RU2782092C1 - Method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lip according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient - Google Patents
Method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lip according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient Download PDFInfo
- Publication number
- RU2782092C1 RU2782092C1 RU2022105883A RU2022105883A RU2782092C1 RU 2782092 C1 RU2782092 C1 RU 2782092C1 RU 2022105883 A RU2022105883 A RU 2022105883A RU 2022105883 A RU2022105883 A RU 2022105883A RU 2782092 C1 RU2782092 C1 RU 2782092C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patient
- metalloproteinase
- oral fluid
- timp
- mmp
- Prior art date
Links
- 239000012530 fluid Substances 0.000 title claims abstract description 83
- 210000000088 Lip Anatomy 0.000 title claims abstract description 55
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 210000004400 Mucous Membrane Anatomy 0.000 title claims abstract description 29
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 title abstract description 19
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 claims abstract description 49
- 102000001776 Matrix Metalloproteinase 9 Human genes 0.000 claims abstract description 46
- 108010015302 Matrix Metalloproteinase 9 Proteins 0.000 claims abstract description 46
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 claims abstract description 46
- 101700065146 TIMP2 Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 102100006014 TIMP2 Human genes 0.000 claims abstract description 44
- 108010031372 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 Proteins 0.000 claims abstract description 44
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 17
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims abstract description 16
- 206010041823 Squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229960000070 antineoplastic Monoclonal antibodies Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229960000060 monoclonal antibodies Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 102000005614 monoclonal antibodies Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010045030 monoclonal antibodies Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 210000000214 Mouth Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 230000037123 dental health Effects 0.000 claims abstract description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 claims description 26
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 2
- 101700040544 TIMP1 Proteins 0.000 claims 1
- 102100002607 TIMP1 Human genes 0.000 claims 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 5
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 abstract description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 101710027855 GLRG_06511 Proteins 0.000 abstract description 2
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000771 oncological Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 10
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 3
- 108009000330 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 3
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 210000001165 Lymph Nodes Anatomy 0.000 description 2
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 2
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesions Effects 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 206010027476 Metastasis Diseases 0.000 description 1
- 210000002200 Mouth Mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в дифференциальной диагностике воспалительных заболеваний и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.SUBSTANCE: invention relates to medicine, namely to a method for differential diagnosis of lip mucosa formation by the content of biomarkers in the patient's oral fluid, and can be used in differential diagnosis of inflammatory diseases and malignant neoplasms of the oral cavity organs in dental, oncological and surgical medical institutions.
Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°С не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В., Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с. 43).A known method for predicting and diagnosing squamous cell carcinoma of the head and neck by the content of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in the patient's blood plasma, including studies of venous blood plasma, while the blood serum was taken in a standard way from patients with squamous cell carcinoma of the head and neck after diagnosis before the start of treatment procedures . The serum was stored at a temperature of -50°C for no more than 10 months and thawed no more than 1 time for enzyme immunoassay determination of the content of matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors using kits for enzyme-linked immunosorbent assay on an ELISA analyzer (see Klisho E.V., Matrix metalloproteinases and their tissue inhibitors in squamous cell carcinoma of the head and neck, dissertation abstract, MD, Tomsk, 2011, p. 43).
Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:However, the known method in its use has the following disadvantages:
- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностикой образований слизистой оболочки губы в день обращения пациента,- has insufficient accuracy in the differential diagnosis of formations of the mucous membrane of the lip on the day of the patient's visit,
- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы,- has insufficient sensitivity in the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the lip mucosa,
- недостаточность вероятности выявления процессов воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки полости рта в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,- the insufficiency of the probability of detecting the processes of inflammation and squamous cell carcinoma of the oral mucosa in the patient's body, both in the early stages of the disease, and in the later ones,
- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,- the complexity of preparing the patient within a certain time frame for the collection and storage of diagnostic material,
- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,- the possibility of infection "through the blood" during the sampling of diagnostic material,
- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).- the difficulty of taking diagnostic material from people with poor venous filling (including the elderly and children).
Задачей изобретения является создание способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.The objective of the invention is to create a method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lips according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient.
Техническим результатом является достижение значительного повышения диагностической точности дифференциальной экспресс-диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента к определенным временным рамкам для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).The technical result is to achieve a significant increase in the diagnostic accuracy of differential rapid diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the lip mucosa on the day of the patient's visit, a significant increase in the sensitivity of the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the lip mucosa, achieving a high probability of detecting the process of inflammation and squamous cell carcinoma of the lip mucosa in the patient's body, both in the early stages of the disease, and at later stages, a significant simplification of the patient's preparation for certain time frames for the collection and storage of diagnostic material, the absence of infection "through the blood" during the collection of diagnostic material, as well as the possibility of taking diagnostic material from individuals with poor venous filling (including in the elderly and in children).
Технический результат достигается тем, что предложен способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, в качестве биомаркера при экспресс определении образования слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяют их количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 205,49-311,21 нг./мл., а тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) группы клинического контроля принимают уровень 11,48-16,32 нг./мл., при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 176,93-204,07 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 25,29-33,59 нг./мл., то диагностируют воспаление слизистой оболочки губы, при этом если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 2498,78-2827,22 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 58,52-66,28 нг./мл., то диагностируют плоскоклеточный рак слизистой оболочки губы при определении стоматологического здоровья, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости долговременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, забирают супернатант в количестве 300 мкл., помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С. При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки губы, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.The technical result is achieved by the fact that a method is proposed for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lip according to the content of biomarkers in the patient's oral fluid, including studies of the patient's oral fluid, the oral fluid is taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient has eaten, oral centrifugation patient fluid at 3000 rpm. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5 ° C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results, while the oral fluid is taken from the patient for differential diagnosis of education of the lip mucosa according to the content of biomarkers in the patient's oral fluid, as a biomarker in the rapid determination of the formation of the lip mucosa by the amount of biomarkers in the oral fluid, matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue are selected inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determine their quantitative content in the oral fluid of the patient, while for the quantitative content of the biomarker in the oral fluid of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) of the clinical contact group roles take the level of 205.49-311.21 ng./ml., and the tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) of the clinical control group take the level of 11.48-16.32 ng./ml ., at the same time, if the content in the oral fluid of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) is determined in the amount of 176.93-204.07 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 25.29-33.59 ng / ml., then inflammation of the mucous membrane of the lip is diagnosed, and if the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the amount of 2498.78-2827.22 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 58.52-66.28 ng / ml, then squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the lip is diagnosed when determining dental health, then according to the results of the determination the content of biomarkers in the patient's oral fluid predicts the patient's treatment tactics. At the same time, if long-term storage of the patient's oral fluid is necessary, it is centrifuged at 3000 rpm before analysis. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, the supernatant is taken in the amount of 300 μl, placed in a salicaps tube and immediately frozen in a freezer at a temperature of minus 80°C. At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the lip mucosa, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости долговременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, забирают супернатант в количестве 300 мкл., помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°С.The method is carried out as follows. The oral fluid is taken from the patient for differential express diagnosis of the formation of the lip mucosa. The oral fluid of the patient is taken before or not earlier than 30 minutes after the patient has taken food. The patient's oral fluid is centrifuged at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilute the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and centrifuge again at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°С. The material of the patient's oral fluid, ready for research, is placed in a cuvette and the enzyme immunoassay method is performed on a plate based on monoclonal antibodies. At the same time, if long-term storage of the patient's oral fluid is necessary, it is centrifuged at 3000 rpm before analysis. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, the supernatant is taken in the amount of 300 μl, placed in a salicaps tube and immediately frozen in a freezer at a temperature of minus 80°C.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяют их количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 205,49-311,21 нг./мл., а тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) группы клинического контроля принимают уровень 11,48-16,32 нг./мл.As a biomarker for differential express diagnostics of the formation of the mucous membrane of the lip, according to the amount of biomarkers in the oral fluid, matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determine their quantitative content in the oral fluid of the patient. At the same time, the quantitative content of the biomarker in the oral fluid of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) of the clinical control group is taken at the level of 205.49-311.21 ng./ml., And the tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) clinical control groups take the level of 11.48-16.32 ng/ml.
Если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 176,93-204,07 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 25,29-33,59 нг./мл., то диагностируют воспаление слизистой оболочки губы.If the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the oral fluid is determined in the amount of 176.93-204.07 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 25.29-33.59 ng / ml, then inflammation of the mucous membrane of the lip is diagnosed.
Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 2498,78-2827,22 нг./мл. и тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 58,52-66,28 нг./мл., то диагностируют плоскоклеточный рак слизистой оболочки губы.If the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the oral fluid of the patient is determined in the amount of 2498.78-2827.22 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 58.52-66.28 ng / ml, then squamous cell carcinoma of the lip mucosa is diagnosed.
Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.Then, according to the obtained results of determining the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the tactics of treating the patient are predicted.
При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки губы, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the lip mucosa, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:Among the essential features that characterize the proposed method of differential express diagnostics of the formation of the lip mucosa according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the following are distinctive:
- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для экспресс исследований новообразований слизистой оболочки губы,- lack of venous blood sampling from a patient for express studies of neoplasms of the lip mucosa,
- выбор в качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,- choice as a biomarker for differential express diagnostics of the lip mucosa by the content of biomarkers in the oral fluid of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) and determination of its quantitative content in the patient's oral fluid,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 205,49-311,21 нг./мл. отсутствие образования слизистой оболочки губы у пациента,- diagnosis when determining the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the oral fluid of the patient, the clinical control group takes the level of 205.49-311.21 ng / ml. lack of formation of the mucous membrane of the lips in the patient,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 176,93-204,07 нг./мл. воспаление слизистой оболочки губы пациента,- diagnosis when determining the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the patient's oral fluid in the amount of 176.93-204.07 ng / ml. inflammation of the mucous membrane of the patient's lips,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 2498,78-2827,22 нг./мл. плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы пациента,- diagnosis when determining the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the patient's oral fluid in the amount of 2498.78-2827.22 ng / ml. squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the patient's lips,
- выбор в качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,- selection of a tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) as a biomarker for differential express diagnostics of the lip mucosa by the amount of biomarkers in the oral fluid and determination of its quantitative content in the patient's oral fluid,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 11,48-16,32 нг./мл. отсутствие образования слизистой оболочки губы у пациента,- diagnosis when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 11.48-16.32 ng / ml. lack of formation of the mucous membrane of the lips in the patient,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 25,29-33,59 нг./мл. воспаление слизистой оболочки губы пациента,- diagnosing when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 25.29-33.59 ng / ml. inflammation of the mucous membrane of the patient's lips,
- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента тканевого ингибитора металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 58,52-66,28 нг./мл. плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы пациента,- diagnosis when determining the content of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the patient's oral fluid in the amount of 58.52-66.28 ng / ml. squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the patient's lips,
- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,- forecasting, based on the obtained results of determining the content of biomarkers in the oral fluid of the patient, the tactics of his treatment,
- выполнение при необходимости долговременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугирования при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, забора супернатанта в количестве 300 мкл., помещения в пробирку «salicaps» и немедленной заморозки в морозильной камере при температуре минус 80°С,- performing, if necessary, long-term storage of the patient's oral fluid before performing the analysis of its centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, supernatant sampling in the amount of 300 µl, placement in a salicaps tube and immediate freezing in a freezer at a temperature of minus 80°C,
- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки губы, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.- additional implementation in the process before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the lip mucosa, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Экспериментальные исследования предложенного способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса воспаления и плоскоклеточного рака слизистой оболочки губы в организме пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.Experimental studies of the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the lip mucosa by the content of biomarkers in the patient's oral fluid in clinical conditions have shown its high efficiency. The method for differential diagnosis of lip mucosa formation by the content of biomarkers in the patient's oral fluid, when used, ensures a significant increase in the accuracy of differential express diagnostics of lip mucosa formation on the day of the patient's visit, a significant increase in the sensitivity of differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the lip mucosa, achieving high the probability of detecting the process of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the lip in the patient's body, both in the early stages of the disease, and at later stages, a significant simplification of the patient's preparation within a certain time frame for the collection and storage of diagnostic material, the absence of infection "through the blood" during the collection diagnostic material, as well as the possibility of taking diagnostic material from people with poor venous filling (including the elderly and children). In addition, the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the lip mucosa by the content of biomarkers in the oral fluid of the patient in practical use significantly improves the quality of life of patients.
Реализация предложенного способа дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.The implementation of the proposed method for the differential diagnosis of the formation of the lip mucosa according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient is illustrated by the following clinical examples.
Пример 1. Пациент Г., 54 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «образование слизистой оболочки верхней губы слева».Example 1. Patient G., aged 54, was admitted to the department with a presumptive diagnosis: "formation of the mucous membrane of the upper lip on the left."
Ротовую жидкость забирали у пациента для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований.The oral fluid was taken from the patient for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lips. The oral fluid was taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient's meal, the patient's oral fluid was centrifuged at 3000 rpm. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирали матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяли их количественное содержание в ротовой жидкости пациента.Matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determined their quantitative content in the oral fluid of the patient.
В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 182,00 нг./мл. и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 26,70 нг./мл.As a result of the performed analysis, the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the amount of 182.00 ng/ml was determined in the patient's oral fluid. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 26.70 ng / ml.
На основании полученных результатов диагностировали воспаление слизистой оболочки губы слева. Клинический диагноз также подтверждали клиническим обследование полости рта пациента. В связи с полученными данными пациентке было назначено консервативное лечение слизистой оболочки верхней губы слева.Based on the results obtained, inflammation of the mucous membrane of the lip on the left was diagnosed. The clinical diagnosis was also confirmed by a clinical examination of the patient's oral cavity. In connection with the data obtained, the patient was prescribed conservative treatment of the mucous membrane of the upper lip on the left.
Пример 2. Пациентка С, 84 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «образование слизистой оболочки нижней губы справа».Example 2. Patient C, 84 years old, was admitted to the department with a presumptive diagnosis: "formation of the mucous membrane of the lower lip on the right."
Ротовую жидкость забирали у пациентки для дифференциальной диагностики образования слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациенткой, центрифугирование ротовой жидкости пациентки при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 15 минут с охлаждением до плюс 5°С, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациентки в кювету и выполнение метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований.The oral fluid was taken from the patient for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lips. The oral fluid was taken from the patient before or not earlier than 30 minutes after the patient's meal, the patient's oral fluid was centrifuged at 3000 rpm. for 15 minutes with cooling to plus 5°C, dilution of the oral fluid with saline in a ratio of 1:100 and repeated centrifugation at 3000 rpm. within 15 minutes with cooling to plus 5°C, placing the material of the patient's oral fluid ready for research into a cuvette and performing the enzyme immunoassay method on a plate based on monoclonal antibodies, followed by analysis of the research results.
В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики образования слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирали матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) и определяли их количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.Matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) and determined their quantitative content in the oral fluid of the patient.
В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксную металлопротеиназу 9 / matrix metalloproteinase 9 (ММП 9 / ММР 9) в количестве 2582,00 нг./мл. и тканевой ингибитор металлопротеиназы 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (ТИМП 2 / TIMP 2) в количестве 62,70 нг./мл.As a result of the analysis, the content of matrix metalloproteinase 9 / matrix metalloproteinase 9 (MMP 9 / MMP 9) in the oral fluid of the patient was determined in the amount of 2582.00 ng / ml. and tissue inhibitor of metalloproteinase 2 / tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP 2 / TIMP 2) in the amount of 62.70 ng / ml.
На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными, пациентке было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования на 1-м этапе, лимфодиссекция шеи на стороне поражения с резекцией слизистой оболочки нижней губы справа на 2-м этапе.Based on the results obtained, cancer of the mucous membrane of the lip on the right was diagnosed. The clinical diagnosis was also confirmed by morphological verification of the biopsy material of the tumor and/or lymph node, if necessary. In connection with the data obtained, the patient was prescribed a combined treatment: preoperative radiation therapy for the tumor and regional metastasis pathways at the 1st stage, lymph node dissection of the neck on the side of the lesion with resection of the mucous membrane of the lower lip on the right at the 2nd stage.
Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.The established clinical diagnoses were subsequently confirmed by the results of the morphological verification of biopsy material taken from all patients previously taken from the lesion.
При этом в процессе до выполнения или после окончания консервативного лечения образования слизистой оболочки губы, в том числе стоматологического лечения, пациенту дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.At the same time, in the process, before performing or after the end of conservative treatment of the formation of the lip mucosa, including dental treatment, the patient is additionally subjected to control determinations of the content of biomarkers in the patient's oral fluid, the results of which are used to judge the effectiveness of the selected treatment for the patient.
Claims (4)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2782092C1 true RU2782092C1 (en) | 2022-10-21 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009018342A1 (en) * | 2007-07-30 | 2009-02-05 | The Regents Of The University Of Michigan | Multi-analyte analysis of saliva biomarkers as predictors of periodontal and peri-implant disease |
| RU2535076C1 (en) * | 2013-08-29 | 2014-12-10 | Екатерина Владимировна Кочурова | Method of qualitative differential express-diagnostics of lip mucosa neoplasms by content of biomarkers in patient's oral fluid |
| RU2544173C1 (en) * | 2014-03-25 | 2015-03-10 | Ирина Николаевна Усманова | Differential diagnostic technique for keratolytic processes of oral mucosa classified among white manifestations |
| WO2020040612A1 (en) * | 2018-08-23 | 2020-02-27 | 서울대학교 산학협력단 | Oral cancer diagnostic method, information provision method, composition and kit, which use mmp-9 in saliva |
| RU2737523C1 (en) * | 2019-12-05 | 2020-12-01 | Ольга Владимировна Красникова | Method for diagnosing premalignant diseases of oral mucosa |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009018342A1 (en) * | 2007-07-30 | 2009-02-05 | The Regents Of The University Of Michigan | Multi-analyte analysis of saliva biomarkers as predictors of periodontal and peri-implant disease |
| RU2535076C1 (en) * | 2013-08-29 | 2014-12-10 | Екатерина Владимировна Кочурова | Method of qualitative differential express-diagnostics of lip mucosa neoplasms by content of biomarkers in patient's oral fluid |
| RU2544173C1 (en) * | 2014-03-25 | 2015-03-10 | Ирина Николаевна Усманова | Differential diagnostic technique for keratolytic processes of oral mucosa classified among white manifestations |
| WO2020040612A1 (en) * | 2018-08-23 | 2020-02-27 | 서울대학교 산학협력단 | Oral cancer diagnostic method, information provision method, composition and kit, which use mmp-9 in saliva |
| RU2737523C1 (en) * | 2019-12-05 | 2020-12-01 | Ольга Владимировна Красникова | Method for diagnosing premalignant diseases of oral mucosa |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Луцкая И. К. и др. ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА. СОВРЕМЕННАЯ СТОМАТОЛОГИЯ. N3, 2018, с. 24-29. Дзугаева И.И. Распространенность заболеваний слизистой оболочки полости рта и губ среди взрослого населения // Институт стоматологии. 2014, N1(62). С.32-33. Komal Smriti et al. Salivary MMP-9 as a Biomarker for the Diagnosis of Oral Potentially Malignant Disorders and Oral Squamous Cell Carcinoma. Asian Pac J Cancer Prev. 2020; 21(1): 233-238. PMID: 31983189. A Peisker et al. Salivary MMP-9 in the detection of oral squamous cell carcinoma. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2017 May 1;22(3): e270-275. PMID: 28160595. TOMOKAZU YOSHIZAKI et al Expression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2 correlates with activation of matrix metalloproteinase-2 and predicts poor prognosis in tongue squamous cell carcinoma // International Journal of Cancer, v.95, p. 44-50, 2001. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4486153B2 (en) | Methods and devices for diagnosing appendicitis | |
| WO2013038981A1 (en) | Method for detecting pancreatic disease marker | |
| Zhang et al. | Plasma mitochondrial DNA levels were independently associated with lung injury in elderly hip fracture patients | |
| Athab | Rate of Helicobacter pylori infection among patients with irritable bowel syndrome | |
| RU2533241C1 (en) | Qualitative differential instant diagnostic technique for new growths of oral floor mucosa shown by patient's oral fluid biomarkers | |
| RU2782092C1 (en) | Method for the differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the lip according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2777180C1 (en) | Method for differential diagnosis of the formation of the mucous membrane of the retromolar region according to the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2782093C1 (en) | Method for differential diagnosis of buccal mucosa formation by the content of biomarkers in the patient's oral fluid | |
| RU2786804C1 (en) | Method for the differential diagnosis of inflammation and squamous cell carcinoma of the mucous membrane of the tongue by the content of biomarkers in the oral fluid of the patient | |
| RU2535076C1 (en) | Method of qualitative differential express-diagnostics of lip mucosa neoplasms by content of biomarkers in patient's oral fluid | |
| US9625451B2 (en) | Method for diagnosing chronic sinusitis | |
| RU2533248C1 (en) | Qualitative differential instant diagnostic technique for periglottis growths shown by patient's oral fluid biomarkers | |
| RU2648765C1 (en) | Method for qualitative determination of dental status of patient with inflammation of alveolar mucosa based on content of biomarkers in oral fluid | |
| RU2517069C1 (en) | Method for prediction of risk of developing recurrent inflammatory intestinal diseases | |
| RU2695063C1 (en) | Method for qualitative determination of the dental status of a patient with squamous cell carcinoma of the oral mucosa in inflammation of the mucous membrane of the alveolar process of the jaw by the content of the biomarkers in the oral fluid | |
| RU2688209C1 (en) | Method for predicting course of isolated form of acantholytic pervasive cavity | |
| RU2527676C1 (en) | Qualitative differential instant diagnostic technique for parotid gland growths shown by patient's oral fluid biomarkers | |
| Saad et al. | Schistosoma mansoni and endocarditis: from egg to free DNA detection in Egyptian patients and infected BALB/c mice | |
| RU2361220C1 (en) | Diagnostic technique for inflammatory destruction of paranasal and ear sinuses | |
| RU2635962C1 (en) | Method for predictiom of structure of common bile duct and hepaticopancreatic ampulla stenosis in patients after cholecystectomy due to cholelithiasis | |
| RU2521196C1 (en) | Qualitative instant diagnostic technique for maxillary and mandibular malignant growth by patient's blood serum and oral fluid biomarkers | |
| Abdel Kader et al. | Evaluation of some salivary enzymes as a diagnostic biomarker for progression of periodontal disease. | |
| Segen et al. | The patient's guide to medical tests: everything you need to know about the tests your doctor orders | |
| TWI816286B (en) | Method for treating hepatocellular carcinoma | |
| RU2312360C1 (en) | Method for screening-diagnosing liver fibrosis cases using salivary biochemical tests |