RU2818453C2 - Комбинация ингибитора mcl-1 и мидостаурина, ее применения и фармацевтические композиции - Google Patents
Комбинация ингибитора mcl-1 и мидостаурина, ее применения и фармацевтические композиции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2818453C2 RU2818453C2 RU2021116433A RU2021116433A RU2818453C2 RU 2818453 C2 RU2818453 C2 RU 2818453C2 RU 2021116433 A RU2021116433 A RU 2021116433A RU 2021116433 A RU2021116433 A RU 2021116433A RU 2818453 C2 RU2818453 C2 RU 2818453C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- flt3
- combination
- group
- myeloid leukemia
- acute myeloid
- Prior art date
Links
- BMGQWWVMWDBQGC-IIFHNQTCSA-N midostaurin Chemical compound CN([C@H]1[C@H]([C@]2(C)O[C@@H](N3C4=CC=CC=C4C4=C5C(=O)NCC5=C5C6=CC=CC=C6N2C5=C43)C1)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 BMGQWWVMWDBQGC-IIFHNQTCSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- 229950010895 midostaurin Drugs 0.000 title claims abstract description 83
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 101001056180 Homo sapiens Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Proteins 0.000 title claims abstract description 11
- 102100026539 Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1 Human genes 0.000 title claims abstract description 11
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims abstract description 89
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims abstract description 84
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 58
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 42
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 28
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 16
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims abstract description 14
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 125000004527 pyrimidin-4-yl group Chemical group N1=CN=C(C=C1)* 0.000 claims abstract description 14
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N n-(5-chloro-2,4-dimethoxyphenyl)-3-oxobutanamide Chemical compound COC1=CC(OC)=C(NC(=O)CC(C)=O)C=C1Cl DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 5
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 39
- 101000932478 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Proteins 0.000 claims description 33
- 102100020718 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Human genes 0.000 claims description 33
- 229960001183 venetoclax Drugs 0.000 claims description 30
- LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N venetoclax Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1C=1CC(C)(C)CCC=1CN(CC1)CCN1C(C=C1OC=2C=C3C=CNC3=NC=2)=CC=C1C(=O)NS(=O)(=O)C(C=C1[N+]([O-])=O)=CC=C1NCC1CCOCC1 LQBVNQSMGBZMKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 18
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims description 18
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 14
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 14
- 102200039431 rs121913488 Human genes 0.000 claims description 10
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 9
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 claims description 7
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 claims description 5
- XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 5-aza-2'-deoxycytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 XAUDJQYHKZQPEU-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 4
- 229960003603 decitabine Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 37
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 29
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 24
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 101
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 57
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 36
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 35
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical group N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 26
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 22
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 17
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 17
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 17
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 17
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 16
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 15
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 15
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 15
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 14
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 description 14
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 13
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 13
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 12
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 description 11
- 125000003601 C2-C6 alkynyl group Chemical group 0.000 description 11
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 11
- 125000006574 non-aromatic ring group Chemical group 0.000 description 11
- 230000009044 synergistic interaction Effects 0.000 description 11
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 10
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 125000006685 (C1-C6) polyhaloalkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 9
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 8
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 8
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 8
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 7
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 7
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 5
- 238000007422 luminescence assay Methods 0.000 description 5
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 5
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 4
- 230000000719 anti-leukaemic effect Effects 0.000 description 4
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 4
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 3
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 3
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 3
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 3
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 3
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 3
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012664 BCL-2-inhibitor Substances 0.000 description 2
- 102000051485 Bcl-2 family Human genes 0.000 description 2
- 108700038897 Bcl-2 family Proteins 0.000 description 2
- 229940123711 Bcl2 inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102000047934 Caspase-3/7 Human genes 0.000 description 2
- 108700037887 Caspase-3/7 Proteins 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 208000036307 FLT3 internal tandem duplication acute myeloid leukemia Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 150000001204 N-oxides Chemical class 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 2
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 2
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 206010012818 diffuse large B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 125000004446 heteroarylalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 125000003392 indanyl group Chemical group C1(CCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 125000003454 indenyl group Chemical group C1(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 125000000876 trifluoromethoxy group Chemical group FC(F)(F)O* 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 125000004454 (C1-C6) alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 1H-benzimidazole Chemical compound C1=CC=C2NC=NC2=C1 HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 102000010565 Apoptosis Regulatory Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010063104 Apoptosis Regulatory Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 102100026596 Bcl-2-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 238000000116 DAPI staining Methods 0.000 description 1
- 229940123014 DNA polymerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N Digitonin Natural products CC1CCC2(OC1)OC3C(O)C4C5CCC6CC(OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(OC%11OC(CO)C(O)C(O)C%11O)C%10O)C8O)C(O)C7O)C(O)CC6(C)C5CCC4(C)C3C2C QRLVDLBMBULFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N Dodecane Natural products CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010066476 Haematological malignancy Diseases 0.000 description 1
- 101000617830 Homo sapiens Sterol O-acyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 206010033661 Pancytopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010090931 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013535 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 102000001712 STAT5 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010029477 STAT5 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 102100021993 Sterol O-acyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101000697584 Streptomyces lavendulae Streptothricin acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N aluminum magnesium Chemical compound [Mg].[Al] SNAAJJQQZSMGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006620 amino-(C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000006721 cell death pathway Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 125000001316 cycloalkyl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000030609 dephosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006209 dephosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N digitonin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO7)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)O[C@H]6[C@@H]([C@@H](O[C@H]7[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@@H](CO)O5)O)C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2[C@@H]1O)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@@H](C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-KUAJCENISA-N 0.000 description 1
- UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N digitonine Natural products CC1C(C2(CCC3C4(C)CC(O)C(OC5C(C(O)C(OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)CO7)O)C(O)C(CO)O6)OC6C(C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)C(O)C(CO)O6)O)C(CO)O5)O)CC4CCC3C2C2O)C)C2OC11CCC(C)CO1 UVYVLBIGDKGWPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- -1 injectables Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000034727 intrinsic apoptotic signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000006667 mitochondrial pathway Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- JLYAXFNOILIKPP-KXQOOQHDSA-N navitoclax Chemical compound C([C@@H](NC1=CC=C(C=C1S(=O)(=O)C(F)(F)F)S(=O)(=O)NC(=O)C1=CC=C(C=C1)N1CCN(CC1)CC1=C(CCC(C1)(C)C)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CSC=1C=CC=CC=1)CN1CCOCC1 JLYAXFNOILIKPP-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 1
- 150000002829 nitrogen Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- GUUBJKMBDULZTE-UHFFFAOYSA-M potassium;2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[K+].OCCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 GUUBJKMBDULZTE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001686 pro-survival effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к лечению злокачественного новообразования. Комбинация для лечения острого миелоидного лейкоза включает мидостаурин или его фармацевтически приемлемую соль, или его комплекс, или его сокристалл, или его сольват, включая гидрат, и ингибитор Mcl-1, который представляет собой Соединение B: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или Соединение C: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропизомеры, или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, в эффективном количестве для одновременного, последовательного или раздельного применения. Также раскрыты фармацевтическая композиция для лечения острого миелоидного лейкоза, применение комбинации для приготовления лекарственного средства для лечения острого миелоидного лейкоза. Группа изобретений обеспечивает синергетическое взаимодействие, ингибируя пролиферацию клеток. 3 н. и 16 з.п. ф-лы, 18 ил., 3 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к комбинации Мидостаурина, ингибитора многоцелевой тирозинкиназы, как определено ниже, и ингибитора Мс1-1. Изобретение также относится к указанной комбинации для применения для лечения злокачественного новообразования, в частности, острого миелоидного лейкоза, и фармацевтическому составу, подходящему для введения такой комбинации.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Мидостаурин также называется как 4'-N-бензоилстауроспорин или РКС412. Химическая структура Мидостаурина представлена ниже:
Мидостаурин, который также обозначается в настоящей заявке как Соединение А, его синтез, его применения для лечения злокачественного новообразования и его фармацевтические составы, описаны в патенте US №5,093,330, содержание которого включено путем ссылки. Мидостаурин специфически описан в Примере 18 патента US №5,093,330. В качестве единственного средства для лечения опухолей на первой стадии клинических исследований Мидостаурин продемонстрировал низкую токсичность, но ограниченную эффективность (Ргоррег и др., Journal of Clinical Oncology 2001, 19, 1485-1492). При добавлении к стандартной схеме лечения индукции цитарабина и даунорубицина и консолидации цитарабина, Мидостаурин продемонстрировал статистически достоверную эффективность и повышенную общую выживаемость у пациентов с AML с FLT3 мутацией (Stone и др., New England Journal of Medicine 2017, 377, 454-464).
Мидостаурин получил разрешение Управления по контролю за продуктами и лекарствами США (US FDA) в апреле 2017 г. в качестве активного компонента RYDAPT™ для лечения пациентов с впервые диагностированным острым миелоидным лейкозом (AML), которые заякоривают FLT3 мутацию, в комбинации с индукцией цитарабина и даунорубицина и консолидацией цитарабина.
Индукция цитарабина и даунорубицина с последующей консолидацией цитарабина является стандартной схемой лечения для AML. Цитарабин и даунорубицин представляют собой химиотерапевтические лекарственные средства, которые действуют путем уничтожения пролиферирующих клеток. Цитарабин представляет собой ингибитор ДНК-полимеразы и даунорубицин -антрациклин, которые блокирует репликацию. Введение цитарабина или даунорубицина может вызывать тошноту и рвоту, а также более серьезные побочные эффекты. Оба лекарственных средства должны вводиться путем инъекции и должны вводиться в специализированных учреждениях, таким образом, чтобы была возможность тщательного наблюдения за пациентами после введения.
Ингибитор Мс1-1 согласно настоящему изобретению представляет собой соединение Формулы (I), как описано в настоящей заявке. Указанные соединения Формулы (I), их синтез, их применения для лечения злокачественного новообразования и их фармацевтические составы, описаны в WO 2015/097123, WO 2016/207216, WO 2016/207217, WO 2016/207225, WO 2016/207226, и WO 2017/125224, содержание которых включено в настоящую заявку путем ссылки.
В частности, ингибитор Мс1-1 представляет собой Соединение В:
(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль, которое описано в Примере 30 заявки WO 2015/097123, содержание которой включено путем ссылки.
В другом варианте осуществления, ингибитор Мс1-1 представляет собой Соединение С (S63845):
(2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль, которое описано в Примере 185 заявки WO 2015/097123, содержание которой включено путем ссылки.
Апоптоз представляет собой строго регулируемый путь гибели клеток, который инициируется различными цитотоксическим стимулами, включая онкогенный стресс и химиотерапевтические средства. Было показано, что уклонение от апоптоза является отличительным признаком злокачественного новообразования и что эффективность многих химиотерапевтических средств зависит от активации внутреннего митохондриального пути. Три разные подгруппы белков семейства Вс1-2 контролируют внутренней апоптотический путь: (I) проапоптотические ВН3 (Вс1-2 гомология 3)-только белки; (II) способствующие выживанию представители, такие как сам Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w, Mcl-1 и Bcl-2al; и (III) проапоптотические эффекторные белки ВАХ и ВАК (Czabotar и др., Nature Reviews Molecular Cell Biology 2014, 15, 49-63). Сверхэкпрессия анти-апоптотических представителей семейства Bcl-2 наблюдается при различных злокачественных новообразованиях, в особенности, при злокачественных новообразованиях системы кровы, таки как лимфома из клеток зоны мантии (MCL), фолликулярная лимфома/диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома (FL/DLBCL) и множественная миелома (Adams and Cory, Oncogene 2007, 26, 1324-1337). Фармакологическое ингибирование анти-апоптотических белков Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w и Мс1-1 с помощью разработанных недавно ВН3-миметических лекарственных средств, таких как АВТ-199 (венетоклакс), АВТ-263 (навитоклакс) и S63845, является терапевтической стратегией для индуцирования апоптоза и вызывает регрессию опухоли при злокачественном новообразовании (Zhang и др., Drug Resist. Updat. 2007, 10, 207-217; Kotschy и др., Nature 2016, 538, 477-482). Тем не менее, наблюдаются механизмы резистентности к ВН3 миметикам (Choudhary и др., Cell Death и Disease 2015, 6, е1593) и применение комбинированных терапий может улучшить эффективность и замедлить или даже отменить развитие резистентности.
Острый миелоидный лейкоз (AML) представляет собой стремительно развивающееся смертельное злокачественное заболевание крови, возникающее при клоновой трансформации гемопоэтических стволовых клеток, что приводит к параличу нормального функционирования костного мозга и смерти вследствие осложнений от абсолютной панцитопении. AML отвечает за 25% всех лейкозов у взрослых, и самый большой коэффициент заболеваемости наблюдается в Соединенных Штатах Америки, Австралии и Европе (WHO. GLOBOCAN 2012. Estimated cancer incidence, mortality and prevalence worldwide in 2012. International Agency for Research on Cancer). Во всем мире, ежегодно диагностируется приблизительно 88 тыс.новых случаев. AML продолжает сохранять наиболее низкий коэффициент выживаемости из всех лейкозов, с предполагаемым 5-ти летним выживанием только 24%. Несмотря на то, что стандартная терапия для AML (цитарабин в комбинации с антрациклином, таким как даунорубицин) была разработана более 4 десятилетий тому назад, введение успешных нацеленных терапий для этого заболевания остается труднодостижимой целью. Концепция нацеленной терапии при AML затруднена тем, что это заболевание развивается как многоклональная иерархия, с быстрым ростом лейкемических субклонов в качестве основной причины резистентности к лекарственным средствам и рецидивирования заболевания (Ding и др., Nature 2012, 481, 506-510).
Активирующие мутации FLT3 (главным образом FLT3-ITD) присутствуют приблизительно у 30% пациентов с AML при постановке диагноза, что приводит к последующей активации нижерасположенного каскада передачи сигналов, включая пути передачи сигналов FLT3/JAK/STAT, МАРК и PI3K.
Активация передачи сигналов FLT3 подавляет сигналы апоптоза путем индуцирования фосфорилирования про-апоптотического белка BAD и экпрессирования представителей анти-апоптотического семейства Вс12. Ингибирование активности FLT3-ITD киназы индуцирует апоптоз посредством понижающей регуляции фосфорилирования BAD и экспресии Bcl-xL в клетках FLT3-ITD (Minami и др., Blood 2003, 102, 2969-2975).
Сохраняется потребность в новых лечениях и терапиях для лечения злокачественного новообразования. Неожиданно было обнаружено, что Мидостаурин, в комбинации с ингибитором Мс1-1 Формулы (I), как описано в настоящей заявке, взаимодействуют синергетическим образом, сильно ингибируя пролиферацию клеток, в частности при AML, и более предпочтительно, при FLT3 мутантпом AML.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В соответствии с первым аспектом изобретения, обеспечивается новая комбинация
(а) Мидостаурина или его фармацевтически приемлемой соли, или его комплекса, или его сокристалла, или его сольвата, включая гидрат, и
(б) ингибитора Мс1-1 Формулы (I):
где:
- D представляет собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или
гетероарильную группу,
- Е представляет собой фурильное, тиенильное или пирролильное кольцо,
- X1, Х3, Х4 и Х5 независимо друг от друга представляют собой атом углерода или атом азота,
- Х2 представляет собой C-R26 группу или атом азота,
-обозначает, что кольцо является ароматическим
- Y представляет собой атом азота или C-R3 группу,
- Z представляет собой атом азота или C-R4 группу,
- R1 представляет собой атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)полигалоалкильную группу, гидрокси группу, гидрокси(C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, циано группу, нитро группу, -Су8, -алкил(С0-С6)-NR11R11', -O-алкил(C1-С6)-NR11R11', -O-алкил(C1-С6)-R12, -C(O)-OR11, -O-C(O)-R11, -C(O)- NR11R11', -NR11-C(O)-R11', -NR11-C(O)-OR11', -алкил(Ci-C6)-NR11-C(O)-R11', -SO2-NR11R11', или -SO2алкил(C1-С6),
- R2, R3, R4 и R5 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)полигалоалкил, гидрокси группу, гидрокси(C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, циано группу, нитро группу, -алкил(C0-C6)-NR11R11', -O-Cy1, -алкил(C0-C6)-Су1, -алкенил(С2-С6)-Су1, -алкинил(С2-С6)-Су1, -O-алкил(C1-С6)-NR11R11', -O-алкил(C1-С6)-R12, -C(O)-OR11, -O-C(O)-R11, -C(O)-NR11R11', -NR11-C(O)-R11', -NR11-C(O)-OR11', -NR11-(C1-C6)-NR11-C(O)-R11', -SO2-NR11R11', или -SO2алкил(C1-С6),
или заместители пары (Rb R2), (R2, R3), (R3, R4), (R4, R5) образуют, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5 - 7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено 1-2 группами, выбранными из галогена, линейного или разветвленного (C1-С6)алкила, -алкил(С0-С6)-NR11R11', -NR11R11', -алкил(С0-С6)-Су1 или оксо,
- R6 и R7 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, линейный или разветвленный (C1-С6)полигалоалкил, гидрокси группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, циано группу, нитро группу, -алкил(C0-C6)-NR11R11',
-O-алкил(C1-С6)-NR11R11', -O-Cy1, -алкил(C0-C6)-Су1, -алкенил(С2-С6)-Су1, -алкинил(С2-С6)-Су1, -O-алкил(Cl-C6)-R12, -C(O)-OR11, -O-C(O)-R11, -C(O)-NR11R11', -NR11-C(O)-R11', -NR11-C(O)-OR11',
-алкил(C1-С6)-NR11-С(O)-R11', -SO2-NR11R11' или -SO2алкил(C1-С6), или заместители пары (R6, R7), когда привиты на два смежных атома углерода, образуют, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, выбранной из линейной или разветвленной
(C1-С6)алкильную группу, -NR13R13', -алкил(C0-C6)-Су1 или оксо,
- W представляет собой -СН2- группу, -NH- группу или атом кислорода,
- R8 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С8)алкильную группу, -CHRaRb группу, арильную группу, гетероарильную группу, арилалкил(C1-С6) группу, или гетероарилалкил(C1-С6) группу,
- R9 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, -Су2, -алкил(C1-С6)-Су2, -алкенил(С2-С6)-Су2, -алкинил(С2-С6)-Су2, -Су2-Су3, -алкинил(С2-С6)-O-Су2, -Су2-алкил(C0-C6)-O-алкил(C0-C6)-Су3, атом галогена,
циано группу, -C(O)-R14, или -C(O)-NR14R14',
- R10 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, арилалкил(C1-С6) группу, циклоалкилалкил(C1-С6) группу, линейный или разветвленный
(C1-С6)полигалоалкил, или -алкил(C1-С6)-O-Су4,
или заместители пары (R9, R10), когда привиты на два смежных атома углерода, образуют, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота,
- R11 и R11' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, или -алкил(C0-C6)-Су1,
или заместители пары (R11, R11') образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что данный азот может быть замещен 1-2 группами, представляющими атом водорода, или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу и подразумевается, что один или несколько атомов углерода возможных заместителей, могут быть дейтерированы,
- R12 представляет собой -Су5, -Су5-алкил(C0-C6)-O-алкил(C0-C6)-Су6, -Су5-алкил(Со-С6)-Су6, -Cy5-алкил(C0-C6)-NR11-алкил(C0-C6)-Cy6, -Су5-Су6-O-алкил(Со-С6)-Су7, -Су5-алкил(C0-C6)-O-алкил(C0-C6)-Су3, -Су5-алкил(C0-C6)-Су3, -NH-C(O)-NH-R11, -Cy5-алкил(C0-C6)-NR11-алкил(C0-C6)-Cy9, -C(O)-NR11R11', -NR11R11', -OR11, -NR11-C(O)-R11', -O-алкил(C1-С6)-(NR11, -SO2-R11, -C(O)-OR11,
представляется возможным для аммония, определенного таким образом, существовать в цвиттерионной форме или иметь моновалентный анионный противоион,
- R11, R13', R14 и R14' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, или необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- Ra представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- Rb представляет собой -O-C(O)-O-Rc группу, -O-C(O)-NRcRc' группу, или -O-P(O)(ORc)2 группу,
- Rc и Rc' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С8)алкильную группу, циклоалкильную группу, (C1-С6)алкокси(C1-С6)алкильную группу, или (C1-С6)алкоксикарбонил(C1-С6)алкильную группу,
или заместители пары (Rc, Rc') образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода и азота, подразумевается, что данный азот может быть замещен группой, представляющей линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- Су1, Су2, Су3, Су4, Су5, Су6, Су7, Су8 и Су10 независимо друг от друга представляют собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу,
- Су9 представляет собой
или Су3 представляет собой гетероарильную группу, которая замещена группой, выбранной из
-O-P(O)(OR20)2; -O-Р(O)(О-М+)2; -(CH2)p-O-(CHR18-CHR19-O)q-R20; гидрокси;
гидрокси(C1-С6)алкила; -(СН2)r- и-(СН2)s-гетероциклоалкила; или -U-(CH2)q-NR21R21'.
- R15 представляет собой атом водорода; -(CH2)p-O-(CHR18-CHR19-O)q-R20 группу; линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси(C1-С6)алкильную группу; -U-(CH2)q-NR21R21' группу; или -(CH2)r-U-(CH2)s-гетероциклоалкильную группу,
- R16 представляет собой атом водорода; гидрокси группу; гидрокси(C1-С6)алкильную группу; -(СН2)r-и-(СН2)s-гетероциклоалкильную группу; (CH2)r-U-V-O-P(O)(OR20)2 группу; -O-Р(O)(O-М+)2 группу; -(CH2)p-O-(CHR18-CHR19-O)q-R20 группу; -(CH2)p-O-C(O)-NR22R23 группу; или -U-(CH2)q-NR21R21' группу,
- R17 представляет собой атом водорода; -(CH2)p-O-(CHR18-CHR19-O)q-R20 группу;
-O-P(O)(OR20)2 группу; -O-Р(O)(O-М)2 группу; гидрокси группу; гидрокси(C1-С6)алкильную группу; -(CH2)r-U-(CH2)s-гетероциклоалкильную группу; -U-(CH2)q-NR21R21' группу; или альдоновую кислоту,
- М+ представляет собой фармацевтически приемлемый моновалентный катион,
- U представляет собой связь или атом кислорода,
- V представляет собой -(CH2)s- группу или -С(О)- группу,
- R18 представляет собой атом водорода или (C1-С6)алкокси(C1-С6)алкильную группу,
- R19 представляет собой атом водорода или гидрокси(C1-С6)алкильную группу,
- R20 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- R21 и R22 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, или гидрокси(C1-С6)алкильную группу,
или заместители пары (R21, R21') образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5 - 7 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, представляющей атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- R22 представляет собой (C1-С6)алкокси(C1-С6)алкильную группу, -(СН2)р-NR24R24' группу, или -(CH2)p-O-(CHR18-CHR19-O)q-R20 группу,
- R23 представляет собой атом водорода или (C1-С6)алкокси(C1-С6)алкильную группу, или заместители пары (R22, R23) образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-18 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 5 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, представляющей атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу или гетероциклоалкильную группу,
- R24 и R24' независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
или заместители пары (R24, R24') образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5 - 7 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, представляющей атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- R25 представляет собой атом водорода, гидрокси группу, или гидрокси(C1-С6)алкильную группу,
- R26 представляет собой атом водорода, атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, или циано группу,
- R27 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- R28 представляет собой -O-Р(O)(O-)(O-) группу, -O-Р(O)(O-)((R30) группу, -O-P(O)(OR30)(OR30') группу, -O-SO2-O- группу, -O-SO2-OR30 группу, -Су10,
-O-C(O)-R29 группу, -O-C(O)-OR29 группу или -O-C(O)-NR29R29' группу;
- R29 и R29' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу или линейную или разветвленную амино(C1-С6)алкильную группу,
- R30 и R30' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу или арилалкил(C1-С6) группу,
- n представляет собой целое число, равное 0 или 1,
- р представляет собой целое число, равное 0, 1 или 2,
- q представляет собой целое число, равное 1, 2, 3 или 4,
- r и s независимо представляют собой целое число, равное 0 или 1,
подразумевается, что:
- "арил" обозначает фенильную, нафтильную, бифенильную, инданильную или инденильную группу,
- "гетероарил" обозначает любую моно- или би-циклическую группу, состоящую из 5 - 10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический компонент и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота,
- "циклоалкил" обозначает любую моно- или би-циклическую неароматическую карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов,
- "гетероциклоалкил" обозначает любую моно- или би-циклическую неароматическую карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов, и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, которая может включать сопряженные, мостиковые или спиро циклические системы,
представляется возможным для арильных, гетероарильных, циклоалкильных и гетероциклоалкильных групп, определенных таким образом, и алкила, алкенила, алкинила, алкокси, быть замещенными от 1 до 4 групп, выбранных из необязательно замещенного линейного или разветвленного (C1-С6)алкила, необязательно замещенной линейной или разветвленной (С2-С6)алкенильной группы, необязательно замещенной линейной или разветвленной (С2-С6)алкинильной группы, необязательно замещенного линейного или разветвленного (C1-С6)алкокси, необязательно замещенного (C1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксид, при необходимости), нитро, циано, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R'', -NR'R'', -(C=NR')-OR'', линейного или разветвленного (C1-С6)полигалоалкила, трифторметокси, или галогена, подразумевается, что R' и R'' независимо друг от друга представляют собой атом водорода или необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, и подразумевается, что один или несколько атомов углерода предшествующих возможных заместителей, могут быть дейтерированы,
или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропизомеры, или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, подходящие для одновременного, последовательного или раздельного применения.
В другом аспекте, изобретение обеспечивает комбинацию, как описано в настоящей заявке, для применения для лечения злокачественного новообразования, в частности острого миелоидного лейкоза.
В дальнейшем аспекте, изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую комбинацию, как описано в настоящей заявке, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
На Фигуре 1 показано влияние на активность каспазы 3.7 при комбинировании FLT3 ингибитора Соединения А (Мидостаурин), с ингибитором Мс1-1 Соединением В, в AML клеточных линиях Molml3 и MV-4-11. Фигура 2: Комбинированное нацеливание FLT3 и Мс1-1 является эффективным в FLT3-ITD AML первичных образцах. Профилирование мутации первичных AML образцов и чувствительность к комбинированному лечению 863845/Мидостаурин в течение 24 часов. Рост клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo. Показатель аддитивности (ПА) рассчитывали, используя программное обеспечение CalcuSyn, и представляет собой среднее ПА при ED50, ED75, и ED90. ПА<1 указывает на синергетический эффект и ПА>1 антагонизм. Первичные AML образцы лечили с применением следующих серийных разведений доз комбинации: Мидостаурин, от 3,1 нМ до 800 нМ; и S63845, от 0,31 нМ до 80 нМ. Соотношение Мидостаурина к S63845 составляло 10:1. На присутствие мутации указывали заполненные синие боксы для каждого образца.
Фигура 3: Мидостаурин индуцирует накопление BIM, которое способствует летальности Мидостаурин/S63845 (Соединение С)
А. Мидостаурин повышает уровень проапоптотического Bim, который может, в свою очередь, связывать и сводить к нулю оставшуюся активность Мс1-1. Повышенный Bim сохраняется при совместном лечении S63845, свидетельствуя о том, что Bim играет функциональную роль в опосредованной Мидостаурин/863845 летальности.
В. Вестерн-блоттинг РЬТ3-опосредованных путей передачи сигналов и экспрессия белков семейства Bcl-2 в MV-4-11 клетках, леченных в течение 6 часов с применением Мидостаурина, S63845 отдельно или в комбинации. Дефосфорилирование FLT3-ITD приводит к инактивации STAT5 и МАРК и сопровождается существенной понижающей регуляцией МАРК-опосредованного фосфорилирования Мс1-1 на Thr163, сайте, необходимом для стабильности Mcl-1. Следовательно, Мидостаурин уменьшает уровень Мс1-1.
Фигуры 4 и 5: Комбинированное нацеливание FLT3 и Мс1-1 облегчает апоптоз
Активацию каспазы измеряли с помощью анализа Caspase-Glo® 3/7 через 6 часов лечения с применением лекарственных средств. Процентное значение апоптотических клеток измеряли с помощью проточной цитометрии, используя окрашивание Аннексин-V-APC/DAPI. AML первичные клетки лечили в течение 16 часов.
Фигура 6: Антилейкемический синергизм S63845 (Соединение С) и FLT3 TKi
Чувствительность AML клеточных линий к S63845 (Соединение С) и выбранным FLT3 ингибиторам (FLT3 TKi) после воздействия в течение 24 часов. Рост клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo. Рассчитывали значения показателя аддитивности (ПА), используя программное обеспечение CalcuSyn, и представлены средние значения ПА при ED50, ED75, и ED90. Соотношения, при которых комбинировали лекарственные средства, представлены в скобках.
Фигуры 7 и 8: Антилейкемический синергизм S63845 и FLT3 TKi
Репрезентативные синергетические взаимодействия между S63845 в комбинации с Мидостаурином на MV4-11 FLT3-ITD клетках определяли с помощью синергизма лекарственных средств на модели независимости увеличенного размера BLISS. Клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Рост клеток оценивали через 24 часа (Фигура 7). Синергетические взаимодействия оценивали, используя модель независимости BLISS. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации>0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса <0 представляют собой антагонизм (Фигура 8).
Фигура 9: ВН3 профилирование: Мидостаурин повышает митохондриальное примирование для апоптоза в FLT3-ITD клетках, подвергнутых воздействию S63845
Анализ ВН3 профилирования показал, что Мидостаурин повышает митохондриальное примирование в MV4-11 FLT3-ITD на ингибитор Мс1-1 S63845 и в особенности Bim пептид. Клетки подвергали анализу ВН3 профилирования через 4 часа после лечения с применением Мидостаурина (100 нМ). Повышение высвобождения цитохрома С является количественным показателем инициации митохондриального апоптоза.
Фигуры 10, 11, 12 и 13: Комбинация S63845 и Мидостаурина является эффективной в резистентных к Венетоклаксу AML клетках с FLT3-ITD, но не в FLT3-WT
Модель независимости BLISS для синергетических взаимодействий между S63845 в комбинации с Мидостаурином в MOLM13 FLT3-ITD клетках и резистентной к Венетоклаксу подлинии. Резистентные к Венетоклаксу клетки создавали, как описано в Zhang и др. Blood, 2015, 126, 328 и поддерживали общепринятым образом в среде, содержащей 1 мкМ Венетоклакса. Венетоклакс вымывали перед экспериментами и клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений S63845 и Мидостаурина, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Через 24 часа лечения, рост клеток измеряли с помощью Cell TiterGlo. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации >0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса<0 представляют собой антагонизм.
Фигура 14: Предварительное исследование in vivo: AML FLT3-ITD ксенотрансплантат
NSG мышам трансплантировали 106 AML клеток, имеющих происхождение от пациента, заякоривающих FLT3-ITD мутации. Опухолевую нагрузку измеряли с помощью процента hCD45+ клеток в крови мышей, используя FACS. После приживления трансплантата, мышей лечили с применением (I) наполнителя, (II) S63845 40 мг/кг в/в один раз в неделю, (III) Мидостаурина 75 мг/кг через желудочный зонд ежедневно, или (IV) комбинации.
Фигуры 15 и 16: Синергетический эффект Мидостаурина и S63845 в мышиных Ba/F3 FLT3-ITD клетках
Синергетические взаимодействия между S63845 в комбинации с Мидостаурином в мышиных Ba/F3 FLT3-ITD клетках определяли с помощью синергизма лекарственных средств на модели независимости увеличенного размера BLISS. Клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Рост клеток оценивали через 24 часа (Фигура 15). Синергетические взаимодействия оценивали, используя модель независимости BLISS. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации >0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса <0 представляют собой антагонизм (Фигура 16).
Фигура 17 и 18: Синергетический эффект Мидостаурина и S63845 в мышиных Ba/F3 FLT3-D835Y клетках
Синергетические взаимодействия между S63845 в комбинации с Мидостаурином в мышиных Ba/F3 FLT3-D835Y клетках определяли с помощью синергизма лекарственных средств на модели независимости увеличенного размера BLISS. Клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Рост клеток оценивали через 24 часа (Фигура 17). Синергетические взаимодействия оценивали, используя модель независимости BLISS. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации>0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса<0 представляют собой антагонизм (Фигура 18).
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
"Комбинация" относится либо к комбинации с фиксированной дозой в одной единичной дозированной форме (например, капсуле, таблетке или саше), комбинации с нефиксированной дозой, или набору для комбинированного введения, где соединение согласно настоящему изобретению и один или несколько компонентов из комбинации (например, другое лекарственное средство, как объясняется ниже, также обозначается в виде "терапевтического средства" или "соагента") могут вводиться независимо в одно и то же время или раздельно в течение временных интервалов, в особенности, если эти временные интервалы предоставляют возможность для компонентов комбинации проявлять совместный, например, синергетический эффект.
Термины "совместное введение" или "комбинированное введение" или тому подобные, как используется в настоящей заявке, охватывают введение выбранного компонента комбинации единичному субъекту, который в этом нуждается {например, пациенту), и включают схемы лечения, при которых агенты не обязательно вводятся одним и тем же путем введения или в одно и то же время.
Термин "комбинация с фиксированной дозой" обозначает, что активные компоненты, например, соединение формулы (I) и один или несколько компонентов комбинации, оба вводятся пациенту одновременно в форме единого целого или дозировки.
Термин "комбинация с нефиксированной дозой" обозначает, что активные компоненты, например, соединение согласно настоящему изобретению и один или несколько компонентов комбинации, оба вводятся пациенту в виде раздельных составляющих либо одновременно или последовательно, без специфических временных ограничений, где такое введение обеспечивает терапевтически эффективные уровни двух соединений в организме пациента. Последнее также применяется для коктейльной терапии, например, введение трех или более активных компонентов.
"Злокачественное новообразование" обозначает класс заболеваний, в котором группа клеток проявляет неконтролируемый рост. Типы злокачественных новообразований включают гематологическое злокачественное новообразование (лимфома и лейкоз). В частности "злокачественное новообразование" относится к гематологическому злокачественному новообразованию, в частности острому миелоидному лейкозу.
"AML" обозначает острый миелоидный лейкоз. В предпочтительном варианте осуществления, AML присутствует у пациентов, несущих FLT3 мутацию. В дальнейшем варианте осуществления, мутация представляет собой FLT3-ITD. В другом варианте осуществления, мутация представляет собой FLT3-TKD. В частности, указанная FLT3-TKD мутация включает FLT3-D835Y или FLT3-F691 мутацию в пределах домена тирозинкиназы (TKD) из FLT3. AML, подвергаемый лечению, может быть резистентным к предшествующей противораковой терапия. Такая предшествующая терапия может включать одно или несколько соединений, используемых для лечения AML, например, венетоклакс, децитабин, даунорубицин, и цитарабин, в частности венетоклакс.В одном варианте осуществления, AML, подвергаемый лечению, представляет собой резистентный к венетоклаксу AML, в особенности, резистентный к венетоклаксу AML с FLT3-ITD мутацией.
Термин "совместно терапевтически эффективны" обозначает, что терапевтические средства могут вводиться раздельно (в хронологически установленном порядке, в особенности специфически к последовательности) в такие временные интервалы, что они могут предпочтительно, у теплокровного животного, в особенности у человека, лечить, все еще проявляя (предпочтительно синергетическое) взаимодействие (совместный терапевтический эффект). В любом случае, это может быть установлено, в частности, путем определения последующих уровней в крови, свидетельствующих о том, что оба соединения присутствуют в крови человека, подвергаемого лечению, по меньшей мере на протяжении определенных временных интервалов.
"Синергетически эффективны" или "синергизм" обозначает, что терапевтический эффект, наблюдаемый после введения двух или более агентов, является больше, чем сумма терапевтических эффектов, наблюдаемых после введения каждого единичного средства.
Как используется в настоящей заявке, термин "лечить", "лечение" или "терапия" любого заболевания или нарушения относится в одном варианте осуществления, к ослаблению заболевания или нарушения (то есть, облечение или остановка или уменьшение развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов). В другом варианте осуществления "лечить", "лечение" или "терапия" относится к ослаблению или облегчению по меньшей мере одного физического параметра, включая те, которые могут не ощущаться пациентом. В еще другом варианте осуществления, "лечить", "лечение" или "терапия" относится к модуляции заболевания или нарушения, либо физически, (например, стабилизация различимого симптома), физиологически, (например, стабилизация физического параметра), или обоих.
Как используется в настоящей заявке, субъект "нуждается в" лечении, если такой субъект будет получать преимущества биологически, медицински или качества жизни от такого лечения.
"Лекарственное средство" обозначает фармацевтическую композицию, или комбинацию нескольких фармацевтических композиций, который содержат один или несколько или активных компонентов в присутствии одного или нескольких наполнителей.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Ниже описаны пронумерованные варианты осуществления изобретения, где, для удобства, Е1 является идентичным первому аспекту изобретения, описанному в настоящей заявке выше. Дальнейшие пронумерованные варианты осуществления (Е) изобретения описаны в настоящей заявке. Следует принять во внимание, что характерные особенности, указанные в каждом варианте осуществления, могут быть комбинированы с другими указанными характерными особенностями, для обеспечения дальнейших характерных вариантов осуществления настоящего изобретения.
Е2. Комбинация в соответствии с Е1, содержащая:
(а) Мидостаурин или его фармацевтически приемлемую соль, или его комплекс, или его сокристалл, или его сольват, включая гидрат, и
(б) ингибитор Мс1-1 Формулы (I),
где ингибитор Мс1-1 Формулы (I) представляет собой Формулу (IA):
где:
- Z представляет собой атом азота или C-R4 группу,
- R1 представляет собой линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (C2- C6)алкинильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, линейный или разветвленный (C1-С6)полигалоалкил, гидрокси группу, циано, -NR11R11', -Cy8 или атом галогена,
- R2, R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)полигалоалкил, гидрокси группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, циано группу, нитро группу, -алкил(C0-C6)-NR11R11',
-O-Cy1, -алкил(C0-C6)-Су1, -алкенил(С2-С6)-Су1, -алкинил(С2-С6)-Су1, -O-алкил(C1-C6)-NR11R11', -O-алкил(C1-C6)-R12, -C(O)-OR11, -O-C(O)-R11, -C(O)-NR11R11', -NR11-C(O)-R11', -NR11-C(O)-OR11', -алкил(C1-C6)-NR11-C(O)-R11, -SO2-NR11R11', или -SO2алкил(C1-С6), или заместители одной из пар (R2, R3), (R3, R4) образуют, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, выбранной из линейной или разветвленной (C1-С6)алкильной группы,
-NR13R13', -алкил(С0-С6)-Су1 или оксо, - R6 и R7 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, атом галогена, линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, линейную или разветвленную (C1-С6)полигалоалкил, гидрокси группу, линейную или разветвленную (C1-С6)алкокси группу, -S-(C1-С6)алкильную группу, циано группу, нитро группу, -алкил(C0-C6)-NR11R11',
-O-Cy1, -алкил(C0-C6)-Су1, -алкенил(С2-С6)-Су1, -алкинил(С2-С6)-Су1, -O-алкил(C1-С6)-R12, -C(O)-OR11, -O-C(O)-R11, -C(O)-NR11R11',-NR11-C(O)-R11', -NR11-C(O)-OR11', -SO2-(Ci-C6)-NR11-C(O)-R11', -SO2-NR11R11', или -SO2алкил(C1-С6),
или заместители пары (R8, R7), когда привиты на два смежных атома углерода, образуют, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что полученное кольцо может быть замещено группой, выбранной из линейной или разветвленной (C1-С6)алкильной группы, -NR13R13', -алкил(C0-C6)-Су1 или оксо,
- R8 представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (C1-С8)алкильную группу, арильную группу, гетероарильную группу, арилалкил(C1-С6) группу, или гетероарилалкил(C1-С6) группу,
- R9 представляет собой линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, -Су2, -алкил(C1-С6)-Су2, -алкенил(С2-С6)-Су2, -алкинил(С2-С6)-Су2, -Су2-Су3, -алкинил(С2-С6)-O-Су2, -Су2-алкил(C0-C6)-O-алкил(C0-C6)-Су3, атом галогена, циано группу, -C(O)-R14, или -C(O)-NR14R14',
- R11 и R11' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, или -алкил(C0-C6)-Су1,
или заместители пары (R11, R11') образуют, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, ароматическое или неароматическое кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которые могут содержать, дополнительно к атому азота, от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, подразумевается, что данный азот может быть замещен группой, представляющей атом водорода, или линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу и подразумевается, что один или несколько атомов углерода возможных заместителей, могут быть дейтерированы,
- R12 представляет собой -Су5, -Су5-алкил(C0-C6)-Су6, -Су5-алкил(C0-C6)-O-алкил(Со-С6)-Су6, -Су5-алкил(C0-C6)-OR11-алкил(С0-С6)-Су6, -Су5-Су6-O-алкил(С0-С6)-Су7, -C(O)-NR11R11', -NR11R11', -OR11, -NR11-C(O)-R11', -O-алкил(C1-C6)-OR11, -SO2-R11, -C(O)-OR11, или -NH-C(O)-NH-R11,
- R13, R13', R14 и R14' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, или необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу,
- R25 представляет собой атом водорода, гидрокси группу, или гидрокси(C1-С6)алкильную группу,
- Cy1, Су2, Су3, Су5, Cy8, Су7 и Cy8 независимо друг от друга представляют собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу,
- n представляет собой целое число, равное 0 или 1,
подразумевается, что:
- "арил" обозначает фенильную, нафтильную, бифенильную, инданильную или инденильную группу,
- "гетероарил" обозначает любую моно- или би-циклическую группу, состоящую из 5 - 10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический компонент и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота,
"циклоалкил" обозначает любую моно- или би-циклическую неароматическую карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов,
"гетероциклоалкил" обозначает любую моно- или би-циклическую неароматическую карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов, и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, которая может включать сопряженные, мостиковые или спиро циклические системы,
представляется возможным для арильных, гетероарильных, циклоалкильных и гетероциклоалкильных групп, определенных таким образом, и алкила, алкенила, алкинила, алкокси, быть замещенными от 1 до 4 групп, выбранных из необязательно замещенного линейного или разветвленного (C1-С6)алкила, необязательно замещенной линейной или разветвленной (С2-С6)алкенильной группы, необязательно замещенной линейной или разветвленной (С2-С6)алкинильной группы, необязательно замещенного линейного или разветвленного (C1-С6)алкокси, необязательно замещенного
(C1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксид, при необходимости), нитро, циано, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R'', -NR'R'', -(C=NR')-OR'', линейного или разветвленного (C1-С6)полигалоалкила, трифторметокси, или галогена, подразумевается, что R' и R'' независимо друг от друга представляют собой атом водорода или необязательно замещенную линейную или разветвленную (C1-С6)алкильную группу, и подразумевается, что один или несколько атомов углерода предшествующих возможных заместителей, могут быть дейтерированы,
или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропизомеры, или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием,
подходящие для одновременного, последовательного или раздельного применения.
Е3. Комбинация в соответствии с Е1 или Е2, где ингибитор Мс1-1 Формулы (I) представляет собой Формулу (IB):
где R9, R11, R11' и R12 имеют значения, как описано в Е1 или Е2 выше.
Е4. Комбинация в соответствии с E1, Е2 или Е3, где ингибитор Мс1-1 Формулы (I) представляет собой Соединение В: (2R)-2-{[(5S'а)-S-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин- 1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль.
Е5. Комбинация в соответствии с E1, Е2 или Е3, где ингибитор Мс1-1 Формулы (I) представляет собой Соединение С: (2R)-2-{[(5S'а)-S-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин- 1-ил)этокси] фенил }-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено [2,3-с/]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль.
Е6. Комбинация в соответствии с Е4, где Соединение В вводят внутривенно и Мидостаурин вводят перорально.
Е7. Комбинация в соответствии с любым E1-Е6, которая дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное противораковое средство, например, цитарабин и/или даунорубицин.
Е8. Комбинация в соответствии с любым E1-Е7, в форме комбинации с нефиксированной дозой.
Е9. Комбинация в соответствии с любым E1-Е7, в форме комбинации с фиксированной дозой.
Е10. Комбинация в соответствии с любым E1-Е9, для применения в медицине.
E11. Комбинация в соответствии с любым E1-Е9, для применения в соответствии с Е10, где указанное применение предназначено для лечения злокачественного новообразования.
Е12. Комбинация в соответствии с любым E1-Е9, для применения в соответствии с Е11, где злокачественное новообразование представляет собой гематологическое злокачественное новообразование.
Е13. Комбинация в соответствии с любым E1-Е9, для применения в соответствии с Е12, где злокачественное новообразование представляет собой острый миелоидный лейкоз. В частности, острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3 мутацию. Более предпочтительно, указанная мутация представляет собой FLT3-ITD.
Е14. Комбинация в соответствии с любым Е4 или Е6-Е9, для применения в соответствии с любым Е10-Е13, где Мидостаурин и Соединение В обеспечены в количествах, которые совместно терапевтически эффективны для лечения злокачественного новообразования.
Е15. Комбинация в соответствии с любым Е4 или Е6-Е9, для применения в соответствии с любым Е10-Е13, где Мидостаурин и Соединение В обеспечены в количествах, которые являются синергетически эффективными для лечения злокачественного новообразования.
Е16. Комбинация в соответствии с любым Е4 или Е6-Е9, для применения в соответствии с любым Е10-Е13, где Мидостаурин и Соединение В обеспечиваются в синергетически эффективных количествах, которые способны уменьшать дозу, необходимую для каждого соединения для лечения злокачественного новообразования, обеспечивая при этом эффективное лечение злокачественного новообразования, с уменьшением побочных эффектов.
Е17. Фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию в соответствии с любым E1-Е9, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
Е18. Применение комбинации в соответствии с любым E1-Е9, для приготовления лекарственного средства для лечения злокачественного новообразования.
Е19. Применение в соответствии с Е18, комбинации в соответствии с любым Е1 - Е9, где злокачественное новообразование представляет собой острый миелоидный лейкоз. В частности, острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3 мутацию. Более предпочтительно, указанная мутация представляет собой FLT3-ITD или FLT3-TKD.
Е20. Лекарственное средство, содержащее, раздельно или совместно,
(а) Мидостаурин или его фармацевтически приемлемую соль, или его комплекс, или его сокристалл, или его сольват, включая гидрат, и
(б) Соединение В: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил) этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль, для одновременного, последовательного или раздельного введения, и где Мидостаурин и Соединение В обеспечиваются в эффективных количествах для лечения злокачественного новообразования, в частности AML.
Е21. Способ лечения злокачественного новообразования, в частности AML, включающий введение совместно терапевтически эффективного количества
(а) Мидостаурина или его фармацевтически приемлемой соли, или его комплекса, или его сокристалла, или его сольвата, включая гидрат, и
(б) Соединения В: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил) этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановой кислоты, или ее фармацевтически приемлемой соли.
Е22. Способ сенсибилизации или лечения пациента, который (I) рефракторный к по меньшей мере одному химиотерапевтическому лечению, или (II) имеет рецидив после лечения с применением химиотерапии, или в обоих случаях (I) и (II), где способ включает введение совместно терапевтически эффективного количества (а) Мидостаурина, и (б) ингибитора Мс1-1 Формулы (I), как определено в настоящей заявке, указанному пациенту.
Е23. Соединение В для применения в комбинированной терапии с Мидостаурином, для лечения злокачественного новообразования, в частности AML.
Е24. Мидостаурин для применения в комбинированной терапии с Соединением В, для лечения злокачественного новообразования, в частности AML.
Е25. Комбинация для применения, способ или применение, как описано в любом из вариантов осуществления изобретения в данной заявке, для лечения AML, резистентного к предшествующей терапии.
Е26. Комбинация для применения, способ или применение, как описано в любом из вариантов осуществления изобретения в данной заявке, для лечения AML, резистентного к одному или нескольким соединениям, выбранным из венетоклакса, децитабина, даунорубицина и цитарабина, в частности венетоклакс.
Е27. Комбинация для применения, способ или применение, как описано в любом из вариантов осуществления изобретения в данной заявке, для лечения резистентного к венетоклаксу AML с FLT3-ITD мутацией.
Е28. Комбинация для применения, способ или применения, как описано в любом из вариантов осуществления изобретения в данной заявке, для лечения AML с FLT3-TKD мутацией.
Е29. Комбинация для применения, способ или применение, как описано в варианте осуществления Е28, где указанная FLT3-TKD мутация включает FLT3-D835Y или FLT3-F691 мутацию в пределах домена тирозинкиназы (TKD) из FLT3.
Е30. Комбинация для применения, способ или применение, как описано в настоящей заявке, где злокачественное новообразование представляет собой острый миелоидный лейкоз, присутствующий у пациентов, несущих FLT3-ITD мутацию в присутствии FLT3-TKD мутации.
В другом аспекте, изобретение обеспечивает комбинацию, комбинацию для применения, способ, композицию, лекарственное средство или применение, как описано в настоящей заявке, в частности, содержащую Соединение В или Соединение С и Мидостаурин, где указанное злокачественное новообразование, в частности AML, резистентно к предшествующей противораковой терапии. Такая предшествующая терапия может включать одно или несколько соединений, используемых для лечения злокачественного новообразования, такого как AML, например, венетоклакс, децитабин, даунорубицин, и цитарабин, в частности венетоклакс.В одном варианте осуществления, AML, подвергаемый лечению, является резистентным к Венетоклаксу AML, в особенности резистентным к Венетоклаксу AML с FLT3-ITD.
В другом варианте осуществления, AML, подвергаемый лечению, представляет собой AML с FLT3-TKD мутацией. В частности, указанная FLT3-TKD мутация включает FLT3-D835Y или FLT3-F691 мутации в пределах домена тирозинкиназы (TKD) из FLT3. В дальнейшем варианте осуществления, злокачественное новообразование представляет собой острый миелоидный лейкоз, присутствующий у пациентов, несущих FLT3-ITD мутация в присутствии FLT3-TKD мутации.
В особенности, AML, подвергаемый лечению, как описано в настоящей заявке, резистентный к лечению с применением ингибитора FLT3.
В другом варианте осуществления обеспечивается способ лечения злокачественного новообразования, в частности AML, включающий введение совместно терапевтически эффективного количества:
(а) Мидостаурина или его фармацевтически приемлемой соли, или его комплекса, или его сокристалла, или его сольвата, включая гидрат, и
(б) Соединения В: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановой кислоты, или ее фармацевтически приемлемой соли, или
(в) Соединения С: (2R)-2-{[(5S'а)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановой кислоты, или ее фармацевтически приемлемой соли.
В дальнейшем варианте осуществления обеспечивается способ лечения злокачественного новообразования, как описано в любом из вариантов осуществления в настоящей заявке, включающий введение совместно терапевтически эффективного количества Мидостаурина и Соединения В или Соединения С.
В фармацевтических композициях в соответствии с изобретением, пропорция активных компонентов по весу (вес активных компонентов по отношению к общему весу композиции) составляет 5-50%.
В качестве фармацевтических композиций в соответствии с изобретением, более специфически используют те, которые являются подходящими для введения пероральным, парентеральным и в особенности внутривенным, через- или транскожным, назальным, ректальным, подъязычным, глазным или респираторным путем, более специфически таблетки, драже, подъязычные таблетки, твердые желатиновые капсулы, таблетки для медленного растворения под языком, капсулы, пастилки, инъецируемые препараты, аэрозоли, глазные капли или капли в нос, суппозитории, кремы, мази, кожные гели и др.
В одном варианте осуществления, соединение Формулы (I), в частности Соединение В, вводят внутривенно, например, используя состав, как описано в WO 2018/078064.
Фармацевтические композиции в соответствии с изобретением могут содержать один или несколько наполнителей или носителей, выбранных из разбавителей, смазывающих веществ, связующих, дезинтеграторов, стабилизаторов, консервантов, абсорбентов, красителей, подсластителей, ароматизаторов и др.
В качестве неограничивающего примера можно указать:
- в качестве разбавителей: лактоза, декстроза, сахароза, маннит, сорбит, целлюлоза, глицерин,
- в качестве смазывающих веществ: диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота и ее магниевая и кальциевая соли, полиэтиленгликоль,
- в качестве связующих: алюмосиликат магния, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон,
- в качестве дезинтеграторов: агар, альгиновая кислота и ее натриевая соль, шипучие смеси.
Соединения комбинации могут вводиться одновременно, раздельно или последовательно. Соответствующие фармацевтические композиции могут предоставлять возможность немедленного или отстроченного высвобождения активных компонентов. Соединения комбинации, кроме того, могут вводиться в форме двух раздельных фармацевтических композиций, каждая из которых содержит один из активных компонентов, или в форме единственной фармацевтической композиции, в которой активные компоненты представлены в смеси.
Пригодная схема приема лекарственного средства изменяется в зависимости от пола, возраста и веса тела пациента, пути введения, природы злокачественного новообразования и любых ассоциированных лечений и находится в диапазоне от 25 мг до 1500 мг ингибитора Мс1-1 в неделю, более предпочтительно от 50 мг до 1400 мг в неделю.
Дозировка Мидостаурина для лечения AML, который является положительным по FLT3 мутации, составляет 50 мг перорально, два раза в сутки во время еды. Мидостаурин обеспечивается пациенту в комбинации со стандартной индукцией цитарабина и даунорубицина и консолидацией цитарабина. Эта доза может быть адаптирована, при необходимости, при комбинированном лечении с применением Соединения В.
В одном варианте осуществления, пероральное введение Мидостаурина осуществляется с помощью твердой формы. Дозированная форма Мидостаурина представляет собой мягкую желатиновую капсулу с 25 мг лекарственного вещества.
Пример 1: Влияние in vitro на активность каспазы 3.7 при комбинировании FLT3 ингибитора Соединения А (Мидостаурин) с ингибитором Мс1-1 Соединением В, в AML клеточных линиях Molml3 и MV-4-11.
Мы оценивали Мс1-1 и FLT3 ингибиторы в качестве монотерапии и в комбинации для определения их способности индуцировать апоптоз (то есть активацию Каспазы 3.7) в лейкемических клетках. Мы использовали две AML клеточные линии с FLT3-ITD мутацией (Molml3 и MV-4-11). Мы тестировали способность Соединений А и В активировать каспазу 3.7 в комбинациях и в качестве монотерапии. Соединение А в качестве монотерапии вызывает индукцию активности каспазы с максимальным повышением 33% в Molml3 и 24% в MV-4-11. Соединение В также индуцирует активность каспазы с максимальным повышением 87% a Molml3 и 89% a MV-4-11. Когда оба соединения комбинировали, то наблюдали синергетическую индукцию активности каспазы 3.7. Синергизм наблюдали в обеих клеточных линиях с оценкой синергизма 3,1 в обоих. Сильный синергизм был особенно очевидным при наиболее низких дозах Соединения В. Результаты представлены на Фигуре 1.
Методы
Оба соединения растворяли в 100% ДМСО (Sigma, номер по каталогу D2650) при концентрациях 10 мМ и хранили при -20°С до использования. Клеточную линию Molml3, используемую в этом исследовании, получали от Leibniz-Institut DSMZ (АСС 554) и MV-4-11 от Американской коллекции типовых клеток (АТСС® CRL-9591). Клеточные линии культивировали при 37°C в 5% CO2 инкубаторе, Molml3 в RPMI (Lonza, 12-702F) и MV-4-11 в IMDM (Hyclone, SH30228.01) среде, дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой (Seradigm, 1500-500). Клетки перевивали два раза в неделю и среду заменяли каждые 2-3 дня.
Активность каспазы 3.7 измеряли с помощью набора Caspase-Glo® 3/7 от Promega (G8092). 9000 клеток/лунку переносили в черные планшеты на 384 лунок с прозрачным дном (Greiner, №781091) в трех повторах с ростовой средой 30 мкл/лунку. В каждую лунку планшета на 384 лунки добавляли 10 мкл/лунку смеси соединений 4Х для лечения в течение 6 часов. Затем в каждую лунку добавляли 30 мкл/лунку реагентов Caspase-Glo® 3/7 на завершающей стадии и записывали люминесценцию на планшет-ридере Envision (Perkin Elmer). Измеренная люминесценция пропорциональна присутствующему количеству активности каспазы.
Для объективной оценки активности каспазы 3.7 при действии комбинации, а также для идентификации синергетического эффекта при всех возможных концентрациях, исследования осуществляли с "матрицей доз". Для этого использовали все возможные комбинации серийных разведений Соединения А и Соединения В.
"Матрица доз" Соединения А и Соединения В, состояла из следующего: оба соединения подвергали 1:3 серийному разведению 11 доз с наивысшей дозой 3 мкМ и понижали до отсутствия соединения в контроле. При исследованиях комбинаций, агенты применяли одновременно. Значения люминесцентного сигнала для лечения с применением каждого средства отдельно и комбинации сравнивали с соответствующими значениями нелеченных контролей. Процент активности каспазы 3.7 рассчитывали, используя следующее вычисление: (1-контроль/леченное соединением) × 100. Значения процента активности каспазы 3.7 для всех лунок рассчитывали, используя программное обеспечение Chalice (CombinatoRx, Cambridge MA) и Chalice Analyser, как описано в Lehar и др., Nature Biotechnology 2009, 27(7), 659-66. В этом исследовании, данные активности каспазы 3.7 анализировали вместо данных ингибирования роста клеток с аналогичными математическими протоколами. Активность каспазы 3.7 по сравнению с контролем представлена на панели, обозначенной как "Процент активности Каспазы3.7", и количество активности, превышающее ожидаемое количество, на панели, обозначенной как "Избыточная активность Леве"). Концентрации Соединения А представлены в нижней строке слева направо, а возрастающие концентрации Соединения В для крайнего левого столбца сверху вниз. Все оставшиеся точки на сетках представляют собой результаты от комбинации двух ингибиторов, которые соответствуют концентрациям отдельных агентов, обозначенным на двух осях. Анализ данных активности каспазы 3.7 осуществляли с использованием Chalice Analyser. Избыточную активность рассчитывали, используя модель синергизма Леве, в которой определяют влияние на активность каспазы 3.7 к такому, которое ожидали, если бы два лекарственных средства действовали дозо-аддитивным образом. Положительные числа представляют собой площади возрастающего синергизма. Интерпретации оценок синергизма были такими: SS ~ 0=Дозо-аддитивный, SS>1=Слабый Синергизм и SS>2=Синергизм.
ПРИМЕР 2: Комбинация ингибитора Мс1-1 Соединения С и Мидостаурина является синергетической в FLT3-ITD мутированных AML клетках, включая те, которые резистентны к ингибитору Bcl-2 Венетоклаксу и в первичных AML клетках
Материалы и методы
Фигура 2: Комбинированное нацеливание FLT3 и Mcl-1 является эффективным в FLT3-ITD AML первичных образцах. Анализ жизнеспособности клеток и Показатель аддитивности (ПА)
Первичные AML клетки получали от взятых образцов периферической крови, собранных от пациентов в М. D. Anderson Cancer Center с впервые диагностированным или рецидивирующим AML и высоким (>40%) количеством бластных клеток. После Фиколл-очистки, AML бласты (8×105/лунку) высевали в планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и 1×Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 приготавливали в виде 10 мМ маточных растворов в ДМСО и выдерживали при -80°С до анализов. Каждое лекарственное средство разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Контрольные клетки получали 100 мкл среды, содержащей ДМСО (объем ДМСО, соответствующий сумме объемов маточных растворов Мидостаурина и S63845, используемых для приготовления 4х растворов). Клетки инкубировали с лекарственными средствами, используемыми отдельно или в комбинации в течение 24 часов. Жизнеспособность клеток измеряли с помощью анализа люминесценции CellTiter-Glo (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки осторожно смешивали путем пипетирования и 35 мкл клеточной суспеНЗии переносили в белые непрозрачные планшеты на 96 лунок. После этого, в каждую лунку добавляли 80 мкл CellTiter-Glo реагента, разведенного при 1:3 в PBS, и клетки инкубировали в течение 30 минут в темноте на встряхивателе для планшетов. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Анализ комбинированных эффектов лекарственных средств осуществляли, используя показатель аддитивности (ПА), рассчитанный с помощью программного обеспечения CalcuSyn (BioSoft, Ferguson, МО, USA). ПА<1, 1 и>1 указывает на синергизм, аддитивный эффект и антагонизм, соответственно.
Фигуры 3А/3В: Мидостаурин индуцирует накопление BIM, которое способствует летальности Мидостаурин/Б63845 (Соединение С). Вестерн-блоттинг
Клетки (3×106/лунку) высевали в планшет на 6 лунок в 5 мл полной RPMI среды и подвергали воздействию Мидостаурина и S63845, которые вводили отдельно или в комбинации. Контрольные клетки получали ДМСО. Клетки инкубировали в течение 6 часов и затем собирали, два раза промывали в PBS и лизировали в RIPA буфере (ThermoFisher Scientific), дополненном коктейлем 1х ингибиторов протеазы и фосфатазы (ThermoFisher Scientific). Лизаты выдерживали на льду в течение 20 минут с вихревым перемешиванием каждые 5 минут, затем в течение короткого периода времени обрабатывали ультразвуком и центрифугировали при 13500 об./мин. в течение 15 минут. Супернатант собирали и содержание белка измеряли с помощью BSA анализа. Клеточные лизаты (30-50 мкг белка на лунку) разделяли путем электрофореза на 4%-20% градиенте заранее приготовленных додецилсульфат натрия-полиакриламидных гелей (Bio-Rad, Hercules, СА) и переносили на PVDF мембрану (Bio-Rad). Мембраны сначала инкубировали в Odyssey блокирующем буфере (Li-Cor, Lincon, Nebraska, USA) в течение 1 часа для блокирования неспецифического белкового связывания, затем с первичным антителом в течение ночи при 4°С, промывали с помощью TBST три раза, и инкубировали с IRDye-конъюгированным вторичным антителом (разведение 1:15000) в течение 1 часа при комнатной температуре. Мембраны сканировали, используя Odyssay Imaging System (Li-Cor).
Фигура 4: Комбинированное нацеливание FLT3 и Mcl-1 облегчает апоптоз. Анализ активности каспазы 3/7 для определения апоптоза
AML клетки или AML первичные бластные клетки (3×106/лунку) высевали в планшет на 6 лунок в 5 мл полной RPMI среды и подвергали воздействию Мидостаурина и S63845, которые вводили отдельно или в комбинации. Контрольные клетки получали ДМСО. Клетки инкубировали в течение 6 часов и затем 100 мкл клеточной суспеНЗии переносили в белый непрозрачный планшет на 96 лунок, смешивали с 100 мкл реагента Caspase-Glo3/7 (Promega) и инкубировали в темноте в течение 30 минут на встряхивателе для планшетов при комнатной температуре. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Изменения активности каспазы-3/7 после лечения с применением лекарственных средств нормировали в ДМСО отдельно. Оставшиеся клетки использовали для вестерн-блоттинга.
Фигура 5: Комбинированное нацеливание FLT3 и Mcl-1 облегчает апоптоз. Анализ аннексин-V/DAPI
AML бластные клетки (8×105/лунку) высевали в круглодонные планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и 1х Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Контрольные клетки получали 100 мкл среды, содержащей ДМСО (объем ДМСО соответствовал сумме объемов маточных растворов Мидостаурина и S63845, используемых для приготовления 4х растворов). Клетки инкубировали с лекарственными средствами, которые вводили отдельно или в комбинации в течение 24 часов. На следующий день, планшеты с клетками центрифугировали при 1500 об./мин. в течение 5 минут. После этого, клетки промывали один раз в PBS и ресуспендировали в 100 мкл Аннексин-V связывающего буфера, содержащего 0,3 мкл Аннексии-V-APC (BD Bioscience) и 5 мкл DAPI (2 мкг/мл). Клетки окрашивали в темноте в течение 20 минут, дополняли с помощью дополнительных 100 мкл Аннексин-V связывающего буфера и анализировали с применением BD LRSII проточного цитометра (Becton Dickinson). Аннексин-V-АРС положительные клетки идентифицировали, используя FlowJo программное обеспечение (LLC, Ashland, Oregon, USA).
Фигура б: Антилейкемический синергизм S63845 (Соединение С) и FLT3 TKi. Анализ жизнеспособности клеток
MV4-11 FLT3-ITD+/+и MOLM13 FLT3-ITD+/+ AML клетки (8×105/лунку) высевали в планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и lx Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Контрольные клетки получали 100 мкл среды, содержащей ДМСО (объем ДМСО соответствовал сумме объемов маточных растворов Мидостаурина и S63845, используемых для приготовления 4х растворов). Клетки инкубировали с лекарственными средствами, которые вводили отдельно или в комбинации в течение 24 часов. Жизнеспособность клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo люминесцентного анализа (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки осторожно смешивали путем пипетирования и 35 мкл клеточной суспензии переносили в белые непрозрачные планшеты на 96 лунок. После этого, в каждую лунку добавляли 80 мкл реагента CellTiter-Glo, разведенного при 1:3 в PBS, и клетки инкубировали в течение 30 минут в темноте на встряхивателе для планшетов. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Осуществляли анализ комбинированных эффектов лекарственных средств, используя показатель аддитивности (ПА), рассчитанный с помощью программного обеспечения CalcuSyn (BioSoft, Ferguson, МО, USA). ПА<1, 1 и>1 указывал на синергизм, аддитивный эффект и антагонизм, соответственно.
Фигуры 7 и 8: Антилейкемический синергизм S63845 и FLT3 TKi. Анализ еспособности клеток и BLISS индекс
MV4-11 FLT3-ITD+/+ клетки (8×105/лунку) высевали в планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и 1x Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Клетки обрабатывали в течение 24 часов с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Измеряли рост клеток, жизнеспособность измеряли с помощью CellTiter-Glo люминесцентного анализа (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки осторожно смешивали путем пипетирования и 35 мкл клеточной суспензии переносили в белые непрозрачные планшеты на 96 лунок. После этого, в каждую лунку добавляли 80 мкл реагента CellTiter-Glo, разведенного при 1:3 в PBS, и клетки инкубировали в течение 30 минут в темноте на встряхивателе для планшетов. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Рост клеток выражали в виде % клеток, обработанных ДМСО. Синергетические взаимодействия оценивали, используя модель независимости BLISS. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации >0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса <0 представляют собой антагонизм.
Фигура 9: Мидостаурин повышает митохондриальное примирование для апоптоза в FLT3-ITD клетках, подвергнутых воздействию S63845. Динамическое ВН3 профилирование
ВН3 профилирование осуществляли в черных планшетах на 384 лунки в соответствии с методом A. Letai (https://letailab.dana-farber.org/bh3-profiling.html). Вкратце, клетки (3×106/лунку) высевали в планшет на 6 лунок в 5 мл полной RPMI среды и подвергали воздействию Мидостаурина и S63845, которые вводили отдельно или в комбинации. Контрольные клетки получали ДМСО. Клетки инкубировали в течение 6 часов, собирали, два раза промывали в PBS и ресуспендировали в МЕВ буфере (150 мМ маннит, 10 мМ HEPES-KOH рН 7,5, 150 мМ KCl, 1 мМ EGTA, 1 мМ EDTA, 0,1% BSA, 5 мМ сукцинат) при конечной плотности 1×106/мл. Клетки (15 мкл) добавляли в планшет на 384 лунки, содержащий пептиды/ВН3 миметики и 15 мкл 0,002% дигитонина в МЕВ буфере. Клетки инкубировали в течение 1 часа в 25°С и после этого фиксировали в 10 мкл 4% формальдегида в PBS в течение 10 минут. Для остановки фиксации, добавляли 10 мкл N2 буфера (1,7М Tris, 1,25М Глицин рН 9,1) и клетки оставляли при комнатной температуре в течение 5 минут. После этого, клетки смешивали с 10 мкл 10х CytoC окрашивающего буфера (10% BSA, 2% Tween20 в PBS), содержащего антитело к Цитохрому С (Клон 6Н2.В4, меченный флуоресцентной меткой, BioLegend) при разведении 1:40 и окрашивали в течение ночи при 4°С. Высвобождение Цитохрома С измеряли с помощью проточной цитометрии.
Фигуры 10, 11, 12 и 13: Комбинация S63845 и Мидостаурина является эффективной в резистентных к Венетоклаксу AML клетках с FLT3-ITD, но не в FLT3-WT. Анализ жизнеспособности клеток и BLISS индекс в резистентных к Венетоклаксу AML клетках
Резистентные к Венетоклаксу клеточные линии (MOLM13 FLT3-ITD+/- и OCI-AML3 FLT3-WT), создавали путем подвергания клеток воздействию последовательно возрастающих концентраций венетоклакса. Клетки поддерживали общепринятым образом в полной RPMI среде, содержащей 1 мкМ венетоклакса. За 24 часов до тестирования влияния комбинации Мидостаурина и S63845 на жизнеспособность клеток, клетки культивировали в RPMI среде, не содержащей венетоклакс. После этого резистентные к Венетоклаксу клетки и их родительские аналоги высеивали в планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и lx Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Клетки обрабатывали в течение 24 часов с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Измеряли рост клеток, жизнеспособность измеряли с помощью CellTiter-Glo люминесцентного анализа (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки осторожно смешивали путем пипетирования и 35 мкл клеточной суспензии переносили в белые непрозрачные планшеты на 96 лунок. После этого, в каждую лунку добавляли 80 мкл реагента CellTiter-Glo, разведенного при 1:3 в PBS, и клетки инкубировали в течение 30 минут в темноте на встряхивателе для планшетов. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Рост клеток выражали в виде % клеток, обработанных ДМСО. Синергетические взаимодействия оценивали, используя модель независимости BLISS. Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации >0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса <0 представляют собой антагонизм.
Фигура 14: Предварительное исследование in vivo: AML FLT3-ITD ксенотрансплантат.AML-PDX модель
Для AML-PDX модели, самок мышей NSG (возраст 6 недель, The Jackson Laboratory) облучали 200 сГр и в/в инъецировали AML-PDX (1×106 клеток/100 мкл). Периферическую кровь собирали один раз в неделю путем отбора из ретроорбитального синуса и обрабатывали для изменения hCD45+ клеток с помощью проточной цитометрии, для подтверждения того, что развилась лейкемия. Когда прививание лейкемии достигло 2-10%, мышей разделяли на группы для лечения с применением наполнителя, Мидостаурина (75 мг/кг, один раз в день с помощью желудочного зонда), S63845 (40 мг/кг в/в один раз в неделю) или комбинации. Один раз в две недели собирали периферическую кровь путем отбора из ретроорбитального синуса и обрабатывали для измерения лейкемической нагрузки (hCD45+ клетки) путем проточной цитометрии.
Эксперименты, представленные на Фигурах 2-14, свидетельствуют о том, что комбинация ингибитора Mcl-1 Соединения С и Мидостаурина является синергетической в FLT3-ITD мутированных AML клетках, включая те клетки, которые резистентны к ингибитору Bcl-2 Венетоклаксу и в первичных AML клетках. Увеличенные уровни Bim и повышенное митохондриальное примирование в ответ на hBIM пептид после воздействия Мидостаурина свидетельствует о том, что Bim может играть функциональную роль в опосредованной Мидостаурин/863845 летальности.
ПРИМЕР 3: Анализ жизнеспособности клеток и BLISS индекса для Ba/F3 FLT3-ITD и FLT3-D835Y клеток
Мышиные Ba/F3 FLT3-ITD и FLT3-D835Y клетки (8×105/лунку) высевали в планшеты на 96 лунок в 100 мкл полной RPMI среды, содержащей 10% FBS (Sigma) и 1x Pen/Strep (Sigma). Мидостаурин и S63845 разводили в полной RPMI среде и вводили в виде 4х концентрированного раствора, приготовленного в 50 мкл среды. Контрольные клетки получали 100 мкл среды, содержащей ДМСО (объем ДМСО соответствовал сумме объемов маточных растворов Мидостаурина и S63845, используемых для приготовления 4х растворов). Клетки инкубировали с лекарственными средствами, которые вводили отдельно или в комбинации в течение 24 часов. Жизнеспособность клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo люминесцентного анализа (Promega) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки осторожно смешивали путем пипетирования и 35 мкл клеточной суспензии переносили в белые непрозрачные планшеты на 96 лунок. После этого, в каждую лунку добавляли 80 мкл реагента CellTiter-Glo, разведенного при 1:3 в PBS, и клетки инкубировали в течение 30 минут в темноте на встряхивателе для планшетов. Люминесценцию записывали, используя Tekan планшет-ридер (Infinite m200 pro). Осуществляли анализ комбинированных эффектов лекарственных средств, используя показатель аддитивности (ПА), рассчитанный с помощью программного обеспечения CalcuSyn (BioSoft, Ferguson, МО, USA). ПА<1, 1 и>1 указывал на синергизм, аддитивный эффект и антагонизм, соответственно.
Результаты
На Фигурах 15 и 16 представлены синергетические взаимодействия между S63845 и Мидостаурином в мышиных Ba/F3 FLT3-ITD клетках, определенные с помощью синергизма лекарственных средств на модели независимости увеличенного размера BLISS. Клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Рост клеток оценивали через 24 часа (тепловая карта, левая панель). Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации >0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса<0 представляют собой антагонизм.
На Фигурах 17 и 18 представлены синергетические взаимодействия между S63845 и Мидостаурином в мышиных Ba/F3 FLT3-D835Y клетках, определенных с помощью синергизма лекарственных средств на модели независимости увеличенного размера BLISS. Клетки обрабатывали с применением девяти 2-х кратных серийных разведений каждого соединения, либо индивидуально или во всех возможных комбинациях в шахматном порядке. Рост клеток оценивали через 24 часа (тепловая карта, левая панель). Значения BLISS индекса для каждой дозы комбинации>0 представляют собой синергизм, в то время как значения BLISS индекса<0 представляют собой антагонизм.
Комбинация S63845 и Мидостаурин проявляет хорошо выраженный синергизм в мышиных Ba/F3 клетках, экспрессирующих либо FLT3-ITD или FLT3-D835Y точечные мутации в пределах домена тирозинкиназы (TKD) из FLT3. Последнее наблюдение свидетельствует о том, что комбинация 863845/Мидостаурин может обеспечивать существенную эффективность в FLT3-ITD мутантах даже в присутствии FLT3 TKD мутаций, что было клинически показано для придания резистентности к лечению с применением FLT3 ингибитора.
Claims (22)
1. Комбинация для лечения острого миелоидного лейкоза
(a) мидостаурина или его фармацевтически приемлемой соли, или его комплекса, или его сокристалла, или его сольвата, включая гидрат, и
(б) ингибитора Mcl-1, который представляет собой Соединение B: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или Соединение C: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту,
или их энантиомеры, диастереоизомеры, атропизомеры, или их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, в эффективном количестве для одновременного, последовательного или раздельного применения.
2. Комбинация по п. 1, где ингибитор Mcl-1 представляет собой Соединение B: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(4-фторфенил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[2-(2-метоксифенил)пиримидин-4-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль.
3. Комбинация по п. 1, где ингибитор Mcl-1 представляет собой Соединение C: (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-хлор-2-метил-4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]фенил}-6-(5-фторфуран-2-ил)тиено[2,3-d]пиримидин-4-ил]окси}-3-(2-{[1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-5-ил]метокси}фенил)пропановую кислоту, или ее фармацевтически приемлемую соль.
4. Комбинация по одному из пп. 1-3, которая дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное противораковое средство, например цитарабин и / или даунорубицин.
5. Комбинация по одному из пп. 1-4 в форме комбинации с нефиксированной дозой.
6. Фармацевтическая композиция для лечения острого миелоидного лейкоза, содержащая комбинацию по одному из пп. 1-5 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
7. Применение комбинации по одному из пп. 1-5 для приготовления лекарственного средства для лечения острого миелоидного лейкоза.
8. Применение по п. 7, где Соединение B вводят внутривенно и Мидостаурин вводят перорально.
9. Применение по п. 7 или 8, где комбинацию применяют в медицине.
10. Применение по п. 7, где острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3 мутацию.
11. Применение по п. 10, где острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3-ITD мутацию.
12. Применение по п. 10, где острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3-TKD мутацию.
13. Применение по п. 12, где указанная FLT3-TKD мутация включает FLT3-D835Y или FLT3-F691 мутации в пределах домена тирозинкиназы (TKD) из FLT3.
14. Применение по одному из пп 10-13, где острый миелоидный лейкоз резистентен к предшествующей терапии.
15. Применение по п. 14, где острый миелоидный лейкоз резистентен к одному или нескольким соединениям, выбранным из венетоклакса, децитабина, даунорубицина и цитарабина.
16. Применение по п. 15, где острый миелоидный лейкоз резистентен к венетоклаксу.
17. Применение по п. 11, где указанный острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3-ITD мутацию, и указанный острый миелоидный лейкоз резистентен к венетоклаксу.
18. Применение по одному из пп. 9-16, где Мидостаурин и Соединение B обеспечены в количествах, которые являются синергетически эффективными для лечения острого миелоидного лейкоза.
19. Применение по п. 10, где острый миелоидный лейкоз присутствует у пациентов, несущих FLT3-ITD мутацию в присутствии FLT3-TKD мутации.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/767,007 | 2018-11-14 | ||
| US62/824,515 | 2019-03-27 | ||
| US62/912,160 | 2019-10-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021116433A RU2021116433A (ru) | 2022-12-15 |
| RU2818453C2 true RU2818453C2 (ru) | 2024-05-02 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015097123A1 (en) * | 2013-12-23 | 2015-07-02 | Les Laboratoires Servier | New thienopyrimidine derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207226A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New aminoacid derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207217A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New bicyclic derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207225A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New hydroxyester derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207216A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New hydroxyacid derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2017125224A1 (en) * | 2016-01-19 | 2017-07-27 | Les Laboratoires Servier | New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015097123A1 (en) * | 2013-12-23 | 2015-07-02 | Les Laboratoires Servier | New thienopyrimidine derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207226A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New aminoacid derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207217A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New bicyclic derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207225A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New hydroxyester derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2016207216A1 (en) * | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Les Laboratoires Servier | New hydroxyacid derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| WO2017125224A1 (en) * | 2016-01-19 | 2017-07-27 | Les Laboratoires Servier | New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| STONE R.M. et al. Midostaurin plus Chemotherapy for Acute Myeloid Leukemia with a FLT3 Mutation // New England Journal of Medicine, 2017, 377(5), р. 454-464. * |
| ХАРКЕВИЧ Д.А. Фармакология: Учебник, 2010, 10-е издание, стр.72-82. Малая медицинская энциклопедия, т.5, Москва, "Медицина", 1996 г., стр. 90-96. Краткий курс молекулярной фармакологии под ред. П.В. Сергеева, М., 1975, с.10. ХОЛОДОВ Л.Е. и др. Клиническая фармакокинетика, М., "Медицина", 1985, с. 83-98, 134-138, 160, 378-380. ВЕНГЕРОВСКИЙ А.И. Фармакологическая несовместимость // Бюллетень сибирской медицины, 2003, N. 3, с. 49-56. TALLARIDA R.J. et al. Quantitative Methods for Assessing Drug Synergism // Genes & Cancer, 2011, V. 2, p. 1003-1008, URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3379564/. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2757373C2 (ru) | Комбинированная терапия противоопухолевым алкалоидом | |
| CN105705148B (zh) | 使用普那布林和紫杉烷的组合的癌症疗法 | |
| CZ305799B6 (cs) | Kombinace analogů epothilonu a chemoterapeutických činidel pro léčení proliferačních nemocí | |
| KR20200083532A (ko) | 적어도 1종의 스플라이세오솜 조정제, 및 bcl2 억제제, bcl2/bclxl 억제제 및 bclxl 억제제로부터 선택된 적어도 1종의 억제제를 포함하는 조합물 및 사용 방법 | |
| KR20220024639A (ko) | 백혈병 또는 골수이형성 증후군을 치료하기 위한 베네토클락스, 길테리티닙, 미도스타우린 또는 다른 화합물과 조합된 아자시티딘 | |
| KR20180014834A (ko) | 카보플라틴을 함유하는 조성물 및 용도 | |
| TW201127384A (en) | Therapeutic combination comprising a Cdc7 inhibitor and an antineoplastic agent | |
| KR20230113594A (ko) | Pik3ca 돌연변이 암을 치료하기 위한 병용 요법 | |
| BR112020011167A2 (pt) | composição e método para tratar linfoma de célula t periférico e linfoma de célula t cutâneo | |
| JP2010532782A (ja) | メラノーマの治療 | |
| EP3880207B1 (en) | Combination of a mcl-1 inhibitor and midostaurin, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| CN110314222B (zh) | 硼替佐米和帕比司他或伏立诺他的组合物在制备治疗耐药型mll白血病的药物中的应用 | |
| AU2018288520B2 (en) | Combination of a Mcl-1 inhibitor and a standard of care treatment for hematologic cancers, uses and pharmaceutical compositions thereof | |
| RU2818453C2 (ru) | Комбинация ингибитора mcl-1 и мидостаурина, ее применения и фармацевтические композиции | |
| JP7493503B2 (ja) | Ｍｃｌ－１阻害剤とミドスタウリンとの組み合わせ、その使用及び医薬組成物 | |
| EA044971B1 (ru) | Комбинация ингибитора mcl-1 и мидостаурина, ее применения и фармацевтические композиции | |
| RU2763544C2 (ru) | Комбинация mcl-1 ингибитора и таксанового соединения, их применения и фармацевтические композиции | |
| JP7447013B2 (ja) | １，２－ナフトキノン誘導体化合物を含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物 | |
| RU2783239C2 (ru) | Комбинация, включающая по меньшей мере один модулятор сплайсосомы и по меньшей мере один ингибитор, выбранный из ингибиторов bcl2, ингибиторов bcl2/bclxl и ингибиторов bclxl, а также способы применения | |
| TWI674094B (zh) | 治療或緩解慢性骨髓性白血病用之醫藥組合物 |