RU2788097C2 - Терапевтические и нейропротекторные пептиды - Google Patents
Терапевтические и нейропротекторные пептиды Download PDFInfo
- Publication number
- RU2788097C2 RU2788097C2 RU2019126014A RU2019126014A RU2788097C2 RU 2788097 C2 RU2788097 C2 RU 2788097C2 RU 2019126014 A RU2019126014 A RU 2019126014A RU 2019126014 A RU2019126014 A RU 2019126014A RU 2788097 C2 RU2788097 C2 RU 2788097C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- retinal
- cells
- luminate
- field
- glycinyl
- Prior art date
Links
- 230000000324 neuroprotective Effects 0.000 title description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 6
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 title description 3
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims abstract description 43
- 230000002207 retinal Effects 0.000 claims abstract description 18
- 229930002945 all-trans-retinaldehyde Natural products 0.000 claims abstract description 16
- 235000020945 retinal Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000011604 retinal Substances 0.000 claims abstract description 16
- 210000001116 Retinal Neurons Anatomy 0.000 claims abstract description 10
- 206010064930 Age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000002780 Macular Degeneration Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000001965 increased Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000004410 intraocular pressure Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000003583 Retinal Pigment Epithelium Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 230000003412 degenerative Effects 0.000 claims abstract 2
- 201000011056 retinal disease Diseases 0.000 claims abstract 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims description 4
- 206010038848 Retinal detachment Diseases 0.000 claims description 3
- 210000002301 Subretinal Fluid Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000001328 Optic Nerve Anatomy 0.000 abstract description 9
- 230000004380 optic nerve Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- VLSMHEGGTFMBBZ-OOZYFLPDSA-N Kainic acid Chemical compound CC(=C)[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)[C@H]1CC(O)=O VLSMHEGGTFMBBZ-OOZYFLPDSA-N 0.000 description 24
- 229950006874 kainic acid Drugs 0.000 description 24
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 206010022114 Injury Diseases 0.000 description 16
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 210000001525 Retina Anatomy 0.000 description 12
- 239000003855 balanced salt solution Substances 0.000 description 12
- 210000000327 Mueller cell Anatomy 0.000 description 9
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 8
- 239000002609 media Substances 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 210000003169 Central Nervous System Anatomy 0.000 description 6
- 208000003098 Ganglion Cysts Diseases 0.000 description 6
- 208000005400 Synovial Cyst Diseases 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 210000004556 Brain Anatomy 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 230000001537 neural Effects 0.000 description 5
- 210000002569 neurons Anatomy 0.000 description 5
- 201000007737 retinal degeneration Diseases 0.000 description 5
- 230000004258 retinal degeneration Effects 0.000 description 5
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 5
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 4
- 206010056677 Nerve degeneration Diseases 0.000 description 4
- 206010052639 Nerve injury Diseases 0.000 description 4
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 4
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 230000001146 hypoxic Effects 0.000 description 4
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 description 4
- 230000001603 reducing Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 4
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 210000000278 Spinal Cord Anatomy 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal Effects 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000000306 component Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000000626 neurodegenerative Effects 0.000 description 3
- 230000002981 neuropathic Effects 0.000 description 3
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 3
- 230000002887 neurotoxic Effects 0.000 description 3
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 1-[(1S,2R,3R,4S,5R,6R)-3-carbamimidamido-6-{[(2R,3R,4R,5S)-3-{[(2S,3S,4S,5R,6S)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-(methylamino)oxan-2-yl]oxy}-4-formyl-4-hydroxy-5-methyloxolan-2-yl]oxy}-2,4,5-trihydroxycyclohexyl]guanidine Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 206010007515 Cardiac arrest Diseases 0.000 description 2
- 208000008069 Geographic Atrophy Diseases 0.000 description 2
- 208000010496 Heart Arrest Diseases 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L MgCl2 Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010053643 Neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 2
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 2
- 210000003994 Retinal Ganglion Cells Anatomy 0.000 description 2
- 208000007014 Retinitis Pigmentosa Diseases 0.000 description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 2
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement Effects 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000004406 elevated intraocular pressure Effects 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000000302 ischemic Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000926 neurological Effects 0.000 description 2
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 2
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical group 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 230000002588 toxic Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 229930006677 A03BA01 - Atropine Natural products 0.000 description 1
- 229940064005 Antibiotic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 229940083879 Antibiotics FOR TREATMENT OF HEMORRHOIDS AND ANAL FISSURES FOR TOPICAL USE Drugs 0.000 description 1
- 229940042052 Antibiotics for systemic use Drugs 0.000 description 1
- 229940042786 Antitubercular Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 210000000702 Aorta, Abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 206010059512 Apoptosis Diseases 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N Atropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N 0.000 description 1
- 229960000396 Atropine Drugs 0.000 description 1
- 229940098773 Bovine Serum Albumin Drugs 0.000 description 1
- 108091003117 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000020504 Collagenase family Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase family Proteins 0.000 description 1
- 210000000795 Conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N Cysteic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CS(O)(=O)=O XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N Diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000981 Epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003722 Extracellular Fluid Anatomy 0.000 description 1
- JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229940093922 Gynecological Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- WZUVPPKBWHMQCE-VYIIXAMBSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@@]2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-VYIIXAMBSA-N 0.000 description 1
- 229960004184 Ketamine Hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 description 1
- 206010025425 Maculopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000003205 Muscles Anatomy 0.000 description 1
- 102100002496 NOS2 Human genes 0.000 description 1
- 101700049309 NOS2 Proteins 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 208000008760 Optic Nerve Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010061323 Optic neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 108009000578 Oxidative Stress Proteins 0.000 description 1
- 229940055729 Papain Drugs 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 229940049954 Penicillin Drugs 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 210000001428 Peripheral Nervous System Anatomy 0.000 description 1
- 208000001293 Peripheral Nervous System Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010034606 Peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 231100000614 Poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000008513 Spinal Cord Injury Diseases 0.000 description 1
- 229960005322 Streptomycin Drugs 0.000 description 1
- QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N Thr-Pro Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O QOLYAJSZHIJCTO-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- 229940024982 Topical Antifungal Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 210000001631 Vena Cava, Inferior Anatomy 0.000 description 1
- 206010047571 Visual impairment Diseases 0.000 description 1
- 208000000208 Wet Macular Degeneration Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- HAMNKKUPIHEESI-UHFFFAOYSA-N aminoguanidine Chemical compound NNC(N)=N HAMNKKUPIHEESI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000009412 basement excavation Methods 0.000 description 1
- 229960000626 benzylpenicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral Effects 0.000 description 1
- 201000004569 blindness Diseases 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003529 diazepam Drugs 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cells Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001771 impaired Effects 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 229940079866 intestinal antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- VCMGMSHEPQENPE-UHFFFAOYSA-N ketamine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=1C=CC=C(Cl)C=1C1([NH2+]C)CCCCC1=O VCMGMSHEPQENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003902 lesions Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940005935 ophthalmologic Antibiotics Drugs 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 201000007914 proliferative diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating Effects 0.000 description 1
- 239000000790 retinal pigment Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic Effects 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000004393 visual impairment Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и медицине. Предложено применение пептида, который содержит глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновую кислоту-треонил-пролин для восстановления ранее утраченной остроты зрения у субъекта, представляющего собой человека или животного, страдающего от неэкссудативной или сухой возрастной макулярной дегенерации, или для защиты зрительного нерва, клеток Мюллера сетчатки, нейронов сетчатки или клеток пигментного эпителия сетчатки от повреждения вследствие повышенного внутриглазного давления или дегенеративного заболевания сетчатки. Изобретение обеспечивает улучшение наибольшей остроты зрения с коррекцией (BCVA) у субъектов с сухой возрастной макулярной дегенерацией, в частности BCVA улучшилось до 20 букв. 5 з.п. ф-лы, 6 ил., 5 табл., 6 пр.
Description
Родственные заявки
По настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительными заявками на патент США № 62/448300, озаглавленной «Нейропротекторные пептиды», поданной 19 января 2017 г., и 62/500998, озаглавленной «Терапевтические пептиды и их механизмы действия», поданной 3 мая 2017 г., полное раскрытие обоих этих заявок включено в настоящий документ посредством ссылки.
Перечень последовательностей
Настоящая заявка содержит Перечень последовательностей, который был представлен в электронном виде в формате ASCII и настоящим полностью включен посредством ссылки. Указанная копия ASCII, созданная 31 мая 2018 г., называется ALLEG-008PC_SL.txt и имеет размер 591 байт.
Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Настоящее изобретение в целом относится к областям биологии и медицины и, в частности, к нейропротекторным пептидам, используемым для лечения повреждений нервов, возникающих в результате нейродегенеративных или нейропатических заболеваний (например, глаукомы, пигментного ретинита, наследственных или приобретенных дегенераций сетчатки, периферической нейропатии, нейродегенеративной центральной нервной системы (ЦНС) или периферических нарушений), гипоксических поражений (например, остановки сердца или инсульта) или механических повреждений (например, травмы, повреждений спинного мозга), а также применимы для усиления восстановления сетчатки и неврологических тканей и регенерационной терапии сетчатки и неврологических заболеваний посредством улучшения иммуномодулирующей функции.
Предшествующий уровень техники настоящего изобретения
В соответствии с 37 CFR 1.71(e) настоящий патентный документ содержит материал, который подлежит защите авторских прав, и владелец настоящего патентного документа сохраняет за собой все авторские права.
Известно, что помимо травматических повреждений нервов и гипоксических поражений различные заболевания вызывают нейродегенеративные или нейропатические эффекты. Например, глаукома представляет собой нейропатию зрительного нерва, которая вызывает экскавацию или «купирование» диска зрительного нерва, дегенерацию ганглиозных клеток сетчатки и, как следствие, потерю поля зрения. Поскольку повышенное внутриглазное давление (IOP) является основным фактором риска развития глаукомы, многие стратегии лечения были направлены на снижение внутриглазного давления.
Недавние исследования показывают, что дегенерация нерва, возникающая при глаукоме, может быть результатом процесса, подобного тому, который происходит после травматического повреждения нейронов центральной нервной системы (ЦНС). Например, после повреждения ЦНС уровни некоторых нейротоксичных веществ увеличиваются во внеклеточной жидкости. Считается, что эти токсичные вещества затем вызывают вторичное повреждение нейронов в дополнение к механическому повреждению, которое произошло в результате первичной травмы. Лекарственные средства, способные предотвращать или уменьшать действие этих нейротоксических веществ, могут быть кандидатами для разработки не только в качестве нейропротекторов для глаз, но также и в качестве нейропротекторов, применимых для уменьшения гибели или нарушений нейронов после повреждения или травмы других нейрональных тканей, включая в себя головной и спинной мозг. Смотрите Yoles, E., et al.; a2-Adrenoreceptor Agonists Are Neuroprotective in a Rat Model of Optic Nerve Degeneration; Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 40, No. 1, pp. 65-73 (January 1999) и Neufeld, A.H., et al.; Inhibition of Nitric-Oxide Synthase 2 by Aminoguanidine Provides Neuroprotection of Retinal Ganglion Cells in a Rat Model of Chronic Glaucoma; Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96 (1999).
Заявитель в настоящее время разрабатывает синтетический олигопептид (Luminate®, Allegro Ophthalmics, LLC), который ингибирует ряд интегринов и при введении в глаз может вызывать витреолиз, заднюю витреоретинальную отслойку (PVD) и может использоваться для лечения нарушений зрения, таких как влажная форма макулодистрофии (WMD), диабетическая ретинопатия (PDR), диабетическая макулопатия (DME) и витреомакулярная тракция (VMT). Как описано в настоящем документе, заявитель обнаружил, что этот синтетический олигопептид также демонстрирует нейропротекторные эффекты в крысиной модели дегенерации зрительного нерва и, как указано выше, также может быть эффективным для предотвращения или восстановления других типов повреждения или дегенерации нерва, таких как вторичное повреждение нейронов, связанное с травматическими повреждениями.
Краткое раскрытие настоящего изобретения
В соответствии с настоящим изобретением предложен способ индукции у человека или отличного от человека животного эффекта, выбранного из следующих: нейропротекция, защита от патологии или повреждения нервов или их уменьшение, лечение глаукомы, лечение возрастной макулярной дегенерации или других унаследованных или приобретенных дегенераций сетчатки, усиление восстановления ткани сетчатки, усиление регенеративной терапии сетчатки посредством активации врожденных иммунных клеток или лечение наследственной или приобретенной дегенерации сетчатки. Такой способ предусматривает введение субъекту неприродного пептида, который вызывает такой эффект, в количестве, которое эффективно для того, чтобы вызвать такой эффект.
В соответствии с настоящим изобретением, пептид может содержать глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновую кислоту-треонил-пролин (SEQ ID NO: 1), включая в себя любой фрагмент, аналог, производное, фармацевтически приемлемую соль, гидрат, изомер, мультимер, циклическую форму, линейную форму, конъюгат, производное или другую модифицированную форму, которая вызывает указанный эффект. Другие неприродные пептиды, которые могут быть использованы в способах по настоящему изобретению, могут включать в себя некоторые из соединений, описанных в рассматриваемой предварительной заявке на патент США № 62/521984, поданной 19 июня 2017 г., полное описание которой прямо включено в настоящий документ посредством ссылки.
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, способ может быть осуществлен для защиты от повреждения, уменьшения повреждения или восстановления функции после повреждения зрительного нерва и/или сетчатки у субъекта, страдающего от глаукомы, возрастной макулярной дегенерации, сухой макулярной дегенерации или других наследственных или приобретенных дегенераций сетчатки, таких как пигментный ретинит.
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением способ может быть осуществлен для лечения субъекта, который перенес травму, механическое повреждение или поражение (например, гипоксическое или ишемическое поражение) головного мозга, спинного мозга, ЦНС или периферической нервной системы.
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением способ может быть осуществлен для лечения или восстановления ослабленной функции головного мозга или другой части нервной системы субъекта после события, повреждающего нерв или головной мозг, такого как заболевание, травма или поражение, включая в себя, без ограничения, остановку сердца, инсульт, гипоксическое или ишемическое поражение, заболевание, нарушение или травму.
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением способ может быть осуществлен для защиты или уменьшения повреждения нерва из-за нейропатического или нейродегенеративного заболевания или нарушения, будь то глазное или системное.
Другие аспекты и детали настоящего изобретения будут понятны после прочтения подробного описания и примеров, изложенных ниже.
Краткое описание графических материалов
Следующее подробное описание и примеры предоставлены с целью неисчерпывающего описания некоторых, но не обязательно всех, примеров или вариантов осуществления настоящего изобретения и никоим образом не должны ограничивать объем настоящего изобретения.
Фиг. 1 представляет собой гистограмму сравнения количества ганглиозных клеток в каждом поле с количеством исследованных полей, как описано в примере 1 ниже, при обработке люминатом по сравнению с контролем.
Фиг. 2 представляет собой гистограмму сравнения общего количества клеток во всех полях с количеством всех клеток при обработке люминатом и контроле, как описано в примере 1 ниже, при обработке люминатом и контроле.
Фиг. 3 представляет собой гистограмму сравнения количества клеток пигментного эпителия сетчатки (RPE) в контрольных и обработанных планшетах, как описано в примере 2 ниже (условные обозначения: Cont = контрольная (BSS) обработка; Lu = обработка люминатом (только); H2O2, 100 мкМ = обработка пероксидом (только); Lu, H2O2, 100 мкМ = люминат с последующей обработкой пероксидом).
Фиг. 4 представляет собой гистограмму сравнения количества клеток Мюллера сетчатки в контрольных и обработанных планшетах, как описано в примере 3 ниже (условные обозначения: Cont = контрольная (BSS) обработка; Lu = обработка люминатом (только); KA = обработка каиновой кислотой (только) и KA-Lu, 500 мкМ = люминат с последующей обработкой каиновой кислотой).
На фиг. 5 показаны гистологические микрофотографии ткани сетчатки, взятые у крыс, обработанных контрольными или увеличивающимися дозами нейротоксического средства каиновой кислотой, как описано в примере 4 ниже.
Фиг. 6 представляет собой гистограмму сравнения количества нейронов сетчатки в контрольных и обработанных планшетах, как описано в примере 5 ниже (условные обозначения: Cont = контрольная (BSS) обработка; Lu = обработка люминатом (только); KA, 100 мкМ = обработка каиновой кислотой (только) и Lu-KA, 100 мкМ = люминат с последующей обработкой каиновой кислотой).
Подробное описание настоящего изобретения
Следующее подробное описание и сопровождающие графические материалы, на которые оно ссылается, предназначены для описания некоторых, но не обязательно всех, примеров или вариантов осуществления настоящего изобретения. Описанные варианты осуществления следует рассматривать во всех отношениях только как иллюстративные, а не ограничивающие. Содержание этого подробного описания и прилагаемых графических материалов никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.
Заявитель изучил безопасность и нейропротектекторные эффекты соединения, содержащего неприродный пептид глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновая кислота-треонил-пролин (SEQ ID NO: 1), имеющего структурную формулу соединения 1 ниже (также упоминаемого как ALG-1001 или Luminate®, Allegro Ophthalmics, LLC):
Циклическая форма неприродного пептида глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновая кислота-треонил-пролин (SEQ ID NO: 1) показана ниже как соединение 2:
Соединения 1 и 2, а также другие родственные соединения описаны в рассматриваемых патентных заявках США с серийными номерами 13/467995 и 14/696250, причем полное раскрытие каждой такой заявки специально включено в настоящий документ посредством ссылки.
Пример 1
Глазная нейропротекция in vivo на крысиной моделе повышенного внутриглазного давления
Здоровых крыс Wister (n=8) в возрасте десяти (10) недель содержали в виварии, в котором поддерживалась постоянная температура 26°C и постоянный цикл свет-темнота (14 часов и 10 часов, соответственно) с доступной по желанию пищей. Крыс случайным образом делили на группу лечения люминатом из пяти (5) животных (группа А) и группу лечения основным солевым раствором (контроль BSS) из трех (3) животных (группа В).
Каждое животное группы А получало одну интравитреальную инъекцию в дозе 1,28 мг/20 мкл люмината в правый глаз. Каждое животное группы В получало по одной интравитреальной инъекции в дозе 20 мкл сбалансированного солевого раствора (BSS). Левые глаза всех животных в группах A и B не подвергали инъекции и использовали в качестве необработанных контролей. Интравитреальные инъекции вводили на расстоянии 2 мм за каймой в супроназальном квадранте с использованием иглы 30-го калибра, прикрепленной к шприцу объемом 1,0 куб. Были приняты меры, чтобы избежать повреждения линзы или сетчатки.
Через двадцать четыре (24) часа после введения инъекций крыс анестезировали путем внутрибрюшинной инъекции в дозе 3,0 мл/кг смеси гидрохлорида кетамина (2,5 мг/мл), диазепама (2,0 мг/мл) и атропина (0,1 мг/мл). Затем глаза подвергали перитонеальной отслойке конъюнктивы боковой прямой мышцы, чтобы обнажить зрительный нерв. Затем зрительный нерв лигировали шелковым швом в течение 60 минут, в течение которых отсутствие кровотока в сетчатке каждого лигированного глаза проверяли с помощью контактной линзы Plano. Лигатуры удаляли через 60 минут, и восстановление кровотока в сетчатке проверяли в каждом ранее лигированном глазу с использованием контактной линзы Plano.
После удаления лигатур и проверки восстановления кровотока в сетчатке крыс содержали живыми в течение 48 часов, а затем умерщвляли посредством направления в брюшную аорту и нижнюю полую вену и перфузии 200 мл 10% формальдегида.
Затем глаза энуклеировали и фиксировали для гистопатологического анализа. Образцы сетчатки и зрительного нерва от каждого глаза обезвоживали и погружали в парафин. Горизонтальные срезы толщиной 4 микрона разрезали и окрашивали гематоксилином и эозином. Посредством световой микроскопии подсчитывали количество ганглиозных клеток в осевых срезах сетчатки каждого глаза от границы между зрительно и слепой частями сетчатки до зрительного нерва. Кроме того, в каждом сечении число ганглиозных клеток на миллиметр по всей длине сетчатки рассчитывали в цифровом виде с использованием калибровочного предметного стекла, откалиброванного для этой цели.
Измерение внутреннего сетчатого слоя проводили путем наблюдения срезов при увеличении в 40 раз не более 1 мм от зрительного нерва.
Результаты подвергали статистическому анализу. Результаты для каждой группы выражали как среднее ± стандартное отклонение, и статистическую значимость между результатами групп оценивали с помощью двухфакторного дисперсионного анализа, а также U-критерия Манна-Уитни. Вероятности <0,05 считались значимыми.
В таблице 1 ниже показано количество ганглиозных клеток на поле для пяти (5) глаз, обработанных LUMINATE®, и трех глаз, обработанных BSS (контроль):
Таблица 1
| Случай 1 | Случай 2 | Случай 3 | Случай 4 | Случай 5 | |
| Поле 1 | 20 | 5 | 8 | 16 | 14 |
| Поле 2 | 17 | 14 | 10 | 16 | 24 |
| Поле 3 | 19 | 25 | 21 | 13 | 20 |
| Поле 4 | 19 | 16 | 9 | 28 | 16 |
| Поле 5 | 16 | 5 | 23 | 24 | 12 |
| Поле 6 | 21 | 25 | 29 | 16 | 15 |
| Поле 7 | 22 | 37 | 29 | 15 | 16 |
| Поле 8 | 19 | 15 | 31 | 25 | 10 |
| Поле 9 | 40 | 16 | 41 | 33 | 12 |
| Поле 10 | 28 | 7 | 29 | 8 | 19 |
| Поле 11 | 13 | 29 | 24 | 17 | |
| Сумма | 234 | 165 | 259 | 218 | 175 |
| SD | 7,268 | 10,157 | 10,596 | 7,454 | 4,036 |
| Контроль 1 | Контроль 2 | Контроль 3 | |||
| Поле 1 | 3 | 5 | 4 | ||
| Поле 2 | 6 | 14 | 2 | ||
| Поле 3 | 3 | 25 | 11 | ||
| Поле 4 | 13 | 16 | 15 | ||
| Поле 5 | 3 | 5 | 10 | ||
| Поле 6 | 0 | 25 | 14 | ||
| Поле 7 | 0 | 37 | 15 | ||
| Поле 8 | 1 | 15 | 8 | ||
| Поле 9 | 3 | 16 | 10 | ||
| Поле 10 | 0 | 7 | 19 | ||
| Поле 11 | 2 | 16 | |||
| Сумма | 34 | 165 | 124 | ||
| SD | 3,754 | 10,157 | 5,198 |
В таблице 2 ниже представлен двухфакторный дисперсионный анализ данных, представленных в таблице 1. Группа A включает в себя глаза, обработанные ALG1001, а группа B включает в себя глаза, обработанные BSS (контроль):
Таблица 2
| Сгруппировано в табличный формат | Группа A | Группа B | ||||||||
| Случаи | Контроли | |||||||||
| A:Y1 | A:Y2 | A:Y3 | A:Y4 | A:Y5 | B:Y1 | B:Y2 | B:Y3 | B:Y4 | B:Y5 | |
| Поле 1 | 20 | 5 | 8 | 16 | 14 | 3 | 5 | 4 | ||
| Поле 2 | 17 | 14 | 10 | 16 | 24 | 6 | 14 | 2 | ||
| Поле 3 | 19 | 25 | 21 | 13 | 20 | 3 | 25 | 11 | ||
| Поле 4 | 19 | 16 | 9 | 28 | 16 | 13 | 16 | 15 | ||
| Поле 5 | 16 | 5 | 23 | 24 | 12 | 3 | 5 | 10 | ||
| Поле 6 | 21 | 25 | 29 | 16 | 15 | 0 | 25 | 14 | ||
| Поле 7 | 22 | 37 | 29 | 15 | 16 | 0 | 37 | 15 | ||
| Поле 8 | 19 | 15 | 31 | 25 | 10 | 1 | 15 | 8 | ||
| Поле 9 | 40 | 16 | 41 | 33 | 12 | 3 | 16 | 10 | ||
| Поле 10 | 28 | 7 | 29 | 8 | 19 | 0 | 7 | 19 | ||
| Поле 11 | 13 | 29 | 24 | 17 | 2 | 16 | ||||
В таблице 3 приведены результаты дисперсионного анализа в виде таблицы, представленные в таблице 2, с указанием статистически значимой разницы (р<0,0001) между глазами, обработанными люминатом (группа A), и глазами, обработанными BSS (контроль) (группа B).
Таблица 3
Табличные результаты двухфакторного дисперсионного анализа
| Анализируемая таблица | Двухфакторный дисперсионный анализ, не RM | ||||
| Двухфакторный дисперсионный анализ | Единичный | ||||
| Альфа | 0,05 | ||||
| Источник изменчивости | % полной вариации | P-значение | Итоговое Р-значение | Статистически значимый? | |
| Неаддитивность | 3,810 | 0,9385 | Незнач. | Нет | |
| Фактор строки | 12,37 | 0,2386 | Незнач. | Нет | |
| Фактор столбца | 22,62 | <0,0001 | **** | Да | |
| Таблица дисперсионного анализа | SS | DF | MS | F (DFn,DFd) | P-значение |
| Неаддитивность | 297,7 | 10 | 29,77 | F(10,64)=0,4070 | P=0,9385 |
| Фактор строки | 966,7 | 10 | 96,67 | F(10,64)=1,321 | P=02386 |
| Фактор столбца | 1767 | 1 | 1767 | F(10,64)=24,16 | P<0,0001 |
| Остаточное | 4682 | 64 | 73,16 |
Фиг. 1 представляет собой столбчатую диаграмму количества ганглиозных клеток в каждом поле относительно количества полей, исследованных в отношении обработки люминатом и контроля, иллюстрирующую различия между средним.
В таблице 4 показаны результаты в табличном виде U-критерия Манна-Уитни, которые также указывают на статистически значимое различие (р<0,0001) между глазами, обработанными люминатом (группа A), и глазами, обработанными BSS (контроль) (группа B).
Таблица 4
Табличные результаты Манна-Уитни
| Проанализированная таблица | Данные 1 |
| Колонка B | Контроли |
| против | против |
| Колонки A | Случаев |
| Критерий Манна-Уитни | |
| P-значение | <0,0001 |
| Точное или приближенное значение? | Точное |
| Итоговое P-значение | **** |
| Значимо различны? (P<0,05) | Да |
| Одно- или двустороннее значение? | Двустороннее |
| Сумма рангов в колонке A,B | 2871, 870,5 |
| U Манна-Уитни | 342,5 |
| Разность медиан | |
| Медиана колонки A | 18,00, n=54 |
| Медиана колонки B | 9,000, n=32 |
| Разница: фактическая | -9,000 |
| Разница: Ходжеса-Лемана | -10,00 |
| 95,05% CI разницы | От -13,00 до -6,000 |
| Точный или приближенный CI? | Точный |
Фиг. 2 представляет собой гистограмму сравнения среднего количества ганглиозных клеток на поле между глазами, обработанными люминатом (группа A), и глазами, обработанными BSS (контроль) (группа B), с использованием U-критерия Манна-Уитни.
На основании этих данных примера 1 сделан вывод, что интравитреальное введение препарата, содержащего эффективное количество пептида глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновая кислота-треонил-пролин (SEQ ID NO: 1) (люминат), характеризовалось значительными нейропротективными эффектами у этой крысиной модели повышенного IOP. Как отмечалось выше, положительные результаты на этой животной модели индуцированного глаукомой повреждения нейронов в глазу не только свидетельствуют о его полезности в качестве нейропротекторного средства для глаз, но также и в качестве нейропротекторного средства, применимого для снижения гибели или нарушения нейрональной функции после повреждения или травмы других нейрональных тканей, в том числе головного и спинного мозга.
Пример 2
InVitro нейропротекторное действие люмината на пигментный эпителий сетчатки (RPE)
Известно, что пероксид водорода (H2O2), физиологический медиатор окислительного стресса, вызывает апоптоз в эпителиальных клетках сетчатки (RPE).
Клетки ARPE-19 инкубировали в среде DMEM/F12 с добавлением фетальной бычьей сыворотки (FBS) в концентрации 10% и стрептомицина в концентрации 50 мкг/мл и пенициллина в концентрации 50 мкг/мл при температуре 37°C в атмосфере 5% CO2. Для индукции дифференцировки клетки ARP-19 культивировали в трансвелах с покрытием ламинином в течение 2 недель в той же среде, дополненной 1% FBS и антибиотиками. Затем клетки RPE выделяли и аликвоты приблизительно 150-200 мкл клеточной суспензии распределяли в чашки Петри, содержащие контрольную среду. Затем клетки инкубировали при температуре 37°С в течение 24 часов перед использованием.
После этого готовили следующие четыре (4) отдельные чашки нейронов, как показано ниже:
А) Контрольные клетки сетчатки RPE;
B) Клетки сетчатки RPE, инкубированные с ALG-1001 (люминат) в концентрации 1,0 мг/мл;
C) Клетки сетчатки RPE, инкубированные с пероксидом водорода в концентрации 100 мкМ; а также
D) Клетки RPE сетчатки, инкубированные с ALG-1001 (люминат) в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов перед воздействием пероксидом водорода в концентрации 100 мкМ.
Через восемь (8) часов после воздействия количество клеток измеряли с использованием способа вытеснения трипанового синего в камере Нейбауэра. Фиг. 3 представляет собой гистограмму сравнения количества клеток RPE на планшетах A, B, C и D. Эти данные примера 2 показывают, что пероксид водорода был токсичен для клеток RPE, о чем свидетельствует тот факт, что количество клеток RPE в планшете, обработанном только пероксидом водорода (планшет C), составляло только 78% от количества контрольных клеток (планшет A). Однако количество клеток RPE в планшете, предварительно обработанном ALG-1001 (люминатом) до воздействия пероксида водорода (пластина D), составляло 90% от количества контрольных клеток (пластина A), что указывает на то, что предварительная обработка ALG-1001 (люминатом), характеризовалась нейропротекторным эффектом в этой модели in vitro.
Пример 3
InVitro нейропротекторные эффекты люмината на клетки Мюллера сетчатки
Мышей CD1 умерщвляли путем декапитации, глаза быстро энуклеировали в комплемент DMEM с раствором антибиотика и хранили в течение ночи при комнатной температуре. Затем интактные глазные яблоки инкубировали в DMEM, содержащей 0,1% трипсина и 70 Ед/мл коллагеназы, при температуре 37°С в течение 60 минут.
Инкубированные материалы помещали в чашку Петри, содержащую DMEM, дополненную 10% фетальной бычьей сывороткой, и сетчатки удаляли без клеток RPE в небольшие агрегаты и высевали в чашки 35 мм для культивирования. Среду не меняли в течение 6 дней, а затем пополняли каждые 3 - 4 дня. Культуры выдерживали при температуре 37°С в 55% СО2/95% О2 в увлажненном инкубаторе.
Когда разрастание клеток достигало полуконфлюентности, (80%) агрегатов сетчатки удаляли путем пипетирования среды в чашку. Эту операцию повторяли три (3) раза до получения очищенной плоской клеточной популяции. Через 24 часа клетки подвергали экспериментальным условиям.
Готовили четыре (4) отдельные чашки для клеток Мюллера следующим образом: А) контрольные клетки Мюллера; B) клетки Мюллера, инкубированные с ALG-1001 (люминат) в концентрации 1,0 мг/мл; C) клетки Мюллера, инкубированные с каиновой кислотой в концентрации 500 мкМ и D) клетки Мюллера, инкубированные с люминатом в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов перед воздействием каиновой кислотой в концентрации 500 мкМ. Через сорок восемь (48) часов после воздействия количество клеток измеряли с использованием способа вытеснения трипанового синего в камере Нейбауэра.
Фиг. 4 представляет собой гистограмму сравнения количества клеток Мюллера на планшетах A, B, C и D. Эти данные показывают, что планшет, инкубированный с люминатом в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов перед воздействием каиновой кислотой в концентрации 500 мкМ (планшет D), характеризовался более высоким количеством клеток Мюллера, чем любой из других планшетов (A, B или C), и значительно большим количеством клеток Мюллера, чем планшет (планшет C), который подвергался воздействию каиновой кислотой без предварительной обработки люминатом.
Через сорок восемь (48) часов после воздействия количество клеток измеряли с использованием способа вытеснения трипанового синего в камере Нойбауэра. Фиг. 4 представляет собой гистограмму сравнения количества клеток Мюллера на планшетах A, B, C и D. Эти данные указывают на то, что планшет, инкубированный с люминатом в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов до воздействия каиновой кислотой в концентрации 500 мкМ (планшет D), характеризовался более высоким числом клеток Мюллера, чем любой из других планшетов (A, B или C), и значительно более высоким числом клеток Мюллера, чем планшет (планшет C), который подвергался воздействию каиновой кислотой без предварительной обработки люминатом.
Пример 4
Дозозависимое нейротоксическое действие каиновой кислоты in vivo
В правые глаза 4 крысам Wister вводили интравитреально 20 мкл четырех различных растворов, как указано ниже: A) раствор BSS в качестве контроля, B) каиновую кислоту в концентрации 0,5 мМ, C) каиновую кислоту в концентрации 5,0 мМ и D) каиновую кислоту в концентрации 50,0 мМ.
Крыс умерщвляли через 24 часа после обработки, и глаза готовили к гистопатологическому исследованию. На фиг. 5 показаны репрезентативные гистологические срезы для каждого из четырех (4) обработанных глаз.
Результаты ясно демонстрируют дегенерацию сетчатки крыс Wister при увеличении концентрации каиновой кислоты от 0,5 мМ до 5,0 мМ. Это подтверждает, что каиновая кислота действительно вызывает дозозависимую нейротоксичность сетчатки in vitro, и подтверждает актуальность исследований с использованием обработанных каиновой кислотой клеток сетчатки in vitro, таких как примеры 2, 3 и 5 настоящей патентной заявки.
Пример 5
InVitro нейропротекторные эффекты люмината на нейроны сетчатки
Мышей CD1 умерщвляли путем декапитации, глаза быстро энуклеировали в комплемент DMEM с раствором антибиотика и сетчатку выделяли из пигментного эпителия.
Выделенную сетчатку инкубировали в среде Хэнка, содержащей папаин в концентрации 2,5 мг/мл и цистеин в концентрации 0,1 мг/мл, в течение 15 минут при температуре 30°С. После промывания средой Хэнка с добавлением CaCl2 в концентрации 1,9 мМ, MgCl2 в концентрации 0,6 мМ и бычьего сывороточного альбумина в концентрации 0,1 мг/мл.
Сетчатку механически отделяли, приблизительно 150-200 мкл клеточной суспензии вносили в чашку Петри, содержащую контрольную среду. Биполярные клетки идентифицировали под микроскопом по морфологии клеток. Клетки инкубировали в течение 6 часов перед использованием.
Четыре (4) отдельные чашки нейронов готовили следующим образом: A) контрольные нейроны сетчатки, B) нейроны сетчатки, инкубированные с ALG-1001 (люминат) в концентрации 1,0 мг/мл, C) нейроны сетчатки, инкубированные с каиновой кислотой в концентрации 100 мкМ, D) нейроны сетчатки, инкубированные с люминатом в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов перед воздействием каиновой кислоты в концентрации 500 мкМ.
Через восемь (8) часов после воздействия количество клеток измеряли с использованием способа вытеснения трипанового синего в камере Нейбауэра.
Фиг. 6 представляет собой гистограмму сравнения количества нейронов сетчатки на планшетах A, B, C и D. Эти данные показывают, что каиновая кислота была токсичной для нейронов сетчатки, и предварительная обработка люминатом существенно снижала эту токсичность. В частности, количество нейронов в планшете, обработанном только каиновой кислотой в концентрации 100 мкМ (планшет C), составляло 58% по сравнению с контролем, в то время как количество нейронов в планшете, инкубированном с люминатом в концентрации 1,0 мг/мл в течение 24 часов перед воздействием каиновой кислотой в концентрации 500 мкМ (планшет D), составляло 80% от контроля. Эти результаты заслуживают особого внимания, учитывая, что планшет D получил в пять (5) раз больше каиновой кислоты, чем планшет C.
Пример 6
Проспективное открытое исследование на людях люмината при лечении сухой AMD
Чтобы определить, оказывает ли единичная интравитреальная инъекция люмината в концентрации 1,0 мг/50 мкл какое-либо влияние на улучшение наибольшей остроты зрения с коррекцией (BCVA) у субъектов с сухой AMD, с умеренной или умеренно выраженной сухой AMD.
Это проспективное интервенционное, открытое, одобренное IRB клиническое подтверждение на людях концепции исследования проводили на 7 людях с умеренной и умеренно тяжелой сухой AMD.
Основные критерии включения включали в себя пациентов с сухой макулярной дегенерацией с относительно интактными фоторецепторными слоями и слоями RPE в центральном 1 мм макулы по OCT.
Исходный уровень BCVA у субъектов находился между 20/30 и 20/400 без каких-либо признаков субретинальной жидкости или CNV и отсутствии лечения анти-VEGF в анамнезе.
Все включенные пациенты проходили базовую однократную интравитреальную инъекцию люмината в концентрации 1,0 мг/50 мкл и подвергались мониторингу ежемесячно, кроме того, получали толщину центральной макулы, OCT, цифровые цветные фотографии и BCVA до и после лечения.
Результаты этого открытого подтверждающего концепцию исследования люмината при лечении сухого AMD у пациентов-людей, обобщены в таблице 5 ниже:
Таблица 5
| Пациент | Исходная BCVA | BCVA через 3 месяца после лечения |
| 1 | 0,5 log Mar (20/63) | 0,3 log Mar (20/40) Добавилось 10 букв |
| 2 | 1,0 log Mar (20/200) | 0,6 log Mar (20/80) Добавилось 20 букв |
| 3 | 1,3 log Mar (20/400) | 1,0 log Mar (20/200) Добавилось 15 букв |
| 4 | 0,2 log Mar (20/32) | 1,0 log Mar (20/200) Добавилось 15 букв |
| 5 | 1,3 log Mar (20/400) | 1,3 log Mar (20/400) Не добавилось букв |
| 6 | 0,40 log Mar (20/50) | 0,20 log Mar (20/32) Добавилось 10 букв |
* У пациента 5 наблюдались худшие исходные фовеальные анатомические особенности в группе и не было обнаружено заметного улучшения BCVA.
Эти результаты указывают на то, что в этом исследовании BCVA субъектов, получавших люминат, улучшилось до 20 букв.
Следует принимать во внимание, что, хотя настоящее изобретение было описано выше со ссылкой на определенные примеры или варианты осуществления настоящего изобретения, в описанные примеры и варианты осуществления могут быть внесены различные дополнения, исключения, изменения и модификации, не отступая от предполагаемой сущности и объема настоящего изобретения. Например, любые элементы, стадии, представители, компоненты, композиции, реагенты или части одного варианта осуществления или примера могут быть включены или использованы с другим вариантом осуществления или примером, если не указано иное или если это не сделает этот вариант осуществления или пример неподходящим для его предполагаемого использования. Кроме того, если стадии способа или процесса были описаны или перечислены в определенном порядке, порядок таких стадий может быть изменен, если не указано иное, или если это не сделает способ или процесс непригодным для его предполагаемой цели. Кроме того, элементы, стадии, представители, компоненты, композиции, реагенты или части любого изобретения или примера, описанного в настоящем документе, могут необязательно существовать или использоваться при отсутствии или существенном отсутствии любого другого элемента, стадии, представителя, компонента, композиции, реагента или части, если не указано иное. Все разумные добавления, исключения, модификации и изменения должны рассматриваться как эквиваленты описанных примеров и вариантов осуществления и должны быть включены в объем следующей формулы изобретения.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> АЛЛЕГРО ФАРМАСЬЮТИКАЛС, ИНК.
<120> ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ И НЕЙРОПРОТЕКТОРНЫЕ ПЕПТИДЫ
<130> ALLEG-008PC
<140> PCT/US2018/014287
<141> 2018-01-18
<150> 62/500998
<151> 2017-05-03
<150> 62/448,300
<151> 2017-01-19
<160> 1
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 6
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: синтетический
пептид
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Цистеиновая кислота
<400> 1
Gly Arg Gly Xaa Thr Pro
1 5
<---
Claims (7)
1. Применение пептида, который содержит глицинил-аргинил-глицинил-цистеиновую кислоту-треонил-пролин для а) восстановления ранее утраченной остроты зрения у субъекта, представляющего собой человека или животного, страдающего от неэкссудативной или сухой возрастной макулярной дегенерации, или b) защиты зрительного нерва, клеток Мюллера сетчатки, нейронов сетчатки или клеток пигментного эпителия сетчатки от повреждения вследствие повышенного внутриглазного давления или дегенеративного заболевания сетчатки.
2. Применение по п. 1, в котором пептид характеризуется формулой:
3. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором субъект характеризуется отсутствием признаков субретинальной жидкости и отсутствием лечения анти-VEGF в анамнезе.
4. Применение по любому из предыдущих пунктов, в котором композицию пептида вводят интравитреально.
5. Применение по п.4, в котором композицию пептида вводят путем интравитреальной инъекции.
6. Применение по п.5, в котором в глаз субъекта интравитреально вводят раствор, содержащий 1,0 мг композиции пептида на 50 мкл.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762448300P | 2017-01-19 | 2017-01-19 | |
| US62/448,300 | 2017-01-19 | ||
| US201762500998P | 2017-05-03 | 2017-05-03 | |
| US62/500,998 | 2017-05-03 | ||
| PCT/US2018/014287 WO2018136669A2 (en) | 2017-01-19 | 2018-01-18 | Therapeutic and neuroprotective peptides |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019126014A RU2019126014A (ru) | 2021-02-19 |
| RU2019126014A3 RU2019126014A3 (ru) | 2021-02-19 |
| RU2788097C2 true RU2788097C2 (ru) | 2023-01-16 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2012118503A (ru) * | 2009-11-10 | 2013-12-20 | Аллегро Фармасьютикалс, Инк. | Композиции и способы ингибирования клеточной адгезии или направленности диагностических или терапевтических агентов к rgd связывающим сайтам |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2012118503A (ru) * | 2009-11-10 | 2013-12-20 | Аллегро Фармасьютикалс, Инк. | Композиции и способы ингибирования клеточной адгезии или направленности диагностических или терапевтических агентов к rgd связывающим сайтам |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| KUPPERMANN B. D. "A Dual-Mechanism Drug for Vitreoretinal Diseases." Retina Today, July/August 2015; p. 85-87. * |
| SCHMIDT et al. "Neurodegenerative Diseases of the Retina and Potential for Protection and Recovery". Curr. Neuropharmacol. 2008; 6(2): p.164-178. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20210085749A1 (en) | Therapeutic and Neuroprotective Peptides | |
| TWI400080B (zh) | 藥物於治療患有青光眼和其他退化性眼疾之人的視力喪失上之用途 | |
| JP5643237B2 (ja) | 光受容細胞のアポトーシスを抑制する方法 | |
| EP3643723B1 (en) | Novel peptide and pharmaceutical composition for treatment of eye diseases comprising same novel peptide as active ingredient | |
| SK65998A3 (en) | Methods for treating photoreceptors using glial cell line-derived neurotrophic factor (gdnf) protein product | |
| HU195523B (en) | Process for producing fractions of hyaluronic acid and pharmaceutical compositions containing them | |
| WO2022194109A1 (zh) | 一种治疗视神经疾病的复合物及其制备方法和用途 | |
| Glybina et al. | Photoreceptor neuroprotection in RCS rats via low-dose intravitreal sustained-delivery of fluocinolone acetonide | |
| WO2006096011A1 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR TREATING AVELLINO CORNEA DYSTROPHY COMPRISING AN ANTIBODY AGAINST TGF-β | |
| EP3448388B1 (en) | Dipeptidyl peptidase-4 inhibitors for topical eye treatment of retinal neurodegenerative diseases | |
| RU2788097C2 (ru) | Терапевтические и нейропротекторные пептиды | |
| EP0756605A1 (de) | Peptide als therapeutikum für autoimmunerkrankungen | |
| KR20120096555A (ko) | 안구 건조증 및/또는 각결막 장해의 처치에 유용한 약제의 스크리닝 방법 및 그 방법에 의해 얻어진 의약 조성물 | |
| JP2020518678A (ja) | ギャップ結合細胞間コミュニケーションモジュレータ及び糖尿病性眼疾患の治療のためのそれらの使用 | |
| EP4082559A1 (en) | Application of fusion protein in treating age-related macular degeneration | |
| KR20170123502A (ko) | 콜라겐 및 색소 상피성 인자를 유효성분으로 함유하는 신생혈관질환 예방 또는 치료용 약학조성물 | |
| EP4159225A1 (en) | Novel pharmaceutical composition for treating dry eye syndrome | |
| RU2733392C1 (ru) | Комбинированное офтальмологическое средство | |
| CN105017406B (zh) | 一类新的具有神经保护功能的多肽 | |
| Navarro-Partida et al. | Safety and Tolerability of Topical Ophthalmic Triamcinolone Acetonide-Loaded Liposomes Formulation and Evaluation of Its Biologic Activity in Patients with Diabetic Macular Edema. Pharmaceutics 2021, 13, 322 | |
| US20230263860A1 (en) | Methods And Compositions For Treating Stroke | |
| US20220204559A1 (en) | Short synthetic peptides and their uses for treating retinal degenerative diseases and/or tissue injuries | |
| KR20230117342A (ko) | 펩타이드 제제 및 이의 안과적 용도 | |
| KR20230147163A (ko) | 안구 병태에 대한 단백질-기반 요법 | |
| Misiuk-Hojło et al. | For non-commmercial use only |