RU2738060C2 - Стабильные составы липидов и липосом - Google Patents
Стабильные составы липидов и липосом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2738060C2 RU2738060C2 RU2017113970A RU2017113970A RU2738060C2 RU 2738060 C2 RU2738060 C2 RU 2738060C2 RU 2017113970 A RU2017113970 A RU 2017113970A RU 2017113970 A RU2017113970 A RU 2017113970A RU 2738060 C2 RU2738060 C2 RU 2738060C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- aqueous
- liposomes
- lipid
- acid
- rna
- Prior art date
Links
- 239000002502 liposome Substances 0.000 title claims abstract description 130
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 150000002632 lipids Chemical group 0.000 title claims description 136
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 claims abstract description 83
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 60
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 41
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 41
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims abstract description 33
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 31
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims abstract description 29
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 18
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims abstract description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 101
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 claims description 32
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 24
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 21
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 20
- KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 0.000 claims description 19
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 18
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 14
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 11
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 11
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 9
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 9
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 9
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 claims description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 5
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 claims description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 4
- MWRBNPKJOOWZPW-NYVOMTAGSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MWRBNPKJOOWZPW-NYVOMTAGSA-N 0.000 claims description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 0.000 abstract 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 77
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 75
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 75
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 75
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 51
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 50
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 47
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 33
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 31
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 28
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 26
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 24
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 24
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 23
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 22
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 22
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 22
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 22
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 17
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 17
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 17
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 16
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 16
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 15
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 15
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 12
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 11
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 11
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 150000002313 glycerolipids Chemical class 0.000 description 9
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 9
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 9
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 8
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 7
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 6
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 5
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 238000010931 ester hydrolysis Methods 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 5
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 5
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 5
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 description 4
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 4
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 4
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 4
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 4
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 4
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 4
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091008103 RNA aptamers Proteins 0.000 description 4
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 4
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 4
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 4
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M dimethyldioctadecylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 description 4
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 description 4
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 230000002535 lyotropic effect Effects 0.000 description 4
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 4
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical class C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 3
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 3
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 3
- 102000039471 Small Nuclear RNA Human genes 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 3
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 3
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 3
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 3
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 3
- WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 2,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 2
- 101150034825 DODA gene Proteins 0.000 description 2
- XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N DOSPA trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCNC(=O)C(CCCNCCCN)NCCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N 0.000 description 2
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 2
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 2
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 2
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 2
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 2
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108020004688 Small Nuclear RNA Proteins 0.000 description 2
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N Spermine Natural products NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 2
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N [3-(dimethylamino)-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CN(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N 0.000 description 2
- 239000002535 acidifier Substances 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000003113 alkalizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M didecyl(dimethyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCC UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N dimethyl(dioctadecyl)azanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005583 doda Nutrition 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000002479 lipoplex Substances 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- MAFHEURJBRFHIT-YEUCEMRASA-N n,n-dimethyl-1,2-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC(C)C(N(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC MAFHEURJBRFHIT-YEUCEMRASA-N 0.000 description 2
- GLGLUQVVDHRLQK-WRBBJXAJSA-N n,n-dimethyl-2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(CN(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC GLGLUQVVDHRLQK-WRBBJXAJSA-N 0.000 description 2
- HKUFIYBZNQSHQS-UHFFFAOYSA-N n-octadecyloctadecan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCNCCCCCCCCCCCCCCCCCC HKUFIYBZNQSHQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 2
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 2
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 2
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 1
- WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 1-(3-chloro-4-methylphenyl)-3-{2-[({5-[(dimethylamino)methyl]-2-furyl}methyl)thio]ethyl}urea Chemical compound O1C(CN(C)C)=CC=C1CSCCNC(=O)NC1=CC=C(C)C(Cl)=C1 WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trimethyl-N-[3-(trifluoromethyl)phenyl]benzenesulfonamide Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1S(=O)(=O)NC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 ZIIUUSVHCHPIQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 3-(N-morpholino)propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCN1CCOCC1 DVLFYONBTKHTER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 1
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 7-methylguanosine Chemical compound C1=2N=C(N)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 101710137115 Adenylyl cyclase-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000000230 African Trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 102000052587 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Human genes 0.000 description 1
- 108700004606 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 102100023003 Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Human genes 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 102100022977 Antithrombin-III Human genes 0.000 description 1
- 102100037435 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Human genes 0.000 description 1
- 101710127675 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Proteins 0.000 description 1
- 101000719121 Arabidopsis thaliana Protein MEI2-like 1 Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 1
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 1
- 241000228405 Blastomyces dermatitidis Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 101150108242 CDC27 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710156847 CTD small phosphatase-like protein Proteins 0.000 description 1
- 102100027674 CTD small phosphatase-like protein Human genes 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039510 Cancer/testis antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 101710134395 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100027668 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710134389 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100027667 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 1
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 201000006082 Chickenpox Diseases 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 102000002029 Claudin Human genes 0.000 description 1
- 108050009302 Claudin Proteins 0.000 description 1
- 102100039518 Claudin-12 Human genes 0.000 description 1
- 101710197000 Claudin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102100038449 Claudin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 1
- 241000223205 Coccidioides immitis Species 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100040501 Contactin-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 201000007336 Cryptococcosis Diseases 0.000 description 1
- 241000221204 Cryptococcus neoformans Species 0.000 description 1
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 description 1
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 description 1
- 101100216227 Dictyostelium discoideum anapc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102100039328 Endoplasmin Human genes 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 102100028043 Fibroblast growth factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 description 1
- 241000710831 Flavivirus Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 108010017544 Glucosylceramidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004547 Glucosylceramidase Human genes 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 206010018612 Gonorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 102100028721 Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Human genes 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000228404 Histoplasma capsulatum Species 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000757191 Homo sapiens Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Proteins 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889345 Homo sapiens Cancer/testis antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000882898 Homo sapiens Claudin-6 Proteins 0.000 description 1
- 101000954709 Homo sapiens Doublecortin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000812663 Homo sapiens Endoplasmin Proteins 0.000 description 1
- 101000985516 Homo sapiens Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000614481 Homo sapiens Kidney-associated antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001134060 Homo sapiens Melanocyte-stimulating hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000615488 Homo sapiens Methyl-CpG-binding domain protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000623901 Homo sapiens Mucin-16 Proteins 0.000 description 1
- 101000874141 Homo sapiens Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Proteins 0.000 description 1
- 101000880770 Homo sapiens Protein SSX2 Proteins 0.000 description 1
- 101000679365 Homo sapiens Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Proteins 0.000 description 1
- 101001109419 Homo sapiens RNA-binding protein NOB1 Proteins 0.000 description 1
- 101000857677 Homo sapiens Runt-related transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000821981 Homo sapiens Sarcoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000665137 Homo sapiens Scm-like with four MBT domains protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000739178 Homo sapiens Secretoglobin family 3A member 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 108050002021 Integrator complex subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 206010061252 Intraocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241000254158 Lampyridae Species 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 241000589248 Legionella Species 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100026238 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 241001115401 Marburgvirus Species 0.000 description 1
- 102100034216 Melanocyte-stimulating hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010057081 Merozoite Surface Protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100021299 Methyl-CpG-binding domain protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010084333 N-palmitoyl-S-(2,3-bis(palmitoyloxy)propyl)cysteinyl-seryl-lysyl-lysyl-lysyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 102000007530 Neurofibromin 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010085793 Neurofibromin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 1
- 102100035724 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Human genes 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101710180313 Protease 3 Proteins 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 102000017975 Protein C Human genes 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102000055027 Protein Methyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700040121 Protein Methyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 102100037686 Protein SSX2 Human genes 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 102100022578 Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Human genes 0.000 description 1
- 108020005161 RNA Caps Proteins 0.000 description 1
- 108010065868 RNA polymerase SP6 Proteins 0.000 description 1
- 102100022491 RNA-binding protein NOB1 Human genes 0.000 description 1
- 101150066717 Rara gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 description 1
- 102100025373 Runt-related transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108050003189 SH2B adapter protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102100021466 Sarcoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038689 Scm-like with four MBT domains protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037269 Secretoglobin family 3A member 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000019802 Sexually transmitted disease Diseases 0.000 description 1
- 101710173693 Short transient receptor potential channel 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000032023 Signs and Symptoms Diseases 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000021712 Soft tissue sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 102100035748 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710185775 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Proteins 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108700019889 TEL-AML1 fusion Proteins 0.000 description 1
- 102100033082 TNF receptor-associated factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical class IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 201000005485 Toxoplasmosis Diseases 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 240000003834 Triticum spelta Species 0.000 description 1
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223104 Trypanosoma Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 102100027244 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710155955 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000005969 Uveal melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046980 Varicella Diseases 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010047513 Vision blurred Diseases 0.000 description 1
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 1
- 208000003152 Yellow Fever Diseases 0.000 description 1
- LDGWQMRUWMSZIU-YKBXHWKCSA-M [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC[C@@H](C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC[C@@H](C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-YKBXHWKCSA-M 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000000909 amidinium group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 238000011224 anti-cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 description 1
- 229940125687 antiparasitic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 238000011398 antitumor immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 108010028263 bacteriophage T3 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010364 biochemical engineering Methods 0.000 description 1
- 238000012925 biological evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000007321 biological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 description 1
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- LIQODXNTTZAGID-OCBXBXKTSA-N etoposide phosphate Chemical compound COC1=C(OP(O)(O)=O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 LIQODXNTTZAGID-OCBXBXKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000752 etoposide phosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 1
- 229940012426 factor x Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 150000002314 glycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 208000001786 gonorrhea Diseases 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 208000029080 human African trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 108091005434 innate immune receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 208000029565 malignant colon neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 208000026045 malignant tumor of parathyroid gland Diseases 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N n-(4-hydroxyphenyl)-2-(1,1,3-trioxo-1,2-benzothiazol-2-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC(=O)CN1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C1=O PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004126 nerve fiber Anatomy 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 201000002575 ocular melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000007859 posttranscriptional regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004313 potentiometry Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 description 1
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 201000007444 renal pelvis carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 201000002612 sleeping sickness Diseases 0.000 description 1
- 201000002314 small intestine cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 108091029842 small nuclear ribonucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 208000037959 spinal tumor Diseases 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 108020003113 steroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000000365 steroidogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000012906 subvisible particle Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 125000005457 triglyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001573 trophoblastic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 230000029069 type 2 immune response Effects 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical group 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
- A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers with substantial amounts of non-phosphatidyl, i.e. non-acylglycerophosphate, surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/186—Quaternary ammonium compounds, e.g. benzalkonium chloride or cetrimide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается водной липосомной дисперсии, содержащей липосомы, содержащие DOPE и по меньшей мере один катионный липид, выбранный из группы, состоящей из DOTMA и DOTAP, и по меньшей мере один регулятор рН, причем водный состав характеризуется значением рН между 2 и 5,5, где указанные липосомы являются катионными при физиологическом рН. Группа изобретений также касается способа получения водной липосомной дисперсии; набора для получения фармацевтической композиции, где указанный набор содержит водную липосомную дисперсию и, в отдельном контейнере, фармацевтически активную нуклеиновую кислоту; фармацевтической композиции для доставки лекарственного средства. Группа изобретений обеспечивает увеличенную химическую стабильность водной липосомной дисперсии. 6 н. и 18 з.п. ф-лы, 3 табл., 9 пр., 7 ил.
Description
Область техники, к которой относится настоящее изобретение
Настоящее изобретение относится к водным липидным и/или липосомным составам с увеличенной химической стабильностью, способам получения таких водных составов, а также содержащим их наборам. Настоящее изобретение дополнительно относится к способам получения фармацевтических композиций на основе липидов, к полученным с помощью таких способов фармацевтическим композициям и к способам химической стабилизации водных липидных и/или липосомных составов.
Предшествующий уровень техники настоящего изобретения
В воде липиды могут существовать в различных формах ламеллярной или неламеллярной (например, кубической или гексагональной) фаз, которые часто носят название лиотропных липидных фаз. Например, липосомы состоят из одно- или многослойных самозамкнутых липидных бислоев, диспергированных в воде. В более общих терминах их можно рассматривать как коллоидные системы, в которых липиды организованы в ламеллярную форму. Многие из этих систем, которые содержат лиотропные липидные фазы, вызывают интерес в качестве фармацевтических составов для доставки лекарственных средств или других применений. Одно требование для введения таких фармацевтических продуктов на основе липидов в клиническую практику заключается в необходимости обеспечения достаточного срока хранения после производства. В этом случае, помимо других критериев, химическая стабильность липидов, которые образуют липосомы, может стать ограничивающим фактором. Липосомы, как правило, собраны из фосфолипидов или родственных соединений. Фосфолипиды состоят из жирных кислот, связанных с триглицеридным каркасом с помощью сложноэфирных связей. Указанные сложноэфирные связи подвержены химическому гидролизу, который ускоряется при кислотных или основных условиях (кислотный или основный сложноэфирный гидролиз). Если липосомы или другие системы, присутствующие в виде лиотропных липидных фаз, подлежат хранению в течение нескольких месяцев или лет в водной фазе, сложноэфирный гидролиз может стать ограничивающим фактором в отношении стабильности в течение срока хранения.
Ввиду ускорения сложноэфирного гидролиза при кислотных или основных условиях, предусмотрено, что лучшая стабильность или самая низкая скорость гидролиза для липидов, как правило, находится в диапазоне pH от 6 до 7. Другие возможности предупреждения гидролиза представляют собой замораживание и/или лиофилизацию липосом (Chen et al., 2010; van Winden and Crommelin, 1999; Stark et al., 2010). Протоколы для проведения замораживания и лиофилизации липосом представлены в литературе. Тем не менее, указанные дополнительные технические стадии также делают производство более сложным и дорогостоящим. Во многих случаях необходимо добавление криопротектора, что может являться невозможным или нежелательным для определенных продуктов. Например, присутствие криопротекторов и/или замораживание/лиофилизация сами по себе могут нежелательным образом повлиять на свойства продукта. Следовательно, длительная стабилизация жидких липосомных препаратов все еще представляет собой неудовлетворенную потребность. В связи с этим, существует значительный интерес к техникам минимизации гидролиза липосом или, в более общем плане, коллоидно-диспергированных липидов в жидкой (водной) фазе. Это особенно относится к тем случаям, когда липосомы предназначены для использования в качестве фармацевтических продуктов, поскольку в этом случае способ стабилизации должен удовлетворять нормативным и технологическим требованиям для таких продуктов. Наиболее сложными в этом контексте являются продукты для парентерального (например, внутривенного) введения, где необходимо удовлетворить, среди прочего, определенные критерии, относящиеся к стерильности, выбору вспомогательных веществ, ионных условий и условий pH или конкретного состава.
Настоящее изобретение направлено на обеспечение способов и средств для увеличения стабильности, в частности химической стабильности липидов и/или липосом, введенных в состав водных составов, таким образом увеличивая стабильность указанных составов в течение срока хранения.
Краткое раскрытие настоящего изобретения
Согласно первому аспекту настоящее изобретение относится к водному составу, содержащему
- по меньшей мере один липид, который характеризуется одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, и
- по меньшей мере один регулятор pH,
причем водный состав характеризуется значением pH между 2 и 5,5.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один из липидов, присутствующих в водном составе, представляет собой катионный липид. Согласно одному варианту осуществления катионный липид представляет собой катионный липид согласно представленному в настоящем документе определению.
Согласно одному варианту осуществления общий суммарный заряд липидов, присутствующих в водном составе, является положительным.
Согласно одному варианту осуществления водный состав характеризуется значением pH между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, включает в себя глицеролипид и/или глицерофосфолипид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, включает в себя катионный липид и/или некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления катионный липид выбран из группы, состоящей из 1,2-диолеоил-3-триметиламмонийпропана (DOTAP), 1,2-диолеоилокси-3-диметиламмонийпропана (DODAP) и аналогов указанных молекул, характеризующихся различной композицией фрагмента - ацильной цепи.
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой нейтральный липид, причем нейтральный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из 1,2-ди-(9Z-октадеценоил)-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (DOPE), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DOPC), фосфатидилхолина (PC) и димиристоилфосфатидилхолина (DMPC).
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой анионный липид, причем анионный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из фосфатидилсерина (PS), фосфатидилинозитола (PI), фосфатидной кислоты (PA), фосфатидилглицерола (PG) и димиристоилфосфатидилглицерола (DMPG).
Согласно одному варианту осуществления водный состав дополнительно содержит по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, включает в себя катионный липид и/или некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления катионный липид выбран из группы, состоящей из 1,2-ди-O-октадеценил-3-триметиламмонийпропана (DOTMA), 1,2-диолеилокси-N,N-диметиламинопропана (DODMA), диоктадецилдиметиламмония (DODA(Br)/DDAB), диоктадецилдиметиламмонийхлорида (DODAC), 1,2-димиристоилоксипропил-1,3-диметилгидроксиэтиламмония (DMRIE), 2,3-диолеоилокси-N-[2(сперминкарбоксамид)этил]-N,N-диметил-1-пропанаминийтрифторацетата (DOSPA), аналогов указанных молекул, характеризующихся различной композицией фрагмента - ацильной цепи.
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой нейтральный липид, причем нейтральный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из холестерина (Chol) и сфингомиелина (SM).
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой анионный липид.
Согласно одному варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере один катионный липид и по меньшей мере один некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления молярное соотношение по меньшей мере одного катионного липида по меньшей мере к одному некатионному липиду составляет 1:4-4:1, предпочтительно 1:2-4:1.
Согласно одному варианту осуществления молярная доля по меньшей мере одного катионного липида по отношению к общему липиду составляет по меньшей мере 5%, предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 20%.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH содержит кислоту и/или кислотный буфер.
Согласно одному варианту осуществления кислота представляет собой неразветвленную, разветвленную или циклическую C1-C28, предпочтительно C1-C22 карбоновую кислоту.
Согласно одному варианту осуществления кислота выбрана из группы, состоящей из уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, соляной кислоты, ортофосфорной кислоты, разветвленных или неразветвленных, насыщенных, мононенасыщенных или полиненасыщенных C12-C28 жирных кислот, предпочтительно C12-C22 жирных кислот (например, олеиновой кислоты).
Согласно одному варианту осуществления кислотный буфер основан на кислоте согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления кислотный буфер выбран из группы, состоящей из ацетатного буфера, цитратного буфера, фосфатного буфера и карбонатного буфера.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH содержит уксусную кислоту и/или ацетатный буфер.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору pH не превышало 100:1.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору pH составляло 10:1-1:10, предпочтительно 5:1-1:5, более предпочтительно 2:1-1:2, более предпочтительно 1,5:1-1:1,5, даже более предпочтительно приблизительно 1:1.
Согласно одному варианту осуществления скорость гидролиза по меньшей мере одного липида, характеризующегося одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, уменьшена по сравнению со скоростью его гидролиза при значении pH между 6 и 7.
Согласно одному варианту осуществления липиды, присутствующие в водном составе, образуют липосомы.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH ассоциирован с липосомами.
Согласно дополнительному аспекту настоящее изобретение относится к способу получения водного состава согласно представленному выше определению, причем способ предусматривает
- образование липосом в водном растворе, содержащем по меньшей мере один регулятор pH и характеризующемся значением pH между 2 и 5,5 или
- добавление по меньшей мере одного регулятора pH к водному раствору, содержащему липосомы, для доведения pH водного раствора до значения pH между 2 и 5,5.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к набору, содержащему водный состав согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления набор дополнительно содержит, в отдельном контейнере, фармацевтически активное соединение, причем фармацевтически активное соединение предпочтительно содержит нуклеиновую кислоту, предпочтительно ДНК или РНК.
Согласно одному варианту осуществления нуклеиновая кислота предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением pH между 6 и 8.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции, причем способ предусматривает
- получения водного состава согласно представленному выше определению; и
- смешивание водного состава с фармацевтически активным соединением.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтически активное соединение содержит нуклеиновую кислоту, предпочтительно ДНК или РНК, причем нуклеиновая кислота предпочтительно предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением pH между 6 и 8.
Согласно дополнительному аспекту настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, полученной способом согласно представленному выше определению.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу химической стабилизации водного состава, содержащего по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, причем способ предусматривает
- доведение pH водного состава до значения pH между 2 и 5,5.
Согласно одному варианту осуществления химическая стабилизация происходит путем ингибирования гидролиза сложноэфирной связи, тиоэфирной связи и/или амидной связи.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один из липидов, присутствующих в водном составе, представляет собой катионный липид. Согласно одному варианту осуществления катионный липид является таким, который соответствует приведенному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления общий суммарный заряд липидов, присутствующих в водном составе, является положительным.
Согласно одному варианту осуществления значение pH доведено до значения pH между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4.
Согласно одному варианту осуществления значение pH водного липидного состава доведено с помощью добавления по меньшей мере одного регулятора pH, предпочтительно по меньшей мере одного регулятора pH согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, является таким, который соответствует приведенному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления липиды, присутствующие в водном составе, образуют липосомы.
Краткое описание фигур
На фигуре 1 показано процентное отношение DOPE, извлеченного из липосомных дисперсий DOTMA/DOPE, полученных в дисперсионных растворах, характеризующихся различными значениями pH. Липосомную дисперсию хранили при 37°C и образцы собирали в различные моменты времени.
На фигуре 2 показано процентное отношение DOPE, извлеченного из липосомных дисперсий DOTMA/DOPE с различными значениями pH, полученными в присутствии уксусной кислоты (HAc) или различных концентраций буферов на основе уксусной кислоты (AcB). Дисперсии хранили в течение 5 недель при 40°C.
На фигуре 3 показано процентное отношение DOPE, извлеченного из липосомных дисперсий DOTMA/DOPE, подвергнутых стрессовому воздействию, через 5 или 6 недель в зависимости от значения pH. Показаны результаты от 3 независимых экспериментов.
На фигуре 4 показано процентное отношение извлечение липидов из липосом DOTAP/DOPE через 2 недели при 40°C в зависимости от значения pH.
На фигуре 5 показано процентное отношение извлечения DOPE из липосом DOTMA/DOPE в воде для инъекций в присутствии или при отсутствии 5 мМ уксусной кислоты (HAc) после хранения в течение 3 месяцев при 5°C, 25°C или 40°C.
На фигуре 6 показаны биолюминесцентные сигналы у мышей, которым вводили инъекции липоплексов РНК, кодирующей люциферазу, полученных с pH-стабилизированными липосомами или pH-нестабилизированными липосомами (стандарт).
На фигуре 7 показана стабильность DOPE в липосомах DOTMA/DOPE в воде для инъекций (L1) или в воде для инъекций с 5 мМ уксусной кислоты (L2) при 5°C (A), 25°C (B) или 40°C (C). Липосомы получали при GMP или GMP-подобных условиях.
Подробное раскрытие настоящего изобретения
Несмотря на то, что настоящее изобретение подробно описано ниже, следует понимать, что настоящее изобретение не ограничено конкретными методиками, протоколами и реагентами, описанными в данном документе, поскольку они могут варьировать. Кроме того, следует понимать, что терминология, используемая в настоящем документе, представлена исключительно с целью описания конкретных вариантов осуществления и не предусмотрена для ограничения объема настоящего изобретения, который будет ограничен исключительно прилагаемой формулой изобретения. Если не указано иное, все используемые в данном документе технические и научные термины, имеют такие же значения, которые обычно понятны специалисту в настоящей области техники.
В последующем описании будут описаны элементы настоящего изобретения. Указанные элементы перечислены с конкретными вариантами осуществления, тем не менее, следует понимать, что их можно комбинировать любым способом и в любом количестве для создания дополнительных вариантов осуществления. Различным образом описанные примеры и предпочтительные варианты осуществления не должны истолковываться как ограничивающие настоящее изобретение только явно описанными вариантами осуществления. Настоящее описание должно пониматься как поддерживающее и охватывающее варианты осуществления, которые объединяют явно описанные варианты осуществления с любым количеством раскрытых и/или предпочтительных элементов. Кроме того, любые перестановки и комбинации всех описанных элементов в настоящей заявке должны рассматриваться как раскрытые в описании настоящей заявки, если контекст не указывает иное.
Используемые в данном документе термины предпочтительно определяют так, как описано в "A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)", H.G.W. Leuenberger, B. Nagel, and Eds., Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basel, Switzerland, (1995).
В осуществлении на практике настоящего изобретения, если не указано иное, будут использовать общепринятые способы химии, биохимии, клеточной биологии, иммунологии и техник рекомбинантных ДНК, объяснение которых можно найти в литературе в настоящей области техники (см., например, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, J. Sambrook et al. eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989).
В настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения, если контекст не требует иного, слово "содержать" и такие его варианты, как "содержит" и "содержащий", будет подразумевать включение указанного представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий, но не исключение какого-либо другого представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий, хотя в некоторых вариантах осуществления такой другой представитель, целое число или стадия или группа представителей, целых чисел или стадий могут быть исключены, иными словами предмет состоит во включении указанного представителя, целого числа или стадии или группы представителей, целых чисел или стадий. Формы единственного числа, использованные в контексте описания настоящего изобретения (особенно в контексте формулы изобретения), следует рассматривать как охватывающие как формы единственного числа, так и формы множественного числа, если иное не указано в настоящем документе или это явно не противоречит контексту. Предусмотрено, что перечисление диапазонов значений в настоящем документе служит исключительно в качестве сокращенного способа ссылки индивидуально на каждое отдельное значение, попадающее в диапазон. Если в настоящем документе не указано иное, каждое индивидуальное значение включено в описание изобретения так, как если бы оно было индивидуально приведено в настоящем документе. Все способы, описанные в настоящем документе, можно провести в любом подходящем порядке, если иное не указано в настоящем документе или это явно не противоречит контексту. Применение какого-либо и всех примеров или иллюстративной формулировки (например, "такие как"), представленное в настоящем документе, предусмотрено исключительно для лучшей иллюстрации настоящего изобретения и не представляет собой ограничение объема настоящего изобретения, заявленного иным образом. Ни одну формулировку в настоящем описании изобретения не следует рассматривать как указывающую на какой-либо не заявленный элемент, необходимый для осуществления настоящего изобретения на практике.
Несколько документов цитируются в тексте настоящего описания изобретения. Каждый из документов, процитированных в настоящем документе (включая в себя патенты, патентные заявки, научные публикации, технические характеристики, инструкции производителей и т.д.), будь то выше или ниже, полностью включены в настоящий документ посредством ссылки. Ничто в настоящем документе не должно быть истолковано как признание того, что настоящее изобретение не наделено правом предшествовать такому раскрытию на основании предшествующего изобретения.
Согласно настоящему изобретению предусмотрен водный состав, содержащий:
- по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, предпочтительно сложноэфирных связей, и
- по меньшей мере один регулятор pH,
причем водный состав характеризуется значением pH между 2 и 5,5.
Водный состав согласно настоящему изобретению (который также может носить название водной липидной дисперсии) характеризуется увеличенной химической стабильностью, более конкретно увеличенной химической стабильностью по меньшей мере одного липида, характеризующегося одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, предпочтительно сложноэфирных связей. Согласно одному варианту осуществления скорость гидролиза по меньшей мере одного липида, характеризующегося одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, предпочтительно сложноэфирных связей, уменьшена по сравнению со скоростью его гидролиза при значении pH между 6 и 7. Согласно одному варианту осуществления скорость гидролиза уменьшена по меньшей мере в 1,5 раза, предпочтительно по меньшей мере в 2 раза, более предпочтительно по меньшей мере в 3 раза, даже более предпочтительно по меньшей мере в 4 раза.
Согласно одному варианту осуществления водный состав характеризуется значением pH между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4. Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления водный состав характеризуется значением pH между 3,1 и 3,9.
Предусмотрено, что используемый в настоящем документе термин "липид" относится к амфифильной молекуле, содержащей гидрофильный фрагмент (например, полярную головку) и липофильный или гидрофобный фрагмент. Липофильный или гидрофобный фрагмент может содержать по меньшей мере один разветвленный или неразветвленный, насыщенный или ненасыщенный жирнокислотный фрагмент или его производное или аналог (например, фторуглерод). Жирнокислотный фрагмент по существу состоит из углеводородного фрагмента/цепи, в частности ацильной цепи. Жирнокислотный фрагмент или его производное или аналог предпочтительно характеризуются длиной, составляющей 10-30, более предпочтительно 12-25, даже более предпочтительно 14-22 атомов углерода. В случае, когда липид содержит более одного, например, два или три жирнокислотных фрагмента или их производных или аналогов, указанные жирнокислотные фрагменты или их производные или аналоги могут быть одинаковыми или различными. Термин "липид" включает в себя катионные липиды и некатионные липиды, т.е. нейтральные или анионные липиды. Липиды могут включать в себя фосфолипиды или их производные, глицеролипиды или их производные, сфинголипиды (например, сфингомиелин) или их производные или стериновые липиды (например, холестерин) или их производные. Глицеролипиды состоят из глицеролов, являющихся моно-, ди- или тризамещенными с помощью жирнокислотных фрагментов. Фосфолипиды, чей гидрофильный фрагмент содержит фосфатную группу, могут представлять собой глицерофосфолипиды. Используемые согласно настоящему изобретению липиды предпочтительно представляют собой липиды, которые образуют бислой. Липиды также могут являться функционализированными/модифицированными, например, с помощью (олиго)пептидов, полимеров (например, ПЭГ) или других функциональных групп. В водной среде липиды дополнительно могут являться супрамолекулярно организованными, например, в форме частиц на основе липидов или лиотропных фаз, таких как липосомы, ламеллярные фазы, гексагональные и инвертированные гексагональные фазы, кубические фазы, мицеллы и обратные мицеллы, состоящие из монослоев. Эффект стабилизации согласно настоящему изобретению применим ко всем типам супрамолекулярной организации липидов. Используемые согласно настоящему изобретению липиды предпочтительно являются фармацевтически приемлемыми, например, используемыми в качестве вспомогательных веществ, в качестве компонентов составов для доставки лекарственных средств и/или для применения в трансфекции нуклеиновых кислот в клетки.
Если настоящее раскрытие относится к заряду, такому как положительный заряд, отрицательный заряд или нейтральный заряд, или к катионному соединению, отрицательному соединению или нейтральному соединению, как правило, это означает, что указанный заряд присутствует при выбранном значении pH, таком как физиологическое значение pH. Например, термин "катионный липид" относится к липиду, характеризующемуся положительным суммарным зарядом при выбранном значении pH, таком как физиологическое значение pH. Термин "нейтральный липид" относится к липиду, который не характеризуется положительным или отрицательным суммарным зарядом, который может существовать в форме незаряженной молекулы или нейтральной амфотерной (или цвиттерионной) молекулы при выбранном значении pH, таком как физиологическое значение pH. Под "физиологическим значением pH" в настоящем документе подразумевают значение pH между 6 и 8, предпочтительно между 6,5 и 8, более предпочтительно приблизительно 7,5.
Катионный липид предпочтительно содержит катионную головку. Полярная головка катионных липидов предпочтительно содержит такие аминопроизводные, как первичные, вторичные и/или третичные амины, четвертичный аммоний, различные комбинации аминов, соли амидиния или группы гуанидина и/или имидазола, а также пиридиний, пиперизин и такие аминокислотные головки, как лизин, аргинин, орнитин и/или триптофан. Полярная головка катионного липида более предпочтительно содержит аминопроизводные. Полярная головка катионного липида наиболее предпочтительно содержит четвертичный аммоний. Головка катионного липида может содержать один катионный заряд или многочисленные катионные заряды.
Анионный липид предпочтительно содержит такую анионную головку, как фосфатная группа. Головка анионного липида может содержать один анионный заряд или многочисленные анионные заряды.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один из липидов, присутствующих в водном составе, представляет собой катионный липид, предпочтительно катионный липид согласно представленному в настоящем документе определению.
Согласно одному варианту осуществления общий суммарный заряд липидов, присутствующих в водном составе, является положительным.
Используемый в настоящем документе термин "общий суммарный заряд" означает сумму результирующих зарядов всех липидов, присутствующих в водном составе.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, включает в себя глицеролипид и/или глицерофосфолипид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, представляет собой глицеролипид. Согласно другому варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, представляет собой глицерофосфолипид. Согласно другому варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере два липида, характеризующихся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, причем по меньшей мере два липида включают в себя глицеролипид и глицерофосфолипид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, включает в себя катионный липид и/или некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, представляет собой катионный липид. Согласно другому варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, представляет собой некатионный липид. Согласно другому варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере два липида, характеризующихся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, причем по меньшей мере два липида включают в себя катионный липид и некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления катионный липид выбран из группы, состоящей из 1,2-диолеоил-3-триметиламмонийпропана (DOTAP), 1,2-диолеоилокси-3-диметиламмонийпропана (DODAP) и аналогов указанных молекул, характеризующихся различной композицией фрагмента - ацильной цепи.
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой нейтральный липид, причем нейтральный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из 1,2-ди-(9Z-октадеценоил)-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламина (DOPE), 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолина (DOPC), фосфатидилхолина (PC) и димиристоилфосфатидилхолина (DMPC).
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой анионный липид, причем анионный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из фосфатидилсерина (PS), фосфатидилинозитола (PI), фосфатидной кислоты (PA), фосфатидилглицерола (PG) и димиристоилфосфатидилглицерола (DMPG).
Согласно одному варианту осуществления водный состав дополнительно содержит по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями. Согласно одному варианту осуществления водный состав дополнительно содержит по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, включает в себя глицеролипид и/или глицерофосфолипид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, представляет собой глицеролипид. Согласно другому варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, представляет собой глицерофосфолипид. Согласно другому варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере два липида, не характеризующихся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, причем по меньшей мере два липида включают в себя глицеролипид и глицерофосфолипид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, включает в себя катионный липид и/или некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, представляет собой катионный липид. Согласно другому варианту осуществления по меньшей мере один липид, не характеризующийся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, представляет собой некатионный липид. Согласно другому варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере два липида, не характеризующихся какими-либо сложноэфирными связями, тиоэфирными связями или амидными связями, причем по меньшей мере два липида включают в себя катионный липид и некатионный липид.
Согласно одному варианту осуществления катионный липид выбран из группы, состоящей из 1,2-ди-О-октадеценил-3-триметиламмонийпропана (DOTMA), 1,2-диолеилокси-N,N-диметиламинопропана (DODMA), диоктадецилдиметиламмоний (DODA(Br)/DDAB), диоктадецилдиметиламмонийхлорида (DODAC), 1,2-димиристоилоксипропил-1,3-диметилгидроксиэтиламмония (DMRIE), 2,3-диолеоилокси-N-[2(сперминкарбоксамид)этил]-N,N-диметил-1-пропанаминийтрифторацетата (DOSPA), аналогов указанных молекул, характеризующихся различной композицией фрагмента - ацильной цепи.
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой нейтральный липид, причем нейтральный липид предпочтительно выбран из группы, состоящей из холестерина (Chol) и сфингомиелина (SM).
Согласно одному варианту осуществления некатионный липид представляет собой анионный липид.
Согласно одному варианту осуществления водный состав содержит по меньшей мере один катионный липид и по меньшей мере один некатионный липид, предпочтительно по меньшей мере один катионный липид и по меньшей мере один нейтральный липид.
Согласно одному варианту осуществления водный состав содержит DOTMA и DOPE. Согласно другому варианту осуществления водный состав содержит DOTAP и DOPE.
Согласно одному варианту осуществления некатионный, т.е. нейтральный или анионный, предпочтительно нейтральный, липид функционирует в качестве "хелперного липида". Термин "хелперный липид" относится к липиду, способному увеличивать эффективность доставки частиц на основе липидов (например, липосом) к мишени, предпочтительно в клетке.
Согласно одному варианту осуществления молярное соотношение по меньшей мере одного катионного липида по меньшей мере к одному некатионному липиду составляет 4:1-1:4, предпочтительно 1:2-4:1.
Согласно одному варианту осуществления молярная доля по меньшей мере одного катионного липида по отношению к общему липиду составляет по меньшей мере 5%, предпочтительно по меньшей мере 10%, более предпочтительно по меньшей мере 20%.
Используемый в настоящем документе термин "регулятор pH" означает любое pH-активное средство, которое можно использовать для модификации значения pH (водного) раствора, и включает в себя подкисляющие и подщелачивающие средства. Подкисляющие средства используют для снижения pH, тогда как подщелачивающие средства используют для увеличения pH. Регулятор pH согласно настоящему изобретению предпочтительно представляет собой подкисляющее средство.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH содержит кислоту и/или кислотный буфер.
Согласно одному варианту осуществления кислота представляет собой неразветвленную, разветвленную или циклическую C1-C28, предпочтительно C1-C22 карбоновую кислоту.
Согласно одному варианту осуществления кислота выбрана из группы, состоящей из уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, соляной кислоты, ортофосфорной кислоты, разветвленных или неразветвленных, насыщенных, мононенасыщенных или полиненасыщенных C12-C28 жирных кислот, предпочтительно C12-C22 жирных кислот (например, олеиновой кислоты).
Согласно одному варианту осуществления кислотный буфер основан на кислоте согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления кислотный буфер выбран из группы, состоящей из ацетатного буфера, цитратного буфера, фосфатного буфера и карбонатного буфера.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH содержит уксусную кислоту и/или ацетатный буфер.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору pH не превышало 100:1.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору pH составляло 10:1-1:10, предпочтительно 5:1-1:5, более предпочтительно 2:1-1:2, более предпочтительно 1,5:1-1:1,5, даже более предпочтительно приблизительно 1:1.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH присутствует в концентрации, составляющей 1 мМ-10 мМ.
Согласно одному варианту осуществления липиды, присутствующие в водном составе, образуют такие частицы на основе липидов, как липосомы. Таким образом, согласно одному варианту осуществления водный состав представляет собой водную липосомную дисперсию. Согласно одному варианту осуществления общий суммарный заряд липидов, образующих липосомы, является положительным. Согласно одному варианту осуществления липосомы представляют собой катионные липосомы.
Используемый в настоящем документе термин "липосома" означает микроскопическую липидную везикулу, которая зачастую характеризуется одним или несколькими бислоями образующего везикулу липида, такого как фосфолипид, и которая способна инкапсулировать лекарственное средство. В контексте настоящего изобретения можно использовать различные типы липосом, включая в себя без ограничения многослойные везикулы (MLV), небольшие однослойные везикулы (SUV), большие однослойные везикулы (LUV), стерически стабилизированные липосомы (SSL), мультивезикулярные везикулы (MV) и большие мультивезикулярные везикулы (LMV), а также другие бислойные формы, известные в настоящей области техники. Размер и ламеллярность липосомы будет зависеть от способа получения. Согласно одному варианту осуществления липосомы характеризуются средним диаметром в диапазоне от приблизительно 50 нм до приблизительно 1000 нм, предпочтительно от приблизительно 100 нм до приблизительно 800 нм, предпочтительно от приблизительно 200 нм до приблизительно 600 нм, например, приблизительно 300 нм - приблизительно 500 нм.
Липосомы можно образовать с использованием стандартных способов, таких как способ обратного испарения (REV), способ на основе инъекции этанола, способ дегидратации-регидратации (DRV), обработка ультразвуком или другие подходящие способы. Липосомы предпочтительно образуют с использованием способа на основе инъекции этанола.
Термин "способ на основе инъекции этанола" относится к способу, при котором раствор этанола, содержащего липиды, быстро вводят по каплям в водный раствор через иглу. Это действие диспергирует липиды в растворе и стимулирует образование липидных частиц, например, образование липосом.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH ассоциирован с частицами на основе липидов, предпочтительно липосомами. Согласно настоящему изобретению термин "ассоциирован с" означает, что регулятор pH связан или образует часть частиц на основе липидов, предпочтительно липосом, например, путем встраивания/включения в липидную бислойную мембрану. Согласно одному варианту осуществления регулятор pH, подлежащий ассоциации с липосомами, представляет собой карбоновую кислоту, предпочтительно карбоновую кислоту согласно представленному выше определению. Согласно одному варианту осуществления карбоновая кислота представляет собой разветвленную или неразветвленную C12-C28, предпочтительно C12-C22 карбоновую кислоту. Согласно одному варианту осуществления карбоновая кислота представляет собой разветвленную или неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную C12-C28 жирную кислоту, предпочтительно C12-C22 жирную кислоту (например, олеиновую кислоту). Согласно одному варианту осуществления частицы на основе липидов, предпочтительно липосомы содержат 1-10% регулятора pH.
Согласно одному варианту осуществления частицы на основе липидов, предпочтительно липосомы, содержат (например, инкапсулируют) фармацевтически активное соединение, причем фармацевтически активное соединение предпочтительно содержит нуклеиновую кислоту, предпочтительно ДНК или РНК.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрен способ получения водного состава согласно представленному выше определению, причем способ предусматривает:
- образование липосом в водном растворе, содержащем по меньшей мере один регулятор pH и характеризующемся значением pH между 2 и 5,5, или
- добавление по меньшей мере одного регулятора pH к водному раствору, содержащему липосомы для доведения pH водного раствора до значения pH между 2 и 5,5.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрен набор, содержащий водный состав согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления набор дополнительно содержит, в отдельном контейнере, фармацевтически активное соединение, причем фармацевтически активное соединение предпочтительно содержит нуклеиновую кислоту, предпочтительно ДНК или РНК.
Согласно одному варианту осуществления нуклеиновая кислота предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением pH между 6 и 8. Подходящие буферные вещества для применения в таких буферных растворах включают в себя Трис, HEPES, MOPS и MES.
Используемый в настоящем документе термин "набор" относится к готовому изделию, содержащему один или несколько контейнеров и необязательно носитель данных. Указанный один или несколько контейнеров могут быть заполнены одним или несколькими вышеупомянутыми средствами или реагентами. В набор можно включить дополнительные контейнеры, которые содержат, например, разбавители, буферы и дополнительные реагенты. Указанный носитель данных может представлять собой неэлектронный носитель данных, например, графический носитель данных, такой как информационный вкладыш, информационный листок, штрих-код или код доступа, или электронный носитель данных, такой как дискета, компакт-диск (CD), цифровой универсальный диск (DVD), микрочип или другой электронный носитель данных на основе полупроводников. Код доступа может обеспечивать доступ к базе данных, например, базе данных в сети Интернет, централизованной или децентрализованной базе данных. Указанный носитель данных может содержать инструкции по применению набора в способах согласно настоящему изобретению. Кроме того, носитель данных может содержать информацию или инструкции в отношении того, как осуществлять способы согласно настоящему изобретению.
Используемый в настоящем документе термин "фармацевтически активное соединение" (или "терапевтическое средство") относится к любому соединению, которое характеризуется положительным или благоприятным эффектом на состояние или болезненное состояние субъекта при введении субъекту в терапевтически эффективном количестве. Фармацевтически активное соединение предпочтительно характеризуется лечебными или паллиативными свойствами, и его можно вводить для уменьшения интенсивности, облегчения, ослабления, обратного развития заболевания, задержки начала развития или уменьшения тяжести одного или нескольких симптомов заболевания или нарушения. Фармацевтически активное соединение может характеризоваться профилактическими свойствами, и его можно использовать для задержки начала развития заболевания или уменьшения тяжести такого заболевания или патологического состояния.
Фармацевтически активные соединения включают в себя фармацевтически активные пептиды или белки, фармацевтически активные нуклеиновые кислоты, например, ДНК или РНК, и другие фармацевтически активные органические или неорганические молекулы, например, низкомолекулярные соединения (т.е. биоактивные органические соединения с молекулярной массой меньше чем 900 Да).
Используемый в настоящем документе термин "пептид" содержит олиго- и полипептиды, встречающиеся или не встречающиеся в природе, и относится к веществам, содержащим две или более, предпочтительно 3 или более, предпочтительно 4 или более, предпочтительно 6 или более, предпочтительно 8 или более, предпочтительно 10 или более, предпочтительно 13 или более, предпочтительно 16 или более, предпочтительно 21 или более и вплоть до предпочтительно 8, 10, 20, 30, 40 или 50, в частности 100 аминокислот (например, 10-100, 10-50, 10-40, 20-100, 20-50 или 20-40 аминокислот), ковалентно связанных с помощью пептидных связей. Термин "белок" предпочтительно относится к большим пептидам, предпочтительно к пептидам с более чем 100 аминокислотными остатками, но в общем термины "пептид" и "белок" являются синонимами, и в настоящем документе их используют взаимозаменяемо.
Термин "фармацевтически активный пептид или белок" включает в себя целые белки или полипептиды и, кроме того, он также относится к их фармацевтически активным фрагментам. Также он может включать в себя фармацевтически активные аналоги пептида или белка. Термин "фармацевтически активный пептид или белок" дополнительно включает в себя пептиды и белки, представляющие собой антигены, т.е. введение пептида или белка субъекту вызывает иммунный ответ у субъекта, который может являться терапевтическим или частично или полностью защитным.
Примеры фармацевтически активных белков включают в себя без ограничения цитокины и белки иммунной системы, такие как иммунологически активные соединения (например, интерлейкины, колониестимулирующий фактор (CSF), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), эритропоэтин, фактор некроза опухоли (TNF), интерфероны, интегрины, адресины, селектины, хоминговые рецепторы, Т-клеточные рецепторы, иммуноглобулины, растворяющиеся антигены главного комплекса гистосовместимости, иммунологически активные антигены, такие как бактериальные, паразитарные или вирусные антигены, аллергены, аутоантигены, антитела), гормоны (инсулин, гормон щитовидной железы, катехоламины, гонадотропины, трофические гормоны, пролактин, окситоцин, дофамин, бычий соматотропин, лептины и подобное), гормоны роста (например, гормон роста человека), факторы роста (например, эпидермальный фактор роста, фактор роста нервов, исулиноподобный фактор роста и подобное), рецепторы факторов роста, ферменты (активатор тканевого плазминогена, стрептокиназа, биосинтетический или деструктивный фермент холестерина, стероидогенные ферменты, киназы, фосфодиэстеразы, метилазы, деметилазы, дегидрогеназы, целлюлазы, протеазы, липазы, фосфолипазы, ароматазы, цитохромы, аденилат- или гуанилатциклазы, нейраминидазы и подобное), рецепторы (рецепторы стероидных гормонов, пептидные рецепторы), связывающие белки (связывающие белки гормона роста или фактора роста и подобное), факторы транскрипции и трансляции, подавляющие рост опухолей белки (например, белки, ингибирующие ангиогенез), структурные белки (такие как коллаген, фиброин, фибриноген, эластин, тубулин, актин и миозин), белки крови (тромбин, сывороточный альбумин, фактор VII, фактор VIII, инсулин, фактор IX, фактор X, активатор тканевого плазминогена, белок C, фактор фон Виллебранда, антитромбин III, глюкоцереброзидаза, эритропоэтин, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (GCSF) или модифицированный фактор VIII, антикоагулянты и подобное.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтически активный белок согласно настоящему изобретению представляет собой цитокин, который участвует в регуляции лимфоидного гомеостаза, предпочтительно цитокин, который участвует и предпочтительно индуцирует или усиливает развитие, примирование, экспансию, дифференцировку и/или выживаемость Т-клеток. Согласно одному варианту осуществления цитокин представляет собой интерлейкин. Согласно одному варианту осуществления фармацевтически активный белок согласно настоящему изобретению представляет собой интерлейкин, выбранный из группы, состоящей из IL-2, IL-7, IL-12, IL-15 и IL-21.
Термин "иммунологически активное соединение" относится к любому соединению, изменяющему иммунный ответ, предпочтительно путем индукции и/или угнетения созревания иммунных клеток, индукции и/или угнетения биосинтеза цитокинов, и/или изменяющему гуморальный иммунитет путем стимулирования продукции антител B-клетками. Иммунологически активные соединения обладают сильной иммуностимулирующей активностью, включая в себя без ограничения антивирусную и противоопухолевую активность, а также могут отрицательно регулировать другие аспекты иммунного ответа, например, сдвиг иммунного ответа в сторону от иммунного ответа TH2, что можно использовать для лечения широкого спектра опосредованных TH2 заболеваний. Иммунологически активные соединения можно применять в качестве адъювантов вакцин.
Нуклеиновая кислота согласно настоящему изобретению предпочтительно представляет собой дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) или рибонуклеиновую кислоту (РНК), более предпочтительно РНК, наиболее предпочтительно in vitro транскрибированную РНК (IVT РНК) или синтетическую РНК. Нуклеиновые кислоты включают в себя согласно настоящему изобретению геномную ДНК, кДНК, иРНК, полученные рекомбинантно и химически синтезированные молекулы. Нуклеиновая кислота согласно настоящему изобретению может находиться в форме молекулы, которая является одноцепочечной или двухцепочечной и неразветвленной или ковалентно замкнутой с образованием кольца.
Нуклеиновые кислоты также могут содержаться в векторе. Используемый в настоящем документе термин "вектор" включает в себя любые векторы, известные специалисту в настоящей области техники, включая в себя плазмидные векторы, космидные векторы, такие фаговые векторы, как лямбда-фаг, такие вирусные векторы, как аденовирусные или бакуловирусные векторы, или такие векторы на основе искусственных хромосом, как бактериальные искусственные хромосомы (BAC), дрожжевые искусственные хромосомы (YAC) или P1 искусственные хромосомы (PAC). Указанные векторы включают в себя как экспрессионные, так и клонирующие векторы. Экспрессионные векторы содержат плазмиды, а также вирусные векторы и, как правило, содержат требуемую кодирующую последовательность и соответствующие последовательности ДНК, необходимые для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организме-хозяине (например, организме бактерии, дрожжей, растения, насекомого или млекопитающего) или в in vitro экспрессионных системах. Клонирующие векторы, как правило, используют для конструирования и амплификации определенного требуемого фрагмента ДНК, и в них могут отсутствовать функциональные последовательности, необходимые для экспрессии требуемых фрагментов ДНК.
В контексте настоящего изобретения термин "ДНК" относится к молекуле, которая содержит дезоксирибонуклеотидные остатки и предпочтительно полностью или по существу состоит из дезоксирибонуклеотидных остатков. "Дезоксирибонуклеотид" относится к нуклеотиду, в котором отсутствует гидроксильная группа в 2'-положении β-D-рибофуранозильной группы. Термин "ДНК" предусматривает выделенную ДНК, такую как частично или полностью очищенная ДНК, по существу чистая ДНК, синтетическую ДНК и образованную рекомбинантно ДНК, и включает в себя модифицированную ДНК, которая отличается от встречающейся в природе ДНК, тем, что содержит вставку, делецию, замену и/или изменение одного или нескольких нуклеотидов. Указанные изменения могут включать в себя вставку ненуклеотидного материала, например, на конце(ах) ДНК или внутри, например, на одном или нескольких нуклеотидах ДНК. Нуклеотиды в молекулах ДНК также могут содержать нестандартные нуклеотиды, такие как не встречающиеся в природе нуклеотиды или химически синтезированные нуклеотиды. Указанные измененные ДНК можно назвать аналогами или аналогами встречающихся в природе ДНК.
В контексте настоящего изобретения термин "РНК" относится к молекуле, которая содержит рибонуклеотидные остатки и предпочтительно полностью или по существу состоит из рибонуклеотидных остатков. "Рибонуклеотид" относится к нуклеотиду с гидроксильной группой в 2'-положении β-D-рибофуранозильной группы. Термин "РНК" предусматривает выделенную РНК, такую как частично или полностью очищенная РНК, по существу чистая РНК, синтетическую РНК и образованную рекомбинантно РНК, и включает в себя модифицированную РНК, которая отличается от встречающейся в природе РНК тем, что содержит вставку, делецию, замену и/или изменение одного или нескольких нуклеотидов. Указанные изменения могут включать в себя вставку ненуклеотидного материала, например, на конце(ах) ДНК или внутри, например, на одном или нескольких нуклеотидах РНК. Нуклеотиды в молекулах РНК также могут содержать нестандартные нуклеотиды, такие как не встречающиеся в природе нуклеотиды или химически синтезированные нуклеотиды или дезоксинуклеотиды. Указанные измененные РНК можно назвать аналогами или аналогами встречающихся в природе РНК.
Термин "фармацевтически активная нуклеиновая кислота" означает нуклеиновые кислоты, характеризующиеся биологическими активностями, такими как экспрессия белка, интерференция экспрессии генов или иммуностимуляция. Таким образом, такие нуклеиновые кислоты являются применимыми для интерференции экспрессии генов (например, антисмысловая РНК или киРНК (короткая интерферирующая РНК, или siRNA)), модификации активностей белка (например, аптамеры ДНК или аптамеры РНК) или активации иммунитета (например, киРНК или вакцины на основе ДНК или вакцины на основе иРНК). "Фармацевтически активная нуклеиновая кислота" также может представлять собой нуклеиновую кислоту, которая кодирует фармацевтически активный пептид или белок, или является фармацевтически активной сама по себе, например, характеризуется одной или несколькими фармацевтическими активностями, такими как активности, описанные для фармацевтически активных белков.
Согласно настоящему изобретению термин "нуклеиновая кислота, кодирующая пептид или белок" означает, что нуклеиновая кислота, если она находится в соответствующем окружении, предпочтительно внутри клеток, может управлять сборкой аминокислот с получением пептида или белка во время процесса трансляции. Нуклеиновые кислоты согласно настоящему изобретению предпочтительно способны взаимодействовать с клеточным трансляционным комплексом, обеспечивая трансляцию пептида или белка.
Согласно одному варианту осуществления нуклеиновая кислота представляет собой РНК.
Согласно настоящему изобретению "РНК" относится к одноцепочечной РНК или двухцепочечной РНК и включает в себя информационную РНК (иРНК, или mRNA), транспортную РНК (тРНК, или tRNA), рибосомную РНК (рРНК, или rRNA), малую ядерную РНК (мяРНК, или snRNA), малую ингибирующую РНК (миРНК, или siRNA), малую шпилечную РНК (мшРНК, или shRNA), микроРНК (miRNA), антисмысловую РНК, имуностимулирующую РНК (исРНК, или isRNA) и аптамеры РНК. Согласно предпочтительному варианту осуществления РНК выбрана из группы, состоящей из иРНК, миРНК, мшРНК, микроРНК, антисмысловой РНК, исРНК и аптамеров РНК.
РНК может содержать самокомплементарные последовательности, что позволяет частям РНК сворачиваться и образовывать пары между собой с образованием двойных спиралей. Согласно настоящему изобретению предпочтительными в качестве РНК являются синтетические олигонуклеотиды длиной 6-100, предпочтительно 10-50, в частности 15-30 или 15-20 нуклеотидов или информационная РНК (иРНК) длиной больше чем 50 нуклеотидов, предпочтительно 50-10000, предпочтительно 100-5000, в частности 200-3000 нуклеотидов.
Согласно настоящему изобретению термин "информационная РНК (иРНК)" относится к "транскрипту", который можно создать с использованием матрицы ДНК и который может кодировать пептид или белок. Как правило, иРНК содержит 5'-нетранслируемую область, кодирующую белок область и 3'-нетранслируемую область. В контексте настоящего изобретения иРНК можно создать с помощью in vitro транскрипции из матрицы ДНК. Методика in vitro транскрипции известна специалисту в настоящей области техники. Например, существуют различные коммерчески доступные наборы для in vitro транскрипции.
Согласно настоящему изобретению термин "малая ингибирующая РНК (миРНК)" относится к двухцепочечным коротким (как правило, 19-23, предпочтительно 21 нуклеотид в длину) олигонуклеотидам, которые можно использовать для индукции разрушения целевой иРНК путем распознавания мишени одной цепью миРНК, этот механизм называется РНК-интерференция (RNAi).
Термин "малая шпилечная РНК (мшРНК)" относится к последовательности РНК, делающей крутой поворот шпильки, и ее можно использовать для сайленсинга экспрессии целевого гена с помощью РНК-интерференции.
Термин "микроРНК" относится к малой некодирующей молекуле РНК (как правило, 19-25 нуклеотидов в длину), которая функционирует в транскрипционной и посттранскрипционной регуляции генной экспрессии.
Согласно настоящему изобретению термин "антисмысловая РНК" относится к одноцепочечной РНК, как правило, к синтетическому олигонуклеотиду, разработанному для образования пар между нуклеотидами с целевой клеточной иРНК, таким образом, физически ингибируя процесс трансляции и в конце концов индуцируя разрушение целевой иРНК.
Согласно настоящему изобретению "иммуностимулирующая РНК (исРНК)" относится к РНК, которая может активировать врожденные иммунные рецепторы, такие как, например, эндоплазматический TLR-3, 7 и 8 или цитозольный белок RIG-1. Согласно одному варианту осуществления исРНК содержит один или несколько уридиновых (U) нуклеотидов.
Согласно настоящему изобретению термин "аптамер РНК" относится к РНК, которую благодаря ее точной трехмерной структуре можно использовать в качестве антитела, т.е. заставлять специфически связываться с заданными структурами и, таким образом, активировать или блокировать биологические механизмы.
Согласно настоящему изобретению РНК можно модифицировать. Например, РНК можно стабилизировать с помощью одной или нескольких модификаций, характеризующихся стабилизирующими эффектами на РНК.
Термин "модификация" в контексте РНК, используемой согласно настоящему изобретению, включает в себя любую модификацию РНК, которая не существует в природе в указанной РНК.
Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения РНК, используемая согласно настоящему изобретению, не содержит некэпированных 5'-трифосфатов. Удаление таких некэпированных 5'-трифосфатов можно осуществить путем обработки РНК фосфатазой.
РНК согласно настоящему изобретению может содержать модифицированные встречающиеся или не встречающиеся в природе (синтетические) рибонуклеотиды для увеличения ее стабильности и/или уменьшения цитотоксичности и/или модуляции ее иммуностимулирующего потенциала. Например, согласно одному варианту осуществления в РНК, используемой согласно настоящему изобретению, уридин замещен частично или полностью, предпочтительно полностью, псевдоуридином.
Согласно одному варианту осуществления термин "модификация" относится к обеспечению РНК 5'-кэпом или аналогом 5'-кэпа. Термин "5'-кэп" относится к кэповой структуре, находящейся на 5'-конце молекулы иРНК и, как правило, состоит из гуанозинового нуклеотида, соединенного с иРНК с помощью необычной 5'-5' трифосфатной связи. Согласно одному варианту осуществления указанный гуанозин метилирован в 7-положении. Термин "традиционный 5'-кэп" относится к 5'-кэпу встречающейся в природе РНК, предпочтительно 7-метилгуанозиновому кэпу (m7G). В контексте настоящего изобретения термин "5'-кэп" включает в себя аналог 5'-кэпа, который напоминает структуру кэпа РНК и модифицирован так, чтобы обладать способностью стабилизировать РНК, когда он прикреплен к ней, предпочтительно in vivo и/или в клетке. Обеспечение РНК 5'-кэпом или аналогом 5'-кэпа может быть достигнуто с помощью in vitro транскрипции матрицы ДНК в присутствии указанного 5'-кэпа или аналога 5'-кэпа, причем указанный 5'-кэп котранскрипционно встроен в образованную цепь РНК, или РНК можно образовать, например, с помощью in vitro транскрипции, и 5'-кэп можно образовать посттранскрипционно с использованием кэпирующих ферментов, например, кэпирующих ферментов вируса осповакцины.
РНК может содержать дополнительные модификации. Например, модификация иРНК, используемой согласно настоящему изобретению, может представлять собой удлинение или усечение встречающегося в природе поли(A) хвоста.
Термин "стабильность" РНК относится к "периоду полужизни" РНК. "Период полужизни" относится к периоду времени, необходимому для устранения половины активности, количества или числа молекул. В контексте настоящего изобретения период полужизни РНК является показателем стабильности указанной РНК.
Если согласно настоящему изобретению необходимо уменьшить стабильность РНК, также можно модифицировать РНК так, чтобы препятствовать функционированию элементов, которые, как описано выше, увеличивают стабильность РНК.
Согласно настоящему изобретению РНК можно получить с помощью химического синтеза или in vitro транскрипции соответствующей матрицы ДНК. В контексте настоящего изобретения термин "транскрипция" относится к процессу, в котором генетический код в последовательности ДНК транскрибируется в РНК. Впоследствии РНК может транслироваться в белок. Согласно настоящему изобретению термин "транскрипция" включает в себя "in vitro транскрипцию", причем термин "in vitro транскрипция" относится к процессу, в котором РНК, в частности иРНК, in vitro синтезируют в бесклеточной системе, предпочтительно с использованием клеточных экстрактов. Клонирующие векторы предпочтительно используют для образования транскриптов. Указанные клонирующие векторы, как правило, относят к транскрипционным векторам и согласно настоящему изобретению они включены в термин "вектор". Промотор для контроля транскрипции может представлять собой любой промотор для любой РНК-полимеразы. Конкретные примеры РНК-полимераз представляют собой РНК-полимеразы T7, T3, и SP6. Матрицу ДНК для in vitro транскрипции можно получить путем клонирования нуклеиновой кислоты, в частности кДНК, и введения ее в соответствующий вектор для in vitro транскрипции. кДНК можно получить с помощью обратной транскрипции РНК. Клонирующие векторы предпочтительно используют для получения транскриптов, которые, как правило, относят к транскрипционным векторам.
Термин "трансляция" согласно настоящему изобретению относится к процессу в рибосомах клеток, с помощью которого цепь информационной РНК управляет сборкой последовательности аминокислот с образованием пептида или белка.
Термин "ингибирование генной экспрессии" относится к процессу, при котором олигонуклеотиды РНК (например, одноцепочечную антисмысловую или двухцепочечную миРНК) можно использовать для связывания специфических последовательностей иРНК, индуцируя или деградацию целевой иРНК, и/или блокирование трансляции.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтически активное соединение представляет собой антиген или кодирующую антиген нуклеиновую кислоту или их фрагмент, например, ассоциированный с заболеванием антиген.
Термин "заболевание" относится к аномальному состоянию, поражающему тело индивидуума. Заболевание зачастую рассматривают как медицинское состояние, ассоциированное с конкретными симптомами и признаками. Заболевание может быть вызвано факторами, происходящими из внешнего источника, например, инфекционное заболевание, или оно может быть вызвано внутренними дисфункциями, например, аутоиммунные заболевания.
Согласно настоящему изобретению термин "заболевание" также относится к злокачественному заболеванию. Термины "злокачественное заболевание" или "злокачественное опухоль" (медицинский термин: злокачественное новообразование) относятся к классу заболеваний, при которых группа клеток проявляет неконтролируемый рост (деление за пределами нормы), инвазию (вторжение и разрушение окружающих тканей), и иногда метастазирование (распространение на другие места локализации в организме через лимфу или кровь). Указанные три злокачественных свойства злокачественных опухолей отличают их от доброкачественных опухолей, которые являются самоограничивающимися и не характеризуются инвазией или метастазированием. Большинство злокачественных опухолей образуют опухоль, т.е. набухание или поражение, образованное аномальным ростом клеток (которые называются неопластические клетки или опухолевые клетки), но некоторые, такие как лейкоз, не делают этого. Примеры злокачественных опухолей включают в себя без ограничения карциному, лимфому, бластому, саркому, глиому и лейкоз. Более конкретно примеры таких злокачественных опухолей включают в себя следующее: злокачественная опухоль костей, злокачественная опухоль крови, злокачественная опухоль легкого, злокачественная опухоль печени, злокачественная опухоль поджелудочной железы, злокачественная опухоль кожи, злокачественная опухоль головы или шеи, кожная интраокулярная злокачественная меланома, злокачественная опухоль матки, злокачественная опухоль яичника, злокачественная опухоль прямой кишки, злокачественная опухоль анальной области, злокачественная опухоль желудка, злокачественная опухоль толстой кишки, злокачественная опухоль молочной железы, злокачественная опухоль предстательной железы, злокачественная опухоль матки, карцинома половых и репродуктивных органов, болезнь Ходжкина, злокачественная опухоль пищевода, злокачественная опухоль тонкого кишечника, злокачественная опухоль эндокринной системы, злокачественная опухоль щитовидной железы, злокачественная опухоль паращитовидной железы, злокачественная опухоль надпочечника, саркома мягкой ткани, злокачественная опухоль мочевого пузыря, злокачественная опухоль почки, почечно-клеточная карцинома, карцинома почечной лоханки, новообразование центральной нервной системы (ЦНС), нейроэктодермальная злокачественная опухоль, опухоли позвоночника, глиома, менингиома и аденома гипофиза. Термин "злокачественная опухоль" согласно настоящему изобретению также включает в себя метастазы злокачественной опухоли.
Злокачественная меланома представляет собой серьезный тип злокачественной опухоли кожи. Он обусловлен неконтролируемым ростом пигментных клеток, которые называются меланоциты.
Согласно настоящему изобретению "карцинома" представляет собой злокачественную опухоль, происходящую из эпителиальных клеток. Указанная группа представляет наиболее распространенные злокачественные опухоли, включая в себя распространенные формы злокачественной опухоли молочной железы, предстательной железы, легких и толстой кишки.
Лимфома и лейкоз представляют собой злокачественные опухоли, происходящие из гемопоэтических (кроветворных) клеток.
Саркома представляет собой злокачественную опухоль, возникающую из трансформированных клеток в одной из тех тканей, которые развиваются из эмбриональной мезодермы. Таким образом, саркомы включают в себя опухоли костной, хрящевой, жировой, мышечной, сосудистой и гемопоэтической тканей.
Властная опухоль, или бластома, представляет собой опухоль (как правило, злокачественную), которая напоминает незрелую или эмбриональную ткань. Многие из указанных опухолей наиболее часто встречаются у детей.
Глиома представляет собой тип опухоли, берущей начало в головном или спинном мозге. Он называется «глиома», поскольку возникает из глиальных клеток. Наиболее распространенным местом локализации глиом является головной мозг.
Под "метастазированием" подразумевают распространение злокачественных клеток из их исходного места расположения на другую часть организма. Образование метастазов представляет собой очень сложный процесс, и он зависит от открепления злокачественных клеток от первичной опухоли, инвазии внеклеточного матрикса, проникновения через эндотелиальные базальные мембраны для входа в полости тела и сосуды, и затем, после транспортировки с кровью, инфильтрации целевых органов. В конце концов, рост новой опухоли, т.е. вторичной опухоли или метастатической опухоли, в целевой локализации зависит от ангиогенеза. Метастазирование опухоли зачастую происходит даже после удаления первичной опухоли, поскольку клетки или компоненты опухоли могут оставаться и развивать метастатический потенциал. Согласно одному варианту осуществления термин "метастазирование" согласно настоящему изобретению относится к "отдаленному метастазированию", которое относится к метастазированию, которое является удаленным от первичной опухоли и системы региональных лимфатических узлов.
Термин "инфекционное заболевание" относится к любому заболеванию, которое может передаваться от индивидуума к индивидууму или от организма к организму, и вызвано агентом-микроорганизмом (например, простуда). Примеры инфекционных заболеваний включают в себя такие вирусные инфекционные заболевания, как СПИД (ВИЧ), гепатит A, B или C, герпес, опоясывающий герпес (ветряная оспа), краснуха (вирус краснухи), желтая лихорадка, лихорадка денге и т.д., флавивирусы, вирусы гриппа, геморрагические инфекционные заболевания (вирусы Марбург или Эбола), и тяжелый острый респираторный синдром (SARS), такие бактериальные инфекционные заболевания, как болезнь легионеров (Legionella), венерические заболевания (например, хламидиоз или гонорея), язва желудка (Helicobacter), холера (Vibrio), туберкулез, дифтерия, инфекции, вызванные Е. coli, Staphylococci, Salmonella или Streptococci (столбняк); инфекции, вызванные протозойными патогенами, такие как малярия, сонная болезнь, лейшманиоз; токсоплазмоз, т.е. инфекции, вызванные Plasmodium, Trypanosoma, Leishmania и Toxoplasma; или грибковые инфекции, вызванные, например, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis, Blastomyces dermatitidis или Candida albicans.
Термин "аутоиммунное заболевание" относится к любому заболеванию, при котором организм производит иммуногенный ответ (т.е. ответ иммунной системы) на некоторые составляющие своей собственной ткани. Иными словами, иммунная система теряет свою способность распознавать определенную ткань или систему в организме как собственную и нацеленно воздействует на нее и атакует ее так, как если бы она была чужеродной. Аутоиммунные заболевания можно классифицировать на те, при которых поражен предпочтительно один орган (например, гемолитическая анемия и аутоиммунный тиреоидит), и те, при которых процесс аутоиммунного заболевания распространен на многие ткани (например, системная красная волчанка). Например, рассеянный склероз, как полагают, вызван Т-клетками, атакующими оболочки, окружающие нервные волокна головного и спинного мозга. Это приводит к потере координации, слабости и расфокусированному зрению. Аутоиммунные заболевания известны в настоящей области техники и включают в себя, например, тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, волчанку, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, гемолитическую анемию, аутоиммунный тиреоидит, системную красную волчанку, целиакию, болезнь Крона, колит, сахарный диабет, склеродермию, псориаз и подобное.
Термин "антиген" относится к агенту, содержащему эпитоп, против которого должен быть сформирован иммунный ответ. Термин "антиген" включает в себя, в частности, белки, пептиды, полисахариды, нуклеиновые кислоты, в частности РНК и ДНК, и нуклеотиды. Термин "антиген" также включает в себя агенты, которые становятся антигенными - и сенсибилизирующими - только путем трансформации (например, непосредственно в молекуле или за счет дополнения белком организма). Антиген предпочтительно презентируется клетками иммунной системы, такими как антигенпрезентирующие клетки, например, дендритные клетки или макрофаги. Кроме того, антиген или продукт его процессинга предпочтительно распознаются T- или B-клеточным рецептором или молекулой иммуноглобулина, такой как антитело. Согласно предпочтительному варианту осуществления антиген представляет собой ассоциированный с заболеванием антиген, такой как ассоциированный с опухолью антиген, вирусный антиген или бактериальный антиген.
Термин "ассоциированный с заболеванием антиген" используют в самом широком смысле, чтобы обозначить любой антиген, ассоциированный с заболеванием. Ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой молекулу, содержащую эпитопы, которые будут стимулировать иммунную систему хозяина производить клеточную антиген-специфический иммунный ответ и/или гуморальный ответ антитела против заболевания. Таким образом, ассоциированный с заболеванием антиген можно использовать для терапевтических целей. Ассоциированные с заболеванием антигены предпочтительно ассоциированы с инфекцией, вызванной микроорганизмами, как правило, антигены микроорганизмов, или ассоциированы со злокачественной опухолью, как правило, опухолями.
Термин "заболевание с участием антигена" относится к любому заболеванию, в которое вовлечен антиген, например, заболеванию, которое характеризуется присутствием антигена. Заболевание с участием антигена может представлять собой инфекционное заболевание, аутоиммунное заболевание или злокачественное заболевание или просто злокачественную опухоль. Как указано выше, антиген может представлять собой ассоциированный с заболеванием антиген, такой как ассоциированный с опухолью антиген, вирусный антиген или бактериальный антиген.
Согласно одному варианту осуществления ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой ассоциированный с опухолью антиген. Пораженный заболеванием орган или ткань предпочтительно характеризуются пораженными заболеванием клетками, такими как злокачественные клетки, экспрессирующие ассоциированный с заболеванием антиген и/или характеризуются ассоциацией ассоциированного с заболеванием антигена с их поверхностью. Иммунизация с помощью интактных или по существу интактных ассоциированных с опухолью антигенов или их фрагментов, таких как пептиды МНС I класса и II класса или нуклеиновыми кислотами, в частности иРНК, кодирующими такой антиген или фрагмент, обеспечивает возможность вызывать ответ МНС I класса и/или II класса и, таким образом, стимулировать такие Т-клетки, как CD8+ цитотоксические Т-лимфоциты, которые способны лизировать злокачественные клетки и/или CD4+ Т-клетки. Такая иммунизация также может вызывать гуморальный иммунный ответ (B-клеточный ответ), что приводит к продукции антител к ассоциированному с опухолью антигену. Кроме того, антигенпрезентирующие клетки (APC), такие как дентдритные клетки (DC), можно нагрузить пептидами, презентирующими МНС I класса, путем трансфекции нуклеиновыми кислотами, кодирующими опухолевые антигены in vitro, и введения пациенту. Согласно одному варианту осуществления термин "ассоциированный с опухолью антиген" относится к составляющей злокачественных клеток, которая может происходить из цитоплазмы, клеточной поверхности и ядра клетки. В частности, он относится к тем антигенам, которые производятся, предпочтительно в большом количестве, внутриклеточно или в качестве поверхностных антигенов на опухолевых клетках. Примеры опухолевых антигенов включают в себя без ограничения HER2, EGFR, VEGF, CAMPATH1-антиген, CD22, CA-125, HLA-DR, антиген лимфомы Ходжкина или муцин-1.
Согласно настоящему изобретению ассоциированный с опухолью антиген предпочтительно включает в себя любой антиген, который представляет собой характеристику опухолей или злокачественных опухолей, а также опухолевых или злокачественных клеток относительно типа и/или уровня экспрессии. Согласно одному варианту осуществления термин "ассоциированный с опухолью антиген" относится к белкам, которые при нормальных условиях, т.е. у здорового субъекта, специфически экспрессируются в ограниченном количестве органов и/или тканей или на конкретных стадиях развития, например, ассоциированный с опухолью антиген при нормальных условиях может специфически экспрессироваться в ткани желудка, предпочтительно в слизистой желудка, в репродуктивных органах, например, в яичке, в трофобластной ткани, например, в плаценте, или в клетках зародышевой линии, и экспрессируется или аномально экспрессируется в одной или нескольких тканях опухоли или злокачественной опухоли. В указанном контексте "ограниченное количество" предпочтительно означает не больше чем 3, более предпочтительно не больше чем 2 или 1. Ассоциированные с опухолью антигены в контексте настоящего изобретения включают в себя, например, антигены дифференцировки, предпочтительно антигены дифференцировки, специфической для типа клеток, т.е., белки, при нормальных условиях специфически экспрессирующиеся в определенном типе клеток на определенной стадии дифференцировки, антигены злокачественной опухоли/яичка, т.е., белки, при нормальных условиях специфически экспрессирующиеся в яичке и иногда в плаценте, и специфические для зародышевой линии антигены. В контексте настоящего изобретения ассоциированный с опухолью антиген предпочтительно не экспрессируется или редко экспрессируется в нормальных тканях или является мутированным в опухолевых клетках. Предпочтительно ассоциированный с опухолью антиген или аномальная экспрессия ассоциированного с опухолью антигена идентифицирует злокачественные клетки. В контексте настоящего изобретения ассоциированный с опухолью антиген, который экспрессируется злокачественной клеткой у субъекта, например, пациента, страдающего от злокачественного заболевания, предпочтительно представляет собой собственный белок указанного субъекта. Согласно предпочтительным вариантам осуществления ассоциированный с опухолью антиген в контексте настоящего изобретения экспрессируется при нормальных условиях специфически в ткани или органе, которые не являются жизненно необходимыми, т.е. ткани или органы, повреждение которых со стороны иммунной системы, не приведет к смерти субъекта, или в органах или структурах организма, которые являются недоступными или тяжело доступными для иммунной системы. Ассоциированный с опухолью антиген предпочтительно презентируется в контексте молекул МНС злокачественной клеткой, в которой он экспрессируется.
Примеры антигенов дифференцировки, которые идеально соответствуют критериям ассоциированных с опухолью антигенов, предусмотренных настоящим изобретением в качестве целевых структур в противоопухолевой иммунотерапии, в частности, в противоопухолевой вакцинации, представляют собой белки клеточной поверхности семейства Claudin, такие как CLDN6 и CLDN18.2. Указанные антигены дифференцировки экспрессируются в опухолях различного происхождения и особенно являются подходящими в качестве целевых структур в связи с опосредованной антителами противораковой иммунотерапией вследствие своей селективной экспрессии (отсутствие выраженной токсичности в отношении нормальной ткани и локализации относительно плазматической мембраны.
Дополнительные примеры антигенов, которые можно использовать согласно настоящему изобретению, представляют собой р53, ART-4, BAGE, бета-катенин/m, Bcr-abL CAMEL, САР-1, CASP-8, CDC27/m, CDK4/m, CEA, CLAUDIN-12, c-MYC, CT, Cyp-B, DAM, ELF2M, ETV6-AML1, G250, GAGE, GnT-V, Gap100, HAGE, HER-2/neu, HPV-E7, HPV-E6, HAST-2, hTERT (или hTRT), LAGE, LDLR/FUT, MAGE-A, предпочтительно MAGE-A1, MAGE-A2, MAGE-A3, MAGE-A4, MAGE-A5, MAGE-A6, MAGE-A7, MAGE-A8, MAGE-A9, MAGE-A10, MAGE-A11, или MAGE-A12, MAGE-B, MAGE-C, MART-1 /Melan-A, MC1R, миозин/m, MUC1, MUM-1, -2, -3, NA88-A, NF1, NY-ESO-1, NY-BR-1, p190 минорный BCR-abL, Pm1/RARa, PRAME, протеиназу 3, PSA, PSM, RAGE, RU1 или RU2, SAGE, SART-1 или SART-3, SCGB3A2, SCP1, SCP2, SCP3, SSX, SURVIVIN, TEL/AML1, TPI/m, TRP-1, TRP-2, TRP-2/INT2, ТРТЕ и WT, предпочтительно WT-1.
Термин "вирусный антиген" относится к любому вирусному компоненту, характеризующемуся антигенными свойствами, т.е. способному вызывать иммунный ответ индивидуума. Вирусный антиген может представлять собой вирусный рибонуклеопротеин или белок оболочки.
Термин "бактериальный антиген" относится к любому бактериальному компоненту, характеризующемуся антигенными свойствами, т.е. способному вызывать иммунный ответ индивидуума. Бактериальный антиген может происходить из клеточной стенки или цитоплазматической мембраны бактерии.
Используемый в настоящем документе термин "иммунный ответ" относится к реакции иммунной системы на такие иммуногенные организмы, как бактерии или вирусы, клетки или вещества. Термин "иммунный ответ" включает в себя врожденный иммунный ответ и приобретенный иммунный ответ. Иммунный ответ предпочтительно связан с активацией иммунных клеток, индукций биосинтеза цитокинов и/или продукцией антител.
Согласно настоящему изобретению термин "лечение заболевания" включает в себя излечение, сокращение продолжительности, уменьшение интенсивности, замедление или ингибирование прогрессирования или ухудшения заболевания или его симптомов.
Термин "иммунотерапия" относится к лечению, которое предпочтительно предусматривает специфическую иммунную реакцию и/или иммунную эффекторную(ые) функцию(и).
Термин "иммунизация" или "вакцинация" описывает способ лечения субъекта для терапевтических или профилактических целей.
Используемый в настоящем документе термин "субъект" предпочтительно относится к млекопитающим. Например, млекопитающие в контексте настоящего изобретения представляют собой людей, не являющихся людьми приматов, таких одомашненных животных, как собаки, кошки, овцы, крупный рогатый скот, козы, свиньи, лошади и т.д., таких лабораторных животных, как мыши, крысы, кролики, морские свинки и т.д., а также таких животных в неволе, как животные зоопарков. Согласно предпочтительному варианту осуществления субъект представляет собой человека.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрен способ получения фармацевтической композиции, причем способ предусматривает:
- получения водного состава согласно представленному выше определению; и
- смешивание водного состава с фармацевтически активным соединением.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтически активное соединение включает в себя нуклеиновую кислоту, причем нуклеиновая кислота предпочтительно предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением pH между 6 и 8.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрена фармацевтическая композиция, полученная с помощью способа согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтическая композиция содержит липосомы, наполненные фармацевтически активным соединением.
Согласно одному варианту осуществления фармацевтическая композиция содержит липоплексы нуклеиновых кислот.
Используемые в настоящем документе термины "липоплекс нуклеиновых кислот" или "липоплекс" относятся к комплексу липидов и нуклеиновых кислот, таких как ДНК или РНК, предпочтительно РНК. Липоплексы образуются спонтанно, когда катионные липиды (например, в форме катионных липосом, которые зачастую также включают в себя нейтральные хелперные липиды), катионные полимеры и другие вещества с положительными зарядами смешивают с нуклеиновыми кислотами, и, как было показано, таким образом можно доставлять нуклеиновые кислоты в клетки. Согласно одному варианту осуществления липоплексы характеризуются средним диаметром в диапазоне от приблизительно 50 нм до приблизительно 1000 нм, предпочтительно от приблизительно 100 нм до приблизительно 800 нм, предпочтительно от приблизительно 200 нм до приблизительно 600 нм, например, приблизительно 300 нм - приблизительно 500 нм.
Средний "диаметр" или "размер" частиц на основе липидов (например, липосом или липоплексов), описанных в настоящем документе, представляет собой, как правило, "номинальный размер" или заданный размер частиц на основе липидов, полученных согласно установленному способу. Размер может представлять собой определенную прямым измерением величину, такую как средний или максимальный диаметр, или его можно определить с помощью непрямого анализа, такого как скрининг-анализ фильтрации. Прямое измерение размера частиц, как правило, проводят с помощью динамического рассеяния света. Зачастую результаты измерений с помощью динамического рассеяния света выражают как Zсредний (величина среднего размера) и коэффициент полидисперсности, PI или PDI (величина по ли дисперсности). Поскольку во время процесса производства возникает небольшое отклонение в размере, отклонение до 40% заявленного измерения является приемлемым и считается находящимся в пределах заявленного размера. Альтернативно размер можно установить с помощью скрининг-анализа фильтрации. Например, препарат частиц меньше заявленного размера, если по меньшей мере 97% частиц проходят через "сетчатый" фильтр заявленного размера.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH ассоциирован с липосомами и/или липоплексами.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению предпочтительно являются стерильными и содержат эффективное количество липидов или частиц на основе липидов (например, липосом или липоплексов). Фармацевтические композиции также могут содержать дополнительные средства, обсуждаемые в настоящем документе, такие как дополнительное терапевтическое средство или антиген. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению дополнительно могут содержать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей и/или вспомогательных веществ. Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению дополнительно может содержать по меньшей мере один адъювант.
"Эффективное количество" относится к количеству, которое достигает требуемой реакции или требуемого эффекта отдельно или вместе с дополнительными дозами. В случае лечения конкретного заболевания или конкретного состояния требуемая реакция предпочтительно относится к ингибированию течения заболевания. Это включает в себя замедление прогрессирования заболевания и, в частности, прерывание или смену на противоположное направление прогрессирования заболевания. Требуемая реакция в лечении заболевания или состояния также может представлять собой задержку возникновения или профилактику возникновения указанного заболевания или указанного состояния. Эффективное количество будет зависеть от подлежащего лечению состояния, тяжести заболевания, индивидуальных параметров пациента, включая в себя возраст, физиологическое состояние, размеры тела и массу, продолжительность лечения, тип сопутствующей терапии (если она имеет место), конкретный путь введения и аналогичные факторы. Соответственно, вводимые дозы могут зависеть от различных перечисленных параметров. В случае, когда реакция у пациента является недостаточной при использовании начальной дозы, можно использовать повышенную дозу (или эффективно повышенную дозу, достигнутую с помощью другого, более локализованного пути введения).
Описанные в настоящем документе фармацевтические композиции можно вводить любым общепринятым путем. Согласно одному варианту осуществления фармацевтическая композиция составлена для системного введения. Согласно настоящему изобретению системное введение предпочтительно осуществляют с помощью парентерального введения, включая в себя инъекцию или инфузию, например, внутривенно, интраартериально, подкожно, введение в лимфатический узел, интрадермально или внутримышечно.
Композиции, подходящие для парентерального введения, как правило, содержат стерильный водный или неводный препарат активного соединения, который предпочтительно является изотоническим крови реципиента. Примеры совместимых носителей и разбавителей/растворителей представляют собой стерильную воду (например, воду для инъекций), раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, как правило, стерильные, нелетучие масла используют в качестве раствора или суспензионной среды.
Используемый в настоящем документе термин "фармацевтически приемлемый" относится к отсутствию токсичности материала, который предпочтительно не взаимодействует с действием активного компонента фармацевтической композиции.
Используемый в настоящем документе термин "вспомогательное вещество" относится ко всем веществам, которые могут присутствовать в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению и которые не представляют собой активные ингредиенты, таким как, например, носители, связующие, смазывающие вещества, загустители, поверхностно-активные средства, консерванты, эмульгаторы, буферы, ароматизаторы или красители.
Термин "адъювант" относится к соединениям, которые пролонгируют, или повышают, или усиливают иммунный ответ. В этом отношении возможны различные механизмы в зависимости от разных типов адъювантов. Например, соединения, которые обеспечивают созревание DC, например, липополисахариды или лиганд CD40, образуют первый класс приемлемых адъювантов. Как правило, любое средство, которое воздействует на иммунную систему по типу "сигнала опасности" (LPS, GP96, дцРНК и т.д.) или цитокинов, таких как GM-CSF, можно использовать в качестве адъюванта, который обеспечивает возможность интенсифицировать и/или влиять на иммунную систему контролируемым способом. Олигодезоксинуклеотиды CpG необязательно также можно использовать в этом контексте, хотя следует принимать во внимание их побочные эффекты, которые возникают при определенных обстоятельствах, как объяснено выше. Наиболее предпочтительные адъюванты представляют собой такие цитокины, как монокины, лимфокины, интерлейкины или хемокины, например, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, INFα, INF-γ, GM-CSF, LT-α, или факторы роста, например, hGH. Дополнительно известные адъюванты представляют собой гидроксид алюминия, адъювант Фрейнда или такое масло, как Montanide®, наиболее предпочтительно Montanide® ISA51. Такие липопептиды, как Pam3Cys, также являются приемлемыми для использования в качестве адъювантов в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению также можно использовать совместно с другим терапевтическим средством, которое можно вводить до, одновременно или после введения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению. Такие терапевтические средства включают в себя иммуномодулирующие средства, которые могут являться иммуностимулирующими или иммунодепрессивными, химиотерапевтические лекарственные средства для пациентов со злокачественными опухолями, например, гемцитабин, этопофос, цисплатин, карбоплатин, противовирусные средства, противопаразитарные средства или антибактериальные средства, и при введении одновременно, они могут присутствовать в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению.
Фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению можно использовать для индукции иммунного ответа, в частности иммунного ответа против ассоциированного с заболеванием антигена или клеток, экспрессирующих ассоциированный с заболеванием антиген, такого как иммунный ответ против злокачественной опухоли. Соответственно, фармацевтическую композицию можно использовать для профилактического и/или терапевтического лечения заболевания с участием ассоциированного с заболеванием антигена или клеток, экспрессирующих ассоциированный с заболеванием антиген, такого как злокачественная опухоль. Указанный иммунный ответ предпочтительно представляет собой T-клеточный ответ. Согласно одному варианту осуществления ассоциированный с заболеванием антиген представляет собой опухолевый антиген.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрена фармацевтическая композиция или набор согласно представленному в настоящем документе определению для применения в способе лечения или профилактики заболевания или для применения в способе иммуностимуляции.
Настоящее изобретение также относится к применению фармацевтической композиции или набору согласно представленному в настоящем документе определению в производстве лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания или для применения в способе иммуностимуляции.
Согласно настоящему изобретению также предусмотрен способ лечения или профилактики заболевания или способ иммуностимуляции, причем способы предусматривают стадию введения фармацевтической композиции согласно представленному в настоящем документе определению нуждающемуся в этом субъекту.
В конце концов, согласно настоящему изобретению предусмотрен способ химической стабилизации водного состава, содержащего по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, предпочтительно сложноэфирных связей, причем способ предусматривает:
- доведение pH водного состава до значения pH между 2 и 5,5.
Согласно одному варианту осуществления химическая стабилизация происходит путем ингибирования гидролиза сложноэфирной связи, тиоэфирной связи и/или амидной связи, предпочтительно гидролиза сложноэфирной связи.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один из липидов, присутствующих в водном составе, представляет собой катионный липид, предпочтительно катионный липид согласно представленному в настоящем документе определению.
Согласно одному варианту осуществления общий суммарный заряд липидов, присутствующих в водном составе, является положительным.
Согласно одному варианту осуществления pH доводят до значения pH между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4. Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления водный состав характеризуется значением pH между 3,1 и 3,9.
Согласно одному варианту осуществления pH водного липидного состава доводят с помощью добавления по меньшей мере одного регулятора pH, предпочтительно по меньшей мере одного регулятора pH согласно представленному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один липид, характеризующийся одной или несколькими связями, выбранными из группы, состоящей из сложноэфирных связей, тиоэфирных связей и амидных связей, соответствует приведенному выше определению.
Согласно одному варианту осуществления липиды, присутствующие в водном составе, образуют липосомы.
Согласно одному варианту осуществления по меньшей мере один регулятор pH ассоциирован с липосомами.
Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые не следует рассматривать как ограничивающие объем настоящего изобретения.
Примеры
Материалы
- (R)-N,N,N-триметил-2,3-диолеилокси-1-1-пропанаминийхлорид (R-DOTMA), Merck & Cie.
- 1,2-диолеоил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин (DOPE), Corden Pharma
- Этанол 99,5%, Европейская фармакопея, Carl Roth
- Уксусная кислота, фармакопея США (USP), AppliChem
- Ацетат натрия USP, AppliChem
- Буфер HEPES, Life Technologies
- Вода для инъекций, Baxter
- 1 мл шприц inject-F, В. Braun
- 0,9×40 мм игла Microlance 3, BD
- Стеклянные флаконы R6 типу I, Wheaton
- 20 мм алюминиевые колпачки, Wheaton
- 20 мм бутилкаучуковые пробки, Wheaton
Пример 1: Получение липосом
Все материалы в контакте с растворами и препаратами липосом являлись стерильными и одноразовыми. Липосомы получали с помощью так называемой техники на основе инъекции этанола (Batzri and Korn, 1973), при которой липиды, растворенные в этаноле, вводили с помощью инъекции в водную фазу при перемешивании.
Соотношения липидов и концентрации липидов в этаноле варьировали в зависимости от требуемого состава и размера частиц. Для липосом DOTMA/DOPE раствор этанола содержал DOTMA и DOPE в молярном соотношении, составляющем 2:1 при концентрации общего липида, составляющей приблизительно 330 мМ. Для липосом DOTAP/DOPE раствор этанола содержал DOTAP и DOPE в молярном соотношении, составляющем 2:1 при концентрации общего липида, составляющей приблизительно 330 мМ. Раствор стерилизовали путем фильтрации через фильтр с размером пор, составляющим 0,2 мкм (Millipore Millex MP).
Стерильные липидные растворы в этаноле затем вводили с помощью инъекции в одноразовую роллерную колбу, содержащую водную фазу, и перемешивали со скоростью, составляющей 150 об/мин в течение по меньшей мере одного часа. Водная фаза представляла собой или воду для инъекций (wfi) или фильтрованную через Milli-Q воду с проводимостью, составляющей 1,3 мкСм/см при 25°C, или представляла собой буферный раствор, полученный из буферных солей и кислот согласно указанному. Все материалы характеризовались фармацевтической квалификацией. Инъекцию проводили до конечной концентрации липида, составляющей 5-10 мМ, в зависимости от эксперимента. Большинство экспериментов проводили при конечной концентрации общего липида в водной фазе, составляющей 6,6 мМ.
Полученные липосомные препараты фильтровали через целлюлозоацетатный фильтр с размером пор, составляющим 0,45 мкм. Препараты фильтратов затем разбавляли с помощью дисперсионного раствора до требуемой концентрации и хранили в пакетах для проведения биопроцессов. Для стандартных экспериментов 4 мМ выбирали в качестве конечной концентрации. Температура хранения перед проведением экспериментов в отношении стабильности pH составляла 2-5°C.
Пример 2: Стабильность липосом DOTMA/DOPE в зависимости от значения pH
Стабильность DOPE в липосомах DOTMA/DOPE исследовали после доведения pH до различных значений от pH 7 до pH 4. Для pH 7 использовали 10 мМ буфер HEPES. Для всех низких значений pH использовали буферы на основе уксусной кислоты (все 10 мМ) (см. таблицу 1). Стеклянные флаконы R6 I типа заполняли 2 мл дисперсией липосом и хранили в климатической камере при 37°C. Значение pH измеряли с помощью потенциометрии с использованием pH-метра WTW inoLab pH 7310, Вайльхайм, Германия
Стабильность липидов анализировали в различные моменты времени до 6 недель после получения липосом путем измерения концентрации липидов в липосомном препарате с использованием системы ВЭРХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии) (Agilent Technologies 1200, оснащенная детекторами DAD и ELSD, Санта-Клара, Калифорния, США).
Результаты представлены на фигуре 1. На фигуре представлено нормированное извлечение DOPE (в процентах) из липосом DOTMA/DOPE. Показан только DOPE, поскольку для DOTMA, при всех условиях, не получили ни одного показателя деградации, что обусловлено тем фактом, что DOTMA содержит простые эфирные связи вместо сложноэфирных связей. Липосомы в водной фазе с самым низким значением pH, pH 4, показали самую лучшую стабильность без какой-либо значительной деградации через 6 недель. Напротив, при pH 5, наблюдали уже значительную деградацию с извлечением только 80% от начального значения. Стабильность уменьшалась с увеличением pH, и самую высокую деградацию наблюдали для pH 6 и pH 7 (диапазон, в котором прогнозировали самую лучшую стабильность).
Пример 3: Влияние концентрации буфера на стабильность липосом
Дополнительно исследовали стабильность DOPE в липосомах DOTMA/DOPE (DOTMA : DOPE при 2:1 молярном соотношении) в диапазоне низких значений pH. В настоящем эксперименте даже пониженное значение pH исследовали путем добавления чистой уксусной кислоты (10 мМ). Буферы на основе уксусной кислоты добавляли в трех различных концентрациях, а именно 1 мМ, 5 мМ и 10 мМ. Образцы подвергали стрессовому воздействию при 40°C в течение 5 недель.
На фигуре 2 извлечение DOPE представлено для различных условий. Для подтверждения результатов эксперимента, описанного в примере 2 (фигура 1), стабильность непрерывно улучшали путем понижения pH. Чистая уксусная кислота (10 мМ; pH 3,2) оказалась по меньшей мере такой ж эффективной или лучшей, чем ацетатный буфер pH 3,5 (AcB) при одинаковой концентрации. Стабилизирующий эффект кислотных буферов зависел от концентрации, что можно наиболее явно увидеть при pH 5 и 6. Можно заметить тенденцию того, что повышенные концентрации буфера давали в результате лучшую защиту от гидролиза. При очень низких значениях pH этот эффект был менее выраженным. Можно сделать вывод, что добавление чистой уксусной кислоты до соответствующей концентрации может представлять собой простой и прямой путь достижения стабилизации DOPE по отношению к сложноэфирному гидролизу.
Пример 4: Сравнение результатов исследований с использованием различных стрессовых воздействий
На фигуре 3 обобщенно представлен результат нескольких независимых исследований влияния стрессовых условий. В каждом случае липосомы DOTMA/DOPE подвергали стрессовому воздействию в уксусной кислоте и буферных растворах уксусной кислоты (все 10 мМ) при разных значениях pH при 40°C. Представлены результаты через 5 или 6 недель (квадраты разного цвета). Сплошную линию изображали для визуализации общей тенденции.
Можно легко увидеть корреляцию между стабильностью липидов и значением pH. Максимальную стабильность получали в диапазоне значений pH ниже 4, где защитный эффект, как можно увидеть, достигал плато. Пониженные значения pH или повышенные концентрации буфера/кислоты могут приводить даже к лучшей защите от гидролиза. Тем не менее в данном контексте очень высокие концентрации буфера или очень низкие значения pH не являются желательными, поскольку такие жесткие условия не должны использовать в составах для введения пациентам.
Пример 5: Стабильность липосом DOTAP/DOPE в зависимости от значения pH
В настоящем исследовании изучали стабильность липосом из DOTAP вместо DOTMA. DOTAP представляет собой катионный липид со структурой, аналогичной DOTMA, но он содержит сложноэфирные связи вместо простых эфирных связей. В связи с этим, DOTAP должен быть подвержен сложноэфирному гидролизу аналогично DOPE. Кроме замены DOTMA на DOTAP, все другие условия оставались неизменными.
На фигуре 4 результаты измерений извлечения липидов через две недели при 40°C показаны для разных условий pH в водной фазе. Показаны результаты как для DOTAP, так и DOPE. Происходил гидролиз обоих липидов, причем общее поведение было эквивалентным и аналогичным тому, которое наблюдали для DOPE в липосомах DOTMA/DOPE. Таким образом, гидролиз DOTAP можно было предупредить таким же образом, как и гидролиз DOPE путем добавления кислотных буферов или таких кислот, как уксусная кислота.
Пример 6: Сравнение деградации DOPE в липосомах DOTMA/DOPE в воде для инъекций с добавлением или без добавления 5 мМ уксусной кислоты
Добавление уксусной кислоты анализировали в отношении стабилизации липосом для фармацевтического применения, которые предварительно получали в чистой воде для инъекций (wfi). На фигуре 5 показаны результаты исследований влияния стрессовых условий с добавлением и без добавления уксусной кислоты. Для стабилизированных липосом 5 мМ уксусной кислоты добавляли к водной фазе перед образованием липосом. Показаны результаты измерений извлечения DOPE через 3 месяца хранения при трех различных температурах, 5°C, 25°C и 40°C. Во всех трех случаях извлечение было выше, когда уксусная кислота присутствовала в водной фазе. Эффект становился более выраженным при повышенных температурах (стрессовые условия) и наиболее явно выраженным при 40°C, где извлечение можно было повысить от приблизительно 60% до приблизительно 90%.
При сравнении стабильности при различных температурах добавление 5 мМ уксусной кислоты характеризовалось эффектом, аналогичным понижению температуры хранения на 15 до 35°C. Принимая во внимание эмпирическое правило, что понижение температуры на 10°C приводит к уменьшению скорости гидролиза в два раза, это будет соответствовать повышению стабильности (или уменьшению скорости гидролиза) при заданной температуре приблизительно в 4 раза (принимая за основу эффект, эквивалентный понижению температуры на 20°C).
Пример 7: Образование липоплексов
pH-стабилизированные липосомы DOTMA/DOPE использовали для образования составов липоплексов РНК для внутривенной инъекции с эквивалентным или лучшим качеством в отношении физико-химических характеристик по сравнению с липоплексами, полученными из липосом, которые не являлись pH-стабилизированными.
Липоплексы РНК получали согласно следующему протоколу:
1. Добавление 4 мл 0,9% раствора NaCl к 1,1 мл РНК;
2. Добавление 0,4 мл липосом к смеси РНК/NaCl; и
3. Уравновешивание в течение 3 минут при комнатной температуре.
В таблице 2 показаны результаты определения физико-химических характеристик липосом и липоплексов. Диаметр липосом измеряли с помощью динамического рассеяния света с использованием PSS-Nicomp 380 ZLS, Санта-Барбара, Калифорния, США. Наряду с тем, что размер и коэффициент полидисперсности (PDI) липосом с добавлением уксусной кислоты были несколько меньше, чем у липосом без добавления уксусной кислоты, размер частиц липоплексов был несколько больше, чем без добавления уксусной кислоты, тогда как коэффициент полидисперсности был меньше. Больший размер считается благоприятным с точки зрения биологической активности, тогда как меньший коэффициент полидисперсности является благоприятным с точки зрения требований к качеству. Количество суб-видимых частиц, которые не должны присутствовать в продуктах для инъекций выше определенных пороговых значений, было значительно ниже, если стабилизированные липосомы использовали для получения липоплексов. Значение pH конечного состава составляло выше 6 и, таким образом, хорошо подходило для инъекции. Осмолярность являлась эквивалентной физиологическим условиям.
Пример 8: Биологическая оценка липоплексов
Биологическую активность липоплексов, образованных из pH-стабилизированных липосом (добавление уксусной кислоты), исследовали с помощью измерений биолюминесценции. Поглощение и трансляцию введенной в состав кодирующей люциферазу светлячка РНК (липоплексы luc РНК) оценивали с помощью in vivo биолюминесцентной визуализации с использованием системы визуализации Xenogen IVIS Spectrum (Caliper Life Sciences). Кратко, водный раствор D-люциферина (75 мг/кг массы тела) (Caliper Life Sciences) вводили с помощью инъекции мышам интраперитонеально через 6 часов после введения 20 мкг липоплексов luc РНК. Испускаемые фотоны живых животных или экстрагированных тканей определяли количественно через 10 мин со временем экспозиции, составляющим 1 мин. На полученных изображениях обозначали представляющие области (ROI), и биолюминесцентность количественно оценивали в виде средней яркости (фотоны/с/см2/ср, представлена цветными столбиками) с использованием программного обеспечения IVIS Living Image 4.0.
Как показано на фигуре 6, сигналы, полученные от липоплексов, образованных из pH-стабилизированных липосом (см. таблицу 3), были лишь немного ниже, чем сигналы липоплексов, образованных из pH-нестабилизированных липосом. Очень небольшое снижение абсолютного количества было ниже, чем погрешность измерения и, следовательно, не является значимым.
Пример 9: Стабильность DOPE в липосомах DOTMA/DOPE, полученных при GMP или GMP-подобных условиях в воде для инъекций или воде для инъекций, содержащей 5 мМ уксусной кислоты
Липосомы, состоящие из DOTMA/DOPE в молярном соотношении 2/1, получали с помощью техники с использованием инъекции этанола до концентрации, составляющей приблизительно 4 мМ (общий липид). В качестве водной фазы использовали или воду для инъекций (wfi), или wfi, содержащую 5 мМ уксусной кислоты. Липосомы в wfi обозначали как липосомы L1, липосомы в wfi, содержащие 5 мМ уксусной кислоты (что дает значение pH между 3 и 4), обозначали как липосомы L2. Кроме присутствия или отсутствия уксусной кислоты все другие условия получения являлись идентичными. Использовали липиды квалификации GMP и получение проводили при GMP или GMP-подобных условиях. Получили несколько партий липосом L1 и L2 и после заполнения ними стеклянных флаконов стабильность анализировали при следующих температурах:
1. 5°C (2-8°C);
2. 25°C (22-28°C) = ускоренные условия хранения;
3. 40°C (38-42°C) = стрессовые условия.
Данные в отношении стабильности липосом L1 и L2 собирали в течение периода до 25 месяцев (L1) и до 9 месяцев (L2), соответственно. Исследования стабильности все еще продолжаются. На фигуре 7A-C показаны данные в отношении стабильности для разных партий липосом L1 и L2 при различных температурах. При всех температурных условиях и для всех изготовленных партий стабильность DOPE в липосомах L2 была значительно лучше, чем в липосомах L1.
Это указывает на то, что доведение pH до кислотных условий путем добавления 5 мМ уксусной кислоты к водной фазе значительно улучшает стабильность DOPE в липосомах. Срок хранения липосом можно увеличить приблизительно в 4 раза.
Ссылки
Batzri, S. and E.D. Korn (1973). "Single bilayer liposomes prepared without sonication." Biochim Biophys Acta 298(4): 1015-1019.
Chen, C.J., D.D. Han, C.F. Cai and X. Tang (2010). "An overview of liposome lyophilization and its future potential." Journal of Controlled Release 142(3): 299-311.
Stark, В., G. Pabst and R. Prassl (2010). "Long-term stability of sterically stabilized liposomes by freezing and freeze-drying: Effects of cryoprotectants on structure." European Journal of Pharmaceutical Sciences 41(3-4): 546-555.
van Winden, E.C. and D.J. Crommelin (1999). "Short term stability of freeze-dried, lyoprotected liposomes." J Control Release 58(1): 69-86.
Claims (32)
1. Водная липосомная дисперсия с увеличенной стабильностью липидов, содержащая
- липосомы, содержащие 1,2-ди-(9Z-октадеценоил)-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин (DOPE) и по меньшей мере один катионный липид, выбранный из группы, состоящей из 1,2-ди-О-октадеценил-3-триметиламмонийпропана (DOTMA) и 1,2-диолеоил-3-триметиламмонийпропана (DOTAP), где указанные липосомы являются катионными при физиологическом рН, и
- по меньшей мере один регулятор рН,
причем водный состав характеризуется значением рН между 2 и 5,5.
2. Водная липосомная дисперсия по п. 1, которая характеризуется значением рН между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4.
3. Водная липосомная дисперсия по любому из пп. 1 или 2, у которой молярное соотношение по меньшей мере одного катионного липида к DOPE составляет от 1:4 до 4:1, предпочтительно от 1:2 до 4:1.
4. Водная липосомная дисперсия по любому из пп. 1 или 2, в которой по меньшей мере один регулятор рН содержит кислоту и/или кислотный буфер.
5. Водная липосомная дисперсия по п. 4, в которой кислота представляет собой неразветвленную, разветвленную или циклическую С1-С28, предпочтительно С1-С22 карбоновую кислоту.
6. Водная липосомная дисперсия по п. 4, в которой кислота выбрана из группы, состоящей из уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, соляной кислоты, ортофосфорной кислоты, разветвленных или неразветвленных, насыщенных, мононенасыщенных или полиненасыщенных С12-С28 жирных кислот, предпочтительно С12-С22 жирных кислот (например, олеиновой кислоты).
7. Водная липосомная дисперсия по п. 4, в которой кислотный буфер основан на кислоте, как определено в п. 5.
8. Водная липосомная дисперсия по п. 4, в которой кислотный буфер выбран из группы, состоящей из ацетатного буфера, цитратного буфера, фосфатного буфера и карбонатного буфера.
9. Водная липосомная дисперсия по любому из пп. 1 или 2, в которой по меньшей мере один регулятор рН содержит уксусную кислоту и/или ацетатный буфер.
10. Водная липосомная дисперсия по любому из пп. 1 или 2, в которой по меньшей мере один регулятор рН присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору рН не превышало 100:1.
11. Водная липосомная дисперсия по п. 10, в которой по меньшей мере один регулятор рН присутствует в таком количестве, чтобы молярное соотношение общего липида по меньшей мере к одному регулятору рН составляло от 10:1 до 1:10, предпочтительно от 5:1 до 1:5, более предпочтительно от 2:1 до 1:2, более предпочтительно от 1,5:1 до 1:1,5, даже более предпочтительно приблизительно 1:1.
12. Водная липосомная дисперсия по любому из пп. 1 или 2, в которой скорость гидролиза DOPE и/или DOTAP, уменьшена по сравнению со скоростью его гидролиза при значении рН между 6 и 7.
13. Водная липосомная дисперсия по п. 1 или 2, в которой по меньшей мере один регулятор рН ассоциирован с липосомами.
14. Способ получения водной липосомной дисперсии по п. 1 или 2, причем способ предусматривает:
- образование липосом в водном растворе, содержащем по меньшей мере один регулятор рН и характеризующемся значением рН между 2 и 5,5; или
- добавление по меньшей мере одного регулятора рН к водному раствору, содержащему липосомы, для доведения рН водного раствора до значения рН между 2 и 5,5.
15. Набор для получения фармацевтической композиции, где указанный набор содержит водную липосомную дисперсию по п. 1 или 2 и, в отдельном контейнере, фармацевтически активную нуклеиновую кислоту.
16. Набор по п. 15, в котором водный состав нуклеиновой кислоты представляет собой ДНК или РНК, предпочтительно РНК.
17. Набор по п. 15, в котором фармацевтически активная нуклеиновая кислота предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением рН между 6 и 8.
18. Способ получения фармацевтической композиции, причем способ предусматривает:
- получение водной липосомной дисперсии по п. 1 или 2; и
- смешивание водной липосомной дисперсии с фармацевтически активной нуклеиновой кислотой.
19. Способ по п. 18, при котором фармацевтически активная нуклеиновая кислота представляет собой ДНК или РНК, причем фармацевтически активная нуклеиновая кислота предпочтительно предусмотрена в буферном растворе, характеризующемся значением рН между 6 и 8.
20. Фармацевтическая композиция для доставки лекарственного средства, полученная способом по п. 18.
21. Способ химической стабилизации водной липосомной дисперсии, содержащей липосомы, содержащие DOPE и по меньшей мере один катионный липид, выбранный из группы, состоящей из DOTMA и DOTAP, причем указанные липосомы являются катионными при физиологическом рН, где способ предусматривает
- доведение рН водной липосомной дисперсии до значения рН между 2 и 5,5.
22. Способ по п. 21, при котором химическая стабилизация происходит путем ингибирования гидролиза сложноэфирной связи.
23. Способ по п. 21, при котором рН доводят до значения рН между 2 и 5, предпочтительно между 2,5 и 5, более предпочтительно между 3 и 4,5, более предпочтительно между 3 и 4 и даже более предпочтительно между 3,5 и 4.
24. Способ по п. 21, при котором рН водного липидного состава доводят с помощью добавления по меньшей мере одного регулятора рН, предпочтительно по меньшей мере одного регулятора рН, как указано в п. 4.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EPPCT/EP2014/070503 | 2014-09-25 | ||
PCT/EP2014/070503 WO2016045732A1 (en) | 2014-09-25 | 2014-09-25 | Stable formulations of lipids and liposomes |
PCT/EP2015/071344 WO2016046060A1 (en) | 2014-09-25 | 2015-09-17 | Stable formulations of lipids and liposomes |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017113970A RU2017113970A (ru) | 2018-10-25 |
RU2017113970A3 RU2017113970A3 (ru) | 2019-04-15 |
RU2738060C2 true RU2738060C2 (ru) | 2020-12-07 |
Family
ID=51626523
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017113970A RU2738060C2 (ru) | 2014-09-25 | 2015-09-17 | Стабильные составы липидов и липосом |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11173120B2 (ru) |
EP (1) | EP3197433A1 (ru) |
JP (1) | JP6703982B2 (ru) |
KR (1) | KR102264820B1 (ru) |
CN (1) | CN107072945B (ru) |
AU (1) | AU2015320980B2 (ru) |
BR (1) | BR112017005821B1 (ru) |
CA (1) | CA2960934C (ru) |
IL (2) | IL250991B (ru) |
MA (1) | MA40627A (ru) |
MX (1) | MX2017003794A (ru) |
MY (1) | MY184381A (ru) |
NZ (1) | NZ730368A (ru) |
RU (1) | RU2738060C2 (ru) |
SG (1) | SG11201702182YA (ru) |
WO (2) | WO2016045732A1 (ru) |
ZA (1) | ZA201701670B (ru) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016045732A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stable formulations of lipids and liposomes |
CN111246845A (zh) | 2017-10-20 | 2020-06-05 | 生物技术Rna制药有限公司 | 适用于治疗的脂质体rna制剂的制备和储存 |
WO2021205077A1 (en) | 2020-04-09 | 2021-10-14 | Finncure Oy | Mimetic nanoparticles for preventing the spreading and lowering the infection rate of novel coronaviruses |
EP3892260A1 (en) * | 2020-04-10 | 2021-10-13 | Bayer Animal Health GmbH | Immunostimulatory compositions based on liposomes with zwiterionic and cationic lipids |
GB202307565D0 (en) | 2020-04-22 | 2023-07-05 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
EP4334943A1 (en) | 2021-05-04 | 2024-03-13 | BioNTech SE | Technologies for early detection of variants of interest |
TW202320842A (zh) | 2021-07-29 | 2023-06-01 | 德商拜恩技術股份公司 | 用於治療黑色素瘤之組合物及方法 |
CN114306244B (zh) * | 2022-01-14 | 2023-04-07 | 苏州尔生生物医药有限公司 | 一种微米级脂质复合物及其制备和应用 |
US11878055B1 (en) | 2022-06-26 | 2024-01-23 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060159737A1 (en) * | 2004-11-19 | 2006-07-20 | Steffen Panzner | Pharmaceutical compositions for local administration |
WO2007107304A2 (en) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Novosom Ag | An efficient method for loading amphoteric liposomes with nucleic acid active substances |
RU2311911C2 (ru) * | 2002-07-05 | 2007-12-10 | Липоксен Текнолоджиз Лимитед | Способ усиления иммунного ответа при вакцинации нуклеиновой кислотой |
Family Cites Families (113)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2816925A (en) * | 1955-10-07 | 1957-12-17 | Du Pont | Diamines |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US5804381A (en) | 1996-10-03 | 1998-09-08 | Cornell Research Foundation | Isolated nucleic acid molecule encoding an esophageal cancer associated antigen, the antigen itself, and uses thereof |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
US4975964A (en) * | 1989-06-27 | 1990-12-04 | Hochstein Peter A | Automatic turn off system |
US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
US6235525B1 (en) | 1991-05-23 | 2001-05-22 | Ludwig Institute For Cancer Research | Isolated nucleic acid molecules coding for tumor rejection antigen precursor MAGE-3 and uses thereof |
US5543152A (en) * | 1994-06-20 | 1996-08-06 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Sphingosomes for enhanced drug delivery |
US7422902B1 (en) | 1995-06-07 | 2008-09-09 | The University Of British Columbia | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
EP0900380B1 (en) | 1996-04-26 | 2003-07-09 | Rijksuniversiteit te Leiden | Methods for selecting and producing t cell peptide epitopes and vaccines incorporating said selected epitopes |
AU728581B2 (en) | 1996-09-13 | 2001-01-11 | Lipoxen Limited | Liposomes |
CA2217550A1 (en) * | 1996-10-22 | 1998-04-22 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cationic lipids for gene therapy |
EP0839912A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
US6210707B1 (en) * | 1996-11-12 | 2001-04-03 | The Regents Of The University Of California | Methods of forming protein-linked lipidic microparticles, and compositions thereof |
US6074645A (en) | 1996-11-12 | 2000-06-13 | City Of Hope | Immuno-reactive peptide CTL epitopes of human cytomegalovirus |
KR20010024585A (ko) | 1997-11-06 | 2001-03-26 | 로셰 디아그노스틱스 게엠베하 | 종양-특이적 항원, 이들의 제조방법, 및 이들의 면역화 및진단에서의 용도 |
WO1999033500A2 (en) * | 1997-12-31 | 1999-07-08 | Pharmasonics, Inc. | Methods, systems, and kits for intravascular nucleic acid delivery |
US6432925B1 (en) | 1998-04-16 | 2002-08-13 | John Wayne Cancer Institute | RNA cancer vaccine and methods for its use |
WO2000020029A1 (en) | 1998-10-05 | 2000-04-13 | Genzyme Corporation | Genes differentially expressed in cancer cells to design cancer vaccines |
US9034329B2 (en) * | 1999-02-22 | 2015-05-19 | Georgetown University | Preparation of antibody or an antibody fragment-targeted immunoliposomes for systemic administration of therapeutic or diagnostic agents and uses thereof |
US8617514B2 (en) * | 1999-02-22 | 2013-12-31 | Georgetown University | Tumor-targeted nanodelivery systems to improve early MRI detection of cancer |
US7311924B2 (en) * | 1999-04-01 | 2007-12-25 | Hana Biosciences, Inc. | Compositions and methods for treating cancer |
MXPA01011250A (es) | 1999-05-06 | 2002-08-12 | Univ Wake Forest | Composiciones y metodos para identificar antigenos que producen una respuesta inmune. |
US7094423B1 (en) * | 1999-07-15 | 2006-08-22 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for preparation of lipid-encapsulated therapeutic agents |
AU4903101A (en) | 1999-11-30 | 2001-07-09 | Cornell Research Foundation Inc. | Isolated nucleic acid molecules encoding cancer associated antigens, the antigens per se, and uses thereof |
US7462354B2 (en) | 1999-12-28 | 2008-12-09 | Pharmexa Inc. | Method and system for optimizing minigenes and peptides encoded thereby |
AU780064B2 (en) | 1999-12-28 | 2005-02-24 | Epimmune, Inc. | Optimized minigenes and peptides encoded thereby |
AU2001275294A1 (en) | 2000-06-07 | 2001-12-17 | Biosynexus Incorporated. | Immunostimulatory RNA/DNA hybrid molecules |
US6472176B2 (en) | 2000-12-14 | 2002-10-29 | Genvec, Inc. | Polynucleotide encoding chimeric protein and related vector, cell, and method of expression thereof |
CA2830887C (en) | 2001-06-05 | 2016-11-29 | Curevac Gmbh | Pharmaceutical composition containing a stabilised mrna optimised for translation in its coding regions |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
AUPS054702A0 (en) | 2002-02-14 | 2002-03-07 | Immunaid Pty Ltd | Cancer therapy |
CA2489296A1 (en) | 2002-06-13 | 2003-12-24 | Merck Patent Gesellschaft Mit Beschraenkter Haftung | Methods for the identification of allo-antigens and their use for cancer therapy and transplantation |
DK2286795T3 (en) * | 2002-06-26 | 2017-02-06 | Syncore Biotechnology Co Ltd | PROCEDURE FOR PREPARING A Cationic LIPOSOMAL PREPARATION INCLUDING A LIPOPHIL COMPOUND |
JP4722481B2 (ja) * | 2002-06-28 | 2011-07-13 | プロティバ バイオセラピューティクス リミテッド | リポソーム製造方法および装置 |
DE10229872A1 (de) | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
DE10344799A1 (de) | 2003-09-26 | 2005-04-14 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Identifizierung von Oberflächen-assoziierten Antigenen für die Tumordiagnose und -therapie |
AU2004283464B8 (en) | 2003-10-15 | 2011-04-14 | Syncore Biotechnology Co., Ltd | Method of administering cationic liposomes comprising an active drug |
BRPI0415533A (pt) | 2003-10-24 | 2006-12-26 | Immunaid Pty Ltd | método de terapia |
US7303881B2 (en) | 2004-04-30 | 2007-12-04 | Pds Biotechnology Corporation | Antigen delivery compositions and methods of use |
DE102004023187A1 (de) | 2004-05-11 | 2005-12-01 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Identifizierung von Oberflächen-assoziierten Antigenen für die Tumordiagnose und -therapie |
EP1793865A4 (en) * | 2004-08-05 | 2009-05-13 | Baylor Res Inst | GENETIC OR DRUG DELIVERY SYSTEM |
DE102004057303A1 (de) | 2004-11-26 | 2006-06-01 | Merck Patent Gmbh | Stabile Kristallmodifikationen von DOTAP Chlorid |
EP1674081A1 (de) * | 2004-12-23 | 2006-06-28 | KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH | Herstellung von lipidbasierten Nanopartikeln unter Einsatz einer dualen asymmetrischen Zentrifuge |
SG158155A1 (en) | 2004-12-29 | 2010-01-29 | Mannkind Corp | Methods to bypass cd+4 cells in the induction of an immune response |
JP4361545B2 (ja) | 2005-05-09 | 2009-11-11 | 小野薬品工業株式会社 | ProgrammedDeath1(PD−1)に対するヒトモノクローナル抗体および抗PD−1抗体単独または他の免疫療法と併用した癌治療方法 |
HUE026039T2 (en) | 2005-07-01 | 2016-05-30 | Squibb & Sons Llc | Human monoclonal antibodies programmed for death ligand 1 (PD-L1) |
EP3611266B1 (en) | 2005-08-23 | 2022-11-09 | The Trustees of the University of Pennsylvania | Rna containing modified nucleosides and methods of use thereof |
DE102005041616B4 (de) | 2005-09-01 | 2011-03-17 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Melanom-assoziierte MHC Klasse I assoziierte Oligopeptide und für diese kodierende Polynukleotide und deren Verwendungen |
EP1762575A1 (en) | 2005-09-12 | 2007-03-14 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Identification of tumor-associated antigens for diagnosis and therapy |
US20120021042A1 (en) * | 2005-09-15 | 2012-01-26 | Steffen Panzner | Efficient Method For Loading Amphoteric Liposomes With Nucleic Acid Active Substances |
EP1994181A4 (en) | 2006-02-27 | 2010-05-19 | Univ Arizona | IDENTIFICATION AND USE OF NOVOPEPTIDES FOR THE TREATMENT OF CANCER |
US20090304711A1 (en) | 2006-09-20 | 2009-12-10 | Drew Pardoll | Combinatorial Therapy of Cancer and Infectious Diseases with Anti-B7-H1 Antibodies |
DE102006060824B4 (de) | 2006-12-21 | 2011-06-01 | Johannes-Gutenberg-Universität Mainz | Nachweis von individuellen T-Zell-Reaktionsmustern gegen Tumor-assoziierte Antigene (TAA) in Tumorpatienten als Basis für die individuelle therapeutische Vakzinierung von Patienten |
KR101523391B1 (ko) | 2006-12-27 | 2015-05-27 | 에모리 유니버시티 | 감염 및 종양 치료를 위한 조성물 및 방법 |
US8877206B2 (en) | 2007-03-22 | 2014-11-04 | Pds Biotechnology Corporation | Stimulation of an immune response by cationic lipids |
US8140270B2 (en) | 2007-03-22 | 2012-03-20 | National Center For Genome Resources | Methods and systems for medical sequencing analysis |
WO2008147526A1 (en) * | 2007-05-23 | 2008-12-04 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Targeted carriers for intracellular drug delivery |
PL2170959T3 (pl) | 2007-06-18 | 2014-03-31 | Merck Sharp & Dohme | Przeciwciała przeciwko ludzkiemu receptorowi programowanej śmierci PD-1 |
EP2060583A1 (en) | 2007-10-23 | 2009-05-20 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Identification of tumor-associated markers for diagnosis and therapy |
NZ588183A (en) | 2008-03-24 | 2012-05-25 | 4Sc Discovery Gmbh | Novel substituted imidazoquinolines |
RU2530555C2 (ru) | 2008-04-17 | 2014-10-10 | ПиДиЭс БАЙОТЕКНОЛОДЖИ КОРПОРЭЙШН | Стимуляция иммунного ответа энантиомерами катионных липидов |
DE102008061522A1 (de) | 2008-12-10 | 2010-06-17 | Biontech Ag | Verwendung von Flt3-Ligand zur Verstärkung von Immunreaktionen bei RNA-Immunisierung |
AU2010223967B2 (en) * | 2009-03-12 | 2015-07-30 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of Eg5 and VEGF genes |
KR20140119197A (ko) | 2009-07-31 | 2014-10-08 | 에트리스 게엠베하 | 단백질 발현을 위한 비변형된 뉴클레오티드 및 변형된 뉴클레오티드의 조합을 가진 rna |
CA2793846A1 (en) * | 2010-03-12 | 2011-09-15 | The Regents Of The University Of California | Triggered cargo release from nanoparticle stabilized liposomes |
KR102315754B1 (ko) | 2010-05-14 | 2021-10-22 | 더 제너럴 하스피톨 코포레이션 | 종양 특이적 신생항원을 확인하는 조성물 및 방법 |
AU2011308496A1 (en) | 2010-10-01 | 2013-05-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
DE12722942T1 (de) | 2011-03-31 | 2021-09-30 | Modernatx, Inc. | Freisetzung und formulierung von manipulierten nukleinsäuren |
DE102011102734A1 (de) | 2011-05-20 | 2012-11-22 | WMF Württembergische Metallwarenfabrik Aktiengesellschaft | Vorrichtung zum Aufschäumen von Milch, Getränkebereiter mit dieser Vorrichtung und Verfahren zum Aufschäumen von Milch |
EP2771349B1 (en) | 2011-09-16 | 2020-02-26 | Iogenetics, LLC. | Bioinformatic processes for determination of peptide binding |
WO2013052523A1 (en) | 2011-10-03 | 2013-04-11 | modeRNA Therapeutics | Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof |
US9579338B2 (en) * | 2011-11-04 | 2017-02-28 | Nitto Denko Corporation | Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery |
TR201904389T4 (tr) * | 2011-11-04 | 2019-04-22 | Nitto Denko Corp | Lipit nükleik asit partiküllerinin steril bir şekilde üretilmesine yönelik yöntem. |
CA2859387A1 (en) | 2011-12-16 | 2013-06-20 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
US20150030576A1 (en) | 2012-01-10 | 2015-01-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for targeting agents into and across the blood-brain barrier |
WO2013124701A2 (en) | 2012-02-20 | 2013-08-29 | Universita' Degli Studi Di Milano | New homo- and heterodimeric smac mimetic compounds as apoptosis inducers |
US20130255281A1 (en) | 2012-03-29 | 2013-10-03 | General Electric Company | System and method for cooling electrical components |
WO2013151669A1 (en) | 2012-04-02 | 2013-10-10 | modeRNA Therapeutics | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
AU2013289939B2 (en) | 2012-07-12 | 2018-08-09 | Persimmune, Inc. | Personalized cancer vaccines and adoptive immune cell therapies |
CN104769112A (zh) | 2012-11-01 | 2015-07-08 | 菲克特生物科学股份有限公司 | 用于在细胞中表达蛋白质的方法和产品 |
US9597380B2 (en) | 2012-11-26 | 2017-03-21 | Modernatx, Inc. | Terminally modified RNA |
EP2931319B1 (en) | 2012-12-13 | 2019-08-21 | ModernaTX, Inc. | Modified nucleic acid molecules and uses thereof |
EP2964234A4 (en) | 2013-03-09 | 2016-12-07 | Moderna Therapeutics Inc | NON-TRANSLATED HETEROLOGOUS REGIONS FOR MRNA |
US20160024181A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Moderna Therapeutics, Inc. | Long-lived polynucleotide molecules |
WO2014160243A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Purification and purity assessment of rna molecules synthesized with modified nucleosides |
US10258698B2 (en) | 2013-03-14 | 2019-04-16 | Modernatx, Inc. | Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions |
EP2971165A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-11-23 | Moderna Therapeutics Inc | DISSOLUTION OF DNA FRAGMENTS IN MRNA MANUFACTURING METHODS |
WO2014144711A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Analysis of mrna heterogeneity and stability |
US11377470B2 (en) | 2013-03-15 | 2022-07-05 | Modernatx, Inc. | Ribonucleic acid purification |
WO2014144767A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Moderna Therapeutics, Inc. | Ion exchange purification of mrna |
US10138507B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-11-27 | Modernatx, Inc. | Manufacturing methods for production of RNA transcripts |
US20160002667A1 (en) * | 2013-03-15 | 2016-01-07 | Rush University Medical Center | Pseudomonas exotoxins for cancer treatment |
US20160032273A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-04 | Moderna Therapeutics, Inc. | Characterization of mrna molecules |
KR20230145545A (ko) | 2013-04-07 | 2023-10-17 | 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 | 개인맞춤화 신생물 백신을 위한 조성물 및 방법 |
WO2015014375A1 (en) | 2013-07-30 | 2015-02-05 | Biontech Ag | Tumor antigens for determining cancer therapy |
JP2016530294A (ja) | 2013-09-03 | 2016-09-29 | モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドModerna Therapeutics,Inc. | キメラポリヌクレオチド |
EP3041938A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
US9925277B2 (en) | 2013-09-13 | 2018-03-27 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide compositions containing amino acids |
EP3049065A1 (en) | 2013-09-26 | 2016-08-03 | BioNTech AG | Particles comprising a shell with rna |
US10385088B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-08-20 | Modernatx, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
US20160264614A1 (en) | 2013-10-02 | 2016-09-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Polynucleotide molecules and uses thereof |
WO2015058780A1 (en) | 2013-10-25 | 2015-04-30 | Biontech Ag | Method and kit for determining whether a subject shows an immune response |
WO2015085318A2 (en) | 2013-12-06 | 2015-06-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Targeted adaptive vaccines |
EP3053585A1 (en) | 2013-12-13 | 2016-08-10 | Moderna Therapeutics, Inc. | Alternative nucleic acid molecules and uses thereof |
EP3102262A1 (en) | 2014-02-05 | 2016-12-14 | BioNTech AG | A cannula, an injection or infusion device and methods of using the cannula or the injection or infusion device |
BR112016024644A2 (pt) | 2014-04-23 | 2017-10-10 | Modernatx Inc | vacinas de ácido nucleico |
WO2015172843A1 (en) | 2014-05-16 | 2015-11-19 | Biontech Diagnostics Gmbh | Methods and kits for the diagnosis of cancer |
WO2016045732A1 (en) | 2014-09-25 | 2016-03-31 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stable formulations of lipids and liposomes |
WO2016062323A1 (en) | 2014-10-20 | 2016-04-28 | Biontech Ag | Methods and compositions for diagnosis and treatment of cancer |
US11149278B2 (en) | 2014-12-12 | 2021-10-19 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules for improved protein expression |
SG11201704681QA (en) | 2014-12-30 | 2017-07-28 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
WO2016155809A1 (en) | 2015-03-31 | 2016-10-06 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Lipid particle formulations for delivery of rna and water-soluble therapeutically effective compounds to a target cell |
-
2014
- 2014-09-25 WO PCT/EP2014/070503 patent/WO2016045732A1/en active Application Filing
-
2015
- 2015-09-17 CN CN201580051758.0A patent/CN107072945B/zh active Active
- 2015-09-17 SG SG11201702182YA patent/SG11201702182YA/en unknown
- 2015-09-17 NZ NZ730368A patent/NZ730368A/en unknown
- 2015-09-17 WO PCT/EP2015/071344 patent/WO2016046060A1/en active Application Filing
- 2015-09-17 MX MX2017003794A patent/MX2017003794A/es unknown
- 2015-09-17 RU RU2017113970A patent/RU2738060C2/ru active
- 2015-09-17 US US15/510,973 patent/US11173120B2/en active Active
- 2015-09-17 JP JP2017516418A patent/JP6703982B2/ja active Active
- 2015-09-17 EP EP15763367.8A patent/EP3197433A1/en active Pending
- 2015-09-17 MA MA040627A patent/MA40627A/fr unknown
- 2015-09-17 CA CA2960934A patent/CA2960934C/en active Active
- 2015-09-17 AU AU2015320980A patent/AU2015320980B2/en active Active
- 2015-09-17 KR KR1020177010943A patent/KR102264820B1/ko active IP Right Grant
- 2015-09-17 MY MYPI2017000403A patent/MY184381A/en unknown
- 2015-09-17 BR BR112017005821-9A patent/BR112017005821B1/pt active IP Right Grant
-
2017
- 2017-03-07 IL IL250991A patent/IL250991B/en unknown
- 2017-03-08 ZA ZA2017/01670A patent/ZA201701670B/en unknown
-
2021
- 2021-10-06 US US17/495,104 patent/US20220023212A1/en active Pending
-
2022
- 2022-03-02 IL IL291055A patent/IL291055B2/en unknown
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2311911C2 (ru) * | 2002-07-05 | 2007-12-10 | Липоксен Текнолоджиз Лимитед | Способ усиления иммунного ответа при вакцинации нуклеиновой кислотой |
US20060159737A1 (en) * | 2004-11-19 | 2006-07-20 | Steffen Panzner | Pharmaceutical compositions for local administration |
WO2007107304A2 (en) * | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Novosom Ag | An efficient method for loading amphoteric liposomes with nucleic acid active substances |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
EVEN-CHEN S., et al., Factors affecting DNA binding and stability of association to cationic liposomes.Chem Phys Lipids. 2012 May;165(4):414-23. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US11173120B2 (en) | 2021-11-16 |
BR112017005821B1 (pt) | 2022-06-14 |
CN107072945B (zh) | 2021-04-06 |
ZA201701670B (en) | 2021-05-26 |
BR112017005821A2 (pt) | 2017-12-12 |
US20220023212A1 (en) | 2022-01-27 |
IL291055B1 (en) | 2023-01-01 |
CA2960934A1 (en) | 2016-03-31 |
RU2017113970A3 (ru) | 2019-04-15 |
IL291055A (en) | 2022-05-01 |
AU2015320980A1 (en) | 2017-04-06 |
RU2017113970A (ru) | 2018-10-25 |
MY184381A (en) | 2021-04-01 |
MA40627A (fr) | 2016-03-31 |
MX2017003794A (es) | 2017-07-07 |
IL250991B (en) | 2022-04-01 |
IL250991A0 (en) | 2017-04-30 |
IL291055B2 (en) | 2023-05-01 |
AU2015320980B2 (en) | 2021-02-18 |
CN107072945A (zh) | 2017-08-18 |
US20170273907A1 (en) | 2017-09-28 |
KR102264820B1 (ko) | 2021-06-14 |
WO2016046060A1 (en) | 2016-03-31 |
SG11201702182YA (en) | 2017-04-27 |
JP6703982B2 (ja) | 2020-06-03 |
JP2017532322A (ja) | 2017-11-02 |
CA2960934C (en) | 2021-08-24 |
KR20170063780A (ko) | 2017-06-08 |
WO2016045732A1 (en) | 2016-03-31 |
NZ730368A (en) | 2024-02-23 |
EP3197433A1 (en) | 2017-08-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220023212A1 (en) | Stable formulations of lipids and liposomes | |
US20210322573A1 (en) | Use of liposomes in a carrier comprising a continuous hydrophobic phase for delivery of polynucleotides in vivo | |
US20220001025A1 (en) | RNA Particles Comprising Polysarcosine | |
JP2023552678A (ja) | 粒子およびmRNAを含む医薬組成物ならびにそれを調製および貯蔵する方法 | |
JP2022062175A (ja) | 免疫応答を誘導するための方法および手段 | |
US20170136129A1 (en) | Stabilised Formulations of RNA | |
IL303874A (en) | Therapeutic RNA for cancer treatment | |
AU2021405019A9 (en) | Therapeutic rna for treating cancer | |
RU2792644C2 (ru) | Рнк-частицы, включающие полисаркозин | |
US20240041999A1 (en) | Therapeutic RNA for Treating Cancer | |
AU2021405008A1 (en) | Treatment schedule for cytokine proteins | |
WO2023051926A1 (en) | Treatment involving non-immunogenic rna for antigen vaccination and pd-1 axis binding antagonists |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20220323 |