RU2819881C1 - Способ определения содержания меди в печени свиней - Google Patents
Способ определения содержания меди в печени свиней Download PDFInfo
- Publication number
- RU2819881C1 RU2819881C1 RU2022131860A RU2022131860A RU2819881C1 RU 2819881 C1 RU2819881 C1 RU 2819881C1 RU 2022131860 A RU2022131860 A RU 2022131860A RU 2022131860 A RU2022131860 A RU 2022131860A RU 2819881 C1 RU2819881 C1 RU 2819881C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- copper
- copper content
- level
- pigs
- Prior art date
Links
- 239000010949 copper Substances 0.000 title claims abstract description 39
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 37
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 37
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 title claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 title abstract 3
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 16
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 claims abstract 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 21
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 6
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000001479 atomic absorption spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 229910052729 chemical element Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010018852 Haematoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 1
- 238000001636 atomic emission spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009616 inductively coupled plasma Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010022694 intestinal perforation Diseases 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000701 toxic element Toxicity 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии и представляет собой способ определения содержания меди в печени свиней, отличающийся тем, что выполняют забор венозной крови у животного данного вида, получают сыворотку крови, проводят ее биохимический анализ, определяют уровень активности аланинаминотрансферазы и рассчитывают содержание меди, пользуясь уравнением регрессии: x=14,896–0,302y, где x – это содержание меди, мг/кг, y – уровень активности аланинаминотрансферазы, ЕД/л, в сыворотке крови. Изобретение позволяет эффективно определять содержание меди в печени свиней. 2 табл.
Description
Изобретение имеет отношение к животноводству, ветеринарии и экологии, применяется в качестве теста для прижизненной оценки уровня меди в печени свиней.
Существует способ определения меди в пищевом сырье и продуктах, который заключается в применении атомно-абсорбционного метода для определения массовой доли металла [1]. Для реализации данного способа оценки меди в печени свиней прижизненно необходимо проведение одного из вариантов биопсии печени. Для получения оптимального по качеству образца лучше выполнять лапароскопическую или открытую биопсию. На примере выполнения данной процедуры у мелких домашних животных количественное определение меди с помощью атомно-абсорбционной спектрометрии требуется минимум от 20 до 40 мг ткани печени, это проба, примерно, около двух сантиметров длиной. Биопсия печени является инвазивными дорогостоящим диагностическим инструментом. Также имеется ряд недостатков, связанных со степенью упитанности животного (чрескожный вариант биопсии), болью, возникновением кровотечения, внутрипеченочной гематомой, желчным перитонитом, перфорацией кишечника, сепсисом и другими осложнениями после вмешательства [2]. В отношении сельскохозяйственных животных в большинстве случаев подразумевается отбор проб для исследования после убоя животных, что не дает возможность оценивать и корректировать прижизненно концентрацию меди в печени свиней.
Существуют потенциальные способы определения меди в печени по концентрации некоторых аминокислот в сыворотке крови. Концентрация металла определялась методом атомно-абсорбционной спектрометрии, количественное содержание аминокислот устанавливалось методом ионообменной хроматографии, самый большой коэффициент корреляции составлял 0,703 с метионином [3].
В представленном способе даны коэффициенты корреляции Спирмена, что предполагает выполнение дальнейших исследований на большем количестве животных.
Также известны способы определения меди в печени овец и рыб с использованием регрессионных моделей [4, 5].
Оценка прототипа [3] не показала признаков сходства с представляемым решением по конкретному химическому элементу. Предлагаемый способ отличается возможностью получения регрессионной модели.
Технической задачей изобретения является оценка количества меди, содержащегося в печени свиней исследования сыворотки крови, полученной от живых животных и определения такого показателя, как аланинаминотрансфераза (АЛТ), путем расчёта концентрации металла с помощью уравнения регрессии.
Поставленная задача реализуется с помощью определения уровня активности АЛТ в сыворотке крови свиней с дальнейшим расчетом концентрации меди в печени, пользуясь уравнением регрессии: x = 14,896 – 0,302y, где x – это содержание меди «мг/кг», y – уровень активности аланинаминотрансферазы «ЕД/л» в сыворотке крови.
Пример выполнения.
Способ определения меди в печени свиней был осуществлен следующим образом. Экспериментальная часть выполнялась на базе крупного свинокомплекса, территориально расположенного в Западной Сибири. Животные содержались в стандартных условиях, которые соответствовали виду и мясному откорму, были вакцинированы в соответствии с планами ветеринарно-профилактических мероприятий. Типовое кормление осуществлялось полнорационным сбалансированным по питательным, минеральным веществам и витаминам комбикормом в зависимости от живой массы. Контроль комбикормов по номенклатуре гарантированных и дополнительных показателей осуществляли в установленном порядке. Поение животных выполняли из собственных источников хозяйственно-питьевого водоснабжения, при этом качество воды соответствовало второму классу.
Забор крови осуществлялся у клинически здоровых свиней в возрасте 6 месяцев из ушной вены острым методом с соблюдением правил асептики после 12-18 часовой голодной диеты, использовался 5%-й цитрат натрия в качестве антикоагулянта.
Проводился убой животных, после чего отбирались пробы печени, замораживались и хранились при температуре 18 °С. Определение уровня меди в паренхиматозном органе выполнялось в Аналитическом центре коллективного пользования Института геологии и минералогии им. В.С. Соболева Сибирского отделения Российской академии наук методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой с использованием спектрометра iCAP-6500 фирмы Thermo Scientific (USA).Навеску массой 100 г измельчали до однородной консистенции, высушивали в печи при температуре 60-70 °С 12 часов. Из полученного сухого остатка отбирали 3 г, озоляли в муфельной печи при 500-550 °С. Минерализация завершалась за 10-15 часов, зола становилась серого или белого цвета. Пробы остывали при комнатной температуре, зольный остаток растворяли в 3-х мл 50% соляной кислоты, выпаривали до сухого остатка на электроплите, его переносили в мерную колбу, разбавляя в 25 мл дистиллированной воды. Полученный раствор исследовали на содержание меди.
Биохимические исследования сыворотки крови выполнялись на базе лаборатории кафедры ветеринарной генетики и биотехнологии ФГБОУ ВО Новосибирский ГАУ, с применением унифицированных методов исследования крови, на анализаторе Photometer 5010 (Германия). Для оценки уровня активности фермента использовали набор реагентов компании ЗАО «Вектор-Бест» для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке, плазме крови.
Регрессионную модель получили с помощью ПО Statistica 8 (StatSoftInc., USA), используя регрессионный анализ. Выполняли поиск мультиколлинеарных факторов, исключая имеющие меньший коэффициент регрессии Beta. Анализировали остатки на нормальность распределения и независимость от предсказанных по уравнению регрессии значений отклика. Рассматривали регрессионное уравнение на наличие факторов, не влияющих на концентрацию меди в печени свиней, исключали биохимические параметры, для которых уровень значимости был больше 0,05. Оценивали приемлемость регрессионной модели в целом, принимая, что она эффективнее, чем прогнозирование содержания металла по средним значениям, при уровне значимости менее 0,05. Анализировали коэффициент детерминации, в нашем случае он был выше 0,3, что свидетельствует о построении качественной регрессионной модели. Строили прогноз с помощью полученной регрессионной модели, проверяя ее на значениях, полученных на свиньях, которые не были включены в первоначальную выборку.
При помощи данного способа можно определить содержание меди в печени свиней. Это предлагается делать посредством установления такого параметра сыворотки крови, как АЛТ, с последующим расчетом концентрации меди в печени с использованием уравнения регрессии. Таким образом, по уровню активности указанного фермента всыворотке крови можно установить содержание меди в печени свиней.
В табл. 1 приведены данные по содержанию меди в печени свиней. Соотношение крайних вариант концентрации металла в печени составило 1:8,6. Установленные значения, касающиеся среднего популяционного уровня меди в печени клинически здоровых свиней, можно предварительно использовать для получения референтных интервалов для данного вида животных в условиях Западной Сибири.
Табл. 1
Содержание меди в печени свиней, мг/кг
| n | ±S | Ме | σ | Q1 | Q2 | IQR | Lim |
| 39 | 9,46±0,85 | 7,7 | 5,3 | 5,3 | 14,0 | 8,7 | 2,9-25,0 |
Здесь и далее:
±S
– средняя арифметическая и ошибка средней; Me – медиана; σ – среднеквадратическое отклонение; Q 1 и Q 2 – первый и второй квартиль; IQR – интерквартильный размах; Lim – максимальное и минимальное значение; обработка материала выполнялась при помощи ПО Statistica 8 (StatSoftInc., USA).
В табл. 2 представлены данные по уровню активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови свиней, коррелирующих с уровнем меди в печени этого вида животных.
Табл. 2
Уровень активности АЛТ в сыворотке крови свиней, ЕД/л
| Показатель | n | ±S | Ме | σ | Q1 | Q2 | IQR | Lim |
| АЛТ | 43 | 15,15±1,90 | 18,96 | 12,43 | 1,53 | 23,44 | 21,91 | 0,77-47,03 |
АЛТ является важным ферментом, занимающим центральную роль в обмене белков, сочетано с некоторыми другими параметрами крови используется для диагностики повреждения паренхимы печени у свиней. Рассматриваются нормативные границы для свиней в пределах 32-84 ЕД/л. Но фактически общепризнанные референтные интервалы в ветеринарной медицине отсутствуют. Предполагается, что гематологические и биохимические нормы должны быть установлены отдельно для каждой географической территории.
В данном случае на клинически здоровых свиньях установили, что между уровнем активности АЛТ и концентрацией меди в печени животных существует связь среднего уровня (табл. 3), получили регрессионную модель для прогнозирования содержания металла по уравнению:
x = 14,896 – 0,302y, где y– это содержание АЛТ «ЕД/л» в сыворотке крови, x– содержание Cu«мг/кг» в печени свиней.
Табл. 3
Корреляции количества меди в печени с биохимическими параметрами сыворотки крови свиней
| Пары признаков | n | r±Sr | x= a + by |
| Cu печень – АЛТ | 37 | –0,684±0,089*** | x = 14,896 – 0,302y |
r±Sr – коэффициент корреляции и ошибка коэффициента корреляции, x= a + by – уравнение регрессии
Построение прогноза с помощью ПО Statistica 8и данной регрессионной модели на значениях, полученных на животных, не включённых в первоначальную выборку, позволяет привести следующие примеры. В сыворотке крови был установлен уровень активности АЛТ14,22 ЕД/л, фактическая концентрация меди в печени животного составила 8,90мг/кг, расчетная концентрация равнялась10,60 мг/кг. В качестве еще одного примера: уровень активности фермента– 13,15ЕД/л, фактическая концентрация меди – 8,53 мг/кг, расчетная концентрация –10,92 мг/кг.
Использование представленной регрессионной модели позволяет прижизненно у свиней прогнозировать содержание меди в печени, установив уровень активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови.
Предлагаемый способ дает возможность прижизненно оценивать такой параметр интерьера животных, как содержание меди в печени свиней, используя только пробы крови.
Источники информации:
1. ГОСТ 30178-96. Издания. Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсичных элементов [Текст].– Введ. 1998-01-01.– М.: Стандартинформ, 2010.– 10 с.
2. Lidbury J.A. Getting the most out of liver biopsy/ J.A. Lidbury// Vet. Clin. North. Am. Small Anim. Pract.– 2017.– Vol. 47(3).– pp. 569-583.
3. Зайко О.А. Изменчивость и корреляция химических элементов в органах и тканях свиней скороспелой мясной породы СМ-1: дис. … канд. биол. наук.– Новосибирск, 2014.– 183 с.
4. Пат. № 2765236 C1 Российская Федерация, МПК G01N 33/53. Способ оценки содержания меди в печени овец/ Саурбаева Р.Т., Андреева В.А., Климанова Е.А. и др.; заявитель и патентообладатель Новосибирский государственный аграрный университет.– № 2021106117; заявл. 09.03.2021; опубл. 26.01.2022.
5. Пат. № RU 2555518 C1 Российская Федерация, МПК G01N 33/48, G01N 33/12. Способ определения содержания меди в мышечной ткани рыбы/ Короткевич О.С., Миллер И.С., Коновалова Т.В. и др.; заявитель и патентообладатель Новосибирский государственный аграрный университет.– № 2014131162/15; заявл. 28.07.2014; опубл. 10.07.2015.
Claims (1)
- Способ определения содержания меди в печени свиней, отличающийся тем, что выполняют забор венозной крови у животного данного вида, получают сыворотку крови, проводят ее биохимический анализ, определяют уровень активности аланинаминотрансферазы и рассчитывают содержание меди, пользуясь уравнением регрессии: x=14,896–0,302y, где x – это содержание меди, мг/кг, y – уровень активности аланинаминотрансферазы, ЕД/л, в сыворотке крови.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2819881C1 true RU2819881C1 (ru) | 2024-05-28 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2505810C1 (ru) * | 2012-08-07 | 2014-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Алтайский государственный университет" | Способ определения меди |
| RU2548751C2 (ru) * | 2013-06-25 | 2015-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный университет" | Способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и меди в той же пробе |
| RU2555518C1 (ru) * | 2014-07-28 | 2015-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный аграрный университет | Способ определения содержания меди в мышечной ткани рыбы |
| RU2765236C1 (ru) * | 2021-03-09 | 2022-01-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный аграрный университет" | Способ оценки содержания меди в печени овец |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2505810C1 (ru) * | 2012-08-07 | 2014-01-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Алтайский государственный университет" | Способ определения меди |
| RU2548751C2 (ru) * | 2013-06-25 | 2015-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный университет" | Способ определения концентрации катионов цинка в сыворотке крови с одновременным определением соотношения катионов цинка и меди в той же пробе |
| RU2555518C1 (ru) * | 2014-07-28 | 2015-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Новосибирский государственный аграрный университет | Способ определения содержания меди в мышечной ткани рыбы |
| RU2765236C1 (ru) * | 2021-03-09 | 2022-01-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный аграрный университет" | Способ оценки содержания меди в печени овец |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЗАЙКО О.А. Изменчивость и корреляция химических элементов в органах и тканях свиней скороспелой мясной породы СМ-1, автореферат дисс. Новосибирск, 2014. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Braun et al. | Clinical biochemistry in sheep: A selected review | |
| Arab et al. | Biomarkers and the measurement of fatty acids | |
| Shetty et al. | Predicting methane emissions of lactating Danish Holstein cows using Fourier transform mid-infrared spectroscopy of milk | |
| Van Gastelen et al. | Predicting enteric methane emission of dairy cows with milk Fourier-transform infrared spectra and gas chromatography–based milk fatty acid profiles | |
| Løkke et al. | Covariance structures of fat and protein influence the estimation of IgG in bovine colostrum | |
| Tautenhahn et al. | Factors associated with calf mortality and poor growth of dairy heifer calves in northeast Germany | |
| Toscano et al. | Associations between the detailed milk mineral profile, milk composition, and metabolic status in Holstein cows | |
| RU2819881C1 (ru) | Способ определения содержания меди в печени свиней | |
| Costa et al. | Iodine content in bovine milk is lowly heritable and shows limited genetic variation | |
| Mariella et al. | Total plasma magnesium in healthy and critically ill foals | |
| Rodríguez-Hernández et al. | In vivo authentication of Iberian pig feeding regime using faecal volatilome information | |
| Tacail et al. | Quantifying the evolution of animal dairy intake in humans using calcium isotopes | |
| Goodwin | Genetic parameters of pork quality traits | |
| Strieder-Barboza et al. | Lipid mobilization assessment in transition dairy cattle using ultrasound image biomarkers | |
| RU2791231C1 (ru) | Способ определения содержания марганца в печени свиней | |
| Ding et al. | Whole blood gas and biochemical reference intervals for Lohmann Silver layers | |
| Zentrichová et al. | Zinc concentration in blood serum of healthy dogs | |
| Brown et al. | Calcium and phosphorus in unbanded eggs of the Nile crocodile (Crocodylus niloticus) | |
| Reynolds et al. | Determination of reference intervals for plasma biochemical values in clinically normal adult domestic shorthair cats by use of a dry-slide biochemical analyzer | |
| Doornenbal et al. | Relationships among serum characteristics and performance and carcass traits in growing pigs | |
| RU2820062C1 (ru) | Способ определения содержания цинка в печени свиней | |
| Opalka et al. | Mitochondrial function in turkey skeletal muscle—impact on meat quality | |
| RU2804795C1 (ru) | Способ определения содержания железа в мышечной ткани свиней | |
| Hov Martinsen et al. | Genetic analyses of nutrient digestibility measured by fecal near-infrared spectroscopy in pigs | |
| Grelet et al. | Prediction of key milk biomarkers in dairy cows through milk mid-infrared spectra and international collaborations |