجات الحرارة المنخفضة عن باقي المحاصيل الأخرى. تكون هناك حاجة لدرجة حرارة للثربة لا تقل عن ‎OVA‏ مئويَّة من أجل الإنبات؛ ولا يتحقق النمو النشط الفعلي للنبات حتى يتم الوصول إلى درجة ‎la‏ مقدارها ‎Aide OVO‏ وتكون درجة الحرارة ‎Hall‏ حوالي ‎OFF‏ ‎Aide ©‏ إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ هو الإنزيم ‎J‏ الذي ‎iad‏ تخليق الأحماض الأمينيّة المتفّئعة ‎isoleucine yleucine » valine‏ . إن إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ يكون هو الإنزيم المستهدف من بعض مبيدات الأعشاب مثل مجموعات ‎sulfonylurea‏ ؛ ‎triazolopyrimidines « imidazolinone‏ و ‎pyrimidyloxybenzoates‏ . تُستخدم ‎٠‏ المجموعتان الأوليان من مبيدات الأعشاب على نطاق واسع في الزراعة الحديثة نظراً لسمّيتها المنخفضة وفعاليّتها المرتفعة ‎dia‏ الأعشاب الضازة. تشتمل مبيدات الأعشاب من مجموعة ‎GUE pe‏ ‎imidazolinone‏ على ‎imazethapyr‏ +11132280010 + والا1113280 . وتشمل بعض مركّبات ‎sulfonylurea‏ الموجودة في السنوق: ‎metsulfuron—-methyl, chlorosulfuron, nicosulfuron, cinosulfuron,‏ ‎imidasulfuron, halosulfuron, rimsulfuron, trisulfuron—-methyl, and ٠١‏ ‎Aribenuron—-methyl‏ ‏ومع ذلك؛ توجد نباتات تكون مُقاومة لمبيدات الأعشاب من مجموعات ‎imidazolinone‏ و/أو ‎sulfonylurea‏ ¢ على سبيل ‎Jia‏ أنواع النباتات ‎Jie‏ الذرة « نبات ثيل الرشاد ‎Arabidopsis‏ ‎«Brassica napus c.illl (thaliana‏ فول ‎«Glycine max soybean Lsall‏ التبغ ‎Nicotiana tabacum ٠٠‏ و الأرز ‎Sebastian et al., (1989) ) rice Oryza sativa‏ ‎Crop Sci, 29: 1403-1408; Swanson et al., 1989 Theor.
Appl.
Genet. 78:‏ ‎Newhouse et al., (1991) Theor.
Appl.
Genet. 83: 65-70;‏ ;525-530 ‎Sathasivan et al., (1991) Plant Physiol., 97: 1044-1050; Mourand et al.,‏ ‎Heredity 84: 91-96;‏ .ل )5(1993 براءة الاختراع الأمريكيّة رقم 45,877 2,5. وقد تم ‎YO‏ وصف طفرة ‎Ahi‏ في نبات ‎ale‏ الشمس ‎sunflower‏ ؛ في الوحدة الفرحيّة الكبيرة ‎large‏
— ¢ — ‎subunit‏ لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ ؛ التي تمنحه القدرة على مقاومة مبيدات الأعشاب من نوع ‎RR imidazolinone‏ الدولي رقم ‎.٠٠١ ١/1476‏ وقد تم اكتشاف نباتات مقاومة لمبيدات الأعشاب من النوع ‎sulfonylurea 4 imidazolinone‏ ‎By.‏ اكتسبت هذه النباتات المقاومة بصورة طببيعيّة و قد ‎a‏ استخدامها في التهجين الوراثي الذي © نتج عنه مجموعة من النباتات المتنّعة المقاومة لمبيدات الأعشاب. ومن خلال تحليل النباتات المقاومة لمبيدات الأعشاب؛ تم تحديد طفرة ‎Ahi‏ في بروتين الإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‎synthase‏ نبات ‎ale‏ الشمس ‎sunflower‏ التي تسببت في استبدال الحمض الأميني ‎Ala‏ ‏بالحمض الأميني ‎White et al., (2003) Weed Sci., 51: 845-853).) : Val‏ بالإضافة إلى ذلك» تكشف براءات الاختراع الأمريكيّة أرقام ١٠٠,777ر1‏ © 77ر11 ؛
‎EVA TYNE 0 VE VYY 0 FV Ved ٠‏ لل ارا عن النباتات المقاومة لمبيدات الأعشاب من مركّبات ‎imidazolinone de seas‏ . تصف جميع هذه البراءات بشكل عام استخدام جين ‎jis‏ للإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ لإثارة
‏المقاومة لمبيدات الأعشاب في النباتات؛ و تكشف على وجه الخصوص عن بعض سلالات ‎Sal‏ ‏00 المقاومة لمرككب ‎imidazolinone‏ . ‎Vo‏ تبحث براءة الاختراع الأمريكيّة رقم 0,771,186 و براءة الاختراع الأمريكيّة رقم ‎5,717,77١‏ ‏جين معزول ‎fae‏ على ‎amy Jail‏ لحمض أميني ‏ في ‎Allg‏ حمض أميني لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في النوع البزي من النبات أحادي الفلقة ‎monocot‏ ‏الذي أحدث مقاومة نوعيَّة ‎ia‏ مُركّب ‎imidazolinone‏ . وتكشف وثائق البراءات المتمطّة في الطلب ‎dl‏ رقم 077977 700/0 و الطلب الدّولي رقم ‎٠‏ 0 7/0574 عن الطفرات التي تمنح المقاومة لمبيدات الأعشاب من نوع ‎imidazolinone‏ ‏في نباتات القمح ‎Wheat‏ . ويصف البحث المنشور بعنوان "الأحماض الأمينيّة التي تمنح المقاومة لمبيدات الأعشاب في إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ الخاص بنبات ‎all‏ طفرة ‎Lhd‏ مُختلفة في إنزيم در
‎acetohydroxyacid synthase‏ التي تمنح المقاومة لمبيدات الأعشاب ( ,1:2 ‎GM Crops‏ ‎February 16, 2010‏ ;62-67(. ‎ni,‏ وثيقة براءة الاختراع الأمريكيَّة ‎70٠00153157‏ إلى نباتات 5,00 الرفيعة ‎sorghum‏ ‏المقاومة لمبيدات الأعشاب حيث يتمٌ تحقيق تلك المقاومة بواسطة تغيير جينات ‎acetyl a‏ ‎CoA carboxylase ©‏ . تم الكشف أيضاً عن نباتات الذَرةٍ الرفيعة المقاومة للمبيد العشبي 0108686 (البراءة الامريكية ‎(Yo) eo VeoTAT‏ و نباتات )5,3 الرفيعة المقاومة للمبيد العشبي ‎synthase‏ 806101801816 (الطلب الدولي ‎.)٠٠١ ١8١.‏ الوصف العام للاختراع تُظهر ‎sl cubis‏ الرفيعة ‎sorghum‏ وفقاً للاختراع الحالي مُقاومة مُحسّنة لمبيدات الأعشاب؛ ‎٠‏ على سبيل المثال مبيدات الأعشاب المستهدفة لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ « و يُعنى بهاء مُركّبات ‎imidazolinone‏ و مركّبات ‎sulfonylurea‏ ؛ بالمقارنة مع ‎sil)‏ البزي من نباتات ‎$l)‏ الرفيعة ‎sorghum‏ . و على وجه الخصوص»؛ يشتمل نبات الذرة الرفيعة ‎sorghum‏ ‏(الذرةٍ الرفيعة ‎sorghum‏ ثنائيّة الألوان) وفقاً للاختراع الحالي في ‎Jalal genome‏ به على الأقل على ‎polynucleotide. als polynucleotide‏ المذكور يُشفُر للوحدة ‎Zeal)‏ الكبيرة ‎Vo‏ لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المحتوية على استبدال من الحمض الأميني ‎alanine‏ ‏إلى الحمض الأميني ‎threonine‏ عند الموضع 47 في الوحدة ‎Le dl‏ الكبيرة ‎large subunit‏ لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في ‎$A)‏ الرفيعة ‎sorghum‏ أو عند موضع مكافئ له حيث من خلاله يكتسب النبات المذكور مقاومة زائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب؛ ‎Jie‏ ‏مبيدات الأعشاب المنتقاة من مجموعة ‎imidazolinone cil ja‏ ؛ بالمقارنة مع النوع البزي من ‎bls Ys‏ $3 الرفيعة. قد يشتمل نبات ‎il‏ الرفيعة في ‎Jalil) genome‏ به؛ على واحدء اثنين؛ ثلاثة أو أكثر من ‎345d) polynucleotide sii‏ لبروتين الإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‎synthase‏ المتحول بالوحدة ‎Leh‏ الكبيرة ‎large subunit‏ في 53 الرفيعة أو ‎polypeptide‏ الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ الموجود في ‎$l)‏ الرفيعة للاختراع الحالي. في هذا الصنّدد؛ فإنّ نبات )53 الرفيعة ‎sorghum‏ .قد يكون ‎Saath‏ لأيّ مبيد عشبي ‎Yo‏ لديه القدرة على تثبيط نشاط إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ ؛ و يعني ذلك؛ أن نبات در
-- )3,3 الرفيعة قد يكون ‎Sats‏ لمبيدات الأعشاب من النّوع 1011082010008 ؛ ‎Jie‏ دون حصرٍ أو تقييد : ‎imazapyr. imazethapyr‏ + و ‎imazapic‏ أو ‎Satis‏ لمبيدات الأعشاب من مجموعة مركّبات ‎sulfonylurea‏ « مثل؛ دون حصر أو تقييد : د ‎chlorosulfuron, metsulfuron methyl, sulfometuron methyl, chlorimuron ethyl,‏ ‎thiofensulfuron methyl, tribenuron methyl, bensulfuron methyl, nicosulfuron,‏ ‎ethametsulfuron methyl, rimsulfuron, triflusulfuron methyl, triasulfuron,‏ ‎primisulfuron methyl, cinosulfuron, amidosulfuron, fluzasulfuron,‏ ‎imazosulfuron, pyrazosulfuron ethyl, and halosulfuron‏ ‎٠‏ في النموذج المفضّل؛ نبات 53 الرفيعة ‎sorghum‏ وفقاً للاختراع الحالي الذي يكون مقاوماً لمبيدات الأعشاب التي ‎an‏ إلى مجموعة مُركّبات | ‎imidazolinone‏ أو مُركّبات ‎sulfonylurea‏ يكون هو سلالة الذرة الرفيعة المشار ‎lead)‏ بالترميز ‎VTT1-11331-BK‏ التي & إيداع بذورها مع المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ البحرية والغذائية ‎Natianal‏ ‎collections of industraol, Marine and food Bacteria (NCIMB)‏ المرمز لها بالرقم ‎Vo‏ 1870؛_برقم وصول 418976 ؛ في ‎١١‏ أكتوبرء ‎٠١٠١‏ وفقاً لأحكام معاهدة ‎Budapest‏ . إن نبات ‎VT11-11331-BK‏ المتحوّل؛ والأجزاء المأخوذة منه و بذوره؛ تشتمل في ‎genome‏ ‎Jalal)‏ بها على الجين المتحوّل لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ الذي يتضمّن ‎gsis<polynucleotide‏ على متوالية النيوكليوتيدات ‎dw ١72001601106 sequence‏ في متوالية ذات الهويّة رقم ‎١‏ المشفّرة لل ‎polypeptide‏ الوحدة الفرعيّة الكبيرة ‎large subunit‏ ‎٠١‏ الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المحتوية على المتوالية ‎dl‏ في المتوالية ذات الهويّة رقم ‎LY‏ وتختلف متوالية الحمض الأميني التي لها متوالية ذات الهويّة رقم 7 المناظرة للوحدة ‎Ae jal‏ الكبيرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في حمض أميني واحد من متوالية الأحماض الأمينيّة ‎gl‏ البزي للوحدة الفرعيّة الكبيرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في 3,30 الرفيعة (متوالية ذات الهويّة رقم ‎oF‏ يتضمّن الاختلاف المذكور استبدال من الحمض الأميني ‎alanine Yo‏ إلى الحمض الأميني ‎threonine‏ عند الموضع 97 من الوحدة الفرعيّة الكبيرة ‎١‏ ‏در
—y— ‏أو‎ « sorghum ‏في )5,3 الرفيعة‎ acetohydroxyacid synthase ‏لإتزيم‎ arge subunit ‏مواضع مكافئة.‎ ‏المتحمّل لمبيدات الأعشاب وفقاً للاختراع‎ sorghum ‏تكون البلازما الجرثوميّة لنبات الذَّرةِ الرفيعة‎ ‏بها بواسطة‎ ALK ‏في إدخال صفة التحمّل الوراثيّة عن طريق إدخال الجينات‎ Sade ‏الحالي‎ ‏الرفيعة وفقاً للاختراع‎ HU ‏التهجين داخل نباتات متنّعة أخرى من 0 الرفيعة. تشمل نباتات‎ ©
AS) ‏حيث‎ + polynucleotide ‏نسل و بذور النباتات التي تشتمل على‎ Jad sacetohydroxyacid synthase ‏المذكور للوحدة الفرعيّة الكبيرة لإنزيم‎ polynucleotide ‏عند‎ threonine ‏يحتوي على استبدال من الحمض الأميني 6 إلى الحمض الأميني‎ ‏في الذرة‎ acetohydroxyacid synthase ‏بالوحدة الفرعيّة الكبيرة المذكورة لإنزيم‎ AY ‏الموضع‎ ‏الرفيعة أو عند موضع مكافئ؛ حيث فيه يُظهر النبات المذكور مُقاومة زائدة لواحد أو أكثر من‎ ٠ ‏و/أو 28 بالمقارنة مع النوع البزي من‎ imidazolinone & sill ‏مبيدات الأعشاب من‎ ‏الرفيعة.‎ 5A ‏نباتات‎ ‎herbicide- ‏في النموذج المفضّل؛ يشتمل نبات 3 الرفيعة المقاوم لمبيدات الأعشاب‎ ‏بالمجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛‎ ala ‏على صفات المقاومة الوراثيّة‎ resistant
Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria ‏البحرية والغذائية‎ Vo ‏و قد يكون نبات كما تمّ وصفه في مجموعة نباتات‎ YAY ‏المرمز لها بالرقم‎ (NCIMB)
Gala ‏بمجموعة 10/08ا51897.110؛ أونبات طافر‎ ald ‏أو نسل لنبات‎ ١78 181.١ NCIMB lil ‏بمجموعة نباتات 5149.110610/08؛ و نسل خاص بمجموعة من‎ ‏و ينتمي‎ 156 Gils ‏أو غير-مُعدّل‎ transgenic Gils Jak ‏طافرة. قد يكون النّبات‎ ‏نباتات‎ Jie ‏نوع نبات مناسب للاستخدام في الأغراض الزراعيَّة؛ أو للاستخدامات الأخرى؛‎ GY ‏ا‎ ٠ ‏الخاصٌ بها على‎ genome ‏؛ المشتملة في‎ sorghum ‏الزينة. يتم أيضاً تقديم بذرة 50 الرفيعة‎ ‏المذكور ل‎ polynucleotide PER ‏فيه‎ dua «aly polynucleotide ‏على‎ Ja ‏إلى‎ alanine ‏محتو على استبدال من الحمض الأميني‎ polypeptide polypeptide large subunit ‏عند الموضع 97 من الوحدة الفرجيَّة الكبيرةٍ‎ threonine ‏الحمض الأميني‎ ‏نباثاً يتميّز‎ ih ‏في الذرة الرفيعة. تنبت البذرة و‎ acetohydroxyacid synthase aj) ‏لبروتين‎ Yo ‏در‎
“A
بمُقاومة زائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب من مجموعة مركّبات ‎imidazolinone‏
بالمقارنة مع النوع البزي من نباتات ‎BA‏ الرفيعة. في النموذج المفضّل تكون ‎BU‏ المذكورة هي
البذرة المودعة في المجموعة ‎VAY NCIMB‏
أيضاً تقديم طريقة من أجل تمييز نبات مُقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ ‏© التي تنتمي إلى مجموعة ‎imidazolinone cif ys‏ أو مركّبات ‎sulfonylurea‏ ¢ التي تشتمل
على:
أ) توفير ‎Ale‏ حمض نووي ‎acid‏ 0001616 من نبات ‎3A‏ رفيعة؛
ب) تضخيم منطقة مناظرة لجين الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ من نبات الذرة رفيعة
موجودة في ‎dike‏ الحمض النووي المذكورة؛
‎٠‏ ج) تمييز نبات الذَّرةِ رفيعة مقاوم لمبيدات الأعشاب من مجموعة ‎imidazolinone cil js‏ بُناءٌ على وجود طفرة واحدة على ‎J)‏ في ‎die‏ الحمض النووي المضخَّم المذكورة التي تمنح المقاومة لمبيدات الأعشاب من نوع ‎imidazolinone‏ . في النموذج المفضّل؛ ‎gy‏ انتقاء النباتات التي تتضمّن ‎sala‏ واحدة على ‎JN‏ في إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مثل الطفرة في المجموعة | 189710610048 حيث الطفرة الواحدة ‏ على ‎J‏ المذكورة ‏ في جين
‎Yo‏ الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ التي ‎polypeptide ah‏ أو للوحدة الفرعيّة الكبيرة في إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ تشتمل على الاستبدال ‎Ala93Thr‏ بالمقارنة مع متوالية الأحماض الأمينيّة في إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ للنوع البزي من الذرة الرفيعة. قد يكون النّبات أحادي الفلقة ‎monocot‏ أو ثنائي الفلقة ‎dicot‏ . و بشكل ‎Jade‏ ‏يكون ‎wlll‏ نباثاً ذا أهميّة زراعيَّة. ‎Jie‏ الذرة الرفيعة ‎sorghum‏ » الأرز 1166 الالذرة 07
‎(rye ‏الجاودار‎ » barley ‏الشوفان 1 ؛ الشعير‎ « wheat ‏؛ القمح‎ soybean ‏فول الصويا‎ Yo ‏أو ما‎ « sunflower ‏الشمس‎ slic ‏؛‎ sugarcane ‏قصب التْكّر‎ cotton ‏؛ القطن‎ flax ‏الكدّان‎ ‎Single ‏تعدد اشكال النوكليوتيد المفرد‎ marker ‏يُشابهها. قد تستخدم طريقة التمييز واسم‎ ‏لطفرة لُقطيَّة نوعيّة.‎ nucleotide polymorphism (SNP)
‎EAT
_ q —_
‎ig‏ الاختراع الحالي طريقة لمكافحة الأعشاب ‎sillall‏ في الأنحاء المجاورة القريبة للنباتات
‎ciel)‏ على سبيل المثال نباتات 53 الرفيعة 5009050000 ؛ حيث تكون نباتات ‎3A)‏ الرفيعة
‏المذكورة مقاومة لمبيدات الأعشاب؛ ‎Jie‏ مبيدات الأعشاب من مجموعة ‎imidazolinonec:l ys‏
‎Jf‏ مُركّبات ‎sulfonylurea‏ . في نموذج مُفضَّل؛ يكون مبيد الأعشاب ‎herbicide‏ عبارة عن
‎Spe ©‏ من مجموعة ‎imidazolinone‏ . قد يكون مبيد الأعشاب ‎herbicide‏ من مجموعة
‎imidazolinone‏ هو ‎imazapic. imazethapyr‏ « أو ‎imazapyr‏ . قد يُظهر الثبات صفات
‏المقاومة الوراثيّة ‎Fie‏ نباتات المجموعة 51789711610/8؛ و قد يكون النّبات ‎Eas Ble‏ أو ‎Bla‏
‎(fal‏ أو نسلاً نباتيًاً من جنسهما.
‎is‏ الاختراع ‎polypeptide Jal‏ الذي ‎ami‏ دون تقييد؛ واحد أو أكثر من متواليات ‎٠‏ النيوكليوتيدات التالية:
‏- المتوالية المبيّئة في المتوالية ذات الهويّة رقم ‎٠‏
‏- متوالية نيوكليوتيدات ‎SHA nucleotide sequence‏ 9 ل ‎polypeptide‏ في
‏المتوالية ذات الهويّة رقم 7؛
‏- متوالية نيوكليوتيدات ‎sais‏ ل ‎polypeptide‏ محتو على ‎J‏ على 795 من ‎a‏ المتواليات ‎١‏ إلى متوالية الحمض الأميني ذات الهويّة رقم ‎oF‏ حيث فيها يُظهر ‎polypeptide‏ نشاط لإنزيم
‎¢ herbicide-resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase
‏- متوالية نيوكليوتيدات محتوية على الأقلّ على 785 من الهويّة إلى متوالية النيوكليوتيدات
‎ddl)‏ في المتوالية ذات الهويّة رقم ٠؛‏ حيث فيها ‎encoding asi‏ متوالية النيوكليوتيدات ل
‎polypeptide‏ يتضمّن وحدة فرحيّة كبيرة لإنزيم ‎synthase‏ 806101700786010 و يُظهر ‎٠‏ نشاط لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مُقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide—resistant‏
‏؛ أو متواليات ‎ASE‏ من جنسها.
‎ary ‏الوحدة_ الكبيرة‎ polypeptide polynucleotide Pre Jade ‏و بشكل‎
‎Ala93Thr ‏التي تشتمل على الاستبدال‎ acetohydroxyacid synthase
“yam
‎sh‏ الاختراع الحالي أيضاً مجموعة تعبير وراثي ‎All expression cassette‏ تشتمل على ‎polynucleotide‏ واحد على الأقلّ محتو على متوالية النيوكليوتيدات التالية: متوالية ذات الهويّة
‏رقم ) متوالية نيوكليوتيدات ‎sash‏ لذ ‎had) polypeptide‏ في متوالية ذات الهريّة رقم 7 متوالية نيوكليوتيدات مشفرة 6020001079 لل ‎Sink polypeptide‏ على الأقل على 7955 من هويّة
‏© المتوالية إلى متوالية الأحماض الأمينيَّة ذات الهويّة رقم 7 حيث ‎led‏ يُظهر ‎polypeptide‏ ‏نشاطاً لإنزيم ‎as acetohydroxyacid synthase‏ لمبيدات الأعشاب ‎herbicide—‏ ‎resistant‏ ¢ متوالية نيوكليوتيدات محتوية على الأقلّ على 785 من هويَّة المتوالية إلى متوالية النيوكليوتيدات ‎ind nucleotide sequence‏ ذات الهويّة رقم ‎١‏ حيث فيها ‎AH‏ متوالية النيوكليوتيدات ل ‎aay polypeptide‏ وحدة فرعيّة كبيرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid‏
‎gsynthase ٠‏ يُظهر نشاطاً لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مُقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ أو_متواليات ‎ge AUG‏ جنسها. و بشكل ‎ad (lain‏ ‎polynucleotide‏ لذ ‎polypeptide‏ الوحدة الكبيرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‏6 التي تشتمل على الاستبدال +189311/؛ تكون المتواليات المذكورة مرتبطة بشكل
‏فعّال مع متوالية نيوكليوتيدات من أجل إجراء التعبير الوراثي؛ على سبيل المثال واحد أو أكثر من
‎١‏ المحفزات؛ أو المعزّزات أو متواليات تنظيميّة أخرى معروفة. قد يكون المحقّز ‎Dine‏ للتعبير الوراثي في النباتات»؛ أنسجة نباتيّة؛ بلاستيدات خضراء؛ ‎DA‏ حيوانيّة؛ بكتيريّة؛ فطريَّة أو خلايا الخميرة.
‎sh‏ الاختراع الحالي ناقل ‎Jail‏ الذي يتضمّن على ‎polynucleotide JI‏ واحد ‎sine‏ على
‏واحدة من متواليات النيوكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ التالية ‎(i:‏ متوالية النيوكليوتيدات المبيّنة في متوالية ذات الهويّة رقم ‎٠‏ ب) متوالية النيوكليوتيدات المشفّرةٍ لل ‎polypeptide‏ المبيّن
‎٠‏ في متوالية ذات الهويّة رقم ‎oF‏ ج) متوالية النيوكليوتيدات المشفرة لذ ‎sss polypeptide‏ على ‎I)‏ على 745 من هويَّة المتوالية إلى متوالية الحمض الأميني ذات الهوية ‎(Yi)‏ حيث يُظهر ‎polypeptide‏ نشاط إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ « 2( متوالية النيوكليوتيدات المحتوية على ‎JN)‏ على 7858 من ‎Lor‏ ‏المتوالية إلى متوالية الحمض الأميني ذات الهوية رقم:٠؛‏ حيث ‎AE‏ متوالية النيوكليوتيدات ل
‎polypeptide Yo‏ يتضمّن وحدة فرحيّة كبيرة لإنزيم ‎synthase‏ 806101700786010 و يُظهر
‏در
-١١- herbicide-resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase ‏نشاط إنزيم‎ ‏متواليات مرتبطة بشكل فعّال التي تُحرّك التعبير الوراثي لمتوالية‎ Lad ‏؛ كما يتضمّن‎ ‏من أجل‎ Jal ‏و الواسمات المنتقاة. قد يتم استخدام‎ nucleotide sequence ‏النيوكليوتيدات‎ ‏حيث يجري تكييفه لكلّ‎ (Algal) ‏تحويل البكتيرياء الفطريّات؛ الخمائر» الخلايا النباتيّة أو الخلايا‎ ‏حالةٍ بعينها.‎ 0 ‏يكون مُدمجاً في‎ IN ‏واحد على‎ ae ‏الاختراع الحالي نبات مُتحوّل الذي يتضمّن؛‎ ag ‏منتقى من: 0 متوالية‎ polynucleotide ‏الخاص به؛ و مرتبط بشكل فغال مع‎ 6 sigh ‏ب) متوالية نيوكليوتيدات‎ ٠ ‏في المتوالية ذات الهويّة رقم‎ Ad) ‏النيوكليوتيدات‎ ‏متوالية نيوكليوتيدات مشفرة‎ (z ؛" ‏في المتوالية ذات_ الهويّة رقم‎ oud polypeptide ‏على 795 من هويّة المتوالية إلى متوالية‎ JN) ‏مُحتو على‎ polypeptide ‏لذ‎ encoding ٠ ‏نشاط لإنزيم‎ polypeptide ‏رقم © حيث يُظهر‎ Agel ‏الأحماض الأمينيَّة ذات‎ ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب 1510106-51 ؛ د) متوالية‎ acetohydroxyacid synthase ‏نيوكليوتيدات محتوية على الأقلّ على 785 من الهويّة إلى متوالية النيوكليوتيدات المبيّنة في‎ ‏يتضمّن وحدة‎ polypeptide ‏حيث تُشقّر متوالية النيوكليوتيدات ل‎ ٠ ‏المتوالية ذات الهويّة رقم‎ my ‏نشاط‎ Ad ‏.و . يكون‎ acetohydroxyacid synthase any 35S Lep ٠ ‏ه)‎ ¢ herbicide-resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase ‏متوالية نيوكليوتيدات تكون مُكمّلة تماماً لواحدة من متواليات النيوكليوتيدات المذكورة من أ) إلى د)؛‎ ‏واحد على الأقلّ مرتبط بشكل فعّال مع متوالية‎ Soak ‏حيث يشتمل الناقل أيضاً على جين منتقى و‎
Bias ‏عن متوالية النيوكليوتيدات المذكورة. يكون المحقز‎ hl ‏نيوكليوتيدات التي تُحرّك التعبير‎ ‏في النباتات؛ على سبيل المثال في أنسجة النباتات أو‎ polypeptides ‏عن‎ Shall ‏للتعبير‎ ae ٠ ‏الذرة الرفيعة‎ JE ‏قد تكون النباتات المتحّلة نباتات أحاديّة الفلقة. على سبيل‎ . chloroplasts ‏؛ أو ثنائيّة الفلقة. على سبيل المثال‎ wheat ‏أو القمح‎ crice ‏الذرة 070 ؛ الأرز‎ « sorghum oilseed sali ‏؛ نبات ثيل الرشاد؛ نبات التبغ أو بذور زيت‎ sunflower ‏الشّمس‎ ale ‏نبات‎ ‎imidazolinone ‏يكون_النبات المتحوّل مقاوماً لمبيدات الأعشاب (ِمُكّبات‎ . rape ‏در‎
-١١7-
Ay ‏و يكون متفؤقاً في هذا الصدد على النوع البزي من نفس النبات عندما‎ ( sulfonylurea ‏و‎ ‏استعمال كميّات متساوية من مبيدات الأعشاب المذكورة على كلا النوعين.‎ ‏الاختراع الحالي أيضاً طريقة من أجل الحصول على نبات مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ i ‏؛ تشتمل‎ resistance ‏أو نبات يتميّز بمقاومة زائدة لمبيدات الأعشاب‎ herbicide—resistant © ‏باستخدام‎ transforming a plant cell dls ‏تحويل خليَّة‎ )١ ‏الطريقة المذكورة على خطوات‎ ‏تجديد‎ (Y polynucleotide ‏تشتمل على‎ expression cassette Jl) ‏مجموعة تعبير‎ ‏المذكور يحتوي‎ polynucleotide ‏الخليّة نباتيّة للحصول على نبات مقاوم لمبيدات الأعشابء‎ ‏متوالية‎ (I :3.ldl nucleotide sequence ‏من متواليات النيوكليوتيدات‎ JY) ‏على واحدة على‎ ‏لل‎ shad ‏ب) متوالية النيوكليوتيدات‎ ٠ ‏النيوكليوتيدات المبيِّنة في المتوالية ذات الهويّة رقم‎ ٠ ‏المبيّن في المتوالية ذات الهويّة رقم 7 ج) متوالية نيوكليوتيدات مشفرة‎ polypeptide ‏المتوالية إلى متوالية‎ oa ‏مُحتو على الأقل على 7955 من‎ polypeptide ‏لذ‎ 9 ‏نشاط إنزيم‎ polypeptide ‏حيث يُظهر‎ oF ‏الهوية رقم‎ cll Ana ‏الأحماض‎ ‏؛ د) متوالية‎ herbicide-resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase ‏نيوكليوتيدات محتوية على الأقلٌ على 785 من الهويّة إلى متوالية النيوكليوتيدات المبيّنة في‎ ١ ‏يتضمّن وحدة‎ polypeptide ‏حيث تُشقّر متوالية النيوكليوتيدات ل‎ ٠ ‏المتوالية ذات الهويّة رقم‎ ‏بنشاط إنزيم‎ زِّيمتي‎ 5 acetohydroxyacid synthase ay . ‏كبيرة‎ de ‏و ه)‎ herbicide-resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase ‏متوالية نيوكليوتيدات مُكمّلة تماماً لواحدة من متواليات النيوكليوتيدات المذكورة من أ) إلى د).‎ ‏واحد لتحريك التعبير‎ ae ‏على الأقلّ على‎ foo ‏عن جزئ‎ Sh) ‏تشتمل مجموعة التعبير‎ Y chloroplasts ‏النباتات؛ على سبيل المثال في أنسجة النباتات أو‎ polypeptide ‏عن‎ sl 53 « sorghum ‏قد تكون النباتات المتحوّلة أحاديّة الفلقة. على سبيل المثال )58 الرفيعة‎ ٠ ‏الشمس‎ dle ‏؛ أو ثنائيّة الفلقة. على سبيل المثال نبات‎ wheat ‏الأرز . ©0© أو القمح‎ « corn ‏أو بذور زيت الثتلجم‎ « soybean Lal ‏نبات ثيل الرشاد؛ نبات التبغ؛ فول‎ « sunflower simidazolinone ‏يكون النبات المتحوّل مقاوماً لمبيدات الأعشاب (مركّبات‎ . oilseed rape Yo ‏در‎
— \ — ‎sulfonylurea‏ بالمقارنة مع النوع البزي من النبات عندما يتمٌ استعمال كميّات متساوية من مبيدات الأعشاب المذكورة على كلا النّوعين. يشتمل النّبات على الوحدة الفرعيّة الكبيرة ‎large‏ ‏071 لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاومة لمبيدات الأعشاب. شرح مختصر للرسومات ‎ih ©‏ شكل ‎١‏ : منحنيات الاستجابة للجرعة لسلالة 530 الرفيعة ‎sorghum‏ الطافرةٍ المقاومة لمبيدات ‎(ADV-IMI-R) imidazolinone‏ و سلالة )5,3 الرفيعة ‎ALY) sorghum‏ قريبة التٌزاج 80777 أو سلالة النوع البزي. كانت مبيدات الأعشاب المختبرة هي ‎imazethapyr:‏ « ‎ dmazapyr‏ 111828010 عند معدّلات ‎baie‏ صفر (الضابط "عينة مقارنة), ‎XY XY‏ ‎SX XY‏ قياس تأثير المبيد العشبي كنسبة ‎ste‏ من المادّة الجاقة للأنسجة الهوائيّة ‎dry‏ ‎matter (DM) ٠‏ بالمقارنة مع ضابط "عينة مقارنة” غير معالج؛ ‎dad OS‏ تكون عبارة عن ‎Liss‏ ‏لثلاثة اختبارات قياس. يُبيّن شكل ؟ : محاذاة متواليات النيوكليوتيدات ‎ADV- sill nucleotide sequences‏ ‎jacetohydroxyacid synthase a 3YIMI-R‏ تلك المتواليات لسلالة 53 الرفيعة الأصليَّة قريبة التزاؤج 80777 أو النوع البزي من السلالة. إن استبدال © إلى ‎3A‏ النيوكليوتيدات يكون ‎lhe ١‏ عند الموضع +777 الذي ‎BS JK‏ المتواليتان عن بعضهما. و قد تمٌ وضع خطاً تحت البادئات المختلفة المستخدمة من أجل تضخيم متواليات ‎amplicon‏ المتراكبة. ‎ou)‏ شكل 9 : اختبارات قياس التنميط ‎genotyping all‏ من أجل ‎SNP G/A‏ عند كودون ؟5 لجين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في ‎$A)‏ الرفيعة ‎sorghum‏ . أجرى التحليل للواسم ‎SNP- sbacetohydroxyacid synthase oil)‏ 4 النمط الجيني للنّباتات ‎٠‏ المتناسلة ‎F2‏ 177 من 90523 ‎x F2‏ 11/1-4-/01. 5 تحديد ثلاثة مجموعات عتقوديّة بوضوح و قد ‎Lalas CIA‏ ( ©) مناظرة للنباتات متماثلة اللواقح للأليل الطافر ‎(AJA)‏ ؛ أو كمثلثات ‎A)‏ )مناظرة للنباتات متغايرة اللواقح ‎(A/G)‏ و على شكل معيّنات (*) للنباتات متماثلة اللواقح للأليل من النوع البزي ‎wild-type allele (G/G)‏ در
-؟١-‏ يُبِيّن شكل ؛ : النتائج المتحصيّل عليها عن طريق مطابقة متوالية النيوكليوتيدات ‎nucleotide‏ ‎sequence‏ لجين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ للذرة الرفيعة (رقم وصول ‎(GMTITYIY,Y‏ مع متواليات 5,3 الرفيعة الجينوميّة ‎sorghum genomic sequences‏ )5,3 الرفيعة البيضاء ‎(Sorghum bicolor‏ المودعة مع قاعدة بيانات متوالية نيوكليوتيدات ‎pd .(http://www.phytozome.net/search.php) Phytozome ©‏ هذه المطابقة أن متوالية الإنزيم ‎777,١ acetohydroxyacid synthase‏ 6/1177 تُظهر ‎Sila‏ كبيراً ‎fas‏ ‏(القيمة ‎(La =e‏ مع متوالية ‎acetohydroxyacid synthase aj‏ الواقعة عند ‎chromosome‏ 4 في ‎asia‏ الذرة الرفيعة مما يذل على أن الجين محل الاهتمام يكون موجوداً في مجموعة الارتباطات هذه. ‎٠‏ شكل * : ‎cad‏ خريطة الارتباطات ل ‎chromosome‏ 4 للأرة ‎.S. bicolor dedi‏ تكون المسافات بين الواسمات المجاورة ‎Aik‏ ب ‎centimorgans (cM)‏ . الموضع ‎chromosomic‏ ‏للواسم المتعدد الاشكال للنوكليوتيد المفرد ‎Single nucleotide polymorphism (SNP)—‏ ل ‎sbacetohydroxyacid synthase‏ و للمقاومة ‎imazethapyr Syl‏ مع الإشارة إلى ‎١7‏ ‏من ‎chromosome i SSRs‏ ؟ و تبيان النمط الجيني لنباتات ‎YY F2‏ & إنشاء ‎Vo‏ الخريطة باستخدام برمجيّات 0101/80ل» و باستخدام المعايير الاقتراضيّة ‎LOD‏ = ¥ و حذ أقصى لمسافة ‎Kosambi‏ يساوي ‎٠‏ 9 سم. الوصف التفصيلي: من أجل الحصول على نباتات مقاومة لمبيدات الأعشاب؛ تمّت معالجة النباتات من سلالة ‎Sl‏ ‏الرفيعة قريبة التَراوْج )530 الرفيعة البيضاء) ‎As YTV‏ باستخدام محلول مائي من مركّب : ‎ethyl‏ ‎cui .methanesulfonate (EMS) ٠‏ زراعة البذور المعالجة و تركها للتلقيح المفتوح. ثم انتقاء مائتين و ثلاثة وسبعين من نباتات ‎MI‏ كما تمت زراعة اثنين من بذور ‎JS‏ نبات في مشتل» و بذلك ‎I‏ الحصول على ما مجموعه 087 من نباتات 2/ا. تم جمع حبوب اللقاح من نبات واحد لكل زوج و استخدامها لتلقيح النباتات الأخرى في الزوج. 55 حصد البذور ‎M3‏ المتحصنّل عليها من عدد 7777 من نباتات ‎M2‏ الملقّحة. تمّت زراعة ما مجموعه 777 من الأخاديد بالنسل النباتي ‎Yo‏ 3الا. در yoo ‏مثر مربع‎ ٠٠٠٠١ / ‏ملليلتر‎ ٠٠١ ‏من كلّ أخدود بكمّيّة‎ 1/43 SLE ‏تم رش خمسين من التسل‎ ‏من النباتات من الأخاديد موا‎ BLS ‏.و قد أظهر ثمانية و ستين‎ imazethapyr ‏من المبيد‎ ‏و اعتبرت تلك النباتات‎ herbicide ‏طبيعيًاً و غياب الأعراض بعد المعالجة بمبيد الأعشاب‎ ‏تم تعريف مواصفات علم السلالات‎ .575 4-649 VT ‏مقاومة للمبيد العشبي و تمٌ تعريفها بالترميز‎ ethyl ١ -١97 ‏من الأخاديد و تمت الإشارة إليها بالترميز‎ dod ‏للنباتات‎ oo (ADV-IMI-R ‏بعد بالترميز‎ Lad ‏(يُشار إليها في هذه الوثيقة‎ 8077١7 methanesulfonate
LY) ‏نباتات 1/7 الطافرة المتحمّلة لمبيدات الأعشاب و البذور المنتقاة من النباتات‎ ‏تم الحصول عليها و‎ (VIT1-11331-BK ‏(المشار إليها بالترميز‎ ADV-IMI-R ‏الطافرة‎ ‏لأحكام معاهدة‎ Ey 1897:1108 ‏برقم وصول‎ NCIMB ‏إيداعها مع المجموعة‎
XV) ربوتكأ‎ ١١ ‏في‎ Budapest ٠ ‏المتحوّلة باستخدام مركب‎ sorghum ‏الاختراع الحالي ليس مقصوراً على نباتات 53 الرفيعة‎ 5) . ethyl methanesulfonate ‏فهناك نباتات )3 رفيعة تقع ضمن مجال الاختراع الحالي يتمٌ الحصول عليها عن طريق طرق‎ ‏على سبيل المثال طرق مثل الإشعاع و المطفّرات الكيميائيّة. النباتات الطافرة‎ pal ‏تطفير‎ ‏المقاومة لمبيدات الأعشاب يُمكن أيضاً أن 2 الحصول عليها عن طريق فحصيّة للضّغط‎ vo ‏الانتقائي على الخلايا المستزرعة مع مبيد أعشاب و الانتقاء للخلايا المقاومة لتوليد نبات مقاوم‎ ‏لمبيدات الأعشاب. إنَ تفاصيل طرق التطفير و التكاثر يُمكن العثور عليها في الوثيقة‎
Fehr, 1993, Macmillan Publishing "Development Principles of Cultivar’ ‏أي ,التي قد تم تضمين محتويات الكشف الخاصٌ بها في هذه الوثيقة و الإشارة إليه‎ Comp ‏كمرجع.‎ ٠٠ ‏أعشاب على النباتات الطافرة المقاومة لل‎ ae ‏تأثير رش‎ Ale cn ‏فقد‎ ull, sorghum ‏(طفرة أصليّة) مع استجابة سلالة الذرة الرفيعة‎ imidazolinone ADV-IMI-R ‏وتحقيقاً لهذه الغاية. تمت معالجة‎ .)01/8018 proprietary elite a3.) A+ YTV ZS ing simidazolinone ‏النباتات في الحقل بثلاثة مبيدات للأعشاب التي تنتمي إلى مجموعة مركّبات‎ ‏هي:‎ Yo ‏ادر‎
_ أ \ _ ‎XL imazapic 5 « imazapyr. imazethapyr‏ اختبار أربع معدّلات مُختلفة: كل ‎XY‏ ‎XE 5 XY‏ لكل مبيد من مبيدات الأعشاب. يتم بيان مُعدّل الاستعمال الموصى به في الحقل ‎(1X)‏ لكل ‎ane‏ للأعشاب في جدول ‎.١‏ ‏جدول ‎١‏ : مُعدَّل الاستعمال الموصى به في الحقل لكل مبيد من مبيدات الأعشاب ‎Ae‏ الأعشاب :1 : الاسم التجاري المعدّل الموصى به ‎(IX)‏ ‎herbicide‏ ‎Pivot® (BASF) | imazethapyr‏ © بعد عشرة ‎ol‏ من ‎(G33)‏ 35 اختبار المادّة الجافّة ‎(DM)‏ في الأنسجة الهوائيَّة لجميع النباتات. تكون النتائج ‎Alas‏ في شكل ‎.)١(‏ تمت مقارنة استجابة ‎coll)‏ الطافر 4]-11/1-/001م للاختراع الحالي مع استجابة السلالة قريبة ‎ZEN‏ 80777. ‎oh‏ جدول 7 تأثير المعدّلات المختلفة لمبيدات !/ام101328618 6 الام10328 « 5 ‎imazapic‏ ‎Tink‏ عنها كنسبة ‎sie‏ 45 من الماذّة الجاقّة بالمقارنة مع الضابط غير المعالج (/701 الضّابط). إن ‎١٠‏ القيّم المفصح عنها هي عبارة عن مُتوسّط ثلاثة تجارب . جدول ‎١‏ ‏مبيد الأعشاب | المعدّل ‎DM‏ الضابط ‎herbicide‏
-١١/-
I
I I I 7
IE ‏اللا ا‎ ‏ل ل ا‎ ‏ا ألا الت‎ 77 ‏ل ل‎ __ ‏ا‎ i
IE
I ‏أ‎ ‎id‏ هذه النتائج ‎Gf‏ سلالة النبات الطافر ‎ADV-IMI-R‏ وفقاً للاختراع الحالي تكون مقاومة لثلاثة من مبيدات الأعشاب المختبرة من مجموعة ‎imidazolinone‏ حتى عند ‎4X Ji‏ و على النقيض من ذلك؛ تكون ‎ADL‏ الأصليّة قريبة التّزاؤج 80777 ‎Aula‏ بشكلٍ واضح لجميع مبيدات الأعشاب؛ حتى عندما يتمٌ استعمال ‎Jon)‏ الموصى به ‎(1X)‏ ‏0 و كما يُمكن أن ‎La‏ يكون نبات 3 الرفيعة ‎sorghum‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎ herbicide-resistant‏ وفقاً للاختراع الحالي مقاوماً لمبيدات الأعشاب من مجموعة ‎imidazolinone‏ « مثل « ‎imazapyr J ¢ imazapic « imazethapyr‏ .
-م١-‏ قد ‎Ay‏ رش نباتات الذرة الرفيعة ‎sorghum‏ المقاومة لمبيدات ‎imidazolinone‏ بكميّات التي تكون ؛ أضعاف الكميّات الموصى بها للاستخدام في أي مجموعة من مبيدات الأعشاب المعروفة ‎imidazolinone‏ . قد يُظهر النبات المقاوم» على سبيل ‎(Jha‏ الصنّفات الوراثيّة المسؤولة عن المقاومة كما لوحظ ذلك في النباتات الناتجة من بذور ‎EVAVINCIMB‏ أو ‎all‏ قد يكون نبات ‎ae File ©‏ أو يكون ‎du‏ أو نباتات ‎gal‏ مُشتملة في ‎genome‏ الخاصٌ بها على ‎polynucleotide‏ واحد على ‎Pre) J‏ ل ‎polypeptide‏ مُحتو على استبدال من الحمض الأميني ‎J alanine‏ الحمض الأميني ‎threonine‏ عند الموضع ‎AY‏ من بروتين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ للذرة الرفيعة أو عند موضع مكافئ له؛ النبات المذكور يتميِّز بالمقاومة الزائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب من مجموعة ‎imidazolinone‏ بالمقارنة مع ‎gil ٠‏ البزي من نباتات الذرة الرفيعة ‎sorghum‏ . ‎ip‏ على ذلك؛ ‎GB‏ هؤلاء الأفراد ذوي المهارة الاعتياديّة في الفنٌ سوف يُدركون ‎Of‏ مواضع الأحماض الأمينيَّة تلك يُمكن أن تختلف اعتماداً على ما إذا كانت الأحماض الأمينيَّة قد تمت إضافتها أو ‎Sle dell)‏ من النهاية ‎ - ARI‏ ن الموجودة بمتوالية حمض أميني. و ‎Mad‏ ‏بعبارة '"موضع مكافئ” أن تعني موضعاً يكون ضمن نفس المنطقة المحفوظة كما في موضع ‎Ye‏ الحمض الأميني التمثيلئ. في الاختراع ‎Jad)‏ يكون للمصطلحات "مُتحمّل" ‎and‏ أعشاب و "مقاوم” ‎and‏ أعشاب يكون لها نفس المعنى و مجال مكافئ عندما 2 استخدامها ‎led‏ يتعلّق بمبيدات الأعشاب مثل مُركّبات ‎imidazolinone‏ أو ‎sulfonylurea‏ . يُوفٌر الاختراع ‎J‏ نباتات؛ خلايا نباتيّة؛ و أنسجة نباتات التي تعرض المقاومة لكميّات فعّالة من مبيدات الأعشاب. و يُقصَد بعبارة 'كميّات فعّالة” ‎٠‏ كميّات من مبيد للأعشاب تكون لديه القدرة على تثبيط 3 ‎gl‏ البزي من النباتات؛ أو الخلايا النباتيّة أو الأنسجة لكن التي لا تُحث تأثيرات خطيرة على النباتات المقاومة؛ الخلايا ‎Atal‏ أو أنسجة النباتات. تكون ‎AGRE Bl‏ من مبيد أعشاب هي ‎Bll‏ الموصى بها للقضاء على الأعشاب ‎pal‏ إن النّوع البزي من نبات؛ أو خليّة أو نسيج هو ذلك النوع الذي لا يُظهر الصفات الوراثيّة المسؤولة عن المقاومة لمبيدات الأعشاب؛ على سبيل المثال مبيد أعشاب ينتمي ©؟ إلى مجموعة مُركّبات ‎imidazolinone‏ أو ‎Jak. sulfonylurea‏ المصطلح ‎"al‏ على ادر
-١4- ‏حيث قد تكون أجزاء النبات المذكورة عبارة عن بذور» أوراق؛‎ cali ‏نبات في أيّ مرحلة؛ أو أجزاء‎ ‏سيقان؛ أنسجة أو أعضاء؛ تكون مشهورة لدى أي باحث نباتي متمرّس. و من أجل أن يتم‎ la acetohydroxyacid ayy ‏اكتشاف الطفرة؛ تم فحص التتابع الوراثي للجين المتحوّل‎ polypeptide ‏ال‎ encoding A ‏الرفيعة وفقاً للاختراع الحالي و الذي‎ 53 synthase polypeptide ‏حيث فيه يكون‎ « acetohydroxyacid synthase ‏يكون له نشاط إنزيم‎ ‏مقاومة‎ acetohydroxyacid synthase ‏الكبيرة الخاصّة بإنزيم‎ Le gl ‏المذكور أو الوحدة‎ ‏لمبيدات الأعشاب.‎ ‏من‎ acetohydroxyacid synthase ‏لجين الإنزيم‎ DNA ‏و قد حدّدت مقارنة متوالية جزئ‎ acetohydroxyacid synthase ‏لجين الإنزيم‎ DNA ‏النباتات المتحلة مع متواليات جزئ‎
G ‏التي بواسطتها تتغيِّر نيوكليوتيدة‎ Aika ‏من نباتات )53 الرفيعة 500900000 طفرة‎ (ll ‏ا للتوع‎ ٠
BLY ‏سلالة 53 الرفيعة‎ BE ‏التي‎ A ةديتويلكوينلا ‏عند موضع نيوكليوتيدة +7797 إلى‎ ‏للاختراع الحالي. عندما 2 استنتاج‎ ADV-IMI-R ‏(النوع البزي) من السلالة الطافرة‎ 80 777 ‏من الستلالات الطافرة و‎ acetohydroxyacid synthase ‏متواليات الأحماض الأمينيّة لإنزيم‎
GCG ‏النيوكليوتيدات (النيوكليوتيدات‎ Jamu) Gf ‏فقد تمت ملاحظة‎ gl gil ay ‏المتحؤل‎ polypeptide ‏التي شفرت لذ‎ )١ ‏رقم‎ A sell ‏في المتوالية ذات‎ ACG ‏بالنيوكليوتيدات‎ ١ ‏إلى الحمض‎ alanine ‏عند موقع الكودون 99 و الذي أحدث استبدالاً من الحمض الأميني‎ ‏يعرض‎ )١ ‏رقم‎ Ase) ‏(المتوالية ذات‎ polypeptide ‏في‎ (Ala93Thr) threonine ‏الأميني‎ ‏الكبيرة‎ Lie jal) ‏و يُناظر في هذا الصندد الوحدة‎ acetohydroxyacid synthase ‏نشاطاً لإنزيم‎
ADV-IMI— ‏للسُلالة المتحوّلة من الذرة الرفيعة‎ acetohydroxyacid synthase ‏لبروتين إنزيم‎ ‏د ا‎ ‏و يدخل ضمن مجال الاختراع الحالي النباتات؛ أجزاء النباتات؛ و البذورء و النسل النباتي من‎ ‏ل‎ jz polynucleotide ‏أو ما يُشابهها التي تشتمل على‎ Gly ‏جنسه؛ والنباتات المعدّلة‎ ‏الحمض الأميني‎ J alanine ‏على استبدال من الحمض الأميني‎ Sink polypeptide
Al ‏المذكور أو عند موضع‎ polypeptide ‏عند الموضع 97 في‎ (Ala93Thr)threonine ‏ضمن مجال‎ JAN ‏إلى نوع مُختلف. و‎ «in acetohydroxyacid synthase ‏مكافئ لإنزيم‎ Yo ‏در‎
=« \ — الاختراع الحالي ‎polynucleotide‏ أو ‎polypeptide‏ مُحتو على متوالية ذات هويّة تكون نسبتها على ‎IR‏ 785 ؛ 795 ؛ أو ‎LA‏ يتم تحديد نسبة هويَّة المتوالية في المائة عن ‎Gob‏ ‏محاذاة اثنين من متواليات الأحماض الأمينيَّة أو اثنين من متواليات النيوكليوتيدات. قد 25 حساب النّسبة المئويّة للمحاذاة بين اثنين من المتواليات؛ على سبيل المثال؛ باستخدام الصيغة التالية: ‎eS) o‏ المواضع المتطابقة/الكميَّة الكليَّة للمواضع المتراكبة) ‎٠٠١ x‏ 2 تحديد النّسبة المئويّة للمحاذاة بين اثنين من المتواليات باستخدام لوغاريثمات حسابيّة مُختلفة؛ على سبيل المثال» اللوغاريثمات الواردة في برامج ‎NBLAST‏ و ‎XBLAST‏ المذكورة بواسطة ‎et al., (1990) J.
Mol.
Biol. 215: 403‏ اناط160ل. و أثناء استخدام البرامج ‎(BLAST‏ ‎«Gapped BLAST‏ و ‎PSI-Blast‏ يُمكن أن يتمٌ استخدام المعايير الافتراضيّة للبرامج المعنيّة ‎XBLAST Si) ٠١‏ و ‎٠. (NBLAST‏ أنظر الموقع على الشبكة العنكبوتيّة /907. 110://0/00/00/.061.0100.015. و هناك مثال آخر مُفضَل؛ و غير ‎die‏ للوغاريثم حسابيّ الذي يُستخدم من أجل مقارنة المتواليات هو لرغاريت 0688105 )1988( ‎Myers and Miller‏ 4:11-7. ‎Jia‏ ذلك اللوغاريثم 25 تضمينه داخل برنامج ‎٠ ZEW) ALIGN‏ ,), الذي هو جزء من حزمة ‎٠‏ برمجيّات محاذاة المتوالية ‎(GCG‏ عندما 2 استخدام البرنامج ‎ALIGN‏ من أجل مقارنة متواليات الأحماض الأمينيّة؛ فإنّه يُمكن أن يتمٌ استخدام جدول وزن الوحدة البنائيّة 5/0/1120 جزاء طول ثغرة مقداره 7 و جزاء ثغرةٌ مقداره 4 . قد يتمٌ أيضاً ‎sha)‏ المحاذاة عن طريق فحص الدّليل. ‎Jas‏ الاختراع الحالي على ‎polynucleotides‏ و بروتينات تمنح مقاومة لمبيدات الأعشاب. إنّه من المفهوم أنه عندما تتمٌ ‎٠‏ الإشارة إلى ‎polynucleotide‏ مقاومة لمبيدات الأعشاب ‎SB‏ ذلك يعني ‎polynucleotide‏ ‎di‏ لبروتين ‎acetohydroxyacid synthase aj)‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide—‏ ‎resistant‏ . ادر
— \ \ — قد تكون بروتينات الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاومة لمبيدات الأعشاب بروتينات طبيعيَّة أو طافرة و هذه البروتينات تمنح المقاومة لمبيدات الأعشاب التي تنتمي إلى مجموعة مُكّبات©000ا101110820 أو مركّبات ‎sulfonylurea‏ . ثم تقييم وراثة المقاومة لمبيدات الأعشاب من نوع ‎imidazolinone‏ ؛ على سبيل المثال ‎ic imazethapyr ©‏ مجتمع فاصل ‎F2‏ من 53 الرفيعة ‎sorghum‏ المولدة عن طريق تهجين ‎ADL‏ حساسة للمبيد ‎imazethapyr‏ مع ‎ADU‏ الطافرة ‎ADV-IMI-R‏ ‏& رش نباتات ‎F2‏ الناتجة من التهجين بالمبيد ‎(BASF (Pivot®) imazethapyr‏ عند مُعدَّل مقداره ‎Yo XY‏ يوماً في المرحلة ‎V6‏ بعد الإنبات و تم تقييم الأعراض التمطيَّة الظاهريّة ‎٠١‏ أَيَام بعد المعالجة. تكون النتائج معروضة في ‎Foden‏ ‎Ve‏ جدول “7 : توزيع النباتات ‎sl)‏ على التقييم النمطئ الظاهري النّمط الظاهري التقييم النمطي الظاهري ‎dis‏ الل في 2] ‎i ~‏ 1 ض ض = تُظهر النتائج ‎Of‏ مجتمع النباتات ‎F2‏ يُمكن أن يتمٌ تصنيفه ‎fl‏ على الأعراض المرئيّة وفقاً إلى تسجيل نقاط لنمط ‎W‏ هري الذي يسمح بتجميع النباتات المنفردة في ثلاث فئات نمطيّة ‎PHN Us‏ النباتات التي لا يوجد بها ‎cali‏ النباتات المصابة بداء الاخضرار و النباتات الميّتة. أظهر فحص التتابع الوراثي أنّ ‎ADL‏ 53 الرفيعة الطافرة المتحمّلة لمبيدات الأعشاب للاختراع ‎٠‏ الحالي احتوت على طفرة ‎dias‏ في ‎polypeptide‏ الذي يتميّز بنشاط ‎ay)‏ حمض ‎acetohydroxyacid synthase‏ أو الوحدة الفرحيّة الكبيرة ‎large subunit‏ لبروتين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ . در
"١
ER ‏المبيّنة في متوالية ذات الهويّة رقم‎ nucleotide sequence ‏وثْبيّن متوالية النيوكليوتيدات‎ ‏عند موضع نيوكليوتيدة +7797 (المناظرة‎ A ‏النيوكليوتيدة © قد 5 تغييرها إلى النيوكليوتيدة‎ ‏(الحمّاسة إلى مبيدات‎ 460777 ZEN ‏الرفيعة الأصليّة قريبة‎ 30 ADL ‏التي تُيِّز‎ (AT ‏لكودون‎ ‏تت‎ ial) ‏الطافرة المحدّثة 4ا-11/01-/101/_للاختراع الحالي. هذا الواسم‎ AEN ‏الأعشاب) من‎ . SNP-sbacetohydroxyacid synthase ‏ه الإشارة إليه بالترميز‎
SNP-sbacetohydroxyacid synthase ‏ومن أجل تحديد فائدة استخدام الواسم الجزيئي‎ ‏للكشف عن النباتات المحتملة مقاومتها لمبيدات الأعشاب؛ تم اختبار أجزاء النبات أو البذور؛ أو‎ ‏تهجين السلالة الطافرة المقاومة‎ Gob ‏عن‎ dell ‏من نباتات 2 من مجتمع النباتات‎ ١77 ‏_السلالة_قريبة‎ ae (VT09-9754-48-6-BK ‏(الانتقاء‎ ADV-IMI-R ‏لمبيدات الأعشاب‎ ‏التَزاؤج الحمّاسة لمبيدات الأعشاب 90577 (مجتمع النباتات المشار إليه في هذه الوثيقة بالترميز‎ ٠ ‏لبعض النباتات من‎ allelic ‏شكل () كمثال التمييز‎ cpa ‏1/1-4ا-/01ل).‎ x 90523 2
F2 ‏مجتمع النباتات‎
ADV-IMI- ‏تمّ وضع الضابطين المختبرين في المجموعات العنقوديّة المتوقّحة (السلالة الطافرة‎
Lg ‏0577؛ المقاوم لتماثل اللواقح و الحسّاس لتماثل اللواقح؛ على التوالي).‎ gull ‏»ا و النوع‎ ‏في‎ fade ‏يكون‎ SNP-sbacetohydroxyacid synthase ‏هذه البيانات أن الواسم الجزيئي‎ Vo ‏ل‎ aid polynucleotide ‏الثلاث عند موضع نيوكليوتيدة +7797 لذ‎ allelic ‏تمييز التوليفات‎ ‏أو الوحدة الفرحيّة الكبيرة‎ acetohydroxyacid synthase ‏بنشاط إنزيم‎ jay polypeptide sorghum ‏في 53 الرفيعة‎ acetohydroxyacid synthase ‏إنزيم‎ (4 5 plarge subunit ‏.إن هللاء الأشخاص المتمرسين في الفنٌ؛ في ضوء الكشف عن الواسم-5010‎ ‏استخداماته ؛ قد يستطيعون تمييز النباتات المقاومة‎ 5 sbacetohydroxyacid synthase Y. ‏لمبيدات الأعشاب؛ على سبيل المثال تلك المقاومة لمبيدات الأعشاب التي تنتمي إلى مجموعة‎ ‏أو‎ « imazapic « imazethapyr ‏مثلاً‎ sulfonylurea ‏مُركّبات 110108200008 ر/أر‎ ‏بالإضافة إلى الطريقة الموصوفة في هذه الوثيقة؛ أيّ طريقة‎ pall ‏ما يُشابهها. قد تكون طريقة‎ ‏أخرى معروفة؛ أنظر على سبيل المثال‎ ‏در‎
— \ — ‎ASA (Soleimaniet al., (2003) Plant Mol Biol Rep 21: 281-288), PAMSA‏ ‎(Gaudet et al., (2007) Plant Mol Biol Rep 25: 1-9), SSCP (Germano and‏ ‎Klein (1999) Theor Appl Genet 99: 37-49) or TagMan® (Jones et al.,‏ ‎Pest Management Science 64: 12-15).‏ )2008( © وقد © تحليل الارتباط بين الأنماط الظاهريّة التي تعرض المقاومة و عدد الأليلات الطافرة باستخدام الواسم ‎SNP-sbacetohydroxyacid synthase‏ . و تحقيقاً لهذه الغاية؛ فقد تمت دراسة الأنماط الظاهريَّة لداء الاخضرار و للموت النباتي في النباتات الفرديّة من النسل 2] ‎(ADV-IMI-R »05977(‏ بعد ‎Gil)‏ بالمبيد العشبي ‎imazethapyr‏ . و في نفس الوقت؛ تعّت دراسة النّمط الجيني للواسم ‎-SNP-SbAHA‏ ‎Ye‏ وثم عرض ‎A All‏ جدول 4. تم تحديد الارتباط بين الواسم الجزيئي ‎SNP-‏ ‎sbacetohydroxyacid synthase‏ والمقاومة للمبيد العشبي ‎imazethapyr‏ (المقيس كتقييم للأنماط الظاهريّة) باستخدام اختبار استقلال مربّع كاي. أحدث الاختبار احتماليّة م - 16,4 - تكون ‎Ally‏ على ارتباط مرتفع بشكلٍ كبير بين الطفرة المحدّثة في جين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ (أجري التنميط الجيني ‎genotyping‏ له باستخدام الواسم ‎١٠‏ النوعي ‎SNP-sbacetohydroxyacid synthase‏ )و المقاومة للمبيد العشبي ‎imazethapyr‏ وفقاً للفصل المشترك للنّمط الظاهري و النّمط الجيني. جدول ؛ : الأنماط الظاهريّة و تقييمات المقاومة للمبيد العشبي ‎imazethapyr‏ الخاصئة ‎July‏ ‏النباتي ‎F2‏ الناتج من التهجين 90577 ‎dsl ADV-IMI-R x‏ على تحليل-5010 ‎AJA . sbacetohydroxyacid synthase‏ متماظة اللواقح لإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‎synthase Y.‏ الطافر؛ ‎A/G‏ متغايرة اللواقح؛ ‎G/G‏ متماثلة اللواقح للنوع البزي ‎Ladd‏ الظاهري ا نقاط النمط الظاهري ‎S|‏ أفراد من نسل 72 كل نمط جيني المسجّلة در
_ \ ¢ —_
IB
0 BE مصاب بداء ‎AY ١ Af‏ م ‏الاخضرار ‏0 8 ‎IE‏ ‏أيضاًء ثم تنفيذ رسم الخرائط ‎Qual)‏ الخاصنة بمقاومة مبيدات الأعشاب و الواسم النوعي ‎SNP—‏ ‎sbacetohydroxyacid synthase‏ . و &: على متوالية إنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‎synthase‏ ,3 الرفيعة المفصح عنها في بنك الجينات (برقم وصول ١,61/777777؛‏ المتوالية ذات الهويّة رقم 4), تم إجراء تحليل ‎BLAST‏ لمطابقة متوالية جزئ د.ن .أ للذرة الرفيعة ثنائيّة ‏د الألوان مع قاعدة بيانات ‎Phytozome‏ : ‎J. (http://www. phytozome.net/search.php)‏ النتائج ‎add‏ في شكل )8( على أن متوالية إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المرتبطة بالمقاومة لمبيدات الأعشاب التي تنتمي إلى مجموعة مُركّبات ‎imidazolinone‏ تكون ‎chromosome i ddl;‏ ¢ في جينوم 53 الرفيعة ثنائيّة الألوان ‎Sorghum bicolor genome‏ . إن إجراءات أخذ البصمات (التنميط ‎٠‏ الجيني ‎EY ( genotyping‏ على هذه المعلومات قد تم ‎alee‏ للسلالة المتحلة ‎ADV-IMI-R‏ ‏للاختراع الحالي و للسلالة قريبة ‎S55‏ 90577 باستخدام واسمات ‎Lipa‏ متنؤعة من النوع - 55845لجزئ د.ن.أ. 5 انتقاء سبعة واسمات من النّوع ‎SSRs‏ عديدة الأشكال تكون واقعة على ‎chromosome‏ ؛ من أجل التنميط الجيني ‎genotyping‏ ‎Mace, ES et al., A consensus genetic map of sorghum that integrates ‎Multiple component maps and high-throughput Diversity Array Technology ‏ا‎ ٠١ (Dart) markers, BMC Plant Biology, 2009, 9: 13; Srinivas, G et al.,
Exploration and mapping of microsatellite markers from subtracted drought
"١0ه‎ stress ESTs in Sorghum bicolor (L.), Moench. Theor. Appl. Genet. 2009, 118: 703-717; Ramu, P et al., In silico mapping of important genes and markers available in the public domain for efficient sorghum breeding, Mol
Breeding 2010, 26: 409-418; http://www.lbk.ars. usda.gov/psgd/sorghum/2009SorghumSEAMs_LBKARS. xls) o
SNP— ‏من الواسم‎ JS ‏و قد أمكن من خلال نتائج هذه الإجراءات رسم الخرائط الجينيَّة‎ ‏الظاهري المقاوم» التي شين أن‎ Ld ‏.و‎ 550/01070007000 SYNTHASE
SNP-sbacetohydroxyacid ‏و الواسم النوعي‎ imidazolinone ‏المقاومة لمبيدات‎ ‏المعرّف سابقاً‎ SSRs ‏المحاط بواسطة الواسم‎ ¢ chromosome ‏تكون واقعة على‎ synthase .)* ‏الألوان (شكل‎ ABLE ‏الرفيعة‎ 5 ¢ chromosome ‏في‎ 0٠ ‏في النباتات‎ )١ ‏وفقاً للاختراع الحالي (المتوالية ذات الهويّة رقم‎ polynucleotide ‏إدخال‎ x; ‏قد‎ ‏في‎ polynucleotide ‏توجد طرق مُختلفة لإدخال‎ Gy ek ‏من أجل الحصول على نباتات‎ soybean sal ‏فول‎ corn sll «Jie ciel, ‏النباثات ذات الأهميّة‎ bala ‏النباتات» و‎ ‏نبات‎ ¢ flax ‏الكتّان‎ « sugarcane SLY (ad ‏؛‎ wheat ‏؛ القمح‎ sorghum ‏الرفيعة‎ $A) ‘ ‏أو النباتات الأخرى؛ الخضروات؛ الشجارء أو نباتات الزيئة. تكون‎ sunflower ‏الشمس‎ aie ١ ‏للحصول على النباتات المعدّلة وراتيا- مشهورة في‎ polynucleotide ‏المتبعة لإدخال‎ gil ‏الفنّ؛ و ربما يتمٌ أيضاً استخدام طرق معاودة الارتباط الجيني.‎ ‏توجد طرق مُختلفة لإحداث التحوّل في النبات؛ باستخدام ناقلات على سبيل المثال‎
An, G. et al., (1986) Plant Pysiol., 81: 301-305; Fry, J., et al., (1987)
Plant Cell Rep., 6: 321-325; Block, M. (1988) Theor. Appl Genet., 76: ٠ 767-7174; Hinchee, et al., (1990) Stadler. Genet. Symp., 203212.203- 212; Barcelo, et al., (1994) Plant J., 5: 583-592; Becker, et al., (1994)
Plant J., 5: 299-307; Borkowska et al., (1994) Acta Physiol Plant., 16: 225-230; Christou, et al., (1992) Trends Biotechnol., 10: 239-246; ‏ادر‎
-؟؟'-
D'Halluin, et al., (1992) Bio/Technol., 10: 309-314; Dhir, et al., (1992)
Plant Physiol., 99: 81-88; Casas et al., (1993) Proc. Nat. Acad Sci. USA 90: 11212-11216; Dong, J. A. and Mchughen, A. (1993) Plant Sci., 91: 139-148; Golovkin, et al., (1993) Plant Sci., 90: 41-52; Guo Chin Sci.,
Bull., 38: 2072-2078; Asano, etal., (1994) Plant Cell Rep., 13; Christou, ©
P. (1994) Agro. Food. Ind. Hi Tech., 5: 17-27; Eapen et al., (1994) man, et al., (1994) Bio—Technology ‏)صا الفن‎ Cell Rep., 13: 582-586; H 12: 919923; Christou, ©. (1993) In Vitro Cell. Dev. Biol.-Plant; 29P: 119-124; Davies, et al., (1993) Plant Cell Rep., 12: 180-183; Ritala, et al., (1994) Plant. Mol. Biol. 24:317-325; and Wan, Y. C. and Lemaux, ٠
P. G. (1994) Plant Physiol., 104:3748). بعض ‎Bill‏ المستخدمة في تحويل النباتات و تقنيات الهندسة الوراثيّة تكون موصوفة في
Sambrook, et al., (1989) Molecular cloning, A laboratory manual, Cold
Spring Harbor Press, Plainview, N.Y.; Ausubel FM, et al., Current
Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, N.Y. Yo قد يتمٌ إدخال الناقل أيضاً باستخدام تقنيات تعجيل قذف الجسيمات مثل الموصوفة في براءات الاختراع الأمريكيّة رقم ‎5,945,05٠‏ والموصوفة في
Casas el. al., Proc. Natl. Sci., USA, 90: 11212, 1993. إن النباتات المتحوّل؛ على سبيل المثال؛ المحتوي على ‎polynucleotide‏ للاختراع الحالي ‎ges‏ ‎Ye‏ عن بروتينات الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاومة لمبيدات الأعشاب و يُظهر الصّفات الوراتيّة المسؤولة عن المقاومة لمبيدات الأعشاب مثل مركّبات ‎imidazolinone‏ و/أو ‎sulfonylurea‏ و ‎aad)‏ بعبارة "بروتينات لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مقاومة ‏لمبيدات الأعشاب" البروتينات التي تعرض نشاطاً لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ الذي ‏يكون أعلى من نشاط إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في النوع البزّي للنبات ‎Laie‏
ا" يكون في وجود مبيد أعشاب يعوق نشاط الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ بالتركيزات التي عندها يعوق مبيد الأعشاب ‎herbicide‏ نشاط بروتين الإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‎synthase‏ للنبات من النوع البزي. قد تكون متوالية ‎polynucleotides‏ للاختراع الحالي مشمولة في مجموعة تعبير وراثي ‎expression cassette °‏ للتعبير عن بروتين الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاوم للمبيدات في نبات يكون ذا أهميّة؛ على سبيل المثال يكون ذا أهميّة زراعيَّة. تشتمل المجموعة على متوالية تنظيميَّة مرتبطة بشكل فعّال؛ ‎Sle‏ على ‎JY)‏ مع ‎me‏ واحد. تكون المحفزات مشهورة في ‎Sal‏ و قد تكون؛ على سبيل ‎JE)‏ تأسيسيّة؛ ‎ALE‏ للحثٌ؛ نوعيَّة ‎rill‏ ‏أو محفّزات ‎Chloroplast dies‏ ؛ و جميعها تكون وظيفيَّة في النباتات. تشتمل المجموعة أيضاً ‎٠‏ على متواليات نهاية ‎TALE‏ معروفة في الفن. قد تشتمل المجموعة على متواليات تنظيميّة مختلفة من أجل إجراء التحسين على فعالية التعبير الوراثي لذ ‎polynucleotide‏ الخاصٌ بإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ « على سبيل المثال المعزّزات ‎Jie‏ الإنترونات؛ المتواليات الفيروسيَّة أو ما يُشابهها؛ أو قد تشتمل على متواليات ‎polynucleotide‏ أخرى ذات أهميّة ‎el)‏ تختلف عن ‎polynucleotide‏ للاختراع ‎Vo‏ الحالي؛ سواءً كانت مرتبطة أم لا مع ‎polynucleotide‏ المذكور؛ أو مع متواليات مرشدة. تشمل المحفّزات؛ و ‎ESD‏ لا تتحصر في» المحقزات التأسيسيّة ؛ القابلة للحث؛ ‎Lo gil)‏ للنسيج أو للعضيّات الخلويّة؛ ‎ad) Jie‏ 355؛ ‎Gish‏ قابل ‎Gall‏ بواسطة الجروح أو الموادً الكيميائيّة؛ ‎jak‏ الصندمة الحراريّة؛ مُحقّز قابل للتحفيز بواسط ‎tetracyclines‏ أو ما يُشابهها للمخترع ‎Chao‏ واخرون ؛ علم طبيعة النبات ؛ ‎٠7١0‏ : 979 و الطلب الامريكي رقم 01897359 و ‎٠‏ _الطلب الامريكي رقم ‎OVEYY‏ 00 .و توجد عوامل مناسبة لإنهاء اللّسخ تكون أيضاً معروفة لدى هؤلاء الأشخاص المتمرسين في الفنّ التي ربما يتمٌ استخدامها في النباتات؛ أنظر؛ ‎Sie‏ ‎Odell, et al., 1985, Nature 313: 810; Sanfacon, et. al., Genes Dev., 5:‏ ‎Munroe, et al., 1990 Gene 91: 151; Rosenberg et al., 1987,‏ ;1990 ,141 ‎Gene 56: 125; Joshi, et al., Nucleic Acid Res., 15: 9627, 1987.‏ در
“YA
Jes ‏بشكل فعّال" الإشارة إلى ارتباط وظيفيّ بين المحفز و متوالية ثانية.‎ Aad ‏و يُقصَد بعبارة‎ ‏المناظرة للمتوالية الثانية. يعني‎ Lo ‏متوالية المحفّز و تتوسّط في عمليَّة نسخ متوالية جزئ‎ ‏المصطلح 'مرتبطة بشكل فعّال” أنَ متواليات الحمض النووي التي تكون مرتبطة مع بعضها تكون‎ ‏للبروتين؛ تكون متجاورة و في‎ Sead) ‏متجاورة و حيث يكون ضرورياً ضمٌ اثنين من المناطق‎ expression ‏نفس إطار القراءة. قد تكون المجموعة عبارة عن مجموعات تعبير وراثي‎ © ‏متعددة.‎ cassette ‏الأخرى في صورة التحام‎ polynucleotide ‏للاختراع الحالي ملحقاً‎ polynucleotide ‏قد يكون‎
AY) polynucleotide Pre ‏بصورة منفصلة. قد‎ 4 polynucleotide ‏مع‎ ‏مقاوم لمبيدات الأعشاب؛ المقاومة للحشرات أو‎ (Jd) ‏الأخرى)؛ على سبيل‎ polynucleotide) . ‏أجزاء النبات الأخرى التي تكون مشهورة لدى هؤلاء الأشخاص المتمرّسين في الفنّ‎ ٠ ‏للاختراع الحالي؛ على‎ polynucleotide ‏و لتحسينال تعبير الوراثي في النباتات؛ قد يتمٌّ تعديل‎ ‏متواليات‎ Jie ‏سبيل المثال عن طريق تضمين كودونات النبات المفضّلة؛ و حذف متواليات‎ polynucleotide ‏يدخل ضمن مجال الاختزاع الحالي‎ clad ‏الإنترونات أو المتواليات الضارّة.‎ ‏المقاوم محل الدراسة للاختراع‎ acetohydroxyacid synthase ‏إنزيم‎ polypeptide ‏ل‎ Pre) ‏حذوفات أو إدراجات أو طفرات أخرى‎ (JE ‏الحالي الذي أصبح مُتحولاً؛ و يعرض؛ على سبيل‎ ٠ ‏المتحوّل"‎ polynucleotide” ‏مُختلفة عن الطفرة الموصوفة في هذه الوثيقة. يُقصَد بعبارة‎ nucleotide ‏في متوالية النيوكليوتيدات‎ ddl ‏محتو على تغيِّرات‎ 0/56 ‏الخاصة به.‎ sequence ‏وفقاً للاختراع الحالي مُعدَّل عن طريق الاستبدالات؛ الحذوفات؛‎ polynucleotide ‏قد يكون‎ ‏التي تتم من خلالها تلك المعالجات تكون معروفة عموماً في‎ Gal ‏_الاقتطاعات؛ و الإدراجات. إنّ‎ ٠ ‏المتبعة لإحداث الطفرات و التعديلات في متواليات النيوكليوتيدات هي طرق‎ Bhi ‏الفنّ. إنّ‎
OA) ‏مشهورة في‎
Kunkel (1985) Proc. Natl. Acad. Sci., USA 82: 488-492; Kunkel et al., (1987) Methods in Enzymol., 154: 367-382; Walker and Gaastra, eds., ‏در‎ vq : (1983) Techniques in Molecular Biology (MacMillan Publishing Comp ‏و المراجع الواردة في هذه الوثائق. قد توجد استبدالات الأحماض الأمينيَّة التي لا‎ New York).
Dayhoff etal., (1978) ‏الاهتمام في البحث التالي:‎ Jae ‏على النشاط البيولوجي للبروتين‎ figs
Atlas of Protein Sequence and Structure Natl. Biomed. Res. Found.,
Washington, D.C. ٠ ‏تضمين محتوياته في هذه الوثيقة كمرجع.‎ I ‏الذي‎ ‎acetohydroxyacid ‏الإنزيم‎ polynucleotide ‏الذي يتضمّن‎ DNA ‏قد يتمٌ إدخال جزئ‎ ‏الاهتمام في الاختراع الحالي في النباتات المختلفة كجزءِ من ناقل. )5 اختيار‎ Jae synthase ‏ناقل مناسب يعتمد على الطريقة التي يُراد استخدامها من أجل إحداث التحؤل و النّبات المزمع‎ (Jie ‏هؤلاء الأشخاص المتمرسين في الفنٌ يكونون على دراية تامّة بالناقلات المختلفة؛‎ (alias ٠ ‏كمناطق مجائحة لتكميل الناقلات‎ "T-DNA" ‏التْقّال‎ DNA ‏يتمٌ أيضاً استخدام جزئ‎ Ri S/T )84/:07917 ‏(الطلب الدّولي‎ Ri Ti
Herrera—Estrella et al., 1983, Nature 303: 209; Horsch et al., 1984,
Science 223: 496; Fraley et. al., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci, USA 80: 4803. ١٠ ‏متواليات نيوكليوتيدات‎ expression 685586116 ‏قد يشتمل الناقل على مجموعة تعبير وراثي‎ ‏أخرى؛ على سبيل المثال الواسمات المنتقاة مثل الواسمات التي تمنح المقاومة للمضادذات الجيويّة‎ polynucleotide ‏الأعشاب و المتواليات لتحريك التعبير الوراثقي عن‎ clad ‏أو‎ ‏الوحدة الفرعيّة الكبيرة‎ polypeptide Sia ‏محل الاهتمام في النباتات؛‎ (polynucleotide) ‏الذي يكون له متوالية ذات الهوبّة‎ acetohydroxyacid synthase ‏لإنزيم‎ large subunit | ٠ ‏إنزيم‎ polypeptide ‏لذ‎ di polynucleotide ‏رقم ". قد يكون ناقل مُعيِّن يشتمل على‎ ‏المقاوم لمبيدات الأعشاب 6510106-61 للاختراع‎ acetohydroxyacid synthase ‏يكون مُقاوماً لمبيدات‎ siliransgenic ‏وراتاً‎ Jie ‏الحالي مفيداً في الحصول على نبات‎
Gs ‏قد تكون النباتات المتحّلة‎ . sulfonylurea jimidazolinone ‏الأعشاب من نوع مركّبات‎
ل نوع من النباتات ‎Jie‏ النباتات ثنائيّة الفلقة و أحاديّة الفلقة. التي ‎Jay‏ ضمنها؛ دون حصر أو ‎cuss‏ النباتات ذات الأهميّة ‎Jie Dell‏ 3 الرفيعة ‎SU)‏ البيضاء الرفيعة ‎EE‏ الألوان ‎«Sorghum bicolor‏ ,5 العويجة ‎(Zea mays) 5, ,(Sorghum vulgare‏ نوع ‎<i Sl)‏ (مثلاًء ‎alll 8. napus sal)‏ 38 .8 الخردل الأخضر 8 .8), البرسيم الحجازي ‎(Medicago sativa) ©‏ الأرز ‎(Oryza sativajrice‏ الجاودار ‎CA (Secale cereal)‏
Eleusine ) ,(Setaria italic) ,(Panicum miliaceum) ,(Pennisetum glaucum) wheat ‏القمح‎ (Helianthus annuus)sunflower ‏الشمس‎ ale ‏نبات‎ ,(coracana
Glycine )soybean ‏فول الصنّويا‎ ,(T. Turgidum ssp. durum (Triticum aestivum) ‏القطن‎ ,(Arachis hypogaea) ‏الفول السوداني‎ (Nicotiana tabacum) ‏نبات التبغ‎ ,(max ‎Gossypium hirsutum) ) ) Gossypium barbadense) cotton ٠٠‏ (¢ البطاطا ‎(Ipomoea batatus)‏ نبات الكسافا "المنيهوت" ‎,(Manihot esculenta)‏ القهوة ( ‎Coffea‏ ‎¢(spp.‏ جوز ‎(Cocos nucifera) ight‏ القرطم ‎,(Carthamus tinctorius)‏ الأناناس ‎«(Ananas comosus)‏ أشجار الحمضيّات ‎«(Citrus spp.)‏ الكاكارو ) ‎Theobroma‏ ‎,(cacao‏ الشاي ‎,(Camellia sinensis)‏ الموز ‎«(Musa spp.)‏ الأفوكادو ) ‎Persea‏ ‎«(americana Yo‏ الزيتون ‎,(Anacardium occidentale) sali, (Olea europaea)‏ اللوز ‎(Beta vulgaris) LL sak «(Prunus amygdalus)‏ البطاطس ( ‎Solanum‏ ‎,(tuberosum‏ قصب ‎(Saccharum spp.) sugarcane RL‏ « الخضروات؛ نباتات ‎and)‏ الأشجار. ‏ و بشكل ‎Sais‏ يكون النّبات في الاختراع الحالي هو ‎BN‏ الرفيعة ‎sorghum‏ . ‎Ye‏ يتم توضيح الاختراع الحالي بشكلٍ أفضل من خلال الأمثلة التالية؛ التي لا يجب أن ‎Ad‏ على ‎se Ll‏ لمجاله. على النّقيض من ذلك؛ فإئه ينبغي أن يُفهم بوضوح ‎Gl‏ هناك نماذج؛ و تعديلات و صور أخرى مكافئة للاختراع ‎all‏ قد تكون ممكنة بعد قراءة الوصف الحالي؛ و التي يمكن أن يقترحها ‎(sf‏ شخص متمرّس في ‎Cl)‏ بدون الابتعاد عن فحوى الاختراع الحالي و/أو مجال عناصر الحماية الملحقة. ‎ve‏ الأمثلة
— \ اذ مثال ‎١‏ ‏إحداث الطفرات في ‎ADL‏ الذّرةٍ ‎sorghum dad)‏ قريبة ‎23H‏ 807797 و انتقاء ‎ADL‏ ‏الطافرة ‎imidazolinone-resistant mutant 80237EMS2-192‏ المقاومة للمبيد العشبي ‎imidazolinone‏ « 5 غمر اثنين و ثلاثين ألفاً من البذور في طور ما قبل الإنبات لسلالة ‎SA‏ ‎o‏ الرفيعة ‎ZS ing‏ اتاد اخل محلول ‎le‏ 00 , م حجم/حجم من : ‎ethyl methanesulfonate‏ لمذة ‎VT‏ ساعة. تمت زراعة البذور المعالجة في محطّة تجارب ‎Advanta Seeds in Venado Tuerto, Province of Santa Fe, Argentina,‏ المخطّط ‎No. 1 (33°41 4777 5: 61° 587 4577 W)‏ , بتاريخ ‎YY‏ ديسمبر, ‎٠١1‏ و ‎A‏ ‏تركها من أجل التلقيح المفتوح. ‎Ys‏ ثم انتقاء ما مجموعه 777 من نباتات ‎ML‏ و تمت زراعة اثنتين من البذور من ‎JS‏ نبات بتاريخ ؟ مايوء 08 في محطّة تجارب ‎Advanta seeds in Oran, Province of Salta,‏ ‎S; 64° 20° 1477 W) Argentina‏ 3777 497 229) في ‎Jide‏ و تم الحصول على ما مجموعه 547 من نباتات ‎M2‏ 25 جمع حبوب اللقاح من نبات واحد من كل زوج و استخدامها لتلقيح النبات الآخر في الزوج. تمٌ حصد بذور ‎M3‏ المتحصّل عليها من ‎OS‏ من 777 من النباتات ‎Yo‏ المائّحة 2. تمت زراعة ما مجموعه ‎YVY‏ أخدود من التُسل ‎M3‏ بتاريخ 1 ١ديسمبر‏ ل في ‎Venado Tuerto‏ وتم رش ‎٠‏ نباتاً من ‎JS‏ أخدود ‎M3‏ بكميَّة ‎٠٠١‏ ملليلتر / ‎٠٠٠٠١‏ ‏متر مربع من المبيد العشبي ‎imazethapyr‏ بتاريخ ‎YY‏ ديسمبر؛ ‎.٠٠١٠١‏ ‏أظهر ثمانية وستين نباتاً من الأخاديد ‎15a‏ طبيعيًاً و غياب الأعراض بعد المعالجة بمبيد الأعشاب ‎herbicide‏ 255 اعتبارها سلالة مقاومة للمبيد العشبي و & تعريفها بالترميز 109-9754/. ‎SY‏ تحديد مواصفات علم السلالات للنباتات المقاومة من الأخاديد و قد تت الإشارة إليها بالترميز 7ح ‎YA«YYY ethyl methanesulfonate‏ (يُشار إليها في هذه الوثيقة فيما بعد بالترميز 11/1-1-/001).يكون تاريخ الأجيال ‎Uk‏ في جدول ‎Ne)‏ ‏در
_— \ اذ الموقع- الأخدود _ جيل امواصفات ‎AD‏ الزراعة تاريخ الانتقاء ‎OR: Oran; VT: Venado Tuerto‏ مثال ؟ تحليل ‎Jax‏ الاستجابة للمعالجة ‎imidazolinonecl aye‏ في ‎CAND WA‏ الطافرة المقاومة -/انام ‎IMI-R‏ بالمقارنة مع ‎ADE‏ الأصليّة 5 الرفيعة قريبة التراؤج 807717 ‎a0‏ رش سلالة ‎SA‏ الرفيعة 807709 (سلالة ‎(Advanta’s proprietary elite‏ و ‎ADE‏ الطافرة ‎IMI-R ADV-‏ المقاومة لل ‎imidazolinone‏ للاختراع الحالي(طفرة ‎(lal‏ في الحقل بثلاثة مبيدات للأعشاب من مجموعة ‎iImazapyr. imazethapyr: imidazolinone EARS‏ © و ‎imazapic‏ . تم اختبار أربع معدّلات مُختلفة ‎JS‏ مبيد من مبيدات الأعشاب ‎XY:‏ كل )ل و ؛ )ل (حيث يكون ‎XY‏ هو معدّل الاستعمال الموصى به) (أنظر جدول ‎١‏ أعلاه): ‎١١ ‏ديسمبر‎ ١ ‏60800/ا و القيام بالزراعة بتاريخ‎ Tuerto ‏إجراء التجارب في الحقل في‎ a Yo ‏تمت مقارنة جميع‎ (V6 ‏يوماً بعد الإنبات (مرحلة‎ ٠١ ‏عند‎ herbicide ‏رشٌ مبيد الأعشاب‎ &
Adie ‏المعالجات مع ضوابطها المقابلة غير المعالجة. و قد تألّف تصميم التجارب من مُخططات‎ ‏إلى ؟ تكرارات (المخطط الرئيسئ: المعالجة بمبيد أعشاب؛ المخطّطات الفرعيّة: السُلالة). وبعد‎ ‏لجميع النباتات في‎ dry matter (DM) ‏الجافَّة‎ sll ‏تمٌ اختبار‎ (Jil ‏من‎ olf ‏مرور عشرة‎ ‎١‏ الأنسجة الهوائيّة. 5 تقييم استجابة مبيد ‎herbicide lie)‏ في صورة نسبة مئويَّة للمادة
اا ‎DM "HI‏ في النسيج الهوائي للضابط المعنئ غير المعالج.لذلك؛ فقد تمٌّ التعبير عن السلالة الحنّاسة لمبيدات الأعشاب أ ‎Jie JS‏ ز في صولة:المادة ‎Lyall /DMij fal‏ = ‎/)٠٠١ * DMij)‏ الماذة الجافة ‎DM‏ للضابط ‎ZDMij dla sil‏ للضابط هي ‎Sle‏ عن متوسّط القيمة لعدد ؟ تجارب لكل معالجة من ‎JS‏ ‏0 سلالة. مثال ؟ : فحص التتابع الوراثي لجين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في نبات 390 رفيعة ‎jai‏ لذ ‎polypeptide‏ المتحوّل للاختراع ‎all‏ المحتوي على نشاط إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ و المقاوم لل ‎imidazolinone‏ . تم إجراء دراسات فحص التتابع الوراثي على نسيج أوراق من السلالة الطافرة ‎ADV-IMI=R‏ (الانتقاء ‎VT11-11331-‏ ‎Y‏ »6ا8) و لسلالة النوع البزي قريبة ‎77١ ZH‏ 0 8. تم عزل و ‎sale)‏ تعليق ‎genomic DNA sia‏ في الما ء عند تركيز نهائي مقداره ‎٠٠١‏ نانوجرام/ميكرولتر . ‎a‏ إجراء فحص التتابع الوراثي لجين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ (إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ ) من السلالة الطافرة ‎ADV-IMI-R‏ .و من سلالة )5,3 الرفيعة ‎AC YYY sorghum‏ و تم تصميم البادئات النوعيّة من أجل التضخيم بواسطة تفاعل البوليميراز التسلسلي ‎polymerase chain‏ ‎reaction (PCR) ١٠‏ القائم على متوالية إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في 53 الرفيعة 0 المفصّح عنها في بنك الجينات ‎GenBank‏ تحت رقم وصول ‎.GM663363.1‏ تم تصميم البادئات بحيث يتم توليد 0 قطاعات من جزيئات د.ن.ءاً المتراكبة (الأمبليكونات) التي ‎Jud‏ ‏المتوالية الكاملة المشفرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ . متواليات البادئات المصمّمة هي كالتالي: ‎CTCGCGCCGCCTCCGAGA | sbacetohydroxyacid [(544 bp)‏ (هوية ‎synthase —F1| amplicon‏ متوالية رقم © ) الأول : ‎p>‏ ‎ATGCGCCGCGGAACCTGT | sbacetohydroxyacid‏ (هوية ‎synthase -1‏ متوالية رقم 6 ) ‎١6010601006100 | sbacetohydroxyacid [(579 bp)‏ (هوية متوالية در
_ اذ ‎yA‏ : ” ‎CATCAAACCGCACACC sbacetohydroxyacid i‏ (هوية ‎synthase —-R2‏ متوالية رقم ‎(A‏ ‎ATGCATGGCACGGTG | sbacetohydroxyacid| (511bp)‏ )452 متوالية ‎synthase —F3| amplicon‏ رقم 4( ‎RAT‏ : - ‎CAGCAGCCGGCAAAC | sbacetohydroxyacid‏ (هوية متوالية ‎synthase -‏ رقم ‎)٠١‏ ‎CACAGGTGTTGGGCA | sbacetohydroxyacid (529 bp)‏ (هوية متوالية ‎synthase —F4 |8006‏ رقم ‎)١‏ ‏الرابع : : ‎CTTGAAAGCCCCACCA sbacetohydroxyacid‏ (هوية ‎synthase —-R4‏ متوالية رقم ‎(VY‏ ‎GGAGCTAGCTATGATCCGAA| sbacetohydroxyacid | (666 bp)‏ ‎synthase —-F5| amplicon‏ )4350 متوالية رقم ‎(VF‏ ‏الخامس : ‎pe‏ ‎435)CAGAACCACTGCATAGCA sbacetohydroxyacid‏ ‎synthase -R5‏ متوالية رقم ‎(VE‏ ‏احتوى خليط ‎polymerase chain reaction (PCR)aus‏ على حجم نهائي ‎Yo oldie‏ ميكرولتر و المكوّنات التالية: ‎XY‏ محلول ‎lai‏ للتفاعل ‎١.7 (Invitrogen)‏ ملليمولار من ‎Y,0 (GE Healthcare)dNTPs‏ ملليمولار من ‎١,7 (Invitrogen) MgCI2‏ ميكرومولار من كلّ بادئ؛ ‎١,5‏ ميكرولتر من ‎Platinum Taq‏ )© وحدات/ميكرولتر) ‎(Invitrogen)‏ و ‎٠٠١ 0‏ نانوجرام من جزئ ‎genomic DNA‏ . ‎cha) &‏ تفاعل ‎polymerase chain reaction (PCR)‏ في ‎System 9700 thermo‏ دورة ‎r‏ ‎eneAmp erkin—Elmer‏ كانت ظروف التضخيم كالتالي: ‎GeneAmp PCR (Perkin-El‏ و يم كالتالو
اج اذ خطوة تمسيخ الابتدائى عند درجة حرارة 94" ‎Asie‏ لمدذّة ‎١‏ دقيقة و ثبعت تلك الخطوة خطوة لعمل التمسيخ الابتدائي عند درجة حرارة 44" مئويَّة لمدّة ‎١‏ دقيقة و ثبعت تلك الخطوة بعدد ‎YO‏ دورة عند درجة حرارة 94" مثويَّة لمدّة £0 ثانية؛ عند درجة حرارة ‎"2١‏ مئويّة 33 £0 ‎(dul‏ و 77" ‎Ade‏ لمدّة ‎Ve‏ ثانية؛ و خطوة تطويل أخيرة عند درجة حرارة 77" مثويّة لمدّة ‎٠١‏ ‏دقائق. ‏5 .الم يتم الحصول على إجراءات تضخيم عندما & استخدام البادئات ‎sbacetohydroxyacid‏ ‎synthase -1‏ و ‎«sbacetohydroxyacid synthase -R1OLD1-R2‏ مع ‎J<‏ من نواتج ‎ADV-IMI-R‏ بالإضافة إلى السلالة ‎Alay)‏ للذرة الرفيعة ‎AVYTY‏ ‏و من أجل التغلّب على هذه المشكلة؛ 5 تصميم بادئين جديدين لتوليد أمبليكون سادس: ‎TCGAGGCTCTTGAGCGCTG sbacetohydroxyacid | amplicon‏ (هوية متوالية المادس ‎synthase —F1-2‏ ارقم ‎(Yo‏ ‎ATGCGCCGCGGAACCTGT | sbacetohydroxyacid (6289‏ (هوية ‎synthase -R1-2 bp)‏ امتوالية رقم ‎(V1‏ ‏تم استخدام نفس ظروف تقنية ‎PCR‏ مثل تلك الموصوفة أعلاه للحصول على أمبليكون سادس. تم فحص اثنين ميكرولتر من ‎OS‏ منتج لجزئ د.ن.اً ناتج من التضخيم بواسطة تقنية ‎PCR‏ ‏بواسطة الإشراد الكهربي في جل أجاروز لتحليل أحجام الأجزاء و تركيز جزئ د.ن.ً المقدّر ‎lad‏ ‏يتعّق بواسم الوزن الجزيئئّ ‎(Invitrogen) Low DNA Mass Ladder‏ 5 تنقية النواتج المتبقّية من تقنية ‎PCR‏ باستخدام ‎(Promega) Wizard® SV gel‏ ر ‎PCR Clean-Up‏ ‎.(Promega)System‏ م فحص التتابع لجزئ ‎ail DNA‏ باستخدام ‎BigDye®‏ ‎Applied Biosystethyl ( Sequencing Systems,,aTerminator +1 yo‏ ‎methanesulfonate‏ ( وفقاً إلى إرشادات الصانع. تمٌّ تجميع ‎CAH‏ فحص التتابع الوراثي لإنزيم ‎Jasidiacetohydroxyacid synthase‏ عليها مع كل أمبليكون باستخدام ‎CAP3‏ ‎(http: //pbil.univ-lyon].fr/cap3.php) Sequence Assembly Program‏ تت محاذاة متواليات جزئ ‎DNA‏ الناتجة الخاصة بجين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ ‎Yo‏ باستخدام النسخة ‎١‏ من البرنامج ‎.(http://www.clustal.org) Clustal W‏
© مثال ¢ وراثة المقاومة للمبيد ‎imazethapyr ofall‏ في مجتمع معزول ‎F2‏ من ‎BN‏ الرفيعة ‎NEA sorghum‏ عن طريق تهجين- سلالة حسّاسة ‎imazethapyr eS pad‏ مع ‎A‏ الطافرة ‎ADV-IMI-R‏ المقاومة له ثم إجراء تهجين مستهدف بين سلالة )5,30 الرفيعة 50577 ‎Advanta proprietary ili)‏ ‎elite‏ الحمّاسة المركّبات 1011082010006 ).و النلالة الطافرة المقاومة ‎Gl‏ ‎imidazolinone ADV-IMI-R‏ (الانتقاء ا109-9754-48-6-9/). تم إجراء التلقيح الذّاتي للنباتات النّاتجة 1 و 25 حصد بذور ‎F2‏ تمّت زراعة البذور 72 في الحقل في ‎Venado‏ ‏0 بتاريخ أكتوبر ٠م‏ رش نباتات ‎١797( F2‏ نباثاً) بالمبيد العشبي ‎imazethapyr‏ ‎Janay (Pivot®, BASF) 0 ٠‏ مقداره ‎3X‏ (حيث يكون ‎IX‏ هو المعدّل الموصى به بواسطة الصانع من أجل الاستخدام التجاري الذي يكون ‎[LHR‏ لكميّة ‎١ “ou‏ ملليلتر ‎a) RE [a Jd.‏ ). و قبل الرشء تم جمع نسيج الأوراق من كل نبتة ‎F2‏ من عدد ‎١77‏ نباتاً من كل من ‎ADC‏ الطافرة-/ا0.م/ +-1//|(الانتقاء 4ا109-9754-48-6-8/)_ و سلالة النوع ‎(ll‏ 90577 لعزل جزئ ‎Alo genomic DNA‏ .تمت إعادة ‎ails‏ في الماء عند تركيز نهائي مقداره ‎V0‏ ١٠٠نانوجرام/ميكرولتر‏ من أجل الاستخدام في تحليل النمط الجينئئ. تمٌ ‎Gi)‏ مبيد الأعشاب 163010606 بعد ‎٠١‏ يوماً من الإنبات (المرحلة 6/). تم تقييم النباتات بعد عشرة أيّام من ‎(Gl‏ و ‎I‏ تصنيف تأثير المبيد العشبي ‎Jah‏ ثلاثة فئات عن طريق الأعراض المقيّمة مرئيًاً وفقاً إلى تسجيل النقاط النّمطيّة الظاهريّة التالية: )= لايوجد ‎ali‏ ‎١‏ " - مصاب بداء الاخضرار ‎=F‏ موث ‎SLi‏ ‎o Jia‏ ابتكار واسمات جزئ د.ن .أ ‎Leg‏ للواسم الجزيئي ‎SNP-sbacetohydroxyacid synthase‏ ادر
— 7 اذ تيز طفرة نُقطيَّة وحيدة في جين الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ التي استبدلت النيوكليوتيدات © ‎A Jae‏ عند موضع النيوكليوتيد +777 (كودون 37( ‎SU ADL‏ الرفيعة الأصليّة قريبة 230 80737 (الحمّاسة لمبيدات الأعشاب) من ‎ADE‏ الطافرةٍ المحدّثة -/ا0م/ -1/اا. و هناك واسم جزيئيئ (مشار إليه في هذه الوثيقة بالترميز الواسم الجزيئي ‎SNP—‏ ‎(sbacetohydroxyacid synthase o‏ & تصميمه باستخدام المجموعة التالية من البادئات ذات التسمية المزدوجة و المجسّات: البادئ/المج | المتوالية التعديل ‎or‏ ‎CCGCGACGTCTTCGC‏ )2 متوالية رقم ‎(VY‏ ‎TGCCTGGTGGATCTCCAT‏ (هوية متوالية رقم عكسى ‎(sal‏ ‎YA )‏ ( ‎5'FAM- )‏ ‎TACCCCGGCGGCACG ١ Cans‏ (هوية متوالية رقم ‎)٠١‏ ‎3'BHQ‏ ‎5'VIC- )‏ مجسٌ ‎TACCCCGGCGGCGCG Y‏ (هوية متوالية رقم ‎)٠١‏ ‎3'BHQ‏ ‏تم تنفيذ التنميط الجيني ‎egenotyping‏ طريق اختبار فحص التفريق ‎allelic‏ بتقنية ‎PCR‏ ‏في الزمن الفعلي باستخدام ‎Applied Biosystethyl ) AB 7500 thermocycler‏ ‎mani .(methanesulfonate , Foster City, CA, US‏ مزيج تفاعل تقنية ‎PCR‏ في ‎Vo‏ حجم نهائي مقداره ‎YO‏ ميكرولتر يتضمّن: ‎YY,0‏ ميكرولتر ‎Perfecta® X qPCR Y‏ ‎vy 0 A ,(Quanta Biosciences, Gaithersburg, MD, US) Supermix‏ ميكرومولار من البادئات (الأماميّة و العكسيَّة), ‎vf‏ ميكرومولار من المجسّات ‎١(‏ و ؟), ‎٠١‏ ميكرولتر من جزئ ‎genomic DNA‏ ماء خالٍ من ‎DNase aj)‏ لتكوين الحجم النهائي. در
‎A —_‏ اذ ظروف التضخيم : دورة تمسيخ واحدة ابتدائيّة عند درجة حرارة 95" مثويّة ‎٠١ 32a‏ دقائق؛ ثبعت بعد ذلك بعدد ‎٠‏ © دورة تمسيخ عند درجة حرارة ‎PAY‏ مثويّة ‎sad‏ 10 ثانية و تهجين/تطويل عند ‎an‏ حرارة 956 ‎١ 3a ise‏ دقيقة. ‎a‏ تحليل نتائج فحص التفريق ‎allelic‏ بعد التضخيم باستخدام نظام برنامج الكشف عن المتواليات ‎Sequence Detection System (SDS) AB‏ © برمجيّات ‎.(Applied Biosystethyl methanesulfonate , Foster City, CA, US) 7500 1.4‏ مثال + ربط المقاومة لمبيدات الأعشاب بالتطفير لإنزيم ‎synthase‏ 010«*/82610/ا8066100 ...في السلالات الطافرة ‎ADV-IMI-R‏ ‎٠‏ ثم تصنيف نسل النباتات ‎F2‏ الفردي المتحصيّل عليه بواسطة تهجين 90523 ‎ADV-IMI-R x‏ حسب الأنماط الظاهريَّة (لا يوجد تلف؛ الإصابة بداء الاخضرار و الموت النباتي) بعد ‎Sl‏ ‏بالمبيد ‎ imazethapyr dal)‏ (باستخدام الطريقة المذكورة في مثال 4) و بعد ذلك تمٌّ تصنيفها حسب التنميط الجيني ‎genotyping‏ باستخدام الواسم الجزيئي ‎SNP-sbacetohydroxyacid‏ ‏086 الذي يكون ‎Ges‏ للطفرة المحدثة في إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ ‎١‏ (باستخدام الطريقة الموصوفة في مثال 0( مثال ‎١‏ ‏رسم الخرائط الجينيَّة لمقاومة مبيدات الأعشاب و الواسم ‎eal‏ للواسم الجزيئي ‎SNP—‏ ‎sbacetohydroxyacid synthase‏ ‎٠‏ ثم رسم الخرائط الجينيّة لمقاومة مبيدات الأعشاب و للواسم ‎ell‏ للواسم الجزيئي ‎SNP-‏ ‎sbacetohydroxyacid synthase‏ .
‎q —_‏ اذ بنا 2 على متوالية إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في الذرة الرفيعة المفصح عنها في بنك الجينات ‎GenBank‏ (برقم وصول ‎13777717,١‏ /ا6), & إجراء تحليل ‎BLAST‏ لمطابقتها مع متواليات جزئ ‎genomic DNA‏ 33 الرفيعة ثنائيّة اللون المودعة في قاعدة بيانات ‎Phytozome‏ : ‎(http://www.phytozome.net/search.php). ©‏ & إجراء التنميط الجيني ‎ile) genotyping‏ أخذ البصمات) من ‎ADL‏ المتحوّلة-/اطم ‎JMI-R‏ السُلالة 90757 قريبة التزاوج باستخدام مجموعة من الواسمات الجزيئيّة من النوع ‎.SSR-‏ تم انتقاء سبعة واسمات 5585 متعدّدة الأشكال الظاهريَّة واقعة على ‎chromosome‏ ‏؛ في جينوم الذرة الرفيعة ثنائيّة اللون ‎Sorghum bicolor genome‏ من أجل إجراء التنميط ‎٠‏ الجيني ‎genotyping‏ : ‎Mace, ES et al., A consensus genetic map of sorghum that integrates‏ ‎multiple component maps and high-throughput Diversity Array Technology‏ ‎(DArT) markers, BMC Plant Biology, 2009, 9: 13; Srinivas, G et al.,‏ ‎Exploration and mapping of microsatellite markers from subtracted drought‏ ‎stress ESTs in Sorghum bicolor (L.), Moench.
Theor.
Appl.
Genet. 2009, ٠‏ ‎Ramu, © et al., In silico mapping of important genes and‏ ;703-717 :118 ‎markers available in the public domain for efficient sorghum breeding, Mol‏ ‎Breeding 2010, 26: 409-418;‏ ‎http: //www.Ibk.ars.usda.gov fpsgd/sorghum/2009SorghumSEAMs_LBKAR‏ ‎)Sxls ٠‏ كانت الواسمات السبعة 5985 المنتقاة من متعدّدة الأشكال الظاهريَّة كالتالي: 4 فى . 1 الأمامى البادئ العكسى البادئ ‎chromosome‏ ¢ 1 1
=« ¢ — ‎AGTCACCCATCGATCAT | AGATCTGGCGGCAACG‏ ‎Xtxp12‏ ) ) (هويّةمتوالية رقم ١؟)‏ © (هويّة متوالية رقم ‎(YY‏ ‎TTAAAGCGATGGGTGTA| 00666‏ ‎p Xtxp177‏ ) (هويّة متوالية رقم ‎(YF‏ ©(هوية متوالية رقم ‎(VE‏ ‎TATAAACATCAGCAGAG | CGATTGGACATAAGTG‏ ‎Xtxp343‏ ) ) ‎TTC‏ (هوية متوالية رقم ‎GTG| (Vo‏ )4358 متوالية رقم ‎(YT‏ ‎ATGCATAAACCACGGCT | TCAGTGATACAGCCGT‏ ‎Dsenhsbm39‏ ) ) 06 هوية متوالية رقم ‎(YY‏ | 610 (هوية متوالية رقم ‎(YA‏ ‏601816116111601 ‎GTGCCGCTTTGCTCGC‏ ) ‎TCCCTTCTC ) Xgap010‏ (هوية متوالية رقم ‎A‏ (هويَّة متوالية رقم ‎(V3‏ ‏ط ‎GCCTTTTTCCGTCTTCGA| GTGAAGCATCCCAACC‏ ‎Xsbarslbk4.50‏ ) ) 18 01 (هوية متوالية رقم ‎(VY‏ | © (هوية متوالية رقم ‎(YY‏ ‎ACACCTCCTCTTGGTGG| TCGGGTATTAGCCCTT‏ ‎Xsbarslb k4.13‏ ) _ ‎TGTG‏ (هوية متوالية رقم ‎La)ATG | (YY‏ متوالية رقم ‎(TE‏ ‎Ja sale) cuss‏ أجزاء تحليل ‎PCR‏ النّاتجة من ‎JS‏ واسم من الواسمات الجزئئيّة المختبرة ‎SSRs‏ ‏بواسطة تقنية الإشراد الكهربي الشعري باستخدام ‎automated sequencer 813130*١‏ ‎Applied Biosystethyl methanesulfonate)‏ ). تم إجراء التنميط الجيني ‎genotyping‏ ‏لهذه الواسمات الجزيئيّة السّبعة ‎SSRs‏ في عدد ‎١77‏ من أفراد النسل النباتي ‎F2‏ النّاتج من © التهجين 90523 ‎ADV-IMI-R x‏ بالإضافة إلى ذلك؛ 25 تحليل هذا النسل النباتي ‎F2‏ نفسه الذي عدده ‎١77‏ نباثاً للكشف وجود عن الواسم ‎SNP-sbacetohydroxyacid synthase‏ النوعئ للطفرة ‎Basal‏ في الجين در
_ \ —_ ‏تم تصنيف النتائج وفقاً إلى تقييم النّمط‎ .acetohydroxyacid synthase ‏بإنزيم‎ Jalil ‏و تم تحليلها‎ F2 ‏على نباتات النسل‎ imazethapyr ‏عند استعمال المبيد العشبي‎ (gala ‏باستخدام البرنامج الحاسوبي‎
Van Ooijen, JW and Voorips, RE, JoinMap 3.0 Software for the (JoinMap calculation of genetic linkage maps, Plant Research International, 2001, ©
Wageningen, The Netherlands). ‏قائمة المتواليات‎ <160> 4 <170> ‏ملامعتوط‎ version 5 <210> 1 ©. <211> 2001 <212> DNA <213> Sorghum bicolor <400> 1 tcgaggctct tgagcgcetge ggcgtccgeg acgtcttcge ctacccecgge ggcacgtcca ١٠ 60 tggagatcca ccaggcactc acccgttccc ccgtcatcge caaccacctc ttccgccacg 120 agcaagggga ggccttcgcc gcctetgget tcgegegcete ctcgggecge gtcggegtet 180 ٠
EAT
_ \ —_ gcgtcgecac ctcecggecce ggegecacca acctagtctec cgegetcgec gacgegcetge 240 tcgactccgt ccccatggtc gccatcacgg gacaggttcc 0000000310 attggcaccg 300 acgccttcca ggagacgccc atcgtcgagg tcacccgctc catcaccaaa cataactacc ه٠‎ 360 tggtcctega cgtcgacgac atcccecgeg tegtgcagga ggcttictte ctegectect 420 ccggtcgece gggaccggtg cttgtcgaca tccccaagga catccagcag cagatggecg 480 tgccggtctg ggacacgccc atgagtctge ctgggtacat tgcgcgcectt cccaagectc ٠ 540 ctgcgactga attgcttgag caggtgctgc gtcttgttgg tgaatcaagg cgccctgttc 600 tttatgttgg tggtggctge gcagceatctg gcgaggagtt gcgcecgcettt gtggagatga 660 ctggaatccc agtcacaact actcttatgg gccttggcaa tttccctgge gacgacccac 720 ١٠ tgtctctgcg catgcttggt atgcatggeca cggtgtatgc aaattatgca gtggataagg 780 cggatctgtt gcttgcattt ggtgtgcggt ttgatgatcg tgtgacaggg aagattgagg 840 cttttgcaag cagggctaag attgtgcaca ttgatattga tcccgctgag attggcaaga 900 acaagcagcc acatgtgtcc atctgtgcag acgttaagct tgctttgcag ggcatgaatg 960 ٠
EAT
_ ".- ctcttctgga aggaagcaca tcaaagaaga gctttgactt tggctcatgg caagctgagt 1020 tggatcagca gaagagagag ttcccccttg ggtataaaac ttttgatgac gagatccagc 1080 cacaatatgc tattcaggtt cttgatgagc tgacaaaagg ggaggccatc attgccacag ٠ 1140 gtgttgggca gcaccagatg tgggcggcac agtactacac ttacaagcgg ccaaggcagt 1200 ggttgtcttc agctggtctt ggggctatgg gatttggttt gccggcetget getggegetg 1260 ctgtggccaa cccaggtatc actgttgttg acatcgacgg agatggtagc ttcctcatga ٠ 1320 acattcagga gctagctatg atccgaattg agaacctccc agtgaaggtc tttgtgctaa 1380 acaaccagca cctggggatg gtggtgcagt gggaggacag gttctataag gccaatagag 1440 ١٠ cacacacata cttgggaaac ccagagaatg aaagtgagat atatccagat ttcgtgacaa 1500 ttgccaaagg gttcaacatt ccagcagtcc gtgtgacaaa gaagagcgaa gtccatgcag 1560 caatcaagaa gatgcttgag actccagggc catacctctt ggatataatc gtcccgcacc ٠ 1620 aggagcatgt gttgcctatg atccctagtg gtggggcttt caaggatatg atcctggatg 1680
EAT
م gtgatggcag gactgtgtat tgatctaaat ttcagcatgc acatctccct gectttettt 170 gacatgcata tgagctggta caagggtgat gtgttattta tgtgatgttc tcctgtgttc 1800 tatctttttg taagccgtca gcetatctata gtgtgcttgt ttgatgtact ctgttatggt 1860 aatcttaagt agtttcctac cttgtagtgg tgtagtctgt tgtttcgtge tggcatatct 190 gtcatcagag gtcatgtaag tgcctittgc tacagataaa taaggaaata agcattgcta ه٠‎ 1980 tgcagtggtt ctgtacgect > 2001 <210> 2 <211> 641 <212> PRT ٠ <213> Sorghum bicolor <400> 2
Met Ala Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Leu Ala Gly Ala Thr 1 5 10 15
Thr Ala Ala Pro Lys Ala Arg Arg Arg Ala His Leu Leu Ala Ala Arg yo
Arg Ala Leu Ala Ala Pro lle Arg Cys Ser Ala Ala Pro Pro Ala Thr
Leu Thr Val Thr Ala Pro Pro Ala Thr Pro Leu Arg Pro Trp Gly Pro
EATS
هم 60 55 50 ‎Thr Asp Pro Arg Lys Gly Ala Asp lle Leu Val Glu Ala Leu Glu Arg‏ 80 75 70 65 ‎Cys Gly Val Arg Asp Val Phe Ala Tyr Pro Gly Gly Thr Ser Met Glu‏ ‎o‏ 95 90 85 ‎lle His GIn Ala Leu Thr Arg Ser Pro Val lle Ala Asn His Leu Phe‏ 110 105 100 ‎Arg His Glu 60 Gly Glu Ala Phe Ala Ala Ser Gly Phe Ala Arg Ser‏ 125 120 115 ‎Ser Gly Arg Val Gly Val Cys Val Ala Thr Ser Gly Pro Gly Ala Thr ٠٠‏ 140 135 130 ‎Asn Leu Val Ser Ala Leu Ala Asp Ala Leu Leu Asp Ser Val Pro Met‏ 160 155 150 145 ‎Val Ala lle Thr Gly Gln Val Pro Arg Arg Met lle Gly Thr Asp Ala‏ ‎yo‏ 175 170 165 ‎Phe GIn Glu Thr Pro lle Val Glu Val Thr Arg Ser lle Thr Lys His‏ 190 185 180 ‎Asn Tyr Leu Val Leu Asp Val Asp Asp lle Pro Arg Val Val Gin Glu‏ 205 200 195 ‎EATS‏
PI
Ala Phe Phe Leu Ala Ser Ser Gly Arg Pro Gly Pro Val Leu Val Asp 210 215 220 lle Pro Lys Asp lle Gln Gin Glin Met Ala Val Pro Val Trp Asp Thr 225 230 235 240
Pro Met Ser Leu Pro Gly Tyr lle Ala Arg Leu Pro Lys Pro Pro Ala ° 245 250 255
Thr Glu Leu Leu Glu GIn Val Leu Arg Leu Val Gly Glu Ser Arg Arg 260 265 2770
Pro Val Leu Tyr Val Gly Gly Gly Cys Ala Ala Ser Gly Glu Glu Leu 275 280 285 ٠١
Arg Arg Phe Val Glu Met Thr Gly lle Pro Val Thr Thr Thr Leu Met 290 295 300
Gly Leu Gly Asn Phe Pro Gly Asp Asp Pro Leu Ser Leu Arg Met Leu 305 310 315 320
Gly Met His Gly Thr Val Tyr Ala Asn Tyr Ala Val Asp Lys Ala Asp yo 325 330 335
Leu Leu Leu Ala Phe Gly Val Arg Phe Asp Asp Arg Val Thr Gly Lys 340 345 350 lle Glu Ala Phe Ala Ser Arg Ala Lys lle Val His lle Asp lle Asp
EATS
- 355 360 365
Pro Ala Glu lle Gly Lys Asn Lys GIn Pro His Val Ser lle Cys Ala 370 375 380
Asp Val Lys Leu Ala Leu GIn Gly Met Asn Ala Leu Leu Glu Gly Ser 385 390 395 400 oo
Thr Ser Lys Lys Ser Phe Asp Phe Gly Ser Trp Gln Ala Glu Leu Asp 405 410 415
GIn Lys Arg Glu Phe Pro Leu Gly Tyr Lys Thr Phe Asp Asp Glu 420 425 430 lle Gln Pro Gln Tyr Ala lle Gln Val Leu Asp Glu Leu Thr Lys Gly ٠٠ 435 440 445
Glu Ala lle lle Ala Thr Gly Val Gly GIn His Gin Met Trp Ala Ala 450 455 460
GIn Tyr Tyr Thr Tyr Lys Arg Pro Arg 60 Trp Leu Ser Ser Ala Gly 465 470 475 480 Yo
Leu Gly Ala Met Gly Phe Gly Leu Pro Ala Ala Ala Gly Ala Ala Val 485 490 495
Ala Asn Pro Gly lle Thr Val Val Asp lle Asp Gly Asp Gly Ser Phe 500 505 510
EATS
A
Leu Met Asn lle Gln Glu Leu Ala Met lle Arg lle Glu Asn Leu Pro 515 520 525
Val Lys Val Phe Val Leu Asn Asn Gln His Leu Gly Met Val Val GIn 530 535 540
Trp Glu Asp Arg Phe Tyr Lys Ala Asn Arg Ala His Thr Tyr Leu Gly ° 545 550 555 560
Asn Pro Glu Asn Glu Ser Glu lle Tyr Pro Asp Phe Val Thr lle Ala 565 570 575
Lys Gly Phe Asn lle Pro Ala Val Arg Val Thr Lys Lys Ser Glu Val 580 585 590 ٠١
His Ala Ala lle Lys Lys Met Leu Glu Thr Pro Gly Pro Tyr Leu Leu 595 600 605
Asp lle lle Val Pro His Gln Glu His Val Leu Pro Met lle Pro Ser 610 615 620
Gly Gly Ala Phe Lys Asp Met lle Leu Asp Gly Asp Gly Arg Thr Val yo 625 630 635 640
Tyr <210> 3 <211> 1
EATS
Pr <212> PRT <213> Sorghum bicolor <400> 3
Met Ala Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Leu Ala Gly Ala Thr 1 5 10 15 o
Thr Ala Ala Pro Lys Ala Arg Arg Arg Ala His Leu Leu Ala Ala Arg
Arg Ala Leu Ala Ala Pro lle Arg Cys Ser Ala Ala Pro Pro Ala Thr
Leu Thr Val Thr Ala Pro Pro Ala Thr Pro Leu Arg Pro Trp Gly Pro ٠٠ 60
Thr Asp Pro Arg Lys Gly Ala Asp lle Leu Val Glu Ala Leu Glu Arg 65 70 75 80
Cys Gly Val Arg Asp Val Phe Ala Tyr Pro Gly Gly Ala Ser Met Glu 85 90 95 yo lle His GIn Ala Leu Thr Arg Ser Pro Val lle Ala Asn His Leu Phe 100 105 110
Arg His Glu 60 Gly Glu Ala Phe Ala Ala Ser Gly Phe Ala Arg Ser 115 120 125
EATS
—
Ser Gly Arg Val Gly Val Cys Val Ala Thr Ser Gly Pro Gly Ala Thr 130 135 140
Asn Leu Val Ser Ala Leu Ala Asp Ala Leu Leu Asp Ser Val Pro Met 145 150 155 160
Val Ala lle Thr Gly Gln Val Pro Arg Arg Met lle Gly Thr Asp Ala ° 165 170 175
Phe GIn Glu Thr Pro lle Val Glu Val Thr Arg Ser lle Thr Lys His 180 185 190
Asn Tyr Leu Val Leu Asp Val Asp Asp lle Pro Arg Val Val Gin Glu 195 200 205 ٠١
Ala Phe Phe Leu Ala Ser Ser Gly Arg Pro Gly Pro Val Leu Val Asp 210 215 220 lle Pro Lys Asp lle Gln Gin Glin Met Ala Val Pro Val Trp Asp Thr 225 230 235 240
Pro Met Ser Leu Pro Gly Tyr lle Ala Arg Leu Pro Lys Pro Pro Ala yo 245 250 255
Thr Glu Leu Leu Glu GIn Val Leu Arg Leu Val Gly Glu Ser Arg Arg 260 265 2770
Pro Val Leu Tyr Val Gly Gly Gly Cys Ala Ala Ser Gly Glu Glu Leu
EATS
-ه١-‎ 275 280 285
Arg Arg Phe Val Glu Met Thr Gly lle Pro Val Thr Thr Thr Leu Met 290 295 300
Gly Leu Gly Asn Phe Pro Gly Asp Asp Pro Leu Ser Leu Arg Met Leu 305 310 315 320 ه‎
Gly Met His Gly Thr Val Tyr Ala Asn Tyr Ala Val Asp Lys Ala Asp 325 330 335
Leu Leu Leu Ala Phe Gly Val Arg Phe Asp Asp Arg Val Thr Gly Lys 340 345 350 lle Glu Ala Phe Ala Ser Arg Ala Lys lle Val His lle Asp lle Asp ٠٠ 355 360 365
Pro Ala Glu lle Gly Lys Asn Lys GIn Pro His Val Ser lle Cys Ala 370 375 380
Asp Val Lys Leu Ala Leu GIn Gly Met Asn Ala Leu Leu Glu Gly Ser 385 390 395 400 | ٠
Thr Ser Lys Lys Ser Phe Asp Phe Gly Ser Trp Gln Ala Glu Leu Asp 405 410 415
GIn Lys Arg Glu Phe Pro Leu Gly Tyr Lys Thr Phe Asp Asp Glu 420 425 430
EATS
هن ‎lle Gln Pro Gln Tyr Ala lle Gln Val Leu Asp Glu Leu Thr Lys Gly‏ 445 440 435 ‎Glu Ala lle lle Ala Thr Gly Val Gly GIn His Gin Met Trp Ala Ala‏ 460 455 450
GIn Tyr Tyr Thr Tyr Lys Arg Pro Arg 60 Trp Leu Ser Ser Ala Gly ° 465 470 475 480
Leu Gly Ala Met Gly Phe Gly Leu Pro Ala Ala Ala Gly Ala Ala Val 485 490 495
Ala Asn Pro Gly lle Thr Val Val Asp lle Asp Gly Asp Gly Ser Phe 500 505 510 ٠١
Leu Met Asn lle Gln Glu Leu Ala Met lle Arg lle Glu Asn Leu Pro 515 520 525
Val Lys Val Phe Val Leu Asn Asn Gln His Leu Gly Met Val Val GIn 530 535 540
Trp Glu Asp Arg Phe Tyr Lys Ala Asn Arg Ala His Thr Tyr Leu Gly yo 545 550 555 560
Asn Pro Glu Asn Glu Ser Glu lle Tyr Pro Asp Phe Val Thr lle Ala 565 570 575
Lys Gly Phe Asn lle Pro Ala Val Arg Val Thr Lys Lys Ser Glu Val
EATS
ارج 590 585 580 ‎His Ala Ala lle Lys Lys Met Leu Glu Thr Pro Gly Pro Tyr Leu Leu‏ 605 600 595 ‎Asp lle lle Val Pro His Gln Glu His Val Leu Pro Met lle Pro Ser‏ ‎o‏ 620 615 610 ‎Gly Gly Ala Phe Lys Asp Met lle Leu Asp Gly Asp Gly Arg Thr Val‏ 640 635 630 625 ‎Tyr‏ ‏4 >210< ‎٠‏ 2274 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Sorghum bicolor‏ >213< 4 >400< ‎gtgcccecge cccaaaccet cgegecgect ccgagacagce cgccgcaacc atggccacca‏ ‎١٠‏ 60 ‎ccgccgecge cgetgecgece gegetagecg gegecactac cgetgecgece aaggcgaggce‏ 120 ‎gccgggcgca cctectggee gcacggegeg cectecgecge geccatcagg tgectcagegg‏ 180 ‎EATS‏
— جم cgccacccgce cacgctgacg gtgacggctc cccecggecac cecegeteegg cecgtggggec 240 ccaccgatcc ccgcaagggc gccgacatcce tcgtcgaggce tcttgagcge tgeggcegtece 300 gcgacgtctt cgcctaccce ggcggcegegt ccatggagat ccaccaggcea ctcaccegtt ‏ه‎ 360 0000901031 cgeccaaccac ctcttccgecc acgagcaagg ggaggccttc gecgcectcetg 420 gcttcgegceg ctectcggge cgegteggeg tetgegtcge cacctcecgge ceccggegeca 480 0٠ ccaacctagt ctccgcgcetc gccgacgcege tgctcgactc cgtccccatg gtcgccatca 540 cgggacaggt tccgecggegce atgattggca ccgacgcectt ccaggagacg cccatcg ‏وما‎ 600 aggtcacccg ctccatcacc aaacataact acctggtcct cgacgtcgac gacatcccce ١٠ 660 gcgtcgtgca ggaggcttte ttcctegect ceteecggteg ccecgggacceg gtgettgteg 720 acatccccaa ggacatccag cagcagatgg ccgtgeccggt ctgggacacg cccatgagtc 780 tgcctgggta cattgcgcge cttcccaage ctectgecgac tgaattgett gagcaggtge ٠ 840 tgcgtcttgt tggtgaatca aggcgecctg ttetttatgt tggtggtggce tgcgcagceat 900
EAT ctggcgagga gttgcgccge tttgtggaga tgactggaat cccagtcaca actactctta 960 tgggccttgg caatttccct ggcgacgacc cactgtctct gcgcatgctt ggtatgcatg 1020 gcacggtgta tgcaaattat gcagtggata aggcggatct gttgcttgca tttggtgtgce 1080 ggtttgatga tcgtgtgaca gggaagattg aggcttttgc aagcagggct aagattgtgc ه٠‎ 1140 acattgatat tgatcccgct gagattggca agaacaagca gccacatgtg tccatctgtg 1200 cagacgttaa gcttgctttg cagggcatga atgctcttct ggaaggaagc acatcaaaga 1260 agagctttga ctttggctca tggcaagctg agttggatca gcagaagaga gagttcccce ٠ 1320 ttgggtataa aacttttgat gacgagatcc agccacaata tgctattcag gttcttgatg 1380 agctgacaaa aggggaggcc atcattgcca caggtgttgg gcagcaccag atgtgggcgg 1440 cacagtacta cacttacaag cggccaaggc agtggttgtc ttcagctggt cttggggcta Vo 1500 tgggatttgg tttgccggcet getgetggeg ctgctgtgge caacccaggt atcactgttg 1560 ttgacatcga cggagatggt agcttcctca tgaacattca ggagctagct atgatccgaa 1620 ttgagaacct cccagtgaag gtctttgtgc taaacaacca gcacctgggg atggtggtge ٠ 1680
EAT
-1ه- ‎agtgggagga caggttctat aaggccaata gagcacacac atacttggga aacccagaga‏ 1740 ‎atgaaagtga gatatatcca gatttcgtga caattgccaa agggttcaac attccagcag‏ 1800 ٠ه ‎tccgtgtgac aaagaagagc gaagtccatg cagcaatcaa gaagatgctt gagactccag‏ 1860 ‎ggccatacct cttggatata atcgtcccgc accaggagca tgtgttgcct atgatcccta‏ 1920 ‎gtgatggggc tttcaaggat atgatcctgg atggtgatgg caggactgtg tattgatcta 1980‏ ‎aatttcagca tgcacatctc cctgcctttc tttgacatgc atatgagcetg gtacaagggt 2040 0٠‏ ‎gatgtgttat ttatgtgatg ttctcctgtg ttctatcttt ttgtaagccg tcagctatct 2100‏ ‎atagtgtgct tgtttgatgt actctgttat ggtaatctta agtagtttcc taccttgtag 2160‏ ‎tggtgtagtc tgttgtttcg tgctggcata tctgtcatca gaggtcatgt aagtgecttt 2220‏ ‎tgctacagat aaataaggaa ataagcattg ctatgcagtg gttctgtacg cctc 2274‏ ‎١٠‏ 5 >210< 18 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F1 amplicon 1 ٠‏ >223<
—oy— <400> 5 ctcgcgcecgce ctccgaga 18 <210> 6 <211> 18 <212> DNA oo <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -41 amplicon 1 <400> 6 atgcgccgceg gaacctgt 18 ٠ <210> 7 <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ١٠ <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F2 amplicon 2 <400> 7 tgctcgactc cgtcc 15 <210> 8
EATS
CoA <211> 6 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -R2 amplicon 2 © <400> 8 catcaaaccg cacacc 16 <210> 9 <211> 5 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F3 amplicon 3 <400> 9 atgcatggca cggtg 15 ١٠ <210> 10 <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence ‏ادر‎
<220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -R3 amplicon 3 <400> 10 cagcagccgg caaac 15
<210> 11 »o <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
<223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F4 amplicon 4 ٠ <400> 11 cacaggtgtt gggca 15 <210> 12 <211> 6
<212> DNA ١٠١ <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE —-R4 amplicon 4 <400> 12
ادر qm cttgaaagcc ccacca 16 <210> 13 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence © <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F5 amplicon 5 <400> 13 ggagctagct atgatccgaa 20 <210> 14 ٠ <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -RS5 amplicon 5 ١٠ <400> 14 cagaaccact gcatagca 18 <210> 15 <211> 19
EATS
Ny <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -F1-2 amplicon 6 <400> 15 ه٠‎ tcgaggctct tgagcgcetg 19 <210> 16 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> SbACETOHYDROXYACID SYNTHASE -41-2 amplicon 6 <400> 16 atgcgccgceg gaacctgt 18 <210> 17 ١ <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
EATS
‎Cebador hacia delante‏ >223< 17 >400< ‎ccgcgacgtc ttcge 15‏ 18 >210< هه 18 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Cebador reverso‏ >223< ‎٠‏ 18 >400< ‎tgcctggtgg atctccat 18‏ 19 >210< >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence ١٠١‏ >213< >220< ‎Sonda 1‏ >223< 19 >400< ‎taccccggeg gcacg 5‏ ادر yy <210> 20 <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ‏هه‎ ‎<223> Sonda 2 <400> 20 taccccggeg gegeg 15 <210> 21 <211> 16 ٠ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Xtxpl2 F <400> 21 ١ agatctggcg gcaacg 16 <210> 22 <211> 18 <212> DNA
EAT
<213> Artificial Sequence <220> <223> Xtxpl2 R <400> 22 agtcacccat cgatcatc 18 © <210> 23 <211> 5 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> 3000177 + <400> 3 gccggttgtg acttg 5 <210> 24 <211> 18 ١٠ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Xtxpl77R ‏ادر‎
م 24 >400< ‎ttaaagcgat gggtgtag 8‏ 25 >210< 19 >211< ‎DNA ٠‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Xtxp343 F‏ >223< 25 >400< ‎cgattggaca taagtgttc 19 ٠‏ 26 >210< >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< ‎٠‏ >220< ‎Xtxp343 R‏ >223< 26 >400< ‎tataaacatc agcagaggtg 20‏ 27 >210< ‎EAT‏
-؟؟- <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Dsenhsbm39 F ه٠‎ <400> 27 tcagtgatac agccgtccag 20 <210> 28 <211> 20 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Dsenhsbm39 R <400> 28 atgcataaac cacggctgtc 20 ١٠ <210> 29 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial Sequence
EATS
<220> <223> Xgap010 F <400> 29 gtgccgcttt getcgea 17 <210> 30 ه٠‎ <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> XgapOlOR 0٠ <400> 30 tgctatgttg tttgcttctc ccttctc 27 <210> 31 <211> 20 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Xsbarslbk4.50 F <400> 31 ‏ادر‎
-م- ‎gtgaagcatc ccaaccctta 20‏ 32 >210< 19 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence ©‏ >213< >220< ‎Xsbarslbk4.50 R‏ >223< 32 >400< ‎gcctttttce gtcttcgag 9‏ ‎٠‏ 33 >210< >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Xsbarslbk4.13 F ١٠‏ >223< 33 >400< ‎tcgggtatta gecctttgty 0‏ 34 >210< 20 >211< ادر
‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Xsbarslbk4.13 R‏ >223< هه 34 >400< ‎acacctcctc ttggtggatg 20‏ ‎EATS‏

Claims (1)

  1. Vm ‏عناصر الحماية‎ ‏المذكور‎ polynucleotide ‏حيث فيه‎ «JY ‏واحد على‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -١ ‏إلى الحمض الأميني‎ alanine ‏على استبدال من الحمض الأميني‎ sink polypeptide ad ‏في الذرة الرفيعة‎ large subunit ‏من الوحدة الفرعيّة الكبيرة‎ AY ‏الموضع‎ die threonine polynucleotide ‏؛ حيث يمنح‎ acetohydroxyacid synthase ‏لبروتين إنزيم‎ 0 Sal ‏مقاومة زائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب عند مقارنته مع النوع البرّي لنباتات‎ ado . sorghum ‏الرفيعة‎ ‏حيث فيه يتم انتقاء مبيد‎ ٠ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -" . sulfonylurea ; imidazolinone ‏من مجموعة المركّبات المؤلّفة من‎ herbicide ‏الأعشاب‎ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم ؛ حيث فيه 2 انتقاء مبيد‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -" ‏من مجموعة المركّبات المؤلفة من‎ imidazolinone ‏من نوع‎ herbicide ‏الأعشاب‎ ٠ . ‏و6ا03280‎ ١ imazapyr:. imazethapyr ‏حيث يشتمل بولي نكليوتيد‎ ٠ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ —¢ .١ ‏على المتوالية ذات الهويّة رقم‎ polynucleotide polypeptide ‏حيث‎ ٠ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي تكليوتيد‎ —o .١ ‏رقم‎ Lael ‏المشقّر يشتمل على المتوالية ذات‎ ٠ ‏الذي يتضمّن طفرة في جين‎ ١١ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -7 ‏في المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية‎ ome ‏كما هو‎ acetohydroxyacid synthase ‏إنزيم‎ ‎Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria ‏البحرية والغذائية‎ « YAY ‏المرمز لها بالرقم‎ (NCIMB) ‏يشتمل نبات 50 رفيعة‎ Cua) ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -#7 ٠ ‏الوراثيّة المسؤولة عن المقاومة الزائدة‎ lial) ‏على‎ polynucleotide ‏يوجد فيه بولي تكليوتيد‎ ‏المقاومة التي تم بيانها‎ Jie imidazolinone ‏لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب من مجموعة‎ Natianal collections ‏بالنّسبة لل المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية » البحرية والغذائية‎ 41716 ‏المرمز لها بالرقم‎ of industraol, Marine and food Bacteria (NCIMB) ‏در‎
    “vy ‏حيث يوجد‎ YT ‏من عناصر الحماية‎ pale GY la polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ —A ‏المذكور في نبات 35 رفيعة ويمنح مقاومة زائدة لواحد أو أكثر‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ ‏المقاومة الوراتيّة‎ dala ‏من مبيدات الأعشاب مما يجعل نبات 5,3 الرفيعة مفيداً من أجل إدخال‎ . sorghum ‏نبات آخر من 5,31 الرفيعة‎ Jah ‏إدخال الجينات بالتهجين‎ Goh ‏عن‎ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم ٠؛ حيث يكون النبات الذي‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -+ 0 . transgenic Gils Jans ‏المذكور‎ polynucleotide ‏يحتوي على‎ ‏النّبات الذي يحتوي‎ Gun) ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -٠ . 100-13750606 Gis Jas ‏المذكور يكون غير‎ polynucleotide ‏على البولي نكليوتيد‎ ‏الذي يوجد في جينوم‎ ٠١-١ ‏لأحد عناصر الحماية‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -١١ ‏رفيعة مقاوم لمبيدات الأعشاب؛ وهو النبات الذي يتضمّن الصنّفات الوراثيّة المسؤولة عن‎ pics ٠ Natianal ‏بالمجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية + البحرية والغذائية‎ Lal ‏المقاومة‎ ‏المرمز لها بالرقم‎ collections of industraol, Marine and food Bacteria (NCIMB) ‏الذي يحتوي على البولي تكليوتيد‎ sorghum ‏حيث يثمٌ انتقاء نبات 53 الرفيعة‎ ٠ ‏نبات في المجموعات الوطنية للبكتريا‎ Jie ‏من الالمجموعة المؤلفتمن نبات‎ polynucleotide Natianal collections of industraol, Marine and food ‏الصناعية » البحرية والغذائية‎ ١٠ ‏أو نسل نبات في المجموعة‎ CEVA. ‏.لها بالرقم‎ ll Bacteria (NCIMB) ‏أو نبات طافر في المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ البحرية والغذائية‎ "00 ‏المرمز‎ Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria (NCIMB) ‏لها بالرقم 51789768 و نسل من نبات طافر في المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ البحرية‎ Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria ‏والغذائية‎ ٠ YAY ‏المرمز لها بالرقم‎ (NCIMB) ‏حيث مبيد الأعشاب‎ ١ ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏تكليوتيد‎ dg —VY . imidazolinone ‏ينتمي إلى مجموعة مُركّبات‎ herbicide ‏الذي يحتوي‎ GLA ‏حيث‎ OY) ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏بولي نكليوتيد‎ -٠ . transgenic ys Jas ‏يكون‎ <adl polynucleotide ‏على البولي نكليوتيد‎ Yo ‏در‎
    ‏المذكور الذي‎ lil ‏حيث‎ VY) ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏بولي نكليوتيد‎ -٠6 000- Gl Jai ‏يكون غير‎ LS polynucleotide ‏يحتوي على البولي نكليوتيد‎ . transgenic polynucleotide ‏واحد على الأقل حيث البولي نكليوتيد‎ polynucleotide ‏بولي نكليوتيد‎ - ‏إلى الحمض‎ alanine ‏على استبدال من الحمض الأميني‎ Sink polypeptide ad ‏المذكور‎ ‏لبروتين‎ large subunit ةريبكلا‎ Lop ‏عند الموضع 47 من الوحدة‎ threonine ‏الأميني‎ ‏ويكون موجود في‎ sorghum ‏في الذرة الرفيعة‎ acetohydroxyacid synthase ‏إنزيم‎
    ‎. sorghum ‏بذرة الذرة الرفيعة‎ 006 ‏حيث تلد بذرة تحتوي‎ (V0 ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ - ‏يتميِّز بالمقاومة الزائدة لواحد أو أكثر من مبيدات‎ Ble polynucleotide ‏على البولي تكليوتيد‎ ٠ ‏بالمقارنة مع النوع البزي لنباتات ,3 الرفيعة‎ imidazolinone ‏الأعشاب من مجموعة مُركّبات‎ . sorghum ‏حيث البولي نكليوتيد‎ Vo ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ -١١7 acetohydroxyacid synthase ‏المذكوريتشتمل على طفرة في جين الإنزيم‎ polynucleotide ‏في البذرة المودعة في المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ البحرية والغذائية‎ cme ‏كما هو‎ Vo ‏المرمز‎ Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria (NCIMB) AVAV ‏لها بالرقم‎ ‏طريقة من أجل تمييز نبات مقاوم لمبيدات الأعشاب؛ تشتمل الطريقة على:‎ =) A ‏مأخوذ من نبات )5 رفيعة؛‎ nucleic acid ‏أ) توفير عيِّنة حمض نووي‎ ie ‏الموجود في‎ acetohydroxyacid synthase ‏تضخيم منطقة مناظرة لجين الإنزيم‎ (0 Yo ‏الحمض النووي المذكور المأخوذ من نبات 50 رفيعة؛‎ ‏بُناءَ على وجود طفرة واحدة‎ herbicide-resistant ‏ج) تمييز نبات مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ ‏في عيّنة الحمض النووي المضخّم» حيث تمنح الطفرة المذكورة مقاومة النبات لمبيدات‎ JAY) ‏على‎
    ‎. imidazolinone ic seas ‏الأعشاب من‎ ‏الحمض النووي على طفرة واحدة‎ de ‏حيث تشتمل‎ OA ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ V4 Yo ‏الموجودة في نبات المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ البحرية‎ sald Jie ‏على الأقنّ‎ ‏در‎
    اللا والغذائية ‎Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria‏ ‎(NCIMB)‏ المرمز لها بالرقم 617176 . ‎—Y‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎VA‏ حيث تشتمل الطفرة الواحدة المذكورة على ‎JR‏ على استبدال ‎Ala93Thr‏ في ‎polypeptide‏ المشفرء حيث ‎polypeptide‏ المذكور يعرض نشاط © إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ . ‎-7١‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎VA‏ حيث ‎de‏ الحمض النووي تشتمل على المتوالية ذات الهويّة رقم ‎.١‏ ‏"؟- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎us «Yo‏ يشتمل ‎polypeptide‏ على المتوالية ذات الهويّة رقم 7. ‎YY)‏ - الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎VA‏ حيث يكون النّبات أحادي الفلقة ‎monocot‏ . ‎—Y‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎VA‏ حيث يكون النّبات ثنائي الفلقة ‎dicot‏ ‎Yo‏ — الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎VA‏ حيث يكون ‎lil‏ نبات ‎transgenic Gl; Jak‏ - الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎OA‏ حيث النّبات يكون نبات غير ‎Jas‏ ورااً -000 ‎transgenic‏ . ‎-YY ١‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎OVA‏ حيث يتم انتقاء مبيد الأعشاب ‎herbicide‏ من مجموعة مُركّبات ‎imidazolinone‏ ومجموعة مركّبات ‎sulfonylurea‏ . 8- طريقة لمكافحة الأعشاب ‎Shall‏ الموجودة بالقرب من نباتات المحاصيل؛ التي تتضمّن استعمال كميَّة فعّالة من مبيد أعشاب من مجموعة مُركّبات ‎imidazolinone‏ أو مُركّبات 18 على الحشائش الضارة و نباتات المحاصيل؛ ؛ حيث يتم انتقاء نبات المحاصيل ‎٠‏ من المجموعة ‎Adiga)‏ من: 0 نبات ‎SA‏ الرفيعة ‎sorghum‏ المشتمل في ‎Jalal) genome‏ به على بولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ واحد على ‎«JN‏ حيث البولي نكليوتيد ‎ai dl polynucleotide‏ ‎polypeptide‏ مُحتو على استبدال من الحمض الأميني 6 إلى الحمض الأميني ‎threonine‏ عند الموضع ‎AV‏ من بروتين إنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ في ,5 ‎Yo‏ الرفيعة ‎sorghum‏ ؛ و حيث يعرض النّبات المذكور مقاومة زائدة لواحد أو أكثر من مبيدات ادر
    و١‏ الأعشاب من مجموعة مُركّبات0008ا10110820 أو مركّبات ‎sulfonylurea‏ بالمقارنة مع النوع البزي لنباتات ,5 الرفيعة ‎sorghum‏ ¢ ب) نبات ‎si‏ الرفيعة ‎sorghum‏ الذي يشتمل على ‎3k‏ في جين الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ مثل النبات في المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ © البحرية والغذائية ‎Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria‏ ‎(NCIMB)‏ المرمز لها بالرقم ‎¢EYAVL‏ ‏ج) نبات الذَرةِ الرفيعة ‎sorghum‏ الذي يشتمل على الصنفات ‎As‏ المسؤولة عن المقاومة الزائدة لواحد أو أكثر من مبيدات الأعشاب من مجموعة ‎imidazolinonecils jk‏ أو مركّبات ‎Jie sulfonylurea‏ المقاومة ‎Aina)‏ بواسطة نبات المجموعات الوطنية للبكتريا الصناعية ؛ ‎٠‏ البحرية والغذائية ‎Natianal collections of industraol, Marine and food Bacteria‏ ‎(NCIMB)‏ المرمز لها بالرقم ‎YAY‏ ‏د) نبات؛ أو نسل نبات؛ أو ‎Gide‏ أو نبات طافر من نباتات 3,3 الرفيعة ‎sorghum‏ من أ) إلى ‎(z‏ ‏4- الطريقة وفقا لعنصر الحماية ‎(YA‏ حيث يتم انتقاء مبيدات أعشاب ‎imidazolinone‏ من ‎VO‏ المجموعة التي تتكون من ‎imazapyr. imazapic. imazethapyr‏ . ‎-٠‏ البولي تنكليوتيد ‎polynucleotide‏ ؛ يشتمل على متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide‏ ‎SEQUENce‏ منتقاة من ‎ic saad)‏ المؤلّفة من: أ) متوالية النكليوتيدات ‎Lda) nucleotide sequence‏ في المتوالية ذات الهويّّة رقم ‎٠‏ ‏ب) متوالية نكليوتيدات ‎SHA nucleotide sequence‏ لذ ‎encoding polypeptide‏ ‎polypeptide ٠‏ المبيّن في المتوالية ذات ‎Agel‏ رقم ؟؛ ج) متوالية نكليروتيدات ‎polypeptide 1 SHA nucleotide sequence‏ مُحتو على ‎Ja‏ ‏على 795 من هويّة المتوالية إلى متوالية الأحماض الأمينيَّة ذات ‎Agel)‏ رقم ‎oY‏ حيث يعرض ال ‎polypeptide‏ نشاط الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ ¢ ‎Yo‏ د) متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ محتوية على الأقل على 785 من الهويّة إلى متوالية النكليوتيدات ‎hdl nucleotide sequence‏ ذات ‎died)‏ رقم ‎٠‏ حيث متوالية در
    م7١‏ النكليوتيدات ‎ai nucleotide sequence‏ ل ‎polypeptide‏ يشتمل على وحدة فرحيَّة كبيرة لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ 5 يُظهر نشاط الإنزيم ‎acetohydroxyacid‏ ‏06 المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ ¢ ه)متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ تكون مُكمّلة تماماً لواحدة من متواليات ‎oo‏ النكليوتيدات أ) إلى د). ‎-١‏ البولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎Fe‏ حيث البولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ المذكور ‎polypeptide ad‏ يشتمل على استبدال ‎Thr‏ 1893 في الوحدة ‎Ae jal‏ الكبيرة ‎large subunit‏ لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ . ‎—TY‏ مجموعة تعبير ‎expression cassette ly‏ تتضمّن؛_متوالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence AD‏ المذكورة في عنصر الحماية رقم ‎Ve‏ و المرتبطة بشكل فغال معها. ‎TY‏ — مجموعة التعبير الوراثي وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎FY‏ التي تتضمّن أيضاً على الأقلّ ‎gine‏ ‏واحد الذي ‎clad‏ التعبير وراثي ‎expression cassette‏ عن البولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ ‏؟- مجموعة التعبير الوراثي وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎FF‏ حيث يتم انتقاء ‎Saad)‏ من المجموعة التي تتضمّن محقّزات للتعبير الوراتي في النباتات ‎plants‏ « البكتيريا ‎bacteria‏ » الفطريّات ‎WAY » fungi Yo‏ الحيوانيّة ‎WN animal cells‏ ‎Yo‏ خليّة مُتحوّلة باستخدام مجموعة التعبير الوراثي المذكورة في عنصر الحماية رقم 77. ؟- الخليّة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎FO‏ حيث ‎Ay‏ انتقاء الخليّة المذكورة من المجموعة المؤلفة من البكتيريا ‎fungi «hill « bacteria‏ » الخميرة ‎yeast‏ « الخلايا النباتية ‎plant cells‏ ؛ و الخلايا الحيوانيَّة ‎.animal cells‏ ‎-TY Yo.‏ ناقل تحوّل يحتوي على بولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ الذي يشتمل على متوالية نكليوتيدات ‎Nucleotide sequence‏ منتقاة من المجموعة التالية: أ) متوالية النكليوتيدات ‎Lda) nucleotide sequence‏ في المتوالية ذات ‎Agel‏ رقم ‎OV‏ ‏ب) متوالية نكليوتيدات ‎encoding SHA nucleotide sequence‏ لذ ‎polypeptide‏ المبيّن في المتوالية ذات الهويّّة رقم ؟؛ © ج)متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ مشفرة ‎sak polypeptide liencoding‏ على ‎J‏ على 795 من هويَّة المتوالية إلى متوالية الأحماض الأمينيَّة ذات الهويّة رقم ‎oY‏ حيث در
    -"١71-
    يُظير ‎polypeptide‏ نشاط الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب
    ¢ herbicide-resistant
    د) متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ محتوية على الأقل على 785 من الهويّة إلى
    متوالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ المبيّنة ذات الهويّة رقم ‎٠‏ حيث تُشفّر متوالية
    © التكليوتيدات ‎polypeptide 1 nucleotide sequence‏ يتضمّن وحدة فرحيّة كبيرة لإنزيم acetohydroxyacid synthase ‏يُظهر نشاط الإنزيم‎ gacetohydroxyacid synthase
    المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ ¢
    ه متوالية نكليوتيدات ‎AK nucleotide sequence‏ تماماً لواحدة من متواليات النكليوتيدات
    أ) إلى د)؛ حيث يشتمل الناقل أيضاً على جين منتقى؛ و ‎Shae‏ واحد على الأقلّ مرتبط بشكل فعّال > مع متوالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ ويكون لديه القدرة على تحريك التعبير الوراثي
    عن متوالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ المذكورة.
    ‎—TA‏ استخدام الناقل المذكور في عنصر الحماية رقم ‎(FY‏ من أجل تحويل خلايا منتقاة من
    ‏مجموعة التي تتضمّن البكتيريا ‎bacteria‏ » الفطريّات ‎fungi‏ ¢ الخميرة ‎yeast‏ ؛ الخلايا النباتية
    ‎animal cells ‏و الخلايا الحيوانيَّة‎ » plant cells
    ‎Yo‏ *©- المُحقّز ؛ الذي يكون مرتبطاً بشكل فعّال مع بولي نكليوتيد ‎polynucleotide‏ منتقى من المجموعة التي تتضمّن:
    ‏أ) متوالية النكليوتيدات ‎Lda) nucleotide sequence‏ في المتوالية ذات ‎Agel‏ رقم ‎OV‏ ‏ب) متوالية نكليوتيدات ‎encoding SHA nucleotide sequence‏ لذ ‎polypeptide‏ المبيّن في المتوالية ذات الهويّّة رقم ؟؛
    ‏ج) متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ مشفرة ‎encoding‏ لذ ‎polypeptide‏ ‏مُحتو على ‎JY)‏ على 745 من ‎isn‏ المتوالية إلى متوالية الأحماض ‎Bnd)‏ ذات ‎sel‏ رقم 7 حيث ‎polypeptide jek)‏ نشاط الإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ المقاوم لمبيدات الأعشاب ‎herbicide-resistant‏ ¢ ‎(a‏ متوالية نكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ محتوية على الأقل على 785 من الهويّة إلى
    ‎Yo‏ متالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ المبيّنة ذات الهويّة رقم ٠؛‏ حيث تُشفّر متوالية النكليوتيدات ‎nucleotide sequence‏ ل ‎polypeptide‏ يتضمّن وحدة ‎Ley‏ كبيرة لإنزيم
    ‏در
    ١/7 acetohydroxyacid synthase ‏و يُظهر نشاط الإنزيم‎ 80610/00728610 synthase ¢ herbicide-resistant ‏المقاوم لمبيدات الأعشاب‎ ‏مُكمّلة تماماً لواحدة من متواليات النكليوتيدات‎ nucleotide sequence ‏ه) متوالية نكليوتيدات‎ ‏مرتبط بشكل‎ JAY) ‏واحد على‎ Jenks ‏أ) إلى د)؛ وحيث يشتمل الناقل أيضاً على جين منتقى؛‎ ‏وتكون لديه القدرة على تحريك التعبير‎ nucleotide sequence ‏فعال مع متوالية النكليوتيدات‎ © ‏المذكورة.‎ nucleotide sequence lag lal ‏الوراثي عن متوالية‎ ie gana ‏انتقاء المحفز من‎ Ay ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم 9؛ حيث‎ promoter ‏المحفز‎ -6 . chloroplast es ‏نوعي للنسيج و مُحفَرْ‎ ink ‏المركّبات المؤلّفة من‎ ‏أحادي الفلقة‎ lil ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم 749 حيث يكون‎ promoter ‏المحفز‎ -؟١‎ . monocot ٠ . dicot ‏حيث يكون النّبات ثنائي الفلقة‎ FA ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ promoter ‏المحفز‎ -" ‏من المجموعة‎ lil ‏لعنصر الحماية رقم ١4؛ حيث يتم انتقاء‎ la, promoter ‏المحفز‎ - . Wheat ‏و القمح‎ rice ‏الأرز‎ « corn ‏؛ الذرة‎ sorghum ‏المؤلّفة من 53 الرفيعة‎ ‏من المجموعة‎ bill ‏حيث يتم انتقاء‎ EY ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ promoter ‏المحفز‎ -44 Vo . oilseed rape ‏الثتلجم‎ Cu) ‏المؤلفة من فول الصنُويا 507/0680 و بذور‎ ‏حيث يتميز النّبات المذكور بمقاومة زائدة‎ (FA ‏لعنصر الحماية رقم‎ la, promoter ‏المحفز‎ - 5 ‏_بالمقارنة مع النبات غير المتحوّل‎ 10168560 herbicide resistance ‏لمبيدات الأعشاب‎ . non—transformed plant ‏الأعشاب‎ ane ‏انتقاء‎ Ay dua ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم 95؛‎ promoter ‏المحفز‎ —¢7 0 ٠ sulfonylurea ‏مُركّبات‎ ;imidazolinone ‏من مُكّبات‎ ids) ‏من المجموعة‎ herbicide ‏أو‎ herbicide-resistant ‏؛ - طريقة من أجل الحصول على نبات مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ ‏حيث‎ ¢ increased herbicide resistance ‏بمقاومة زائدة لمبيدات الأعشاب‎ jay ‏نبات‎ ‏تشتمل الطريقة المذكورة على:‎ ‏در‎
    —VA- ‏باستخدام مجموعة تعبير وراثي‎ transforming a plant cell ils ‏تحويل خليَّة‎ )١ ‏محتو على‎ polynucleotide ‏أو ناقل يتضمّن بولي نكليوتيد‎ expression cassette ‏منتقاة من المجموعة التالية:‎ 101601106 sequence ‏متوالية نكليوتيدات‎ ؛١ ‏المبيِّنة في المتوالية ذات الهويّة رقم‎ nucleotide sequence ‏أ) متوالية النكليوتيدات‎ ‏المبيّن‎ polypeptide ‏لذ‎ encoding SHA nucleotide sequence ‏_ب) متوالية نكليوتيدات‎ © ‏في المتوالية ذات الهويّّة رقم ؟؛‎ polypeptide ‏لذ‎ encoding ‏مشفرة‎ nucleotide sequence ‏ج) متوالية نكليوتيدات‎ OF ‏على 745 من هويَّة المتوالية إلى متوالية الأحماض الأمينيّة ذات الهويّة رقم‎ J ‏مُحتو على‎ ‏المقاوم لمبيدات‎ acetohydroxyacid synthase ‏نشاط الإنزيم‎ polypeptide jl) ‏حيث‎ ‎¢ herbicide-resistant ‏الأعشاب‎ ٠ ‏على 85 7 من الهويّة إلى‎ Ja ‏محتوية على‎ nucleotide sequence ‏د) متوالية نكليوتيدات‎ ‏حيث‎ ٠ ‏رقم‎ Agel) ‏في المتوالية ذات‎ ddl nucleotide sequence ‏متوالية النكليوتيدات‎ ‏وحدة فرحيَّة‎ samy polypeptide ‏ل‎ nucleotide sequence ‏متوالية النكليوتيدات‎ 534 acetohydroxyacid ‏و يُظهر نشاط الإنزيم‎ acetohydroxyacid synthase ‏كبيرة لإنزيم‎ ‏؛ و‎ herbicide-resistant ‏المقاوم لمبيدات الأعشاب‎ synthase Yo ‏لواحدة من متواليات النكليوتيدات‎ la ‏مُكمّلة‎ nucleotide sequence ‏متوالية نكليوتيدات‎ (a ‏واحد على الأقلّ مرتبط بشكل‎ Jind ‏التعبير الوراثي أيضاً على‎ de pene ‏أ) إلى د)؛ حيث تشتمل‎ ‏حيث المحفّز المذكور يُحرّك التعبير الوراثي عن‎ polynucleotide ‏فعّال مع البولي نكليوتيد‎ ‏المذكور؛‎ polynucleotide ‏البولي نكليوتيد‎ ‏النباتيّة للحصول على نبات مقاوم لمبيدات الأعشاب.‎ GL ‏تجديد‎ )١ | ٠ ‏نوع لنسيج نبات.‎ Shak ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم 7؟؛ حيث يشتمل المحفّز على‎ - A Ges ak ‏على‎ ad Jak ‏وفقاً لعنصر الحماية رقم 47 حيث‎ dll -4 .chloroplast ‏من‎ herbicide ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم 497 حيث 2 انتقاء مبيد الأعشاب‎ -٠ . sulfonylurea ‏و مُكّبات‎ imidazolinone ‏المجموعة المؤلّفة من مُركّبات‎ Yo ‏در‎
    -"١74- ‏العشبي من نوع‎ apd) ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم 560؛ حيث يتم انتقاء‎ -5١ ‏و‎ ١ 03280166 imazethapyr ‏من مجموعة المركّبات التي تتضمّن‎ imidazolinone . Imazapyr . monocot ‏حيث يكون النّبات أحادي الفلقة‎ £V ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ —oY dicot ‏حيث يكون النّبات ثنائي الفلقة‎ £Y ‏الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم‎ -#© 0 4 - الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎OF‏ حيث ينم انتقاء التّبات من المجموعة المؤلّفة من ‎SA‏ ‏الرفيعة ‎sorghum‏ ¢ الذرة ‎corn‏ « الأرز 86 ؛ و القمح ‎Wheat‏ . - الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎(OF‏ حيث يتم انتقاء النّبات من المجموعة المؤلّفة من فول ‎soybean lal‏ و بذور زيت ‎oilseed rape aa Lal)‏ . ‎0٠‏ 21- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم ‎EY‏ حيث يتميز البات المذكور بمقاومة زائدة لمبيدات الأعشاب ‎herbicide resistance‏ 70168580 _بالمقارنة مع النبات غير المتحوّل ‎non—‏ ‎transformed plant‏ . ‎—ov‏ الطريقة وفقاً لعنصر الحماية رقم 7 حيث يشتمل النبات المذكور على الوحدة الفرعيّة الكبيرة ‎large subunit‏ لإنزيم ‎acetohydroxyacid synthase‏ و يُظهر نشاطاً لإنزيم
    ‎. herbicide—resistant ‏مُقاوم لمبيدات الأعشاب‎ acetohydroxyacid synthase ١٠ ‏در
    _ A «= Sy i = ER . : > ¥ 3 Fad edi a ‏والح انا‎ 3 N Ahlen Qe ‏تا«‎ ; N : NH N >“ N AZ wl ‏اسم‎ OY i TY IN ‏الس‎ ‎FTN ‏دسي اس ان ال حا ان‎ 8 N ‏با‎ RRZRT af a 8 N 1 ‏ب‎ : N a >“ ‏ب‎ ‎N SFC ‏و‎ : i Foe NEE ES LTR LCE ‏الي‎ J i N Sead SAR W iB 1 PEW ‏وب ميان‎ 8 ‏اع‎ >“
    N . 6 ‏ا‎ ‎N ‏ا 3 ب‎ i 7# ‏م‎ 1 ‏إٍْ م‎ N : i Ny 3 9 ‏وا‎ 3 3 Xe Lo { N ~ 8 N a : i i 8 N g : N 8 - N ‏و" ا‎ : N cc SNES 8 NE ‏ا لا‎ NE 3 ١ Fo 8 ‏الا‎ or i FE - } } ‏ب دمحا‎ 8 NE ar i N on i NER ae i N + = : NINE a 8
    NE . = 8 ‏اح حب‎ Ea i N ot 8 N 8 ‏كر ؟‎ 5 8 N & ‏الي ب‎ NH ‏ا حم 0 ؟‎ NERA hy 8 N er RK ‏و ؟‎ ١ RK ‏؟:‎ de ‏ب خا‎ 8 VS TES ‏إٍْ ا‎ 1 ‏الل‎ \ 8 Ni N i RE RN 8 N 5 8 i ‏يا‎ i N 6 8 i we Ne, or y 8 N Ta ‏لال‎ ‏اح م‎ oi Sm TIE N ‏اس ع ا الي‎ EE ‏ا ا قح‎ N 0 ‏ا‎ 8 N 4 8 N >“ N ‏ا‎ LAA EAE ‏ا‎ EAA AAA AA i N : 5 ¥ i N >“ >“ i 8 8 A ‏بو لا 1 لا‎ 3 of ‏ارا‎ SEE N 1 4 3 p ; : i BETTE = KY XY ‏اقل‎ ‎3 > > > > N SETI Li fr Bods i N [a Jt FRE - REE Andy 3 3 ‏كذ ها متليفتي لج الما‎ SE LC ! ‏اي‎ SR wo EB wT i ‏سس‎ iy ‏شكل‎ i Baad 5 N Ea CAE here N Soba okey ‏ليا‎ Vs N ١ ‏ا‎ ‎N KAO N TREN . . 1 ‏ن‎ IN ‏اج ل‎ 1 ‏اليه الول ا ما‎ N N ods N ‏اسح واد اك‎ 5 : : TRA ‏ال ا ل ا‎ 1 ‏لكريم نا‎ MRR ٍ ik N ES N oF Sa Tha Fa rv N = Soon,
    N . 0 1 ‏ع‎ 3 a i ) \ [RA gy 1 ‏ا م‎ N : 5 8 RA 5 Pos, EN i 1 ‏س‎ ‎: ‏ا‎ Lo. ‏م ج‎ ‏ل‎ Fie ‏#المسسسس‎ ‎Yan ee Raed N ENCE ‏"م‎ jel FE ha oa ER { Fmt” tR Lo N = N v ‏ب"‎ ‎: ‏بط‎ ١ te a = Po N ped oy NR Ws he : ‏ف‎ 1: 0 ‏ا ا‎ ~ NET ng N : 0 N ow ~~. N =, N fos) ‏احم سم‎ N Ra RN BEN Se WE ‏ا‎ ‎5 ‏ربس مي‎ TAT ‏با‎ EA ‏ا احج 1 محص‎ : Trams ‏الس ا ال الب‎ Nat N = ‏اح إم"‎ N » ‏ب‎ ‎1 ‏أت‎ ‎N
    ‎N . N Ey 0 ‏سا اا‎ 0 ْ ‏الشابط‎ ES 85 83 85 N N 1 : EEA Us oad 1 Fone ‏ل ا اه‎ BEY add ha 1 ‏حرام زج لحان‎ d= 200 pin ‏ماج ااا‎ SIR : ge i 3 95
    Fee i Tow oo, ‏ب‎ 1 i 1 ‏بعاد التعاة‎ ald Ye i 0 : 1 i yd Coo H Thad 0 yd i THX ae LLL : ES H H { EET fm Peay H H 3 FREE RE a H H H ‏الم لاي با‎ A Fu En H i oa : : ‏ادي‎ H H ‏م الاج‎ an 0 any ‏حال‎ H H : : ‏م ا ل الا ا الس‎ H i 0 WY ‏اللا يش‎ 1 i FEE SE Wi 8 EE 5 i 1 i ١ 3 1 1 XY A ed Bo i H ¥ ¥ ® H ~ H H H ed H H HN ho H H H 5 H i ; : ‏ب‎ H 1 ‏ب ا ا‎ H i H oF i i i 6 H H i 0 i H H 5 H H # : i H 1 ‏يدج ل‎ 0 1 ‏ا‎ i poy a H i ow 3 kd ‏ب‎ i ! ‏الح الي 8 م‎ 5 1 0 ‏الس ا لاا دا‎ H H [4 ¥ =r > ‏اام ف‎ A H HIE ON : = Pe H H H oo Me of H ! ‏اي : ته‎ Ni 5 H POE ‏ب لذ بو‎ po.
    H ] ‏ب 5 لخر‎ he H Pol : 0 ‏من‎ id H ‏ا‎ 8 - : i i 3 > i 1 58 2 Ba : ‏ا‎ SE i I a i Poo 1 ‏إن‎ 1 i 8 - 3 oN 1 H ‏ادا حا دي‎ Ma, H PoE 7 a H fun 3 H HI 3 H i : ‏بي‎ i i dnd Sa i H 3 i H i 3 ‏بذ‎ i i i ‏الل ب‎ i Yel IERIE CO i Ra [epi an ‏يج ا ا‎ een 2 i H H EER A SEE ‏ا ل‎ 1 H H lie nist 1 H i i i ‏كا نا ل امم أ‎ >>>> ه١‎ i fbn ¥ A bo ‏شي‎ IN i ahead pi uy + Ed H : we. : : 8 ‏لم الا خا‎ H H [rs RE 2 ‏عد جح‎ ROAR RYE ‏ا‎ H i Pola ‏ا‎ did, LE AR ‏ادر ا‎ Gg i TR ‏مضي‎ i ‏كود‎ Baldy Co 3 ‏ساد لدان : اريت‎ ٍ 88 ‏داج عدا لضا و اج تت ا اج لت و ع ا اا ان‎ tr ‏ااام‎ rir or ‏اج اا ا با اج ااا وا اا‎ 87 ‏مو يعت ل اح معن رح عه م ل عه لت وتم م تح لع عت تت تاه لد مه تالت 1ل‎ A SHEER XE SHANE 0 pS ‏يا‎ BLE ‏علي عا لامح ست‎ snc nar mn sar ‏حت ام‎ mse sn ‏سج الم‎ ona lo ‏ماح تعاب بط ماح‎ sed sme ‏بط تمه بع عم بعال‎ el ‏لاه ايم مي‎ ro ‏صم عه‎ me ey ‏اه جلها ا ا و اا ان ال ا اك سا رك الت ال‎ ES ‏ا ل ريا جد وا‎ CR CS SRS 283 : ‏دحا لتاقو‎ 0 ‏تا‎ CLE hme nmin ‏م انيت 8 ا اح م‎ A ‏مين مي لمجا مريت حا عت‎ ses en SE ‏م1‎ SSSR BY ‏ا كد قي ا ا او د ا تك ما الم لف الا‎ BR CA TR Rr NE nsieTen : ‏ادرو‎ 1 © . Gre ‏ا‎ 0 A BE 14113 BEATER {IR ‏ران لايد راج عه امي كاد جنات ري انا‎ BS ‏كدير كيه‎ TA ‏ا‎ SR TES ‏كرا‎ DE ‏ال نه سعد جمد يك‎ ‏قمع‎ r/R ‏د ل ل ا ل ا لد لا ل ا ال ل‎ CAPE ‏ا ا‎ : 41 : : : : : 55 EE | Ch ‏و م رك ا ل ع ع م ا اع سه مد تاي‎ TAGE ‏اع‎ ‎EY ‏ا المح اك ات ا ال م كر ام ا ل اي ا سن ا ل‎ FRR TC ‏ا ل‎ ١ 54 ‏لكف ا ا‎ ٍ 5 : BH ‏الا ارا‎ L228) ‏را جا‎ A ‏ا ار م كي‎ A ‏ل الجر‎ ESA GON T PECANS SOS ATER ENT TEED ‏عع يا اك ب ا ب ا ا عه ل‎ TRS : 11 ١ ‏ا‎ ) wo TRY ‏سوواط‎ TAREE ‏كد عقي‎ AR ‏ع‎ Th ‏ا ع عه‎ A A SOA RAC TR RE FO IRAE CU TSENG AT RL AR ‏كوت ال‎ A ‏ل ار راي ال كي الا ا‎ A ‏رك ا ا ا مما وا‎ AA NED STU ‏را د‎ 1 WL : : : ; Co 1 1 #81 ‏ام ا ل حي ات لكوع عه اميم ته تح عض عاتن لمعا تسق‎ 237 ‏جوم رسيي تت يلض‎ A ‏لتاقت لعجت معت حت تج‎ A SC CA A SPOT SS TR ‏موتح‎ ‎801 : : 1 ‏"م‎ : : EE) ENTS IR ‏ل رك ا‎ AR TT ‏حي جيه الود و لاا لحار كد لد رن يج اتات كادي كن تاه د رت يكت ره‎ TE CT RR ‏عات الت اتج ال لات تتا ت لتقا # لاج‎ TT a ‏لست اا الات‎ R RGR IRE ORT ‏احج هب ا‎ NE RARELY ‏اليا ابتك بن‎ ١ #81 ST B " ٍ ) 108 ‏رح قل لوو كك واه ا سا ال ال ا‎ San ‏مي رمن ايت‎ Sep yatta ‏ميري كات مدان حي ميخو لج‎ se da ‏ادع امج‎ Tea a ‏مدي جو‎ 2 3 1 RSLS ‏ل‎ SOO E TT ENTERS RRA TEADT RANT CRCAST EN Nt ARCELOR ROOT TREAT DT ‏وه جع اه خاو حك رات اواو‎ Med ‏وو : لجعي‎ 1188 ‏ال الا ا‎ TE ‏لس اكت لح الج يكت لمحت ا وما رجي جح لتم اي اج ني جا مقي تج مه الما ا اكت‎ A ‏موك ا 3 13013 ا قط‎ i ‏شكل‎
    ‎La.‏ . - . ا ا ‎AREER TEI SEIRERATI SATIN TEE ARGC AGES DARGA T DIVA RUA DT ATR Y MRIS Y DH ASR a SOAR NE TE BRO UR FATT]‏ امسج ين ا ‎DE AR SARA REAR RC ATI‏ فج مه الوحت لحو تا متا ‎NRA DC AA‏ ال براحو ‎RE‏ ب 00 27 فا ‎١ 01 : 0 ١ ١ : HE‏ ‎ER A RASA SRC TR Sa IA TO SOR A TORS TR‏ نا ‎CR I‏ اد يارت ل ل اجو ا ‎AEST.
    NEY AGA‏ ‎RF A GEA AB A TF RRO TF SE I SE SCOR TN NER SSK‏ اا ا تت ‎a DS‏ ات عت الات تتا ‎BRAT HERS‏ ‎١ Ea‏ : امال ‎١‏ ‎DTA HAR AE RR AS TR RE‏ العامة الف عض ‎ER‏ تصعة قم ‎AR ER‏ مسجم توت ست ‎NT RR A RE ET TR TR A TT ER TR CS RT CO Se A RATA TA SR TTA LT TD TRA TR RSE TOR‏ تتفل ‎Cu : . : LT ORAS‏ ا ا 804 ‎١‏ : مضي ‎at Boacesl TE perso 0 TR LE Der Te Emel Erte benef oleh Sal chi‏ ا ام اام ‎CRITE‏ الس ‎ECE‏ ‎AY AS ER TR BA SR TT TS A A A GA RT SR TOT I CASC TERRI S THEIR‏ ‎IN LC IRANRE-RE Ce LER‏ : : ‎NR Sr ROOT IARI,‏ مه ‎CGA‏ الى الال ا عا جه التي تح ع لا الس ل الم ست ‎EEE‏ حدس ممع ‎Th‏ ع تج حا ا ‎EYE‏ ‎EE GOANRA-FY ; So . Ls‏ ‎RAG A TERN AR ST I AN INR GBB TONY‏ جم الاي كارت الاير ‎Ga RA AR Be‏ بل مادا ‎(TINY RGN‏ ال ا ‎RR TS TE A RA RATT TRE‏ ل ‎THER TR 1 Bee EA‏ +8023 ‎FL . INT‏ ا ل ‎A a A A A AA AR A TT A PE RE A TAOS A AE‏ ا ‎RA‏ لا ل ‎EA A‏ مسار ا ‎A RA A SER SA TH EN PU CASE SF CRS RR FA BRAG TR RGA DEER‏ اا ‎١ ARR AAR RA TR‏ لا ‎BEER‏ ‏اح ااا ‎ol . 0 ١ . ١‏ . . : 5 لاا . . ممت لاماي احجان دما ‎THR FER‏ نك ‎COR TR‏ اتاد تاها ا ‎A AGRA ST‏ تاي لاش ‎RR AR CA TR‏ سال ‎ERE)‏ للحت ات لتق لمعيه ‎A‏ دانسا رت للع لكر ‎BEY A A GD A‏ لاتقل ‎Sadan eC BRED‏ الات ا ل ا ا ل ا ا لاا للستت ا ا اا ا ا ل ‎coe‏ ‏الا ‎a be‏ اتات الحا ا ا ‎LETH‏ ممص الح افج ‎CT SAT Se‏ ا ‎TE TS TEA TCO‏ لما لا و الماح ف ا ‎RRE‏ د تا لدت ‎RBG‏ ‏لا ‎pics A‏ : شح ا ا ‎FRR‏ مستا سا حو يتاي ا اا تاي حتت و مك عي اسن ده لمشت تمع ‎TR‏ لبرت تالو الات لاا ل ‎BORE ERE‏ ‎EE‏ . : : : ا "0 ‎Co FEST‏ ‎A El REY ATT SA a TT To TT ET ET Dy ET TS ER SS PT TE TT TO TR TOCA TA TO TEI CATER‏ الت ‎RS TO DR PPT AA TH PA TA TO NP‏ ا و تل ‎A‏ رار م لا جا ل ‎A LE A A‏ ‎PEAT :‏ © لد لتقو ‎EAL Co Lo‏ ‎AWE ER A I ST CT A A RA TAR FAR I AA TR RS CAT LA PA A SETI OR DRGs‏ ‎FRAXY EE SETA TIRADE FR TO TAA AIAN TEA SRA FARO RUT AT 1 ERR‏ شكل نيز
    ‎yal SET ®‏ الح ‎Lal aad = 3 x‏ ‎No + 8 8 i‏ ال : ‎ca we‏ ‎i 1 1 1 i‏ و ب اا ااا ا ا ااا ار اذا اما اس ال ‎oF‏ ‎IRE 8 3 i 3 CE EY N N 3 1‏ ا ‎i i 3 p HUNAN N N By‏ 0 ‎N i i 3 En ate) 08 N N 3 iF‏ ‎N 3 3 3 FINDER 3 by N Ny 1“‏ ‎HN 1 8 3 Eom (RRA ¥ H 2 £4‏ ‎by H 8 x‏ كد لخ د ا ل 3 ‎N 3 I‏ ‎ERE Io wid 3 bd‏ ام 3 : 1 ‎N‏ ‎ko‏ 2 ا ‎N oe‏ التي ل 3 8 31 ‎H‏ ‏ا ‎H 3 i 3 SERGE § N oe By‏ ‎x 3 = Ed‏ ا 9 ال 0 3 # ‎N i‏ ‎i‏ ل ل ا 23 ‎i 3 3 & ER‏ 0 ‎H‏ 3 اس موس أ ال سا 8 1 ‎N‏ ‏1 3 £3 ا 8 8 3 ‎RA AT ARR RAR ATR AAA‏ ل ‎ky oa‏ ‎i‏ 0 ا الما م 0 ‎H‏ ٍ + ةا ا وآ ‎aad 3 Ed‏ اا اراي ا ‎i 3 3 H s‏ 8 : ‎i 1‏ ل 9 § ‎i i i 1 Ed‏
    ‎JL. ony NEST ¥ i H‏ م ‎i HEE al i‏ 1 1 ‎A i |‏ ا ال رص ‎i i : Pn‏ ‎H 1 ps ER a 2 RENE BR by x‏ ‎rine x 2 ra 3 By on‏ ب 2 0 3 ‎H‏ ‎i ; Ad 1% + PANS i i i‏ 3 ‎i i 3 . 3 FORT TT J 3 iF‏ 0 ‎X fas N H 1‏ ا 8 ‎EN 1 3 i yg LHS § i N 3 Ed‏ 5% ‎N‏ لما ‎Teas. ; FP‏ ‎N Ny 1‏ الول -؟ ‎HN 3 3 by‏ ‎H 3 ps 3 RIE 4 5 & ¥ N 3 ®‏ ‎H 3 hi 3 FO Th ¥ J N 2 ol‏ ‎H i i 3 FE = Hy HN arm 0‏ 1 الخ 3 اك ‎i i i‏ 1 1 ‎N oT HE H i‏ ؟ 3 ‎N i i‏ ‎ss RIE SUL. i‏ اع ‎H H i i‏ 1 اا ‎a NE‏ لا اح لا ‎i 3 i IE SCO. SN‏ ‎A Lag ERI 1‏ : الت ا لت ا ادا لحا لاا الا 1 : ‎Ea x‏ ا ‎Jr 3 3 3 3 £ A.‏ ماي ؟ ‎i i ; 3 i i FORINT i‏ : ‎i‏ الا اها 0 8 0 ‎H i i‏ 0 ‎om H HN 3 1 3 N & Ds 3 x‏ ‎i i i 0 8 PRAY B 0‏ 3 = ‎i i 3 N N ven bY i i‏ 1 = ‎Ba i i i i 0 i 5 M 3 ES +‏ ‎i‏ ب ام اننم ا الحا ماه الا 8 ‎Wed i‏ ‎i 1‏ لات لمج 1 0 اللا الا ااا ل ‎ICE‏ ‎by i 3 3 3 N by +‏ ب ل لس ‎HN H 8 8 H by x‏ ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎i 3 3 N N HN 8 bd‏ 0 ‎i 3 3 N N HN 8 bd‏ 0 ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎H 3 0 a 8 By ou‏ : : : : : : ‎bd‏ ل ‎Ls E 3 N N N‏ 0 ‎i‏ و لتنا تتا لتنا لتنا الا ااا 3 3 3 20 ‎i‏ ‎H it‏ 3 8 جا اا ال ا 80 1 ‎BN N N N H bd‏ ¥ ل ‎woke ed 1 3 H 8 Hy HN 3 +‏ ‎H 3 ks 3 8 HN 8 x‏ ‎i 3 3 N N HN 8 bd‏ 0 ‎i 3 3 N N HN 8 bd‏ 0 ‎i 3 3 N N HN 8 bd‏ 0 ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎H 3 0 a 8 By ou‏ ‎i 3 3 N N N 8 bd‏ 0 ا ‎HN 3 i 3 3 N 3 By‏ ‎H i 3 3 3 N N 3 Ed‏ ‎HN 1 ps 3 3 8 3 bd‏ ‎i i ; : GE Yeh |‏ ‎EER i 1‏ بحخكت ‎NT Tyee LF‏ ا 7 - ‎Td oe‏ ‎VT : 1‏ ب مقع“ باج اال 7 ‎fi VIE i‏ ال ‎UNC‏ ‎w ji SB‏ iE iE iE iE iE
    ® . [ENE ‏مرحنا‎ i PERE: Ca = RE ¥ Pid ‏ميد‎ 8 Pl FTI Toho i f ‏تفي‎ (oF Tey ‏طول سيد‎ A | k wn Xow by 0 x Sant gra Roa i 888 ‏ل اا اس‎ i 0 ‏ب" لياس الدب‎ 05 Expt ٠ <7 ‏المع حو‎ : Yaa jog a TAME 3 : kid ‏ري‎ ‏دا ل‎ __ __ _ __ _ __ ‏ات‎ ‏للق تتاهؤ2ؤضيضٍ>هضص05359|طٍ ص/صض__ ا جا سا م ات اا اا اي‎ : ‏قا خم > ا حم‎ addy ale i LY rt ‏را مها‎ N OI Da ‏ادك لفون مقباط. الج‎ an ‏يا‎ JAS Wve Vel R RT LP Ww ‏مش‎ hd LEONE H 3 BRS ENLE EU J. ‏ل آل — د جد د جججمجدجأن‎ ‏الح ا ا ا‎ I 2 3 1
    3 . 1 0 andy ‏كنات‎ SN: RLS RE cy ¥ = y ‏وال ب‎ 20% nad Sal ‏الهذحب : ميان‎ iad i ad A Fronted BAe 2.5 aR : wy wT 5 FER ; 2 gh i iE EERE Ea a ‏أو‎ ER ‏ا زا لجو توي وجي ووو وجي وي ووو ووو ووو وو ويس ووس سيا‎ ‏ا حي حا ل ا‎ wena I EC | ES ; i $ =~ aN = 5 Sadat : ‏الم مشي‎ lA ‏ا £4.07 ومسي سا تن‎ Ye ‏قياس‎ + IRE ‏قباس‎ ev ikl wn H 7 ‏رحد بشي‎ PR ‏ل‎ ‏لل ا ا ل ال ا ااا ا‎ i H ® nw i g % * 0: ‏ل‎ x ‏ل‎
    _ A 7 _ ‏را ملا بضغ مدي‎ pre Pe 7 = 7 ‏ب‎ 2 ee 3 a
    Ba. C , —Dsenhsbm39 al ‏ل“‎ 3 : SE 7١ --Xgap010 : HO AT a I [ ‎i‏ ا ‎EN id ‎tr id ‎~~ FE ‎i ‏ال‎ 1 ‎1 ‏لام‎ ‏ع كب‎ Xsbarslbk4.50
    ©. SNRSDAHAS ss! +t) ¥ PO ¢ 3 ie i Xixp343 ‏المقاونة ‎doll‏ العشبي ‎efile]‏ ما 8 الهم ‏الي ‎= » ‎iu B ‎Ee x : 1 ‏قو احج ‎i= id ‎= id ‎i ‏مك ‎i Xsharsibk4.13‏ = ‎* Job
    مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏
SA113340439A 2012-04-05 2013-04-03 بولي نكليوتيد يمنح مقاومة مبيدات الأعشاب للذُّرة الرفيعة SA113340439B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/EP2012/056352 WO2013149674A1 (en) 2012-04-05 2012-04-05 Sorghum plants having a mutant polynucleotide encoding the large subunit of mutated acetohydroxyacid synthase protein and increased resistance to herbicides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA113340439B1 true SA113340439B1 (ar) 2016-05-22

Family

ID=45932337

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA113340439A SA113340439B1 (ar) 2012-04-05 2013-04-03 بولي نكليوتيد يمنح مقاومة مبيدات الأعشاب للذُّرة الرفيعة

Country Status (14)

Country Link
US (3) US10485195B2 (ar)
EP (3) EP4019640A1 (ar)
JP (1) JP2015512640A (ar)
CN (2) CN104395472B (ar)
AP (1) AP2014008033A0 (ar)
AR (2) AR090578A1 (ar)
AU (1) AU2012376012B2 (ar)
BR (1) BR112014024641A8 (ar)
MX (1) MX366944B (ar)
RU (1) RU2658604C2 (ar)
SA (1) SA113340439B1 (ar)
UY (2) UY39735A (ar)
WO (1) WO2013149674A1 (ar)
ZA (1) ZA201407173B (ar)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7298376B2 (en) 2003-07-28 2007-11-20 Landmark Graphics Corporation System and method for real-time co-rendering of multiple attributes
WO2016130247A1 (en) * 2015-01-10 2016-08-18 Cibus Us Llc Mutated acetohydroxyacid synthase genes in euphorbiaceae and plant material comprising such genes
BR112022015690A2 (pt) * 2020-02-07 2022-10-18 Isca Tech Métodos de produção de feromônios de insetos

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0131623B2 (en) 1983-01-17 1999-07-28 Monsanto Company Chimeric genes suitable for expression in plant cells
US5331107A (en) 1984-03-06 1994-07-19 Mgi Pharma, Inc. Herbicide resistance in plants
US5304732A (en) 1984-03-06 1994-04-19 Mgi Pharma, Inc. Herbicide resistance in plants
US4761373A (en) 1984-03-06 1988-08-02 Molecular Genetics, Inc. Herbicide resistance in plants
US6211439B1 (en) 1984-08-10 2001-04-03 Mgi Pharma, Inc Herbicide resistance in plants
US4945050A (en) 1984-11-13 1990-07-31 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
US5378824A (en) * 1986-08-26 1995-01-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase
NL8800725A (nl) 1988-03-23 1989-10-16 Mogen International N V En Rij Recombinant dna; getransformeerde microorganismen, plantecellen en planten; werkwijze voor het produceren van een polypeptide of eiwit m.b.v. planten of plantecellen; werkwijze voor het produceren van planten met virusresistentie.
US5187267A (en) 1990-06-19 1993-02-16 Calgene, Inc. Plant proteins, promoters, coding sequences and use
US5731180A (en) 1991-07-31 1998-03-24 American Cyanamid Company Imidazolinone resistant AHAS mutants
US5545822A (en) 1992-08-21 1996-08-13 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Herbicide resistant rice
US5859348A (en) * 1996-07-17 1999-01-12 Board Of Trustees Operating Michigan State University Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
US20030097692A1 (en) * 2000-12-21 2003-05-22 Georg Jander Plants with imidazolinone-resistant ALS
AU2002322212B8 (en) 2001-08-09 2008-08-21 University Of Saskatchewan Wheat plants having increased resistance to imidazolinone herbicides
WO2005020673A1 (en) * 2003-08-29 2005-03-10 Instituto Nacional De Technologia Agropecuaria Rice plants having increased tolerance to imidazolinone herbicides
CA2570298A1 (en) 2004-06-16 2006-01-19 Basf Plant Science Gmbh Polynucleotides encoding mature ahasl proteins for creating imidazolinone-tolerant plants
AR051690A1 (es) * 2004-12-01 2007-01-31 Basf Agrochemical Products Bv Mutacion implicada en el aumento de la tolerancia a los herbicidas imidazolinona en las plantas
HUE029181T2 (en) 2005-07-01 2017-02-28 Basf Se Polynucleotides encoding herbicide-resistant sunflower plants, herbicide-resistant acetohydroxyacetic acid synthase high-subunit protein, and their application methods
ES2284390B1 (es) 2006-04-19 2008-11-01 Minera Del Santo Angel, S.L. Uso del carbonato calcico como coadyuvante tecnologico en los proceso s de extraccion de aceites y grasas.
WO2007149069A2 (en) * 2006-06-15 2007-12-27 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Resistance to acetolactate synthase-inhibiting herbicides
RU2451079C2 (ru) 2006-12-07 2012-05-20 Канзас Стейт Юниверсити Рисерч Фаундейшн Сорго, устойчивое к ацетолактатсинтазному гербициду
SI2687085T1 (sl) 2007-01-12 2017-12-29 Kansas State University Research Foundation Herbicidno rezistentna acetil-coa karboksilaza sirka
AP2009004993A0 (en) 2007-04-04 2009-10-31 Basf Plant Science Gmbh Ahas mutants
AU2008294493C1 (en) * 2007-04-04 2015-04-02 Basf Se Herbicide-resistant brassica plants and methods of use
CN101878300B (zh) * 2007-04-04 2013-09-11 巴斯夫农业化学品有限公司 具有多个除草剂抗性ahasl1等位基因的除草剂抗性向日葵植物及使用方法
BR122018070228B1 (pt) * 2007-10-05 2023-01-10 Cibus Europe B.V. Método para produção de planta brassica resistente à herbicida
EP2052606A1 (de) * 2007-10-24 2009-04-29 Bayer CropScience AG Herbizid-Kombination
EP2103216A1 (de) * 2008-03-19 2009-09-23 Bayer CropScience AG Ausgewählte Salze des 3-(5,6-dihydro-1,4,2-dioxazin-3-yl)-N-[(4,6-dimethoxypyrimidin-2-yl)carbamoyl] pyridin-2-sulfonamids, Verfahren zur deren Herstellung, sowie deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren
CA2737939C (en) * 2008-09-26 2021-04-27 Basf Agrochemical Products B.V. Herbicide-resistant ahas-mutants and methods of use
US8373025B2 (en) 2009-02-09 2013-02-12 Chromatin Germplasm, Llc Herbicide resistant sorghum

Also Published As

Publication number Publication date
JP2015512640A (ja) 2015-04-30
EP2834361A1 (en) 2015-02-11
CN104395472B (zh) 2018-05-04
AR090578A1 (es) 2014-11-19
ZA201407173B (en) 2016-01-27
RU2014144411A (ru) 2016-05-27
US20140245499A1 (en) 2014-08-28
CN104395472A (zh) 2015-03-04
EP3246408A1 (en) 2017-11-22
US20240341256A1 (en) 2024-10-17
MX2014011814A (es) 2015-12-09
AU2012376012B2 (en) 2018-12-06
RU2658604C2 (ru) 2018-06-21
AR119762A2 (es) 2022-01-12
MX366944B (es) 2019-07-31
UY39735A (es) 2022-06-30
UY34732A (es) 2013-10-31
WO2013149674A1 (en) 2013-10-10
US20200015445A1 (en) 2020-01-16
BR112014024641A2 (pt) 2018-07-24
BR112014024641A8 (pt) 2019-01-29
AU2012376012A1 (en) 2014-10-23
EP4019640A1 (en) 2022-06-29
WO2013149674A8 (en) 2014-11-13
CN108611363B (zh) 2022-05-17
US10485195B2 (en) 2019-11-26
CN108611363A (zh) 2018-10-02
AP2014008033A0 (en) 2014-10-31
US11963498B2 (en) 2024-04-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11987798B2 (en) Transgenic maize event MON 87419 and methods of use thereof
Roso et al. Regional scale distribution of imidazolinone herbicide-resistant alleles in red rice (Oryza sativa L.) determined through SNP markers
Ramakrishnan et al. Tracing QTLs for leaf blast resistance and agronomic performance of finger millet (Eleusine coracana (L.) Gaertn.) genotypes through association mapping and in silico comparative genomics analyses
Rakosy-Tican et al. Introgression of two broad-spectrum late blight resistance genes, Rpi-Blb1 and Rpi-Blb3, from Solanum bulbocastanum Dun plus race-specific R genes into potato pre-breeding lines
Rahman et al. Association mapping in Brassica napus (L.) accessions identifies a major QTL for blackleg disease resistance on chromosome A01
US20240341256A1 (en) Sorghum Plants Having a Mutant Polynucleotide Encoding the Large Subunit of Mutated Acetohydroxyacid Synthase Protein and Increased Resistance to Herbicides
Guo et al. Synergistic mutations of two rapeseed AHAS genes confer high resistance to sulfonylurea herbicides for weed control
Domínguez‐Mendez et al. Stacked traits conferring multiple resistance to imazamox and glufosinate in soft wheat
Jacob et al. Screening of cultivated and wild Helianthus species reveals herbicide tolerance in wild sunflowers and allelic variation at Ahasl1 (acetohydroxyacid synthase 1 large subunit) locus
Bhuiyan et al. Transgressive variants for red pericarp grain with high yield potential derived from Oryza rufipogon× Oryza sativa: field evaluation, screening for blast disease, QTL validation and background marker analysis for agronomic traits
Oliver et al. Plant gene containment
Thyssen et al. Genetic mapping of non-target-site resistance to a sulfonylurea herbicide (Envoke®) in upland cotton (Gossypium hirsutum L.)
Sabet Zangeneh et al. Cross-and Multiple Herbicide Resistant Lolium rigidum Guad.(Rigid Ryegrass) Biotypes in Iran
Wenefrida et al. Inheritance of herbicide resistance in two germplasm lines of Clearfield* rice (Oryza sativa L.)
Raman et al. Genetic variation for weed competition and allelopathy in rapeseed (Brassica napus L.)
Murphy Discovery, surveillance, and management of herbicide-resistant Amaranthus spp
De Wet Rust and FHB improvement of wheat through marker assisted selection and phenotyping
Fjellheim et al. Phenotypic and molecular characterization of genetic resources of Nordic timothy (Phleum pratense L.)
Gislum et al. NIRS and chemometrics-exploration of grass forage quality
Kölliker et al. the Art of Bringing Science to Life
Andersen et al. Vernalization response in ryegrass involves orthologues of wheat VRN1 and rice Hd1
EA040754B1 (ru) Трансгенное событие кукурузы mon 87419 и способы его применения
Dizkırıcı Genetic diversity of scald (Rhynchosporium secalis) disease resistant and sensitive Turkish barley seed sources as determined with simple sequence repeats