RU2735988C1 - Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion - Google Patents
Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion Download PDFInfo
- Publication number
- RU2735988C1 RU2735988C1 RU2020112189A RU2020112189A RU2735988C1 RU 2735988 C1 RU2735988 C1 RU 2735988C1 RU 2020112189 A RU2020112189 A RU 2020112189A RU 2020112189 A RU2020112189 A RU 2020112189A RU 2735988 C1 RU2735988 C1 RU 2735988C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood
- contraction
- clot
- patient
- blood clot
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области удовлетворения жизненных потребностей человека, может быть применено в медицине, а именно - в акушерстве, для диагностики (оценки, определения) риска невынашивания беременности из-за угрозы развития предтромботических или тромботических состояний. Способ используется исключительно для прогнозирования удачного исхода беременности. Краткая сущность заключается в том, что диагностику проводят посредством измерения степени контракции (сжатия) сгустка крови в образцах крови на этапе планирования беременности, в результате чего становится воможным диагностика и планирование удачного либо неудачного исхода беременности.The proposed invention relates to the field of satisfying human vital needs, can be used in medicine, namely in obstetrics, for the diagnosis (assessment, determination) of the risk of miscarriage due to the threat of pre-thrombotic or thrombotic conditions. The method is used exclusively for predicting a successful pregnancy outcome. The brief essence lies in the fact that the diagnosis is carried out by measuring the degree of contraction (compression) of a blood clot in blood samples at the stage of pregnancy planning, as a result of which it becomes possible to diagnose and plan a successful or unsuccessful pregnancy outcome.
Использованные термины и определения:Terms and definitions used:
Гемокоагуляция – это процесс, при котором кровь из жидкого состояния превращается в гель, образуя сгусток крови. Это приводит к гемостазу, прекращению кровотечения из поврежденного сосуда, а затем к его восстановлению. Нарушения гемокоагуляции могут приводить как к кровотечениям, так и тромбозам, в случае, если образовавшийся сгусток крови перекроет просвет артерии или вены и остановит или затруднит кровоток. Hemocoagulation is a process by which blood from a liquid state turns into a gel, forming a blood clot. This leads to hemostasis, the cessation of bleeding from the damaged vessel, and then to its restoration. Hemocoagulation disorders can lead to both bleeding and thrombosis, if the resulting blood clot blocks the lumen of an artery or vein and stops or obstructs blood flow.
Контракция – процесс спонтанного сжатия сгустка крови, происходящего под действием сократительных белков тромбоцитов, актина и миозина. Contraction is a process of spontaneous contraction of a blood clot, which occurs under the influence of contractile proteins of platelets, actin and myosin.
Лаг-период контракции – это отрезок времени, необходимый для уменьшения размера сгустка менее 95% от исходного. The contraction lag is the length of time required to reduce the clot size to less than 95% of the original.
По данным Всемирной организации здравоохранения частота невынашивания беременности составляет 10-25%. Ежегодно на свет появляется 2,6 миллиона мертворожденных детей, при этом многие из этих случаев смерти можно было предотвратить [Глобальная стратегия охраны здоровья женщин, детей и подростков (2016-2030)]. У женщин с привычным невынашиванием беременности (далее по тексту – ПНБ) во время беременности часто наблюдается патологическая гиперкоагуляция, которая приводит к микротромбозу сосудов хориона или плаценты, что, в конечном итоге, приводит к выкидышу или преждевременным родам [Rai R., Tuddenham E., Backos M., Jivrai S., Gaddal S., Cork B., Regan L. Thromboelastography, whole-blood haemostasis and recurrent miscarriage. Hum Reprod. 2003; 18(12):2540-3].According to the World Health Organization, the miscarriage rate is 10-25%. 2.6 million stillbirths are born each year, and many of these deaths were preventable [Global Strategy for Women's, Children's and Adolescent Health (2016-2030)]. In women with recurrent miscarriage (hereinafter referred to as PNB), pathological hypercoagulation is often observed during pregnancy, which leads to microthrombosis of the chorionic or placental vessels, which ultimately leads to miscarriage or premature birth [Rai R., Tuddenham E. , Backos M., Jivrai S., Gaddal S., Cork B., Regan L. Thromboelastography, whole-blood haemostasis and recurrent miscarriage. Hum Reprod. 2003; 18 (12): 2540-3].
Основываясь на выше изложенном, возможно сделать вывод о крайне высокой актуальности решения данной проблемы, которая до настоящего времени не нашла надлежащего разрешения в мире.Based on the above, it is possible to draw a conclusion about the extremely high urgency of solving this problem, which has not yet found a proper solution in the world.
Из исследованного уровня техники заявителем выявлены аналоги предлагаемого изобретения. При описании аналогов использована их (аналогов) терминология. From the investigated prior art, the applicant identified analogues of the proposed invention. When describing analogs, their (analogs) terminology was used.
Известен «Способ прогноза осложнений беременности у пациенток с тромбофилией» [патент RU 2429478. МПК G01N 33/49 (2006.01). Сущность изобретения состоит в том, что способ прогноза осложнений беременности у пациенток с тромбофилией на основе комплексной оценки изменений в системе гемостаза отличается тем, что определяют значения параметров коагулограммы: фибринолитическую активность (ФА), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), продукты деградации фибрина (Д-Димеры) и международное нормализованное отношение (MHO) и вычисляют интегральный показатель коагуляции (ИПК) по формуле:Known "Method for predicting pregnancy complications in patients with thrombophilia" [patent RU 2429478. IPC G01N 33/49 (2006.01). The essence of the invention lies in the fact that a method for predicting pregnancy complications in patients with thrombophilia based on a comprehensive assessment of changes in the hemostasis system differs in that the values of the coagulogram parameters are determined: fibrinolytic activity (FA), activated partial thromboplastin time (APTT), fibrin degradation products ( D-Dimers) and international normalized ratio (MHO) and calculate the integral coagulation index (IPC) by the formula:
ИПК = 0,06 ФА+0,25 МНО+0,08 Д-Димер+0,54 АЧТВ+6,54IPC = 0.06 FA + 0.25 INR + 0.08 D-Dimer + 0.54 APTT + 6.54
где: Where:
ИПК – интегральный показатель коагуляции;IPC - an integral indicator of coagulation;
ФА – фибринолитическая активность, мин.;FA - fibrinolytic activity, min;
MHO – международное нормализованное отношение, ед.;MHO - international normalized ratio, units;
Д-Димер – продукты деградации фибрина, нг/мл;D-Dimer - fibrin degradation products, ng / ml;
АЧТВ – активированное частичное тромбопластиновое время, сек,APTT - activated partial thromboplastin time, sec,
и, получив значение ИПК больше или равно 1, прогнозируют высокий риск осложнений беременности, ассоциированных с тромбозами, а при ИПК меньше 1 делают заключение о низком риске тромбогенных гестационных осложнений.and, having obtained an IPC value greater than or equal to 1, predict a high risk of pregnancy complications associated with thrombosis, and with an IPC less than 1, a conclusion is made about a low risk of thrombogenic gestational complications.
Исследование проводят утром натощак, пунктируют локтевую вену пациентки иглой одноразового пользования и забирают 4,5 мл крови в пластиковую или силиконированную пробирку, содержащую 3,8% раствора цитрата натрия. Кровь центрифугируют при 3000-4000 об/мин в течение 15 мин. Полученную бедную тромбоцитами плазму переносят в другую пробирку и помещают в анализатор для проведения исследования. Определяют фибринолитическую активность (ФА), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), продукты деградации фибрина (Д-димер) и международное нормализованное отношение (MHO) стандартными методами и вычисляют ИПК. При ИПК ≥1 риск ассоциированных с тромбозами осложнений беременности оценивается как высокий, при ИПК <1 – тромбогенный риск гестационных осложнений низкий. The study is carried out in the morning on an empty stomach, the patient's ulnar vein is punctured with a disposable needle and 4.5 ml of blood is taken into a plastic or siliconized tube containing a 3.8% sodium citrate solution. The blood is centrifuged at 3000-4000 rpm for 15 minutes. The resulting platelet-poor plasma is transferred to another tube and placed in the analyzer for research. Fibrinolytic activity (FA), activated partial thromboplastin time (APTT), fibrin degradation products (D-dimer) and international normalized ratio (MHO) are determined by standard methods, and the IPC is calculated. With an IPC ≥1, the risk of thrombotic complications of pregnancy is assessed as high, with an IPC <1, the thrombogenic risk of gestational complications is low.
Недостатком известного способа является множественность и неоднозначность вариантов интерпретации (толкования) полученных показателей коагулограммы. The disadvantage of this method is the multiplicity and ambiguity of interpretation options (interpretation) of the obtained indicators of the coagulogram.
Следствием неоднозначности интерпретации показателей коагулограммы является низкая для практического применения достоверность диагностики на основе полученных численных показателей коагулограммы. При этом достоверность получаемых результатов зависит от многих факторов, таких как:The consequence of the ambiguity in the interpretation of the coagulogram indicators is the low reliability of diagnostics for practical use based on the obtained numerical indicators of the coagulogram. Moreover, the reliability of the results obtained depends on many factors, such as:
- технические характеристики использованного для измерений прибора той или иной фирмы-производителя; - technical characteristics of the device used for measurements of a particular manufacturer;
- комплектация оборудования;- complete set of equipment;
- чистота и чувствительность используемых реагентов. - the purity and sensitivity of the reagents used.
Например, поочередно применяя аналитическое оборудование и реагенты двух различных фирм-производителей для анализа функционального состояния системы гемостаза у одного и того же человека, получают несовпадающие, существенно различающиеся показатели. For example, by alternately using analytical equipment and reagents from two different manufacturers to analyze the functional state of the hemostasis system in the same person, they obtain mismatched, significantly different indicators.
Такое несовпадение существенно снижает результативность применения (эффективность) способа, и, как следствие, ограничивает область применения в медицинской практике известного способа по патенту RU 2429478.This discrepancy significantly reduces the effectiveness of the application (efficiency) of the method, and, as a consequence, limits the scope of application in medical practice of the known method according to patent RU 2429478.
Известен «Способ диагностики синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови» [Авторское свидетельство СССР SU 1520450, М.кл. G01N 33/86. Приоритет от 28.12.1987. Опубликовано 07.11.1989. Описание изобретения к а.с. БИ № 41]. Сущность способа заключается в том, что диагностику внутрисосудистого свертывания крови производят путем тромбоэластографии цитратной плазмы крови, и отличается способ тем, что, с целью ускорения и упрощения диагностики синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания, производят одновременно тромбоэлектро-графическое исследование равных объёмов цитратной крови и плазмы, определяют время коагуляции в этих пробах, вычисляют отношение первого показателя к второму и при величине его 1,1 и менее диагностируют синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови. Known "Method for diagnosing disseminated intravascular coagulation syndrome" [USSR author's certificate SU 1520450, M.cl. G01N 33/86. Priority from 28.12.1987. Published on November 7th, 1989. Description of the invention to A.S. BI number 41]. The essence of the method lies in the fact that the diagnosis of intravascular blood coagulation is performed by thromboelastography of citrated blood plasma, and the method differs in that, in order to accelerate and simplify the diagnosis of disseminated intravascular coagulation syndrome, simultaneously produce thromboelectrographic study of equal volumes of citrated blood and plasma, determine the coagulation time in these samples, the ratio of the first indicator to the second is calculated, and with a value of 1.1 or less, the syndrome of disseminated intravascular coagulation is diagnosed.
Недостатками известного способа являются низкая чувствительность известного способа, обусловленная высокой погрешностью измерений. Кроме того, известный способ обладает низкой воспроизводимостью результатов, приводящих к невозможности выявления существенных для практики тонких сдвигов (изменений, отклонений) в системе свертывания крови, что в свою очередь проводит низкой эффективности известного способа при использовании по назначению. The disadvantages of the known method are the low sensitivity of the known method due to the high measurement error. In addition, the known method has a low reproducibility of the results, leading to the impossibility of identifying significant for practice subtle shifts (changes, deviations) in the blood coagulation system, which in turn leads to low efficiency of the known method when used for its intended purpose.
Известен способ (метод) оценки состояния клеточного звена гемостаза при помощи выполнения унифицированных скрининговых тестов на анализаторах оптико-механического типа [Макацария А. Д. Тромбофилии и противотромботическая терапии в акушерской практике. /А.Д.Макацария, В.О.Бицадзе. // -М.:Триада-Х, 2003. - 904с.]. Эти скрининговые тесты позволяют выявлять нарушения со стороны факторов-ферментов, факторов-субстратов, кофакторов, ингибиторов каскада свертывания крови, а также действие некоторых лекарственных препаратов или аутоантител. Анализатор представляет собой электромагнитомеханическое устройство для исследования свертывания (коагуляции) плазмы крови или крови в стационарных и поликлинических условиях. There is a method (method) for assessing the state of the cellular link of hemostasis by performing unified screening tests on analyzers of the optical-mechanical type [Makatsaria AD Thrombophilia and anti-thrombotic therapy in obstetric practice. / A.D. Makatsaria, V.O.Bitsadze. // -M.: Triada-X, 2003. - 904s.]. These screening tests can detect abnormalities in enzyme factors, substrate factors, cofactors, inhibitors of the blood coagulation cascade, as well as the action of certain drugs or autoantibodies. The analyzer is an electromechanical device for studying the coagulation (coagulation) of blood plasma or blood in stationary and polyclinic conditions.
Недостатком способа (метода) является то, что тесты, отражая изменения в отдельных звеньях системы гемостаза, не характеризуют общий свертывающий потенциал крови и, вследствие изложенного, не обеспечивают возможность достоверного прогнозирования возникновения тромбозов, которые играют ключевую роль в развитии тяжелых акушерских осложнений. Недостаток ограничивает область эффективного применения данного способа по назначению.The disadvantage of this method (method) is that the tests, reflecting changes in individual links of the hemostasis system, do not characterize the total coagulation potential of the blood and, as a result, do not provide the ability to reliably predict the occurrence of thrombosis, which play a key role in the development of severe obstetric complications. The disadvantage limits the area of effective application of this method for its intended purpose.
Известен «Способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности» [Патент России RU 2123698]. «Способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности», который осуществляется путем исследования крови, отличается тем, что определяют содержание растворимых фибрин-мономерных комплексов в плазме крови и при показателях более 5,5Ч10-2 г/л; 6,5Ч10-2 г/л и 7Ч10-2 г/л соответственно в первом, втором и третьем триместрах беременности прогнозируют угрозу невынашивания беременности.Known "Method for preclinical prediction of miscarriage" [Russian Patent RU 2123698]. "The method of preclinical prediction of miscarriage", which is carried out by examining the blood, differs in that the content of soluble fibrin-monomeric complexes in the blood plasma is determined and at values of more than 5.5 × 10 -2 g / l; 6.5 x 10 -2 g / l and 7 x 10 -2 g / l, respectively, in the first, second and third trimesters of pregnancy predict the threat of miscarriage.
Недостатком является то, что известный способ обладает низкой для применения в практике чувствительностью и специфичностью, вследствие чего не удовлетворяет современным требованиям медицинской практики, предъявляемым к лабораторным тестам, что делает известный способ неприменимым для практики диагностики и прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности, что существенно ограничивает область применения способа назначению. The disadvantage is that the known method has a low sensitivity and specificity for use in practice, as a result of which it does not meet the modern requirements of medical practice for laboratory tests, which makes the known method inapplicable for the practice of diagnosing and predicting the likelihood of spontaneous abortion, which significantly limits the area application of the method to the appointment.
Известен «Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах» [патент России RU 2272574]. Сущностью является «Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах», его осуществляют путем исследования периферической крови беременной, отличается способ тем, что с 28-й недели гестации в сыворотке крови до и после проведения курса сохраняющей терапии определяют количественный показатель нитрат-ионов и при его увеличении на 10% или более относительно первоначального значения прогнозируют исход беременности в виде преждевременных родов.Known "Method for predicting the outcome of pregnancy with threatening premature birth" [Russian patent RU 2272574]. The essence is "A method for predicting the outcome of pregnancy with threatening premature birth", it is carried out by examining the peripheral blood of a pregnant woman, the method differs in that from the 28th week of gestation in the blood serum before and after the course of preserving therapy, the quantitative indicator of nitrate ions is determined and an increase of 10% or more relative to the initial value predict the outcome of pregnancy in the form of premature birth.
Недостатком известного способа является то, что он обеспечивает возможность существенно запоздалого прогнозирования исхода беременности – только с 3-го триместра, и осуществляется с двукратным исследованием периферической крови беременной. The disadvantage of this method is that it provides the possibility of significantly delayed prediction of the outcome of pregnancy - only from the 3rd trimester, and is carried out with a double study of the peripheral blood of the pregnant woman.
Вследствие запоздалого прогнозирования исхода беременности известное изобретение не позволяет еще при планируемой беременности и/или на ранних сроках беременности определить наличие или отсутствие риска привычного невынашивания беременности и не обеспечивает возможность своевременного, применения профилактических мер для минимизации вероятности невынашивания, предотвращения нежелательного исхода беременности.Due to the late prediction of the pregnancy outcome, the known invention does not allow, even during a planned pregnancy and / or in early pregnancy, to determine the presence or absence of the risk of recurrent miscarriage and does not provide the possibility of timely, preventive measures to minimize the likelihood of miscarriage, to prevent an undesirable pregnancy outcome.
Общеизвестно, что возможно более ранняя диагностика нарушений или болезни в организме и своевременно (на начальной стадии нарушения или болезни) предпринятое профилактическое лечение этих нарушений существенно позитивно результативнее по сравнению с последствиями запоздалого выявления и лечения нарушений или болезни в организме пациента. Недостатки существенно ограничивают область применения известного способа.It is well known that early diagnosis of disorders or disease in the body is possible and timely (at the initial stage of violation or disease) preventive treatment of these disorders is significantly more positively effective compared to the consequences of delayed detection and treatment of disorders or disease in the patient's body. The disadvantages significantly limit the scope of the known method.
Известен способ диагностики нарушений системы гемостаза путём определения генетических полиморфизмов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени в препаратах ДНК человека и определение серологических маркеров антифосфолипидного синдрома (далее по тексту – АФС) при помощи твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) [Путилова Н.В. Вессел-Дуэ-Ф в профилактике тромбофилических осложнений у беременных с дефектами гемостаза / Н.В.Путилова, М.В.Сивова. // Уральский медицинский журнал № 12 (52), 2008. – С. 63-66.].A known method for diagnosing disorders of the hemostasis system by determining genetic polymorphisms by the method of polymerase chain reaction (PCR) in real time in preparations of human DNA and determining serological markers of antiphospholipid syndrome (hereinafter referred to as APS) using solid-phase enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) [Putilova N. IN. Wessel-Duet-F in the prevention of thrombophilic complications in pregnant women with hemostasis defects / N.V. Putilova, M.V. Sivova. // Ural medical journal № 12 (52), 2008. - S. 63-66.].
Данный способ имеет существенный недостаток – неоднозначность интерпретации результатов применения известного способа, так как он оценивает только генетическую предрасположенность к спонтанному прерыванию беременности , но не учитывает состояния гемостаза в конкретный момент времени у конкретного пациента, что может привести к прерыванию беременности, даже при отсутствии патологии на генетическом уровне, что ограничивает возможность постановки однозначного диагноза, вследствие наличия риска невынашивания беременности по иным, не связанным с генетикой, причинам. This method has a significant drawback - the ambiguity of the interpretation of the results of the application of the known method, since it assesses only the genetic predisposition to spontaneous abortion, but does not take into account the state of hemostasis at a particular point in time in a particular patient, which can lead to abortion, even in the absence of pathology on genetic level, which limits the possibility of making an unambiguous diagnosis, due to the risk of miscarriage for other reasons not related to genetics.
Основываясь на изложенном, возможно сделать вывод общего характера о том, что имеется наличие существенных для практики не идентифицированных на дату представления заявочных материалов факторов, а именно - не выявленных изменений и отклонений в системе свертывания крови, наличие которых и приводит к невынашиванию беременности. Based on the above, it is possible to draw a general conclusion that there is a presence of significant for practice factors not identified at the date of submission of application materials, namely, unidentified changes and deviations in the blood coagulation system, the presence of which leads to miscarriage.
Неоднозначность интерпретации подтверждается и наличием общеизвестного в медицине факта – наличие отдельных полиморфизмов не всегда реализуется в нарушениях гемостаза. The ambiguity of interpretation is also confirmed by the fact that the presence of individual polymorphisms is not always realized in disorders of hemostasis, which is well known in medicine.
Поэтому наличие отдельных полиморфизмов не характеризует фактическое состояние свертывающей системы крови у конкретного пациента, не определяет однозначно реальный риск развития гестационных осложнений, приводящих к невынашиванию беременности. Указанный недостаток не обеспечивает возможность эффективного применения известного способа по назначению.Therefore, the presence of individual polymorphisms does not characterize the actual state of the blood coagulation system in a particular patient, does not unambiguously determine the real risk of developing gestational complications leading to miscarriage. This disadvantage does not provide the possibility of effective application of the known method for its intended purpose.
Известен «Способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах» [Патент России RU 2630573.]. Сущность изобретения заключается в том, что способ прогнозирования исхода беременности при угрожающих преждевременных родах путем исследования периферической венозной крови до начала сохраняющей терапии у беременных женщин с клиническими признаками угрожающих преждевременных родов в сроках гестации 24-34 недели, отличается тем, что в плазме крови определяют показатель резистентности активного фактора Va свертывания крови к активированному протеину С и при его значении, равном 0,94 или менее, прогнозируют преждевременные роды. Known "Method for predicting the outcome of pregnancy with threatening premature birth" [Russian Patent RU 2630573.]. The essence of the invention lies in the fact that a method for predicting the outcome of pregnancy in threatened preterm labor by examining the peripheral venous blood prior to the start of conserving therapy in pregnant women with clinical signs of threatening preterm labor at 24-34 weeks of gestation, differs in that the indicator is determined in the blood plasma resistance of active blood coagulation factor Va to activated protein C and when its value is equal to 0.94 or less, preterm labor is predicted.
Недостатком является высокая специфичность известного способа, выражающаяся в сильной зависимости результатов от уровня квалификации исследователя (зависимость от влияния человеческого фактора), следствием чего является сложность его осуществления, особенно – для массового применения.The disadvantage is the high specificity of the known method, which is expressed in a strong dependence of the results on the level of qualifications of the researcher (dependence on the influence of the human factor), which results in the complexity of its implementation, especially for mass use.
Недостаток существенно ограничивает область применения способа по патенту RU 2630573, делает известный способ не эффективным для диагностики и прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности в условиях массового применения. The disadvantage significantly limits the scope of application of the method according to patent RU 2630573, makes the known method ineffective for diagnosing and predicting the likelihood of spontaneous abortion in conditions of mass use.
По результатам анализа выявленного уровня техники наиболее близким аналогом по совокупности совпадающих признаков в целом - прототипом с заявленным техническим решением, но не используемого для диагностики и прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности, является «Способ оценки динамики и полноты ретракции (контракции) кровяного сгустка» [патент RU 2596926]. Сущность способа по прототипу заключается в том, что производят взятие пробы крови пациента в содержащие цитрат натрия емкости, берут двухканальную измерительную кювету, внутреннюю поверхность кюветы ополаскивают детергентом – раствором Тритона X-100 на хлориде натрия, затем удаляют остатки детергента, в цитратную кровь добавляют хлорид кальция и тромбин, кровь переносят в измерительную кювету, которую помещают в предварительно прогретую термостатируемую камеру, где в автоматическом режиме фоторегистрируют и фиксируют изменение размеров двумерного изображения сгустка крови, по результатам фиксации строят кинетическую кривую (график) зависимости изменения площади S проекции сгустка крови от времени t, по построенной кривой определяют и оценивают параметры динамики ретракции (контракции) сгустка крови, при этом характеризующие процесс средние значения - конечной степени ретракции сгустка крови здоровых доноров, равное 51,9%; лаг-период, равный 72,6 с; время достижения сгустка от исходного размера - 344,7 с; время достижения сгустка от конечного размера - 348,5 с; величину площади под кинетической кривой 785,2 у.е.; среднюю скорость ретракции 0,041 у.е./с принимают за норму, при отклонениях от указанных норм – диагностируют патологическое состояние системы гемостаза пациента. Частоту замеров и общее время измерения изменяют настройками прибора. Изменение размеров двумерного изображения сгустка крови регистрируют и фиксируют каждые 15 с в течение 20 мин. Образование сгустка и активацию тромбоцитов стимулируют добавлением к рекальцифицированной цитратной крови свежеразмороженного раствора тромбина до конечной концентрации 1 ЕД/мл. С использованием кинетической кривой ретракции определяют дополнительные параметры процесса ретракции крови. С использованием кинетической кривой ретракции определяют конечную степень ретракции сгустка крови. С использованием кинетической кривой ретракции определяют лаг-период. С использованием кривой ретракции определяют время сжатия сгустка на 1/4 от исходного размера. С использованием кинетической кривой ретракции определяют время достижения 1/2 от конечного сжатия сгустка. С использованием кинетической кривой ретракции определяют площадь под кривой. С использованием кинетической кривой ретракции определяют среднюю скорость ретракции.According to the results of the analysis of the revealed prior art, the closest analogue in terms of a set of coinciding features as a whole - a prototype with the claimed technical solution, but not used for diagnostics and predicting the likelihood of spontaneous abortion, is the "Method for assessing the dynamics and completeness of retraction (contraction) of a blood clot" [patent RU 2596926]. The essence of the method according to the prototype is that the patient's blood sample is taken into containers containing sodium citrate, a two-channel measuring cuvette is taken, the inner surface of the cuvette is rinsed with a detergent - a solution of Triton X-100 on sodium chloride, then the residues of the detergent are removed, chloride is added to citrated blood calcium and thrombin, the blood is transferred into a measuring cuvette, which is placed in a preheated thermostatted chamber, where the change in the size of the two-dimensional image of the blood clot is automatically photographed and recorded, according to the results of fixation, a kinetic curve (graph) of the dependence of the change in the area S of the projection of the blood clot on time is built t, according to the constructed curve, the parameters of the dynamics of retraction (contraction) of the blood clot are determined and evaluated, while the mean values characterizing the process are the final degree of retraction of the blood clot of healthy donors, equal to 51.9%; lag period equal to 72.6 s; time to reach the clot from the original size - 344.7 s; time to reach the clot from the final size - 348.5 s; the area under the kinetic curve is 785.2 cu; the average retraction speed of 0.041 cu / s is taken as the norm, in case of deviations from these norms, the pathological state of the patient's hemostasis system is diagnosed. The frequency of measurements and the total measurement time are changed by the settings of the device. The resizing of the two-dimensional image of the blood clot is recorded and recorded every 15 seconds for 20 minutes. Clot formation and platelet activation are stimulated by adding freshly thawed thrombin solution to recalcified citrated blood to a final concentration of 1 U / ml. Using the kinetic retraction curve, additional parameters of the blood retraction process are determined. Using the kinetic retraction curve, the final degree of retraction of the blood clot is determined. Using the kinetic retraction curve, the lag period is determined. The retraction curve is used to determine the time to compress the clot to 1/4 of the original size. Using the kinetic retraction curve, the time to reach 1/2 of the final clot compression is determined. The area under the curve is determined using the kinetic retraction curve. Using the kinetic retraction curve, the average retraction rate is determined.
Известный способ оценки динамики и полноты ретракции (контракции) кровяного сгустка, хотя во многом подобен заявленному техническому решению, но не решает весьма актуальную проблему диагностики для прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности – из-за наличия существенных недостатков. The known method for assessing the dynamics and completeness of retraction (contraction) of a blood clot, although in many ways similar to the claimed technical solution, does not solve the very urgent problem of diagnostics for predicting the likelihood of spontaneous abortion - due to the presence of significant disadvantages.
Недостаком известного способа при использовании по назначению является его пригодность только для общей, то есть неконкретной диагностики – наличия или отсутствия патологического состояния системы гемостаза пациента, при отсутствии возможности выявления (постановки) конкретного диагноза, а именно – для прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности.The disadvantage of the known method when used for its intended purpose is its suitability only for general, that is, non-specific diagnostics - the presence or absence of a pathological state of the patient's hemostasis system, in the absence of the possibility of identifying (setting) a specific diagnosis, namely, to predict the likelihood of spontaneous abortion.
Прогнозирование вероятности спонтанного прерывания беременности невозможно из-за отсутствия в известном способе конкретных, присущих только этой патологии, цифровых характеристик и показателей патологического состояния системы гемостаза планирующей беременность пациентки, использование которых позволяет, как в заявленном техническом решении, достоверно диагностировать наличие или отсутствие риска спонтанного прерывания беременности будущей матери из-за патологического состояния её системы гемостаза.Predicting the likelihood of spontaneous abortion is impossible due to the absence in the known method of specific, inherent only to this pathology, digital characteristics and indicators of the pathological state of the hemostasis system of a patient planning a pregnancy, the use of which allows, as in the claimed technical solution, to reliably diagnose the presence or absence of the risk of spontaneous abortion pregnancy of the expectant mother due to the pathological state of her hemostatic system.
Недостаток делает невозможным использование способа по патенту RU 2596926 для предварительного, на стадии планируемой беременности, прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности, что исключает возможность применения известного изобретения по назначению.The disadvantage makes it impossible to use the method according to patent RU 2596926 for preliminary, at the stage of planned pregnancy, predicting the probability of spontaneous abortion, which excludes the possibility of using the known invention for its intended purpose.
Анализ известных, наиболее информативных и применяемых в медицине способов прогнозирования спонтанного прерывания беременности позволяет сделать вывод общего характера, о том, что на дату представления заявочных материалов в мире отсутствует надежный и высокоэффективный способ прогнозирования тромботических осложнений у беременных женщин и связанного с тромботическими осложнениями риска невынашивания беременности.Analysis of the known, most informative and used in medicine methods for predicting spontaneous abortion allows us to draw a general conclusion that, as of the date of submission of application materials, there is no reliable and highly effective method for predicting thrombotic complications in pregnant women and the risk of miscarriage associated with thrombotic complications. ...
Целью заявленного изобретения является своевременная, заранее, до наступления негативных последствий выполненная диагностика связанных с риском невынашивания беременности патологических изменений гемостаза у женщин. Такая диагностика обосновывает и обеспечивает принятие соответствующих мер медицинской терапии, снижающих вероятность невынашивания беременности. The aim of the claimed invention is the timely, in advance, before the onset of negative consequences, performed diagnostics of pathological changes in hemostasis in women associated with the risk of miscarriage. This diagnosis justifies and ensures the adoption of appropriate measures of medical therapy that reduce the likelihood of miscarriage.
Техническим результатом заявленного изобретения является способ диагностики часто встречающейся патологии беременных женщин, позволяющий медработникам принять меры предотвращения невынашиваемости плода (ребенка) еще заранее, например – на этапе планирования или на ранних стадиях беременности. The technical result of the claimed invention is a method for diagnosing a common pathology of pregnant women, which allows health workers to take measures to prevent miscarriage of a fetus (child) in advance, for example, at the planning stage or in the early stages of pregnancy.
Врожденные и приобретенные нарушения гемостаза являются одним из патогенетических факторов невынашивания беременности, диагностика и прогнозирование которого (невынашивания) важны для профилактики акушерской патологии – диагностика позволяет выбрать и применять известные средства и меры профилактики патологии. Congenital and acquired disorders of hemostasis are one of the pathogenetic factors of miscarriage, the diagnosis and prediction of which (miscarriage) are important for the prevention of obstetric pathology - diagnostics allows you to select and apply known means and measures for the prevention of pathology.
Сущностью заявленного технического решения является способ оценки динамики и полноты ретракции кровяного сгустка для прогнозирования вероятности спонтанного прерывания беременности, заключающийся в том, чтоThe essence of the claimed technical solution is a method for assessing the dynamics and completeness of retraction of a blood clot to predict the likelihood of spontaneous abortion, which consists in the fact that
берут пробы крови пациентки в содержащие цитрат натрия емкости,taking blood samples of the patient into containers containing sodium citrate,
переносят цитратную кровь в пробирку и добавляют хлорид кальция и 1 ЕД/мл тромбина,transfer citrated blood into a test tube and add calcium chloride and 1 U / ml thrombin,
берут двухканальную измерительную кювету,take a two-channel measuring cuvette,
ополаскивают раствором Тритона X-100 на хлориде натрия внутренние поверхности каналов кюветы, удаляют остатки детергента,rinse the inner surfaces of the cuvette channels with a solution of Triton X-100 on sodium chloride, remove the detergent residues,
переносят в измерительную кювету цитратную кровь с добавленным хлоридом кальция и тромбина,transferring citrated blood with added calcium and thrombin chloride to the measuring cuvette,
проводят фотофиксацию в автоматическом режиме изменения размеров двумерного изображения сгустка крови,carry out photofixation in the automatic mode of resizing a two-dimensional image of a blood clot,
проводят построение по результатам фиксации кинетической кривой зависимости изменения площади проекции сгустка от времени,plotting according to the results of fixing the kinetic curve of the dependence of the change in the projection area of the clot on time,
определяют и оценивают по построенной кривой параметры динамики контракции сгустка крови, отличающийся тем, чтоthe parameters of the dynamics of the contraction of the blood clot are determined and evaluated according to the constructed curve, characterized in that
производят измерение температуры тела обследуемой пациентки,measure the body temperature of the examined patient,
в термостатируемой камере устанавливают температуру тела обследуемой пациентки,the body temperature of the examined patient is set in a thermostatically controlled chamber,
измерительную кювету с исследуемой кровью помещают в термостатируемую камеру;the measuring cuvette with the blood to be examined is placed in a thermostatic chamber;
производят диагностику путём сравнения показателей кинетики контракции сгустка крови обследуемой пациентки с усредненными показателями кинетики контракции сгустка крови ранее рожавших небеременных женщин без отягощенного акушерского анамнеза и предшествующих осложнений беременности и принятыми за норму:diagnostics is performed by comparing the indicators of the kinetics of blood clot contraction of the examined patient with the average indicators of the kinetics of blood clot contraction in non-pregnant women who have given birth before without a burdened obstetric history and previous complications of pregnancy and taken as the norm:
– конечной степени контракции сгустка К = 42±1%, в % от начального размера изображения сгустка крови,- the final degree of clot contraction K = 42 ± 1%, in% of the initial size of the blood clot image,
– лаг-период = 199±17 сек,- lag period = 199 ± 17 sec,
– площадь S под кривой кинетики контракции = 304±16 у.е.,- area S under the curve of the kinetics of contraction = 304 ± 16 conventional units,
– cредняя скорость контракции = 0,034 ±0,001 % /сек- average contraction rate = 0.034 ± 0.001% / sec
и при:and at:
– уменьшении конечной степени контракции сгустка крови К менее 37±2% при норме 42±1%,- a decrease in the final degree of contraction of a blood clot K less than 37 ± 2% at a rate of 42 ± 1%,
– увеличении лаг-периода A более 257±21 сек при норме 199±17 сек,- an increase in the lag-period A of more than 257 ± 21 sec at a rate of 199 ± 17 sec,
– уменьшении площади S под кривой контракции сгустка крови менее 260±15 у.е. при норме 304±16 у.е.,- a decrease in the area S under the blood clot contraction curve less than 260 ± 15 conventional units. at a rate of 304 ± 16 cu,
– уменьшении средней скорости контракции менее 0,031±0,001 %/ сек, при норме 0,034 ±0,001 %/сек- a decrease in the average contraction rate less than 0.031 ± 0.001% / sec, at a rate of 0.034 ± 0.001% / sec
диагностируют высокую вероятность невынашивания беременности вследствие тромботических осложнений и принимают профилактические меры медицинской помощи. diagnose a high probability of miscarriage due to thrombotic complications and take preventive measures of medical care.
Заявленное техническое решение иллюстрируется Фиг.1 – Фиг.2.The claimed technical solution is illustrated in Fig. 1 - Fig. 2.
На Фиг.1 приведены графики, показывающие результат осуществления заявленного способа путём оценки динамики и полноты контракции сгустков крови: небеременных женщин с привычнымFigure 1 shows graphs showing the result of the implementation of the claimed method by assessing the dynamics and completeness of contraction of blood clots: non-pregnant women with the usual
невынашиванием беременности и небеременных женщин без этого отягощенного акушерского анамнеза, где:miscarriage and non-pregnant women without this burdened obstetric history, where:
1 – кинетическая кривая (график) контракции сгустков крови небеременных женщин с привычным невынашиванием беременности; 1 - kinetic curve (graph) of contraction of blood clots of non-pregnant women with recurrent miscarriage;
2 – кинетическая кривая (график) контракции сгустков небеременных женщин без отягощенного акушерского анамнеза;2 - kinetic curve (graph) of contraction of clots of non-pregnant women without a burdened obstetric history;
- по оси Х отложена продолжительность времени t контракции сгустка крови, в секундах (сек); - the X-axis represents the duration of the time t of the blood clot contraction, in seconds (sec);
- по оси Y отложена степень контракции сгустка крови K, %; - the Y-axis shows the degree of contraction of the blood clot K,%;
- А – конечная степень контракции, %;- A - final degree of contraction,%;
- В – лаг-период, сек;- B - lag period, sec;
- S – площадь под кинетической кривой (в условных единицах, например – см2, далее по тексту – у.е.);- S is the area under the kinetic curve (in arbitrary units, for example - cm 2 , hereinafter - conventional units);
На Фиг.2 приведена Таблица сопоставительного анализа прототипа и заявленного способа. Figure 2 shows a table of comparative analysis of the prototype and the claimed method.
Заявленное техническое решение в целом осуществляют, например, следующим путем. The claimed technical solution is generally carried out, for example, in the following way .
Исследование проводят у пациентки, определяющей состояние своего здоровья как нормальное, не проявляющей видимые признаки наличия заболевания, например – простудного, преимущественно утром, натощак.The study is carried out in a patient who determines her state of health as normal, does not show visible signs of a disease, for example, a cold, mainly in the morning, on an empty stomach.
Измеряют и определяют температуру тела обследуемой пациентки. Производят взятие пробы крови пациентки в емкости, например – в известные вакуумные пробирки, содержащие 3,8% цитрата натрия, например, фирмы Vacuette TUBE (Greiner Bio-One GmbH, Австрия), в соотношении 9:1 (кровь : цитрат натрия) по объёму. The body temperature of the examined patient is measured and determined. Take a sample of the patient's blood in a container, for example, into known vacuum tubes containing 3.8% sodium citrate, for example, from Vacuette TUBE (Greiner Bio-One GmbH, Austria), in a ratio of 9: 1 (blood: sodium citrate) according to volume.
Для определения контракции сгустка крови используют кювету, преимущественно двухканальную, например – размером 12×7×1 мм, производства компании «ГемаКор», Россия. Для предотвращения прилипания сгустка к внутренним стенкам кюветы, её (кювету) ополаскивают 4%-ным раствором Тритона Х-100 в 0,15М NaCl. To determine the contraction of a blood clot, a cuvette is used, mainly two-channel, for example, 12 × 7 × 1 mm in size, manufactured by GemaCor, Russia. To prevent the clot from sticking to the inner walls of the cuvette, it (the cuvette) is rinsed with a 4% solution of Triton X-100 in 0.15M NaCl.
Для запуска процесса свертывания крови и активации тромбоцитов к цитратной крови добавляют 2 мМ хлорида кальция и 1 ЕД/мл тромбина (конечная концентрация), таким образом получают рекальцифицированную цитратную кровь – исследуемый образец крови. To start the blood coagulation process and activate platelets, 2 mM calcium chloride and 1 U / ml thrombin (final concentration) are added to citrated blood, thus obtaining recalcified citrated blood - the blood sample under study.
Затем в каждый из каналов прозрачной кюветы переносят по 80 мкл образца, а саму кювету помещают в прогретую до ранее измеренной температуры тела пациентки камеру регистрирующего прибора, например – «Регистратора Тромбодинамики» (производства фирмы «ГемаКор», Россия) и двумерные изображения (проекции) сгустков крови фоторегистрируют, например – автоматически, каждые 15 сек в течение 1200 секунд (20 мин). Then, 80 μl of the sample is transferred to each of the channels of the transparent cuvette, and the cuvette itself is placed in a recording device chamber heated to the previously measured body temperature of the patient, for example, the "Thrombodynamics Registrar" (manufactured by "GemaCor", Russia) and two-dimensional images (projections) blood clots are photographed, for example - automatically, every 15 seconds for 1200 seconds (20 minutes).
При мéньшей 1200 сек (20 мин) продолжительности фоторегистрации существенно снижается достоверность результата, при бóльшей продолжительности фоторегистрации – достоверность результата повышается несущественно. With a shorter 1200 sec (20 min) duration of photo registration, the reliability of the result significantly decreases, with a longer duration of photo registration, the reliability of the result increases insignificantly.
Для применения в медицинской практике продолжительность процесса фоторегистрации сгустка крови в течение 1200 сек является оптимальной – за однократное посещение пациенткой медицинского учреждения, без излишней затраты времени, удается выполнить высокодостоверную диагностику возможных осложнений планируемой беременности, что позволяет своевременно применять профилактическое лечение и по сравнению с прототипом существенно расширяет область применения способов диагностики. For use in medical practice, the duration of the process of photographic registration of a blood clot for 1200 seconds is optimal - for a single visit by a patient to a medical institution, without unnecessary time expenditures, it is possible to perform highly reliable diagnostics of possible complications of a planned pregnancy, which allows timely use of preventive treatment and, compared with the prototype, significantly expands the scope of diagnostic methods.
На Фиг.1 приведены графики, показывающие результат осуществления заявленного способа путём оценки динамики и полноты контракции сгустков крови: небеременных женщин с привычным невынашиванием беременности и небеременных женщин без этого отягощенного акушерского анамнеза. Figure 1 shows graphs showing the result of implementing the claimed method by assessing the dynamics and completeness of the contraction of blood clots: non-pregnant women with recurrent miscarriage and non-pregnant women without this burdened obstetric history.
Кинетическую кривую (график) контракции сгустка крови в зависимости от времени строят, используя результаты фоторегистрации происходящих изменений в образце сгустка крови.A kinetic curve (graph) of blood clot contraction versus time is constructed using the results of photographic registration of the changes occurring in the blood clot sample.
На Фиг.1 показана усредненная (по 50 пациенткам) кинетическая кривая 1 (с показом среднего значения ± стандартной ошибки среднего значения) контракции сгустка крови женщин, до планируемой беременности, имевших привычное (многократное) невынашивание беременности (ПНБ) в анамнезе. Figure 1 shows the averaged (for 50 patients) kinetic curve 1 (showing the mean ± standard error of the mean) of the contraction of a blood clot in women who had a history of recurrent miscarriage (RMP) before planned pregnancy.
Таким образом, из приведенного на Фиг.1 графика видно, что кинетическая кривая 1 контракции крови женщин с ПНБ лежит достоверно ниже кинетической кривой 2, отражающей процесс контракции сгустков крови у женщин без отягощенного акушерского анамнеза. Thus, from the graph shown in Fig. 1, it can be seen that the
Кинетическая кривая 2 контракции сгустков крови здоровых женщин ограничивает существенно бóльшую площадь S2 под кинетической кривой 2 по сравнению с площадью S1 под кинетической кривой 1. Kinetic curve 2 of the contraction of blood clots in healthy women limits a significantly larger area S 2 under kinetic curve 2 compared to the area S 1 under
Соответственно, кинетическая кривая 1 контракции сгустка крови женщин с привычным невынашиванием беременности (ПНБ) ограничивает существенно мéньшую площадь S1 фигуры между осью координат Х и кривой 1 (под кривой 1) по сравнению с площадью S2 фигуры под кинетической кривой 2 контракции сгустков крови здоровых женщин. Различие между величинами площадей S1 и S2 отражает снижение, по сравнению с нормой, степени контракции сгустка крови женщин с ПНБ. Accordingly, the
Изменение показателей контракции у женщин с ПНБ в сторону угнетения контракции имеет существенное значение и является основанием для достоверной диагностики (про)тромботических состояний и прогнозирования тромботического риска, а также результатов профилактики и лечения тромбозов.Changes in contraction indices in women with PNL towards suppression of contraction is essential and is the basis for reliable diagnosis of (pro) thrombotic conditions and prediction of thrombotic risk, as well as the results of prevention and treatment of thrombosis.
Далее заявителем представлена более детальная и конкретизированная информация о достоверности прогноза по заявленному способу.Further, the applicant provides more detailed and specific information about the reliability of the forecast for the claimed method.
На Фиг.1 показаны экспериментально полученные кинетические кривые конечных степеней контракции А сгустков крови: Figure 1 shows the experimentally obtained kinetic curves of the final degrees of contraction A of blood clots:
– вынашивающих беременность здоровых женщин (кинетическая кривая 2);- healthy women carrying pregnancy (kinetic curve 2);
– женщин, до беременности (планируемой) имеющих привычное невынашивание (кинетическая кривая 1). - women with habitual miscarriage before pregnancy (planned) (kinetic curve 1).
Усредненные показатели конечной степени контракции (К2А ≈43%) сгустков крови А (кинетическая кривая 2) приняты в качестве 100% (стопроцентно) достоверной информации, свидетельствующей об отсутствии вероятности спонтанного прерывания беременности (риска) невынашивания беременности, а именно – из-за угрозы развития предт тромботических и тромботических состояний. The average indicators of the final degree of contraction (K 2A ≈43%) of blood clots A (kinetic curve 2) are taken as 100% (one hundred percent) reliable information indicating the absence of the likelihood of spontaneous abortion (risk) of miscarriage, namely, due to threats to the development of pre-thrombotic and thrombotic conditions.
Показатели контракции (К1А ≈37%) сгустков крови А (кинетическая кривая 1) женщин, до беременности имеющих привычное невынашивание, свидетельствуют о наличии вероятности спонтанного прерывания беременности (риска) из-за угрозы развития предтромботических и тромботических состояний. Показатели (К2А – К1А) = (43% – 37%)= 6%.Indicators of contraction (K 1A ≈37%) of blood clots A (kinetic curve 1) of women who have recurrent miscarriage before pregnancy indicate the likelihood of spontaneous abortion (risk) due to the threat of pre-thrombotic and thrombotic conditions. Indicators (K 2A - K 1A ) = (43% - 37%) = 6%.
Это позволяет утверждать, что заявленный способ позволяет с достаточной для медицинской практики достоверностью более 90% [(100% – 6%) = 94% > 90%] диагностировать вероятность спонтанного прерывания беременности и при необходимости назначить антикоагулянтную или антиагрегантную терапию.This allows us to assert that the claimed method allows, with a reliability sufficient for medical practice of more than 90% [(100% - 6%) = 94%> 90%], to diagnose the likelihood of spontaneous abortion and, if necessary, to prescribe anticoagulant or antiplatelet therapy.
Ниже представлены средние значения принятых за норму и характеризующих кинетику контракции расчетных параметров, полученных на образцах крови небеременных женщин, ранее рожавших без отягощенного акушерского анамнеза и предшествующих осложнений беременности: Below are the average values taken as the norm and characterizing the kinetics of contraction of the calculated parameters obtained on blood samples of non-pregnant women who had previously given birth without a burdened obstetric history and previous complications of pregnancy:
1) конечная степень контракции сгустка К = (42±1)% (конечный размер сжимающегося сгустка в % от начального размера сгустка крови); 1) the final degree of clot contraction K = (42 ± 1)% (the final size of the contracting clot in% of the initial size of the blood clot);
2) лаг-период В = (199±17) сек; 2) lag period B = (199 ± 17) sec;
3) площадь под кинетической кривой S2 = (304±16) условных единиц (по тексту – у.е.) 3) the area under the kinetic curve S 2 = (304 ± 16) conventional units (in the text - conventional units)
4) cредняя скорость контракции = (0,034 ±0,001) % /сек.4) average contraction rate = (0.034 ± 0.001)% / sec.
Отклонения от указанных нормальных значений свидетельствуют о приводящих к прерыванию беременности патологических изменениях системы гемостаза в организме пациентки. Поскольку движущей силой контракции сгустка являются тромбоциты, заявленный способ используют прежде всего как тест для характеристики количества и функционального состояния тромбоцитов. Снижение (по сравнению с нормой) или отсутствие контракции сгустка свидетельствует о возможных предтромботических и тромботических состояниях, которые могут стать причиной наличия риска прерывания беременности. Например, при снижении количества тромбоцитов до 110 тыс/мкл наблюдается падение степени контракции К сгустка до 14% при норме (42±1)%.Deviations from these normal values indicate pathological changes in the hemostatic system in the patient's body leading to the termination of pregnancy. Since platelets are the driving force of clot contraction, the claimed method is used primarily as a test to characterize the number and functional state of platelets. A decrease (compared to normal) or absence of clot contraction indicates possible pre-thrombotic and thrombotic conditions that may cause the risk of termination of pregnancy. For example, with a decrease in the number of platelets to 110 thousand / μl, a decrease in the degree of contraction of the K clot to 14% is observed at the norm (42 ± 1)%.
Заявленный способ прогнозирования применим в комплексной диагностике заболеваний, связанных с рисками тромботических осложнений, приводящих к невынашиванию беременности. The claimed method for predicting is applicable in the complex diagnosis of diseases associated with the risks of thrombotic complications leading to miscarriage.
У пациенток с привычным невынашиванием беременности (ПНБ) при использовании заявленного технического решения наблюдаются и выявляются отклонения от нормальных значений следующих параметров: In patients with recurrent miscarriage (PNB), when using the claimed technical solution, deviations from the normal values of the following parameters are observed and detected:
1) конечная степень контракции К1A сгустка крови уменьшается в пределах К1A = (37±2)%, при норме К2A = (42±1)%; 1) the final degree of contraction K 1A of a blood clot decreases within K 1A = (37 ± 2)%, with a norm of K 2A = (42 ± 1)%;
2) лаг-период увеличивается в пределах (257±21) сек, при норме (199±17) сек; 2) the lag period increases within (257 ± 21) sec, while the norm is (199 ± 17) sec;
3) площадь S1 под кривой 1 уменьшается в пределах (260±15) условных единиц, при норме (304±16) у.е.; 3) the area S 1 under
4) cредняя скорость контракции уменьшается в пределах (0,031±0,001) %/сек, при норме (0,034±0,001) %/сек.4) the average contraction rate decreases within (0.031 ± 0.001)% / sec, while the norm is (0.034 ± 0.001)% / sec.
При получении свидетельствующих о патологии результатов обследования по усмотрению врача дополнительно делают развернутый анализ крови с лейкоформулой, оценку функционального состояния тромбоцитов и последующей консультацией гематолога. Совместное определение кинетики контракции сгустков крови и коагулограммы позволяет провести дифференциальную (различительную и уточненную) диагностику нарушений системы гемостаза у пациента и с достаточной для медицинской практики достоверностью (более 90%) диагностировать вероятность спонтанного прерывания беременности и при выявлении патологических показателей назначить антикоагулянтную или антиагрегантную терапию.Upon receipt of the examination results that indicate pathology, at the discretion of the doctor, an additional blood test with a leukoformula, an assessment of the functional state of platelets and the subsequent consultation of a hematologist are performed. The joint determination of the kinetics of contraction of blood clots and coagulogram allows for differential (distinctive and refined) diagnostics of disorders of the hemostasis system in a patient and, with sufficient reliability for medical practice (more than 90%), to diagnose the probability of spontaneous termination of pregnancy and, if pathological indicators are detected, prescribe anticoagulant or antiplatelet therapy.
Важно отметить, что при этом результаты скрининговых тестов (активированного частичного тромбопластинового времени, протромбинового и тромбинового времени) остаются в пределах нормы.It is important to note that the results of screening tests (activated partial thromboplastin time, prothrombin and thrombin time) remain within the normal range.
Отклонение от нормальных показателей динамики и полноты контракции сгустков крови у пациенток данной группы, выявляемое только с применением заявленного способа, свидетельствует о высокой вероятности приводящих к невынашиванию беременности тромботических осложнений и необходимости их профилактики. The deviation from the normal indicators of the dynamics and completeness of contraction of blood clots in patients of this group, detected only with the use of the claimed method, indicates a high probability of thrombotic complications leading to miscarriage and the need for their prevention.
Заявленный способ прогнозирования спонтанного прерывания беременности путем контракции сгустка крови позволяет прогнозировать возможные (пред)тромботические состояния, которые могут развиться у женщин в процессе беременности и привести к прерыванию беременности. The claimed method for predicting spontaneous abortion by contraction of a blood clot makes it possible to predict possible (pre) thrombotic conditions that may develop in women during pregnancy and lead to abortion.
Предлагаемое изобретение актуально для женщин, не принимающих антикоагулянтных, антиагрегантных и тромботических препаратов, а также не имеющих доказанный антифосфолипидный синдром. The proposed invention is relevant for women who do not take anticoagulant, antiplatelet and thrombotic drugs, as well as have no proven antiphospholipid syndrome.
Заявленный способ показал высокую эффективность при его (способа) использовании в медицинских учреждениях города Казань.The claimed method has shown high efficiency in its (method) use in medical institutions of the city of Kazan.
Пример 1. Пациентка М., 31 год, планируемая беременность четвертая, желательная. В анамнезе 2 выкидыша на малых сроках, кесарево сечение на 40-й неделе.Example 1. Patient M., 31 years old, planned fourth pregnancy, desirable. History of 2 short-term miscarriages, caesarean section at 40 weeks.
Проведено исследование по описанному выше заявленному способу: взяли пробу крови пациентки в содержащие цитрат натрия емкости, перенесли цитратную кровь в пробирку и добавили хлорид кальция и 1 ЕД/мл тромбина, взяли двухканальную измерительную кювету, ополаскивали раствором Тритона X-100 на хлориде натрия внутренние поверхности каналов кюветы, удалили остатки детергента, перенесли в измерительную кювету цитратную кровь с добавленным хлоридом кальция и тромбина, поместили кюветы в предварительно прогретую термостатируемую камеру, провели фотофиксацию в автоматическом режиме изменения размеров двумерного изображения сгустка крови, провели построение по результатам фиксации кинетической кривой (графика) зависимости изменения площади проекции сгустка от времени, определили и оценили по построенной кривой параметры динамики контракции сгустка крови, исследование проводили на этапе планирования пациенткой М. беременности – степень контракции составила 28%, лаг-период 135 сек, площадь под кинетической кривой 190 у.е, cредняя скорость контракции 0,023 %/сек. После этого проведены развернутый анализ крови с лейкоформулой, оценка функционального состояния тромбоцитов, консультация гематолога. Согласно анализам, определено наличие вероятности спонтанного прерывания беременности (наличие риска выкидыша при беременности). A study was carried out according to the claimed method described above: they took a blood sample of the patient into containers containing sodium citrate, transferred the citrate blood to a test tube and added calcium chloride and 1 U / ml of thrombin, took a two-channel measuring cuvette, rinsed the inner surfaces with Triton X-100 solution on sodium chloride channels of the cuvette, removed the detergent residues, transferred citrated blood with added calcium chloride and thrombin to the measuring cuvette, placed the cuvettes in a preheated thermostatic chamber, carried out photofixation in the automatic mode of changing the size of the two-dimensional image of the blood clot, plotted according to the results of fixing the kinetic curve (graph) the dependence of the change in the projection area of the clot on time, the parameters of the dynamics of the contraction of the blood clot were determined and evaluated according to the constructed curve, the study was carried out at the stage of planning by the patient M. of pregnancy - the degree of contraction was 28%, the lag period was 135 sec, the area under kin etic curve 190 cu, average contraction rate 0.023% / sec. After that, a detailed blood test with leukoformula, an assessment of the functional state of platelets, and a consultation with a hematologist were carried out. According to the analyzes, the presence of the likelihood of spontaneous abortion (the presence of a risk of miscarriage during pregnancy) was determined.
Диагноз: носительство генетических протромботических полиморфизмов. Гиперкоагуляционный синдром. Diagnosis: carriage of genetic prothrombotic polymorphisms. Hypercoagulable syndrome.
Заключение: прогноз исхода беременности – выкидыш, в случае отсутствия специфической профилактики. Conclusion: the prognosis of pregnancy outcome is miscarriage, in the absence of specific prophylaxis.
Для предотвращения нежелательного исхода планируемой беременности пациентке была назначена профилактическая терапия антикоагулянтами. To prevent the undesirable outcome of the planned pregnancy, the patient was prescribed prophylactic anticoagulant therapy.
Пациентка забеременела, на 5 неделе степень контракции составила 17%, лаг-период 720 сек, площадь под кинетической кривой 72 у.е., cредняя скорость контракции 0,014 %/сек. Рекомендованные процедуры и терапевтическое лечение для предотвращения нежелательного исхода планируемой беременности пациенткой выполнены лишь частично, не в полной мере, с нарушениями сроков приема лекарств.The patient became pregnant, at
Основанный на заявляемом способе прогноз впоследствии подтвердился – на 6-й неделе беременности произошел выкидыш. Это подтвердило достоверность диагностики по заявленному способу.The prognosis based on the claimed method was subsequently confirmed - a miscarriage occurred at the 6th week of pregnancy. This confirmed the reliability of the diagnosis according to the claimed method.
Пример 2. Пациентка В., 27 лет, планируемая беременность третья, желательная. В анамнезе 1 выкидыш на малых сроках, 1 выкидыш на 19 неделе беременности.Example 2. Patient C., 27 years old, planned third pregnancy, desirable. A history of 1 miscarriage at a short time, 1 miscarriage at 19 weeks of gestation.
Проведено исследование по описанному выше заявленному способу: контракция сгустка крови исследована на этапе планирования пациенткой В. беременности – степень контракции составила 16%, лаг-период 555 сек, площадь под кинетической кривой 83 у.е, cредняя скорость контракции 0,001%/сек. После чего проведены развернутый анализ крови с лейкоформулой, оценка функционального состояния тромбоцитов, консультация гематолога. Согласно анализам определено наличие вероятности спонтанного прерывания беременности (наличие риска выкидыша при беременности). A study was carried out according to the claimed method described above: the contraction of a blood clot was investigated at the stage of planning by patient V. of pregnancy - the degree of contraction was 16%, the lag period was 555 sec, the area under the kinetic curve was 83 cu, the average contraction rate was 0.001% / sec. After that, a detailed blood test with leukoformula, an assessment of the functional state of platelets, and a consultation with a hematologist were carried out. According to the analyzes, the presence of the likelihood of spontaneous abortion (the presence of a risk of miscarriage during pregnancy) was determined.
Диагноз: носительство генетических протромботических полиморфизмов. Diagnosis: carriage of genetic prothrombotic polymorphisms.
Заключение: прогноз исхода беременности – выкидыш, в случае отсутствия специфической профилактики. Conclusion: the prognosis of pregnancy outcome is miscarriage, in the absence of specific prophylaxis.
Для предотвращения нежелательного исхода планируемой беременности пациентке была назначена профилактическая терапия антикоагулянтами. To prevent the undesirable outcome of the planned pregnancy, the patient was prescribed prophylactic anticoagulant therapy.
Пациентка забеременела, на 5 неделе степень контракции составила 41%, лаг-период 240 сек, площадь под кинетической кривой 252 у.е., cредняя скорость контракции 0,027 %/сек. Рекомендованные процедуры и терапевтическое лечение для предотвращения нежелательного исхода планируемой беременности пациенткой выполнены. Показатели контракции на 5 неделе говорят о нормализации состояния гемостаза и эффективности терапии, что подтверждает благоприятный исход беременности.The patient became pregnant, at
Основанный заявляемым способом прогноз впоследствии подтвердился – терапия помогла, беременность прошла без осложнений, родился здоровый ребенок. Это подтвердило достоверность диагностики по заявленному способу.The prognosis based on the claimed method was subsequently confirmed - the therapy helped, the pregnancy passed without complications, and a healthy child was born. This confirmed the reliability of the diagnosis according to the claimed method.
Таким образом, из описанных выше жизненных примеров можно сделать логический вывод, что заявителем достигнуты поставленные задачи и заявленный технический результат путем заявленной совокупности существенных признаков, включенных в независимый пункт формулы изобретения. А именно – с использованием заявленного технического решения возможна (практически осуществима) своевременная, заранее, до наступления негативных последствий выполненная диагностика патологических изменений гемостаза у женщин, связанных с риском невынашивания беременности. Диагностика обеспечивает принятие соответствующих мер медицинской терапии, снижающих риск невынашивания беременности – как планируемых, так и на ранних стадиях беременности.Thus, from the life examples described above, it can be concluded that the applicant has achieved the set objectives and the claimed technical result by means of the claimed set of essential features included in the independent claim. Namely, with the use of the claimed technical solution, it is possible (practically feasible) timely, in advance, before the onset of negative consequences, the diagnosis of pathological changes in hemostasis in women associated with the risk of miscarriage. Diagnostics ensures that appropriate medical therapy is taken to reduce the risk of miscarriage, both planned and early in pregnancy.
Диагностика в результате применения заявленного способа по сравнению с прототипом является объективной, основанной на инструментальных измерениях, в отличие от присущего прототипу наличию влияния субъективных (вносимых человеком-исследователем) диагностических факторов. Например, заявленный способ не зависит от уровня квалификации выполняющего исследование работника, его физического и психологического состояния – так как способ является выполняемым инструментально и основанным на процессах, выполняемых с минимальным и несущественным вмешательством человека (оператора). Несущественным потому, что участие диагностирующего человека сводится лишь к запуску не влияющей на процесс контракции фотографической фиксации в автоматизированном режиме серии изображений двумерной проекции сгустка крови с последующей компьютерной обработкой и компьютерным расчетом параметров процесса. Полученные результаты – объективны, так как избавлены от влияния субъективных факторов, и более информативны, так как оценивают динамику контракции определяемыми стандартным способом количественными параметрами.Diagnostics as a result of the application of the claimed method in comparison with the prototype is objective, based on instrumental measurements, in contrast to the presence of the influence of subjective (introduced by a human researcher) diagnostic factors inherent in the prototype. For example, the claimed method does not depend on the skill level of the worker performing the research, his physical and psychological state - since the method is performed instrumentally and based on processes performed with minimal and insignificant human (operator) intervention. It is insignificant because the participation of a diagnosing person is reduced only to the launch of photographic fixation, which does not affect the contraction process, in an automated mode of a series of images of a two-dimensional projection of a blood clot with subsequent computer processing and computer calculation of the process parameters. The results obtained are objective, since they are free from the influence of subjective factors, and are more informative, since they evaluate the dynamics of contraction by quantitative parameters determined in a standard way.
Осуществляемая по заявленному техническому решению оценка процесса контракции кровяного сгустка избавлена от недостатков аналогов и прототипа, позволяет ввести в медицинскую практику новый способ для диагностики женщин с привычным невынашиванием беременности (ПНБ) из-за нарушений гемостаза, что, по данным ВОЗ, поможет сохранить беременность более 2,5 млн. женщин. Carried out according to the claimed technical solution, the assessment of the process of contraction of the blood clot is spared the disadvantages of analogs and the prototype, allows to introduce into medical practice a new method for diagnosing women with recurrent miscarriage (PNB) due to hemostasis disorders, which, according to the WHO, will help keep the pregnancy more 2.5 million women.
Заявленное техническое решение повышает достоверность диагностики, способствует результативной профилактике нарушений и повышению рождаемости. Итогом применения заявляемого способа является повышение качества жизни людей, способствующее решению демографических проблем. The claimed technical solution increases the reliability of diagnostics, contributes to effective prevention of disorders and an increase in the birth rate. The result of the application of the proposed method is to improve the quality of life of people, contributing to the solution of demographic problems.
Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «новизна», предъявляемому к изобретениям, так как при определении уровня техники не обнаружено средство, которому присущи признаки, идентичные (то есть совпадающие по исполняемой ими функции и форме выполнения этих признаков) всем признакам, перечисленным в формуле изобретения, включая характеристику назначения.The claimed technical solution complies with the "novelty" patentability condition for inventions, since when determining the level of technology, no means was found that have features identical (that is, coinciding in the function they perform and the form of performing these features) to all the features listed in the claims , including the description of the purpose.
Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень», предъявляемому к изобретениям, поскольку из исследованного уровня техники не выявлены технические решения, имеющие признаки, совпадающие с существенными признаками заявленного изобретения, и не установлена известность влияния существенных признаков на указанный технический результат.The claimed technical solution meets the requirement of patentability "inventive step" for inventions, since no technical solutions have been identified from the studied prior art that have features that coincide with the essential features of the claimed invention, and the influence of essential features on the specified technical result is not known.
Заявленное техническое решение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость», предъявляемому к изобретениям, так как может быть осуществлено с применением имеющихся в свободном доступе известных отечественных инструментов, оборудования, материалов, реактивов, комплектующих деталей и узлов, при этом может быть за короткий срок освоен медицинским персоналом и использован в практической деятельности медицинских учреждений.The claimed technical solution complies with the condition of patentability "industrial applicability" for inventions, since it can be carried out using freely available well-known domestic tools, equipment, materials, reagents, components and assemblies, while it can be mastered in a short time by medical personnel and used in the practice of medical institutions.
Claims (23)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020112189A RU2735988C1 (en) | 2020-03-25 | 2020-03-25 | Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020112189A RU2735988C1 (en) | 2020-03-25 | 2020-03-25 | Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2735988C1 true RU2735988C1 (en) | 2020-11-11 |
Family
ID=73460903
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020112189A RU2735988C1 (en) | 2020-03-25 | 2020-03-25 | Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2735988C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2341800C1 (en) * | 2007-08-24 | 2008-12-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Method of miscarriage prediction in first trimester of pregnancy |
| RU2390022C2 (en) * | 2007-12-19 | 2010-05-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский государственный медицинский университет" Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Diagnostic technique for threatened miscarriage |
| RU2596926C2 (en) * | 2014-12-31 | 2016-09-10 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (сокращенно - ФГАОУВПО КФУ) | Method for assessing dynamics and complete retraction (stabilization) of blood clot |
-
2020
- 2020-03-25 RU RU2020112189A patent/RU2735988C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2341800C1 (en) * | 2007-08-24 | 2008-12-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Method of miscarriage prediction in first trimester of pregnancy |
| RU2390022C2 (en) * | 2007-12-19 | 2010-05-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Российский государственный медицинский университет" Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Diagnostic technique for threatened miscarriage |
| RU2596926C2 (en) * | 2014-12-31 | 2016-09-10 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (сокращенно - ФГАОУВПО КФУ) | Method for assessing dynamics and complete retraction (stabilization) of blood clot |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| А.П. ЛОЖКИН и др. РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ НОВОГО МЕТОДА ИЗУЧЕНИЯ КОНТРАКЦИИ (РЕТРАКЦИИ) СГУСТКА КРОВИ / Гены и Клетки, 2014, т. IX, N 3, стр. 99-104 [Ссылка размещена на сайте Интернет 14.02.2017 https://cyberleninka.ru/article/n/razrabotka-i-primenenie-novogo-metoda-izucheniya-kontraktsii-retraktsii-sgustka-krovi; дата размещения подтверждена по адресу Web-архива https://web.archive.org/web/2017*/https://cyberleninka.ru/article/n/razrabotka-i-primenenie-novogo-metoda-izucheniya-kontraktsii-retraktsii-sgustka-krovi]. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mustard et al. | C-reactive protein levels predict postoperative septic complications | |
| Kamal et al. | How to interpret and pursue an abnormal prothrombin time, activated partial thromboplastin time, and bleeding time in adults | |
| CA2759534C (en) | Method for determining maternal health risks | |
| KR20020042622A (en) | Method for measuring coagulant factor activity in whole blood | |
| CA2380622C (en) | A method for predicting the presence of haemostatic dysfunction in a patient sample | |
| AU2008340656A1 (en) | Diagnostic in vitro method for assessing Von Willebrand Disease and increased bleeding risk associated with Von Willebrand Disease and acquired or congenital disorders of platelet function | |
| Peshkova et al. | Premorbid hemostasis in women with a history of pregnancy loss | |
| Suehiro et al. | Probability of soluble tissue factor release lead to the elevation of D-dimer as a biomarker for traumatic brain injury | |
| Lim et al. | Global coagulation assays in hypercoagulable states | |
| RU2735988C1 (en) | Method for assessment of dynamics and completeness of contraction of blood clots for prediction of probability of spontaneous abortion | |
| RU2483311C1 (en) | Diagnostic technique of preeclampsia in pregnant women with chronic arterial hypertension | |
| RU2429478C1 (en) | Method for predicting pregnancy complications in patients suffering trombophilia | |
| Orlikowski et al. | Coagulation monitoring in the obstetric patient | |
| RU2723627C1 (en) | Method for prediction of severe preeclampsia in pregnant women accompanying a mutation of the prothrombin gene, genotype f2g20210a | |
| RU2419800C1 (en) | Method of assessing risk of recurrent thrombotic events in patients with acute coronary syndrome | |
| Van Dreden et al. | Procoagulant phospholipids and tissue factor activity in cerebrospinal fluid from patients with intracerebral haemorrhage | |
| RU2618447C2 (en) | Method of assessing severity of intoxication | |
| Lin et al. | Study of the significance of thromboelastography changes in patients with dyslipidemia | |
| Mihalceanu et al. | The correlation between markers of systemic inflammation and angiogenic markers in pre-eclampsia | |
| KR20140023260A (en) | METHOD FOR TESTING FOR CEREBRAL INFARCTION VIA CARTILAGE ACIDIC PROTEIN l | |
| Peshkova et al. | Assessment of hemostatic function in women with a history of recurrent pregnancy loss using thrombodynamics and blood clot contraction tests | |
| RU2652894C1 (en) | Screening method for thrombophilia in patients with habitual miscarriage | |
| RU2543653C1 (en) | Diagnostic technique for coagulation failures in pregnant women in trimester 2-3 | |
| RU2737277C1 (en) | Method for prediction of risk of venous thromboembolic complications in severe burn injury | |
| RU2154823C1 (en) | Method for predicting gestosis development in early pregnancy period |