RU2759662C2 - ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ - Google Patents
ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2759662C2 RU2759662C2 RU2021121501A RU2021121501A RU2759662C2 RU 2759662 C2 RU2759662 C2 RU 2759662C2 RU 2021121501 A RU2021121501 A RU 2021121501A RU 2021121501 A RU2021121501 A RU 2021121501A RU 2759662 C2 RU2759662 C2 RU 2759662C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- petroleum
- strain
- degradans
- products
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Production Of Liquid Hydrocarbon Mixture For Refining Petroleum (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии. Штамм бактерий Rhodococcus degradans Н33, обладающий утилизирующей способностью по отношению к нефти и нефтепродуктам, депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина Российской академии наук (ИБФМ РАН) под регистрационным номером ВКМ Ac-2901D и может быть использован при биологической очистке воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Изобретение позволяет повысить степень очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов. 3 пр.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии, представляет собой новый бактериальный штамм Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D - деструктор нефти и нефтепродуктов, который может быть использован для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов.
В настоящее время загрязнение окружающей среды нефтью и нефтепродуктами является одной из актуальных проблем. При этом остается открытым вопрос их биологической деструкции при помощи микроорганизмов, способных окислять нефтяные углеводороды в широком диапазоне рН 4-11 (так как многие нефтезагрязнения в Западной Сибири локализованы в кислых средах, а для загрязнений южных регионов России характерны щелочные значения рН) [1].
Известны штаммы Rhodococcus erythropolis, Rhodococcus luteus, Micrococcus flavus [2], которые осуществляют деструкцию нефтепродуктов в ассоциации, что увеличивает затраты на изготовление конечного препарата.
Известен штамм Bacillus species 739 [3] и полученный на его основе бактериальный препарат «Бациспецин» [4], используемый для рекультивации почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами.
Недостатком штамма является его низкая эффективность, особенно в условиях высокого содержания нефти и нефтепродуктов в углеводородсодержащем субстрате, отсутствует информация о рН - стабильности бактериальной культуры и ее рабочем диапазоне рН.
Большая эффективность в условиях низких положительных температур установлена для штамма Rhodococcus erythropolis Е-17 [5] при биодеградации нефти, без указания рабочего диапазона рН утилизации нефтепродуктов.
Наиболее близким аналогом является штамм Rhodococcus jialingiae Б-М-1 - деструктор нефтяных углеводородов, депонированный во Всероссийскую коллекцию промышленных микроорганизмов под номером Ас-1967 [6], жизнеспособный до значения рН 9. Недостатком данного штамма является отсутствие информации о диапазоне рН, в котором проявляется его нефтеокисляющая способность.
Целью изобретения является расширение номенклатуры штаммов нефтедеструкторов, обладающих утилизирующей способностью по отношению к нефти и нефтепродуктам в широком диапазоне рН (от 4,5 до 11).
Полученный штамм выделен из нефтезагрязненной почвы Республики Башкортостан.
Полученный штамм депонирован во Всероссийскую коллекцию микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина Российской академии наук под регистрационным номером ВКМ Ac-2901D и характеризуется следующими признаками:
Клетки штамма - подвижные палочки изменчивые по Граму, встречающиеся преимущественно парами и нерегулярными скоплениями, не спорообразующие. Небольшие непрозрачные, круглые колонии с ровными краями с бледно-лососево-розовым пигментом диаметром 1,0-2,5 мм (на питательном агаре). Оптимальная температура роста 26-28°С. Не растут при 37°С. Рост при температурах от 15 до 30°С, рН от 4,5 до 11 и концентрации хлорида натрия до 7%. Положительные признаки: каталаза, оксидаза, гидролиз желатина и казеина, утилизация цитрата, индола, фосфатазную активность, образование H2S, использует малонат в качестве источника углерода. Отрицательные признаки: активности лизин-декарбоксилазы, уреазы, лецитиназы, нитратредуктазы, утилизация крахмала.
Сравнительный анализ нуклеотидной последовательности гена кодирующего 16S рРНК с известными структурами из GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank) позволяет утверждать, что микроорганизм относится к виду Rhodococcus degradans (обнаружено 100% сходства с типовым штаммом вида Rhodococcus degradans ССМ 4446).
Хранится на косяках МПА и в лиофилизированном состоянии при температуре +4°С.
Пример 1. Приготовление препарата на основе микробных клеток Rhodococcus degradans Н33 Ас-2901D.
Культуру Rhodococcus degradans Н33 выращивают на питательной среде следующего состава, г/л: Na2CO3 - 0,1; CaCl2 - 0,01; MnSO4⋅7H2O - 0,02; FeSO4⋅7H2O - 0,02; NaH2PO4 - 1,5; K2HPO4 - 1,0; MgSO4⋅7H2O - 0,2; NH4NO3 - 2,0; пептон - 1,0; дизельное топливо - 10; вода дистиллированная - 1000 мл при температуре 26±2°С в течение 72-96 часов. Полученную нативную культуру, содержащую не менее 1⋅109 живых микробов в 1 см3, используют в качестве биологического препарата для оценки деструктивной активности в отношении нефти и нефтепродуктов при различных значениях рН.
Пример 2. Исследование нефтеокисляющей активности штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D в отношении нефти и нефтепродуктов при загрязнении воды при различных значениях рН.
Для определения биодеградационной активности штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D в отношении нефти, дизельного топлива и мазута в воде при кислом (рН 4,5), нейтральном (рН 6,86) и щелочном (рН 11,0) значениях рН готовят минимальную солевую среду (пропись среды изложена в примере 1), разливают в лабораторные колбы емкостью 250 см по 100 см и доводят до нужной кислотности. Затем в отдельные колбы вносят нефть, дизельное топливо, мазут в количестве 10,0 г/л среды и нативную культуру штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D (по примеру 1) в количестве, обеспечивающем конечную биологическую концентрацию в смеси 1⋅107 живых микробных клеток. В качестве контроля параллельно ставят аналогичные пробы без внесения микробной культуры. Затем пробы выдерживают на термостатируемой качалке при температуре 26±2°С и постоянном перемешивании 180 об/мин в течение 7 сут.
Концентрацию нефтепродуктов в пробах воды определяют с использованием анализатора жидкости Флюорат-02 согласно ПНДФ 14.1 2 4.128-98 Методика измерений массовой концентрации нефтепродуктов в пробах природных, питьевых, сточных вод на анализаторе жидкости Флюорат-02 (М 01-05-2012).
Утилизация (нефтеокисляющая активность) составила:
при рН 4,5 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 54,5%, 58,0% и 32,6% (в контроле менее 1,0%);
при рН 6,86 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 98,6%, 99,6% и 68,6% (в контроле менее 1,8%);
при рН 11,0 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 88,6%), 92,2% и 60,3% (в контроле менее 1,0%).
Пример 3. Исследование нефтеокисляющей активности штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D в отношении нефти и нефтепродуктов при загрязнении почвы при различных значениях рН.
Определение биодеградационной активности штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D в отношении нефти, дизельного топлива и мазута при загрязнении почвы при кислом (рН 4,5), нейтральном (рН 6,86) и щелочном (рН 11,0) значениях рН проводят следующим образом. Доводят рН почвы с остаточной влажностью 50-60%) до нужной кислотности и фасуют по 1 кг в сосуды емкостью 1,5 дм. Затем в отдельные сосуды вносят нефть, дизельное топливо, мазут в количестве 80 г/кг почвы и нативную культуру штамма Rhodococcus degradans Н33 Ac-2901D (по примеру 1) из расчета конечной концентрации 1⋅107 живых микробных клеток на 1 г загрязненной почвы. Приготовленные пробы выдерживают при температуре 22±2°С в течение 2 месяцев. В качестве контроля параллельно ставят аналогичные пробы без внесения микробной культуры. Остаточную влажность поддерживают орошением водопроводной водой на протяжении срока наблюдения.
Концентрацию нефтепродуктов в пробах почвы определяют в соответствии с ПНД Ф 16.1.41-2004 «Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в пробах почв гравиметрическим методом».
Утилизация (нефтеокисляющая активность) составила:
при рН 4,5 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 65,8%, 68,9% и 39,5% (в контроле менее 2,0%);
при рН 6,86 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 87,5%, 95,6% и 58,4% (в контроле менее 2,8%);
при рН 11,0 в отношении нефти, дизельного топлива и мазута соответственно 80,2%, 82,5% и 50,4% (в контроле менее 2,0%).
Таким образом, преимуществом заявляемого штамма является то, что он обладает высокой утилизирующей способностью по отношению как к нефти, так и к нефтепродуктам в относительно короткие сроки (от 7 суток до 2 месяцев), в широком диапазоне рН среды (от 4,5 до 11,0), который может быть использован для очистки почв и воды от загрязнений нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, мазут).
Список литературы
1. Ветрова А.А., Иванова А.А., Филонов А.Е., Забелин В.А., Гафаров А.Б., Соколов С.Л., Нечаева И.А., Пунтус И.Ф., Воронин A.M. Биодеструкция нефти отдельными штаммами и принципы составления микробных консорциумов для очистки окружающей среды от углеводородов нефти // Изв. Тульского гос. ун-та. Естественные науки. 2013. Вып. 2, ч. 1. С. 241-257.
2. Патент СССР №1493666, кл. C12N 1/20, C02F 3/34, C02F 101/32, C02F 103/06, C12R 1/01, C12R 1/27, 1989.
3. Авторское свидетельство СССР №1743019, кл. С12N 1/20, 1989.
4. Патент РФ №2077397, кл. C09K 3/32, 1997.
5. Патент РФ №2019527, кл. C02F 3/34, 1994.
6. Патент РФ №2618838, кл. C12N 1/20, В09С 1/10, C02F 3/34, C12R 1/01, 2016.
Claims (1)
- Штамм бактерий Rhodococcus degradans ВКМ Ac-2901D - деструктор нефти и нефтепродуктов.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021121501A RU2759662C2 (ru) | 2021-07-19 | 2021-07-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2021121501A RU2759662C2 (ru) | 2021-07-19 | 2021-07-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021121501A RU2021121501A (ru) | 2021-09-03 |
RU2021121501A3 RU2021121501A3 (ru) | 2021-10-27 |
RU2759662C2 true RU2759662C2 (ru) | 2021-11-16 |
Family
ID=77663123
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2021121501A RU2759662C2 (ru) | 2021-07-19 | 2021-07-19 | ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2759662C2 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2133769C1 (ru) * | 1998-03-25 | 1999-07-27 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Штамм бактерий rhodococcus species mfn, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
JP2007135425A (ja) * | 2005-11-15 | 2007-06-07 | Ritsumeikan | 実汚染土壌を効率よく浄化する微生物および浄化方法 |
RU2518349C1 (ru) * | 2013-04-11 | 2014-06-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "КубГТУ") | ШТАММ Rhodococcus sp.-ДЕСТРУКТОР НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ |
RU2618838C1 (ru) * | 2016-02-02 | 2017-05-11 | Общество с ограниченной ответственностью "БИО-МАРКЕТ" | Штамм бактерий Rhodococcus jialingiae Б-М-1 ВКПМ Ас-1967 - деструктор нефти и нефтепродуктов |
-
2021
- 2021-07-19 RU RU2021121501A patent/RU2759662C2/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2133769C1 (ru) * | 1998-03-25 | 1999-07-27 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Штамм бактерий rhodococcus species mfn, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
JP2007135425A (ja) * | 2005-11-15 | 2007-06-07 | Ritsumeikan | 実汚染土壌を効率よく浄化する微生物および浄化方法 |
RU2518349C1 (ru) * | 2013-04-11 | 2014-06-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "КубГТУ") | ШТАММ Rhodococcus sp.-ДЕСТРУКТОР НЕФТЯНЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ |
RU2618838C1 (ru) * | 2016-02-02 | 2017-05-11 | Общество с ограниченной ответственностью "БИО-МАРКЕТ" | Штамм бактерий Rhodococcus jialingiae Б-М-1 ВКПМ Ас-1967 - деструктор нефти и нефтепродуктов |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2021121501A (ru) | 2021-09-03 |
RU2021121501A3 (ru) | 2021-10-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN113215033B (zh) | 一种磺胺类抗生素降解菌及其应用 | |
Wang et al. | Isolation and characterization of a nitrobenzene-degrading bacterium Klebsiella ornithinolytica NB1 from aerobic granular sludge | |
Sankaran et al. | Bacterial assisted treatment of anaerobically digested distillery wastewater | |
CN113462622A (zh) | 一株高效降解多种芳香类污染物的假单胞菌及其应用 | |
RU2300561C1 (ru) | Штамм rhodococcus globerulus h-42 для разложения нефти и нефтепродуктов | |
RU2759662C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus degradans H33 Ас-2901D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
KR101475589B1 (ko) | 연안 갯벌에서 분리 동정한 균주 및 이를 이용한 갯벌 유기물 정화제 | |
EA043191B1 (ru) | Штамм бактерий rhodococcus degradans h33 ac-2901d - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2257409C1 (ru) | Штамм rhodococcus erythropolis для разложения нефти и нефтепродуктов | |
RU2661679C9 (ru) | Способ очистки сточных вод нефтеперерабатывающих и нефтехимических производств от фенола | |
CN112574918B (zh) | 一种氨氮降解菌、微生物菌剂及其应用 | |
RU2624052C2 (ru) | Штамм Arthrobacter rhombi ARC 8 ВКПМ Ас-1987 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
RU2142997C1 (ru) | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов | |
Kumar et al. | Utilization of petroleum hydrocarbons by Micrococcus and Streptococcus spp. isolated from contaminated site | |
RU2257410C1 (ru) | Штамм rhodococcus erythropolis для разложения нефти и нефтепродуктов | |
RU2299239C1 (ru) | Штамм rhodococcus globerulus для разложения нефти и нефтепродуктов | |
RU2142996C1 (ru) | Штамм arthrobacter sp. для разложения сырой нефти и нефтепродуктов | |
KR101898660B1 (ko) | 바실러스 리케니포미스 sn1 균주 및 이를 포함하는 친환경음식물쓰레기처리제제 | |
RU2660196C1 (ru) | Биопрепарат для очистки сточных вод от масложировых загрязнений | |
CN115216425B (zh) | 一株尼泊尔金黄杆菌及其在降解塑料中的应用 | |
RU2697381C1 (ru) | Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений | |
CN115029275B (zh) | 一种氯苯降解菌及其应用 | |
RU2697278C1 (ru) | Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений | |
RU2697377C1 (ru) | Микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений | |
JP3588613B2 (ja) | 新規微生物及びその微生物を用いた有機性固形物の処理方法 |