RU2704322C1 - Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте - Google Patents
Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2704322C1 RU2704322C1 RU2019118187A RU2019118187A RU2704322C1 RU 2704322 C1 RU2704322 C1 RU 2704322C1 RU 2019118187 A RU2019118187 A RU 2019118187A RU 2019118187 A RU2019118187 A RU 2019118187A RU 2704322 C1 RU2704322 C1 RU 2704322C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cream
- stromal cells
- inflammation
- mesenchymal stromal
- psoriasiform
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и представляет собой крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте, содержащий 8 – 10 мл секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, содержащего 10-1000 мкг белка на 1 мл питательной среды, и до 100 мл индифферентной кремовой основы. Изобретение обеспечивает купирование острого псориазиформного кожного воспаления в эксперименте. 7 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии.
Известно техническое решение, в котором применяют состав для распыления, содержащий клобетазол, для лечения псориаза (RU № 2397769, публ. 10.06.2009). В известном решении на пораженную псориазом кожу ежедневно в течение 4 недель распыляют композицию, содержащую эффективное количество пропионата клобетазола. Кроме того, композиция включает этиловый спирт, изопропилмиристат и анионный сурфактант.
Недостатком указанного способа является то, что, как известно, топические кортикостероиды имеют множество побочных эффектов в виде диспигментации, гипертрихоза, а также стероид-зависимого дерматита, тахифилаксии, развития кушингоида (Sharma R., Abrol S., Wani M. Misuse of topical corticosteroids on facial skin. A study of 200 patients. J Dermatol Case Rep. 2017 Mar 31;11(1):5-8. doi: 10.3315/jdcr.2017.1240);
Meena S, Gupta L.K., Khare A.K., Balai M., Mittal A., Mehta S., Bhatri G. «Topical Corticosteroids Abuse: A Clinical Study of Cutaneous Adverse Effects», Indian J Dermatol. 2017 Nov-Dec;62(6):675. doi: 10.4103/ijd.IJD_110_17;
Singh S.K., Nasir F. «The reservoir effect of topical steroids in vitiliginous skin: A cross-sectional study», Indian J Dermatol Venereol Leprol. 2015 Jul-Aug;81(4):370-5. doi: 10.4103/0378-6323.159933;
Н.С. Потекаев, А.Н. Львов, В.В. Фадеев, В.В. Самойленко «Тяжелые системные побочные эффекты топической стероидной терапии псориаза», Клиническая дерматология и венерология 1, 2013.
Известно техническое решение крем лечебно-профилактический "Чистопсор" (RU № 2307646, публ. 10.10.2007), включающий чистотел большой, череду трехраздельную и вазелин медицинский, дополнительно содержит корень щавеля конского, яичный белок, цветочный пчелиный мед и лецитин.
Недостатком данного средства является большое количество растительных компонентов, которые могут вызвать аллергические реакции в виде кожной сыпи, зуда. (Kim J.D. , Kim S.Y., Kwak E.J., Sol I.S., Kim M.J., Kim Y.H., Kim K.W., Sohn M.H. «Reduction Rate of Specific IgE Level as a Predictor of Persistent Egg Allergy in Children», Allergy Asthma Immunol Res. 2019 Jul;11(4):498-507. doi: 10.4168/aair.2019.11.4.498;
Bellón T. «Mechanisms of Severe Cutaneous Adverse Reactions: Recent Advances», Drug Saf. 2019 Apr 24. doi: 10.1007/s40264-019-00825-2;
Pokladnikova J, Meyboom R.H., Meincke R., Niedrig D., Russmann S. «Allergy-Like Immediate Reactions with Herbal Medicines: A Retrospective Study Using Data from VigiBase», Drug Saf. 2016 May;39(5):455-64. doi: 10.1007/s40264-016-0401-5).
Таким образом, проблема поиска новых лекарственных препаратов для лечения псориаза остается актуальной задачей. Одними из перспективных направлений в этой области является использование секретом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК). Известно противовоспалительное и иммуносупрессивное действие ММСК за счет ингибирования активности цитотоксических Т-лимфоцитов, дендритных клеток, макрофагов, стимуляции регуляторных Т-лимфоцитов, с соответствующими сдвигами в продукции цитокинов, в том числе – снижение дифференцировки Th17 и повышение дифференцировки и активности регуляторных Т-лимфоцитов (Bassi, E.J., Aita, C.A. and Camara, N.O. Immune regulatory properties of multipotent mesenchymal stromal cells: Where do we stand? World J Stem Cells. 2011, Vol. 3, 1; Mengyuan, W., Quan, Y., Liang X. Mesenchymal Stem Cell-Based Immunomodulation: Properties and Clinical Application. 2018. Article ID 3057624; Ghannam, S., Pène, J., Torcy-Moquet, G., et al. Mesenchymal stem cells inhibit human Th17 cell differentiation and function and induce a T regulatory cell phenotype. J Immunol. 2010, Vol. 185, pp. 302–312).
Особенность использования ММСК в медицине связана с возможностью их аллогенного введения, обусловленного такими свойствами этих клеток, как иммунопривелигерованность и способность к иммуносупрессии, которые к настоящему времени достаточно подробно изучены (Uccelli et al., 2006; Nauta & Fibbe, 2007; Jones &McTaggart 2008; Ankrum et al., 2014; Castro-Manrreza & Montesinos, 2015).
Известно, что мультипотентные мезенхимальные стромальные/стволовые клетки (ММСК) (Caplan,1991; Horwitz et al., 2005) способны мигрировать в поврежденные ткани-мишени, обеспечивая репарацию, поддерживать гемопоэз, а также подавлять иммунный ответ при аутологичном и аллогенном введении (Caplan, 2007; Da Silva Meirelles et al., 2008; Murphy et al., 2013).
Кроме того, ММСК костного мозга обладают высокой миграционной способностью, секретируют большое число биологически активных молекул и обладают иммуномодулирующим действием. Этими ключевыми свойствами ММСК костного мозга и обусловлена возможность их эффективного применения в качестве источников стволовых клеток для лечения гематологических, аутоиммунных, сердечно-сосудистых заболеваний, травм и заболеваний костно-суставной системы (Wang et al., 2011; Bernardo et al.,2012). Известно применение ММСК с противовоспалительной (Патент на изобретение № 2604672 Способ лечения септического шока в состоянии агранулоцитоза») и иммуносупрессивной (Патент на изобретение № 2298410 C1, 10.05.2007 - биотрансплантат для лечения аутоиммунных и ревматических заболеваний, содержащий мезенхимальные стволовые клетки) целью, а их секретома в регенеративной медицине - патент №217.015.CA5C 25.08.2017 «Способ получения средства для стимуляции регенерации на основе продуктов секреции мультипотентных мезенхимных стромальных клеток человека» и патент № 2280459 C1 – «средство для изменения скорости роста или репродукции клеток и для лечения, в том числе ран и ожогов, содержащее кондиционированную клеточную культуральную среду».
Задачей предполагаемого изобретения является создание более эффективного средства – крема, включающего использование секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, обладающего противовоспалительной и иммуносупрессивной активностью за счет комплекса гуморальных факторов для коррекции псориазиформного воспаления.
Поставленная задача решается с помощью предлагаемого крема с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте, содержащего секретом мультипотентных мезенимальных стромальных клеток и индифферентный детский крем, в следующем соотношении, в мл.:
- 8 - 10 секретома мультипотентных мезенимальных стромальных клеток, содержащего 10-1000 мкг белка на 1 мл питательной среды
- индифферентную кремовую основу – до 100.
Такое соотношение компонентов приводит к коррекции воспаления при моделируемой патологии. Данный эффект связан с выраженным противовоспалительным и иммуносупрессивным действием комплекса гуморальных факторов, составляющих секретом ММСК.
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ.
Приготовление крема с секретомом ММСК
В стерильных условиях в объем посуды вносили 10 мл секретома ММСК, содержащего 10-1000 мкг белка на 1 мл питательной среды. Секретом ММСК получают путем сбора питательной бессывороточной среды (МЕМ, DMEM, DMEM/F12, α-МЕМ, IMEM, изотонического солевого раствора, с рН 6,7-7,4, в любых их сочетаниях), в которой культивировали 1×105 – 1×108 ММСК на 1 мл, в течение 1-4 суток. Затем добавили объемом до 100 мл индифферентный крем (детский крем). После чего тщательно смешивали в течение 5-10 минут до получения однородной консистенции, затем полученный крем перекладывали в стерильную упаковку. Хранение крема перед использованием и в процессе эксперимента осуществляли при температуре +4°С.
Изобретение поясняется иллюстрациями, на которых:
Фиг. 1 и Фиг. 2 - развитие воспаление, после которого начиналось лечение;
Фиг. 3 – результат лечения в группе с отрицательным контролем (животные получали детский крем);
Фиг. 4 - результат лечения кремом, содержащим секретом ММСК.
Морфометрические показатели представлены на Фиг. 5-7:
Фиг. 5 - показатели общей клеточности препаратов. * - p<0,05;
Фиг. 6 - показатели толщины дермы. * - p<0,05;
Фиг. 7 - выраженность акантоза. * - p<0,05.
Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar 214 до 256 г, на которых было смоделировано псориазиформное воспаление. Псориазиформное воспаление вызывали путем ежедневного нанесения на кожу спины по 50 мкл 1% суспензии Imiquimod (Xi'an Leader Biochemical Engineering Co.,Ltd, China) в оливковом масле с ДМСО и с 1 мл ацетона в соотношении 1:8:1, в течение 4 дней.
После развития выраженного воспаления с появлением крупнопластинчатого шелушения, экскориаций, с обеих сторон начинали лечение: с одной стороны каждое животное получало детский крем (отрицательный контроль), с другой стороны –крем с добавлением секретома ММСК в соответствующей группе, нанесение осуществляли 1 раз в день в течение 3 дней. На 8-й день эксперимента животных подвергали эвтаназии и забирали фрагменты кожи на гистологическое исследование.
Фрагменты кожи фиксировали 4% формальдегидом, окрашивали гематоксилином и эозином. Морфометрические исследования проводили на микроскопе AxioScope A1 в программном пакете Fiji (ImageJ 2.0). Статистическую обработку проводили в MS Excel 2013 с использованием критерия Даннета.
При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при p<0,05.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.
Выявлена эффективность местного применения секретома ММСК в купировании псориазиформного воспаления у крыс линии Wistar как по клиническим признакам, так и по морфометрическим показателям. Так общая клеточность препаратов в отрицательном контроле (животные получали детский крем) составила 876,9±77,5 (M±sd), а в опытной группе – 589,4±105,4. Толщина дермы в мкм в контроле – 893,0±71,1, а в случае применения секретома ММСК – 629,1±48,0. Также под влиянием факторов, продуцируемых ММСК, статистически значимо уменьшался такой характерный для псориатического поражения кожи признак, как акантоз: 253,6±35,9 мкм в опытной группе, получавшей крем с ММСК и 677,1±80,6 мкм в отрицательном контроле (применялся детский крем). Данные полученных исследований приведены в таблице 1.
Таблица 1
Таким образом, противовоспалительная и иммуносупрессивная активность комплекса гуморальных факторов, составляющих секретом ММСК, обеспечила купирование острого псориазиформного кожного воспаления.
Claims (3)
- Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте, характеризующийся содержанием секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток и индифферентного крема, в следующем соотношении, мл:
- - 8 - 10 секретома мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, содержащего 10-1000 мкг белка на 1 мл питательной среды;
- - остальное индифферентная кремовая основа до 100.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019118187A RU2704322C1 (ru) | 2019-06-11 | 2019-06-11 | Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019118187A RU2704322C1 (ru) | 2019-06-11 | 2019-06-11 | Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2704322C1 true RU2704322C1 (ru) | 2019-10-28 |
Family
ID=68500460
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019118187A RU2704322C1 (ru) | 2019-06-11 | 2019-06-11 | Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2704322C1 (ru) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2298861A2 (en) * | 2004-03-22 | 2011-03-23 | Osiris Therapeutics, Inc. | Mesenchymal stem cells and uses therefor |
EP2620156A2 (en) * | 2010-08-23 | 2013-07-31 | Kang Stem Holdings Co., Ltd | Pharmaceutical composition for preventing or treating immune diseases or inflammatory diseases, containing stem cells treated with nod2 agonist or cultured product thereof |
US20160243250A1 (en) * | 2013-10-04 | 2016-08-25 | The Regents Of The University Of California | Treating inflammation using llp2a-bisphosphonate conjugates and mesenchymal stem cells |
US20170020914A1 (en) * | 2010-06-15 | 2017-01-26 | Histocell, S.L. | Antioxidant composition |
WO2018073837A1 (en) * | 2016-10-19 | 2018-04-26 | F Khorakiwala Habil | Topical dressing composition for the treatment of damaged skin tissue |
RU2662564C2 (ru) * | 2012-07-04 | 2018-07-26 | ЗЗ Байотек ЛЛС | Лечение воспалительных заболеваний кожи |
-
2019
- 2019-06-11 RU RU2019118187A patent/RU2704322C1/ru active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2298861A2 (en) * | 2004-03-22 | 2011-03-23 | Osiris Therapeutics, Inc. | Mesenchymal stem cells and uses therefor |
US20170020914A1 (en) * | 2010-06-15 | 2017-01-26 | Histocell, S.L. | Antioxidant composition |
EP2620156A2 (en) * | 2010-08-23 | 2013-07-31 | Kang Stem Holdings Co., Ltd | Pharmaceutical composition for preventing or treating immune diseases or inflammatory diseases, containing stem cells treated with nod2 agonist or cultured product thereof |
RU2662564C2 (ru) * | 2012-07-04 | 2018-07-26 | ЗЗ Байотек ЛЛС | Лечение воспалительных заболеваний кожи |
US20160243250A1 (en) * | 2013-10-04 | 2016-08-25 | The Regents Of The University Of California | Treating inflammation using llp2a-bisphosphonate conjugates and mesenchymal stem cells |
WO2018073837A1 (en) * | 2016-10-19 | 2018-04-26 | F Khorakiwala Habil | Topical dressing composition for the treatment of damaged skin tissue |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hashemi et al. | The healing effect of Wharton's jelly stem cells seeded on biological scaffold in chronic skin ulcers: A randomized clinical trial | |
Burlando et al. | Honey in dermatology and skin care: a review | |
Insausti et al. | Amniotic membrane induces epithelialization in massive posttraumatic wounds | |
Thakur et al. | Practices in wound healing studies of plants | |
US20230149490A1 (en) | Novel composition comprising edelweiss-derived exosome as active ingredient | |
KR20160121847A (ko) | 백미 추출물의 지표성분인 시나프산 또는 이를 함유하는 백미 추출물을 함유하는 피부재생용 화장료 조성물 및 상처 치료용 약학 조성물 | |
KR102341932B1 (ko) | 장미 줄기세포 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 항염, 상처 치료 또는 상처 치료 촉진용 조성물 | |
Lee et al. | Treatment of chemically induced oral ulcer using adipose‐derived mesenchymal stem cell sheet | |
Mai et al. | Synergistic effect of bismuth subgallate and borneol, the major components of Sulbogin®, on the healing of skin wound | |
KR20100079586A (ko) | 엉겅퀴 추출물을 함유하는 항아토피 피부염 조성물 | |
CN103182070A (zh) | 一种外用组合物、制剂及其应用 | |
Kirsner et al. | Durability of healing from spray‐applied cell therapy with human allogeneic fibroblasts and keratinocytes for the treatment of chronic venous leg ulcers: A 6‐month follow‐up | |
Phillips et al. | Cultured allogenic keratinocyte grafts in the management of wound healing: prognostic factors | |
RU2704322C1 (ru) | Крем с секретомом мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток для коррекции псориазиформного воспаления в эксперименте | |
Liu et al. | Repairing and Regenerating Injured Endometrium Methods | |
Aqsa et al. | Efficacy of Aloe vera cream for healing diabetic foot ulcers | |
US20200230172A1 (en) | Stem cell conditioned media for clinical and cosmetic applications | |
Fromes et al. | The tetrapeptide acetyl‐serine‐aspartyl‐lysine‐proline improves skin flap survival and accelerates wound healing | |
KR20150142287A (ko) | 식물추출물을 포함하는 줄기세포 증식 촉진용 배지 조성물 | |
Shivhare et al. | Healing potential of Trichosanthes dioica Roxb on burn wounds | |
Hemmati et al. | Evaluation of the healing effects of Onosma bolbutrichum root extract on second degree burn wound in rabbit | |
Sen et al. | Wound repair and regenerating effect of ethyl acetate soluble fraction of ethanolic extract of Cinnamomum camphora leaves in wistar albino rats | |
KR20160122052A (ko) | 피뿌리풀 추출물 또는 그의 분획물을 포함하는 상처를 치료하기 위한 조성물 및 개체의 상처를 치료하는 방법 | |
CN110585478A (zh) | 一种植发修复液及其制备方法 | |
KR102565365B1 (ko) | 캣닢 유래의 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 새로운 조성물 |