RU2769672C1 - Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины - Google Patents

Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины Download PDF

Info

Publication number
RU2769672C1
RU2769672C1 RU2021109385A RU2021109385A RU2769672C1 RU 2769672 C1 RU2769672 C1 RU 2769672C1 RU 2021109385 A RU2021109385 A RU 2021109385A RU 2021109385 A RU2021109385 A RU 2021109385A RU 2769672 C1 RU2769672 C1 RU 2769672C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
sssr
influenza
donor
vaccine
Prior art date
Application number
RU2021109385A
Other languages
English (en)
Inventor
Лариса Георгиевна Руденко
Наталья Валентиновна Ларионова
Ирина Васильевна Киселева
Ирина Николаевна Исакова-Сивак
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ")
Priority to RU2021109385A priority Critical patent/RU2769672C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2769672C1 publication Critical patent/RU2769672C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицинской вирусологии и биотехнологии. Описан штамм гриппа В/СССР/60/69/5252, полученный в результате 3-кратного клонирования в развивающихся куриных эмбрионах известного донора аттенуации В/СССР/60/69. Штамм активно размножается в куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°С, характеризуется генетической однородностью, температурочувствительностью и холодоадаптированностью репродукции, стабильностью свойств и безвредностью и аттенуацией для лабораторных животных. Использование чистой линии донора аттенуации В/СССР/60/69/5252 для реассортации с регулярно обновляющимися эпидемическими вирусами гриппа позволяет гарантировать стабильность характеристик аттенуированных штаммов для живой гриппозной вакцины в соответствии с Фармакопейной статьей ФСП 42-0417-4097-03 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения и может быть использовано при производстве живой гриппозной интраназальной холодоадаптированной аттенуированной реассортантной вакцины для взрослых и для детей. 8 табл., 6 пр.

Description

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано при производстве живой гриппозной интраназальной холодоадаптированной аттенуированной реассортантной вакцины.
Наиболее близким к заявленному изобретению является холодоадаптированный штамм В/СССР/60/69 - прототип [Патент РФ №2078817 от 27.11.1992. - Опубл. 10.05.1997]. Прототип был получен двумя этапами. Первый этап заключался в последовательных пассажах «дикого» вируса В/СССР/69 в развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ) при оптимальной температуре инкубации 32°С (17 пассажей), в результате чего был получен вирус В/СССР/17/69, который использовался в СССР в начале 1970-х годов в качестве штамма живой гриппозной вакцины (ЖГВ) для взрослых. Вирус В/СССР/17/69 (В17) приобрел свойство температурочувствительности репродукции (ts фенотип), но сохранил присущий «дикому» родителю чувствительный к пониженной температуре инкубации (поп-са) фенотип. Второй этап состоял в дополнительном 60-кратном пассировании вируса В/СССР/17/69 в развивающихся куриных эмбрионах при пониженной до 25-28°С температуре. Полученный ts/ca вирус В/СССР/60/69 использовался как штамм ЖГВ для детей, а с 1980-х годов по настоящее время успешно применяется при подготовке реассортантной ЖГВ [Александрова Г.И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. СПб: Наука. - 1994. - 151 с.] и является единственным в России донором аттенуации, официально разрешенным Министерством здравоохранения Российской Федерации для получения реассортантных вакцинных штаммов типа В.
Однако, прототип - донор В/СССР/60/69 (В60) - обладает рядом недостатков:
(1) авторы никогда не клонировали этот вирус, поэтому прототип представляет собой гетерогенную популяцию клонов, отличающихся по набору мутаций в генах, кодирующих внутренние белки, (2) изучение генетической последовательности генома не проводили (вирус не секвенировали), что не позволяло установить степень генетической неоднородности штамма, (3) не были описаны аттенуирующие мутации, появившиеся в результате пассирования «дикого» предшественника при оптимальной и пониженной температуре инкубации.
Штамм ЖГВ, полученный на неклонированном доноре аттенуации, является продуктом реассортации дикого вируса с одним клоном из гетерогенной популяции донора. Невозможно предугадать, какой из клонов передаст в геном вакцинного штамма гены, кодирующие внутренние белки вируса. В результате, стабильность характеристик реассортантных вирусов не может быть обеспечена. Только чистота популяции донора может гарантировать наследование реассортантом генов донора с оптимальным набором аттенуирующих мутаций. Клонирование донора, секвенирование генома клонов из гетерогенной популяции, определение роли отдельных мутаций необходимо для отбора оптимального клона для использования в качестве донора аттенуации для живых гриппозных вакцин.
Технический результат заявленного изобретения: получение аттенуированного холодоадаптированного штамма - донора аттенуации вируса гриппа В, обладающего генетической однородностью, известным набором аттенуирующих мутаций, способного к активному размножению в РКЭ при оптимальной температуре инкубации (32°С) и при пониженной до 25°С температуре и проявляющего ts фенотип при температурах выше 37°С.
Из гетерогенной популяции донора аттенуации В/СССР/60/69 отобрана и охарактеризована чистая линия, обладающая наиболее удачным сочетанием полезных признаков и позволяющая создавать генетически стабильные реассортантные вакцинные штаммы.
Сущность изобретения: Холодоадаптированный штамм В/СССР/60/69/5252 был трижды клонирован в РКЭ методом предельных разведений и генетически полностью охарактеризован. Было проведено полногеномное секвенирование штамма по Сэнгеру. Сравнительный анализ последовательностей генома эпидемических вирусов гриппа В, доступных в базах данных генетических последовательностей, показал наличие 6-ти уникальных и 2-х не уникальных мутаций во внутренних генах, кодирующих белки РВ2, PA, M1, ВМ2 и NS1, что отличает его от современных и ранее циркулировавших эпидемических вирусов гриппа В, сиквенсы которых на настоящий момент имеются в базах данных. Полученный штамм В/СССР/60/69/5252 обладает высокой репродуктивной активностью в РКЭ при оптимальной (32°С) и пониженной (25°С) температурах и сниженной репродуктивностью при температурах выше 37°С.Штамм В/СССР/60/69/5252 депонирован в Государственную коллекцию вирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России под №2973.
Согласно Приказу №156/29 МЗ РФ холодоадаптированный донор аттенуации должен иметь комплекс генетических маркеров и быть исследован в молекулярно-биологических и биохимических тестах, включая секвенирование «внутренних» генов; геном донора аттенуации должен иметь мутации всех (или большей части) генов, кодирующих негликозированные белки [Приказ №156/29 МЗ РФ от 07.05.1998 «О подготовке новых вакцинных производственных и диагностических штаммов вируса гриппа и их внедрении в производство вакцинных и диагностических препаратов».- 1998. - 14 с.]. Примеры подготовки и изучения биологических и генетических свойств холодоадаптированного штамма В/СССР/60/69/5252 приведены ниже.
Пример 1. Получение штамма В/СССР/60/69/5252.
Прежде всего, была определена нуклеотидная последовательность донора аттенуации В/СССР/60/69. Была выявлена гетерогенность его популяции по ряду позиций. Для получения чистой линии потребовалось клонирование донора В/СССР/60/69. Всего было получено 8 групп, различающихся по нуклеотидному составу клонов, получивших условные номера по своему представителю: 5252, 5253, 5254, 5255, 5272, 5273, 5274 и 5277.
Все клоны, выделенные из популяции донора аттенуации В/СССР/60/69, характеризовались са-фенотипом, но отличались по температурочувствительности, что нашло отражение в разбросе данных при титровании неклонированного донора в РКЭ (Табл. 1).
Figure 00000001
По высокой температурочувствительности к 38°С клоны между собой не различаются (признак: ts38°), однако, при снижении температуры инкубации до 37°С образуют две группы: температурочувствительные и температуроустойчивые к 37°С (признак: ts37° и non-ts37°). При этом дикие вирусы гриппа В, выделенные в тот же временной период, что и предшественник донора В60, характеризуются non-ts фенотипом при 38°С (признак: non-ts38°).
Отобранный клон В/СССР/60/69/5252 хорошо размножался при оптимальной и пониженной температуре (са-фенотип) и не размножался при повышенной температуре 38°С (ts-фенотип). Для обеспечения генетической однородности ts/ca клон В/СССР/60/69/5252 прошел дополнительные три клонирования предельными разведениями от 10-7 до 10-10 при температуре 32°С в свободных от патогенной флоры (SPF) РКЭ. Каждым разведением вируса было заражено по 20 куриных эмбрионов. Аллантоисную жидкость единственного положительного в реакции гемагглютинации эмбриона, зараженного разведением вируса 10-8, использовали для второго раунда клонирования. Клон, выделенный из 10-9 разведения второго раунда клонирования, прошел третье клонирование. Выделенный из 10-9 разведения 3-го клонирования вирус, получил название В/СССР/60/69/5252.
Пример 2. Репродукция в РКЭ при разных температурах инкубации и генетическая стабильность
Оценку фенотипических свойств клона В/СССР/60/69/5252 проводили путем его параллельного титрования в РКЭ при 32, 25 и 38°С. Клон В/СССР/60/69/5252 обладает выраженным температурочувствительным и холодоадаптированным фенотипом. Его инфекционная активность при температуре 38°С составила 1,7±0,2 lg ЭИД50/мл (ts фенотип), а инфекционная активность при пониженной до 25°С температуре инкубации составила 7,7±0,3 lg ЭИД50/мл (са фенотип), что свидетельствует о его безвредности для человека. По этим показателям он идентичен донору аттенуации В/СССР/60/69, но обладает значительно более стабильными характеристиками, что отражается в незначительном разбросе данных при статистической обработке результатов титрования в РКЭ при разных температурах (см. табл. 1).
Фенотипические свойства клона В/СССР/60/69/5252 не изменились после его пятикратного пассирования в развивающихся куриных эмбрионах при использовании больших заражающих доз (табл. 2), что свидетельствует о генетической стабильности препарата.
Figure 00000002
Пример 3. Безвредность для мышей.
Доклинические исследования острой токсичности штамма В/СССР/60/69/5252 проводили на белых беспородных мышах в соответствии Европейской директивой [Директива 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях], Межгосударственным стандартом [Межгосударственным стандартом ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики»] и Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Иммунобиологические лекарственные препараты); Часть вторая. - М.: Гриф и К, 2012. - 536 с]. Исследования были одобрены для проведения локальным этическим комитетом при ФГБНУ «ИЭМ» (заключение №1/20 от 27.02.2020).
Мышам вводили однократно внутрибрюшинно 0,5 мл вируса В/СССР/60/69/5252 с титром 7,0 lg ЭИД50/мл, что соответствовало одной человеческой дозе вакцинного штамма ЖГВ. Животным контрольной группы вводили внутрибрюшинно фосфатно-солевой буферный раствор (PBS). Ежедневно в течение всего исследования (7 дней) проводился контроль общего состояния каждого животного.
Данные физиологического обследования (подвижность, поведенческие реакции, кинетика массы тела) показали, что внутрибрюшинное введение вируса В/СССР/60/69/5252 не вызывало гибели экспериментальных животных (табл. 3) и не приводило к изменению их внешнего вида, поведения, не отражалось на потреблении ими пищи и воды, что свидетельствует о безвредности вакцинного препарата.
Figure 00000003
Пример 4. Безвредность и иммуногенность для хорьков.
Исследования проводили на серонегативных самках хорьков, по 6 животных в группе. Животных иммунизировали вакцинным штаммом вируса гриппа В/60/Брисбен/2008/83, полученным на основе клонированного донора аттенуации В/СССР/60/69/5252, по 0,5 мл интраназально в дозе вируса 6,0 lg ЭИД50 на животное.
Работа осуществлялась с соответствии с Европейской директивой [Директива 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях], Межгосударственным стандартом [Межгосударственный стандарт ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики»] и Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Иммунобиологические лекарственные препараты); Часть вторая. - М.: Гриф и К, 2012. - 536 с]. Исследования проводились на базе ООО «Институт доклинических исследований» (Санкт-Петербург) и были одобрены для проведения локальным этическим комитетом при ООО «Институт доклинических исследований» (заключение №1.4/17 от 18.01.2017).
Контрольных хорьков заражали «диким» родительским вирусом В/Брисбен/60/2008 в той же дозе, что и вакцинную группу. Третью группу представляли интактные животные (не получали ничего). Клинический осмотр всех животных проводили на 0-3 дни эксперимента. Состояние животных оценивали по следующим параметрам: температура тела, активность, появление респираторных симптомов (кашель, чихание, выделения из носа). Клиническую картину заболевания оценивали в баллах: активный - 0 баллов, вялый - 1 балл, чихание - 1 балл, выделения из носа - 1 балл. Была подсчитана сумма баллов для каждого животного. Для определения уровня репродукции вируса у трех животных каждой группы на 3-й день опыта производили забор назальных смывов, а затем, после эвтаназии - образцы легких. Репродукцию вирусов определяли путем заражения развивающихся куриных эмбрионов.
Через 21 день после заражения/вакцинации у оставшихся хорьков забирали кровь для определения гуморального иммунного ответа в РТГА и в реакции микронейтрализации.
Интраназальное введение вируса В/60/Брисбен/2008/83 не приводило к изменению внешнего вида и активности экспериментальных животных, не вызывало повышения температуры тела, респираторные симптомы у хорьков отсутствовали (табл. 4), что свидетельствует о безвредности вакцинного препарата на основе клонированного донора В/СССР/60/69/5252.
Figure 00000004
В отличие от хорьков, зараженных «диким» вирусом В/Брисбен/60/2008, у вакцинированных хорьков отсутствовала репликация вируса в легких. При этом штамм ЖГВ В/60/Брисбен/2008/83 успешно реплицировался в верхних дыхательных путях (в носу) хорьков (табл. 5), что приводило к выработке выраженного иммунного ответа у хорьков к 21 дню после вакцинации (табл. 6).
Figure 00000005
Figure 00000006
Пример 5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ МУТАЦИЙ В ГЕНОМЕ ШТАММА В/СССР/60/69/5252. Для выявления мутаций в геноме донора аттенуации необходимо его сравнение с исходным эпидемическим (WT) вирусом, из которого он был получен. К сожалению, «дикий» предшественник донора аттенуации В/СССР/60/69 не сохранился, поэтому было проведено множественное выравнивание нуклеотидных и аминокислотных последовательностей полученных клонов донора аттенуации В/СССР/60/69 с соответствующими последовательностями эпидемических вирусов гриппа В, выделенных в период с 1940 по 2006 год и депонированных в Базах данных генетических последовательностей http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genomes/TLU/FLU.htlm, https://www.gisaid.org/, и http://www/flu.lanl.gov. Для сравнения последовательностей использован вирус гриппа В/Яманаши/166/98. Количество проанализированных сиквенсов и результаты анализа всех значащих мутаций в геноме клонов донора аттенуации В/СССР/60/69 отражены в таблице 7.
Figure 00000007
Установлено, что 5 клонов, идентичных клону 5252, содержат в генах, кодирующих внутренние белки, 8 мутаций: РВ2 (L-3190Q; E467G; R639K), PA (S149N; T524K), M1 (R167K), ВМ2 (I87V), и NS1 (C104S). Два клона, аналогичные клону 5253, содержат в генах, кодирующих внутренние белки, 6 мутаций: РВ2 (L-3190Q; R639K), РВ1 (I644V); M1 (S218N), и NS2 (А54Т; L103F). Клон 5272 содержит в генах, кодирующих внутренние белки, 11 мутаций: РВ2 (Y104H; I269V; L3190Q; E467G; R639K), PA (S149N; I459V), ВМ2 (I87V), и NS1 (R272H) и NS2 (А54Т; L103F).
Были проанализированы внутренние гены 6 вакцинных штаммов, подготовленных в разное время на основе неклонированного донора аттенуации В/СССР/60/69. Все эти вакцинные штаммы использовались в производстве сезонной ЖГВ, зарекомендовали себя безвредными для человека и иммуногенными и соответствовали требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам. По наличию мутаций в различных внутренних генах эти вакцинные штаммы распределились следующим образом: 4 штамма соответствовали набору мутаций, описанному для клона 5252, один - клону 5253 и один - клону 5272 (см. табл. 7). Таким образом, и среди клонов донора В/СССР/60/69, и среди вакцинных штаммов, полученных на его основе, большинство представляло собой аналог клона 5252, что позволило нам выбрать его в качестве нового потенциального клонированного донора аттенуации ЖГВ типа В.
Пример 6. Установление роли отдельных мутаций в формировании аттенуирующего фенотипа штамма В/СССР/60/69/5252
Для выявления роли уникальных мутаций в геноме донора аттенуации в формировании его ts/ca фенотипа было проведено его сравнение с промежуточным вариантом на пути от «дикого» вируса к современному донору аттенуации - вирусом В/СССР/17/69, обладающим ts/non-ca фенотипом. Общий предшественник вакцинного штамма В17 и донора аттенуации В60 обладал non-ts/non-ca фенотипом, как и другие эпидемические вирусы гриппа В тех лет выделения. Сравнительный молекулярно-генетический анализ ts/non-ca и ts/ca вариантов дает возможность выявить мутации, определяющие холодоустойчивость репродукции донора аттенуации В60.
Чтобы определить уникальные мутации, специфичные для становления температурочувствительности донора В60, было проведено сравнение нуклеотидных и аминокислотных последовательностей донора аттенуации с соответствующими последовательностями эпидемических вирусов гриппа В, выделенных в период с 1940 до 2006 года и депонированных в базах данных генетических последовательностей (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genomes/FLU/FLU.htlm и http://wvvw/flu.lanl.gov).
Для сравнения первичных последовательностей «диких» и мутантных вирусов гриппа В использован вирус гриппа В/Яманаши/166/98. Количество проанализированных сиквенсов и результаты анализа отражены в таблице 8.
Figure 00000008
В первичной структуре генома донора В/СССР/60/69/5252 установлено восемь кодирующих мутаций, предположительно появившихся в результате пассирования эпидемического родительского вируса в РКЭ при оптимальной и пониженной до 26°С температуре.
В гене РВ2 - три мутации, приведшие к замене L-319-Q, E-467-G и R-639-K, в РА - две мутации, приведшие к замене S-149-N и Т-524-K, в М - две мутации, приведшие к одной аминокислотной замене в белке M1 R-167-K и одной в белке ВМ2 I-87-V, в NS1 - одна мутация C-104-S.
Две из восьми мутаций: в белке РВ2 (R-639-K), и в белке ВМ2 (I-87-V), не могут считаться абсолютно уникальными, так как присутствуют у некоторых более поздних эпидемических вирусов. С другой стороны, они не были обнаружены у вирусов, циркулировавших в тот же временной период - в 1960-1970-х годах (вирусы В/Энн Арбор/1/66, В/Россия/69, В/Гонконг/5/72, В/Гонконг/8/73, В/Сингапур/222/79).
В общей сложности гены, кодирующие РНП комплекс клонированного донора аттенуации В60, содержат четыре уникальных и одну неуникальную мутацию.
Не было обнаружено ни одной кодирующей мутации ни в гене РВ1, ни в гене NP донора аттенуации В60/69/5252, что указывает на отсутствие участия генов РВ1 и NP в формировании ts/ca фенотипа. Роль мутаций в генах М и NS1 пока не ясна, возможно, они имеют значение для аттенуации донора, но не связаны с его температурными характеристиками.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В результате проведенных исследований установлено, что заявляемый штамм В/СССР/60/69/5252 характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых донору аттенуации: генетической гомогенностью популяции, а также характерной для донора аттенуации температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека. Это отражено в прилагаемом ниже Паспорте штамма.
Штамм безвреден для мышей и хорьков, аттенуирован и иммуногенен для хорьков.
Полученный штамм В/СССР/60/69/5252 депонирован 11.11.2020 в Государственную коллекцию вирусов Института вирусологии им. Д. И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России под №2973.
ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32°С в течение 72 часов - 9,7 lg ЭИД50/мл.
Гемагглютинирующая активность - 1:512.
Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).
Характеристики холодоадаптированного штамма В/СССР/60/69/5252 представлены в прилагаемом паспорте.
Figure 00000009

Claims (1)

  1. Штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, депонированный в Государственную коллекцию вирусов Института вирусологии им. Д.И. Ивановского ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России под №2973, представляющий собой клон вируса гриппа В/СССР/60/69, имеющий 8 кодирующих мутаций во внутренних генах: РВ2 (L319Q; E467G; R639K), PA (S149N; T524K), M1 (R167K), ВМ2 (I87V) и NS1 (C104S) и являющийся донором аттенуации для получения живой гриппозной интраназальной реассортантной гриппозной вакцины для взрослых и для детей.
RU2021109385A 2021-04-05 2021-04-05 Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины RU2769672C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021109385A RU2769672C1 (ru) 2021-04-05 2021-04-05 Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021109385A RU2769672C1 (ru) 2021-04-05 2021-04-05 Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2769672C1 true RU2769672C1 (ru) 2022-04-04

Family

ID=81076155

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021109385A RU2769672C1 (ru) 2021-04-05 2021-04-05 Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2769672C1 (ru)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU92006181A (ru) * 1992-11-16 1997-02-10 Акционерное общество закрытого типа "Медбиофарм" Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа в/ссср/60/69 для получения живой интраназальной гриппозной вакцины
RU2703024C1 (ru) * 2019-03-15 2019-10-15 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины" (ФИЦ ФТМ) Штамм вируса гриппа B/Novosibirsk/40/2017-MA для изучения лечебной и профилактической эффективности противовирусных препаратов in vitro и in vivo
WO2020236811A1 (en) * 2019-05-20 2020-11-26 President And Fellows Of Harvard College Drug-resistant influenza virus strains

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2078817C1 (ru) * 1992-11-27 1997-05-10 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН Аттенурованный холодоадаптированный штамм вируса гриппа, используемый для получения живой интраназальной гриппозной вакцины

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU92006181A (ru) * 1992-11-16 1997-02-10 Акционерное общество закрытого типа "Медбиофарм" Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа в/ссср/60/69 для получения живой интраназальной гриппозной вакцины
RU2703024C1 (ru) * 2019-03-15 2019-10-15 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный исследовательский центр фундаментальной и трансляционной медицины" (ФИЦ ФТМ) Штамм вируса гриппа B/Novosibirsk/40/2017-MA для изучения лечебной и профилактической эффективности противовирусных препаратов in vitro и in vivo
WO2020236811A1 (en) * 2019-05-20 2020-11-26 President And Fellows Of Harvard College Drug-resistant influenza virus strains

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Е.М. Дорошенко. Безопасность, иммуногенность и эффективность живых гриппозных аттенуированных интраназальных вакцин - опыт многолетнего применения в различных возрастных группах. Эпидемиология и Вакцинопрофилактика, 2013, том 71, номер 4, с.67-73. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Miller et al. Antigenic differences among Newcastle disease virus strains of different genotypes used in vaccine formulation affect viral shedding after a virulent challenge
JP5261338B2 (ja) 低温適応性ウマインフルエンザウィルス
CN101448520B (zh) 禽流感病毒、疫苗、组合物、制剂及方法
US10793834B2 (en) Live-attenuated virus and methods of production and use
US20070172494A1 (en) Cold-adapted equine influenza viruses
RU2318871C1 (ru) Штамм вируса гриппа гкв 2389 для получения живой интраназальной и инактивированной гриппозной вакцины
US7201909B2 (en) Cold-adapted equine influenza viruses
Do Hwang et al. Protection of pregnant mice, fetuses and neonates from lethality of H5N1 influenza viruses by maternal vaccination
He et al. Molecular basis of live-attenuated influenza virus
Tan et al. Infectious bronchitis virus poly-epitope-based vaccine protects chickens from acute infection
JP2021536228A (ja) ヘマグルチニン（ｈａ）タンパク質内の非ドミナントエピトープに対する免疫応答を誘起するためのベクター
CN107961371A (zh) 季节流感-rsv联合疫苗及其制备方法和应用
RU2746274C2 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Колорадо/2017/1 (Линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
Nurpeisova et al. Analysis of the efficacy of an adjuvant-based inactivated pandemic H5N1 influenza virus vaccine
AU2001249300B2 (en) Cold-adapted equine influenza viruses
RU2556833C2 (ru) Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа а/рr/8/59/m2 (h1n1), предназначенный для получения вакцинных штаммов вируса гриппа в качестве донора аттенуации, вакцинные штаммы вируса гриппа а/59/м2/калифорния/66/2211 (н2n2) и а/59/м2/токио/67/22111 (н2n2)
RU2315101C2 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/ 04/6 (н3n2) и донор аттенуации а/ленинград/134/17/к7/57 (н2n2) для его получения
RU2769672C1 (ru) Холодоадаптированный донор аттенуации - штамм вируса гриппа В/СССР/60/69/5252, предназначенный для получения штаммов живой интраназальной гриппозной вакцины
RU2702834C1 (ru) Штамм вируса гриппа A/UNL/HK/2:6/2017 (H5N8) для получения инактивированных и живых гриппозных вакцин
RU2664460C1 (ru) Штамм вируса гриппа A/Shanghai/HK/6:2/2013 (H7N9) для получения инактивированных и живых гриппозных вакцин
RU2757396C1 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Гонконг/2017/5584 (линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
RU2757397C1 (ru) Реассортантный штамм вируса гриппа В/60/Вашингтон/2019/3676 (линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
Megahed et al. Evaluation of different Newcastle disease virus vaccination regimes against challenge with recently isolated genotype vii virus from Egypt.
RU2653388C1 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
RU2793387C1 (ru) Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Гуандун-Маонань/2019/211 (H1N1)pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей