RU2791194C1 - Method for treatment of chronic periodontitis using mesenchymal stem cells of adipose tissue - Google Patents
Method for treatment of chronic periodontitis using mesenchymal stem cells of adipose tissue Download PDFInfo
- Publication number
- RU2791194C1 RU2791194C1 RU2022107262A RU2022107262A RU2791194C1 RU 2791194 C1 RU2791194 C1 RU 2791194C1 RU 2022107262 A RU2022107262 A RU 2022107262A RU 2022107262 A RU2022107262 A RU 2022107262A RU 2791194 C1 RU2791194 C1 RU 2791194C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adipose tissue
- treatment
- stem cells
- stromal
- periodontitis
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии и предназначено для лечения хронического генерализованного пародонтита.The present invention relates to medicine, namely to dentistry, and is intended for the treatment of chronic generalized periodontitis.
Хронический генерализованный пародонтит проявляется такими симптомами, как кровоточивость и припухание десен, неприятный запах изо рта и подвижность зубов, приводит к потере зубов и часто сопровождается снижением качества жизни пациентов. Причиной развития пародонтита является бактериальная биопленка и индивидуальная реакция организма-хозяина Немаловажными факторами в развитии заболевания является общесоматический статус и местные факторы, способствующие развитию воспаления, такие как кариозные полости и некариозные поражения, нависающие края пломб, некачественно изготовленные протезы, травматические узлы окклюзии и другое.Chronic generalized periodontitis is manifested by symptoms such as bleeding and swelling of the gums, bad breath and tooth mobility, leads to loss of teeth and is often accompanied by a decrease in the quality of life of patients. The reason for the development of periodontitis is a bacterial biofilm and the individual reaction of the host organism. Important factors in the development of the disease are the general somatic status and local factors that contribute to the development of inflammation, such as carious cavities and non-carious lesions, overhanging edges of fillings, poorly made prostheses, traumatic occlusion nodes, and more.
Высокая распространенность воспалительных заболеваний пародонта и отсутствие тенденции к их снижению является серьезной проблемой стоматологии, требующей поиска новых способов лечения на современном этапе. Существуют противовоспалительные препараты на основе антисептиков и антибактериальных средств с доказанной эффективностью, которые способствуют снижению кровоточивости десен и отечности тканей, позволяющие добиться клинически значимого улучшения у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта. Препараты на основе бактериофагов рекомендованы для улучшения иммунного статуса, однако не оказывают противовоспалительного эффекта. Инъекционные препараты гиалуроновой кислоты и обогащенной аутоплазмы внедрены в пародонтологическую практику для стимуляции регенерации костной ткани после лазерного кюретажа пародонтальных карманов, однако для достижения ощутимого клинического эффекта требуется неоднократное повторение таких процедур.The high prevalence of inflammatory periodontal diseases and the lack of a tendency to reduce them is a serious problem in dentistry, requiring the search for new methods of treatment at the present stage. There are anti-inflammatory drugs based on antiseptics and antibacterials with proven efficacy, which reduce gum bleeding and tissue swelling, allowing for clinically significant improvement in patients with inflammatory periodontal disease. Preparations based on bacteriophages are recommended to improve the immune status, but do not have an anti-inflammatory effect. Injectable preparations of hyaluronic acid and enriched autoplasma have been introduced into periodontal practice to stimulate bone tissue regeneration after laser curettage of periodontal pockets, however, to achieve a tangible clinical effect, repeated repetition of such procedures is required.
В реальной клинической практике лечение пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом заключается в терапевтическом лечении, направленном на устранение бактериальной биопленки и факторов, обеспечивающих ее аккумуляцию на зубе; хирургическом лечении, направленном на ликвидацию очагов воспаления: закрытый и открытый кюретаж, гингивэктомию, пластику уздечек языка и губ, вестибулопластику и др.; ортодонтическое лечение; ортопедическое лечение и поддерживающую пародонтальную терапию. Согласно российским и международным клиническим рекомендациям поддерживающая пародонтальная терапия проводится каждые 3 или 6 месяцев в зависимости от тяжести заболевания (Клинические рекомендации (протоколы лечения) при диагнозе пародонтит, утверждены «СтАР» 23.04.2013, актуализированы 02.08.2018 г.).In real clinical practice, the treatment of patients with chronic generalized periodontitis consists in therapeutic treatment aimed at eliminating the bacterial biofilm and the factors that ensure its accumulation on the tooth; surgical treatment aimed at eliminating foci of inflammation: closed and open curettage, gingivectomy, plastic surgery of the frenulum of the tongue and lips, vestibuloplasty, etc .; orthodontic treatment; orthopedic treatment and supportive periodontal therapy. According to Russian and international clinical guidelines, periodontal maintenance therapy is carried out every 3 or 6 months, depending on the severity of the disease (Clinical guidelines (treatment protocols) for the diagnosis of periodontitis, approved by StAR on April 23, 2013, updated on August 2, 2018).
К недостаткам такого ведения являются:The disadvantages of such management are:
1. Неудовлетворенность пациентов, низкое качество жизни.1. Patient dissatisfaction, poor quality of life.
2. Симптоматический характер лечения, отсутствие влияния на регенерацию пародонтальной связки.2. Symptomatic nature of the treatment, no effect on the regeneration of the periodontal ligament.
3. Высокий риск осложнений в виде появления рецессий десны.3. High risk of complications in the form of gum recession.
4. Появление послеоперационных болей после хирургических вмешательств.4. The appearance of postoperative pain after surgical interventions.
5. Появление гиперчувствительности зубов после пародонтологических вмешательств.5. The appearance of tooth hypersensitivity after periodontal interventions.
Известны методы реабилитации тканей пародонта, основанные на электронейростимуляции. У пациентов с хроническим пародонтитом чрескожная электростимуляция позволяет повысить качество жизни и снизить болевые ощущения и отечность тканей [1].Known methods of rehabilitation of periodontal tissues based on electrical nerve stimulation. In patients with chronic periodontitis, transcutaneous electrical stimulation can improve the quality of life and reduce pain and tissue swelling [1].
К недостаткам метода относятся:The disadvantages of the method include:
1. Временный эффект.1. Temporary effect.
2. Необходимость многократного повторения процедуры.2. The need for repeated repetition of the procedure.
Новым перспективным направлением лечения воспалительных заболеваний пародонта относится клеточная терапия, в частности использование мультипотентных стволовых клеток жировой ткани.Cellular therapy, in particular, the use of multipotent adipose tissue stem cells, is a promising new direction in the treatment of inflammatory periodontal diseases.
Введение стромально-васкулярной фракции жировой ткани путем инъекций в зону наружного сфинктера мочевого пузыря показало свою эффективность для лечения недержания мочи [2], как путь доставки лекарств у пациентов, перенесших инсульт [3], для лечения ожогов кожи и «диабетической стопы» [4], инъекционное введение в связки суставов в травматологии и ортопедии при лечении дегенеративных процессов [5, 6], в постфибротической репарации печени [7, 8, 9].The introduction of the stromal-vascular fraction of adipose tissue by injection into the zone of the external sphincter of the bladder has shown its effectiveness for the treatment of urinary incontinence [2], as a drug delivery route in stroke patients [3], for the treatment of skin burns and "diabetic foot" [4 ], injection into the ligaments of the joints in traumatology and orthopedics in the treatment of degenerative processes [5, 6], in post-fibrotic liver repair [7, 8, 9].
В настоящее время в России и за рубежом проходит ряд исследований по применению полученных из жировой ткани стволовых клеток в лечении стоматологических заболеваний в экспериментах на лабораторных животных [10, 11].Currently, a number of studies are underway in Russia and abroad on the use of stem cells derived from adipose tissue in the treatment of dental diseases in experiments on laboratory animals [10, 11].
В исследованиях на животных была доказана эффективность и безопасность использования полученных из жировой ткани аутологичных мезенхимальных клеток при лечении различных заболеваний [3, 12, 13].Animal studies have proven the efficacy and safety of using adipose tissue-derived autologous mesenchymal cells in the treatment of various diseases [3, 12, 13].
Механизм действия стволовых клеток связан как с клеточной дифференцировкой в хондроциты и остеобласты [4, 14, 15], так и с секрецией биологически активных веществ [2, 16].The mechanism of action of stem cells is associated both with cell differentiation into chondrocytes and osteoblasts [4, 14, 15] and with the secretion of biologically active substances [2, 16].
Сведения об использовании мезенхимальных стволовых клеток для лечения пародонтита, а также введении стромально-васкулярной фракции в область пародонтальной связки в научно-технической, литературе отсутствуют.Information on the use of mesenchymal stem cells for the treatment of periodontitis, as well as the introduction of the stromal-vascular fraction into the area of the periodontal ligament, is not available in the scientific and technical literature.
В качестве ближайшего аналога предлагаемого способа выбран способ лечения дегенеративных и травматических заболеваний костной ткани челюстно-лицевой области с применением биотрансплантата, содержащего аутологичные и донорские мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки костного мозга или жировой ткани взрослых доноров, которые распределены в фибриновом (Патент РФ №2380105 С1, 2010). Способ заключается в том, что выделенные из костного мозга или жировой ткани мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки (ММСК), ферментативно дезагригируют трипсином и вносят из расчета 5-7 млн. клеток на 1 мл аутогенной обогащенной тромбоцитами плазмы, перемешивают, при необходимости с добавлением дополнительных компонентов, полученную суспензию смешивают с материалом матрицы-носителя, представляющей собой коллаген-минеральный комплекс в виде блоков, стружки или крошки, отмытым раствором Хэнкса с цефазолином (1 г/л), затем по каплям добавляют раствор тромбина 50 Ед/мл на 10% хлорида кальция до загустения и полимеризуют при температуре 37°С в течение от 3 до 30 суток в остеогенной культуральной среде. Используя стандартные хирургические доступы, в дефект костной ткани вводят биотрансплантат в объеме, соответствующем дефекту, то есть по 1 мл биотрансплантата на 1 см3 дефекта, после чего закрытие раневой поверхности также осуществляется по стандартным методикам.As the closest analogue of the proposed method, a method for the treatment of degenerative and traumatic diseases of the bone tissue of the maxillofacial region using a biograft containing autologous and donor multipotent mesenchymal stem cells of the bone marrow or adipose tissue of adult donors, which are distributed in fibrin (RF Patent No. 2380105 C1, 2010). The method consists in the fact that multipotent mesenchymal stem cells (MMSC) isolated from bone marrow or adipose tissue are enzymatically disaggregated with trypsin and added at the rate of 5-7 million cells per 1 ml of autogenous platelet-rich plasma, mixed, if necessary with the addition of additional components , the resulting suspension is mixed with the carrier matrix material, which is a collagen-mineral complex in the form of blocks, chips or crumbs, washed with Hanks solution with cefazolin (1 g/l), then a solution of thrombin 50 U/ml per 10% chloride is added dropwise calcium to thicken and polymerize at a temperature of 37°C for 3 to 30 days in an osteogenic culture medium. Using standard surgical approaches, a biograft is introduced into the bone tissue defect in a volume corresponding to the defect, that is, 1 ml of the biograft per 1 cm 3 of the defect, after which the wound surface is also closed according to standard methods.
Недостатки данного метода:Disadvantages of this method:
1. Высокие биологические риски при использовании ММСК из костного мозга.1. High biological risks when using MMSCs from the bone marrow.
2. Сложность получения ММСК из костного мозга при трепанобиопсии и малое количество клеток в полученном пунктате.2. Difficulty in obtaining MMSC from the bone marrow during trepanobiopsy and a small number of cells in the resulting punctate.
3. Интраоперационное введение травматичнее, чем инъекционное.3. Intraoperative administration is more traumatic than injection.
4. Отсутствие данных о влиянии на регенерацию костной ткани пародонта, и соответственно об эффективности при лечении хронического пародонтита.4. Lack of data on the effect on the regeneration of periodontal bone tissue, and, accordingly, on the effectiveness in the treatment of chronic periodontitis.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является создание нового способа лечения хронического пародонтита, обеспечивающего повышение эффективности лечения.The task to be solved by the present invention is the creation of a new method for the treatment of chronic periodontitis, providing an increase in the effectiveness of treatment.
Существенными отличиями заявленного способа являются:The essential differences of the claimed method are:
1. Инновационность.1. Innovation.
2. Использование регенераторного потенциала собственного организма пациента за счет применения аутологичной стромально-васкулярной фракции.2. Using the regenerative potential of the patient's own body through the use of autologous stromal-vascular fraction.
3. Наличие продолжительного лечебного эффекта.3. The presence of a long-term therapeutic effect.
4. Возможность снизить число посещений в ходе комплексного лечения.4. Possibility to reduce the number of visits during complex treatment.
Преимущество заявленного способа заключается в возможности добиться состояния стойкой ремиссии хронического пародонтита у пациентов любого пола.The advantage of the claimed method lies in the ability to achieve a state of stable remission of chronic periodontitis in patients of any gender.
Технический результат заявляемого изобретения - снижение кровоточивости и припухания десен, восстановление зубо-десневого пародонтального прикрепления, восстановление уровня минерализации костной ткани межзубных перегородок альвеолярных отростков челюстей по данным комплексного стоматологического обследования.The technical result of the claimed invention is the reduction of bleeding and swelling of the gums, the restoration of dentogingival periodontal attachment, the restoration of the level of mineralization of the bone tissue of the interdental septa of the alveolar processes of the jaws according to a comprehensive dental examination.
Заявляемый способ лечения хронического генерализованного пародонтита апробирован на экспериментальной модели хронического пародонтита и заключается в инъекционном введении в мягкие ткани пародонта стромально-васкулярной фракции (СВФ), полученной из аутологичной жировой ткани на 4 сутки после операции лазерного кюретажа.The claimed method for the treatment of chronic generalized periodontitis was tested on an experimental model of chronic periodontitis and consists in injecting a stromal vascular fraction (SVF) obtained from autologous adipose tissue into the soft tissues of the periodontium on day 4 after laser curettage.
Моделирование хронического пародонтита на кроликах породы Советская Шиншилла проводили в соответствии с авторской методикой (Патент РФ №2654598, 2018). Способ моделирования экспериментального пародонтита включает использование инфекционного агента и механическое повреждение тканей пародонта. Для этого создают дефект десны путем разрыва круговой связки нижних зубов. Вводят в это дефект инфицированные зубные отложения - зубной налет и зубной камень, заранее взятые у пациента с тяжелой формой пародонтита. Далее на зубы наносят самопротравливающую адгезивную систему, отсвечивают ее при помощи фотополимерной лампы, накладывают ортодонтическую проволоку и фиксируют ее при помощи жидкотекучего композиционного материала. Способ обеспечивает получение адекватной модели заболевания. На 28 сутки после моделирования хронического пародононтита у лабораторных животных проводили осмотр, общеклинические анализы крови, конусно-лучевую компьютерную томографию (КЛКТ), морфологическое исследование.Modeling of chronic periodontitis in rabbits of the Soviet Chinchilla breed was carried out in accordance with the author's methodology (RF Patent No. 2654598, 2018). The method for modeling experimental periodontitis includes the use of an infectious agent and mechanical damage to periodontal tissues. To do this, a gum defect is created by rupturing the circular ligament of the lower teeth. Infected dental deposits are introduced into this defect - dental plaque and tartar taken in advance from a patient with a severe form of periodontitis. Next, a self-etching adhesive system is applied to the teeth, it is illuminated with a photopolymer lamp, an orthodontic wire is applied and fixed with a fluid composite material. The method provides an adequate model of the disease. On the 28th day after the modeling of chronic periodontitis in laboratory animals, an examination, general clinical blood tests, cone beam computed tomography (CBCT), and a morphological study were performed.
Жировую ткань забирали интраоперационно из брызжейки. Выделение стромально-васкулярной фракции проводили неферментным методом. Общий объем полученной в ходе операции жировой ткани от одного животного достигал 20 мл. Далее производили центрифугирование шприцов с липоаспиратом в течение 4 минут при скорости 2500 оборотов/мин, без остановки. После центрифугирования жировую фракцию извлекали с помощью верхнего шприца АСР. Заготовленный центрифугированный жир медленно переносили в один из 10 мл шприцов через коннектор 2.4 мм. Затем эту порцию жира интенсивно «перегоняли» 30 раз с максимальной скоростью между двумя 10 мл шприцами через коннектор 1,4 мм. Далее вновь переносили данную эмульгированную жировую фракцию в шприцы АСР и производили повторное центрифугирование в течение 4 мин при 2500 оборотах/минуту. После повторного центрифугирования на дне шприцов выявлялся клеточный осадок (стромально-васкулярная фракция) в объеме 5 мл. Введение стромально-васкулярной фракции проводили на 4 сутки после операции лазерный кюретаж. СВФ вводили с помощью иглы G30 в маргинальную десну экспериментального животного в 10 точках из расчета 0,5 мл/точка. Через 1 и 4 недели после вмешательства проводили клиническую оценку результатов, анализы крови. Через 28 дней после введения СВФ кролику проводили конусно-лучевую компьютерную томографию челюстных костей и морфологическое исследование.Adipose tissue was taken intraoperatively from the mesentery. Isolation of the stromal-vascular fraction was performed by a non-enzymatic method. The total volume of adipose tissue obtained during the operation from one animal reached 20 ml. Next, the syringes were centrifuged with lipoaspirate for 4 minutes at a speed of 2500 rpm, without stopping. After centrifugation, the fat fraction was extracted using an ACP top syringe. The harvested centrifuged fat was slowly transferred into one of the 10 ml syringes through a 2.4 mm connector. Then this portion of fat was intensively “distilled” 30 times at maximum speed between two 10 ml syringes through a 1.4 mm connector. Next, this emulsified fat fraction was again transferred into ACP syringes and re-centrifugation was performed for 4 minutes at 2500 rpm. After repeated centrifugation, a cell sediment (stromal-vascular fraction) was detected at the bottom of the syringes in a volume of 5 ml. The introduction of the stromal-vascular fraction was performed on the 4th day after the laser curettage. SVF was injected with a G30 needle into the marginal gingiva of the experimental animal at 10 points at a rate of 0.5 ml/point. After 1 and 4 weeks after the intervention, a clinical assessment of the results, blood tests were performed. 28 days after the administration of SVF, the rabbit underwent cone-beam computed tomography of the jaw bones and a morphological study.
Способ лечения хронического пародонтита с использованием мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани продемонстрировал эффективность и безопасность в комплексном лечении хронического пародонтита на экспериментальной модели хронического пародонтита. Механизм действия стволовых клеток связан как с клеточной дифференцировкой в остеобласты [5, 11, 13], так и с секрецией биологически активных веществ [4, 9, 12, 16]. Процессы клеточной регенерации и активации метаболических процессов в тканях пародонта приводят к восстановлению пародонтального прикрепления и костной ткани межзубной перегородки. Клинически это проявляется улучшением состояния десны, снижением кровоточивости и отечности маргинальной и папиллярной десны, десна плотно охватывает шейки зубов.A method for the treatment of chronic periodontitis using mesenchymal stem cells of adipose tissue has demonstrated efficacy and safety in the complex treatment of chronic periodontitis in an experimental model of chronic periodontitis. The mechanism of action of stem cells is associated both with cell differentiation into osteoblasts [5, 11, 13] and with the secretion of biologically active substances [4, 9, 12, 16]. The processes of cellular regeneration and activation of metabolic processes in periodontal tissues lead to the restoration of periodontal attachment and bone tissue of the interdental septum. Clinically, this is manifested by an improvement in the condition of the gums, a decrease in bleeding and swelling of the marginal and papillary gums, the gum tightly covers the necks of the teeth.
Клинический пример. В качестве примера применения способа лечения приводим данные обследования лабораторного животного кролика породы Советская Шиншилла, у которого смоделирован экспериментальный пародонтит.Clinical example. As an example of the application of the method of treatment, we present data from a survey of a laboratory animal rabbit of the Soviet Chinchilla breed, in which experimental periodontitis is modeled.
Результаты обследования до лечения: Кролик породы Советская Шиншилла весом 2850 гр. Внешний вид без особенностей. В полости рта слизистая маргинального края десны отечна, гиперемирована, кровоточит при зондировании.The results of the examination before treatment: Rabbit breed Soviet Chinchilla weighing 2850 gr. Appearance without features. In the oral cavity, the mucosa of the marginal edge of the gums is edematous, hyperemic, and bleeds on probing.
На Фиг. 1 - Экспериментальный пародонтит на лабораторном животном: А - Клиническая картина на 28 сутки после моделирования экспериментального пародонтита. В - Конусно-лучевая компьютерная томография экспериментального животного на 28 сутки после моделирования экспериментального пародонтита.On FIG. 1 - Experimental periodontitis on a laboratory animal: A - Clinical picture on the 28th day after the simulation of experimental periodontitis. C - Cone-beam computed tomography of the experimental animal on the 28th day after the modeling of experimental periodontitis.
Лейкоциты крови - 7,13×109/л, нейтрофилы - 1,33×109/л, гемоглобин - 141 г/л, тромбоциты - 501×109/л, АлТ - 33,2 Е/л, АсТ - 24,2 Е/л, гидроксипролин в сыворотке крови - 72 нг/мл, «костная» щелочная фосфатаза - 48 Е/л, С-реактивный белок в сыворотке крови - 10,3 г/мл.Blood leukocytes - 7.13×10 9 /l, neutrophils - 1.33×10 9 /l, hemoglobin - 141 g/l, platelets - 501×10 9 /l, ALT - 33.2 U/l, AST - 24.2 U/l, hydroxyproline in blood serum - 72 ng/ml, "bone" alkaline phosphatase - 48 U/l, C-reactive protein in blood serum - 10.3 g/ml.
КЛКТ: в области резцов нижней челюсти определяется воспалительная деструкция костной ткани межзубных костных перегородок до ¼ длины корней зубов.CBCT: in the area of the incisors of the lower jaw, inflammatory destruction of the bone tissue of the interdental bone septa is determined up to ¼ of the length of the roots of the teeth.
Лечение:Treatment:
1. Забор жировой ткани для приготовления стромально-васкулярной фракции: в условиях общего наркоза (препараты Золетил-100 и Ксила) проведен забор жировой ткани из брызжейки в объеме 20 мл. Материал отправлен в лабораторию для приготовления стромально-васкулярной фракции.1. Sampling of adipose tissue for preparation of the stromal-vascular fraction: under general anesthesia (Zoletil-100 and Xyla preparations), adipose tissue was sampled from the mesentery in a volume of 20 ml. The material was sent to the laboratory for the preparation of the stromal-vascular fraction.
2. Приготовление стромально-васкулярной фракции в объеме 5 мл - в объеме 5 мл по описанной выше методике.2. Preparation of the stromal-vascular fraction in a volume of 5 ml - in a volume of 5 ml according to the method described above.
3. В условиях наркоза препаратами Ксила и Золетил-100 кроликам проводилась операция лазерный кюретаж пародонтальных карманов с применением высокоинтенсивного диодного лазера SiroLaser (Sirona) мощность 2,8 Вт, длина волны 980 нм, оптоволокно 320 мкм, по 10 секунд на каждый пародонтальный карман.3. Under conditions of anesthesia with Xyla and Zoletil-100, rabbits underwent laser curettage of periodontal pockets using a high-intensity diode laser SiroLaser (Sirona) with a power of 2.8 W, a wavelength of 980 nm, an optical fiber of 320 μm, for 10 seconds for each periodontal pocket.
4. В условиях наркоза препаратами Ксила и Золетил-100 кролику на 4 сутки после лазерного кюретажа проводили инъекции СВФ в 10 точках маргинальной десны по 0,5 мл/точка.4. Under conditions of anesthesia with Xyla and Zoletil-100, the rabbit was injected with SVF at 10 points of the marginal gingiva, 0.5 ml/point, on the 4th day after laser curettage.
На Фиг. 2 представлены фото: А - Лазерный кюретаж пародонтальных карманов животному с экспериментальным пародонтитом, проводится диодным лазером. В - Проведение инъекций СВФ экспериментальному животному на 4 сутки после лазерного кюретажа.On FIG. 2 photos are presented: A - Laser curettage of periodontal pockets in an animal with experimental periodontitis, performed with a diode laser. C - SVF injections to an experimental animal on the 4th day after laser curettage.
Результаты обследования после лечения: Вес кролика 2830 гр. Внешний вид без особенностей. На 7 сутки после операции слизистая альвеолярного отростка бледно-розовая, гладкая, блестящая, по маргинальному краю фибриновый налет. На 28 сутки наблюдения десна бледно-розовая, гладкая, блестящая, плотно охватывает корни зубов животного, соответствует состоянию здоровой десны (Фиг. 3А).The results of the examination after treatment: The weight of the rabbit is 2830 gr. Appearance without features. On the 7th day after the operation, the mucosa of the alveolar process is pale pink, smooth, shiny, with fibrin plaque along the marginal edge. On the 28th day of observation, the gingiva is pale pink, smooth, shiny, densely covers the roots of the animal's teeth, corresponds to the state of a healthy gingiva (Fig. 3A).
Лейкоциты крови - 5,52×109/л, нейтрофилы - 1,11×109/л, гемоглобин - 140 г/л, тромбоциты - 450×109/л, АлТ - 32,7 Е/л, АсТ - 24,5 Е/л, гидроксипролин в сыворотке крови - 75 нг/мл, «костная» щелочная фосфатаза - 42 Е/л, С-реактивный белок в сыворотке крови - 5,4 г/мл.Blood leukocytes - 5.52×10 9 /l, neutrophils - 1.11×10 9 /l, hemoglobin - 140 g/l, platelets - 450×10 9 /l, ALT - 32.7 U/l, AST - 24.5 U / l, hydroxyproline in blood serum - 75 ng / ml, "bone" alkaline phosphatase - 42 U / l, C-reactive protein in blood serum - 5.4 g / ml.
КЛКТ: в области резцов нижней челюсти определяется межзубная костная перегородка минерализованна на всю длину корней зубов.CBCT: in the region of the incisors of the lower jaw, an interdental bone septum is determined, mineralized along the entire length of the roots of the teeth.
Результаты наблюдения за животными после лазерного кюретажа и введения СВФ представлены на Фиг. 3: А - Фото клинической картины на 28 сутки наблюдения. В - КЛКТ животного на 28 сутки комплексного лечения. С - Микрофотография фрагмента зуба, связочного аппарата и фрагмента костной перегородки без структурных изменений на 28 сутки после лазерного кюретажа и инъекции СВФ. Ув. 100. Окраска гематоксилин и эозин.The results of monitoring animals after laser curettage and administration of SVF are shown in Fig. 3: A - Photo of the clinical picture on the 28th day of observation. C - CBCT of the animal on the 28th day of complex treatment. C - Micrograph of a tooth fragment, ligamentous apparatus and a fragment of the bone septum without structural changes on the 28th day after laser curettage and SVF injection. SW. 100. Staining with hematoxylin and eosin.
Морфологическое исследование на 28 сутки: полное восстановление связочного аппарата (зрелые коллагеновые волокна) и костной перегородки. Зубной сосочек представлен плотной волокнистой соединительной тканью (Фиг. 3С).Morphological examination on the 28th day: complete restoration of the ligamentous apparatus (mature collagen fibers) and the bone septum. The dental papilla is represented by dense fibrous connective tissue (Fig. 3C).
Результат: восстановление зубо-десневого пародонтального прикрепления, восстановление плотности костной ткани межзубной перегородки.Result: restoration of dentogingival periodontal attachment, restoration of bone density of the interdental septum.
Таким образом, предлагаемый способ повышает эффективность хронического генерализованного пародонтита за счет стимулирующего влияния аутологичной стромально-васкулярной фракции жировой ткани, содержащей мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки на восстановление пародонтального зубо-десневого прикрепления после лазерного кюретажа. Клинически это проявляется восстановлением пародонтального зубо-десневого пародонтального прикрепления и костной ткани межзубной перегородки. Из анализа научно-технической, патентной литературы и материалов следует, что заявляемое техническое решение соответствуют критериям «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».Thus, the proposed method increases the effectiveness of chronic generalized periodontitis due to the stimulating effect of the autologous stromal-vascular fraction of adipose tissue containing multipotent mesenchymal stem cells on the restoration of periodontal dentogingival attachment after laser curettage. Clinically, this is manifested by the restoration of periodontal dentogingival periodontal attachment and bone tissue of the interdental septum. From the analysis of scientific, technical, patent literature and materials it follows that the claimed technical solution meets the criteria of "novelty", "inventive step" and "industrial applicability".
Список литературыBibliography
1. Мандра Ю.В., Жегалина Н.М., Григорьев С.С., Светлакова Е.Н., Костина И.Н., Иощенко Е.С., Ваневская Е.А. Опыт применения динамической электронейростимуляции в комплексном лечении стоматологических заболеваний. Проблемы стоматологии. - 2014. - №3. - С. 21-24.1. Yu. V. Mandra, N. M. Zhegalina, S. S. Grigoriev, E. N. Svetlakova, I. N. Kostina, E. S. Experience in the use of dynamic electrical nerve stimulation in the complex treatment of dental diseases. Problems of dentistry. - 2014. - No. 3. - S. 21-24.
2. Зырянов А.В., Бердюгин К.А., Борзунов И.В., Цветков А.И., Баженов И.В., Филиппова Е.С. Способ лечения гипотонии мочевого пузыря с использованием мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани. Патент на изобретение Ru 2712029 С1, 24.01.2020. Заявка №2019119277 от 19.06.2019.2. Zyryanov A.V., Berdyugin K.A., Borzunov I.V., Tsvetkov A.I., Bazhenov I.V., Filippova E.S. A method for treating bladder hypotension using mesenchymal adipose tissue stem cells. Patent for invention Ru 2712029 C1, 01/24/2020. Application No. 2019119277 dated 06/19/2019.
3. Павлова С.В., Сергеевичев Д.С., Чепелева Е.В., Козырева B.C., Малахова А.А., Захарова И.С., Григорьева Е.В., Покушалов Е.А., Закиян С.М. Сравнение мезенхимальных стромальных клеток костного мозга и региональных стволовых клеток сердца и фибробластов кожи человека. Патология кровообращения и кардиохирургия. - 2015. - Т. 19. - №4-2. - С. 12-19.3. Pavlova S.V., Sergeevichev D.S., Chepeleva E.V., Kozyreva B.C., Malakhova A.A., Zakharova I.S., Grigorieva E.V., Pokushalov E.A., Zakian S. M. Comparison of mesenchymal bone marrow stromal cells and regional heart stem cells and human skin fibroblasts. Circulatory pathology and cardiac surgery. - 2015. - T. 19. - No. 4-2. - S. 12-19.
4. Свистушкин В.М., Старостина С.В., Свистушкин М.В., Тимашев С.Ф., Шехтер А.Б., Файзуллин A.M., Побиванцева А.А., Луничева А.А., Лебедева Г.В. Влияние мезенхимальных стромальных клеток на восстановление структуры голосовых складок при рубцовых изменениях. Контролируемое экспериментальное исследование. Фарматека. - 2020. - Т. 27. - №5. - С. 65-71.4. V. M. Svistushkin, S. V. Starostina, M. V. Svistushkin, S. F. Timashev, A. B. Shekhter, A. M. Faizullin, A. A. Pobivantseva, A. A. Lunicheva, and G. Lebedeva, Russ. IN. Influence of mesenchymal stromal cells on the restoration of the structure of the vocal folds in cicatricial changes. Controlled experimental study. Pharmateka. - 2020. - T. 27. - No. 5. - S. 65-71.
5. Смышляев И.А., Гильфанов С.И., Еремин И.И., Пулин А.А., Гильмутдинова И.Р. Возможности лечения дегенеративнодистрофических заболеваний коленного сустава при помощи стромально-васкулярной фракции из жировой ткани. Гены и Клетки. - 2019. - Т. 14. - №S. - С. 217.5. Smyshlyaev I.A., Gilfanov S.I., Eremin I.I., Pulin A.A., Gilmutdinova I.R. Possibilities of treatment of degenerative-dystrophic diseases of the knee joint using stromal-vascular fraction from adipose tissue. Genes and Cells. - 2019. - T. 14. - No. S. - S. 217.
6. Kholodenko I.V., Kurbatov L.K., Kholodenko R.V., Manukyan G.V., Yarygin K.N. Mesenchymal stem cells in the adult human liver: hype or hope? Cells. - 2019. - T.8 (10). - P. 1127. DOI: 11.2290/cells8101127.6. Kholodenko I.V., Kurbatov L.K., Kholodenko R.V., Manukyan G.V., Yarygin K.N. Mesenchymal stem cells in the adult human liver: hype or hope? Cells. - 2019. - V.8 (10). - P. 1127. DOI: 11.2290/cells8101127.
7. Марченко Л.Н., Чекина А.Ю., Федулов A.C., Джумова М.Ф., Качан Т.В., Волотовский И.Д., Квачева З.Б., Василевич И.Б. Клеточная терапия воспалительно-дистрофических заболеваний роговицы. Российский общенациональный офтальмологический форум. - 2020. - Т. 2. - С. 472-475.7. L. N. Marchenko, A. Yu. Cell therapy of inflammatory-dystrophic diseases of the cornea. Russian national ophthalmological forum. - 2020. - V. 2. - S. 472-475.
8. Еремин П.С., Супруненко Е.А., Мурзабеков М.Б., Голиченков В., Беспятых А.Ю., Котенко К.В., Еремин И.И. Разработка экспериментальной модели терапии фиброза печени с помощью стромально-васкулярной фракции жировой ткани. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2013. - Т.8. - №3. - С. 22-23.8. Eremin P.S., Suprunenko E.A., Murzabekov M.B., Golichenkov V., Bespyatykh A.Yu., Kotenko K.V., Eremin I.I. Development of an experimental model for the treatment of liver fibrosis using the stromal-vascular fraction of adipose tissue. Cell transplantation and tissue engineering. - 2013. - V.8. - No. 3. - S. 22-23.
9. Маклакова И.Ю., Гребнев Д.Ю., Юсупова В.Ч., Петрунина Е.М. Влияние трансплантации мультипотентных мезенхимальных стролальных клеток на морфометрические показатели печени зрелых и старых лабораторных животных в условиях токсического гепатита. Морфология. - 2020. - Т. 157. - №1. - С. 55-60.9. Maklakova I.Yu., Grebnev D.Yu., Yusupova V.Ch., Petrunina E.M. Effect of transplantation of multipotent mesenchymal strolal cells on liver morphometric parameters in mature and old laboratory animals under conditions of toxic hepatitis. Morphology. - 2020. - T. 157. - No. 1. - S. 55-60.
10. Venkataiah V.C., Yahata Y., Kitagata A., Inagaki M., Kakiuchi Y., Nakano M., Suzuki S., Handa K., Saito M. Clinical applications of Cell-Scaffold constructs for bone regenerarion therapy. Cells. - 2021. - 10 (10). - P. 2687. DOI 10.3390/cells10102687.10. Venkataiah V.C., Yahata Y., Kitagata A., Inagaki M., Kakiuchi Y., Nakano M., Suzuki S., Handa K., Saito M. Clinical applications of Cell-Scaffold constructs for bone regenerarion therapy. Cells. - 2021. - 10 (10). - P. 2687. DOI 10.3390/cells10102687.
11. Денисова Ю.Л., Рубникович С.П., Кузьменко Е.В., Андреева В.А. Анализ показателей восстановления костной ткани при применении мезенхимальных стволовых клеток. Сборник: Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации. Материалы 76-ой научной сессии ВГМУ. Под ред. А.Т. Щастного. УО «Витебский государственный медицинский университет». - 2021. - С. 75-76.11. Denisova Yu.L., Rubnikovich S.P., Kuzmenko E.V., Andreeva V.A. Analysis of indicators of bone tissue recovery with the use of mesenchymal stem cells. Collection: Achievements of fundamental, clinical medicine and pharmacy. Materials of the 76th scientific session of VSMU. Ed. A.T. Shchastny. EE "Vitebsk State Medical University". - 2021. - S. 75-76.
12. Sakuma R., Takahashi A., Nakano-Doi A., Sawada R., Kamachi S., Beppu M., Takagi Т., Yoshimura S., Matsuyama Т., Nakagomi T. Comparative characterization of ischemia-induced brain multipotent stem cells with mesenchymal stem cells: similarities and differences. Stem Cells Dev. - 2018. - 27 (19). - P. 1322-1338. DOI: 10.1089/scd.2018.0075.12. Sakuma R., Takahashi A., Nakano-Doi A., Sawada R., Kamachi S., Beppu M., Takagi T., Yoshimura S., Matsuyama T., Nakagomi T. Comparative characterization of ischemia-induced brain multipotent stem cells with mesenchymal stem cells: similarities and differences. Stem Cell Dev. - 2018. - 27 (19). - P. 1322-1338. DOI: 10.1089/scd.2018.0075.
13. Sekiya I., Katano H., Mizuno M., Koga H., Masumoto J., Tomita M., Ozeki N. Alterations in cartilage quantification before and after injections of mesenchymal stem cells into osteoarthritic knees. Sci. Rep. - 2021. - 11(1). - P. 13832. DOI: 10.1038/s41598-021093462-8.13. Sekiya I., Katano H., Mizuno M., Koga H., Masumoto J., Tomita M., Ozeki N. Alterations in cartilage quantification before and after injections of mesenchymal stem cells into osteoarthritic knees. sci. Rep. - 2021. - 11(1). - P. 13832. DOI: 10.1038/s41598-021093462-8.
14. Yeo E.F., Markides H., Schade A.T., Studd A.J., Oliver J.M., Waters S.L., El Haj A.J. Experimental and mathematical modelling of magnetically labelled mesenchymal stromal cell delivery. J.R. Soc. Interface. - 2021. - 18(175): 20200558. DOI: 10.1098/rsif.2020.0558.14. Yeo E.F., Markides H., Schade A.T., Studd A.J., Oliver J.M., Waters S.L., El Haj A.J. Experimental and mathematical modeling of magnetically labeled mesenchymal stromal cell delivery. J.R. soc. Interface. - 2021. - 18(175): 20200558. DOI: 10.1098/rsif.2020.0558.
15. Шехтер А.Б., Курков А.В., Файзуллин А.Л. Морфологические аспекты тканевой инженерии. Гены и Клетки. - 2017. - Т. 12(3). - С. 268-269.15. Shekhter A.B., Kurkov A.V., Faizullin A.L. Morphological aspects of tissue engineering. Genes and Cells. - 2017. - T. 12(3). - S. 268-269.
16. Ranganath S.H., Levy О., Inamdar M.S., Karp J.M. Harnessing the mesenchymal stem cell secretome for the treatment of cardiovascular disease. Cell Stem Cell. - 2012. - 10(3). - P. 244-258. DOI: 10.1016/j.stem.2012.02.005.16. Ranganath S.H., Levy O., Inamdar M.S., Karp J.M. Harnessing the mesenchymal stem cell secretome for the treatment of cardiovascular disease. Cell Stem Cell. - 2012. - 10(3). - P. 244-258. DOI: 10.1016/j.stem.2012.02.005.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2791194C1 true RU2791194C1 (en) | 2023-03-03 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2800646C1 (en) * | 2023-03-31 | 2023-07-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of periodontitis treatment using stroma-vascular fraction of human adipose tissue and osteogenesis stimulator medicinal product |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2380105C1 (en) * | 2008-07-29 | 2010-01-27 | ЗАО "РеМеТэкс" | Biotransplant, method for making thereof and method of treating degenerative and traumatic diseases of maxillofacial bone tissue |
| WO2010024702A2 (en) * | 2008-08-28 | 2010-03-04 | Akademia Medyczna Im. Piastow Slaskich We Wroclawiu | Pharmaceutical composition for the treatment of periodontal diseases |
| JP2011109951A (en) * | 2009-11-26 | 2011-06-09 | Kao Corp | Method for creating periodontitis model and nonhuman animal of periodontitis model |
| RU2606040C2 (en) * | 2015-04-01 | 2017-01-10 | Ирина Николаевна Усманова | Method for treating chronic inflammation of paradentium tissues and mucous membrane with hyperkeratosis in young individuals |
| RU2654598C1 (en) * | 2017-04-05 | 2018-05-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации" (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России) | Method of positioning of experimental periodontitis |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2380105C1 (en) * | 2008-07-29 | 2010-01-27 | ЗАО "РеМеТэкс" | Biotransplant, method for making thereof and method of treating degenerative and traumatic diseases of maxillofacial bone tissue |
| WO2010024702A2 (en) * | 2008-08-28 | 2010-03-04 | Akademia Medyczna Im. Piastow Slaskich We Wroclawiu | Pharmaceutical composition for the treatment of periodontal diseases |
| JP2011109951A (en) * | 2009-11-26 | 2011-06-09 | Kao Corp | Method for creating periodontitis model and nonhuman animal of periodontitis model |
| RU2606040C2 (en) * | 2015-04-01 | 2017-01-10 | Ирина Николаевна Усманова | Method for treating chronic inflammation of paradentium tissues and mucous membrane with hyperkeratosis in young individuals |
| RU2654598C1 (en) * | 2017-04-05 | 2018-05-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации" (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России) | Method of positioning of experimental periodontitis |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| В.П. РУСАНОВ и др., Обоснование применения трансплантата на основе аутологичных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани в хирургическом лечении экспериментального пародонтита, Вестник КазНМУ, Алматы, 1, 2016, стр. 301-309. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2800646C1 (en) * | 2023-03-31 | 2023-07-25 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of periodontitis treatment using stroma-vascular fraction of human adipose tissue and osteogenesis stimulator medicinal product |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Baba et al. | Phase I/II trial of autologous bone marrow stem cell transplantation with a three-dimensional woven-fabric scaffold for periodontitis | |
| Aimetti et al. | Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report. | |
| Orhan et al. | Odontoblast‐like cell numbers and reparative dentine thickness after direct pulp capping with platelet‐rich plasma and enamel matrix derivative: a histomorphometric evaluation | |
| JP5002816B2 (en) | Transplant material and bone quality improver | |
| Rubnikovich et al. | Regenerative cell technologies for gingival recession treatment | |
| Brizuela et al. | Allogeneic cellular therapy in a mature tooth with apical periodontitis and accidental root perforation: a case report | |
| JPWO2019216438A1 (en) | Periodontal disease therapeutic agent containing culture supernatant of mesenchymal cells | |
| RU2627582C1 (en) | Method for treatment of destructive chronic periodontitis using injection form of autological platelet plasma | |
| RU2791194C1 (en) | Method for treatment of chronic periodontitis using mesenchymal stem cells of adipose tissue | |
| RU2418571C1 (en) | Biotransplant, method of its obtaining and method of treating periodontal diseases | |
| RU2605630C1 (en) | Method of autotransplantation of tooth with preserving its pulp viability | |
| RU2320285C2 (en) | Method for restoring alveolar jaw bone crest and periodontium tissues having reduced recovery potential | |
| RU2626826C1 (en) | Method for hypertrophic gingivitis treatment in patients with non-removable orthodontic devices with application of injection form of autological platelet-rich plasma | |
| Araújo et al. | Use of platelet-rich fibrin (PRF) in dental surgical procedures | |
| JP2007037635A (en) | Gelled composition for periodontium regeneration | |
| KR101871810B1 (en) | Pharmaceutical Composition for Temporomandibular Joint Disorders comprising Stromal Vascular Fraction | |
| RU2551312C1 (en) | Method for dentofacial tissue repair | |
| Ren et al. | Biomaterials derived from hard palate mucosa for tissue engineering and regenerative medicine | |
| Kumar et al. | Regenerative endodontics | |
| RU2344772C1 (en) | Method of treatment of destructive forms of chronic generalised periodontitis | |
| RU2725243C1 (en) | Method of treating parodontosis | |
| RU2794464C1 (en) | Biocomplex to stimulate tissue regeneration and remodeling | |
| Aleid | Tissue engineering: an analogous platelet rich fibrin for coronal pulpotomy in revival of pulp tissue vitality in adult molar with pulpitis, a case report | |
| US20230277729A1 (en) | Photobiomodulation (PBM) and Anti-Microbial Photo Disinfection Therapy (aPDT) of Morula Stem Cells (MoSC) In-Vivo and In-Vitro | |
| RU2787679C1 (en) | Method for treatment of gingi recession using sans mots oil |