RU2812627C2 - Конъюгированный дезоксиниваленол для защиты от микотоксикоза - Google Patents
Конъюгированный дезоксиниваленол для защиты от микотоксикоза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2812627C2 RU2812627C2 RU2022102371A RU2022102371A RU2812627C2 RU 2812627 C2 RU2812627 C2 RU 2812627C2 RU 2022102371 A RU2022102371 A RU 2022102371A RU 2022102371 A RU2022102371 A RU 2022102371A RU 2812627 C2 RU2812627 C2 RU 2812627C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- don
- conjugated
- animal
- animals
- group
- Prior art date
Links
- LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N deoxynivalenol Chemical compound C([C@@]12[C@@]3(C[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1C=C(C([C@@H](O)[C@@]13CO)=O)C)C)O2 LINOMUASTDIRTM-QGRHZQQGSA-N 0.000 title claims abstract description 101
- LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N vomitoxin hydrate Natural products OCC12C(O)C(=O)C(C)=CC1OC1C(O)CC2(C)C11CO1 LINOMUASTDIRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 101
- 229930002954 deoxynivalenol Natural products 0.000 title claims abstract description 99
- 206010028520 Mycotoxicosis Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 231100000006 Mycotoxicosis Toxicity 0.000 title claims abstract description 20
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 73
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 235000021052 average daily weight gain Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 4
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 claims abstract description 3
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 15
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 claims description 8
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 claims description 5
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000037406 food intake Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 231100000678 Mycotoxin Toxicity 0.000 description 45
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 45
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 24
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 24
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 10
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 10
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 10
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 9
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 7
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 7
- 231100000607 toxicokinetics Toxicity 0.000 description 7
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 6
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000223195 Fusarium graminearum Species 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 5
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 229930195730 Aflatoxin Natural products 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- 239000005409 aflatoxin Substances 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 229930013292 trichothecene Natural products 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000223194 Fusarium culmorum Species 0.000 description 2
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 2
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 2
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- AVULRCDYZOWVKE-MDZDMXLPSA-N ethyl (e)-octadec-11-en-9-ynoate Chemical compound CCCCCC\C=C\C#CCCCCCCCC(=O)OCC AVULRCDYZOWVKE-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229930183344 ochratoxin Natural products 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 2
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 description 2
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- MBMQEIFVQACCCH-UHFFFAOYSA-N trans-Zearalenon Natural products O=C1OC(C)CCCC(=O)CCCC=CC2=CC(O)=CC(O)=C21 MBMQEIFVQACCCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- LZAJKCZTKKKZNT-PMNGPLLRSA-N trichothecene Chemical compound C12([C@@]3(CC[C@H]2OC2C=C(CCC23C)C)C)CO1 LZAJKCZTKKKZNT-PMNGPLLRSA-N 0.000 description 2
- 150000003327 trichothecene derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- MBMQEIFVQACCCH-QBODLPLBSA-N zearalenone Chemical compound O=C1O[C@@H](C)CCCC(=O)CCC\C=C\C2=CC(O)=CC(O)=C21 MBMQEIFVQACCCH-QBODLPLBSA-N 0.000 description 2
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010007269 Carcinogenicity Diseases 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010070840 Gastrointestinal tract irritation Diseases 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 208000034809 Product contamination Diseases 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 101100378514 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) adg1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000209056 Secale Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- 206010040880 Skin irritation Diseases 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000019714 Triticale Nutrition 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000012773 agricultural material Substances 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001539 anorectic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 229940075522 antidotes Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 231100000260 carcinogenicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007670 carcinogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940099898 chlorophyllin Drugs 0.000 description 1
- 235000019805 chlorophyllin Nutrition 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229960003133 ergot alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000003008 fumonisin Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 231100000025 genetic toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- CKNAQFVBEHDJQV-UHFFFAOYSA-N oltipraz Chemical compound S1SC(=S)C(C)=C1C1=CN=CC=N1 CKNAQFVBEHDJQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008687 oltipraz Drugs 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000024241 parasitism Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 244000000003 plant pathogen Species 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000036556 skin irritation Effects 0.000 description 1
- 231100000475 skin irritation Toxicity 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 231100000033 toxigenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001551 toxigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003512 tremorgenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000002569 water oil cream Substances 0.000 description 1
- 241000228158 x Triticosecale Species 0.000 description 1
Abstract
Настоящее изобретение относится к применению конъюгированного дезоксиниваленола (DON) в способе защиты животного от вызванного DON микотоксикоза, в частности для защиты от снижения среднего суточного привеса, поражения печени, язв желудка и/или поражения почек, вызванного попаданием DON внутрь. 13 з.п. ф-лы, 7 табл., 4 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение в целом относится к защите от микотоксикоза, вызванного микотоксином дезоксиниваленолом (DON), также известным, как вомитоксин. DON является трихотеценом типа B, который содержится в основном в зернах, таких растений, как пшеница, ячмень, овес, рожь и кукуруза, а также рис, сорго и тритикале. Наличие дезоксиниваленола в основном связано с Fusarium graminearum (Gibberella zeae) и Fusarium culmorum, которые оба являются важными патогенами растений, которые вызывают фузариоз колоса пшеницы и gibberella или фузариозную гниль кукурузы. Установлена непосредственная связь между распространенностью фузариоза колоса и загрязнением пшеницы дезоксиниваленолом. Распространенность фузариоза колоса тесно связана с влажностью во время цветения и наиболее критическим фактором является время выпадения дождя, а не его количество. Кроме того, на содержание DON значительно влияет восприимчивость сортов к штаммам Fusarium, предшествующая культура, практика обработки почвы и применение фунгицида. Fusarium graminearum оптимально размножается при температуре, равной 25°C, а Fusarium culmorum оптимально размножается при 21°C. Поэтому Fusarium graminearum является самым распространенным штаммом в теплом климате.
DON участвует в случаях микотоксикозов у людей и сельскохозяйственных животных. Этот токсин относится к классу трихотеценов, которые являются эффективными ингибиторами синтеза белка. Воздействие DON приводит к тому, что в головном мозге снижается потребление аминокислоты триптофана и, в свою очередь синтез серотонина. Предполагается, что уменьшение содержания серотонина приводит к анорексическому воздействию DON. Раздражение желудочно-кишечного тракта также может играть роль в уменьшении потребления корма и также может частично объяснить широкую распространенность парапищеводных язв желудка, наблюдающихся у свиней при отказе от корма.
Профилактическое лечение вызванного DON микотоксикоза в настоящее время ограничено надлежащей сельскохозяйственной практикой для снижения выработки микотоксинов культурами и программами контроля продовольственных и кормовых товаров для обеспечения содержания микотоксинов ниже некоторых предельно допустимых значений.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Грибы вызывают самые различные болезни животных, включая паразитизм органов и тканей, а также проявления аллергии. Однако кроме отравления при приеме внутрь несъедобных грибов, грибы могут вырабатывать микотоксины и органические химикаты, которые приводят к разным токсическим эффектам, называющимся микотоксикозом. Эта болезнь вызвана воздействием микотоксинов, фармакологически активных соединений, вырабатываемых мицелиальными грибами, загрязняющими пищевые продукты или корма для животных. Микотоксины являются вторичными метаболитами, некритичными для физиологии грибов, которые в минимальных концентрациях
чрезвычайно токсичны для позвоночных при попадании внутрь, вдыхании или соприкосновении с кожей. В настоящее время известны примерно 400 микотоксинов, разделенных на семейства химически родственных молекул со сходными биологическими и структурными характеристиками. Из их числа примерно 12 групп постоянно привлекают внимание, как угрозы для здоровья животных. Примеры микотоксинов, обладающих наибольшим общественным интересом и агроэкономическим значением, включают афлатоксины (AF), охратоксины (OT), трихотецены (T; включая DON), зеараленон (ZEN), фумонизины (F), треморгенные токсины и алкалоиды спорыньи. Микотоксины были связаны с острыми и хронические заболеваниями с биологическими эффектами, которые могут меняться в основном в связи с различиями их химической структуры, но и в связи с биологическими, питательными и экологическими факторами. Патофизиология микотоксикозов является следствием взаимодействий микотоксинов с функциональными молекулами и органеллами клеток животных, что может привести к канцерогенности, генотоксичности, ингибированию синтеза белка, иммуносупрессии, раздражению кожи и другим метаболическим нарушениям. У чувствительных видов животных микотоксины могут привести к сложным и перекрывающимся токсическим эффектам. Микотоксикозы не являются заразными и не приводят к значительному стимулированию иммунной системы. Лечение лекарственными средствами или антибиотиками оказывает слабое влияние или не влияет на течение болезни. В настоящее время для человека или животных нет вакцин, предназначенных для борьбы с микотоксикозами.
В настоящее время все большее количество исследований посвящено разработке вакцин и/или иммунотерапии, эффективных по отношению к широким классам грибов, в качестве мощного средства борьбы с микозами, т. е. инфицированием самими грибами, а не токсинами, для предупреждения специфических грибковых болезней. В отличие от микозов, для микотоксикозов не требуется участие вырабатывающих токсин грибов и они считаются абиотическими опасностями, хотя и биотического происхождения. В этом смысле микотоксикозы считались примерами отравления природными средствами и стратегии защиты в основном были направлены на предупреждение воздействия. Воздействие на людей и животных происходит в основном вследствие приема внутрь микотоксинов с пищей растительной природы. Метаболизм попавших внутрь микотоксинов может привести к накоплению в разных органах или тканях; таким образом микотоксины могут попадать в пищевую цепь с мясом животных, молоком или яйцами (перенос). Поскольку токсикогенные грибы заражают разные типы культур, потребляемых людьми и животными, микотоксины могут содержаться во всех типах необработанных сельскохозяйственных материалов, продуктов и напитков. По оценкам Организации по продовольствию и сельскому хозяйству (FAO) в мире 25% продовольственных культур значительно заражены микотоксинами. В настоящее время наилучшие стратегии предупреждения микотоксикозов включают надлежащую сельскохозяйственную практику для снижения выработки микотоксинов культурами и программы контроля продовольственных и кормовых товаров для обеспечения содержания микотоксинов ниже некоторых предельно допустимых значений. Эти стратегии могут ограничить проблему заражения товаров некоторыми группами микотоксинов при больших затратах и переменной эффективности. За исключением поддерживающей терапии (например, диета, гидратация), почти нет средств лечения воздействия микотоксинов и антидоты для микотоксинов обычно отсутствуют, хотя для индивидуумов, на которых воздействовали AF, некоторые обнадеживающие результаты были получены при использовании ряда защитных средств, таких как хлорофиллин, полифенолы зеленого чая и дитиолтионы (олтипраз).
Для предупреждения микотоксикоза у домашнего скота и заражения микотоксинами важных пищевых продуктов животного происхождения была предложена вакцинация для борьбы с конкретными микотоксинами, эта стратегия основана на выработке антител, которые могут блокировать начальное всасывание или биоактивацию микотоксинов, их токсичность и/или выработку в животных продуктах (таких как молоко) с помощью иммуноконтрацепции.
Однако производство вакцин для защиты от микотоксикозов весьма затруднительно, в основном связано с широким диапазоном структур, химических характеристик и токсичностью, связанной с микотоксинами. Микотоксины являются обладающими низкой молекулярной массой небелковыми молекулами, которые обычно неиммуногенны (гаптены), но могут вызвать иммунный ответ при соединении с молекулой-носителем, такой как белок. Широко исследовали методики конъюгирования микотоксинов с белковым или полипептидным носителем и оптимизацию условий для иммунизации животных с целью выработки моноклональных или поликлональных антител разной специфичности для использования в иммунологическом анализе для скрининга микотоксинов в продуктах, предназначенных для потребления людьми и животными. Связывающие белки, использованные в этих исследованиях, включают, в частности, бычий сывороточный альбумин (BSA), гемоцианин лимфы улитки (KLH), тиреоглобулин (TG) и полилизин. В последние десятилетия проведены многочисленные исследования по разработке производных микотоксинов, которые могут связываться с белками при сохранении в достаточной степени исходной структуры, так чтобы выработанные антитела смогли распознавать нативный токсин. По этим методикам получены антитела ко многим микотоксинам и это показало, что конъюгирование с белками может быть эффективным средством для иммунизации. Таким образом, применение этой стратегии для вакцинации людей и животных, обеспечивающее защиту при безопасности для реципиента, до сих пор не было успешным вследствие токсичности молекул, которые могли высвободиться in vivo. Например, показано, что конъюгирование токсинов, таких как T-2, с белками-носителями привело к нестабильным комплексам с возможным высвобождением свободного токсина в его активной форме (Chanh et al, Monoclonal anti-idiotype induces protection against the cytotoxicity of the trichothecene mycotoxin T-2, in J Immunol. 1990, 144: 4721-4728). По аналогии с токсоидом вакцины, которые могут обеспечить защиту от патологических эффектов бактериальных токсинов, что является разумным подходом для разработки вакцин от микотоксинов, могут быть основаны на конъюгированных "микотоксоидах", определенных, как модифицированная форма микотоксинов, лишенных токсичности, но сохранивших антигенность (Giovati L et al, Anaflatoxin B1 as the paradigm of a new class of vaccines based on "Mycotoxoids", in Ann Vaccines Immunization 2(1): 1010, 2015). С учетом небелковой природы микотоксинов методика превращения в микотоксоиды должна основываться на химическом получении производных. Введение специфических групп в стратегические положения родственного исходного микотоксина может привести к образованию молекул, обладающих другими физико-химическими характеристиками, но все же способных индуцировать антитела с достаточной перекрестной реакционной способностью с нативным токсином. Таким образом, разумное объяснение вакцинации для микотоксинов основано на выработке к микотоксоидам антител, обладающих лучшей способностью связывать нативный микотоксин, чем клеточные мишени, нейтрализовывать токсин и предупреждать развитие болезни в случае воздействия. Возможное применение этой стратегии было продемонстрировать в случае микотоксинов, относящихся к группе AF (Giovati et al, 2015), но не для любых других микотоксинов. Кроме того, защитный эффект от микотоксикоза для самих вакцинированных животных не был продемонстрирован, но обнаружен только для переноса в молоко молочных коров, что защищало от микотоксикоза людей, потребляющих молоко или изготовленные из него продукты.
ЗАДАЧА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Задачей настоящего изобретения является разработка способа защиты животного от микотоксикоза вызванного дезоксиниваленолом, одним из самых распространенных микотоксинов в кормах для животных.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Для решения задачи настоящего изобретения было установлено, что конъюгированный дезоксиниваленол (DON) пригоден для применения в способе защиты животного от вызванного DON микотоксикоза. Было установлено, что не требуется превращать DON в токсоид, конъюгированный токсин, видимо, безопасен для подвергнутого лечению животного-хозяина. Кроме того, неожиданно было установлено, что индуцированный иммунный ответ был достаточно сильным, чтобы защитить самого животного от микотоксикоза после приема внутрь DON после лечения. Такая реальная защита путем индуцирования иммунного ответа на сам микотоксин не была продемонстрирована в данной области техники для любого микотоксина, не считая широко распространенного и чрезвычайно токсичного соединения дезоксиниваленола.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Микотоксикоз является болезнью, обусловленной воздействием микотоксина. Клинические признаки, пораженные органы и результат зависят от собственных токсических характеристик микотоксина и степени и продолжительности воздействия, а также состояния здоровья подвергнутого воздействию животного.
Защита от микотоксикоза означает предупреждение или ослабление одного или большего количества негативных физиологических воздействий микотоксина на животное , таких как снижение среднего суточного привеса.
Дезоксиниваленол (также известный, как вомитоксин или VOM) является микотоксином, продуцируемым грибами Fusarium graminearum, который вызывает фузариоз колоса (FHB), или паршу мелких зерен. DON может вызвать отказ от корма и рвоту. Молекулярная формула исходного соединения имеет вид C15H20O6.
Конъюгированная молекула является молекулой, с которой иммуногенное соединение связано ковалентной связью. Обычно иммуногенное соединение является крупным белком, таким как KLH, BSA или OVA.
Адъювантом является неспецифическое иммуностимулирующее средство. В принципе, каждое соединение, которое способно благоприятствовать или усиливать конкретный процесс в каскаде иммунологических событий, в конечном счете приводящее к лучшему иммунологическому ответу (т. е. объединенному ответу организма на антиген, в частности, опосредуемому лимфоцитами и обычно включающему распознавание антигенов специфическими антителами или предварительно сенсибилизированными лимфоцитами), можно определить, как адъювант. Адъювант обычно не требуется для протекания указанного конкретного процесса, а просто благоприятствует указанному процессу или усиливает его.
ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В другом варианте осуществления настоящего изобретения конъюгированный DON вводят животному системно. Хотя известно, что локальное введение, например, через слизистую оболочку в желудочно-кишечный тракт (перорально или через анальное отверстие) или в глаза (например, при иммунизации цыплят) является эффективным путем индуцирования иммунного ответа у разных животных, было установлено, что системное введение приводит к иммунному ответу, необходимому для защиты животных от вызванного DON микотоксикоза. В частности, было установлено, что эффективную иммунизацию можно обеспечить после внутримышечного, перорального и/или внутрикожного введения.
Возраст для введения не является критически важным, хотя предпочтительно проводить введение до того, когда животное может проглотить корм, зараженный значительными количествами DON. Поэтому предпочтительный возраст в момент введения составляет 6 недель или менее. Более предпочтительный возраст составляет 4 недели или менее, такой как, например, возраст, равный 1-3 неделям.
В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения конъюгированный DON вводят животному по меньшей мере дважды. Хотя многие животные (в частности, свиньи, цыплята, жвачные животные) обычно восприимчивы к иммунизации при одном введении иммуногенной композиции, предполагается, что для экономически надежной защиты от DON предпочтительны два введения. Это обусловлено тем, что на практике иммунная система животных не начинает вырабатывать антитела к DON при воздействии природного DON, просто поскольку природный DON не является иммуногенным. Таким образом, иммунная система животных полностью зависит от введения конъюгированного DON. Промежуток времени между этими двумя введениями конъюгированного DON может быть любым в диапазоне от 1 недели до 1-2 лет. Предполагается, что для молодых животных достаточен режим первичной иммунизации, например, в возрасте 1-3 недель с последующим бустерным введением через 1-4 недели, обычно через 1-3 недели, например, через 2 недели. Для более старых животных может потребоваться бустерное введение через каждые несколько месяцев (например, через 4, 5, 6 месяцев после последнего введения) или ежегодно, или через каждые два года, как это известно для других промышленно использующихся режимов иммунизации животных.
В еще одном варианте осуществления конъюгированный DON используют в композиции, содержащей адъювант в дополнение к конъюгированному DON. Адъювант можно использовать, если сам конъюгат неспособен вызвать иммунный ответ с обеспечением заданной степени защиты. Хотя известны молекулы конъюгата, которые способны в достаточной степени стимулировать иммунную систему без дополнительного адъюванта, такого как KLH или BSA, использование дополнительного адъюванта может быть полезным. Это может исключить необходимость бустерного введения или увеличение интервала для его введения. Все зависит от степени защиты, необходимой для конкретного случая. Типом адъюванта, для которого показано, что он способен вызвать хороший иммунный ответ на DON при использовании конъюгированного DON в качестве иммуногена, является эмульсия воды и масла, такая как, например, эмульсия вода-в-масле или эмульсия масло-в-воде. Первую обычно используют для домашней птицы, а вторую обычно используют для животных, которые более подвержены вызванным адъювантом побочным реакциям, таких как свиньи и жвачные животные.
В еще одном другом варианте осуществления конъюгированный DON включает DON, конъюгированный с белком, обладающим молекулярной массой, равной более 10000 Да. Установлено, что такие белки, в частности, гемоцианин лимфы улитки (KLH) и овальбумин (OVA), могут вызвать достаточный иммунный ответ у животных, в частности, у свиней и цыплят. Практическое верхнее предельное значение для белка может составлять 100 МДа.
Для защиты от микотоксикоза, в частности, было установлено, что при использовании настоящего изобретения животные защищаются от снижения среднего суточного привеса, поражения печени, язв желудка и/или поражения почек, т. е. одного или большего количества этих признаков микотоксикоза.
Ниже настоящее изобретение дополнительно разъяснено с помощью следующих примеров.
ПРИМЕРЫ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Пример 1: Эксперимент по иммунизации с заражением с использованием конъюгированного DON
Задача
Задачей этого исследования была оценка эффективности конъюгированного дезоксиниваленола для защиты животного от микотоксикоза вследствие приема DON внутрь. Для этого исследования свиней иммунизировали дважды с помощью DON-KLH до заражения токсичным DON. Для исследования влияния пути введения использовали разные пути иммунизации.
Схема исследования
В исследовании использовали сорок 1-недельных поросят, полученных от 8 свиноматок, разделенных на 5 групп. 24 поросят групп 1-3 иммунизировали дважды в возрасте 1 и 3 недель. Поросят группы 1 иммунизировали внутримышечно (IM) в обоих возрастах. Поросята группы 2 получали IM инъекцию в возрасте одной недели и пероральную бустерную дозу в возрасте 3 недель. Поросят группы 3 дважды иммунизировали внутрикожно (ID). От возраста 5½ недель поросят группы 1-3 в течение 4 недель заражали с помощью DON, вводимым перорально в виде жидкости. Поросят группы 4 не иммунизировали, а только заражали с помощью DON, как описано для групп 1-3. Поросята группы 5 выступали в качестве контроля и им давали только контрольную жидкость от возраста 5,5 недель в течение 4 недель.
Концентрация DON в жидком препарате соответствовала 5,4 мг/кг корма. Это соответствует среднему количеству, равному 2,5 мг DON в сутки. После 4 недель заражения всех животных исследовали после умерщвления, обращая особое внимание на печень, почки и желудок. Кроме того, в дни исследования 0, 34, 41, 49, 55, 64 (после умерщвления) брали пробы крови за исключением животных группы 5, у которых пробы крови брали только в дни 0, 34, 49 и сразу после умерщвления.
Исследуемые образцы
Готовили три разные иммуногенные композиции, а именно, исследуемый образец 1, содержащий DON-KLH в концентрации 50 мкг/мл в эмульсии масло-в-воде для инъекции (X-solve 50, MSD AH, Boxmeer), который использовали для IM иммунизации; исследуемый образец 2, содержащий DON-KLH в концентрации 50 мкг/мл в эмульсии вода-в-масле (GNE, MSD AH, Boxmeer), который использовали для пероральной иммунизации, и исследуемый образец 3, содержащий DON-KLH в концентрации 500 мкг/мл в эмульсии масло-в-воде для инъекции (X-solve 50) для ID иммунизации.
Использующийся для заражения дезоксиниваленол (получен у фирмы Fermentek, Israel) разводили в 100% метаноле до конечной концентрации, равной 100 мг/мл, и хранили при температуре ниже -15°C. Перед использованием DON дополнительно разводили и включали в средство для введения.
Критерии включения
Использовали только здоровых животных. Для исключения нездоровых животных перед началом исследования у всех животных проверяли физикальные характеристики и убеждались в отсутствии клинических аномалий и болезни. В группе использовали поросят от разных свиноматок. При обычной практике всех животных иммунизируют даже если на них предварительно воздействовал DON путем приема внутрь зараженного с помощью DON корма. Поскольку сам DON не приводит к иммунному ответу, предполагается, что нет принципиальных различий между животными, которые предварительно были заражены с помощью DON, и животными, которые не получали DON.
Результаты
Ни у одного из животных не наблюдались неблагоприятные эффекты, связанные с иммунизацией с помощью DON-KLH. Таким образом, композиция представлялась безопасной.
В начале эксперимента все поросята были серологически негативными по титрам по отношению к DON. При заражении у животных групп, иммунизированных внутримышечно (группа 1) и внутрикожно (группа 3), развивался иммунный ответ к DON, определенный с помощью ELISA с нативным DON-BSA в качестве нанесенного антигена. В таблице 1 приведены средние значения IgG для 4 моментов времени во время исследования и их SD значения. И внутримышечная иммунизация, и внутрикожная иммунизация приводили к значительным титрам по отношению к DON.
Таблица 1. Титры IgG
| Группа 1 | Группа 2 | Группа 3 | Группа 4 | Группа 5 | |
| T=0 | <4,3 | <4,3 | <4,3 | <4,3 | <4,3 |
| T=35 | 11,2 | 4,86 | 9,99 | 4,3 | 4,19 |
| T=49 | 9,56 | 4,64 | 8,81 | 4,71 | 3,97 |
| T=64 | 8,48 | 4,3 | 7,56 | 4,3 | 3,31 |
Как показано в таблице 2, для всех иммунизированных животных, включая животных группы 2, у которых не обнаруживается значительное увеличение титра по отношению к DON IgG, за первые 15 дней обнаруживается намного более значительный привес, чем у зараженных животных. По сравнению с зараженными животными в течение исследования у всех животных обнаруживается более значительный вес.
Таблица 2. Анализ веса
| ADG11 | ADG2 | Начальный вес | Конечный вес | Средний дополнительный привес по сравнению с зараженными животными (г) | |
| Группа 1 | 0,67 | 0,80 | 11,63 | 32,29 | + 1060 |
| Группа 2 | 0,64 | 0,79 | 12,31 | 32,13 | +760 |
| Группа 3 | 0,58 | 0,82 | 12,88 | 32,25 | +310 |
| Группа 4 | 0,54 | 0,81 | 12,69 | 31,75 | 0 |
| Группа 5 | 0,57 | 0,80 | 11,63 | 31,08 | +390 |
1 средний суточный привес за первые 15 дней после заражения
2 средний суточный привес за последние 13 дней после заражения
Также следили за состоянием тонкого кишечника (по отношению ворсинки/крипты в тощей кишке). В таблице 3 приведено отношение ворсинки/крипты. Можно видеть, что у животных группы 3 среднее значение отношения ворсинки/крипты сопоставимо с данными для здоровых контрольных животных (группа 5), тогда как у неиммунизированных зараженных животных (группа 4) наблюдалось намного меньшее (статистически значимо) отношение ворсинки/крипты. Кроме того, у животных группы 1 и группы 2 наблюдалось отношение ворсинки/крипты, которое было значительно лучше (т. е. больше), чем у неиммунизированных зараженных животных контрольной группы. Это показывает, что иммунизация защищает от повреждения тонкого кишечника, вызванного DON.
Таблица 3. Отношение ворсинки/крипты
| Группа 1 | Группа 2 | Группа 3 | Группа 4 | Группа 5 | |
| Среднее значение | 1,57 | 1,41 | 1,78 | 1,09 | 1,71 |
| STD | 0,24 | 0,22 | 0,12 | 0,10 | 0,23 |
Также следили за общим состоянием других органов, точнее, печени, почек и желудка. Обнаружено, что состояние здоровья животных всех трех исследуемых групп (группы 1-3) было лучше, чем неиммунизированных зараженных животных контрольной группы (группа 4). В таблице 4 приведена сводка данных об общем состоянии здоровья. Степень изъязвления желудка указана в диапазоне от - (нет данных об образовании язвы желудка) до ++ (множественные язвы). Степень воспаления желудка указана в диапазоне от - (нет данных о воспалении) до ++/- (начало воспаления желудка).
Таблица 4. Данные об общем состоянии здоровья
| Цвет печени | Язва желудка | Воспаление желудка | Почки | |
| Группа 1 | Нормальный-желтый | - | - | Пастельный |
| Группа 2 | Нормальный | +/-- | - | Нормальный |
| Группа 3 | Нормальный | +/- | +/-- | Нормальный |
| Группа 4 | Пастельный | ++ | ++/- | Пастельный |
| Группа 5 | Нормальный | + | ++/- | Нормальный |
Пример 2: Влияние иммунизации на содержание DON
Задача
Задачей этого исследования была оценка влияния иммунизации конъюгатом DON на токсикокинетику при попадании DON внутрь. Для этого исследования свиней дважды иммунизировали с помощью DON-KLH и затем им давали токсичный DON.
Схема исследования
В исследовании использовали десятерых 3-недельных поросят, разделенных на 2 группы по 5 поросят в каждой. Поросят группы 1 иммунизировали IM дважды в возрасте 3 и 6 недель с помощью DON-KLH (исследуемый образец 1; пример 1). Поросята группы 2 выступали в качестве контроля и им давали только контрольную жидкость. В возрасте 11 недель всем животным вводили DON (Fermentek, Israel) с помощью болюса в дозе 0,05 мг/кг, которая (в пересчете на суточное потребление корма) соответствовало степени заражения, равной 1 мг/кг корма. Пробы крови брали у поросят непосредственно перед введением DON и через 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, и 12 ч после введения DON.
Критерии включения
Использовали только здоровых животных.
Определение DON в плазме
Определение несвязанного DON в плазме проводили по аттестованной методике LC-MS/MS с помощью системы Acquity® UPLC, соединенной с прибором Xevo® TQ-S MS (Waters, Zellik, Belgium). Нижнее предельное значение количественного определения DON в плазме свиней по этой методике равнялось 0,1 нг/мл.
Токсикокинетический анализ
Токсикокинетическое моделирование профилей концентрация DON - время в плазме проводили с помощью некомпартментального анализа (Phoenix, Pharsight Corporation, USA). Рассчитывали следующие параметры: площадь под кривой от нуля до бесконечности (AUC0→∞), максимальную концентрацию в плазме (Cmax) и время максимальной концентрации в плазме (tmax).
Результаты
Токсикокинетические данные приведены ниже в таблице 5. Можно видеть, что иммунизация с помощью DON-KLH приводит к уменьшению всех токсикокинетических параметров. Поскольку проявление токсических эффектов обеспечивает несвязанный DON, можно заключить, что иммунизация с помощью DON-KLH будет уменьшать вызванные DON токсические эффекты путем уменьшения количества несвязанного DON в крови животных.
Таблица 5. Токсикокинетические параметры для несвязанного DON
| Токсикокинетический параметр | DON-KLH | Контроль |
| AUC0→∞ | 77,3 ± 23,6 | 187 ± 33 |
| Cmax | 12,5 ± 2,7 | 30,8 ± 2,5 |
| tmax | 1,69 ± 1,03 | 2,19 ± 1,07 |
Пример 3: Серологический ответ на разные конъюгаты DON
Задача
Задачей этого исследования была оценка эффективности разных препаратов конъюгированного дезоксиниваленола.
Схема исследования
В исследовании использовали восемнадцать 3-недельных поросят, разделенных на 3 группы по 6 поросят в каждой. Поросят группы 1 дважды иммунизировали внутримышечно в возрасте 3 и 5 недель с помощью DON-KLH (с использованием исследуемого образца 1 примера 1). Поросят группы 2 иммунизировали с помощью DON-OVA. Поросята группы 3 выступали в качестве отрицательного контроля. Для всех животных проверяли ответ на IgG к DON в возрасте 3 недель, в возрасте 5 недель и в возрасте 8 недель.
Результаты
Серологические данные приведены ниже в таблице в виде титра антител log2.
Таблица 6. Ответ на IgG к DON
| Исследуемый образец | 3 недели | 5 недель | 8 недель |
| DON-KLH | 3,5 | 6,6 | 8,3 |
| DON-OVA | 3,3 | 3,9 | 11,8 |
| Контроль | 4,8 | 3,3 | 3,3 |
Представляется, что оба конъюгата являются подходящими для усиления ответа на IgG к DON. Кроме того, представляется, что ответ проявляется только при одном введении.
Пример 4: Серологический ответ у цыплят
Задача
Задачей этого исследования была оценка серологического ответа на DON-KLH у цыплят.
Схема исследования
В этом исследовании использовали 30 четырехнедельных цыплят, разделенных на 3 группы по 10 цыплят в каждой. Цыплят иммунизировали внутримышечно с помощью DON-KLH. Цыплят группы 1 использовали в качестве контроля и им давали только PBS. Цыплятам группы 2 давали DON-KLH без какого-либо адъюванта и цыплятам группы 3 давали DON-KLH, приготовленный в адъюванте GNE (выпускает фирма MSD Animal Health, Boxmeer). Первичную иммунизацию проводили в день 0 с помощью 0,5 мл вакцины в правую лапу. В день 14 для цыплят проводили сопоставимую бустерную иммунизацию в левую лапу.
Пробы крови брали в дни 0 и 14, а также в дни 35, 56, 70 и 84. Выделяли сыворотку для определения IgY к DON. В дни 0 и 14 пробы крови брали непосредственно перед иммунизацией.
Результаты
Серологические данные приведены в таблице 7 в виде титра антител log2. Из данных вычитали фоновое значение PBS.
Таблица 7. Ответ на IgY к DON
| Вакцина | День 0 | День 14 | День 35 | День 56 | День 70 | День 84 |
| DON-KLH | 0 | 0 | 0,6 | 1,2 | 1,1 | 1,2 |
| DON-KLH в GNE | 0 | 1,9 | 6,5 | 6,0 | 6,7 | 7,7 |
Можно видеть, что конъюгированный DON также приводит к титру к DON у цыплят. Адъювант GNE значительно увеличивает ответ, но не представляется существенным для получения суммарного ответа, как такового.
Claims (14)
1. Применение конъюгированного дезоксиниваленола (DON) для защиты животного от вызванного DON микотоксикоза.
2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят животному системно.
3. Применение по п. 2, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят внутримышечно, перорально и/или внутрикожно.
4. Применение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят животному в возрасте 6 недель или моложе.
5. Применение по п. 4, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят животному в возрасте 4 недель или моложе.
6. Применение по п. 5, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят животному в возрасте 1-3 недель.
7. Применение по любому из пп. 1-6, отличающееся тем, что конъюгированный DON вводят животному по меньшей мере дважды.
8. Применение по любому из пп. 1-7, отличающееся тем, что конъюгированный DON используют в композиции, содержащей адъювант в дополнение к конъюгированному DON.
9. Применение по п. 8, отличающееся тем, что адъювантом является эмульсия воды и масла.
10. Применение по п. 9, отличающееся тем, что адъювантом является эмульсия вода-в-масле или эмульсия масло-в-воде.
11. Применение по любому из пп. 1-10, отличающееся тем, что конъюгированный DON включает DON, конъюгированный с белком, обладающим молекулярной массой, равной более 10000 Да.
12. Применение в способе по п. 11, отличающееся тем, что конъюгированный DON включает DON, конъюгированный с гемоцианином лимфы улитки (KLH) или овальбумином (OVA).
13. Применение по любому из пп. 1-12, отличающееся тем, что животные защищаются от снижения среднего суточного привеса, поражения печени, язв желудка и/или поражения почек.
14. Применение по любому из пп. 1-13, отличающееся тем, что животным является свинья или курица.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP19184132.9 | 2019-07-03 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2022102371A RU2022102371A (ru) | 2023-08-03 |
| RU2812627C2 true RU2812627C2 (ru) | 2024-01-30 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007079893A1 (de) * | 2005-12-23 | 2007-07-19 | Bayer Technology Services Gmbh | Vorrichtung und verfahren zum nachweis von mykotoxinen |
| CN101413954A (zh) * | 2008-11-07 | 2009-04-22 | 无锡益达生物技术有限公司 | 呕吐毒素的酶联免疫吸附检测专用测试盒及制备及检测方法 |
| KR20120024239A (ko) * | 2010-09-06 | 2012-03-14 | 대한민국(관리부서 : 농림수산식품부 농림수산검역검사본부) | 데옥시니발레놀과 특이적으로 결합하는 단클론 항체 및 이를 포함하는 데옥시니발레놀 검출용 킷트 |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007079893A1 (de) * | 2005-12-23 | 2007-07-19 | Bayer Technology Services Gmbh | Vorrichtung und verfahren zum nachweis von mykotoxinen |
| CN101413954A (zh) * | 2008-11-07 | 2009-04-22 | 无锡益达生物技术有限公司 | 呕吐毒素的酶联免疫吸附检测专用测试盒及制备及检测方法 |
| KR20120024239A (ko) * | 2010-09-06 | 2012-03-14 | 대한민국(관리부서 : 농림수산식품부 농림수산검역검사본부) | 데옥시니발레놀과 특이적으로 결합하는 단클론 항체 및 이를 포함하는 데옥시니발레놀 검출용 킷트 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ZHANG XIYA ET AL, One-Step Core/Multishell Quantum Dots-Based Fluoroimmunoassay for Screening of Deoxynivalenol in Maize, 03 April 2018 (2018-04-03), Vol. 11, No. 9, page 2570-2572, DOI: 10.1007/S12161-018-1198-X external link. Р. С. Овчинников и др., МИКОТОКСИНЫ И МИКОТОКСИКОЗЫ ЖИВОТНЫХ - АКТУАЛЬНАЯ ПРОБЛЕМА СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА, РЖ "Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии", 1 (25), 2018, 114-123. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gujral et al. | Effect of anti-gliadin IgY antibody on epithelial intestinal integrity and inflammatory response induced by gliadin | |
| BE1011033A6 (fr) | Composition pharmaceutique et/ou alimentaire pour le traitement de pathologies liees a un rejet de greffe, une reaction allergique ou auto-immune ou du cancer. | |
| RU2812627C2 (ru) | Конъюгированный дезоксиниваленол для защиты от микотоксикоза | |
| US20220233496A1 (en) | Conjugated deoxynivalenol to protect against mycotoxicosis | |
| KR102260009B1 (ko) | 콜레스테롤 흡수 억제를 통한 비만 예방 또는 치료용 난황항체 제조방법 | |
| EP4267190A1 (en) | Conjugated t-2 toxin to protect against mycotoxicosis | |
| CN116940385A (zh) | 防止真菌毒素中毒症的偶联的伏马毒素 | |
| CN116710144A (zh) | 防止真菌毒素中毒症的偶联的玉米赤霉烯酮 | |
| US20240024446A1 (en) | Conjugated aflatoxin b to protect against mycotoxicosis | |
| CN116457004A (zh) | 用于保护猪免于各种疾病的组合疫苗 | |
| Bižanov et al. | Adjuvant effect of saponin on the immune responses to bovine serum albumin in hens | |
| Bižanov et al. | Experimental immunology Adjuvant effect of saponin on the immune responses to bovine serum albumin in hens | |
| US20150250870A1 (en) | Compositions for Immunotherapy |