RU2817061C1 - Способ неинвазивной оценки рецептивности эндометрия при экстракорпоральном оплодотворении - Google Patents
Способ неинвазивной оценки рецептивности эндометрия при экстракорпоральном оплодотворении Download PDFInfo
- Publication number
- RU2817061C1 RU2817061C1 RU2023127151A RU2023127151A RU2817061C1 RU 2817061 C1 RU2817061 C1 RU 2817061C1 RU 2023127151 A RU2023127151 A RU 2023127151A RU 2023127151 A RU2023127151 A RU 2023127151A RU 2817061 C1 RU2817061 C1 RU 2817061C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- endometrial receptivity
- mig
- endometrial
- interferon
- receptivity
- Prior art date
Links
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 title claims abstract description 63
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 238000003744 In vitro fertilisation Methods 0.000 title abstract 4
- 102100036170 C-X-C motif chemokine 9 Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 101710085500 C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 claims abstract description 35
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 31
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 claims abstract description 10
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 claims abstract 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 24
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 claims description 23
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 claims description 23
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 claims description 19
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 19
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 abstract description 37
- 238000012546 transfer Methods 0.000 abstract description 30
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 abstract description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 10
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 22
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 15
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 13
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 10
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 10
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 9
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 8
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 7
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 7
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 4
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 4
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 3
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 3
- 101100369992 Homo sapiens TNFSF10 gene Proteins 0.000 description 3
- 102100020880 Kit ligand Human genes 0.000 description 3
- 101710177504 Kit ligand Proteins 0.000 description 3
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 3
- 108700012411 TNFSF10 Proteins 0.000 description 3
- 102100024598 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Human genes 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 3
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 3
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 101001027327 Bos taurus Growth-regulated protein homolog alpha Proteins 0.000 description 2
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 2
- 102000016950 Chemokine CXCL1 Human genes 0.000 description 2
- 102000006573 Chemokine CXCL12 Human genes 0.000 description 2
- 108010008951 Chemokine CXCL12 Proteins 0.000 description 2
- 102000004240 Glycodelin Human genes 0.000 description 2
- 108010081520 Glycodelin Proteins 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 2
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002650 habitual effect Effects 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000007477 logistic regression Methods 0.000 description 2
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000028685 Asherman syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010081589 Becaplermin Proteins 0.000 description 1
- 102100021936 C-C motif chemokine 27 Human genes 0.000 description 1
- 101710112538 C-C motif chemokine 27 Proteins 0.000 description 1
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 1
- 101710155834 C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 1
- 108700012434 CCL3 Proteins 0.000 description 1
- 102000000013 Chemokine CCL3 Human genes 0.000 description 1
- 102000001326 Chemokine CCL4 Human genes 0.000 description 1
- 108010055165 Chemokine CCL4 Proteins 0.000 description 1
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 1
- 102000006579 Chemokine CXCL10 Human genes 0.000 description 1
- 108010008978 Chemokine CXCL10 Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 208000002777 Gynatresia Diseases 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 1
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 238000011869 Shapiro-Wilk test Methods 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 208000032095 Uterine synechiae Diseases 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 208000036878 aneuploidy Diseases 0.000 description 1
- 231100001075 aneuploidy Toxicity 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 102000009634 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040001669 interleukin-1 receptor antagonist activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 1
- 230000009984 peri-natal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000003762 quantitative reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000005186 women's health Effects 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике и репродуктивной медицине, и может быть использовано для неинвазивной оценки рецептивности эндометрия в текущем менструальном цикле при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО). Осуществляют забор менструальной крови, определение уровней общего белка, интерферон-γ-индуцируемого белка 10 (IP-10) и монокина, индуцируемого интерфероном-γ (MIG), и определение индекса рецептивности эндометрия. При значении индекса рецептивности эндометрия больше или равно 1,1 пациентку относят к группе высокой рецептивности эндометрия, а при значении менее 1,1 – к группе низкой рецептивности эндометрия. Способ обеспечивает отнесение пациентки с бесплодием, проходящей цикл ЭКО, к группе высокой или низкой рецептивности эндометрия с определением вероятности успешного исхода переноса эмбриона высокого качества за счет анализа уровней сигнальных молекул в менструальной крови. 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к области медицины, в частности к клинической лабораторной диагностике в области репродуктивной медицины, и может быть использовано для прогнозирования исхода переноса эмбриона высокого качества при экстракорпоральном оплодотворении.
Бесплодие определяется как невозможность зачатия в течение 1 года регулярных половых незащищенных актов (или в течение 6 месяцев в том случае, если женщина моложе 35 лет). По всему миру с данной проблемой сталкивается около 15% пар репродуктивного возраста; мужской фактор является наиболее значимым примерно в половине случаев [Sun, H. Global, Regional, and National Prevalence and Disability-Adjusted Life-Years for Infertility in 195 Countries and Territories, - 1990-2017: Results from a Global Burden of Disease Study, - 2017 / H. Sun [et al.] // Aging. - 2019. - Vol. 11, N 23. - P. 10952-10991]. Бесплодие, как и сам процесс его лечения, неизбежно оказывают влияние на качество жизни, вызывая финансовые трудности, депрессию, социальный дискомфорт.
В настоящее время для борьбы с бесплодием доступны вспомогательные репродуктивные технологии, в частности экстракорпоральное оплодотворение. Ежегодно совершается около 2 миллионов подобных процедур по всему миру, из которых лишь ~25% приводят к успешному исходу беременности [Mouzon, J. de International committee for monitoring assisted reproductive technologies world report: Assisted reproductive technology - 2012 / J. de Mouzon [et al.] // Human Reproduction. - 2020. - Vol. 35, N 8. - P. 1900-1913]. Учитывая их высокую стоимость процедур, а также возможные нежелательные явления, связанные с высокой экзогенной гормональной нагрузкой, разработка подходов к предсказанию исходов подобных циклов представляется крайне актуальной.
Известно, что низкое качество эмбриона ответственно за ~30% неудачных имплантаций [Oron, G. The association between embryo quality and perinatal outcome of singletons born after single embryo transfers: A pilot study / G. Oron [et al.] // Human Reproduction. - 2014. - Vol. 29, N 7. - P. 1444-1451]. Введение в клиническую практику морфологического и преимплантационного генетического тестирования эмбрионов позволило в некоторой степени повысить шансы на успешную имплантацию при ЭКО, однако частота успешных исходов данных процедур все равно остается субоптимальной, именно поэтому необходимо обратить внимание на вторую, более значимую, причину нарушения имплантации - пониженную рецептивность эндометрия [Baltaci, V. Relationship between embryo quality and aneuploidies / V. Baltaci [et al.] // Reproductive BioMedicine Online. - 2006. - Vol. 12, N 1. - P. 77-82].
Рецептивность эндометрия (РЭ) - это способность эндометрия принять эмбрион и обеспечить для него оптимальные трофический статус и микроокружение. Другими словами, РЭ это величина эмбрионально-эндометриального взаимодействия. Однако в настоящее время не существует общепризнанного подхода к оценке рецептивности эндометрия вне констатации факта наступления/ненаступления беременности.
Из уровня техники известны подходы к оценке рецептивности эндометрия, основанные на ультразвуковых методах исследования [Jinno, M. Measurement of endometrial tissue blood flow: A novel way to assess uterine receptivity for implantation / M. Jinno [et al.] // Fertility and Sterility. - 2001. - Vol. 76, N 6. - P. 1168-1174; Довгань, А. А., Зиганшина, М. М., Долгушина, Н. В. Современные тренды в поиске маркеров рецептивности эндометрия - от отдельных параметров к комплексному подходу / А. А. Довгань, М. М. Зиганшина, Н. В. Долгушина // Акушерство и Гинекология. - 2020. - N 11. - C. 26-32], подразумевающие определение таких пространственных параметров эндометрия, как толщина, объем и паттерн. Сравнительная простота изучения ультразвуковых характеристик эндометрия позволила получить подобным подходам к оценке рецептивности эндометрия широкое распространение в научных исследованиях. Однако стоит отметить, что данные параметры являются суррогатными по отношению к молекулярному состоянию эндометрия и соответственно его способности принять имплантируемый эмбрион. Таким образом, в недавнем мета-анализе L. Craciunas и соавт. было продемонстрировано, что хоть и все обсужденные выше ультразвуковые параметры эндометрия в определенных подгруппах пациентов с бесплодием оказываются статистически значимо ассоциированы с исходом экстракорпорального оплодотворения, их прогностический потенциал оказывается предельно низок (площадь под ROC-кривой - 0,6), что существенно ограничивает оправданность принятия клинических решений, основываясь на данных ультразвукового исследования [Craciunas, L. Conventional and modern markers of endometrial receptivity: A systematic review and meta-analysis / L. Craciunas [et al.] // Human Reproduction Update. - 2019. - Vol. 25, N 2. - P. - 202-223].
Из уровня техники также известны способы оценки рецептивности эндометрия, основанные на анализе экспрессии ряда генов, связанных с процессом имплантации [Патент WO2010010213, Gene expression profile as an endometrial receptivity marker; Enciso, M. Development of a new comprehensive and reliable endometrial receptivity map (ER Map/ER Grade) based on RT-qPCR gene expression analysis / M. Enciso [et al.] // Human Reproduction. - 2018. - Vol. 33, N 2. - P. 220-228] и подразумевающие исследование биопсийного материала эндометрия. Для оценки уровней экспрессии предлагается использование полимеразной цепной реакции в реальном времени с обратной транскрипцией или секвенирования нового поколения. Ключевым недостатком данных способов является тот факт, что сбор биоматериала (с помощью биопсии эндометрия), необходимого для проведения анализа, возможен лишь вне цикла переноса эмбриона. Считается, что эндометрий женщин, проходящих цикл ВРТ, является крайне хрупкой системой, поэтому какой-либо инвазивный сбор биоматериала (особенно в момент близкий к имплантации) представляется недопустимым [Sar-Shalom Nahshon, C. The impact of intentional endometrial injury on reproductive outcomes: A systematic review and meta-analysis / C. Sar-Shalom Nahshon [et al.] // Human Reproduction Update. - 2019. - Vol. 25, N 1. - P. 95-113]. Таким образом, в соответствии с данными способами результаты анализа экспрессии генов в биопсийном материале эндометрия в нецелевом цикле экстраполируются на непосредственный цикл переноса эмбриона, тогда как нет доказательств сохранности как параметров экспрессии тех или иных связанных с процессом имплантации генов, так и рецептивности эндометрия в целом от цикла к циклу. Также для данных способов неизвестен реальный прогностический потенциал в связи с прекращением основного клинического исследования (NCT01954758).
Из уровня техники также известен способ оценки рецептивности эндометрия, основанный на анализе экспрессии нескольких генов, связанных с процессом имплантации, методом количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией [Camargo-Díaz, F. Colony stimulating factor-1 and leukemia inhibitor factor expression from current-cycle cannula isolated endometrial cells are associated with increased endometrial receptivity and pregnancy / F. Camargo-Díaz [et al.] // BMC Women’s Health. - 2017. - Vol. 17, N 1. - 63], подразумевающий анализ остаточных клеток на катетере для переноса эмбриона. В соответствии с данным способом сбор биоматериала выполняется в потенциально самый информативный момент менструального цикла, а именно в момент переноса эмбриона. Однако это же и является основным недостатком данного способа. С клинической точки зрения получение прогностических данных в отношении исхода экстракорпорального оплодотворения после проведения данной процедуры является бессмысленным, так как после данного этапа принятие каких-либо клинических решений, в частности возможности отложить процедуру имплантации до наступления цикла с оптимальной рецептивностью (что позволит избежать выполнения заведомо неудачной имплантации, тем самым сохранив эмбрион высокого качества, уменьшив финансовую нагрузку, устранив необходимость в избыточной гормональной стимуляции при подготовке к имплантации), невозможно.
Из уровня техники также известен способ оценки рецептивности эндометрия, основанный на анализе уровня гликоделина на второй день после овуляции в смывах, полученных из полости матки [Bentin-Ley, U. Glycodelin in endometrial flushing fluid and endometrial biopsies from infertile and fertile women / U. Bentin-Ley [et al.] // European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. - 2011. - Vol. 156, N 1. - P. 60-66]. Основным недостатком данного способа является тот факт, что сбор смывов из полости матки путем орошения ее физиологическим раствором является неоднородной и маловоспроизводимой процедурой, так как могут происходить потери жидкости, в том числе через фаллопиевы трубы, что может затруднять сравнение результатов между разными пациентами. Данный факт нашел отражение в низком прогностическом потенциале данного способа (площадь под ROC-кривой - 0,58).
Таким образом, в настоящее время существует необходимость в разработке способа неинвазивной оценки рецептивности эндометрия у пациенток в цикле экстракорпорального оплодотворения, лишенного всех вышеперечисленных недостатков.
Раскрытие изобретения
Техническая проблема, решаемая посредством заявляемого изобретения, заключается в необходимости разработки способа неинвазивной оценки рецептивности эндометрия при экстракорпоральном оплодотворении, учитывающим ограниченную воспроизводимость забора биоматериала из матки и обладающим высоким прогностическим потенциалом в отношении наступления беременности в результате переноса эмбриона.
Техническим результатом заявляемого изобретения является разработка способа неинвазивной оценки рецептивности эндометрия при экстракорпоральном оплодотворении, обладающего высоким прогностическим потенциалом в отношении наступления беременности в результате переноса эмбриона, осуществляемого в первые дни менструального цикла, в котором производится имплантация зародыша, тем самым обеспечивая возможность своевременного принятия клинических решений, в частности отмены переноса эмбриона до наступления цикла с оптимальной рецептивностью эндометрия, что позволит сохранить эмбрионы высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше), избежать проведения гормональной стимуляции в заведомо неблагоприятном для имплантации цикле, а также снизить финансовую нагрузку. Также техническим результатом является отнесение пациентки с бесплодием, проходящей цикл экстракорпорального оплодотворения, к группе высокой или низкой рецептивности эндометрия с определением вероятности успешного исхода переноса эмбриона высокого качества, основанное на анализе уровней сигнальных молекул в менструальной крови, собранной из полости матки, и характеризующееся неинвазивностью, возможностью нормализации значений молекулярных биомаркеров в биоматериале для нивелирования неоднородности процедуры забора биоматериала из полости матки, осуществимостью непосредственно в начале целевого цикла переноса эмбриона и высокой прогностической ценностью при чувствительности 90% и специфичности 67% (площадь под ROC-кривой 0,822).
Техническая проблема решается способом неинвазивной оценки рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием при экстракорпоральном оплодотворении, включающим:
- проведение забора менструальной крови (не менее 0,1 мл) из полости матки в любой день менструации в начале цикла переноса эмбриона, предпочтительно на второй или третий ввиду наибольшей обильности выделений в эти дни, с использованием любого известного из уровня техники катетера диаметром от 2 до 10 по Французской шкале диаметров катетеров (Fr), предпочтительно с диаметром 6,6 Fr для обеспечения отсутствия закупорки катетера и безболезненности процедуры (например, с использованием катетера для переноса эмбрионов Guardia Access Transfer Catheter K-JETS-7019, Cook Medical Inc., Блумингтон, Индиана, США);
- центрифугирование менструальной крови с последующем отделением надосадочной жидкости на любом известном из уровня техники оборудовании при скорости центрифугирования от 2000 об./мин до 14000 об./мин в течение от 1 до 30 минут, предпочтительно при 5500 об./мин в течение 10 мин для достижения оптимальной сепарации клеточного и неклеточного компонентов биоматериала (например, с использованием центрифуги Pico 21 Microcentrifuge, Thermo Fisher Scientific, Уолтэм, Массачусетс, США);
- измерение уровня общего белка в надосадочной жидкости менструальной крови любом известным из уровня техники способом (например, с использованием автоматизированного биохимического анализатора AU480, Beckman Coulter, Бреа, Калифорния, США);
- измерение уровней цитокинов интерферон-γ-индуцируемого белка 10 (англ. - Interferon-γ induced protein IP-10) и монокина, индуцируемого интерфероном-γ (англ. - Monokine induced by Interferon-γ, MIG), в надосадочной жидкости менструальной крови любым известным из уровня техники способом (например, с использованием набора реактивов для мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа с магнитными частицами Bio-Plex Custom Assay IP-10, MIG на приборе Bio-Plex 200 (Bio-Rad Laboratories Inc., Геркулес, Калифорния, США);
- нормализацию измеренных в надосадочной жидкости менструальной крови уровней цитокинов IP-10 и MIG по уровню общего белка путем деления значений их измерения на значения измерений уровня общего белка в соответствующем образце биоматериала;
- расчет значения индекса рецептивности эндометрия (I ER ) в соответствии со следующей формулой:
I ER = 0,054 × С IP -10 + 0,018 × С MIG - 0,005,
где I ER - индекс рецептивности эндометрия; С IP -10 - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина IP-10; С MIG - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина MIG; 0,054, 0,018 и 0,005 - константы;
- отнесение пациентки к группе высокой рецептивности эндометрия при значении индекса рецептивности эндометрия больше или равно 1,1;
- отнесение пациентки к группе низкой рецептивности эндометрия при значении индекса рецептивности эндометрия менее 1,1.
Краткое описание чертежей
Изобретение поясняется следующими чертежами.
На фиг. 1 представлена диаграмма «ящики с усами» для сравнения уровней цитокина IP-10 в надосадочной жидкости менструальной крови пациенток, достигших и не достигших беременности в результате переноса эмбриона высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше) при экстракорпоральном оплодотворении. По оси Х отложена принадлежность данных к группе. По оси Y отложена концентрация цитокина, представленная в виде пг цитокина на мг общего белка. Показано наличие статистически значимых различий; р-значение было рассчитано с использованием U-критерия Манна-Уитни.
На фиг. 2 представлена диаграмма «ящики с усами» для сравнения уровней цитокина MIG в надосадочной жидкости менструальной крови пациенток, достигших и не достигших беременности в результате переноса эмбриона высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше) при экстракорпоральном оплодотворении. По оси Х отложена принадлежность данных к группе. По оси Y отложена концентрация цитокина, представленная в виде пг цитокина на мг общего белка. Показано наличие статистически значимых различий; р-значение было рассчитано с использованием U-критерия Манна-Уитни.
На фиг. 3 представлена ROC-кривая для индекса рецептивности эндометрия. По оси Х отложена разность единицы и специфичности для прогнозирования наступления или ненаступления беременности в результате переноса эмбриона высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше) при экстракорпоральном оплодотворении. По оси Y отложена чувствительность для прогнозирования наступления или ненаступления беременности в результате процедуры. Каждая точка на кривой соответствует определенному пороговому значению индекса рецептивности эндометрия. Площадь под ROC-кривой составляет 0,822.
Осуществление изобретения
С целью разработки способа неинвазивной оценки рецептивности эндометрия у пациенток с бесплодием при экстракорпоральном оплодотворении было проведено клиническое исследование, в которое было включено 40 пациенток, которым был запланирован криоперенос эмбриона (как часть программы экстракорпорального оплодотворения). Критериями исключения пациенток из исследования были прием антибиотиков или диагностированные инфекции, передающиеся половым путем за 3 месяца до включения в исследование, а также наличие онкологических заболеваний. Все процедуры в рамках вспомогательных репродуктивных технологий были выполнены в строгом соответствии с национальными клиническими рекомендациями (№ 15-4/И/2-1908 от 05.03.2019 утв. МЗ РФ). Перенос эмбрионов проводился только для бластоцист качества 2ВВ по Гарднеру или выше. Пациентки были разделены на две группы в зависимости от исхода переноса эмбриона. Таким образом, 19 пациенток составили группу «беременность наступила», тогда как 21 - группу «беременность не наступила». Клиническая беременность устанавливалась по уровню человеческого хорионического гонадотропина с последующим ультразвуковым подтверждением наличия одного или более плодных яиц. Также производился контроль пролонгирования беременности до 12 недель. Впрочем, оно было достигнуто абсолютно у всех пациенток из группы «беременность наступила», поэтому данный параметр не учитывался при последующей обработке данных. Клинико-демографические характеристики участниц исследования представлены в Таблице 1. При применении поправки на множественные сравнения группы не различались по представленным параметрам (p>0,05).
| Таблица 1 Клинико-демографическая характеристика участниц исследования |
||
| Показатель | Группа «беременность наступила» | Группа «беременность не наступила» |
| Возраст, лет | 34,7 (19,0-50,0)* | 38,3 (31,0-51,0)* |
| Индекс массы тела, кг/м2 | 21,7 (17,3-30,5)* | 21,9 (17,3-27,9)* |
| Привычное нарушение имплантации** | 1/19 | 5/21 |
| Привычное невынашивание** | 0/19 | 1/21 |
| Детали ВРТ | ||
| ЭКО | 12/19 | 9/21 |
| ЭКО/ИКСИ | 7/19 | 14/21 |
| Крио-ПЭ | 19/19 | 21/21 |
| Цикл с заместительной гормональной терапией | 18/19 | 21/21 |
| Естественный цикл | 1/19 | 0/21 |
| Преимплантационное генетическое тестирование | 6/19 | 13/21 |
| Факторы бесплодия: | ||
| Трубно-перитонеальный | 5/19 | 3/21 |
| Эндометриоз | 3/19 | 8/21 |
| Снижение овариального резерва | 4/19 | 12/21 |
| Эндокринный | 1/19 | 0/21 |
| Неясный генез | 2/19 | 3/21 |
| Маточный | 0/19 | 3/21 |
| - внутриматочные синехии | 0/19 | 1/21 |
| - рубцы на матке | 0/19 | 2/21 |
| Примечание: * Данные представлены как среднее (разброс). ** Данные состояния устанавливались при наличии 3 и в анамнезе. ЭКО - экстракорпоральное оплодотворение; ИКСИ - интрацитоплазматическая инъекция смерматозоида в яйцеклетку; ПЭ - перенос эмбриона. |
||
В рамках исследования менструальная кровь собиралась на 2-3-й дни цикла криопереноса эмбриона непосредственно из полости матки с использованием катетера для переноса эмбриона Guardia Access Transfer Catheter K-JETS-7019 (Cook Medical Inc., Блумингтон, Индиана, США), соединенного со шприцем. Данная процедура была полностью безболезненна. Объем аспирируемой менструальной крови было весьма гетерогенным и большинстве случаев составлял не более 0,5 мл. Из-за высокой вязкости биоматериала катетер зачастую забивался и нуждался в промывке стерильным физиологическим раствором (0,2 мл). Образцы менструальной крови центрифугировались при 5500 об./мин в течение 10 мин. Супернатант переносился в отдельные пробирки. И супернатант, и осадок менструальной крови хранились при температуре минус 80°С.
После размораживания менструальный супернатант доводился стерильным физиологическим раствором до объема 0,4 мл при необходимости, а затем разбавлялся 1:1 тем же раствором. Анализ цитокинов, хемокинов и факторов роста в супернатанте менструальной крови проводился с использованием набора реактивов для мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа с магнитными частицами Bio-Plex Pro™ Human Cytokine Screening 48-Plex на приборе Bio-Plex 200 (Bio-Rad Laboratories Inc., Геркулес, Калифорния, США). Данная панель включала следующие аналиты: FGF; Eotaxin; G-CSF; GM-CSF; M-CSF; IFN-γ; IFN-α2; IL-1β; IL-1ra; IL-1α; IL-2Rα; IL-3; IL-12 (p40); IL-16; IL-2; IL-4; IL-5; IL-6; IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; IL-12 (p70); IL-13; IL-15; IL-17A; IL-18; GRO-α; HGF; LIF; MCP-1; MCP-3; IP-10; MIG; NGF-β; SCF; SCGF-β; SDF-1α; MIP-1α; MIP-1β; PDGF-BB; RANTES; TNF-α; TNF-β; VEGF; CTACK; TRAIL.
Из-за высокой вариабельности исхода забора менструальной крови (в первую очередь, неизвестное соотношение крови к эндометриальному секрету) уровни всех анализируемых иммунных факторов нормализовались по общему белку и представлялись как пг аналита на мг общего белка. Уровень общего белка анализировался на автоматизированном биохимическом анализаторе AU480 (Beckman Coulter, Бреа, Калифорния, США). В части образцов менструального супернатанта были видимые признаки гемолиза разной степени, уровни гемоглобина в каждом образце определялись спектрофотометрически на приборе Multiskan GO (Thermo Fisher Scientific Inc., Уолтем, Массачусетс, США), чтобы оценить его влияние на результаты анализа сигнальных молекул.
Статистический анализ был осуществлен в компьютерной программе IBM SPSS Statistics 26.0 (IBM, Армонк, Нью-Йорк, США). Нормальность распределения была оценена с использованием критерия Шапиро-Уилка. После установления отсутствия нормального распределения во всех выборках сравнение переменных было осуществлено с помощью непараметрических критериев. U-критерий Манна-Уитни был использован для сравнения независимых количественных данных. Корреляционный анализ проводился с использованием рангового коэффициента Спирмена (rS), который интерпретировался по шкале Чеддока. Поправка на множественные сравнения проводилась по методу Бенджамини-Хохберга. Построение прогностической модели выполнялось с использованием бинарной логистической регрессии. Для оценки классифицирующей способности переменных применялся ROC-анализ.
Все 48 иммунных медиаторов, входящих в заявленную аналитическую панель, оказались детектируемы в менструальном супернатанте. После нормализации по общему белку уровней проанализированных сигнальных молекул статистически значимая разница между группами «беременность наступила» и «беременность не наступила» была обнаружена для G-CSF, GRO-α, IL-6, IL-9, MCP-1, SDF-1α, TNF-β, M-CSF, TRAIL, SCF, IP-10 и MIG (p<0,05). После применения поправки на множественные сравнения статистическая значимость сохранилась для цитокинов M-CSF, TRAIL, SCF, IP-10 и MIG (p<0,05). Наибольшие различия были продемонстрированы для уровней IP-10 (фиг. 1) и MIG (фиг. 2) (p<0,01), которые и были использованы для построения прогностической модели при помощи бинарной логистической регрессии. Важно отметить, что степень гемолиза (оцененная посредством изучения уровня гемоглобина в менструальной супернатанте) не была связана с уровнями IP-10 и MIG (rS -0,103 и 0,126, p>0,05, соответственно)
Построенная модель описывается следующей формулой:
I ER = 0,054 × С IP -10 + 0,018 × С MIG - 0,005,
где I ER - индекс рецептивности эндометрия; С IP -10 - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина IP-10; С MIG - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина MIG; 0,054, 0,018 и 0,005 - константы.
При пороговом значении индекса рецептивности эндометрия, равном 1,1, данная модель характеризуется чувствительностью 90% и специфичностью 67% (площадь под ROC-кривой 0,822) (фиг. 3), что превосходит прогностический потенциал отдельно взятых цитокинов IP-10 (площадь под ROC-кривой 0,820) и MIG (площадь под ROC-кривой 0,815).
Для оценки вероятности успешного исхода экстракорпорального оплодотворения была использована формула модифицированной относительной вероятности с целью преобразования полученных значений в более доступную для пациента форму:
P p = ((e^I ER / (1 + e^I ER )) - 0,5) × 2× 100%,
где P p - вероятность наступления беременности; IER - индекс рецептивности эндометрия; 1, е, 0,5, 2 и 100% - константы.
Ниже представлено более детальное описание заявляемого способа, которое не ограничивает объем притязаний заявляемого изобретения, а демонстрирует возможность осуществления изобретения с достижением заявляемого технического результата.
1) Проводят забор менструальной крови из полости матки в любой день менструации, предпочтительно на второй или третий дни. Избыток влагалищного секрета удаляют при помощи ватного тампона. Аспирацию биоматериала проводят таким образом, чтобы биоматериал представлял молекулярный профиль матки, а не проходил через шейку матки и влагалище. Предпочтительно аспирацию биоматериала проводить с использованием любого известного из уровня техники катетера диаметром от 2 до 10 по Французской шкале диаметров катетеров (Fr), предпочтительно с диаметром 6,6 Fr (например, с использованием катетера для переноса эмбрионов Guardia Access Transfer Catheter K-JETS-7019, Cook Medical Inc., Блумингтон, Индиана, США), который подсоединяют к шприцу объемом до 5 мл (предпочтительно 0,5 мл). Аспирацию выполняют при достижении конца катетера устья матки. При закупорке катетера компонентами менструальной крови его промывают изотоническим раствором (например, 0,9% раствор хлорида натрия или натрий-фосфатный буфер) в объеме до 1 мл (предпочтительно 0,2 мл). Собранный биоматериал помещают в пробирку любого объема (предпочтительно 1,5 мл).
2) Проводят отделение надосадочной жидкости менструальной крови с использованием центрифугирования. Центрифугирование выполняют при скорости от 2000 об./мин до 14000 об./мин в течение от 1 до 30 минут, предпочтительно при 5500 об./мин в течение 10 мин на любом известном из уровня техники оборудовании (например, с использованием центрифуги Pico 21 Microcentrifuge, Thermo Fisher Scientific, Уолтэм, Массачусетс, США). После центрифугирования надосадочную жидкость переносят в отдельную пробирку любого объема (предпочтительно 1,5 мл). В случае если объем надосадочной жидкости составляет менее 0,4 мл, то его доводят до этого объема изотоническим раствором (например, 0,9% раствор хлорида натрия или натрий-фосфатный буфер). Надосадочную жидкость менструальной крови при невозможности дальнейшего анализа в течение 4 часов с момента сбора биоматериала допускается хранить при температуре от минус 20°С до минус 80°С (предпочтительно минус 80°С). Последующие циклы перезаморозки недопустимы.
3) Проводят измерение уровня общего белка в надосадочной жидкости менструальной крови любом известным из уровня техники способом (например, с использованием автоматизированного биохимического анализатора AU480, Beckman Coulter, Бреа, Калифорния, США).
4) Выполняют измерение уровней цитокинов IP-10 и MIG, в надосадочной жидкости менструальной крови любым известным из уровня техники способом (например, с использованием набора реактивов для мультиплексного иммунофлуоресцентного анализа с магнитными частицами Bio-Plex Custom Assay IP10, MIG на приборе Bio-Plex 200 (Bio-Rad Laboratories Inc., Геркулес, Калифорния, США).
5) Проводят нормализацию измеренных в надосадочной жидкости менструальной крови уровней цитокинов IP-10 и MIG по уровню общего белка путем деления значений их измерения на значения измерений уровня общего белка в соответствующем образце биоматериала. Полученные значения представляют в виде пикограммов цитокина на мг общего белка (пг/мг).
6) Выполняют расчет значения индекса рецептивности эндометрия (I ER ) в соответствии со следующей формулой:
I ER = 0,054 × С IP -10 + 0,018 × С MIG - 0,005,
где I ER - индекс рецептивности эндометрия; С IP -10 - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина IP-10; С MIG - нормализованная по уровню общего белка концентрация цитокина MIG; 0,054, 0,018 и 0,005 - константы;
7) Пациентку относят к группе высокой рецептивности эндометрия при значении индекса рецептивности эндометрия больше или равно 1,1.
8) Пациентку относят к группе низкой рецептивности эндометрия при значении индекса рецептивности эндометрия менее 1,1.
Пример 1
Пациентка С., женщина, 35 лет. Пациентке был запланирован перенос замороженного эмбриона в рамках программы экстракорпорального оплодотворения в цикле с заместительной гормональной терапией. На второй день менструального цикла у пациентки был выполнен забор менструальной крови в соответствии с заявляемым способом. В надосадочной жидкости менструальной крови были измерены уровни общего белка (13,5 мг/мл), IP-10 (7,6 пг/мл) и MIG (38,8 пг/мл).
Были рассчитаны нормализованные по уровню общего белка концентрации цитокинов IP-10 и MIG в надосадочной жидкости менструальной крови, которые составили 0,56 пг/мг и 2,87 пг/мг соответственно. Данные значения были подставлены в формулу расчета индекса рецептивности эндометрия (IER) по заявляемому способу:
I ER = 0,054 × 0,56 + 0,018 × 2,87 - 0,005 = 0,077
Значение индекса рецептивности эндометрия оказалось менее 1,1, пациентка была отнесена к группе низкой рецептивности эндометрия.
На 18-й день менструального цикла пациентке был выполнен перенос замороженного эмбриона высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше). Позже было подтверждено отсутствие клинической беременности по уровню человеческого хорионического гонадотропина с последующим ультразвуковым подтверждением отсутствия плодного яйца.
Таким образом, заявляемое изобретение позволило точно предсказать отрицательный исход переноса эмбриона. Отсрочка переноса эмбриона до наступления менструального цикла с высокой рецептивностью эндометрия, установленного по заявляемому способу, позволила бы не проводить заведомо неудачную вспомогательную репродуктивную процедуру, что, в свою очередь, способствовало бы сохранению эмбриона высокого качества, снижению финансовых затрат пациентки, а также обеспечило бы отсутствие повышенной гормональной нагрузки и связанных с ней потенциальных побочных реакций.
Пример 2
Пациентка И., женщина, 28 лет. Пациентке был запланирован перенос замороженного эмбриона в рамках программы экстракорпорального оплодотворения в цикле с заместительной гормональной терапией. На второй день менструального цикла у пациентки был выполнен забор менструальной крови в соответствии с заявляемым способом. В надосадочной жидкости менструальной крови были измерены уровни общего белка (23,2 мг/мл), IP-10 (907,1 пг/мл) и MIG (396,9 пг/мл).
Были рассчитаны нормализованные по уровню общего белка концентрации цитокинов IP-10 и MIG в надосадочной жидкости менструальной крови, которые составили 39,1 пг/мг и 17,1 пг/мг соответственно. Данные значения были подставлены в формулу расчета индекса рецептивности эндометрия (IER) по заявляемому способу:
I ER = 0,054 × 39,1 + 0,018 × 17,1 - 0,005 = 2,414
Значение индекса рецептивности эндометрия оказалось более 1,1, пациентка была отнесена к группе высокой рецептивности эндометрия.
На 18-й день менструального цикла пациентке был выполнен перенос замороженного эмбриона высокого качества (бластоцисты качества 2ВВ по Гарднеру или выше). Позже было подтверждено наступление клинической беременности по уровню человеческого хорионического гонадотропина с последующим ультразвуковым подтверждением наличия плодного яйца.
Таким образом, заявляемое изобретение позволило точно предсказать положительный исход переноса эмбриона.
Claims (6)
1. Способ неинвазивной оценки рецептивности эндометрия в текущем менструальном цикле при экстракорпоральном оплодотворении, включающий забор менструальной крови, определение в ее надосадочной жидкости уровней общего белка, интерферон-γ-индуцируемого белка 10 (IP-10) и монокина, индуцируемого интерфероном-γ (MIG), определение индекса рецептивности эндометрия проводят по формуле
IER = 0,054 × СIP-10 + 0,018 × СMIG – 0,005,
где IER – индекс рецептивности эндометрия; СIP-10 – нормализованная по уровню общего белка концентрация интерферон-γ-индуцируемого белка 10 (IP-10); СMIG – нормализованная по уровню общего белка концентрация монокина, индуцируемого интерфероном-γ (MIG); 0,054, 0,018 и 0,005 – константы и
при значении индекса рецептивности эндометрия в текущем менструальном цикле больше или равно 1,1 пациентку относят к группе высокой рецептивности эндометрия, а при значении менее 1,1 – к группе низкой рецептивности эндометрия.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что менструальную кровь получают непосредственно из полости матки на 2-3-й день цикла.
3. Способ по п.1, характеризующийся тем, что значения уровней интерферон-γ-индуцируемого белка 10 (IP-10) и монокина, индуцируемого интерфероном-γ (MIG), нормализуют путем деления их концентрации на концентрацию общего белка в образце.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2817061C1 true RU2817061C1 (ru) | 2024-04-09 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2562559C1 (ru) * | 2014-05-27 | 2015-09-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта" Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук | Способ прогнозирования рецептивности эндометрия в циклах экстракорпорального оплодотворения |
| US20190241955A1 (en) * | 2018-02-02 | 2019-08-08 | Coopersurgical, Inc. | Methods of determining endometrial receptivity and uses thereof |
| US10918327B2 (en) * | 2017-02-02 | 2021-02-16 | Coopersurgical, Inc. | Compositions and methods for determining receptivity of an endometrium for embryonic implantation |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2562559C1 (ru) * | 2014-05-27 | 2015-09-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта" Северо-Западного отделения Российской академии медицинских наук | Способ прогнозирования рецептивности эндометрия в циклах экстракорпорального оплодотворения |
| US10918327B2 (en) * | 2017-02-02 | 2021-02-16 | Coopersurgical, Inc. | Compositions and methods for determining receptivity of an endometrium for embryonic implantation |
| US20190241955A1 (en) * | 2018-02-02 | 2019-08-08 | Coopersurgical, Inc. | Methods of determining endometrial receptivity and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| RAHIMINEJAD M.E. et al. The relationship between some endometrial secretion cytokines and in vitro fertilization. Iran J Reprod Med. 2015 Sep; 13(9): 557-62. LI M.Q. et al. Ovarian stimulation for in vitro fertilization alters the protein profile expression in endometrial secretion. Int J Clin Exp Pathol. 2013 Sep 15; 6(10): 1964-71. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2214021B1 (en) | Kit for predicting implantation success in assisted fertilisation | |
| JP6411340B2 (ja) | 生殖補助における着床の成功を増大させる方法 | |
| RU2651762C1 (ru) | Способ оценки рецептивности эндометрия в период "имплантационного окна" | |
| Wu et al. | Bone morphogenetic protein-15 in follicle fluid combined with age may differentiate between successful and unsuccessful poor ovarian responders | |
| Gica et al. | The role of biological markers in predicting infertility associated with non-obstructive endometriosis | |
| McLachlan et al. | Semen analysis: its place in modern reproductive medical practice | |
| McRae et al. | Metabolite profiling in the pursuit of biomarkers for IVF outcome: the case for metabolomics studies | |
| Irez et al. | The use of aniline blue chromatin condensation test on prediction of pregnancy in mild male factor and unexplained male infertility | |
| Hervás et al. | Sperm deoxyribonucleic acid fragmentation (by terminal deoxynucleotidyl transferase biotin dUTP nick end labeling assay) does not impair reproductive success measured as cumulative live birth rates per donor metaphase II oocyte used | |
| Pavone et al. | The progressive simplification of the infertility evaluation | |
| RU2817061C1 (ru) | Способ неинвазивной оценки рецептивности эндометрия при экстракорпоральном оплодотворении | |
| RU2817062C1 (ru) | Способ определения вероятности наступления беременности при экстракорпоральном оплодотворении | |
| Yoldemir et al. | The effect of retrieved oocyte count on pregnancy outcomes in an assisted reproduction program | |
| Sini et al. | Role of three-dimensional Doppler ultrasonography and leukemia inhibitory factor from endometrial secretion in predicting endometrial receptivity in IVF treatment: a pilot study | |
| Tripathi et al. | Can preterm labour be predicted in low risk pregnancies? Role of clinical, sonographic, and biochemical markers | |
| WO2011000805A1 (en) | Biomarkers of oocyte competency and method of use | |
| Zhu et al. | Correlations between elevated basal sperm DNA fragmentation and the clinical outcomes in women undergoing IUI | |
| Wang et al. | Psychological characteristics of and counseling for carriers of structural chromosome abnormalities | |
| RU2785487C1 (ru) | Способ прогнозирования инфертильности эякулята у мужчин | |
| Gao et al. | Noninvasive isolation of transcervical trophoblast cells for fetal identification | |
| Moradi et al. | P-303 Supplementing IVM medium with mesenchymal stem cell-conditioned medium, L-carnitine, and Repaglinide to improve maturation and developmental competence of oocytes derived from normal and endometriosis mice | |
| Umarsingh | The relationship between Anti-Müllerian Hormone (AMH) levels and pregnancy outcomes in patients undergoing in-vitro fertilization (IVF) or intra-cytoplasmic sperm injection (ICSI) | |
| Budihastuti et al. | Mucin-1 expression in endometrium is higher in polycystic ovary syndrome than in normal women | |
| Ibis et al. | Testicular sperm retrieval for intracytoplasmic sperm injection: when to consider it after unsuccessful intracytoplasmic sperm injection with ejaculated sperm? | |
| Majzoub et al. | IMPACT OF METABOLIC AGE ON SEXUAL AND ANDROGENIC FUNCTION IN YOUNG PATIENTS |