RU2809116C2 - Конъюгат амантина с антителом - Google Patents
Конъюгат амантина с антителом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2809116C2 RU2809116C2 RU2020137094A RU2020137094A RU2809116C2 RU 2809116 C2 RU2809116 C2 RU 2809116C2 RU 2020137094 A RU2020137094 A RU 2020137094A RU 2020137094 A RU2020137094 A RU 2020137094A RU 2809116 C2 RU2809116 C2 RU 2809116C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- drug
- compound
- synthesis
- cancer
- pharmaceutically acceptable
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 32
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 claims abstract description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 claims abstract 7
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 claims abstract 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 19
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 claims description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 15
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 5
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 4
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 4
- CIORWBWIBBPXCG-JZTFPUPKSA-N amanitin Chemical class O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2CC(O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H](C(C)[C@@H](O)CO)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-JZTFPUPKSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006593 Urologic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 claims 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 84
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 84
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 40
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 33
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 24
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 23
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 19
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 13
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 13
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 6
- WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 1-[(3s,4s)-4-[8-(2-chloro-4-pyrimidin-2-yloxyphenyl)-7-fluoro-2-methylimidazo[4,5-c]quinolin-1-yl]-3-fluoropiperidin-1-yl]-2-hydroxyethanone Chemical compound CC1=NC2=CN=C3C=C(F)C(C=4C(=CC(OC=5N=CC=CN=5)=CC=4)Cl)=CC3=C2N1[C@H]1CCN(C(=O)CO)C[C@@H]1F WZZBNLYBHUDSHF-DHLKQENFSA-N 0.000 description 6
- 101100038180 Caenorhabditis briggsae rpb-1 gene Proteins 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 5
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 5
- KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O Chemical compound CC1=C(SC=N1)C2=CC=C(C=C2)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]3C[C@H](CN3C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)CCCCCCCCCCNCCCONC(=O)C4=C(C(=C(C=C4)F)F)NC5=C(C=C(C=C5)I)F)O KCBAMQOKOLXLOX-BSZYMOERSA-N 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 5
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 5
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- -1 1H-benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate Chemical compound 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004007 alpha amanitin Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 4
- UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N (1R,9R,10S,11R,12R,15S,18S,21R)-10,11,21-trihydroxy-8,8-dimethyl-14-methylidene-4-(prop-2-enylamino)-20-oxa-5-thia-3-azahexacyclo[9.7.2.112,15.01,9.02,6.012,18]henicosa-2(6),3-dien-13-one Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](O)[C@@]23C(C1=C)=O)C[C@H]2[C@]12C(N=C(NCC=C)S4)=C4CC(C)(C)[C@H]1[C@H](O)[C@]3(O)OC2 UAOUIVVJBYDFKD-XKCDOFEDSA-N 0.000 description 3
- AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N (1S,2S,4R,8S,9S,11S,12R,13S,19S)-6-[(3-chlorophenyl)methyl]-12,19-difluoro-11-hydroxy-8-(2-hydroxyacetyl)-9,13-dimethyl-6-azapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosa-14,17-dien-16-one Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2[C@H]3[C@]([C@]4(C=CC(=O)C=C4[C@@H](F)C3)C)(F)[C@@H](O)C[C@@]2([C@@]1(C1)C(=O)CO)C)N1CC1=CC=CC(Cl)=C1 AOSZTAHDEDLTLQ-AZKQZHLXSA-N 0.000 description 3
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 3
- UVNPEUJXKZFWSJ-LMTQTHQJSA-N (R)-N-[(4S)-8-[6-amino-5-[(3,3-difluoro-2-oxo-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-4-yl)sulfanyl]pyrazin-2-yl]-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-4-yl]-2-methylpropane-2-sulfinamide Chemical compound CC(C)(C)[S@@](=O)N[C@@H]1COCC11CCN(CC1)c1cnc(Sc2ccnc3NC(=O)C(F)(F)c23)c(N)n1 UVNPEUJXKZFWSJ-LMTQTHQJSA-N 0.000 description 3
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 3
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 4-[5-[3-(carboxymethoxy)phenyl]-3-(4,5-dimethyl-1,3-thiazol-2-yl)tetrazol-3-ium-2-yl]benzenesulfonate Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=C(OCC(O)=O)C=CC=2)=NN1C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 Chemical compound CCN(CCCCCOCC(=O)N[C@H](C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)c1ccc(cc1)-c1scnc1C)C(C)(C)C)CCOc1ccc(cc1)C(=O)c1c(sc2cc(O)ccc12)-c1ccc(O)cc1 BQXUPNKLZNSUMC-YUQWMIPFSA-N 0.000 description 3
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N [(1s,3r,4ar,7s,8s,8as)-3-hydroxy-8-[2-[(4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-7-methyl-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydronaphthalen-1-yl] (2s)-2-methylbutanoate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=C[C@H]2C[C@@H](O)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)CC1C[C@@H](O)CC(=O)O1 LJOOWESTVASNOG-UFJKPHDISA-N 0.000 description 3
- LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-6-[[(3s,5s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]oxy]-4,5-disulfo Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]([C@@H]([C@H]1OS(O)(=O)=O)OS(O)(=O)=O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4CC[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]1O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]1OS(O)(=O)=O LNUFLCYMSVYYNW-ZPJMAFJPSA-N 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940127204 compound 29 Drugs 0.000 description 3
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 3
- GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N (1s,2s,3r,4r)-3-[[5-chloro-2-[(1-ethyl-6-methoxy-2-oxo-4,5-dihydro-3h-1-benzazepin-7-yl)amino]pyrimidin-4-yl]amino]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxamide Chemical compound CCN1C(=O)CCCC2=C(OC)C(NC=3N=C(C(=CN=3)Cl)N[C@H]3[C@H]([C@@]4([H])C[C@@]3(C=C4)[H])C(N)=O)=CC=C21 GLGNXYJARSMNGJ-VKTIVEEGSA-N 0.000 description 2
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 2
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N (2r)-n-[(2s,3r)-4-[[(4s)-6-(2,2-dimethylpropyl)spiro[3,4-dihydropyrano[2,3-b]pyridine-2,1'-cyclobutane]-4-yl]amino]-3-hydroxy-1-[3-(1,3-thiazol-2-yl)phenyl]butan-2-yl]-2-methoxypropanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](C)OC)[C@H](O)CN[C@@H]1C2=CC(CC(C)(C)C)=CN=C2OC2(CCC2)C1)C(C=1)=CC=CC=1C1=NC=CS1 IUSARDYWEPUTPN-OZBXUNDUSA-N 0.000 description 2
- UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N (3ar,5s,6s,7r,7ar)-5-(difluoromethyl)-2-(ethylamino)-5,6,7,7a-tetrahydro-3ah-pyrano[3,2-d][1,3]thiazole-6,7-diol Chemical compound S1C(NCC)=N[C@H]2[C@@H]1O[C@H](C(F)F)[C@@H](O)[C@@H]2O UDQTXCHQKHIQMH-KYGLGHNPSA-N 0.000 description 2
- HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N (3r,4r)-3-azaniumyl-5-[[(2s,3r)-1-[(2s)-2,3-dicarboxypyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-oxo-4-sulfanylpentane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC[C@@H](N)[C@@H](S)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)CC)C(=O)N1CCC(C(O)=O)[C@H]1C(O)=O HUWSZNZAROKDRZ-RRLWZMAJSA-N 0.000 description 2
- MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M (3r,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-5-[methyl-[(1r)-1-phenylethyl]carbamoyl]-4-propan-2-ylpyrazol-3-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound C1([C@@H](C)N(C)C(=O)C2=NN(C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C2C(C)C)C=2C=CC(F)=CC=2)=CC=CC=C1 MPDDTAJMJCESGV-CTUHWIOQSA-M 0.000 description 2
- OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M (3r,5r)-7-[3-(4-fluorophenyl)-8-oxo-7-phenyl-1-propan-2-yl-5,6-dihydro-4h-pyrrolo[2,3-c]azepin-2-yl]-3,5-dihydroxyheptanoate Chemical compound O=C1C=2N(C(C)C)C(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O)=C(C=3C=CC(F)=CC=3)C=2CCCN1C1=CC=CC=C1 OMBVEVHRIQULKW-DNQXCXABSA-M 0.000 description 2
- YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N (4R)-5-[(6-bromo-3-methyl-2-pyrrolidin-1-ylquinoline-4-carbonyl)amino]-4-(2-chlorophenyl)pentanoic acid Chemical compound CC1=C(C2=C(C=CC(=C2)Br)N=C1N3CCCC3)C(=O)NC[C@H](CCC(=O)O)C4=CC=CC=C4Cl YQOLEILXOBUDMU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 2
- FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 2-(1-adamantyl)-n-[2-[2-(2-hydroxyethylamino)ethylamino]quinolin-5-yl]acetamide Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC2CC13CC(=O)NC1=CC=CC2=NC(NCCNCCO)=CC=C21 FQMZXMVHHKXGTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 2-amino-9-[(2R,3S,4S,5R)-4-fluoro-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-ynyl-1H-purine-6,8-dione Chemical compound NC=1NC(C=2N(C(N(C=2N=1)[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H]1O)F)CO)=O)CC#C)=O TVTJUIAKQFIXCE-HUKYDQBMSA-N 0.000 description 2
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010027164 Amanitins Proteins 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 2
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N [(2R)-1-[[4-[(3-phenylmethoxyphenoxy)methyl]phenyl]methyl]pyrrolidin-2-yl]methanol Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)OC=1C=C(OCC2=CC=C(CN3[C@H](CCC3)CO)C=C2)C=CC=1 SPXSEZMVRJLHQG-XMMPIXPASA-N 0.000 description 2
- PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N [(3r,4ar,5s,6s,6as,10s,10ar,10bs)-3-ethenyl-10,10b-dihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-1-oxo-6-(2-pyridin-2-ylethylcarbamoyloxy)-5,6,6a,8,9,10-hexahydro-2h-benzo[f]chromen-5-yl] acetate Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(O[C@](C)(CC(=O)[C@]2(O)[C@@]2(C)[C@@H](O)CCC(C)(C)[C@@H]21)C=C)C)OC(=O)C)C(=O)NCCC1=CC=CC=N1 PSLUFJFHTBIXMW-WYEYVKMPSA-N 0.000 description 2
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 2
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 2
- XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N asunaprevir Chemical compound O=C([C@@H]1C[C@H](CN1C(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(C)(C)C)OC1=NC=C(C2=CC=C(Cl)C=C21)OC)N[C@]1(C(=O)NS(=O)(=O)C2CC2)C[C@H]1C=C XRWSZZJLZRKHHD-WVWIJVSJSA-N 0.000 description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 2
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 2
- ACBQROXDOHKANW-UHFFFAOYSA-N bis(4-nitrophenyl) carbonate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 ACBQROXDOHKANW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 2
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 2
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 2
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 2
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 description 2
- 229940125851 compound 27 Drugs 0.000 description 2
- 229940125807 compound 37 Drugs 0.000 description 2
- 229940127573 compound 38 Drugs 0.000 description 2
- 229940126540 compound 41 Drugs 0.000 description 2
- 229940125936 compound 42 Drugs 0.000 description 2
- 229940125844 compound 46 Drugs 0.000 description 2
- 229940127271 compound 49 Drugs 0.000 description 2
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 2
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N ombitasvir Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NC1=CC=C([C@H]2N([C@@H](CC2)C=2C=CC(NC(=O)[C@H]3N(CCC3)C(=O)[C@@H](NC(=O)OC)C(C)C)=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)C(C)(C)C)C=C1 PIDFDZJZLOTZTM-KHVQSSSXSA-N 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- JBWKIWSBJXDJDT-UHFFFAOYSA-N triphenylmethyl chloride Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(Cl)C1=CC=CC=C1 JBWKIWSBJXDJDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N (1R,3R)-3-[[3-bromo-1-[4-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)phenyl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl]amino]-N,1-dimethylcyclopentane-1-carboxamide Chemical compound BrC1=NN(C2=NC(=NC=C21)N[C@H]1C[C@@](CC1)(C(=O)NC)C)C1=CC=C(C=C1)C=1SC(=NN=1)C ASGMFNBUXDJWJJ-JLCFBVMHSA-N 0.000 description 1
- ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N (1r,2r,4r)-2-(4-bromophenyl)-n-[(4-chlorophenyl)-(2-fluoropyridin-4-yl)methyl]-4-morpholin-4-ylcyclohexane-1-carboxamide Chemical compound C1=NC(F)=CC(C(NC(=O)[C@H]2[C@@H](C[C@@H](CC2)N2CCOCC2)C=2C=CC(Br)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 ABJSOROVZZKJGI-OCYUSGCXSA-N 0.000 description 1
- WMSUFWLPZLCIHP-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 9h-fluoren-9-ylmethyl carbonate Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)ON1C(=O)CCC1=O WMSUFWLPZLCIHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-[6-amino-8-[(4-phenylphenyl)methylamino]purin-9-yl]-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C=1C=C(C=2C=CC=CC=2)C=CC=1CNC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O YJLIKUSWRSEPSM-WGQQHEPDSA-N 0.000 description 1
- KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-oxo-4-(tritylamino)butanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 1
- VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-acetamido-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4,4-dimethylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(C)=O VIJSPAIQWVPKQZ-BLECARSGSA-N 0.000 description 1
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 1-[2-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-4,6-dihydroxyphenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 ONBQEOIKXPHGMB-VBSBHUPXSA-N 0.000 description 1
- BOHCOUQZNDPURZ-ICNZIKDASA-N 2-[(1R,4S,8R,10S,13S,16S,27R,34S)-34-[(2S)-butan-2-yl]-13-[(2R,3R)-3,4-dihydroxybutan-2-yl]-8-hydroxy-2,5,11,14,27,30,33,36,39-nonaoxo-27lambda4-thia-3,6,12,15,25,29,32,35,38-nonazapentacyclo[14.12.11.06,10.018,26.019,24]nonatriaconta-18(26),19,21,23-tetraen-4-yl]acetamide Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)CNC(=O)[C@@H]2Cc3c([nH]c4ccccc34)[S@](=O)C[C@H](NC(=O)CNC1=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1C[C@H](O)C[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](O)CO)C(=O)N2 BOHCOUQZNDPURZ-ICNZIKDASA-N 0.000 description 1
- PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(2-cyclopropylethoxy)-9-(2-hydroxy-2-methylpropyl)-1h-phenanthro[9,10-d]imidazol-2-yl]-5-fluorobenzene-1,3-dicarbonitrile Chemical compound C1=C2C3=CC(CC(C)(O)C)=CC=C3C=3NC(C=4C(=CC(F)=CC=4C#N)C#N)=NC=3C2=CC=C1OCCC1CC1 PYRKKGOKRMZEIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 2-amino-9-[(1S,6R,8R,9S,10R,15R,17R,18R)-8-(6-aminopurin-9-yl)-9,18-difluoro-3,12-dihydroxy-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecan-17-yl]-1H-purin-6-one Chemical compound NC1=NC2=C(N=CN2[C@@H]2O[C@@H]3COP(S)(=O)O[C@@H]4[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@@H]3F)O[C@H]([C@H]4F)N2C=NC3=C2N=CN=C3N)C(=O)N1 YSUIQYOGTINQIN-UZFYAQMZSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- 101800002638 Alpha-amanitin Proteins 0.000 description 1
- QCZXQEYEVLCQHL-UHFFFAOYSA-N Amanin Natural products O=C1NC(CC(O)=O)C(=O)N2CC(O)CC2C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)NC(C2)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC1CS(=O)C1=C2C2=CC=CC=C2N1 QCZXQEYEVLCQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091051 Arenine Natural products 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O Chemical compound C(C1=CC=CC=C1)[C@@H]1NC(OCCCCCCCCCCCNC([C@@H](NC(C[C@@H]1O)=O)C(C)C)=O)=O ISMDILRWKSYCOD-GNKBHMEESA-N 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126639 Compound 33 Drugs 0.000 description 1
- 229940127007 Compound 39 Drugs 0.000 description 1
- SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N Dehydro-L-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(=O)C1=O SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- KRHAHEQEKNJCSD-UHFFFAOYSA-N Dihydroasparagusic acid Natural products OC(=O)C(CS)CS KRHAHEQEKNJCSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000014450 RNA Polymerase III Human genes 0.000 description 1
- 108010078067 RNA Polymerase III Proteins 0.000 description 1
- 229940122277 RNA polymerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- RXGJTYFDKOHJHK-UHFFFAOYSA-N S-deoxo-amaninamide Natural products CCC(C)C1NC(=O)CNC(=O)C2Cc3c(SCC(NC(=O)CNC1=O)C(=O)NC(CC(=O)N)C(=O)N4CC(O)CC4C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)N2)[nH]c5ccccc35 RXGJTYFDKOHJHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N Triiodomethane Natural products IC(I)I OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N [[(2R,3S,4R,5S)-5-(2,6-dioxo-3H-pyridin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [[[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-fluoro-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]2O[C@H]([C@H](O)[C@@H]2O)C2C=CC(=O)NC2=O)[C@H](O)[C@@H](F)[C@@H]1O SMNRFWMNPDABKZ-WVALLCKVSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N alpha-amanitin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](O)CO)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1C[S@@](=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-SXZCQOKQSA-N 0.000 description 1
- CIORWBWIBBPXCG-UHFFFAOYSA-N alpha-amanitin Natural products O=C1NC(CC(N)=O)C(=O)N2CC(O)CC2C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)NC(C2)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CIORWBWIBBPXCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCZXQEYEVLCQHL-MIBTZWEZSA-N amanin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](O)CO)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1CS(=O)C1=C2C2=CC=CC=C2N1 QCZXQEYEVLCQHL-MIBTZWEZSA-N 0.000 description 1
- 108010004258 amaninamide Proteins 0.000 description 1
- BOHCOUQZNDPURZ-UHFFFAOYSA-N amaninamide Natural products O=C1NC(CC(N)=O)C(=O)N2CC(O)CC2C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)NC(C2)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC1CS(=O)C1=C2C2=CC=CC=C2N1 BOHCOUQZNDPURZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QQLVIKWYAVVKKF-XYDKGUIVSA-N amanullin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 QQLVIKWYAVVKKF-XYDKGUIVSA-N 0.000 description 1
- HFENEIQMWRYNGK-XYDKGUIVSA-N amanullinic acid Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N2C[C@H](O)C[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 HFENEIQMWRYNGK-XYDKGUIVSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)ON1C(=O)CCC1=O PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940126142 compound 16 Drugs 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- JYGAZEJXUVDYHI-UHFFFAOYSA-N dihydroartemisininic acid Natural products C1CC(C)=CC2C(C(C)C(O)=O)CCC(C)C21 JYGAZEJXUVDYHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000010235 enterohepatic circulation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N nazartinib Chemical compound C1N(C(=O)/C=C/CN(C)C)CCCC[C@H]1N1C2=C(Cl)C=CC=C2N=C1NC(=O)C1=CC=NC(C)=C1 IOMMMLWIABWRKL-WUTDNEBXSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- CTYHFRWAIRSHQT-YRDOMICZSA-N proamanullin Chemical compound O=C1N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C2)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@H]1CS(=O)C1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 CTYHFRWAIRSHQT-YRDOMICZSA-N 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- RVZPDKXEHIRFPM-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-(6-aminohexyl)carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCCCCN RVZPDKXEHIRFPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000011345 viscous material Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229960005502 α-amanitin Drugs 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая конъюгат токсина, обладающий ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы, или его фармацевтически приемлемая соль, противоопухолевое лекарственное соединение, обладающее ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы, включающее конъюгат токсина или его фармацевтически приемлемую соль, и способ применения конъюгата токсина или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого лекарственного средства, обладающего ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы. Изобретение расширяет арсенал средств, обладающих ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 13 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области биофармацевтической технологии и, в частности, относится к конъюгату амантина с антителом.
Предпосылки создания изобретения
Аманитин представляет собой бициклический пептид, состоящий из 8 аминокислот, который является одним из нескольких пептидных аманитатоксинов, выделенных из высокотоксичных грибов; существует девять природных амантинов, которые были выделены и очищены, которые, соответственно, представляют собой α-амантин, β-амантин, γ-амантин, ε-амантин, аманин, аманинамид, амануллин, амануллиновую кислоту и проамануллин, при этом α-амантин и β-амантин являются основными токсинами, ответственными за смертельные случаи. Амантины представляют собой класс медленно действующих токсинов, которые ингибируют транскрипцию эукариотической РНК-полимеразы II и РНК-полимеразы III, приводя к потере белка и клеточной гибели. Этот класс токсинов обладает чрезвычайно высоким ингибиторным эффектом на РНК-полимеразу II, с KD до 3 нМ, и они периодически абсорбируются в организме в результате энтерогепатической циркуляции в желудочно-кишечном тракте, вызывая устойчивое серьезное повреждение органов в организме человека, таких как печень, почки, сердце и легкие.
Когда амантин связывают с большим биомолекулярным носителем (таким как молекула антитела), его токсичность существенно снижается, и даже амантин становится относительно инертным, и только после удаления биомолекулярного носителя в специфических физиологических условиях амантин будет проявлять цитотоксичность.
В последние годы ряд исследовательских институтов и компаний в разных странах мира структурно модифицировали молекулы амантина с получением фармацевтически ценных конъюгатов антитело-токсин, в том числе: компания Heidelberg Pharma AG (Germany), которая осуществила связывание 1-положения, 3-δ- положения или 6'-фенольной гидроксильной группы природного амантина с моноклональным антителом с использованием линкера; компания Agensys Co. (US), которая структурно модифицировала фенил на индольном кольце α-амантина для его связывания с антителом из положения 6'-фенольного гидроксила или 7'-положения с использованием линкера; компания Hangzhou Duoxi Biotechnology Co., Ltd., которая осуществила нитрование 5'- и 7'-положений амантинового производного для его связывания с антителом с использованием линкера с амидной структурой; компания Leg Chem Biosciences Co. (Korea), которая также исследовала способы для связывания с антителом с использованием линкера из положения 6'-фенольной гидроксильной группы, а также 3-δ-положения. Из вышеперечисленных способов синтеза способ, используемый для присоединения линкера в положении 6'-фенольной гидроксильной группы, требует многостадийной защиты и удаления защиты гидроксильных групп, расположенных на других участках молекулы амантина, и соответствующий путь синтеза усложняется; кроме того, неопределенное позиционирование в реакции замещения, осуществляемой по 5'- и 7'- положениям бензольного кольца, быстро приводит к трудностям при выделении продукта и низкому выходу.
Сущность изобретения
На основании описанного выше предшествующего уровня техники, целью настоящего изобретения является предоставление конъюгата бициклического октапептидного амантинового производного и биомакромолекулы, который является стабильным в кровотоке и расщепляется после эндоцитоза клетками-мишенями, высвобождая при этом амантиновое производное, которое действует как ингибитор РНК-полимеразы, оказывая сильное токсическое действие на клетки посредством специфического ингибирования синтеза мРНК у эукариот.
Для достижения указанной выше цели настоящее изобретение использует следующее техническое решение: Конъюгат токсина, представленный структурной формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль:
Где:
n=0, 1 или 2,
R1 представляет собой -H или -OH,
R2 представляет собой -H или -OH,
R3 представляет собой -H, -OH или C1-6 алкил,
R4 представляет собой -NH2 или -OH,
R5 представляет собой -L-A,
A представляет собой часть, являющуюся биологической макромолекулой, которая связывается с мишенью, и
L представляет собой любую химическую структуру, связывающую амантиновое производное и биологическую макромолекулу.
Предпочтительно, химическая структура L включает расщепляемую или нерасщепляемую структуру.
Предпочтительно, A включает антитело или его антиген-связывающий фрагмент или антиген-связывающий полипептид.
Предпочтительно, место конъюгации L и связывающейся с мишенью биомолекулы A включает следующую структуру:
.
Предпочтительно, L связан с токсином через сложный эфир или простой эфир.
Настоящее изобретение также включает фармацевтическую композицию, содержащую вышеуказанный конъюгат токсина или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.
Настоящее изобретение также включает применение вышеуказанного конъюгата токсина или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого лекарственного средства или противоракового лекарственного средства.
Кроме того, указанное противоопухолевое лекарственное средство или противораковое лекарственное средство представляет собой лекарственное средство от рака легкого, лекарственное средство от рака почек, лекарственное средство от рака мочевыводящих путей, лекарственное средство от колоректального рака, лекарственное средство от рака предстательной железы, лекарственное средство от глиобластомы, лекарственное средство от рака яичников, лекарственное средство от рака поджелудочной железы, лекарственное средство от рака молочной железы, лекарственное средство от меланомы, лекарственное средство от рака печени, лекарственное средство от рака мочевого пузыря, лекарственное средство от злокачественной лимфомы, лекарственное средство от лейкоза, лекарственное средство от рака желудка или лекарственное средство от рака пищевода.
Определения: В соответствии со стандартной практикой в данной области техники, символ , используемый в формулах и таблицах, относящихся к настоящему изобретению, представляет собой связь в ядре или связывание по ядру фрагмента или заместителя со структурой соединения.
В соответствии со стандартной практикой в данной области техники, в контексте настоящего изобретения гетеро (атом, алкил, арил, циклическая группа) относится к соответствующей химической структуре, содержащей атом, отличный от углерода.
| Аббревиатуры и символы: | |
| Boc: | трет-бутоксикарбонил |
| PyBOP: | 1H-бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфоний гексафторфосфат |
| Cit: | L-цитруллин |
| CO2: | диоксид углерода |
| DCM: | дихлорметан |
| DIPEA: | диизопропилэтиламин |
| DMF: | диметилформамид |
| DMSO: | диметилсульфоксид |
| DPBS: | фосфатно-буферный раствор Дульбекко |
| DTPA: | диэтилентриаминпентауксусная кислота |
| DTT: | DL-дитиотреитол |
| EA: | этилацетат |
| EDTA: | этилендиаминтетрауксусная кислота |
| FBS: | фетальная бычья сыворотка |
| HATU: | O-(7-азобензотриазол)-N,N,N,N-тетраметилуроний гексафторфосфат |
| H2O: | вода |
| HOBt: | 1-гидроксибензотриазол |
| mAb: | моноклональное антитело |
| MEM: | Минимальная питательная среда |
| MTS: | 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2H-тетразолий, внутренняя соль |
| MTT: | 3-(4,5-диметилтиазол-2)-2,5-дифенилтетразолийбромид соль |
| PAB: | пара-аминобензилокси |
| PBS: | фосфатно-буферный раствор |
| Пируват натрия: | Na пируват |
| THF: | тетрагидрофуран |
| ТСХ: | тонкослойная хроматография |
| Tris: | трисгидроксиметиламинометан |
| Val: | валин |
| Trt-Cl: | хлортрифенилметан |
| TBTU: | O-(1H-бензотриазол-1-ил)-N,N,N ’ ,N ’ -тетраметилуроний тетрафторборат |
| HOBT: | 1-гидроксибензотриазол |
| TFA: | трифторуксусная кислота |
| TBS-Cl: | трет-бутилдиметилсилилхлорид |
| HOSu: | N-гидроксисукцинимид |
| Na2CO3: | карбонат натрия |
| EDCI: | 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид |
Преимущества настоящего изобретения заключаются в следующем:
Авторы настоящего изобретения конъюгировали молекулу антитела с гидроксильной группой 2-пролина амантина или его производной молекулы, используя фармацевтически приемлемую связывающую структуру, и тем самым смогли получить конъюгат, который является стабильным и нетоксичным в плазме, но может расщепляться с высвобождением токсичных молекул в больных клетках, и были приятно удивлены, обнаружив, что указанный способ связывания прост и эффективен и в значительной степени удовлетворяет потребности в массовом производстве таких продуктов в промышленных масштабах.
Настоящее изобретение раскрывает бициклическое октапептидное производное, которое конъюгировано с соответствующей связывающейся с мишенью группой через специфическую химическую структуру, которое стабильно в плазме и расщепляется с высвобождением активного лекарственного средства в определенной биологической среде, чтобы максимизировать летальность для клеток-мишеней и минимизировать токсичные побочные эффекты на клетки, не являющиеся мишенями, и которое можно использовать при лечении различных злокачественных опухолей.
Описание чертежей
Фиг. 1 показывает экспериментальные результаты, полученные из клеточной линии BT474 в Примере 13.
Фиг. 2 показывает экспериментальные результаты, полученные из клеточной линии SKBR3 в Примере 13.
Фиг. 3 показывает экспериментальные результаты, полученные из клеточной линии N87 в Примере 13.
Конкретные варианты осуществления
Настоящее изобретение описано более подробно ниже.
Пример 1: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-1
Твердофазный синтез промежуточного соединения 08:
Используя предварительно нагруженную N-флуоренилметоксикарбонил-O-трет-бутил-L-гидроксипролином смолу в качестве исходного вещества, защитную группу Fmoc удаляли с использованием 20% раствора пиперидина (20 мл 20% раствора пиперидина в 1 г смолы), затем добавляли DMF в виде раствора (20 мл/г), с последующим последовательным добавлением Fmoc-N-пропинил-L-аспарагина (Fmoc-Asn(Trt)-OH) (3 экв.), TBTU (2,5 экв.), HOBT (1,8 экв.) и DIPEA (6 экв.); реакции давали протекать в течение 2 ч при комнатной температуре (28°C), затем осуществляли промывку 3 раза при помощи DMF (20 мл DMF на 1 г смолы каждый раз), после чего осуществляли присоединение последующих аминокислот в соответствии с предыдущей процедурой; после завершения конечного связывания использовали 1% раствор TFA (по 20 мл на 1 г смолы каждый раз; 1% TFA 5 мин; повторяли три раза) для отщепления от смолы и этот раствор удаляли центрифугированием, после чего осуществляли перемешивание с метил-трет-бутиловым эфиром для индукции выделения кристаллов, с получением соединения 08 с выходом приблизительно 54% и чистотой 76%. MS: [M+H]+ 1417,6123.
Синтез соединения 09:
10 г соединения 08 растворяли с использованием TFA (10 мл/г), затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение пяти часов с последующим удалением TFA при пониженном давлении при 50°C, очищали препаративной ВЭЖХ с получением приблизительно 4,3 г чистого продукта с выходом 43% и чистотой 95,6%. MS: [M+H]+ 760,2144.
Синтез соединения 13:
2,94 г (4S)-гидроксиизолейцина, 40 мл 1,4-диоксана и 40 мл насыщенного раствора карбоната натрия добавляли в 250-мл одногорлую колбу и тщательно перемешивали, затем партиями добавляли Fmoc-OSu; через 10 минут реакцию продолжали при комнатной температуре в течение 12 часов при перемешивании до завершения взаимодействия исходного вещества; затем в реакционный раствор добавляли 50 мл воды и pH доводили до приблизительно 4 с использованием 5% раствора лимонной кислоты; осуществляли экстрагирование этилацетатом три раза (по 50 мл каждый раз) и органический слой собирали и промывали один раз с использованием 50 мл насыщенного солевого раствора, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением бледно-желтого маслянистого вещества. Никакой очистки не требовалось, и полученное вещество подавали непосредственно на следующую стадию. Выход >100%.
Синтез соединения 14:
После растворения неочищенного продукта, образованного Соединением 13, в 40 мл DMF добавляли 2,68 г имидазола (2 экв.) с последующим добавлением партиями TBS-Cl; после того, как добавление было завершено, осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение 12 часов до тех пор, пока исходные вещества полностью не прореагировали, затем добавляли 50 мл воды и 50 мл этилацетата и осуществляли перемешивание; органический слой затем отделяли с последующим экстрагированием водного слоя два раза этилацетатом (по 50 мл каждый раз) и органический слой собирали, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением светло-желтого маслянистого вещества, которое подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: PE:EA=5:1), с получением таким образом 4,5 г маслянистого вещества. Соответствующий выход от двух стадий составил приблизительно 46,6%.
Синтез соединения 15:
Соединение 14, HOSu (1,23 г, 1,15 экв.), DCC (2,23 г, 1,15 экв.) и 50 мл THF добавляли в 250-мл одногорлую колбу и осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение шести часов в атмосфере азота, затем добавляли 50 мл воды и 50 мл этилацетата и смесь перемешивали в течение 10 минут, с последующим отделением органического слоя и экстрагированием водного слоя два раза этилацетатом с использованием каждый раз по 50 мл, органический слой затем объединяли и сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением светло-желтого маслянистого вещества, которое затем очищали препаративной ВЭЖХ, с получением приблизительно 3,24 г белого пенистого твердого вещества с выходом 60%. 1H-ЯМР(400МГц, DMSO-d6): 0,08(с, 6H), 0,86(с, 9H), 0,98(д, 3H, J＝8,0Гц)，1,06(д, 3H, J＝5,6), 1,95(т, J＝10,8), 2,83(с, 4H), 4,21(дд, 1H, J＝16,8Гц, 8,0Гц), 4,34(дд, 1H, J＝12Гц, 4Гц), 4,67-4,73(м, 1H), 7,31(д, 2H, J＝8,0Гц), 7,34-7,46(м, 2H), 7,70-7,76(м, 2H), 7,89(т, 2H, J＝12,0), 8,24(д, 1H, J＝8,8Гц); MS:[M+H]+581,34。
Синтез соединения 10
После растворения 180 мг соединения 09 с использованием 1,5 мл DMF добавляли Соединение 15 (825 мг, 6 экв.) и DIPEA (0,25 мл, 6 экв.) в атмосфере азота и реакции давали осуществиться при комнатной температуре в течение пяти часов, отслеживая реакцию методом ВЭЖХ. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без необходимости в последующей очистке.
Синтез соединения 11
0,3 мл пиперидина добавляли к указанному выше реакционному раствору и реакцию продолжали при комнатной температуре при перемешивании в течение двух часов, затем реакцию останавливали, смесь очищали с использованием препаративной ВЭЖХ(нейтральные условия, ацетонитрил/чистая водная система) и фракции, соответствующие пику целевого продукта, собирали с последующим удалением ацетонитрила при пониженном давлении, затем осуществляли лиофилизацию с получением 136 мг белого порошкообразного твердого вещества с соответствующим выходом от двух стадий приблизительно 52%; MS: [M+H]+ 1003,5654.
Синтез соединения 12
После растворения 136 мг соединения 11 безводным DMF добавляли EDCI (130 мг, 5 экв.), HOBT (367 мг, 20 экв.) и DIPEA (0,12 мл, 5 экв.) и осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение четырех часов, затем использовали ВЭЖХ для подтверждения завершения реакции, затем осуществляли препаративную ВЭЖХ (нейтральные условия, ацетонитрил/чистая водная система) и фракции, соответствующие пику целевого продукта, собирали с последующим удалением ацетонитрила при пониженном давлении, осуществляли лиофилизацию с получением 60 мг белого порошкообразного твердого вещества с выходом приблизительно 45%; MS: [M+H]+ 985,5421.
Синтез соединения 17
30 г соединения 16 (49,92 ммоль, 1,0 экв.) добавляли в 500-мл круглодонную колбу и растворяли при перемешивании с 240 мл DMF, затем добавляли 22,76 г бис(п-нитрофенил)карбонат (74,87 ммоль, 1,5 экв.) и добавляли по каплям 9,68 г DIPEA (74,87 ммоль, 1,5 экв.); затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре и реакции давали осуществиться в течение 1,5 часов, при этом использовали ТСХ для подтверждения, что исходные вещества полностью прореагировали, и затем реакцию останавливали. Последующая обработка: 1,5 л изопропилового эфира добавляли в реакционную колбу при интенсивном перемешивании и перемешивание продолжали в течение двух часов перед удалением верхнего жидкого слоя, затем к остатку добавляли 800 мл изопропилового эфира и перемешивание продолжали в течение одного часа с последующим вакуумным фильтрованием, полученную фильтровальную лепешку затем добавляли в 600 мл изопропилового эфира и оставляли выстаиваться в течение ночи при перемешивании, затем осуществляли вакуумное фильтрование с получением 31,2 г коричневато-желтого порошкообразного твердого вещества с выходом 81,6%. MS: [M+H]+ 767,62.
Синтез соединения 18
31,2 г соединения 17 (40,73 ммоль, 1,0 экв.) добавляли в 500-мл одногорлую колбу и растворяли при перемешивании с 150 мл DMF, затем добавляли 8,1 г трет-бутилметил(2-(метиламино)этил)карбамата (36,66 ммоль, 1,1 экв.), растворенного в 50 мл DMF, и реакции давали осуществиться при комнатной температуре при перемешивании в течение 3,5 часов, использовали ТСХ для подтверждения, что Соединение 17 полностью прореагировало, и реакцию останавливали. Последующая обработка: 2 л изопропилового эфира добавляли в реакционный раствор и осуществляли перемешивание для осаждения вязкого маслянистого вещества на внутренней стенке колбы, затем супернатант сливали, добавляли 1 л изопропилового эфира при интенсивном перемешивании; супернатант затем снова сливали, добавляли 500 мл изопропилового эфира и смеси давали выстояться в течение ночи при перемешивании; в завершение, осуществляли вакуумное фильтрование с получением 27,2 г коричневато-желтого порошкообразного твердого вещества с выходом 81,9%. MS: [M+H]+ 816,73.
Синтез соединения 19
20 г соединения 18 (24,53 ммоль) отвешивали в 500-мл круглодонную колбу и в колбу добавляли 100 мл DMF для растворения соединения, затем добавляли по каплям 20 мл диэтиламина на ледяной бане в течение 10 минут, затем осуществляли перемешивание и реакции давали осуществиться в течение двух часов при комнатной температуре, при этом использовали ТСХ для подтверждения, что Соединение 18 полностью прореагировало, и затем реакцию останавливали. Последующая обработка: DMF и диэтиламин удаляли при пониженном давлении и полученный продукт непосредственно подавали на следующую стадию без осуществления очистки.
Синтез соединения 20
В 500-мл круглодонную колбу добавляли 150 мл DMF для растворения неочищенного продукта, представляющего собой Соединение 19, полученное на предыдущей стадии, с последующим добавлением 11,7 г N-сукцинимидил-6-малеимидогексаноата (37,98 ммоль, 1,55 экв.) и затем 8,4 мл DIEA (50,63 ммоль, 2,06 экв.), который добавляли по каплям, и осуществляли перемешивание при комнатной температуре, давая продолжиться реакции в течение двух часов, при этом использовали ТСХ для подтверждения, что исходное вещество, Соединение 19, полностью прореагировало, и затем реакцию останавливали. Последующая обработка: 1,5 л изопропилового эфира добавляли в реакционный раствор и осуществляли перемешивание для осаждения кристаллов, что приводило к осаждению твердого вещества, а также маслянистого вязкого вещества, которое прилипало к стенке колбы, супернатант сливали и добавляли 500 мл метил-трет-бутилового эфира и 500 мл изопропилового эфира для осуществления перемешивания-промывки один раз, с последующим вакуумным фильтрованием, полученную фильтровальную лепешку сушили при пониженном давлении при 45°C в вакуумной сушилке с получением 20 г неочищенного продукта в виде коричневато-желтого порошкообразного твердого вещества. MS: [M+H]+ 787,63.
Синтез соединения 21
0,4 г соединения 20 растворяли в 2 мл 50% раствора TFA в дихлорметане, затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение двух часов и использовали ТСХ для подтверждения завершения реакции, затем раствор удаляли при пониженном давлении для последующего использования и продукт непосредственно подавали на следующую стадию без необходимости в очистке.
Синтез соединения 22:
100 мг (0,10 ммоль, 1,0 экв.) соединения 12, 304 мг (1,0 ммоль, 10 экв.) бис(п-нитрофенил)карбоната и 3 мл DMF добавляли в 20-мл коричневую колбу и, когда растворение было завершено, добавляли DIPEA (260 мг, 20 экв.) и температуру повышали до 28°C в течение 24 часов в атмосфере азота, при этом использовали ВЭЖХ для отслеживания реакции и подтверждения, что исходное вещество 012 и NPC полностью прореагировали, полученный неочищенный продукт не нуждался в очистке, и его непосредственно подавали в следующую реакцию.
Синтез соединения 23
Неочищенное Соединение 21 добавляли в реакционный раствор соединения 22, затем добавляли подходящее количество DIPEA, поддерживая pH реакционного раствора в пределах от 8 до 9, осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение трех часов в атмосфере азота, когда реакция была завершена, как показал ВЭЖХ анализ, целевой продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 30 мг светло-желтого твердого вещества. MS: [M+H]+ 1697,9150.
Синтез соединения ama-1
15 мг соединения 23 добавляли в 4-мл коричневую колбу, с последующим добавлением 1 мл 5% TFA/MeOH, чтобы полностью растворить соединение, температуру реакции затем повышали до 28°C в течение одного часа в атмосфере азота и использовали ВЭЖХ (чистая вода) для отслеживания реакции, после того, как исходное вещество 23 полностью прореагировало, растворитель удаляли путем высушивания азотом и использовали ВЭЖХ для получения продукта с концентрацией ацетонитрила приблизительно 35%, который затем лиофилизировали, с получением 11 мг белого твердого вещества с выходом (Y) 42%. MS: [M+H]+ 1583,7532.
Пример 2: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-2
Приблизительно 6 мг ama-1 растворяли с использованием дихлорметана, с последующим добавлением 13 микролитров дихлорметанового раствора 1,0 экв. m CPBA (0,05 г/мл), затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение двух часов и использовали ВЭЖХ для подтверждения, что исходные вещества полностью прореагировали, затем осуществляли очистку методом препаративной ВЭЖХ с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 3 мг белого порошкообразного твердого вещества. Выход составил 49,5%. MS: [M+H]+ 1599,8450.
Пример 3: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-3
Синтез соединения 24: Ссылаясь на синтез соединения 09, получали приблизительно 1,2 г белого твердого вещества. Выход составил 25,7%. MS: [M+H]+ 790,4254.
Синтез соединения 25: Синтез осуществляли со ссылкой на Liang Zhao, et al. Synthesis of a Cytotoxic Amanitin for Biorthogonal Conjugation. ChemBionchem. 2015, 16, 1420-1425.
Синтез соединения 26: Ссылаясь на способ синтеза соединения 10, добавляли 300 мг соединения 24 и продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 27: Ссылаясь на способ синтеза соединения 11, очищали препаративной ВЭЖХ с последующей лиофилизацией с получением 195 мг белого твердого вещества с общим выходом для двух стадий 44,1%. MS: [M+H]+ 1163,6341.
Синтез соединения 28: Ссылаясь на способ синтеза соединения 12, добавляли 150 мг соединения 27 с получением 96 мг целевого соединения в виде белого твердого вещества с выходом 65%. MS: [M+H]+ 1145,6124.
Синтез соединения 29: Ссылаясь на синтез соединения 22, добавляли 80 мг соединения 28 и продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 30: Ссылаясь на синтез соединения 23, после получения и очистки было получено приблизительно 59 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 45,4%. MS: [M+H]+ 1857,9813.
Синтез соединения ama-3: Ссылаясь на синтез соединения ama-1, добавляли 40 мг соединения 30, и после получения и очистки было получено приблизительно 8,4 мг светло-желтого твердого вещества. Выход составил 24%. MS: [M+H]+ 1629,8021.
Пример 4: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-4
Синтез соединения 30: 49 мг N-трет-бутоксикарбонил-1,6-гександиамина (2 экв.) добавляли к реакционному раствору соединения 29 (при этом Соединение 28 пополняли до 500 мг, что соответствовало добавлению в этом случае 130 мг, без очистки, и рассчитано в соответствии с 100% выходом) и добавляли DIPEA по каплям, при этом pH раствора поддерживали в пределах 8-9, и осуществляли перемешивание при комнатной температуре в атмосфере азота в течение четырех часов, после подтверждения при помощи ВЭЖХ, что Соединение 29 полностью прореагировало, реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ, фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и органический растворитель удаляли центрифугированием, с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 83,4 мг белого твердого вещества с выходом 53%. [M+H]+ 1387,7541.
Синтез соединения 31: 80 мг соединения 30 растворяли в 1 мл 20% раствора TFA в дихлорметане и осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение двух часов в атмосфере азота, использовали ВЭЖХ для подтверждения, что Соединение 30 полностью прореагировало, затем органический растворитель удаляли центрифугированием при пониженном давлении и полученный продукт откладывали для последующего использования.
Синтез соединения 32: После растворения неочищенного продукта, соответствующего Соединению 31, при помощи 2 мл DMF pH доводили до 8-9 при помощи DIPEA, затем добавляли 38 мг (2 экв.) N-сукцинимидил-6-малеимидогексаноата и осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение шести часов в атмосфере азота, после подтверждения методом ВЭЖХ, что Соединение 31 полностью прореагировало, реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ, фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и органический растворитель удаляли центрифугированием, с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 46 мг белого твердого вещества с выходом 54%; [M+H]+ 1480,7841.
Синтез соединения ama-4: Ссылаясь на синтез соединения ama-3, добавляли 44 мг соединения 32 и осуществляли лиофилизацию с получением 21 мг целевого соединения с выходом 56,4%; [M+H]+ 1152,5431.
Пример 5: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-5
12 мг ama-4 растворяли с использованием дихлорметана с последующим добавлением 165 микролитров дихлорметанового раствора 5,0 экв. m CPBA (0,05 г/мл), затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение двух часов и использовали ВЭЖХ для подтверждения, что исходные вещества полностью прореагировали, затем осуществляли очистку при помощи препаративной ВЭЖХ с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 4 мг желтого порошкообразного твердого вещества. Выход составил 32,9%. MS: [M+H]+ 1268,5821.
Пример 6: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-6
Синтез соединения 33: Ссылаясь на синтез соединения 10, добавляли 300 мг соединения 09 и продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 34: Ссылаясь на синтез соединения 11, после очистки при помощи препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 248,9 мг белого твердого вещества с выходом 55,6%; MS: [M+H]+ 1133,6348.
Синтез соединения 35: Ссылаясь на синтез соединения 12, после добавления 220 мг исходного вещества 34 и очистки при помощи препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 137,3 мг белого твердого вещества с выходом 63,4%; MS: [M+H]+ 1115,6147.
Синтез соединения 36: Ссылаясь на синтез соединения 22, добавляли 120 мг исходного вещества 35 и продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 37: Ссылаясь на синтез соединения 23, после очистки при помощи препаративной ВЭЖХ органическую фазу удаляли центрифугированием и осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 112,4 мг белого твердого вещества с выходом 57,1%; MS: [M+H]+ 1827,9857.
Синтез соединения ama-6
Синтез осуществляли со ссылкой на синтез соединения ama-1, после добавления 20 мг соединения 37 и очистки при помощи препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 7 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 40%. MS: [M+H]+ 1599,8324.
Пример 7: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-7
Синтез соединения 38: Ссылаясь на синтез соединения 07, нагрузку рассчитывали до приблизительно 0,32 ммоль/г.
Синтез соединения 39: Ссылаясь на синтез соединения 08, осуществляли сушку центрифугированием с получением коричневого маслянистого вещества, которое непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 40: Ссылаясь на синтез соединения 09, после очистки препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 526,4 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 34%, рассчитанным исходя из используемого количества соединения 38. MS: [M+H]+ 866,3512.
Синтез соединения 41: Ссылаясь на синтез соединения 10, добавляли 500 мг соединения 40 и фракции, соответствующие целевым пикам, собирали с последующей лиофилизацией с получением 531,6 мг не совсем белого твердого вещества с выходом 63%. MS: [M+H]+ 1461,6624.
Синтез соединения 42: Ссылаясь на синтез соединения 11, добавляли 525 мг соединения 41, осуществляли очистку и фракции, соответствующие целевым пикам, собирали с последующей лиофилизацией с получением 368,5 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 82,8%. MS: [M+H]+ 1239,5764.
Синтез соединения 43: Ссылаясь на синтез соединения 12, добавляли 350 мг соединения 42, фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и осуществляли лиофилизацию с получением 223,4 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 64,7%. MS: [M+H]+ 1221,5748.
Синтез соединения 44: Ссылаясь на синтез соединения 22, добавляли 220 мг соединения 43 и продукт непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
Синтез соединения 45: Ссылаясь на синтез соединения 30, после очистки препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 130,2 мг светло-желтого твердого вещества с выходом 49,4%. MS: [M+H]+ 1463,7524.
Синтез соединения 46: Приблизительно 125 мг соединения 45 растворяли в 1 мл метанола, затем добавляли 12,5 мг 10% Pd/C и осуществляли реакцию восстановительного гидрирования при 40°C и 0,5 мПа в течение 12 часов, используя ВЭЖХ для подтверждения завершения реакции, затем Pd/C удаляли фильтрованием и фильтрат собирали и концентрировали с получением коричневого маслянистого вещества, которое подавали непосредственно на следующую стадию без очистки.
Синтез соединения 47: Неочищенный продукт, представляющий собой Соединение 46, растворяли в 10% растворе TFA в дихлорметане, затем реакции давали осуществиться при перемешивании и в атмосфере азота в течение одного часа при комнатной температуре, ВЭЖХ использовали для подтверждения завершения реакции, раствор удаляли центрифугированием и полученный продукт непосредственно подавали на следующую стадию без очистки.
Синтез соединения 48: Ссылаясь на синтез соединения 32 и рассчитывая исходя из 100% выхода для предыдущей стадии, после очистки препаративной ВЭЖХ фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 20,6 мг светло-желтого твердого вещества с общим выходом от трех стадий 16%. MS: [M+H]+ 1466,7436.
Синтез соединения ama-7
Ссылаясь на синтез соединения ama-1, после добавления 10 мг исходного вещества 48 и очистки при помощи препаративной ВЭЖХ фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 3,2 мг не совсем белого твердого вещества с выходом 37,9%. MS: [M+H]+ 1238,6512.
Пример 8: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-8
Синтез соединения 49: 30 мг α-аманитина растворяли с использованием 1 мл DMF, затем добавляли 9 мг карбоната калия (3 экв.), и смесь перемешивали в течение одного часа при комнатной температуре с последующим добавлением 13 мкл иодметана (10 экв.) и перемешиванием в течение 12 часов при комнатной температуре, а затем очисткой при помощи препаративной ВЭЖХ и лиофилизацией с получением приблизительно 9,1 мг целевого соединения с выходом 30%. MS: [M+H]+ 933,4031.
Синтез соединения 50: Соединение 49, полученное на предыдущей стадии, растворяли в 1 мл DMF с последующим добавлением 25 мг (10 экв.) N, N'-дисукцинимидилкарбоната и добавлением 0,14 мл (20 экв.) триэтиламина, затем осуществляли перемешивание при комнатной температуре в течение 12 часов, затем, после того как исходное вещество полностью прореагировало, осуществляли очистку при помощи препаративной ВЭЖХ, фракции, соответствующие целевым пикам, собирали и осуществляли лиофилизацию с получением 5,6 мг белого твердого вещества с выходом 59,9%; MS:[M+H]+ 959,4501.
Синтез соединения 51: Ссылаясь на синтез соединения 22, все 5,6 мг соединения 50, полученного на предыдущей стадии, добавляли к реакционной смеси и продукт непосредственно подавали на следующую стадию без очистки.
Синтез соединения ama-8:
Ссылаясь на синтез соединения 23, после очистки препаративной ВЭЖХ осуществляли лиофилизацию с получением приблизительно 3,2 мг белого твердого вещества с выходом 32,8%; MS: [M+H]+ 1671,7211.
Пример 9: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-9
Приблизительно 2 мг соединения ama-8 растворяли в 0,5 мл дихлорметана с последующим добавлением 0,6 мг (3 экв.) м-хлорпероксибензойной кислоты (m-CPBA), затем реакции давали осуществиться при перемешивании в течение трех часов при комнатной температуре, затем осуществляли очистку при помощи препаративной ВЭЖХ и собирали фракции, соответствующие целевым пикам, с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 0,8 мг белого твердого вещества с выходом 39,6%; MS: [M+H]+ 1687,7142.
Пример 10: Синтез низкомолекулярной нагрузки ama-10
Приблизительно 4 мг соединения ama-6 растворяли в 0,5 мл дихлорметана с последующим добавлением 0,5 мг (1,2 экв.) м-хлорпероксибензойной кислоты (m-CPBA), затем реакции давали осуществиться при перемешивании в течение двух часов при комнатной температуре, затем осуществляли очистку при помощи препаративной ВЭЖХ и собирали фракции, соответствующие пику целевого продукта, с последующей лиофилизацией с получением приблизительно 1,2 мг белого твердого вещества с выходом 29,7%; MS: [M+H]+ 1615,7320.
Пример 11:
Следующие соединения были получены как часть данного примера:
Пример 12: Получение конъюгата антитело-лекарственное средство
1) Общий способ конъюгации: После предварительной очистки молекулы антител с содержанием мономеров больше чем 95% подвергали процедуре обмена среды на фосфатный буфер, содержащий EDTA при концентрации 10 мг/мл, с использованием ультрафильтрационной центрифужной пробирки. Добавляли TCEP в 10-кратном молярном количестве относительно антитела и осуществляли взаимодействие в течение двух часов. Затем, используя ультрафильтрационную центрифужную пробирку для обмена раствора на pH 6,5 фосфатный буфер, добавляли DHAA в 10-кратном молярном количестве относительно антитела и реакции давали осуществиться в течение двух часов. Затем добавляли полезную нагрузку в 3-кратном молярном количестве относительно антитела и реакции давали осуществиться в течение четырех часов. Когда реакция завершилась, использовали ультрафильтрационную центрифужную пробирку с отсечкой по молекулярной массе 30 кДа для обмена раствора на PBS и несвязанную нагрузку удаляли.
2) Анализ DAR конъюгата антитело-лекарственное средство
Условия анализа для определения содержания мономера:
Образцы центрифугировали при 14000 об/мин в течение 5 минут и супернатант брали для анализа.
Устройство: Waters e2695 (2489 УФ/видимая область спектра)
Хроматографическая колонка: TSKgel G3000SWXL (7,8 × 300 мм, 5 мкм)
Подвижная фаза: A: 50 мМ PB, 300 мМ NaCl, 200 мМ Arg, 5% IPA, pH 6,5
Осуществляли элюирование с подвижной фазой A в изократическом режиме в течение 30 мин; скорость потока: 0,714 мл/мин; температура колонки: 25°C; и длина волны детекции: 280 нм.
Условия анализа DAR:
Образцы центрифугировали при 14000 об/мин в течение 5 минут и супернатант брали для анализа.
Устройство: Waters H-class (TUV)
Хроматографическая колонка: Proteomix HIC Butyl-NP5 (4,6 × 35 мм, 5 мкм)
Подвижная фаза: A: 1,5 M сульфата аммония, 0,025 M безводного фосфата натрия, pH 7,0
B: 0,025 M безводного фосфата натрия, 25% IPA, pH 7,0
Подвижную фазу A использовали для уравновешивания хроматографической колонки; после этого осуществляли градиентное элюирование с подвижной фазой A и B; скорость потока: 0,8 мл/мин; температура колонки: 25°C; и длина волны детекции: 214 нм.
Структурная формула A0301 является следующей:
3) Результаты99
Таблица 1 показывает, что конъюгат антитела, связанный из сайта гидроксипролина, демонстрирует относительно благоприятный процент мономера и относительно высокое значение DAR. Из-за схожести их структур Соединения 1-14 также демонстрируют относительно благоприятный процент мономера и относительно высокое значение DAR.
| Таблица 1 | ||
| Номер | Процент мономера | DAR |
| Герцептин-007 | 93,86% | -- |
| Герцептин-007-A0301 | 93,47% | 1,81 |
| Герцептин-007-ama-3 | 95,08% | 1,87 |
| Герцептин-007-ama-4 | 96,34% | 1,86 |
| Герцептин-007-ama-6 | 95,44% | 1,7 |
| Герцептин-007-ama-8 | 95,27% | 1,86 |
| Герцептин-007-ama-9 | 95,20% | 1,83 |
| Герцептин-007-ama-10 | 95,61% | 1,86 |
Пример 13: Испытание на активность in vitro
1) Материалы, используемые в эксперименте
Клетки: получены от Cell Bank of Chinese Academy of Sciences
Среда для культивирования опухолевых клеток: Gibco
FBS: BIOWEST
2) Получение культуральной среды
Питательная среда (с 10% FBS, Пенициллин/стрептомицин (100 Ед/мл)
Среда для детекции (с 1% FBS, Пенициллин/стрептомицин (100 Ед/мл)
3) Процедура
Ультрафиолетовую лампу бокса биологической безопасности включали заранее за 30 минут для облучение, а затем в течение 3 минут осуществляли воздухообмен. Питательную среду, среду для детекции, D-PBS и трипсин предварительно нагревали на водяной бане с термостатом 37°C и после стерилизации поверхности их помещали в бокс биологической безопасности. Клетки с конфлюэнтностью около 80% помещали в бокс биологической безопасности, старую среду удаляли путем аспирации, клетки промывали D-PBS с последующей аспирацией и расщеплением трипсином в течение 2-3 минут, после этого добавляли питательную среду для нейтрализации реакции и осуществляли центрифугирование при 1200 об/мин в течение трех минут. Полученный после центрифугирования супернатант удаляли путем аспирации, и добавляли 4 мл среды для количественного определения и гомогенно смешивали, после этого 100 мкл раствора использовали для подсчета (при этом 50 мкл содержащего клетки раствора тщательно смешивали с 50 мкл красителя трипанового синего и затем осуществляли подсчет). Клетки высевали, в соответствии с предварительно установленным количеством клеток, при плотности 80 мкл на лунку в 96-луночные планшеты; в лунки E11, F11 и G11 добавляли только 80 мкл среды для детекции, а в крайние лунки добавляли 150 мкл DPBS. Разбавление раствора антител: 300 мкл раствора испытываемого продукта с начальной концентрацией 5 мкМ получали в первой колонке 96-луночного планшета V-типа, при этом в каждую из колонок 2-10 добавляли 210 мкл среды для детекции; затем брали 30 мкл предварительной смеси из первой колонки и добавляли во вторую колонку, смешивали пипеткой 10 раз вверх и вниз и наконечник пипетки затем выбрасывали; и затем последовательно получали семь последующих концентраций с использованием такой же процедуры. Через 24 часа после посева добавляли разбавленное антитело при 20 мкл на лунку и устанавливали дополнительные контроли; только 20 мкл среды для детекции добавляли в колонку 11, для каждой концентрации устанавливали две дублирующие лунки и после добавления клетки подвергали вихревому перемешиванию при 550 об/мин в течение трех минут.
4) Анализ
Через 4 дня реагент MTS удаляли и образцы размораживали при комнатной температуре, защищая от света, и осуществляли интенсивное перемешивание вихревым способом; 20 мкл CellTiter 96® One Solution Reagen MTS реагента добавляли вдоль боковой стенки лунок на каждые 100 мкл объема клеточной культуры и осторожно похлопывали по поверхности планшета для гомогенного смешивания раствора MTS, после чего образцы помещали в инкубатор для клеточных культур для статической инкубации в течение двух часов, защищая при этом от воздействия света. После завершения реакции 96-луночный планшет извлекали, определяли значение оптической плотности при OD 490 нм с использованием считывающего устройства для микропланшетов и соответствующие данные регистрировали, сортировали и хранили.
5) Результаты
Как показано в Таблице 2 и на Фиг. 1-3, хорошая противоопухолевая активность была продемонстрирована в клеточных линиях BT474/SKBR3/N87. Из-за схожести их структур Соединения 1-14 также демонстрируют относительно благоприятную противоопухолевую активность.
| Таблица 2 | |||
| Номер | BT474 IC50 (нМ) |
SKBR3 IC50 (нМ) |
N87 IC50 (нМ) |
| Герцептин-007-ama-3 | 19,31 | 0,21 | 11,72 |
| Герцептин-007-ama-4 | 200~1000 | >1000 | >1000 |
| Герцептин-007-ama-6 | 200~1000 | >1000 | ~1000 |
| Герцептин-007-ama-8 | 9,87 | 0,15 | 6,61 |
| Герцептин-007-ama-9 | 34,77 | 0,14 | 5,92 |
| Герцептин-007-ama-10 | 7,36 | 0,14 | 24,19 |
| Герцептин-007-A0301 | >1000 | 0,25 | >1000 |
В предыдущем разделе варианты осуществления настоящего изобретения были подробно описаны вместе с примерами, чтобы полностью пояснить, как настоящее изобретение использует определенные технические средства для решения соответствующих технических проблем и достижения технической эффективности, и они могут быть использованы в качестве основы для его осуществления. Следует отметить, что отдельные варианты осуществления настоящего изобретения и индивидуальные характерные признаки каждого варианта осуществления могут быть объединены друг с другом, и полученные технические решения должны оставаться в пределах объема настоящего изобретения при условии отсутствия каких-либо противоречий.
Claims (16)
1. Конъюгат токсина, обладающий ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы, содержащий фрагмент токсина и биомакромолекулу A, заявленный в структурной формуле (I), или его фармацевтически приемлемая соль
где:
n=0, 1 или 2;
R1 представляет собой -H или -OH;
R2 представляет собой -H или -OH;
R3 представляет собой -H, -OH или -OC1-6 алкил;
R4 представляет собой -NH2 или -OH;
R5 представляет собой -L-A, где A представляет собой антитело или его антиген-связывающий фрагмент, или его антиген-связывающий полипептид, которые сконфигурированы для связывания с мишенью, и L представляет собой химическую структуру, выбранную из группы из сукцинимида и его формы с раскрытием цикла, -C(=O)-, -C(=O)NH- и C1-6 алкила, связывающую аманитиновое производное и биологическую макромолекулярную часть А.
2. Конъюгат токсина по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где L включает расщепляемую или нерасщепляемую химическую структуру.
3. Конъюгат токсина по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где место конъюгации L и связывающейся с мишенью биомолекулы A включает следующую структуру:
.
4. Конъюгат токсина по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где L связан с аманитиновым производным через сложноэфирную или простую эфирную связь.
5. Противоопухолевое лекарственное соединение, обладающее ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы, включающее конъюгат токсина по п. 1 или его фармацевтически приемлемую соль.
6. Способ применения конъюгата токсина по п. 1 или его фармацевтически приемлемой соли для получения противоопухолевого лекарственного средства, обладающего ингибирующей активностью в отношении РНК-полимеразы, путем включения конъюгата токсина или его фармацевтически приемлемой соли.
7. Способ по п. 6, где указанное противоопухолевое лекарственное средство содержит лекарственное средство от рака легкого, лекарственное средство от рака почек, лекарственное средство от рака мочевыводящих путей, лекарственное средство от колоректального рака, лекарственное средство от рака предстательной железы, лекарственное средство от глиобластомы, лекарственное средство от рака яичников, лекарственное средство от рака поджелудочной железы, лекарственное средство от рака молочной железы, лекарственное средство от меланомы, лекарственное средство от рака печени, лекарственное средство от рака мочевого пузыря, лекарственное средство от злокачественной лимфомы, лекарственное средство от лейкоза, лекарственное средство от рака желудка или лекарственное средство от рака пищевода.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710804207.8 | 2017-09-08 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2023131488A Division RU2023131488A (ru) | 2017-09-08 | 2018-09-08 | Конъюгат амантина с антителом |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020137094A RU2020137094A (ru) | 2022-05-13 |
| RU2809116C2 true RU2809116C2 (ru) | 2023-12-06 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011130580A1 (en) * | 2010-04-15 | 2011-10-20 | Alper Biotech, Llc | Monoclonal antibodies against her2 antigens, and uses therefor |
| RU2470668C2 (ru) * | 2005-08-19 | 2012-12-27 | Эндосайт, Инк. | Конъюгаты лиганда с несколькими лекарственными средствами |
| US10245326B2 (en) * | 2015-08-06 | 2019-04-02 | Landon C. G. Miller | Amantadine, memantine, and rimantadine conjugates and a pharmaceutical composition for treatment of neuronal disorders |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2470668C2 (ru) * | 2005-08-19 | 2012-12-27 | Эндосайт, Инк. | Конъюгаты лиганда с несколькими лекарственными средствами |
| WO2011130580A1 (en) * | 2010-04-15 | 2011-10-20 | Alper Biotech, Llc | Monoclonal antibodies against her2 antigens, and uses therefor |
| US10245326B2 (en) * | 2015-08-06 | 2019-04-02 | Landon C. G. Miller | Amantadine, memantine, and rimantadine conjugates and a pharmaceutical composition for treatment of neuronal disorders |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018329066B2 (en) | Amanitin antibody conjugate | |
| DK2678037T3 (en) | Branched linker for protein pharmaceutical conjugates | |
| AU2019268215B2 (en) | Process for preparing intermediate of antibody drug conjugate | |
| Billing et al. | Cyclic peptides containing a δ-sugar amino acid—synthesis and evaluation as artificial receptors | |
| JP4012145B2 (ja) | ピロール−イミダゾールポリアミドの固相合成法 | |
| AU2020204250B2 (en) | One-pot process for preparing intermediate of antibody-drug conjugate | |
| JP7292751B2 (ja) | 抗体薬物複合体用薬物リンカーｍｃ－ｍｍａｆの調製方法及びその中間体 | |
| CA3085001C (en) | One-pot process for preparing intermediate of antibody-drug conjugate | |
| AU2018317611B2 (en) | Non-natural amatoxin-type antibody conjugate | |
| RU2809116C2 (ru) | Конъюгат амантина с антителом | |
| US9446141B2 (en) | Methods of producing cancer compounds | |
| CN114409563B (zh) | 一类连接子用于蛋白质标记及其在生物药中的应用 | |
| CN104906592B (zh) | 用于蛋白质药物偶联物的支链联接体 | |
| CN109232712A (zh) | 一种用于抗体药物偶联物的中间体的制备方法 | |
| RU2798981C2 (ru) | Конъюгат антитела с аматоксином неприродного типа | |
| JP2013526577A (ja) | 葉酸を標的にする薬剤用の改善されたプロセス | |
| Sharma et al. | Exploiting azido-dichloro-triazine as a linker for regioselective incorporation of peptides through their N, O, S functional groups | |
| CN113979981B (zh) | 一种巯基响应型脱碱基位点捕获试剂及应用 | |
| AU2022383308A1 (en) | Antibody-drug conjugate intermediate comprising sn38 and preparation method therefor | |
| CA3076714C (en) | Method for producing antibody-drug conjugate intermediate by addition of acid and use thereof | |
| Hemantha et al. | Synthesis of Hybrid Peptidomimetics and Neoglycoconjugates Employing Click Protocol: dual utility of Poc-group for inserting carbamate-triazole units into peptide backbone | |
| WO2022196797A1 (ja) | アミノ酸又はペプチドの製造方法、保護基形成用試薬、及び、化合物 | |
| EP4247798A1 (en) | Synthesis of prostate specific membrane antigen (psma) ligands | |
| CN113045567A (zh) | 基于蛋白磷酸酶5的磷酸酶募集嵌合体(PHORCs)化合物、其制备方法和医药用途 | |
| CN116574154A (zh) | 一种环肽-来那度胺类protac衍生物及其制备方法和在抗癌药物中的应用 |