RU2782031C1 - Синбиотическое средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота - Google Patents
Синбиотическое средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота Download PDFInfo
- Publication number
- RU2782031C1 RU2782031C1 RU2021127237A RU2021127237A RU2782031C1 RU 2782031 C1 RU2782031 C1 RU 2782031C1 RU 2021127237 A RU2021127237 A RU 2021127237A RU 2021127237 A RU2021127237 A RU 2021127237A RU 2782031 C1 RU2782031 C1 RU 2782031C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- synbiotic
- agent
- solution
- consortium
- Prior art date
Links
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 22
- 210000001035 Gastrointestinal Tract Anatomy 0.000 title claims abstract description 16
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 32
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 26
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 claims abstract description 14
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims abstract description 14
- 229940039695 Lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 claims abstract description 11
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N Lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000000529 probiotic Effects 0.000 claims description 11
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 11
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims description 8
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims 1
- 230000003042 antagnostic Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 208000008665 Gastrointestinal Disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 244000052616 bacterial pathogens Species 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004936 stimulating Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002708 enhancing Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 9
- 239000002609 media Substances 0.000 description 7
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 4
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 3
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 3
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 210000003491 Skin Anatomy 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 201000008286 diarrhea Diseases 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 230000000813 microbial Effects 0.000 description 3
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 3
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N propionic acid Chemical compound CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 206010064389 Dysbacteriosis Diseases 0.000 description 2
- 210000003608 Feces Anatomy 0.000 description 2
- 229940039696 Lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000423 heterosexual Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal Effects 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 240000008371 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L Calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000982579 Enterococcus faecium L3 Species 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 1
- 210000004080 Milk Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 Stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000001488 breeding Effects 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002550 fecal Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004922 lacquer Substances 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 1
- 235000003715 nutritional status Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Группа изобретений относится к области ветеринарной медицины, в частности к синбиотическому средству для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота и способу его получения. Синбиотическое средство состоит из консорциума микроорганизмов и дополнительно содержит в качестве штаммов-продуцентов депонированные паспортизированные культуры микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86, ресуспендированные фосфатным буфером, раствор деминерализованной молочной сыворотки, лактулозу и цеолит. Осуществление изобретения позволяет повысить метаболические процессы, физиологический и иммунный статусы организма; обеспечить антагонистический эффект в отношении широкого разнообразия условно-патогенных микроорганизмов; стимулировать неспецифическую резистентность организма и, как следствие, увеличить эффективность профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка крупного рогатого скота. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 4 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а именно, к средству для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота при дисбиотических нарушениях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами семейства Enterobacteriaceae, посредством положительного воздействия на развитие пробиотической индигенной микрофлоры, обеспечения антагонистического эффекта в отношении широкого спектра условно-патогенных микроорганизмов, стимулирования неспецифической резистентности и, как следствие, повышение иммунного статуса организма животного.
Уровень техники
Известен, способ получения пробиотического средства "Симбитер-2" [патент РФ №97108832]. В состав средства входят уксуснокислые бактерии и пропионовокислые бактерии, которые смешивают с предварительно полученным консорциумом молочнокислых бактерий в соотношении 4:1. Способ получения пробиотика предусматривает совместное культивирование в молочной среде бифидобактерий разных видов.
Недостатки данного способа следующие:
1. Во-первых, при совместном культивировании разных видов бифидобактерий, отличающихся динамикой развития, не всегда можно гарантировать получение стабильного субстрата.
2. Во-вторых, использование данного пробиотика ограничивается только его использованием для получения кисломолочных продуктов определенного состава и имеющих короткий срок годности.
Известен способ получения средства для обеспечения колонизационной резистентности микробиоценоза кишечника [патент РФ №2589818], включающий в качестве пробиотической составляющей стерилизованную высушенную культуральную жидкость, содержащую метаболиты пробиотического штамма бактерий Bacillus subtilis ВКПМ № В-2335, в качестве сорбента-носителя выступает природный минерал цеолит, в качестве вспомогательной технологической добавки используют стеарат кальция или аэросил, стерилизованные высушенные культуральные жидкости, содержащие метаболиты Enterococcus faecium L-3, Lactobacillus delbrueckii TS1-06 и Lactobacillus fermentum TS3-06, в качестве пребиотической составляющей используют овсяные хлопья, выполнена при этом в твердой дозированной форме в виде капсул.
Недостатки данного способа следующие:
1. Во-первых, в сухих препаратах клетки микроорганизмов находятся в глубоком анабиозе, причем процесс перехода из анабиоза в активное состояние занимает 8-10 часов.
2. Во-вторых, лиофилизация нарушает структуры поверхностных белков-адгезинов, что снижает колонизационную способность бактерий.
3. В-третьих, в процессе сушки большая часть метаболитов разрушается, в частности, ценные органические кислоты.
Наиболее близким по способу получения и технической сущности, принятый авторами за прототип, является лечебно-профилактический препарат из живых штаммов микроорганизмов лакто- и бифидобатерий «LB-комплекс Л», защищенный патентом [патент РФ № 2441907], предусматривающий раздельное культивирование штаммов лакто- и бифидобактерий с последующим смешиванием биомасс культур и иммобилизацией на цеолите.
Недостатки данного способа следующие:
1. Во-первых, за счет отсутствия в формуле изобретения пребиотической составляющей, возникает вероятность снижения приживаемости микроорганизмов в толстом кишечнике и не обеспечивает дополнительный субстрат для их размножения.
2. Во-вторых, использование дистиллированной воды в основе средства, может снизить жизнеспособность используемых штаммов.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения является разработка синбиотического средства и способа его получения для обеспечения колонизационной резистентности желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота, в форме бактериального концентрата на основе консорциума депонированных паспортизированных культур микроорганизмов.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, заключается в повышении метаболических процессов, физиологического и иммунного статуса организма, обеспечении антагонистического эффекта в отношении широкого спектра условно-патогенных микроорганизмов, стимулировании неспецифической резистентности организма и, как следствие, повышении эффективности профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний молодняка крупного рогатого скота.
Технический результат достигается с помощью синбиотического средства «SIN-S» для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота состоящее из консорциума микроорганизмов, отличающееся тем, что дополнительно содержит в качестве штаммов-продуцентов - депонированные паспортизированные культуры микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86, ресуспендированные фосфатным буфером, раствор деминерализованной молочной сыворотки, лактулозу и цеолит в следующем соотношении, мас./%:
| Раствор деминерализованной | |
| молочной сыворотки pH 4,5 (10 мл) | 10,4 г/73,2% |
| Лактулоза | 0,3 г/2,2% |
| Раствор консорциума культур микроорганизмов | |
| Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и | |
| Enterococcus faecium УДС 86 (1 мл) | 1,5 г/10,5% |
| Цеолит | 2 г/14,1% |
Технический результат достигается с помощью способа получения синбиотического средства «SIN-S» для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота включает депонированние лиафилизированной паспортизированной пробиотической культуры Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86 в условиях стерильной зоны с последующим ресуспендированием фосфатным буфером в отдельных пробирках на протяжении 20-30 минут и приведение к концентрации равной 1:100000000 (в 1 мл ~ 109 КОЕ), после чего из полученных разведений отбирают по 0,5 мл каждой культуры микроорганизмов в отдельную стерильную пробирку и смешивают полученный консорциум в разведении 1:1, в результате получается 1 мл жидкости, который, вносят в приготовленную стабилизированную питательную основу, полученную из сухой деминерализованной молочной сыворотки разведенной теплой дистиллированной водой (32-37 °C) в соотношении 1:10 мл с последующим внесением Лактулозы в соотношении 0,3 г на 10 мл полученного раствора, перемешивают и при температуре 32 - 37°С вносят полученный раствор, раствор инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течении 4-5 часов и остужают до температуры 4±2°С, в полученный раствор добавляют порошкообразный Цеолит в количестве 2 г и последующей иммобилизацией метаболитов микроорганизмов в течении 18-24 часов.
Таким образом, разработан оптимальный комплекс, обеспечивающий получение более эффективного синбиотического средства с высоким содержанием метаболитов живых микробных колоний предложенных пробиотических культур в единице объема с длительным сроком хранения и биологической активности.
Штамм Lactobacillus acidophilus K-1-T, ВКПМ: B-4107 (1970 год) культивируют на среде MRS (ООО «НПЦ «БИОКОМПАС-С», Россия), в аэробных условиях при температуре 37°C в течение 24 часов. При культивировании на среде MRS (агаризованной) образуются мелкие слегка выпуклые, бесцветные колонии. При окраске по методу Грама наблюдают палочковидные грамположительные, не спорообразующие микроорганизмы. Биохимические свойства определяют на средах Гисса - «Цветной ряд» (среды с углеводами).
Штамм Enterococcus faecium УДС 86, ВКПМ: B-4054 (1984 год) культивируют на среде M 17 (ООО «НПЦ «БИОКОМПАС-С», Россия). Выращивают энтерококки в аэробных условиях при температуре 37°C в течение 24 часов. Наблюдают рост энтерококков на среде в виде мелких колоний округлой формы белого или полупрозрачного цвета. В мазках-отпечатках, окрашенных по методу Грама, клетки штаммов энтерококков представляют собой овальные кокки, располагающиеся одиночно, попарно или короткими цепочками.
Нарушение бактериального гомеостаза организма новорожденных животных при кишечном дисбактериозе находится в прямой зависимости с элиминацией бифидофлоры. Патологии, вызванные кишечной палочкой, чаще всего возникают в возрасте от 1 до 14 дней. При дисбактериозе характерно снижение уровня представителей полезной микрофлоры, количественные и качественные изменения кишечной палочки, понижение антагонистической активности к гнилостной флоре, а также снижение иммунного статуса организма животного, как следствие вышеперечисленные факторы приводят к массовым диареям.
Таким образом, диарея - одно из наиболее распространенных заболеваний молодняка, вызываемое за счет активной деятельности представителей бактерий семейства Enterobacteriaceae. В свою очередь данные обстоятельства приводят к существенным экономическим потерям, возникающим не только из-за смертности, но и из-за других затрат, включая лечение, диагностику и ветеринарное вмешательство. Одним из наиболее распространенных факторов синдрома диареи являются условно-патогенные (неинфекционные) факторы, связанные с физиологическим состоянием животного (иммунологический и пищевой статус), окружающей средой или ветеринарным обеспечением.
Чертежи и иные материалы
На фиг. 1 - Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта морских свинок по первому опыту, lgKOE/г
На фиг. 2 - Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта морских свинок по второму опыту, lgKOE/г
На фиг. 3 - Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта морских свинок по третьему опыту, lgKOE/г
Осуществление изобретения
Апробацию эффективности разработанного синбиотического средства, проводили на базе научно-испытательной лаборатории кафедры эпизоотологии и микробиологии факультета ветеринарной медицины (Санитарно-эпидемиологическое заключение № 26.01.06.000.M.000318.07.17 от 07.07.2017) ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет», а также СПК племзавод «Вторая Пятилетка» Ипатовского городского округа Ставропольского края.
Получение синбиотического средства, условно названного «SIN-S» осуществляют в три этапа:
Этап 1. Приготовление консорциума микроорганизмов.
Депонированные лиафилизированные паспортизированные пробиотические культуры Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86 в условиях стерильной зоны, ресуспендируют фосфатным буфером в отдельных пробирках на протяжении 20-30 минут и приводят к концентрации равной 1:100000000 (в 1 мл ~ 109 КОЕ). Из полученных разведений отбирают по 0,5 мл каждой культуры микроорганизмов в отдельную стерильную пробирку и смешивают полученный консорциум в разведении 1:1, в результате получают 1 мл жидкости.
Этап 2. Приготовление питательной основы.
Для приготовления стабилизированной питательной основы раствора используют сухую деминерализованную молочную сыворотку с рН - 4,5. Сухую деминерализованную молочную сыворотку разводят теплой дистиллированной водой (примерно 32-37 °C) 1:10 мл. Далее в полученный раствор вносят пребиотик - Лактулозу в соотношении 0,3 г на 10 мл полученного раствора, перемешивают.
Этап 3. Получение синбиотического средства «SIN-S».
В 10 мл приготовленной стабилизированной питательной основы при температуре 32 - 37°С, вносят полученный раствор на основе консорциума микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86 в размере 1 мл. Далее комбинированный раствор инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течении 4-5 часов. После инкубации раствор остужают до температуры 4±2°С. Далее в полученный раствор добавляют порошкообразный сорбент-носитель - Цеолит в количестве 2 г, реакция иммобилизации метаболитов микроорганизмов происходит в течении 18-24 часов.
Проведение апробации синбиотического средства «SIN-S», осуществляют методом группового сравнения. Было задействовано 20 клинически здоровых новорожденных телят, из которых сформировали четыре группы по 5 голов и 10 разнополых белых лабораторных крыс с массой тела 450-500 г, для выявления токсичности.
Оценку влияния образца синбиотического средства «SIN-S» на микрофлору желудочно-кишечного тракта телят контрольной и опытных групп осуществляли на 7-ой день опыта путем отбора образцов фекалий через 2-3 часа после утреннего кормления от всех особей из каждой группы. Полученные свежие образцы каловых масс исследовали путем посева последовательных 10-кратных разведений на агаризированные дифференциально-диагностические питательные среды поверхностным методом с последующим подсчетом количества общего микробного числа (ОМЧ) в КОЕ/г, после чего проводили пересчет данного показателя в lg KOE/г. Видовую идентификацию микроорганизмов проводили путем оценки их морфологических свойств при микроскопии бактериальных препаратов, изготовленных из колоний чистых культур, выращенных на питательных средах для дифференциальной диагностики микроорганизмов: MПА - ОМЧ, MRS - Lactobacillus spp., М-17 - Enterococcus spp., Эндо - БГКП.
Пример 1. В первом опыте телятам из контрольной группы задают физиологический раствор. В первой опытной группе особям согласно применяемой методике, задают образец синбиотического средства, полученного в следующем соотношении компонентов, мас./%:
| Раствор деминерализованной | |
| молочной сыворотки pH 4,5 (10 мл) | 10,4 г/68,4% |
| Лактулоза | 3 г/19,7% |
| Раствор консорциума культур микроорганизмов | |
| Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и | |
| Enterococcus faecium УДС 86 (0,5 мл) | 0,8 г/5,3% |
| Цеолит | 1 г/6,6% |
Согласно полученным данным (фиг. 1), включение в кормление телятам опытного образца синбиотического средства согласно формуле по первому примеру, оказало неблагоприятное воздействие на качественный состав фекальной микрофлоры. На 7-ой день опыта бактерии группы БГКП в первой опытной группе увеличились на 6,3%. В содержании бактерий Lactobacillus spp. и Enterococcus spp. существенных изменений не наблюдалось и были в пределах 8,036±0,251 - 8,005±0,306 lgKOE/г и 7,684±0,040 - 7,732±0,581 lgKOE/г.
Согласно анализу полученных данных, было установлено, что заданный объем Лактулозы, необходимо корректировать, с целью понижения кислотности желудка и воздействия на представителей бактерий БГКП. Так же необходимо увеличить объем раствора консорциума культур микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86, с целью повышения резистентности пробиотической микрофлоры желудочно-кишечного тракта.
Пример 2. Второй опыт осуществляют согласно применяемой методике по примеру 1, отличающийся тем, что телятам второй опытной группы, задавали заявленное синбиотическое средство в следующем соотношении компонентов, мас./%:
| Раствор деминерализованной | |
| молочной сыворотки pH 4,5 (10 мл) | 10,4 г/78,7% |
| Лактулоза | 0,3 г/2,3% |
| Раствор консорциума культур микроорганизмов | |
| Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и | |
| Enterococcus faecium УДС 86 (1,5 мл) | 1,5 г/11,4% |
| Цеолит | 1 г/7,6% |
По результатам микробиологических исследований (фиг. 2), общее микробное число не превышало значения нормы и составило у телят второй опытной группы 9,114±0,293 lg KOE/г, а в контрольной группе - 8,837±0,226 lg KOE/г. Во второй опытной группе, количество Lactobacillus spp. составило 9,221±0,196* lg KOE/г (Р<0,05), а содержание Enterococcus spp. - 7,339±0,204 lg KOE/г, по сравнению с особями из контрольной группы количество лактобактерий было выше на 12,9%, а энтерококков - на 7,9%, соответственно. Содержание бактерий группы кишечной палочки у телят второй опытной группы было равно 3,050±0,185* lg KOE/г (Р<0,05), по сравнению с контрольной группой, где данное значение равно 3,816± 0,160, было ниже на 20,1%.
Для повышения активности разработанного синбиотического средства, необходимо повысить концентрацию сорбент-носителя - Цеолита, с целью повышения реакции иммобилизации метаболитов микроорганизмов.
Пример 3. Третий опыт осуществляют согласно применяемой методике по примеру 1, отличающийся тем, что телятам третьей опытной группы, задают заявленное синбиотическое средство в следующем соотношении компонентов, мас./%:
| Раствор деминерализованной | |
| молочной сыворотки pH 4,5 (10 мл) | 10,4 г/73,2% |
| Лактулоза | 0,3 г/ 2,2% |
| Раствор консорциума культур микроорганизмов | |
| Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и | |
| Enterococcus faecium УДС 86 (1 мл) | 1,5 г/10,5% |
| Цеолит | 2 г/14,1% |
Согласно данным полученным в ходе 3 опыта (фиг. 3) уставлено, что включение в кормление телятам из третьей опытной группы, образца синбиотического средства «SIN-S» по заявленному соотношению компонентов, позволило снизить содержание бактерий группы БГКП на 37,6% и увеличить количество лактобактерий и энтерококков на 19% и 11,9%, что свидетельствует об увеличении колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта организма животного, способствующей снижению риска проявления желудочно-кишечных заболеваний бактериальной природы.
Пример 4. Средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры микробиоценоза желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота при дисбиотических нарушениях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами семейства Enterobacteriaceae, было исследовано на токсичность. Токсичность средства определяют при однократном накожном нанесении раствора половозрелым, 10 разнополым белым лабораторным крысам с массой тела 450-500г. На кожу методом скарификации наносят разработанное средство. После повторных обработок, в течение 2 недель проводили наблюдения за общим состоянием животных. На кожных покровах изменений не выявлено. Ни одно животное не погибло.
В ходе проведения испытаний синбиотического средства «SIN-S» на клинически здоровых телятах, была доказана его высокая эффективность, в качестве новых профилактических средств. Синбиотическое средство «SIN-S» оказывает вспомогательную функцию организму в переваривании и усвоении кормов, повышает основные показатели неспецифического иммунитета стимулируя рост представителей полезной микрофлоры.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:
- Используемые ингредиенты выпускаются в промышленных условиях, тем самым легко доступны и недороги;
- Обеспечивает высокую антагонистическую активность;
- Сохраняет свои биологические свойства достаточно длительный срок.
- Избирательно повышает колонизационный потенциал нормофлоры микробиоценоза желудочно-кишечного тракта.
Claims (3)
1. Синбиотическое средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота, состоящее из консорциума микроорганизмов, отличающееся тем, что дополнительно содержит в качестве штаммов-продуцентов депонированные во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) НИЦ «Курчатовский институт» – ГосНИИгенетика, паспортизированные культуры микроорганизмов Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86, ресуспендированные фосфатным буфером, раствор деминерализованной молочной сыворотки, лактулозу и цеолит в следующем соотношении, мас.%:
2. Способ получения синбиотического средства для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота включает ресуспендирование фосфатным буфером депонированных во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) НИЦ «Курчатовский институт» – ГосНИИгенетика, лиофилизированных паспортизированных, пробиотических культур Lactobacillus acidophilus (B-4107) K-1-T и Enterococcus faecium УДС 86 в условиях стерильной зоны в отдельных пробирках на протяжении 20-30 мин и приведение к концентрации, равной 1:100000000 (в 1 мл ~ 109 КОЕ), после чего из полученных разведений отбирают по 0,5 мл каждой культуры микроорганизмов в отдельную стерильную пробирку и смешивают полученный консорциум в разведении 1:1, в результате получается 1 мл жидкости, который вносят в приготовленную стабилизированную питательную основу, полученную из сухой деминерализованной молочной сыворотки, разведённой теплой дистиллированной водой 32-37 °C в соотношении 1:10 мл, с последующим внесением Лактулозы в соотношении 0,3 г на 10 мл полученного раствора и перемешиванием; затем в этот раствор питательной основы при температуре 32-37 °C вносят полученный раствор консорциума, инкубируют в термостате при температуре 37 °С в течение 4-5 ч и остужают до температуры 4±2 °С, в полученный комбинированный раствор добавляют порошкообразный Цеолит в количестве 2 г с последующей иммобилизацией метаболитов микроорганизмов в течение 18-24 ч.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2782031C1 true RU2782031C1 (ru) | 2022-10-21 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2810586C1 (ru) * | 2023-06-02 | 2023-12-27 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Способ получения комплексной синбиотической композиции |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA25909U (en) * | 2007-04-20 | 2007-08-27 | Univ Nat Pharmaceutical | Synbiotic medicinal agent for correcting dysbiotic disorders |
| UA46404U (ru) * | 2009-05-25 | 2009-12-25 | Национальный Фармацевтический Университет | Комбинированное синбиотическое лекарственное средство |
| RU2602201C1 (ru) * | 2015-08-04 | 2016-11-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ профилактики желудочно-кишечных болезней телят |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA25909U (en) * | 2007-04-20 | 2007-08-27 | Univ Nat Pharmaceutical | Synbiotic medicinal agent for correcting dysbiotic disorders |
| UA46404U (ru) * | 2009-05-25 | 2009-12-25 | Национальный Фармацевтический Университет | Комбинированное синбиотическое лекарственное средство |
| RU2602201C1 (ru) * | 2015-08-04 | 2016-11-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ профилактики желудочно-кишечных болезней телят |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| И.В. АНДРЕЕВА, Потенциальные возможности применения пробиотиков в клинической практике. Клиническая микробиологическая антимикробная химиотерапия. 2006, Т.8, N 2, с. 151-172. FRANCISCO GUARNER et al., Пробиотики и пребиотики. Всемирная Гастроэнтерологическая Организация. Практические рекомендации. 2008. А.В. ГРЕЧКО, Нутритивная поддержка пациентов с коронавирусной инфекцией COVID-19. Клиническое питание и метаболизм 2, 2020, с.56-91. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2810586C1 (ru) * | 2023-06-02 | 2023-12-27 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Способ получения комплексной синбиотической композиции |
| RU2811096C1 (ru) * | 2023-06-02 | 2024-01-11 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Лиофилизат иммобилизованного поликомпонентного синбиотика и способ его получения |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106222158B (zh) | 一种包埋乳酸杆菌的微胶囊制备方法 | |
| CN112011481B (zh) | 一株防治畜禽细菌性腹泻的罗伊氏乳杆菌及其应用 | |
| WO1995016461A1 (en) | PROBIOTIC FOR CONTROL OF $i(SALMONELLA) | |
| CN109182184B (zh) | 一株犬源乳酸片球菌及其应用 | |
| CN110878266B (zh) | 一株约氏乳杆菌及其用途 | |
| Shi et al. | Evaluation of safety and probiotic properties of a strain of Enterococcus faecium isolated from chicken bile | |
| CN111187730A (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| JPH08502019A (ja) | サルモネラ菌抑制のためのプロバイオテック | |
| CN114806978B (zh) | 约氏乳杆菌sxdt-23及其应用 | |
| Gneusheva et al. | Justification of a synbiotic preparation (“probiotic+ prebiotic”) composition for use in veterinary practice | |
| CN113088468B (zh) | 干酪乳杆菌Ma.GLRGJ 1及其应用 | |
| RU2086248C1 (ru) | Пробиотический препарат "стрептобифид" для животных | |
| CN112226389A (zh) | 一种三黄肉雏鸡肠道益生菌群的定植培养方法及其应用 | |
| RU2782031C1 (ru) | Синбиотическое средство для повышения колонизационного потенциала нормофлоры желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота | |
| CN114921383A (zh) | 一种具有清除胆固醇功能的益生菌制剂及其制备方法 | |
| CN115925832A (zh) | 一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用 | |
| Shirisha et al. | Isolation and characterization of probiotics from different curd samples | |
| US20130115328A1 (en) | Microencapsulated probiotics for reducing fecal shedding of pathogenic microbes in animals | |
| Koh et al. | Biological activities of thermo-tolerant microbes from fermented rice bran as an alternative microbial feed additive | |
| RU2797587C1 (ru) | Пробиотическая кормовая добавка для коров и телят | |
| CN117305189B (zh) | 一种德氏乳杆菌保加利亚亚种vb183及其培养装置和应用 | |
| CN117286083B (zh) | 一种罗伊氏粘液乳杆菌vb319及其培养装置和应用 | |
| CN111154677B (zh) | 嗜酸乳杆菌及其应用 | |
| Tzugkiev et al. | The Characteristic of Lactic Acid Bacteria Isolated in North Ossetia-Alania | |
| Samples | JOURNAL of DRUG VIGILANCE and ALTERNATIVE THERAPIES |