RU2749614C1 - Method for producing rootstock material (l-2) in vitro - Google Patents

Method for producing rootstock material (l-2) in vitro Download PDF

Info

Publication number
RU2749614C1
RU2749614C1 RU2020121705A RU2020121705A RU2749614C1 RU 2749614 C1 RU2749614 C1 RU 2749614C1 RU 2020121705 A RU2020121705 A RU 2020121705A RU 2020121705 A RU2020121705 A RU 2020121705A RU 2749614 C1 RU2749614 C1 RU 2749614C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nutrient medium
plants
agar
salts
chelate
Prior art date
Application number
RU2020121705A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ибрагим Мусаевич Баматов
Джабраил Мусаевич Баматов
Магомед Маулаевич Арсанов
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Чеченский государственный университет"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Чеченский государственный университет" filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Чеченский государственный университет"
Priority to RU2020121705A priority Critical patent/RU2749614C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2749614C1 publication Critical patent/RU2749614C1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: invention relates to the field of biotechnology. The invention is a method for producing rootstock material (L-2) in vitro, grafting test-tube plants and planting single-node cuttings on an agar nutrient medium containing macro- and microelements and vitamins based on the prescription of the nutrient medium, Fe-chelate, agar-agar, sucrose, while a high concentration of salts is added to the nutrient medium (Chelate - Fe of 50 mg / l and Ca (NO3)2 of 1000 mg / l) and for plant activity the plants are transplanted onto a nutrient medium containing 1 mg of 6 BAP and 0.05 g / l of succinic acid, while the concentration of micro-salts: ZnSO4 * 7H2O - 4.3 mg / l and H3BO3 - 3.1 mg / l, the calcium source is also changed in the form (from CaCl2 * 2H2O to Ca (NO3)2 * 4H2O), the transplant is carried out after 3 weeks, during reproduction, special attention is paid to the vitreousness or super-water content of tissues, while the optimal conditions for the cultivation of L-2 are: temperature of 22-26 degrees, illumination of 2500-5000 lux with a 16-hour photoperiod.
EFFECT: invention makes it possible to increase the yield of plants up to 70%.
1 cl, 3 tbl

Description

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к биотехнологии, и может быть использовано в питомниководстве для массового производства оздоровленного посадочного материала плодовых (косточковых) культур вишни (Л-2).The invention relates to the field of agriculture, in particular to biotechnology, and can be used in nursery for mass production of healthy planting material for fruit (stone fruit) cherry crops (L-2).

Изобретение представляет собой способ получения подбойного материала (Л-2) в условиях in vitro, черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу, при этом в питательную среду добавляют высокую концентрацию солей (Хелат - Fe 50 мг/л и Ca(NO3)2 1000 мг/л) и для растительной активности растения пересаживают на питательную среду содержанием 1 мг 6 БАП и 0,05 г/л янтарной кислоты, при этом концентрация микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3 ВО3 - 3.1 мг/л, источник кальция тоже изменен в форме (от CaCl2*2H2O на Ca(NO3)2*4H2O), пересадку проводят через 3 недели, при размножении особое внимание уделяют стекловидности или сверховодненности тканей, при этом оптимальные условия культивирования Л-2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2500-5000 лк, при 16-часовом фотопериоде.The invention is a method for producing a hammer material (L-2) in vitro, grafting test-tube plants and planting single-node cuttings on an agar nutrient medium containing macro- and microelements and vitamins based on the prescription of the nutrient medium, Fe-chelate, agar-agar, sucrose, while a high concentration of salts is added to the nutrient medium (Chelate - Fe 50 mg / l and Ca (NO 3 ) 2 1000 mg / l) and for plant activity the plants are transplanted onto a nutrient medium containing 1 mg of 6 BAP and 0.05 g / l of succinic acid, while the concentration of micro-salts: ZnSO 4 * 7H 2 O - 4.3 mg / l and Н3 ВО3 - 3.1 mg / l, the calcium source is also changed in the form (from CaCl 2 * 2H 2 O to Ca (NO 3 ) 2 * 4H 2 O), the transplant is carried out after 3 weeks, during reproduction, special attention is paid to the vitreousness or super-water content of tissues, while the optimal conditions for the cultivation of L-2 are: temperature 22-26 degrees, illumination 2500-5000 lux, with a 16-hour photoperiod ...

Наиболее близким техническим решением из известных является способ получения оздоровленных цитрусовых растений (в практике плодоводства известно применение БАВ на основе янтарной кислоты для повышения продуктивности и качества плодов черешни, вишни и сахарной свеклы. Л.А. Бадовская, Н.И. Ненько и др. (1997) успешно применяли препарат «Универсальный», состоящий из смеси янтарной кислоты, фумаровой кислот, малеиновой, и 2(5Н)-фуранона (содержание янтарной кислоты не менее 85%), посредством листовой обработки. Однако этот способ имеет следующие недостатки. Процесс приживаемости высаженных эксплантов желает оставлять лучшее - только 1/20 часть (т.е. 5%) приживаются. Приживаемость таких мелких структур также неудовлетворительна. Кроме того, все полученные растения требуют обязательного тестирования, так как до этой процедуры их фитосанитарный статус неизвестен.The closest technical solution of the known is a method of obtaining healthy citrus plants (in the practice of fruit growing, the use of biologically active substances based on succinic acid is known to increase the productivity and quality of sweet cherries, cherries and sugar beets. L.A. Badovskaya, N.I. Nenko, etc. (1997) successfully used the preparation "Universal", consisting of a mixture of succinic acid, fumaric acid, maleic, and 2 (5H) -furanone (the content of succinic acid is not less than 85%), through sheet processing, however, this method has the following disadvantages. The survival rate of the planted explants wants to keep the best - only 1/20 part (ie 5%) take root. The survival rate of such small structures is also unsatisfactory. In addition, all the plants obtained require mandatory testing, since their phytosanitary status is unknown before this procedure.

Задача изобретения заключается в мультипликации подвойного материала Л-2 в условиях in vitro для массового производства оздоровленного посадочного материала плодовых (косточковых) культур.The objective of the invention is to multiply stock L-2 in vitro for mass production of healthy planting material for fruit (stone fruit) crops.

Поставленная задача решается следующим образом: Первый этап считается завершенным после получения небольшого конгламерата побегов длиной 0,5 - 1,5 см. Для увеличения коэффициента размножения в первых пассажах можно не разделять на отдельные единицы, а переносить на свежую питательную среду целиком. При использовании этого приема величина коэффициента размножения резко возрастает и может достигать 40-60 за пассаж. Содержание цитокининов на первом этапе колеблется от 0,1 до 1 мг/л, ауксинов от 0,001 до 1 мг/л. Полученные побеги пересаживают на питательную среду Мурасиге Скуга с добавлением в среду высокую концентрацию солей (Хелат - Fe 50 мг/л и Са(NO3)2*1000 мг/л) и для растительной активности растения пересаживают на питательную среду содержанием 1 мг 6 БАП и 0,05 г/л янтарной кислоты, уменьшая концентрацию микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3ВО3 - 3.1 мг/л., источник кальция тоже изменен в форме (от CaCl2*2Н2О на Са(NO3)2*4Н2O). Пересадки необходимо проводить через 3 недели. При размножении особое внимание уделяют стекловидности или сверховодненности тканей, что можно определить по характерному блеску культур. Такие культуры выбраковываются, а условия культивирования (содержание агара, цитокининов, соотношение NH4, NO3, колебания температуры) корректируются. Оптимальные условия культивирования Гизелы 5 и ВСЛ 2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2000-5000 лк, при 16-часовом фотопериоде.The task is solved in the following way: The first stage is considered completed after obtaining a small conglamerate of shoots 0.5 - 1.5 cm long. To increase the multiplication factor in the first passages, it is possible not to divide into separate units, but to transfer the whole to a fresh nutrient medium. When using this technique, the magnitude of the multiplication factor increases sharply and can reach 40-60 per passage. The content of cytokinins at the first stage ranges from 0.1 to 1 mg / l, auxins from 0.001 to 1 mg / l. The obtained shoots are transplanted onto a nutrient medium Murashige Skoog with the addition of a high concentration of salts to the medium (Chelate - Fe 50 mg / l and Ca (NO 3 ) 2 * 1000 mg / l) and for plant activity the plants are transplanted onto a nutrient medium containing 1 mg 6 BAP and 0.05 g / l of succinic acid, reducing the concentration of micro-salts: ZnSO 4 * 7H 2 O - 4.3 mg / l and H 3 VO 3 - 3.1 mg / l., the calcium source is also changed in the form (from CaCl 2 * 2H 2 O on Ca (NO 3 ) 2 * 4H 2 O). Transplants must be carried out after 3 weeks. During reproduction, special attention is paid to the vitreousness or super-water content of tissues, which can be determined by the characteristic luster of the cultures. Such cultures are discarded, and the cultivation conditions (agar content, cytokinins, NH 4 , NO 3 ratio, temperature fluctuations) are adjusted. The optimal conditions for the cultivation of Gisela 5 and VSL 2 are: temperature 22-26 degrees, illumination 2000-5000 lux, with a 16-hour photoperiod.

Сравнительный анализ питательных сред:Comparative analysis of culture media:

Figure 00000001
Figure 00000001

Выход растений: не более 10%.Plant yield: no more than 10%.

Figure 00000002
Figure 00000002

Figure 00000003
Figure 00000003

Выход растений не более 20 - 30%.The yield of plants is not more than 20 - 30%.

Figure 00000004
Figure 00000004

Выход растений 70%.The plant yield is 70%.

Claims (1)

Способ получения подвойного материала Л-2 in vitro, включающий черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы, витамины и сахарозу на основе прописи питательной среды Мурасиге и Скуга на первом этапе, полученные побеги пересаживают в питательную среду Мурасиге Скуга с добавлением высокой концентрации солей: Хелат - Fe 50 мг/л и Ca(NO3)2 1000 мг/л, далее растения пересаживают на питательную среду Мурасиге Скуга с содержанием 1 мг 6 БАП и 0,05 г/л янтарной кислоты, при этом концентрация микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3ВО3 - 3.1 мг/л, источник кальция Ca(NO3)2*4H2O - 100 мг/л, пересадки проводят через 3 недели, при этом оптимальными условиями культивирования Л-2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2500-5000 лк, при 16-часовом фотопериоде.A method for obtaining rootstock material L-2 in vitro, including grafting test-tube plants and planting single-node cuttings on an agar nutrient medium containing macro- and microelements, vitamins and sucrose based on the prescription of the Murashige and Skoog nutrient medium at the first stage, the resulting shoots are transplanted into the nutrient medium Murashige Skooga with the addition of a high concentration of salts: Chelate - Fe 50 mg / l and Ca (NO 3 ) 2 1000 mg / l, then the plants are transplanted onto a nutrient medium Murashige Skoga containing 1 mg of 6 BAP and 0.05 g / l of succinic acid , while the concentration of micro-salts: ZnSO 4 * 7H 2 O - 4.3 mg / l and H 3 VO 3 - 3.1 mg / l, calcium source Ca (NO 3 ) 2 * 4H 2 O - 100 mg / l, transplants are carried out after 3 weeks, while the optimal conditions for the cultivation of L-2 are: temperature 22-26 degrees, illumination 2500-5000 lux, with a 16-hour photoperiod.
RU2020121705A 2020-06-25 2020-06-25 Method for producing rootstock material (l-2) in vitro RU2749614C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020121705A RU2749614C1 (en) 2020-06-25 2020-06-25 Method for producing rootstock material (l-2) in vitro

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020121705A RU2749614C1 (en) 2020-06-25 2020-06-25 Method for producing rootstock material (l-2) in vitro

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2749614C1 true RU2749614C1 (en) 2021-06-16

Family

ID=76377446

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020121705A RU2749614C1 (en) 2020-06-25 2020-06-25 Method for producing rootstock material (l-2) in vitro

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2749614C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2783895C1 (en) * 2021-11-10 2022-11-21 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Чеченский Государственный Университет Имени Ахмата Абдулхамидовича Кадырова" Method for producing rootstock material l-2 in vitro

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A. A. Batukaev Improvement of the technology of accelerated propagation of grapes by the in vitro method and the use of growth regulators in vitro and in vivo, abstract of dissertation, Moscow, 1999. *
MURASHIGE T. et al. Murashige1962Revised.Pdf, Physiol.Plant, 1962, T.15, p.474-497. *
S.V. SIBIRYATKIN. Some aspects of introducing new clonal rootstocks for stone fruit cultures into in vitro culture, Scientific journal KubGAU, N131 (07), 2017, pp. 1-3. *
СИБИРЯТКИН С.В. Некоторые аспекты ввода в культуру in vitro новых клоновых подвоев для косточковых культур, Научный журнал КубГАУ, N131 (07), 2017, с.1-3. БАТУКАЕВ А.А. Совершенствование технологии ускоренного размножения винограда методом in vitro и применение регуляторов роста в условиях in vitro и in vivo, автореферат диссертации, Москва, 1999. MURASHIGE T. et al. Murashige1962Revised.Pdf, Physiol.Plant, 1962, T.15, p.474-497. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2783895C1 (en) * 2021-11-10 2022-11-21 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Чеченский Государственный Университет Имени Ахмата Абдулхамидовича Кадырова" Method for producing rootstock material l-2 in vitro

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Masteller et al. The growth of and organ formation from callus tissue of sorghum
Boxus The production of strawberry plants by in vitro micro-propagation
Al et al. In vitro propagation of Lonicera kamtschatica
Zapata et al. Callus formation from leaf mesophyll photoplasts of three Lycopersicon species: L. esculentum, CV Walter, L. pimpinillifolium and L. hirsutum, F. glabratum
Snir In vitro propagation of ‘Canino’apricot
EP0525914A1 (en) Synthetic seed
RU2749614C1 (en) Method for producing rootstock material (l-2) in vitro
RU2729832C1 (en) Method of producing gisela 5 and afl-2 rootstock in in vitro
EP0223624B1 (en) Process for cultivating water hyacinths, plants and their uses
JP4278183B2 (en) Sugarcane production
RU2783895C1 (en) Method for producing rootstock material l-2 in vitro
RU2748968C1 (en) Optimized nutrient medium for rootstock material vsv-1, vsl-1 and vsl-2 in vitro
Sahin-Demirbag et al. In vitro plant regeneration from Hungarian vetch (Vicia pannonica Crantz) using cotyledonary node explants
Maki et al. Time course study of ancymidol for micropropagation of Hosta in a liquid culture system
RU2732450C1 (en) Method for clonal microreproduction of western serviceberry varieties (amelanchier alnifolia (nutt_) nutt_ ex m_roem_)
Yildirim et al. In vitro embryo culture of apricot, Prunus armeniaca L. cv. Hacihaliloglu
FR2510354A1 (en) PROCESS FOR THE PREPARATION OF THE PROPAGATION MATERIAL OF DIGITAL (DIGITALIS LANATA EHRH.) IN A CULTURE OF TISSUE
RU2732230C1 (en) Method of rooted stock material vsl-2 in vitro
JPH0463527A (en) Production of seedling by clone proliferation
Saha et al. Development of an effective in vitro Regeneration protocol for BARI Mash 2 (Vigna mungo L.) an important legume crop in Bangladesh
RU2798519C1 (en) Method for accelerated production of healthy virus-free plants of berry crops in vitro
RU2789460C1 (en) Method for microclonal reproduction of potatoes in vitro variety hostayushka
JPH02286019A (en) Multiplication of tuber of araceae plant
EP0574283A1 (en) Method for the tuberization of potatoes
RU2704274C2 (en) Strawberry propagation method in vitro

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Correction of name of patent owner
QB4A Licence on use of patent

Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20220329

Effective date: 20220329