RU2759831C1 - Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex - Google Patents
Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex Download PDFInfo
- Publication number
- RU2759831C1 RU2759831C1 RU2021115742A RU2021115742A RU2759831C1 RU 2759831 C1 RU2759831 C1 RU 2759831C1 RU 2021115742 A RU2021115742 A RU 2021115742A RU 2021115742 A RU2021115742 A RU 2021115742A RU 2759831 C1 RU2759831 C1 RU 2759831C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- burkholderia cepacia
- microorganisms
- iron
- cepacia complex
- nutrient medium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для первичного посева клинического материала и культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex. Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia содержит агар Мюллера-Хинтона, железа (III) гидроксида полимальтозата и селективную добавку и в заданных количествах. При этом селективная добавка содержит полимиксин Б, гентамицин и тиканциллин в заданных количествах. Изобретение позволяет улучшить микробиологическую диагностику инфекционных осложнений, вызванных микроорганизмами из Burkholderia cepacia complex при первичном посеве из клинического материала от пациентов с муковисцидозом. 2 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологии, и может быть использовано для первичного посева клинического материала и культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex.
Уровень техники
Микроорганизмы из Burkholderia cepacia complex относятся к неферментирующим грамотрицательным бактериями, отличаются культуральными и биологическими свойствами, а также имеют доказанное клиническое значение в развитии инфекционно-воспалительных процессов в бронхолегочной системе у пациентов с муковисцидозом и являются причиной тяжелого осложнения - «цепация-синдрома». Данное состояния сопровождается некротизирующей пневмонией, лихорадкой, сепсисом и может развиться в течение нескольких часов [R. Lord, A.M. Jones, A. Horsley. Antibiotic treatment for Burkholderia cepacia complex in people with cystic fibrosis experiencing a pulmonary exacerbation. Cochrane Database of Systematic Reviews 2020, Issue 4]. Однако культивирование, идентификация и определение чувствительности к антимикробным препаратам микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex требует особых условий с затратой длительного периода времени - до нескольких суток. В связи с этим необходима среда для первичного посева клинического материала от пациентов с муковисцидозом с целью ускоренного выделения микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex. Известно, что одним из незаменимых факторов роста и метаболизма микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex является железо, которое данные бактерии приобретают из внешней среды с помощью специфических механизмов получения и усвоения, в частности из физиологического депо железа в клетках человека - белка ферритина. [А.Т. Butt, M.S. Thomas. Iron Acquisition Mechanisms and Their Role in the Virulence of Burkholderia Species. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 2017; 7:460.]. В связи с этим нами предложено использование железа (III) гидроксида полимальтозата, имеющего сходную структуру с ферритином в качестве одного из дополнительных компонентов питательной среды.
Известно использование для первичного посева клинического материала от пациентов с муковисцидозом с целью выявления микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex селективной среды OFPBL Agar - оксидазно/ферментативный-полимиксин-бацитрацин-лактозный агар. [Руководство по микробиологической диагностике инфекций дыхательных путей у пациентов с муковисцидозом / С.В. Поликарпова, С.В. Жилина, О.В. Кондратенко и др. - М. - Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2019, - 128 с.]. Данный способ принимается за прототип.
Недостатком использования данной питательной среды является длительное срок культивирования микроорганизмов, продолжающийся не менее 5 суток.
В научной литературе имеются данные о возможности культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex с использованием 5% кровяного агара [М.Ю. Чернуха, И.А. Шагинян, В.Г. Жуховицкий и др. Применение системы MALDI Biotyper и алгоритма микробиологической диагностики для идентификации неферментирующих микроорганизмов, выделенных из дыхательных путей у больных муковисцидозом. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2017. - Т. 17 - №4. - С. 327-334].
Недостатком использования данной питательной среды является то, что 5% кровяной агар не является селективной средой, а, следовательно, при работе с нестерильным в норме клиническим материалом возможно подавление роста микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex другими быстрорастущими микроорганизмами, что может привести к ложноотрицательному результату исследования.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения улучшение микробиологической диагностики инфекционных осложнений, вызванных микроорганизмами из Burkholderia cepacia complex при первичном посеве из клинического материала от пациентов с муковисцидозом.
Это достигается тем, что в отличие от известных питательных сред 38 г агара Мюллера-Хинтона растворяется в 1000 мл воды, размешивается до растворения и нагревается до кипения. После этого стерилизуется автоклавированием 15 минут при температуре 121°С и охлаждается до 45-50°С. Далее добавляется селективная добавка, содержащая 150000 ЕД полимиксина Б, 5 мг гентамицина и 100 мг тиканциллина из расчета на 1000 мл готовой среды. Затем дополнительно вносится 285,76 мг железа (III) гидроксида полимальтозата, что соответствует 80 мг железа.
Технический результат изобретения заключается в том, что заявленная питательная среда позволяет выделить микроорганизмы из Burkholderia cepacia complex при первичном посеве материала от пациентов с муковисцидозом в более короткие сроки - за 24-48 часов.
Осуществление изобретения
Приготовление предложенной питательной среды заключается в следующем: 38 г агара Мюллера-Хинтона растворяется в 1000 мл воды, размешивается до растворения и нагревается до кипения. После этого стерилизуется автоклавированием 15 минут при температуре 121°С и охлаждается до 45-50°С. Далее добавляется селективная добавка, содержащая 150000 ЕД полимиксина Б, 5 мг гентамицина и 100 мг тиканциллина из расчета на 1000 мл готовой среды. Затем дополнительно вносится 285,76 мг железа (III) гидроксида полимальтозата, что соответствует 80 мг железа.
Предлагаемая питательная среда позволяет сократить сроки культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex до 24-48 часов.
Использование предлагаемой питательной среды не требует применения дорогостоящего оборудования, позволяет выделить микроорганизмы из Burkholderia cepacia complex при первичном посеве клинического материала от пациентов с муковисцидозом.
Сущность применения заявленной питательной среды поясняется следующими результатами оценки продуктивности предлагаемой питательной среды в сравнении со средами с содержанием других концентраций железа (III) гидроксида полимальтозата в пересчете на железо. Продуктивность - количество клеток, давших видимый рост, выраженный в процентах по трем показателям: менее 50%, 50-69%, 70% и более от количества клеток в инокулюме. Для оценки продуктивности сравнивался рост 50 штаммов микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex на питательных средах с добавлением железа (III) гидроксида полимальтозата в концентрациях, соответствующих 10 мг, 20 мг, 40 мг, 80 мг и 120 мг железа. В качестве контрольной среды использовался OFPBL Agar без добавления железа (III) гидроксида полимальтозата. Показатели продуктивности питательной среды на первые сутки культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex представлены в таблице 1. Показатели продуктивности питательной среды на вторые сутки культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex представлены в таблице 2. После первых суток культивирования статистически достоверные различия (р<0,01, при расчете критерия χ2) были получены по предлагаемой питательной среде с концентрацией железа 80 мг по отношению к OFPBL Agar без добавки, содержащей железо и питательным средам с концентрацией железа 20 мг и 40 мг. На вторые сутки культивирования статистически достоверные различия были получены по предлагаемой питательной среде с концентрацией железа 80 мг по отношению к OFPBL Agar без добавки, содержащей железо и питательным средам с концентрацией железа 10 мг. Полученные сопоставимые результаты для концентраций 80 и 120 мг железа позволяют использовать добавку в меньшей из тестируемых концентраций для достижения лучшего результата по показателю продуктивности.
Claims (1)
- Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex, приготавливаемая путем растворения 38 г агара Мюллера-Хинтона в 1000 мл воды, размешивания до растворения и нагревания до кипения с последующим автоклавированием 15 минут при температуре 121°С и охлаждением до 45-50°С, ОТЛИЧАЮЩАЯСЯ добавлением селективной добавки, содержащей 150000 ЕД полимиксина Б, 5 мг гентамицина и 100 мг тиканциллина из расчета на 1000 мл готовой среды с дополнительным внесением 285,76 мг железа (III) гидроксида полимальтозата, что соответствует 80 мг железа.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021115742A RU2759831C1 (ru) | 2021-05-31 | 2021-05-31 | Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021115742A RU2759831C1 (ru) | 2021-05-31 | 2021-05-31 | Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2759831C1 true RU2759831C1 (ru) | 2021-11-18 |
Family
ID=78607487
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021115742A RU2759831C1 (ru) | 2021-05-31 | 2021-05-31 | Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2759831C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2779641C1 (ru) * | 2022-03-01 | 2022-09-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ первичного посева биоматериала, выделенного из полости рта пациентов с муковисцидозом при стоматологическом обследовании |
| CN115491407A (zh) * | 2022-11-17 | 2022-12-20 | 山东格研生物技术有限公司 | 一种洋葱伯克霍尔德氏菌显色培养基及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2281501C1 (ru) * | 2004-11-22 | 2006-08-10 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОБНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ Burkholderia cepacia И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ЕГО ОТ ДРУГИХ ВИДОВ БУРКХОЛЬДЕРИЙ И ПСЕВДОМОНАД |
| RU2566555C1 (ru) * | 2014-10-20 | 2015-10-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии паразитологии" (ФБУН РостовНИИ микробиологии и паразитологии) | ШТАММ Burkholderia cepacia B-7518, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К Burkholderia cepacia В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ |
-
2021
- 2021-05-31 RU RU2021115742A patent/RU2759831C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2281501C1 (ru) * | 2004-11-22 | 2006-08-10 | Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт | СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОБНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ВНУТРИБОЛЬНИЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ Burkholderia cepacia И ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ЕГО ОТ ДРУГИХ ВИДОВ БУРКХОЛЬДЕРИЙ И ПСЕВДОМОНАД |
| RU2566555C1 (ru) * | 2014-10-20 | 2015-10-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии паразитологии" (ФБУН РостовНИИ микробиологии и паразитологии) | ШТАММ Burkholderia cepacia B-7518, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К Burkholderia cepacia В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| ANDREAS O WAGNER, RUDOLF MARKT I et.al. Medium Preparation for the Cultivation of Microorganisms under Strictly Anaerobic/Anoxic Conditions, Journal of Visualized Experiments, 2019, august, (150), p. 1-9. * |
| ANDREAS O WAGNER, RUDOLF MARKT I et.al. Medium Preparation for the Cultivation of Microorganisms under Strictly Anaerobic/Anoxic Conditions, Journal of Visualized Experiments, 2019, august, (150), p. 1-9. GOVAN J.R.W. et al. Burkholderia cepacia: medical, taxonomic and ecological issues, J. Med. Microbiol., 1996, vol.45, p.395-407. * |
| GOVAN J.R.W. et al. Burkholderia cepacia: medical, taxonomic and ecological issues, J. Med. Microbiol., 1996, vol.45, p.395-407. * |
| Методические указания. Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чума, сибирская язва, холера, туляремия, бруцеллез, сап, мелиоидоз) к антибактериальным препаратам, 2010, М, с. 19-35. * |
| ЧЕРНУХА М.Ю., ШАГИНЯН И.А. и др. Применение системы MALDI Biotyper и алгоритма микробиологической диагностики для идентификации неферментирующих микроорганизмов, выделенных из дыхательных путей у больных муковисцидозом. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2017. - Т. 17. МУК 4.2.2495-09. * |
| ЧЕРНУХА М.Ю., ШАГИНЯН И.А. и др. Применение системы MALDI Biotyper и алгоритма микробиологической диагностики для идентификации неферментирующих микроорганизмов, выделенных из дыхательных путей у больных муковисцидозом. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2017. - Т. 17. МУК 4.2.2495-09. Методические указания. Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чума, сибирская язва, холера, туляремия, бруцеллез, сап, мелиоидоз) к антибактериальным препаратам, 2010, М, с. 19-35. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2779641C1 (ru) * | 2022-03-01 | 2022-09-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ первичного посева биоматериала, выделенного из полости рта пациентов с муковисцидозом при стоматологическом обследовании |
| CN115491407A (zh) * | 2022-11-17 | 2022-12-20 | 山东格研生物技术有限公司 | 一种洋葱伯克霍尔德氏菌显色培养基及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2759831C1 (ru) | Питательная среда для культивирования микроорганизмов из Burkholderia cepacia complex | |
| Burn | Postmortem bacteriology | |
| Hristeva et al. | Value of cerebrospinal fluid examination in the diagnosis of meningitis in the newborn. | |
| Dheyab et al. | Study of virulence factors in urease-positive bacteria isolated from urinary tract infections clinical specimens | |
| RU2455351C1 (ru) | Питательная среда для культивирования дифтерийных микробов | |
| RU2388489C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2569456C1 (ru) | Питательная среда для выявления возбудителя некробактериоза | |
| CN112680499A (zh) | 一种厌氧微生物的体外检测试剂盒 | |
| RU2538158C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
| RU2660708C1 (ru) | Способ получения питательной среды для выделения гемокультуры при диагностике инфекции кровотока | |
| US20110256583A1 (en) | Method and medium for accelerating target analyte growth in a test sample | |
| RU2415944C2 (ru) | Способ выявления микобактерий туберкулеза из резецированной ткани легкого | |
| Wang et al. | Empyema caused by Anaeroglobus geminates, a case report with literature review | |
| Hanoon et al. | Molecular detection of Pseudomonas Aeruginosa isolated from chicken cans in the markets of Al-Muthanna Province | |
| RU2738858C1 (ru) | Способ выделения некультивируемых форм стафилококков | |
| RU2460801C1 (ru) | Способ выявления санитарно-показательных бактерий и стартовых культур в мясных продуктах | |
| RU2266956C2 (ru) | Питательная среда для выделения бруцелл | |
| RU2709136C1 (ru) | Питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa | |
| Désidéri-Vaillant et al. | Staphylococcus simulans osteitis in a diabetic patient | |
| RU2704854C1 (ru) | Дифференциально-элективная питательная среда для выделения клебсиелл | |
| Nielsen et al. | Clostridial infection in the urinary tract: report of a case of bladder infection due to Clostridium welchii | |
| US20110275114A1 (en) | Method and medium for detecting the presence or absence of methicillin resistant staphylococcus aureus (mrsa) in a test sample | |
| Khamees et al. | The role of Lactic acid bacteria in combination with conventional antibiotics against bacterial species isolated from genital tract of cattle | |
| Vlad et al. | Phenotypic characterization of gram-positive cocci strains isolated from infections localized in the oro-maxillo-facial sphere | |
| Burton | GRAM–NEGATIVE BACTEREMIA IN COLONIC AND RECTAL SURGERY |