RU2699206C1 - Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot - Google Patents

Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot Download PDF

Info

Publication number
RU2699206C1
RU2699206C1 RU2019105662A RU2019105662A RU2699206C1 RU 2699206 C1 RU2699206 C1 RU 2699206C1 RU 2019105662 A RU2019105662 A RU 2019105662A RU 2019105662 A RU2019105662 A RU 2019105662A RU 2699206 C1 RU2699206 C1 RU 2699206C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
clot
autologous
cornea
thrombofibrin
corneal
Prior art date
Application number
RU2019105662A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Екатерина Валериановна Ченцова
Елена Викторовна Федосеева
Иван Николаевич Пономарев
Наталья Валерьевна Боровкова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России)
Priority to RU2019105662A priority Critical patent/RU2699206C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2699206C1 publication Critical patent/RU2699206C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61FFILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F9/00Methods or devices for treatment of the eyes; Devices for putting-in contact lenses; Devices to correct squinting; Apparatus to guide the blind; Protective devices for the eyes, carried on the body or in the hand
    • A61F9/007Methods or devices for eye surgery
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14Blood; Artificial blood
    • A61K35/19Platelets; Megacaryocytes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents

Abstract

FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention relates to medicine, specifically to ophthalmology. To treat deep corneal defects, an autologous thrombofibrin clot is placed on the surface of the cornea. First, autologous plasma is obtained by single-step centrifugation from non-stabilized blood. It is incubated at room temperature until formation of gel. After constriction, clot characterized by content of functionally complete thrombocytes in concentration of at least 240*10/l, placed on the cornea, covered with an amniotic membrane and fixed with sutures. Subconjunctivally in 4 quadrants by limb there introduced is autologous serum in total volume 0.5 ml and tarsorrhaphy is administered. Procedure is repeated once a week until complete epithelisation.EFFECT: method provides reducing the length of healing of damaged corneal surface, improving quality of its healing, forming turbidity of lower intensity in case of deep injuries.1 cl, 1 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии и предназначено для лечения пациентов с глубокими дефектами роговицы различной этиологии. Данная проблема признана одной из важнейших социально-экономических и этических проблем современного мира. По данным ВОЗ (2006), роговичная слепота составляет 4-5% среди всех причин слепоты во всем мире. По данным регионов Российской Федерации, за 2010 год, роговичная слепота составляет 5,9% от всех слепых и слабовидящих России. В структуре роговичной слепоты РФ 9% приходится на язвы роговицы, 21% - это пациенты с рубцами и помутнениями роговицы, больные с ожоговой болезнью глаз составляют от 6 до 38,4% среди всех глазных повреждений, и более 40% пациентов, имеющих заболевания роговицы, становятся инвалидами по зрению.The present invention relates to ophthalmology and is intended for the treatment of patients with deep defects of the cornea of various etiologies. This problem is recognized as one of the most important socio-economic and ethical problems of the modern world. According to WHO (2006), corneal blindness accounts for 4-5% of all causes of blindness worldwide. According to the regions of the Russian Federation, for 2010, corneal blindness accounts for 5.9% of all blind and visually impaired in Russia. In the structure of corneal blindness of the Russian Federation, 9% are corneal ulcers, 21% are patients with scars and clouding of the cornea, patients with burn eye disease account for 6 to 38.4% of all eye injuries, and more than 40% of patients with corneal diseases become visually impaired.

Уровень техникиState of the art

Традиционная консервативная терапия пациентов с повреждениями роговицы предполагает применение антибактериальных препаратов, препаратов нуклеинового ряда, декспантенола, солкосерила для ускорения репаративных процессов в роговице. Хирургическое лечение включает поверхностную кератэктомию, с последующим укрытием дефектаамниотической мембраной [Макаров П.В., Кугушева А.Э., Слепова О.С., Ченцова Е.В., Хазамова А.И. // Российский офтальмологический журнал - N2, 2015. С. 41-44]. Однако такое лечение не всегда сопровождается восстановлением ткани роговицы, в связи с чем продолжается поиск наиболее эффективного способа лечения язвенных дефектов роговицы. Кроме того, применение антибактериальных и противовирусных препаратов оказывает угнетающее действие на процессы репарации и регенерации, учитывая механизм их действия, заключающийся в нарушении процессов синтеза ДНК, что в конечном итоге нередко приводит к необходимости хирургического лечения, включая пересадку роговицы.The traditional conservative treatment of patients with corneal injuries involves the use of antibacterial drugs, nucleic acid preparations, dexpanthenol, solcoseryl to accelerate reparative processes in the cornea. Surgical treatment includes superficial keratectomy, followed by covering with a defective amniotic membrane [Makarov P.V., Kugusheva A.E., Slepova OS, Chentsova E.V., Khazamova A.I. // Russian Ophthalmological Journal - N2, 2015. P. 41-44]. However, such treatment is not always accompanied by restoration of corneal tissue, and therefore the search continues for the most effective way to treat corneal ulcer defects. In addition, the use of antibacterial and antiviral drugs has a depressing effect on the processes of repair and regeneration, given the mechanism of their action, which consists in disrupting the processes of DNA synthesis, which ultimately often leads to the need for surgical treatment, including corneal transplantation.

Альтернативным методом лечения является применение аутологичных препаратов крови, содержащих факторы роста для ускорения процессов репарации тканей глаза (цельная аутокровь, лейкотромбоцитарная масса, богатая тромбоцитами плазма). Наиболее перспективным является применение богатой (или обогащенной) тромбоцитами плазмы (БоТП или plateletrichplasma - PRP). На протяжении многих лет она успешно используется для купирования воспаления и ускорения регенерации различных тканей [Foster Т.Е., Puskas B.L., Mandelbaum B.R., Gerhardt М.В., Rodeo S.A. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications. Am J Sports Med. 2009, vol. 37, №11, pp. 2259-2272].An alternative method of treatment is the use of autologous blood preparations containing growth factors to accelerate the repair of eye tissue (whole autologous blood, platelet rich plasma rich in platelets). The most promising is the use of plasma rich in (or enriched) platelets (BoTP or plateletrichplasma - PRP). Over the years, it has been successfully used to stop inflammation and accelerate the regeneration of various tissues [Foster T.E., Puskas B.L., Mandelbaum B.R., Gerhardt M.V., Rodeo S.A. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications. Am J Sports Med. 2009, vol. 37, No. 11, pp. 2259-2272].

При лечении повреждения роговицы главной задачей является купирование воспалительной реакции, усиление и ускорение репарации, чего можно добиться посредством применения биологически активных пептидов, содержащихся в гранулах тромбоцитов человека. Известно, что альфа-гранулы тромбоцитов содержат более 30 цитокинов и факторов роста, которые способствуют улучшению репаративных процессов в тканях. Факторы роста, высвобождаемые из активированных тромбоцитов, инициируют и модулируют заживление ран [Nurden А.Т., Nurden P., Sanchez M., Andia I.,etal. Platelet sand wound healing. // Front. Biosci., 2008, 13, 3532-3548].In the treatment of corneal damage, the main task is to stop the inflammatory reaction, enhance and accelerate repair, which can be achieved through the use of biologically active peptides contained in human platelet granules. It is known that platelet alpha granules contain more than 30 cytokines and growth factors that contribute to the improvement of reparative processes in tissues. Growth factors released from activated platelets initiate and modulate wound healing [Nurden A.T., Nurden P., Sanchez M., Andia I., etal. Platelet sand wound healing. // Front. Biosci., 2008, 13, 3532-3548].

Известен способ лечения герпетических эрозий роговицы с помощью БоТП (патент RU 2653260,05.07.18). Способ лечения проводят в два этапа. Первый этап включает 3 недели, на протяжении которых проводят противовирусную, антибактериальную, репаративную терапию. На втором этапе лечения после курса противовирусной терапии, инсталлируют богатую тромбоцитами плазму 6 раз в день в сочетании с субконъюнктивальной инъекцией богатой тромбоцитами плазмы 1 раз в неделю. Длительность лечения составляет от 3 до 5 недель. При такой форме применения БоТП отсутствие клинического эффекта в ряде случаев может быть связано с недостаточной концентрацией цитокинов в месте повреждения роговицы за счет смывания или разбавления БоТП слезной жидкостью.A known method of treating herpetic erosion of the cornea using BoTP (patent RU 2653260,05.07.18). The treatment method is carried out in two stages. The first stage includes 3 weeks, during which antiviral, antibacterial, reparative therapy is carried out. In the second stage of treatment, after a course of antiviral therapy, a platelet-rich plasma is installed 6 times a day in combination with a subconjunctival injection of platelet-rich plasma 1 time per week. The duration of treatment is from 3 to 5 weeks. With this form of application of BTP, the absence of a clinical effect in some cases may be associated with an insufficient concentration of cytokines at the site of corneal damage due to rinsing or dilution of BTP with lacrimal fluid.

Известен способ лечения эрозивных и других повреждений роговицы с помощью аутологичного тромбофибринового сгустка, который фиксируют амниотической мембраной (Alio J.L., Arnalich-Montiel F, Rodriguez AE. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology. // Curr Pharm Biotechnol. 2012 Jun; 13(7): 1257-65]. Для получения сгустка у пациента производят забор 40-60 мл венозной крови непосредственно перед операцией, после одноступенчатого центрифугирования отбирали плазму, ближайшую к эритроцитам, избегая слоя лимфоцитов. Концентрация тромбоцитов в БоТП в 2-3 раза выше, чем в цельной крови. Один миллилитр полученной БоТП помещали в каждую лунку 4-луночного планшета с плоским дном и добавляли 50 мкл 10% хлорида кальция для активации, затем инкубировали при t37°C в течение 30 минут. Через 30 минут формировался сгусток БоТП, готовый к наложению на дефект поверхности роговицы с фиксацией его под амниотической мембраной.A known method of treating erosive and other corneal injuries with an autologous thrombofibrin clot that is fixed with an amniotic membrane (Alio JL, Arnalich-Montiel F, Rodriguez AE. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology. // Curr Pharm Biotechnol. 2012 Jun; 13 (7): 1257-65]. To obtain a clot, a patient is sampled 40-60 ml of venous blood immediately before surgery, after a single-stage centrifugation, the plasma closest to the red blood cells was taken, avoiding the layer of lymphocytes. The platelet concentration in BTP is 2-3 times higher than in whole blood. an in milliliter of the obtained BOT was placed in each well of a 4-well flat-bottom plate and 50 μl of 10% calcium chloride was added for activation, then incubated at t37 ° C for 30 minutes. After 30 minutes, a BOT clot formed, ready to be applied to the surface defect corneas with its fixation under the amniotic membrane.

При таком способе лечения, также отмечены единичные случаи низкой клинической эффективности, что, вероятно, связано с использованием при приготовлении сгустка БоТП с низкой концентрацией функционально полноценных тромбоцитов, а также преждевременной элиминацией из сгустка короткоживущих рост-стимулирующих цитокинов. Кроме того, при образовании сгустка используется активатор свертывания (хлорид кальция), что приводит к необходимости вскрытия пробирки, а также к увеличению риска контаминации посторонней микрофлорой. Недостатком способа является также отсутствие стандартизации плазмы по количеству функционирующих тромбоцитов и в связи с этим неоднозначность получаемого эффекта у различных больных.With this method of treatment, isolated cases of low clinical efficacy were also noted, which is probably due to the use of functionally complete platelets in the preparation of a BTP clot with a low concentration, as well as premature elimination of short-lived growth-stimulating cytokines from the clot. In addition, in the formation of a clot, a coagulation activator (calcium chloride) is used, which leads to the need for opening the test tube, as well as to an increased risk of contamination by extraneous microflora. The disadvantage of this method is the lack of standardization of plasma by the number of functioning platelets and, therefore, the ambiguity of the effect obtained in various patients.

Задачей изобретения является дальнейшее совершенствование способа лечения дефектов роговицы с использованием сгустка и сыворотки, полученных из БоТП.The objective of the invention is to further improve the method of treatment of corneal defects using a clot and serum obtained from BoTP.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является сокращение сроков заживления поврежденной поверхности роговицы, улучшение качества ее заживления, формирование помутнения меньшей интенсивности при глубоких повреждениях.The technical result of the invention is to reduce the healing time of the damaged surface of the cornea, improve the quality of its healing, the formation of turbidity of lesser intensity with deep damage.

Технический результат достигается за счет использования тромбофибринового сгустка, сформированного из аутоплазмы, полученной из нестабилизированной крови и обработанной путем одноэтапного центрифугирования, выдержанной при комнатной температуре и характеризующийся содержанием функционально полноценных тромбоцитов в концентрации не менее 240*109/л и фиксации его амниотической мембраной, а также за счет дополнительного субконъюнктивального введения по лимбу в 4-х квадрантах аутологичной сыворотки и проведения тарзорафии.The technical result is achieved through the use of a thrombofibrin clot formed from autoplasma obtained from unstabilized blood and processed by one-stage centrifugation, kept at room temperature and characterized by the content of functionally complete platelets in a concentration of at least 240 * 10 9 / L and fixing it with an amniotic membrane, and also due to the additional subconjunctival introduction of the limb in 4 quadrants of autologous serum and the implementation of tarzarafiya.

Важным аспектом является форма препарата, которая позволяет обеспечить целевую концентрацию цитокинов в течение длительного времени. С этой точки зрения использование БоТП в виде сгустка сопровождается медленным выходом из клеток рост-стимулирующих и противовоспалительных цитокинов. Таким образом, можно получить более длительное, постепенное терапевтическое воздействие непосредственно в зоне повреждения роговицы пациента.An important aspect is the form of the drug, which allows you to provide the target concentration of cytokines for a long time. From this point of view, the use of BOTP in the form of a clot is accompanied by a slow exit from cells of growth-stimulating and anti-inflammatory cytokines. Thus, it is possible to obtain a longer, gradual therapeutic effect directly in the area of damage to the cornea of the patient.

Использование терапевтически значимого уровня биологически активных факторов в зоне повреждения в виде тромбофибринового сгустка (БоТП), характеризующегося содержанием функционально полноценных тромбоцитов (с гранулами) в определенной концентрации обеспечивает наиболее полноценный эффект в зоне повреждения роговицы.The use of a therapeutically significant level of biologically active factors in the lesion area in the form of a thrombofibrin clot (BOT), characterized by the content of functionally complete platelets (with granules) in a certain concentration, provides the most complete effect in the area of corneal damage.

Субконъюнктивальное введение по лимбу в 4-х квадрантах аутологичной сыворотки оказывает стимулирующее влияние на клетки лимбальной зоны, а вместе с тем усиление процессов регенерации роговицы. Сочетание эффекта от присутствующего на поверхности роговицы тромбофибринового сгустка и введенной аутологичной сыворотки обеспечивает усиление лечебного эффекта.Subconjunctival administration of the limb in 4 quadrants of autologous serum has a stimulating effect on the cells of the limbal zone, and at the same time, enhances the processes of corneal regeneration. The combination of the effect of the thrombofibrin clot present on the surface of the cornea and the introduced autologous serum enhances the therapeutic effect.

Тарзорафия действует как дополнительная биологическая повязка, препятствующая смещению сгустка и защищающая переднюю поверхность глаза от внешних воздействий, что также вносит свой вклад в получение адекватного клинического эффекта.Tarsoraphia acts as an additional biological dressing that prevents clot displacement and protects the front surface of the eye from external influences, which also contributes to an adequate clinical effect.

На первом этапе пациента из кубитальной вены забирают кровь в объеме 2 мл в пробирку с антикоагулянтом ЭДТА для подсчета количества и морфофункционального статуса тромбоцитов. Определение относительной и абсолютной концентрации полноценных тромбоцитов проводят по патенту RU 2485502, 20.06.13. На основании полученных данных рассчитывают требуемое количество крови, необходимое для получения БоТП. Затем у пациента из вены забирают кровь в стерильную «сухую» пробирку без консерванта, охлаждают и транспортируют в течение 30-60 минут в лабораторию. Получение тромбофибринового сгустка и сыворотки проводят с соблюдением правил асептики и антисептики в стерильных условиях. Плазму получают путем одноэтапного центрифугирования из охлажденной нестабилизированной крови. Затем с сохранением стерильности из пробирки отбирают надосадочную плазму с тромбоцитами. Плазму с тромбоцитами помещают в стерильную емкость выдерживают при комнатной температуре (18-25°С) до формирования геля. Полученный гель готов к применению. Разделение на сгусток и сыворотку происходит самостоятельно вследствие констрикции сгустка в момент применения. Полученную сыворотку можно далее использовать.At the first stage of the patient, 2 ml of blood is taken from a cubital vein into a tube with an EDTA anticoagulant to calculate the number and morphofunctional status of platelets. The determination of the relative and absolute concentration of full platelets is carried out according to the patent RU 2485502, 06/20/13. Based on the data obtained, the required amount of blood required to obtain BTP is calculated. Then, blood is taken from a patient from a vein into a sterile “dry” test tube without a preservative, cooled and transported to the laboratory for 30-60 minutes. Obtaining a thrombofibrin clot and serum is carried out in compliance with the rules of asepsis and antiseptics in sterile conditions. Plasma is obtained by one-step centrifugation from chilled unstabilized blood. Then, with the preservation of sterility, the supernatant plasma with platelets is taken from the tube. Plasma with platelets is placed in a sterile container kept at room temperature (18-25 ° C) until gel formation. The resulting gel is ready for use. Separation into a clot and serum occurs independently due to constriction of the clot at the time of application. The resulting serum can be further used.

Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.

Сначала получают аутологичную плазму путем одноэтапного центрифугирования из нестабилизированной крови. Инкубируют ее при комнатной температуре до образования геля. После констрикции, сгусток, характеризующийся содержанием функционально полноценных тромбоцитов в концентрации не менее 240*109/л. размещают на роговице и фиксируют с помощью амниотической мембраны. Субконъюнктивально в 4-х квадрантах по лимбу вводят оставшуюся сыворотку в общем объеме 0,5 мл и проводят тарзорафию. При недостаточной эпителизации процедуру повторяют 1 раз в неделю до полной эпителизации.First, autologous plasma is obtained by one-step centrifugation from unstabilized blood. Incubate it at room temperature until gel formation. After constriction, a clot characterized by the content of functionally complete platelets in a concentration of at least 240 * 10 9 / L. placed on the cornea and fixed using an amniotic membrane. The remaining serum in a total volume of 0.5 ml is administered subconjunctively in 4 quadrants of the limb and tarsoraphy is performed. With insufficient epithelialization, the procedure is repeated 1 time per week until complete epithelization.

Клинический пример.Clinical example.

Пациент В., 1975 года рождения, поступил в стационар с диагнозом: постожоговая персистирующая эрозия роговицы с субтотальной конъюнктивизацией, лимбально-клеточная недостаточность правого глаза. Проводили стандартное обследование: визометрию, ориентировочное пальпаторное измерение ВГД, биомикроскопию с флюоресцеиновой пробой. Из анамнеза: со слов ожог произошел в быту (кипятком). Находился на стационарном лечении по месту жительства, где проводили длительную консервативную терапию. Спустя 3 месяца после травмы пациент обратился в Институт с жалобами на отсутствие предметного зрения, ощущение инородного тела, слизистое отделяемое из глаза.Patient V., born in 1975, was admitted to the hospital with a diagnosis of persistent corneal erosion with subtotal conjunctivization, limbal-cell insufficiency of the right eye. Conducted a standard examination: visometry, tentative palpation measurement of IOP, biomicroscopy with fluorescein breakdown. From the anamnesis: according to the words, the burn occurred in everyday life (boiling water). He was hospitalized at the place of residence, where they carried out long-term conservative therapy. 3 months after the injury, the patient turned to the Institute complaining of a lack of objective vision, a foreign body sensation, and mucous discharge from the eye.

При поступлении Vis OD pr.l.certae OS 1,0. При осмотре глазная щель сужена. Отмечается инъекция сосудов конъюнктивы. Конъюнктивизация роговицы с расширенными, извитыми сосудами. В центре роговицы эрозия диаметром 5,5×5,0 мм, с неоднородной поверхностью. Передняя камера средней глубины, зрачок в центре, детали за флером. Глубжележащие структуры не визуализируются.Upon receipt of Vis OD pr.l.certae OS 1.0. On examination, the palpebral fissure is narrowed. Conjunctival vascular injection is noted. Conjunctivization of the cornea with dilated, convoluted vessels. In the center of the cornea, erosion with a diameter of 5.5 × 5.0 mm, with a heterogeneous surface. The anterior chamber is of medium depth, the pupil in the center, details behind the fleur. Deep structures are not visualized.

Учитывая, что пациенту проводилась длительная (в течение 3 месяцев) репаративная терапия с использованием кератопротекторов без видимого эффекта, принято решение о применении тромбофибринового сгустка. Информированное согласие на использование аутологичного тромбофибринового сгустка получено. Пациенту также проводилась противовоспалительная, дезинтоксикационная и репаративная терапия.Given that the patient underwent long-term (for 3 months) reparative therapy using keratoprotectors without a visible effect, a decision was made to use a thrombofibrin clot. Informed consent to use an autologous thrombofibrin clot has been obtained. The patient was also given anti-inflammatory, detoxification and reparative therapy.

Накануне операции у пациента произвели забор 20 мл крови из кубитальной вены перед операцией. С сохранением стерильности, кровь транспортировали в ГБУЗ НИИ СП им. Н.В. Склифосовского ДЗМ при +4°С для получения персонифицированного биотрансплантата. Пробирки с кровью центрифугировали. Затем с сохранением стерильности из пробирки отобрали надосадочную плазму с тромбоцитами. Плазму с тромбоцитами поместили в стерильную емкость с круглым дном, герметично закрыли и выдержали при комнатной температуре до формирования тромбофибринового геля. При отделении геля от стенок пробирки произошла констрикция и разделение его на сгусток и сыворотку.On the eve of the operation, 20 ml of blood from the cubital vein was taken from the patient before surgery. With the preservation of sterility, blood was transported to GBUZ Research Institute of Sp. N.V. Sklifosovsky DZM at + 4 ° C to obtain a personalized biotransplant. Blood tubes were centrifuged. Then, with preservation of sterility, the supernatant plasma with platelets was taken from the tube. Platelet plasma was placed in a sterile round-bottom container, hermetically closed and kept at room temperature until a thrombofibrin gel was formed. Upon separation of the gel from the walls of the tube, constriction occurred and its separation into a clot and serum.

Полученный сгусток уложили на поверхность роговицы, затем сверху покрыли амниотической мембраной. Мембрану фиксировали по границе лимба циркулярным швом, по лимбу в 4-х квадрантах произвели инъекции аутологичной сыворотки в общем объеме 0,5 мл. После этого была выполнена временная латеральная тарзорафия.The resulting clot was laid on the surface of the cornea, then coated with an amniotic membrane from above. The membrane was fixed along the limb border with a circular suture, autologous serum was injected in 4 quadrants along the limb in a total volume of 0.5 ml. After this, a temporary lateral tarzarafia was performed.

Через 2 дня отметили уплощение сгустка по форме роговицы под амниотической мембраной.After 2 days, flattening of the clot in the shape of the cornea under the amniotic membrane was noted.

На 5 сутки провели расшивание век. Амниотическая мембрана и остатки тромбофибринового сгустка были удалены для оценки эпителизации. При осмотре выявлено равномерное окрашивание флюоресцеином. Площадь эрозии сократилась до 4,0×4,0 мм, обрела более четкие границы.On the 5th day spent eyelid broadening. The amniotic membrane and thrombofibrin clot residues were removed to assess epithelization. On examination, uniform staining with fluorescein was revealed. The area of erosion was reduced to 4.0 × 4.0 mm, found more clear boundaries.

Учитывая положительную динамику, но не полное закрытие дефекта, процедуру повторили. Пациент был выписан под амбулаторное наблюдение с необходимостью осмотра через 2 недели. При повторном осмотре, после снятия швов с век и удаления остатков амниотической мембраны с роговицы, наблюдали уменьшение инъекции глазного яблока, роговица была полностью эпителизирована, не окрашивалась флюоресцеином. Vis OD счет пальцев у лица эксцентрично.Given the positive dynamics, but not the complete closure of the defect, the procedure was repeated. The patient was discharged on an outpatient basis with the need for examination after 2 weeks. When re-examined, after removing the sutures from the eyelids and removing the remnants of the amniotic membrane from the cornea, a decrease in eyeball injection was observed, the cornea was completely epithelized, not stained with fluorescein. Vis OD counts fingers in the face eccentrically.

Таким образом, предложенный способ обеспечивает сокращение сроков заживления поврежденной поверхности роговицы, улучшение качества ее заживления, формирование помутнения меньшей интенсивности при глубоких повреждениях.Thus, the proposed method provides a reduction in the healing time of the damaged surface of the cornea, improving the quality of its healing, the formation of turbidity of lesser intensity with deep damage.

Claims (2)

1. Способ лечения глубоких дефектов роговицы, включающий размещение аутологичного тромбофибринового сгустка на поверхности роговицы с фиксацией под амниотической мембраной, отличающийся тем, что сначала получают аутоплазму путем одноэтапного центрифугирования из нестабилизированной крови, инкубируют ее при комнатной температуре до образования геля, после констрикции сгусток, характеризующийся содержанием функционально полноценных тромбоцитов в концентрации не менее 240*109/л, размещают на роговице, покрывают его амниотической мембраной и фиксируют швами, затем субконъюнктивально в 4-х квадрантах по лимбу вводят аутологичную сыворотку в общем объеме 0.5 мл и проводят тарзорафию.1. A method for the treatment of deep corneal defects, including the placement of an autologous thrombofibrin clot on the surface of the cornea with fixation under the amniotic membrane, characterized in that the autoplasma is first obtained by centrifugation from unstabilized blood, incubated at room temperature until gel formation, after which the clot is characterized the content of functionally complete platelets in a concentration of at least 240 * 10 9 / l, placed on the cornea, cover it with amniotic membrane ana and fix it with sutures, then subconjunctively in 4 quadrants of the limb autologous serum is introduced in a total volume of 0.5 ml and tarsoraphy is performed. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процедуру повторяют 1 раз в неделю до полной эпителизации.2. The method according to p. 1, characterized in that the procedure is repeated 1 time per week until complete epithelization.
RU2019105662A 2019-02-27 2019-02-27 Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot RU2699206C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019105662A RU2699206C1 (en) 2019-02-27 2019-02-27 Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019105662A RU2699206C1 (en) 2019-02-27 2019-02-27 Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2699206C1 true RU2699206C1 (en) 2019-09-03

Family

ID=67851804

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019105662A RU2699206C1 (en) 2019-02-27 2019-02-27 Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2699206C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2765601C1 (en) * 2021-08-17 2022-02-01 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers
RU2782129C1 (en) * 2022-03-31 2022-10-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for surgical treatment of corneal defects of various origins

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2279887C2 (en) * 2004-06-10 2006-07-20 Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца Минздрава РФ Method for treating cornea defect cases
RU2358695C1 (en) * 2007-09-24 2009-06-20 Федеральное государственное учреждение "МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЛАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ИМЕНИ ГЕЛЬМГОЛЬЦА ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ" Total symblepharon elimination method
RU2607163C1 (en) * 2015-12-15 2017-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of surgical management of corneal defects of various geneses
RU2609253C1 (en) * 2015-12-08 2017-01-31 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treating deep defects of cornea
RU2653260C1 (en) * 2017-06-29 2018-05-07 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Treatment method for chronic cornea erosions of herpetic ethiology

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2279887C2 (en) * 2004-06-10 2006-07-20 Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца Минздрава РФ Method for treating cornea defect cases
RU2358695C1 (en) * 2007-09-24 2009-06-20 Федеральное государственное учреждение "МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЛАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ИМЕНИ ГЕЛЬМГОЛЬЦА ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ" Total symblepharon elimination method
RU2609253C1 (en) * 2015-12-08 2017-01-31 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treating deep defects of cornea
RU2607163C1 (en) * 2015-12-15 2017-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Московский научно-исследовательский институт глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of surgical management of corneal defects of various geneses
RU2653260C1 (en) * 2017-06-29 2018-05-07 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Treatment method for chronic cornea erosions of herpetic ethiology

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Alio J.L. et al. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology, Curr Pharm Biotechnol, 2012; 13(7): 1257-65. *
Журова С.Г. и др. Лечение язвы роговицы ксеротической этиологии, РМЖ "Клиническая офтальмология", N2, 2010, с.49. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2765601C1 (en) * 2021-08-17 2022-02-01 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers
RU2782129C1 (en) * 2022-03-31 2022-10-21 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) Method for surgical treatment of corneal defects of various origins
RU2809012C1 (en) * 2023-05-19 2023-12-05 Федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ "НМИЦ "МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н. Method of treating corneal defects of various etiologies
RU2807860C1 (en) * 2023-10-04 2023-11-21 Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования "Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова" Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) Method of combined fixation of amniotic membrane for treatment of chronic corneaal erosions

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ronci et al. Platelet-rich plasma as treatment for persistent ocular epithelial defects
Akcam et al. Autologous serum eye‐drops and enhanced epithelial healing time after photorefractive keratectomy
Kohnen et al. Effect of heparin in irrigating solution on inflammation following small incision cataract surgery
RU2699206C1 (en) Method of treating corneal defects via an autologous thrombofibrin clot
EP0410006B1 (en) Eye drops for healing wound of corneal epithelium
Kamiya et al. Effect of platelet-rich plasma on corneal epithelial healing after phototherapeutic keratectomy: an intraindividual contralateral randomized study
Yang et al. Case report: subconjunctival injection with autologous platelet-rich plasma for refractory corneal ulcers in a dog
RU2575966C2 (en) Method of treating neovascular glaucoma
RU2714193C1 (en) Method of treating inflammatory or dystrophic eye diseases
RU2393824C1 (en) Method of treating macular oedemas of various geneses
KR20150108351A (en) Protein slurp-1 for use in the treatment of ocular diseases
RU2539161C2 (en) Method of treating herpes virus involvement of inner structures of eye
RU2765601C1 (en) Method for differentiated treatment of corneal erosions and ulcers
RU2809012C1 (en) Method of treating corneal defects of various etiologies
RU2617066C1 (en) Method for determination of indications for intravitreal injection of ciliary neurotrophic factor during treatment of eye visual-nerve apparatus diseases
RU2807860C1 (en) Method of combined fixation of amniotic membrane for treatment of chronic corneaal erosions
RU2607163C1 (en) Method of surgical management of corneal defects of various geneses
RU2807900C1 (en) Method of surgical treatment of pterigium
RU2803007C1 (en) Method of surgical treatment of macular hole
RU2353341C2 (en) Therapy of recurrent aching bullous keratopathy following phototherapeutic glaucoma eye keratectomy
RU2095067C1 (en) Method of stimulation of repair and trophic processes in organism tissues
RU2071303C1 (en) Method to treat turbidity of clear ocular media
RU2733576C1 (en) Method of treating post-traumatic scars of peri-orbital region and eyelid region
RU2754385C1 (en) Method for treating macular ruptures using autologous platelet-rich plasma
RU2782129C1 (en) Method for surgical treatment of corneal defects of various origins

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20210228