RU2684911C2 - Пептид, полученный из hsp70, фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая такой пептид, индуктор иммунного ответа и способ получения антиген-презентирующей клетки - Google Patents
Пептид, полученный из hsp70, фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая такой пептид, индуктор иммунного ответа и способ получения антиген-презентирующей клетки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2684911C2 RU2684911C2 RU2017115719A RU2017115719A RU2684911C2 RU 2684911 C2 RU2684911 C2 RU 2684911C2 RU 2017115719 A RU2017115719 A RU 2017115719A RU 2017115719 A RU2017115719 A RU 2017115719A RU 2684911 C2 RU2684911 C2 RU 2684911C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- peptide
- seq
- amino acid
- antigen
- cancer
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 47
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title description 5
- 101100125027 Dictyostelium discoideum mhsp70 gene Proteins 0.000 title 1
- 101150031823 HSP70 gene Proteins 0.000 title 1
- 101150052825 dnaK gene Proteins 0.000 title 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 152
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims abstract description 26
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims abstract description 21
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims description 55
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 44
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 35
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 101710163595 Chaperone protein DnaK Proteins 0.000 abstract description 25
- 101710178376 Heat shock 70 kDa protein Proteins 0.000 abstract description 25
- 101710152018 Heat shock cognate 70 kDa protein Proteins 0.000 abstract description 25
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 62
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 35
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 31
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 29
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 20
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 20
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 20
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 17
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 8
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 8
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 8
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 6
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000007376 cm-medium Substances 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 5
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 5
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 4
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 4
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 4
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 102100039165 Heat shock protein beta-1 Human genes 0.000 description 3
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 3
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010013476 HLA-A24 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 101001036709 Homo sapiens Heat shock protein beta-1 Proteins 0.000 description 2
- 101001136981 Homo sapiens Proteasome subunit beta type-9 Proteins 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 102100035764 Proteasome subunit beta type-9 Human genes 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010092262 T-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N cysteic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CS(O)(=O)=O XVOYSCVBGLVSOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KQMBIBBJWXGSEI-ROLXFIACSA-N (2s)-2-amino-3-hydroxy-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C(O)C1=CNC=N1 KQMBIBBJWXGSEI-ROLXFIACSA-N 0.000 description 1
- AJFGLTPLWPTALJ-SSDOTTSWSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-(fluoromethyl)-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoate Chemical compound FC[C@@](N)(C(O)=O)CC1=CN=CN1 AJFGLTPLWPTALJ-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- WPRAXAOJIODQJR-UHFFFAOYSA-N 1-(3,4-dimethylphenyl)ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(C)C(C)=C1 WPRAXAOJIODQJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038222 60 kDa heat shock protein, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010058432 Chaperonin 60 Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 101150118346 HLA-A gene Proteins 0.000 description 1
- 108010045100 HSP27 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010042283 HSP40 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004447 HSP40 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101150051208 HSPH1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100031624 Heat shock protein 105 kDa Human genes 0.000 description 1
- 101710113864 Heat shock protein 90 Proteins 0.000 description 1
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 101000839464 Leishmania braziliensis Heat shock 70 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 101100071630 Mesocentrotus franciscanus HSP110 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 1
- 101000767152 Mus musculus General vesicular transport factor p115 Proteins 0.000 description 1
- 101100451677 Mus musculus Hspa4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101001093920 Mus musculus SEC14-like protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- HRRYYCWYCMJNGA-ZETCQYMHSA-N alpha-methyl-L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@](N)(C)CC1=CN=CN1 HRRYYCWYCMJNGA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000510 ammonia Drugs 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- -1 homogistidine Chemical compound 0.000 description 1
- 108010007811 human immunodeficiency virus p17 gag peptide Proteins 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 108010061181 influenza matrix peptide (58-66) Proteins 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000004719 natural immunity Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004798 organs belonging to the digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XEBWQGVWTUSTLN-UHFFFAOYSA-M phenylmercury acetate Chemical compound CC(=O)O[Hg]C1=CC=CC=C1 XEBWQGVWTUSTLN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229940068984 polyvinyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940100996 sodium bisulfate Drugs 0.000 description 1
- 229940001607 sodium bisulfite Drugs 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001474 sodium thiosulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000003799 water insoluble solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003021 water soluble solvent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001176—Heat shock proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4615—Dendritic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4622—Antigen presenting cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464476—Heat shock proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
- A61K2239/53—Liver
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к полученному из HSP70 иммуногенному пептиду, который является индуктором иммунитета и может быть использован в фармацевтических композициях для лечения рака, где указанная композиция может находиться в виде вакцины. 16 н. и 6 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр., 6 ил.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0001] Настоящее изобретение предлагает полученный из HSP70 пептид, более конкретно, иммуногенный пептид, участвующий в презентации антигена T-клетке посредством связывания с человеческим лейкоцитарным антигеном, фармацевтическую композицию для лечения или профилактики рака, содержащую такой пептид, индуктор иммунного ответа, способ получения антиген-презентирующей клетки и др.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] Существует гипотеза, что в живом организме периодически появляются раковые клетки и существует естественный иммунитет, направленный против специфического ракового антигена, образующегося в раковых клетках, и индуцирующий специфический иммунный ответ, включающий в себя уничтожение раковых клеток лимфоцитами и другими клетками.
[0003] Для распознавания антигена, образующегося в раковых клетках, требуется наличие комплекса человеческого лейкоцитарного антигена (HLA), присутствующего на поверхности клетки, и лимфоцита. Молекулы HLA, как основного антигена гистосовместимости, условно подразделяют на молекулы класса I (HLA типа A, B и C) и молекулы класса II (HLA типа DP, DQ и DR). Реакция уничтожения раковой клетки цитотоксической T-клеткой (CTL) индуцируется в результате специфического распознавания ракового антигена (эпитопа CTL), состоящего из 8-11 аминокислот и презентированного молекулой HLA класса I на поверхности раковой клетки, рецептором T-клеточного антигена (TCR), присутствующим на CTL.
[0004] Поиск иммуногенных пептидов в настоящее время проводят с учетом их применения, например, для лечения или профилактики разных заболеваний, связанных с иммунной системой; например, в выложенном патенте Японии № 08-151396 описан олигопептид, состоящий из конкретной аминокислотной последовательности и обладающий HLA-связывающей способностью.
Список литературы
Патентные документы
[0005] Патентный документ 1: выложенный патент Японии № 08-151396
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ТЕХНИЧЕСКАЯ ЗАДАЧА
[0006] Известно много пептидов, обладающих HLA-связывающей способностью; однако еще существует потребность в пептидах, которые можно использовать для лечения или профилактики разных раковых заболеваний. Поскольку ген HLA характеризуется высокой степенью полиморфизма, также существует потребность в иммуногенных пептидах разных типов, каждый из которых совместим с разными типами HLA.
РЕШЕНИЕ ЗАДАЧИ
[0007] С учетом описанных выше обстоятельств, целью настоящего изобретения является получение иммуногенного пептида, способного связываться с молекулой HLA класса I, в частности, пептида, способного индуцировать CTL, получение фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака с использованием пептида, стимулятора иммунитета, и разработка способа получения антиген-презентирующей клетки.
[0008] А именно, настоящее изобретение включает в себя нижеследующие пункты.
(1) Пептид, содержащий 8 или более последовательных аминокислотных остатков одной из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15, и состоящий из 11 или менеее аминокислотных остатков.
(2) Пептид по пункту (1), аминокислотная последовательность которого содержит 1 или более аминокислотных замен, вставок, делеций или добавлений, причем пептид является иммуногенным.
(3) Пептид по пункту (2), аминокислотная последовательность которого содержит замену аминокислоты в положении 2 на тирозин, фенилаланин, метионин, триптофан, валин, лейцин или глутамин, и/или замену C-концевой аминокислоты на фенилаланин, лейцин, изолейцин, триптофан, метионин или валин.
(4) Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая пептид по любому из пунктов (1)-(3).
(5) Фармацевтическая композиция по пункту (4), где композиция находится в виде вакцины.
(6) Фармацевтическая композиция по пункту (4) или (5), где пептид может связываться с молекулами HLA одного или более типов.
(7) Индуктор иммунитета, содержащий пептид по любому из пунктов (1)-(3).
(8) Индуктор иммунитета по пункту (7), где индуктор индуцирует цитотоксическую T-клетку.
(9) Индуктор иммунитета по пункту (7) или (8), где пептид может связываться с молекулами HLA одного или более типов.
(10) Способ получения антиген-презентирующей клетки, обладающей CTL-индуцирующей активностью, где способ включает в себя стадию приведения пептида по любому из пунктов (1)-(3) в контакт с антиген-презентирующей клеткой in vitro.
ПОЛЕЗНЫЕ ЭФФФЕКТЫ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0009] В последние годы среди способов лечения рака большое внимание уделяется иммунотерапии. Есть все основания предполагать, что пептид настоящего изобретения можно использовать в качестве противораковой вакцины, поскольку он обладает способностью связываться с HLA и эффективно индуцировать CTL. Кроме того, предусматривается его применение в разных способах иммунотерапии, в частности, в иммунотерапии с использованием дендритных клеток.
[0010] Семейство белков теплового шока (HSP) участвует в выполнении ряда клеточных функций, таких как укладка, транспорт, модификация и защита белка, например, в качестве молекулярного шаперона (Zugel, U. and Kaufmann, S.H.: Role of heat-shock proteins in protection from and pathogenesis of infectious diseases., Clin. Microbiol. Rev. 12: 19-39, 1999). HSP подразделяют на 8 семейств: HSP110, HSP90, HSP70, HSP60, HSP40, HSP28, HSP27 и HSP25, в зависимости от размера их молекул. Кроме того, известно, что HSP участвуют в процессе гибели клеток (апоптоз), в связи с чем их условно подразделяют на 2 группы: группа, ингибирующая апоптоз, и группа, индуцирующая апоптоз.
[0011] HSP70 представляет собой белок теплового шока, ингибирующий апоптоз, причем показано, что высокий уровень экспрессии HSP70 связан с выживанием клеток в разных условиях, например, при злокачественной трансформации клеток. И действительно, описано, что белок HSP 70, из которого получают пептид настоящего изобретения, экспрессируется при разных раковых заболеваниях (например,
1. Yoshida et al., Anticancer Res. 2009 Feb;29(2):539-44
2. Ciocca DR, Clark GM, Tandon AK, Fuqua SA, Welch WJ and McGuire WL: Heat-shock protein hsp70 in patients with axillary lymph node-negative breast cancer: prognostic implications. J Natl Cancer Inst 85: 570-574, 1993
3. Kaur J and Ralhan R: Differential expression of 70-kDa heatshock protein in human oral tumorigenesis. Int J Cancer 63: 774-779, 1995
4. Park CS, Joo IS, Song SY, Kim DS, Bae DS and Lee JH: An immunohistochemical analysis of heat-shock protein 70, p53, and estrogen receptor status in carcinoma of the uterine cervix. Gynecol Oncol 74: 53-60, 1999
5. Cornford PA, Dodson AR, Parsons KF, Desmond AD, Woolfenden A, Fordham M, Neoptolemos JP, Ke Y and Foster C: Heat-shock protein expression independently predicts clinical outcome in prostate cancer. Cancer Res 60: 7099-7105, 2000
6. Malusecka E, Zborek A, Krzyzowska-Gruca S and Krawczyk Z: Expression of heat-shock proteins HSP70 and HSP27 in primary non-small cell lung carcinomas. An immunohistochemical study. Anticancer Res 21: 1015-1021, 2001
7. Chuma M, Sakamoto M, Yamazaki K, Ohta T, Ohki M, Asaka M and Hirohashi S: Expression profiling in multistage hepatocarcinogenesis: identification of HSP70 as a molecular marker of early hepatocellular carcinoma. Hepatology 37: 198-207, 2003
8. Castle PE, Ashfaq R, Ansari F and Muller CY: Immunohistochemical evaluation of heat-shock proteins in normal and preinvasive lesions of the cervix. Cancer Lett 229: 245-252, 2005
9. Kurahashi T, Miyake H, Hara I and Fujisawa M: Expression of major heat-shock proteins in prostate cancer: correlation with clinicopathological outcomes in patients undergoing radical prostatectomy. J Urol 177: 757-761, 2007).
[0012] Конкретный пептид настоящего изобретения способен связываться с HLA разных типов. Следовательно, пептид настоящего изобретения можно использовать, например, для разработки противораковой вакцины и терапии на основе дендритных клеток, подходящих для применения у весьма широкой группы раковых пациентов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[0013]
[Фигура 1] На фигуре 1 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISPOT (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 02: 01/24:02), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 7, 9 или 15.
[Фигура 2] На фигуре 2 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISPOT (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 02: 01/33:03), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 7, 9 или 15.
[Фигура 3] На фигуре 3 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISPOT (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 02: 06/24:02), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 7, 9 или 15.
[Фигура 4] На фигуре 4 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISA (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 24: 02/26:01), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 7, 9 или 15.
[Фигура 5] На фигуре 5 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISA (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 24: 02/26:01), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 5, 6, 7, 9, 10 или 15.
[Фигура 6] На фигуре 6 приведен график, демонстрирующий результаты анализа ELISA (число IFN-γ-продуцирующих клеток), где образцы пациентов с раком печени (тип HLA: 24: 02/24:02), получающих терапию дендритными клетками HSP70, стимулируют пептидом SEQ ID NO: 5, 6, 7, 9 или 10.
ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
[0014] 1. Иммуногенный пептид
Каждый пептид настоящего изобретения содержит 8 или более последовательных аминокислотных остатков одной из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15 и состоит, в общей сложности, из 11 или менее, предпочтительно, из 10 или менее, более предпочтительно, из 9 или менее аминокислотных остатков. Пептид настоящего изобретения может представлять собой пептид, имеющий одну из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15. Пептид настоящего изобретения получают из HSP70, который представляет собой один из белков теплового шока. Выбирают аминокислотную последовательность, связывающая способность которой в отношении молекулы HLA характеризуется значением -log Kd 3 или более, причем связывающую способность предсказывают, используя гипотезу, полученную с помощью метода активного обучения (выложенный патент Японии № 08-151396), на основе аминокислотных последовательностей, составляющих HSP70.
[0015] В таблице 1 приведены аминокислотные последовательности пептидов настоящего изобретения и теоретические оценки их способности связываться с HLA.
[Таблица 1]
| Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO:) | Положение в HSP70 | Теоретическая оценка связывания | ||
| с A*24:02 | с A*02:01 | с A*02:06 | ||
| GVPQIEVTF (SEQ ID NO: 1) | 470 | 6,8692 | 4,1663 | 4,1952 |
| TFDVSILTI (SEQ ID NO: 2) | 204 | 5,407 | 4,4626 | 4,2078 |
| FYPEEISSM (SEQ ID NO: 3) | 114 | 5,4008 | 4,1076 | 4,6748 |
| KLLQDFFNG (SEQ ID NO: 4) | 348 | 4,9877 | 4,8334 | 4,7267 |
| VLVGGSTRI (SEQ ID NO: 5) | 335 | 4,9353 | 4,6469 | 4,8296 |
| MVLTKMKEI (SEQ ID NO: 6) | 122 | 4,7341 | 4,1818 | 5,093 |
| YGAAVQAAI (SEQ ID NO: 7) | 371 | 4,6632 | 4,9012 | 4,2215 |
| LLLDVAPLS (SEQ ID NO: 8) | 392 | 4,4106 | 5,5399 | 5,3719 |
| AMTKDNNLL (SEQ ID NO: 9) | 448 | 5,6852 | 4,9114 | 3,9638 |
| ITRARFEEL (SEQ ID NO: 10) | 297 | 5,0063 | 3,8722 | 5,0269 |
| NLLGRFELS (SEQ ID NO: 11) | 454 | 4,3151 | 5,0725 | 5,4672 |
| AQIHDLVLV (SEQ ID NO: 12) | 329 | 4,1429 | 5,0029 | 5,5161 |
| YAFNMKSAV (SEQ ID NO: 13) | 545 | 3,1481 | 5,0986 | 5,022 |
| NQPGVLIQV (SEQ ID NO: 14) | 434 | 3,9589 | 5,2086 | 6,1881 |
| SVTNAVITV (SEQ ID NO: 15) | 138 | 3,4149 | 4,8686 | 6,0256 |
[0016] Пептид настоящего изобретения обладает способностью связываться с HLA и иммуногенностью (далее его иногда называют просто "HLA-пептид" или "иммуногенный пептид"). В данном описании термин "иммуногенность" относится к способности индуцировать иммунный ответ и, например, к CTL-индуцирующей активности, то есть, к цитотоксической активности в отношении раковых клеток.
[0017] В предпочтительном варианте осуществления пептид настоящего изобретения представляет собой мульти-HLA-пептид, способный связываться с разными аллелотипами HLA-A гена A. Например, пептид SEQ ID NO: 7 способен прочно связываться с продуктом гена HLA-A*24:02 (молекула HLA-A*24:02), продуктом гена HLA-A*02:01 (молекула HLA-A*02:01) и продуктом гена HLA-A*02:06 (молекула HLA-A*02:06), и обладает высокой иммуногенностью.
[0018] Подтип HLA, с которым может связываться пептид настоящего изобретения, не ограничивается HLA-A*24:02, HLA-A*02:01 или HLA-A*02:06. Однако указанные подтипы HLA встречаются примерно у 85% жителей Востока, включая Японию, и примерно у 55% жителей Запада; следовательно, можно предположить, что мульти-HLA-пептид настоящего изобретения позволит охватить широкую группу пациентов, например, при применении в качестве иммунотерапии.
[0019] Пептид настоящего изобретения можно модифицировать по аминокислотным остаткам, составляющим аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-15, или их части, при условии сохранения иммуногенности. Каждая из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15 подразумевает статус, присутствующий на антиген-презентирующей клетке; однако, если пептид настоящего изобретения вводят непосредственно в организм, пептид может претерпевать изменения, например, отщепление концевых участков в пищеварительных органах и т.п., в зависимости от способа введения. Следовательно, перед внедрением в антиген-презентирующую клетку, пептид настоящего изобретения может находиться в виде предшественника, образованного в результате добавления одного или более аминокислотных остатков и т.п. к N-концу и/или C-концу, так что аминокислотная последовательность, выбранная из SEQ ID NO: 1-15, сохраняется после связывания с заранее определенной молекулой HLA класса I на антиген-презентирующей клетке.
[0020] Кроме того, пептид настоящего изобретения может содержать 1 или более замен, вставок, делеций или добавлений аминокислотных остатков, и/или он может содержать такие модификации, как добавление сахарной цепи, окисление и/или фосфорилирование боковой цепи, при условии, что пептид при этом сохраняет желательную иммуногенность. В данном документе термин "аминокислота" используется в самом широком смысле и включает в себя, помимо природных аминокислот, искусственные варианты и производные аминокислот. В соответствии с данным описанием, примеры аминокислот включают в себя природные L-аминокислоты, входящие в состав белков; D-аминокислоты; химически модифицированные аминокислоты, такие как варианты и производныеаминокислот; природные аминокислоты, не входящие в состав белков, такие как норлейцин, β-аланин и орнитин; а также химически синтезированные соединения, имеющие свойства, которые в данной области известны как свойства, характерные для аминокислот. Примеры неприродных аминокислот включают в себя α-метиламинокислоты (такие как α-метилаланин), D-аминокислоты, гистидин-подобные аминокислоты(такие как β-гидроксигистидин, гомогистидин, α-фторметилгистидин и α-метилгистидин), аминокислоты, содержащие внешний метилен на боковой цепи ("гомо"-аминокислоты), и аминокислоты, в которых карбоксильная функциональная группа на боковой цепи замещена сульфоновой кислой группой (такие как цистеиновая кислота).
[0021] В случае замены аминокислотного остатка и т.п., с учетом непрерывности пептидной последовательности, обладающей связывающей способностью в отношении HLA (J. Immunol., 152: p3913, 1994; Immunogenetics, 41: p178, 1995; J. Immunol., 155: p4307, 1994), специалисты в данной области могут соответствующим образом заменить аминокислотный остаток, являющийся составной частью пептида настоящего изобретения.
[0022] Более конкретно, в случае пептида, связывающегося с молекулой HLA-A*24:02, аминокислоту в положении 2 пептида можно заменить на тирозин, фенилаланин, метионин или триптофан, и/или C-концевую аминокислоту можно заменить на фенилаланин, лейцин, изолейцин, триптофан или метионин. В случае пептида, связывающегося с молекулой HLA-A*02:01, аминокислоту в положении 2 можно заменить на лейцин или метионин, и/или C-концевую аминокислоту можно заменить на валин или лейцин. Кроме того, в случае пептида, связывающегося с молекулой HLA-A*02:06, аминокислоту в положении 2 можно заменить на валин или глутамин, и/или C-концевую аминокислоту можно заменить на валин или лейцин.
[0023] Пептид настоящего изобретения можно получить с помощью способа, известного специалистам в данной области. Например, его можно искусственно синтезировать, используя твердофазный метод, такой как Fmoc-метод или tBoc-метод, или жидкофазный метод. Целевой пептид также можно получить путем экспрессии полинуклеотида, кодирующего пептид настоящего изобретения, или рекомбинантного вектора, содержащего такой полинуклеотид. Каждый из полученных таким образом пептидов можно идентифицировать с помощью метода, известного специалистам в данном области. Например, пептид можно идентифицировать методом деградации по Эдману или методом масс-спектрометрии.
[0024] 2. Фармацевтическая композиция
Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака настоящего изобретения содержит, в качестве активного ингредиента, например, пептид, содержащий 8 или более последовательных аминокислотных остатков из одной или более аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, включающей в себя SEQ ID NO: 1-15, и состоящий, в общей сложности, из 11 или менее, предпочтительно, из 10 или менее, более предпочтительно, из 9 или менее аминокислотных остатков. Пептид, входящий в состав фармацевтической композиции, может представлять собой пептид, имеющий одну из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15. Пептид имеет указанное выше определение.
[0025] Пептид настоящего изобретения, представленный на антиген-презентирующей клетке, индуцирует CTL, а индуцированный CTL повреждает раковую клетку. Таким образом, активный ингредиент фармацевтической композиции настоящего изобретения не ограничивается пептидом настоящего изобретения и может представлять собой компонент, способный непосредственно или косвенно индуцировать CTL, такой как полинуклеотид, кодирующий пептид, или вектор, содержащий полинуклеотид, или антиген-презентирующая клетка, представляющая комплекс пептида и молекулы HLA на своей поверхности, или экзосома, секретированная из антиген-презентирующей клетки, или их сочетание. Примеры подходящей антиген-презентирующей клетки включают в себя макрофаг и дендритную клетку; однако предпочтительно использовать дендритную клетку, которая обладает высокой CTL-индуцирующей способностью. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать и другие ингредиенты, традиционно используемые для противораковой терапии, такие как хемокин, цитокин, фактор некроза опухоли и химиотерапевтическое средство. Доза пептида может составлять, например, примерно от 1 до 10 мг/сутки для взрослого пациента. Однако доза может варьировать в зависимости от возраста и массы тела пациента, способа введения и т.п., и поэтому нужную дозу определяет специалист в данной области.
[0026] Полагают, что фармацевтическая композиция настоящего изобретения может способствовать уничтожению раковых клеток, например, посредством нижеследующего механизма действия, но не ограничиваясь им. В результате введения фармацевтической композиции настоящего изобретения конкретному раковому пациенту пептид, входящий в состав фармацевтической композиции, предоставляется в виде формы, связанной с молекулой HLA, на поверхности антиген-презентирующей клетки. В результате распознавания пептида на такой антиген-презентирующей клетке происходит активация CTL, затем их пролиферация и поступление в кровоток. Когда пептид-специфический CTL попадает в раковую ткань, он распознает такой же пептид, полученный из специфического ракового антигена, в природе связанный с молекулой HLA, присутствующей на поверхности раковой клетки, и уничтожает раковую клетку. Такой процесс является составной частью способа лечения рака.
[0027] Фармацевтическую композицию настоящего изобретения можно использовать не только для лечения, но и для профилактики рака. Например, фармацевтическая композиция настоящего изобретения после введения в организм здорового человека индуцирует CTL, индуцированные цитотоксические T-клетки остаются в организме и при появлении отдельных раковых клеток могут уничтожать их. Подобным образом, композицию можно вводить в организм человека после лечения рака для предотвращения рецидива.
[0028] Любой рак, сопровождающийся экспрессией HSP70, рассматривается как рак, подлежащий лечению или профилактике. Более конкретные примеры представляющего интерес рака включают в себя, без ограничения, рак поджелудочной железы, печеночно-клеточный рак, рак простаты, рак легкого, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак крови, опухоль мозга, рак почки и рак кожи. Например, поскольку HSP70, из которого получают пептид настоящего изобретения, экспрессируется на повышенном уровне при печеночно-клеточном раке, полагают, что пептид настоящего изобретения можно эффективно использовать для лечения или профилактики данного рака. Если присутствует несколько видов рака, подлежащих лечению или профилактике, можно использовать фармацевтическую композицию настоящего изобретения, содержащую несколько активных ингредиентов, включающих в себя иммуногенный пептид.
[0029] Фармацевтическую композицию настоящего изобретения можно растворить в водном растворителе, получить в виде фармацевтически приемлемой соли и использовать для введения пациентам. Примеры такой фармацевтически приемлемой соли включают в себя форму, забуференную при физиологическом значении pH в виде физиологически приемлемой водорастворимой соли, такой как соль натрия, калия, магния или кальция. Помимо водорастворимого растворителя можно использовать также растворитель, не растворимый в воде; примеры такого не растворимого в воде растворителя включают в себя спирты, такие как этанол и пропиленгликоль.
[0030] Фармацевтическая композиция настоящего варианта осуществления может содержать средства, предназначенные для разных целей; примеры таких средств включают в себя консерванты и забуферивающие средства. Примеры консервантов включают в себя бисульфит натрия, бисульфат натрия, тиосульфат натрия, бензалкония хлорид, хлорбутанол, тимеросал, ацетат фенилртути, нитрат фенилртути, метилпарабен, поливиниловый спирт, фенилэтиловый спирт, аммиак, дитиотреитол и бета-меркаптоэтанол. Примеры забуферивающих средств включают в себя карбонат натрия, борат натрия, фосфат натрия, ацетат натрия и бикарбонат натрия. Указанные средства могут присутствовать в количестве, обеспечивающем поддержание pH системы от 2 до 9, предпочтительно от 4 до 8.
[0031] Вид лекарственной формы фармацевтической композиции настоящего изобретения специально не ограничивается; однако если композиция находится в виде вакцины, примеры лекарственных форм включают в себя растворы для инъекций (внутримышечных, подкожных и внутрикожных), пероральные композиции и назальные капли. Если фармацевтическая композиция настоящего изобретения находится в виде вакцины, она может представлять собой смесь вакцин, содержащую несколько активных ингредиентов. Например, такая вакцина может содержать два или более пептидов, выбранных из SEQ ID NO: 1-15, или она может содержать совокупность активных ингредиентов в сочетании с другими активными ингредиентами.
[0032] Вакцина настоящего изобретения может содержать инертный ингредиент, который представляет собой ингредиент, отличный от фармацевтической композиции, не обладающий собственной активностью, но способствующий дополнительному усилению эффекта фармацевтической композиции, используемой в качестве вакцины. Примеры инертного ингредиента включают в себя адъювант и токсоид. Примеры адъюванта включают в себя, без ограничения, адъюванты осадочного типа, такие как гидроксид алюминия, фосфат алюминия и фосфат кальция, и масляные адъюванты, такие как полный адъювант Фрейнда и неполный адъювант Фрейнда.
[0033] Если фармацевтическая композиция настоящего изобретения находится в виде вакцины, ее предпочтительно вводят в организм путем инъекции или инфузии, например, путем внутрикожного, подкожного или внутримышечного введения, путем дермального введения, или путем ингаляции через слизистую оболочку носа, зева и т.п. Ее однократную дозу можно установить в диапазоне от дозы, способной заметно индуцировать цитотоксические T-клетки, до дозы, способной вызвать повреждение значительного числа нераковых клеток.
[0034] Фармацевтическую композицию настоящего изобретения можно использовать не только для введения в организм человека, но и для применения вне организма. Более конкретно, фармацевтическую композицию настоящего изобретения можно использовать для стимуляции антиген-презентирующих клеток in vitro или ex vivo с целью повышения их CTL-индуцирующей активности. Например, если фармацевтическую композицию настоящего изобретения используют для лечения рака с применением дендритных клеток, композицию можно привести в контакт с антиген-презентирующими клетками, такими как дендритные клетки, полученные заранее от пациента, нуждающегося в лечении или профилактике рака, с последующим введением антиген-презентирующих клеток пациенту путем возвращения их в организм пациента. Пептид, входящий в состав фармацевтической композиции, можно ввести в антиген-презентирующие клетки, например, путем липофекции или инъекции. Если в таком способе применения используют полинуклеотид, кодирующий пептид настоящего изобретения, указанный полинуклеотид можно ввести в антиген-презентирующие клетки с помощью известного в данной области метода. Например, полученные от пациента антиген-презентирующие клетки можно трансформировать in vitro представляющим интерес полинуклеотидом, или вектором, кодирующим полинуклеотид, с помощью такого метода, как липофекция, электропорация, микроинъекция, гибридизация клеток, применение DEAE-декстрана, кальций-фосфатный метод и т.п.
[0035] 3. Индуктор иммунитета
Индуктор иммунитета настоящего изобретения содержит, в качестве активного ингредиента, например, пептид, содержащий 8 или более последовательных аминокислотных остатков из одной или более аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, включающей в себя SEQ ID NO: 1-15, и состоящий, в общей сложности, из 11 или менее, предпочтительно, из 10 или менее, более предпочтительно, из 9 или менее аминокислотных остатков. Пептид, входящий в состав индуктора иммунитета, может представлять собой пептид, имеющий одну из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15. Пептид имеет указанное выше определение.
[0036] Полагают, что пептид настоящего изобретения, представленный на антиген-презентирующей клетке, будет индуцировать иммунитет. Таким образом, активный ингредиент индуктора имунитета настоящего изобретения не ограничивается пептидом настоящего изобретения и может представлять собой компонент, способный непосредственно или косвенно индуцировать иммунитет, такой как полинуклеотид, кодирующий пептид настоящего изобретения, или вектор экспресии, содержащий указанный полинуклеотид, или антиген-презентирующая клетка, представляющая комплекс пептида и молекулы HLA на своей поверхности, или экзосома, секретированная из антиген-презентирующей клетки, или их сочетание. Примеры подходящей антиген-презентирующей клетки включают в себя макрофаг и дендритную клетку; однако предпочтительно использовать дендритную клетку, которая обладает высокой CTL-индуцирующей способностью.
[0037] Индуктор имунитета настоящего изобретения можно использовать не только для введения в организм человека, но и для применения вне организма. Более конкретно, индуктор имунитета настоящего изобретения можно использовать для стимуляции антиген-презентирующих клеток in vitro или ex vivo с целью повышения их CTL-индуцирующей активности. Например, если индуктор имунитета настоящего изобретения используют в способе терапии с применением дендритных клеток, индуктор можно привести в контакт с антиген-презентирующими клетками, такими как дендритные клетки, полученные заранее от пациента, нуждающегося в индукции иммунитета, с последующим введением антиген-презентирующих клеток пациенту путем возвращения их в организм пациента. Пептид, входящий в состав индуктора имунитета, можно ввести в антиген-презентирующие клетки, например, путем трансфекции с использованием липосом (метод липофекции) или инъекции. Если в таком способе применения используют полинуклеотид, кодирующий пептид настоящего изобретения, указанный полинуклеотид можно ввести в антиген-презентирующие клетки с помощью известного в данной области метода. Например, полученные от пациента антиген-презентирующие клетки можно трансформировать in vitro представляющим интерес полинуклеотидом, или вектором, обеспечивающим экспрессию указанного полинуклеотида, с помощью такого метода, как липофекция, электропорация, микроинъекция, гибридизация клеток, применение DEAE-декстрана, кальций-фосфатный метод и т.п.
[0038] В данном описании термин "индукция иммунитета" относится к индукции иммунного ответа, например, к повышению CTL-индуцирующей активности антиген-презентирующей клетки, и к дополнительному повышению цитотоксической активности CTL против раковых клеток. В данном описании термин "индукция CTL" относится к индукции или пролиферации CTL, специфически распознающих конкретный антиген, или к дифференциации наивных T-клеток в эффекторные клетки, способные уничтожать клетки-мишени (цитотоксическая активность), такие как раковые клетки, и/или к увеличению цитотоксической активности CTL в результате представления пептида настоящего изобретения на поверхности антиген-презентирующей клетки in vitro или in vivo. CTL-индуцирующую активность можно измерить путем анализа продукции цитокинов (например, интерферона (IFN)-γ)), опосредованной CTL. Например, CTL-индуцирующую активность можно измерить путем определения увеличения числа цитокин-продуцирующих клеток, индуцированных из клеток-предшественников под действием антиген-презентирующих клеток, таких как моноциты периферической крови, стимулированные пептидом настоящего изобретения, с помощью известного высокочувствительного иммуноанализа, такого как ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot). Цитотоксическую активность также можно измерить с помощью известного метода, такого как анализ высвобождения 51Cr. Если активность заметно увеличивается по сравнению с контролем, например, на 5% или более, на 10% или более, на 20% или более, предпочтительно, на 50% или более, можно сделать вывод об индукции иммунитета или CTL.
[0039] 4. Способ получения антиген-презентирующей клетки
Способ получения антиген-презентирующей клетки настоящего изобретения включает в себя стадию приведения в контакт, например, пептида, содержащего 8 или более последовательных аминокислотных остатков из одной или более аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, включающей в себя SEQ ID NO: 1-15, и состоящего, в общей сложности, из 11 или менее, предпочтительно, из 10 или менее, более предпочтительно, из 9 или менее аминокислотных остатков, и антиген-презентирующей клетки in vitro. Пептид, используемый в способе получения настоящего изобретения, может представлять собой пептид, имеющий одну из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1-15. Пептид имеет указанное выше определение.
[0040] Предполагается, что пептид, используемый в способе получения настоящего изобретения, связывается с молекулой HLA класса I на поверхности антиген-презентирующей клетки и предоставляется CTL как антигенный пептид, способный индуцировать CTL-активность антиген-презентирующей клетки. Компонент, приводимый в контакт с антиген-презентирующей клеткой, не ограничивается пептидом настоящего изобретения, он может представлять собой любой компонент, способный непосредственно или косвенно индуцировать CTL, такой как полинуклеотид, кодирующий указанный пептид, или вектор, содержащий указанный полинуклеотид, или антиген-презентирующая клетка, представляющая комплекс пептида и молекулы HLA на своей поверхности, или экзосома, секретированная из антиген-презентирующей клетки, или их сочетание. Примеры подходящей антиген-презентирующей клетки включают в себя макрофаг и дендритную клетку; однако предпочтительно использовать дендритную клетку, которая обладает высокой CTL-индуцирующей способностью.
[0041] Антиген-презентирующую клетку, полученную с помощью способа настоящего изобретения, можно использовать не только в качестве активного ингредиента фармацевтической композиции или индуктора иммунитета, но и для проведения иммунотерапии и т.п. Например, если антиген-презентирующие клетки используют в способе терапии с применением дендритных клеток, полученные клетки можно привести в контакт с антиген-презентирующими клетками, такими как дендритные клетки, обладающие низкой CTL-индуцирующей способностью и полученные заранее от пациента, нуждающегося в индукции иммунитета, с последующим введением антиген-презентирующих клеток пациенту путем возвращения их в организм пациента. Пептид настоящего изобретения можно ввести в антиген-презентирующие клетки, например, путем трансфекции с использованием липосом (метод липофекции) или инъекции. Если в таком способе применения используют полинуклеотид, кодирующий пептид настоящего изобретения, указанный полинуклеотид можно ввести в антиген-презентирующие клетки с помощью известного в данной области метода. Например, полученные от пациента антиген-презентирующие клетки можно трансформировать in vitro представляющим интерес полинуклеотидом, или вектором, обеспечивающим экспрессию указанного полинуклеотида, с помощью такого метода, как липофекция, электропорация, микроинъекция, гибридизация клеток, применение DEAE-декстрана, кальций-фосфатный метод и т.п.
Пример 1
[0042] Далее настоящее изобретение описывается более подробно с использованием Примеров. Однако настоящее изобретение не ограничивается указанными примерами.
[0043] В данном примере процедуры прогнозирования, эксперимента и анализа проводят с использованием экспериментального метода активного обучения, описанного в международной публикации № WO 2006/004182. Порядок эксперимента определяется посредством повторения нижеследующих стадий как единого целого.
[0044] (1) Проверяют алгоритм обучения низкой категории, описанный ниже. Данный алгоритм включает в себя генерирование ряда гипотез на основе случайной перевыборки из накопленных данных, и выбор точки, в которой вариантность предсказанных значений случайно сгенерированных точек запроса-кандидатов (пептидов) является максимальной, в качестве точки запроса, подлежащей исследованию.
[0045] (2) Пептид в выбранной точке запроса получают с помощью описанных ниже способов синтеза и очистки. С помощью описанного ниже эксперимента измеряют фактическую связывающую способность и результаты добавляют к накопленным данным.
[0046] Такой способ активного обучения позволяет уменьшить число экспериментов по анализу связывания, необходимых для тестирования всех 5 сотен миллиардов (=209) или более веществ-кандидатов, представляющих собой HLA-связывающие пептиды, состоящие из 9 аминокислотных остатков.
[0047] Используя описанный выше порядок эксперимента, экстрагируют аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-15.
[0048] <Синтез и очистка пептида>
Пептиды, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-15, синтезируют вручную с помощью твердофазного метода Меррифильда, используя Fmoc-аминокислот. После удаления защитных групп полученный пептид подвергают очистке методом ВЭЖХ на обращенной фазе, используя колонку C18, с достижением чистоты 95% или более. Идентификацию пептидов и подтверждение степени их чистоты осуществляют методом масс-спектрометрии MALDI-TOF (AB SCIEX MALDI-TOF/TOF5800). Количественное определение пептида проводят с помощью анализа Micro BCA (Thermo Scienftific Co., Ltd.), используя BSA в качестве стандартного белка.
[0049] <Анализ связывания пептида с молекулой HLA-A*24:02>
Способность каждого пептида связываться с молекулой HLA-A*24:02, как продуктом гена HLA-A*24:02, измеряют, используя клетки C1R-A24, экспрессирующие молекулу HLA-A*24:02 (клетки, полученные профессором Masafumi Takeguchi, университет Кумамото, подарены старшим доцентом Masaki Yasukawa, университет Эхиме, с разрешения).
[0050] Вначале клетки C1R-A24 подвергают воздействию кислых условий, pH 3,3, в течение 30 секунд, чтобы вызвать диссоциацию и удалить эндогенные пептиды, изначально связанные с молекулой HLA-A*24:02, и легкую цепь, β2m, которая обычно связана с молекулами HLA класса I. После нейтрализации к клеткам C1R-A24 добавляют очищенный β2m и затем серийные разведения пептидов. Все смеси инкубируют на льду в течение 4 часов. Комплекс из 3 молекул (MHC-pep), содержащий молекулу HLA-A*24:02, пептид и β2m, который был отсоединен в процессе инкубации, окрашивают моноклональным антителом 17A12, меченным флуоресцентной меткой и распознающим данный комплекс.
[0051] Затем измеряют число MHC-pep на клетке C1R-A24 (пропорциональное интенсивности флуоресценции меченного антитела) с помощью флуоресцентного клеточного анализатора, FACScan (Becton, Dickinson and Company). Константу диссоциации (значение Kd) комплекса, образованного молекулой HLA-A*24:02 и пептидом, рассчитывают, исходя из среднего значения интенсивности флуоресценции на клетку, с помощью метода, опубликованного ранее авторами настоящего изобретения (Udaka et al., Immunogenetics, 51, 816-828, 2000).
[0052] <Анализ связывания пептида с молекулой HLA-A*02:01>
Способность каждого пептида связываться с молекулой HLA-A*02:01, как продуктом гена HLA-A*24:02, измеряют, используя клеточную линию T2 (полученную от ATCC), экспрессирующую молекулу HLA-A*02:01.
[0053] Клетки T2 и очищенный β2m добавляют к серийным разведениям пептида, связывающая способность которого подлежит измерению, и инкубируют при 37°C в течение 4 часов. Молекулу HLA-A*02:01, уровень экспрессии которой увеличивается в зависимости от концентрации в течение данного периода времени, окрашивают комплекс-специфичным моноклональным антителом, меченным флуоресцентной меткой, BB7.2.
[0054] Затем с помощью проточного цитометра измеряют количество флуоресценции, приходящееся на одну клетку, и рассчитывают константу диссоциации (значение Kd) с помощью метода, опубликованного ранее авторами настоящего изобретения (Udaka et al., Immunogenetics, 51, 816-828, 2000).
[0055] <Анализ связывания пептида с молекулой HLA-A*02:06>
Способность каждого пептида связываться с молекулой HLA-A*02:06, как продуктом гена HLA-A*02:06, измеряют, используя клетки RA2.6 (клеточная линия, недавно полученная в университете Коти), где кДНК гена HLA-A*02:06 вводят в RMAS в виде мышиный TAP (транспортер, ассоциированный с процессингом антигена)-дефицитной клеточной линии.
[0056] Вначале клетки RA2.6 культивируют в течение ночи при 26°C, чтобы накопить молекулы HLA-A*02:06, не связанные с пептидом, на поверхности клетки. Затем добавляют серийные разведения пептида и инкубируют при 26°C в течение 60 минут.
[0057] Затем смесь культивируют при 35°C в течение 4 часов, что приводит к денатурации пустой молекулы HLA-A*02:06, не связанной с пептидом, и к утрате ее стерической структуры. Добавляют меченное флуоресцентной меткой моноклональное антитело BB7.2, специфически распознающее связанную с пептидом молекулу HLA-A*02:06, и инкубируют на льду в течение 20 минут для развития окрашивания.
[0058] Затем с помощью проточного цитометра измеряют количество флуоресценции, приходящееся на одну клетку, и рассчитывают константу диссоциации (значение Kd) с помощью метода, опубликованного ранее авторами настоящего изобретения (Udaka et al., Immunogenetics, 51, 816-828, 2000).
[0059] <Результаты анализа связывания>
Результаты анализов связывания пептидов настоящего изобретения с каждой молекулой HLA показаны в нижеследующей таблице 2.
[Tаблица 2]
| Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO:) | Положение в HSP70 | Результаты анализа связывания | ||
| с A*24:02 | с A*02:01 | с A*02:06 | ||
| GVPQIEVTF (SEQ ID NO: 1) | 470 | -6,451225173 | >-3 | -5,130417023 |
| TFDVSILTI (SEQ ID NO: 2) | 204 | -6,238032253 | >-3 | >-3 |
| FYPEEISSM (SEQ ID NO: 3) | 114 | -7,66350091 | >-3 | >-3 |
| KLLQDFFNG (SEQ ID NO: 4) | 348 | >-3 | -4,958921074 | -5,268061867 |
| VLVGGSTRI (SEQ ID NO: 5) | 335 | -6,172930121 | -4,860260368 | -5,069659334 |
| MVLTKMKEI (SEQ ID NO: 6) | 122 | -5,818975521 | -4,58642391 | -5,532894759 |
| YGAAVQAAI (SEQ ID NO: 7) | 371 | -5,502072835 | -4,904317969 | -5,37221634 |
| LLLDVAPLS (SEQ ID NO: 8) | 392 | > -3 | -6,059683064 | -6,171355699 |
| AMTKDNNLL (SEQ ID NO: 9) | 448 | -5,492398754 | -5,559823762 | -4,275867751 |
| ITRARFEEL (SEQ ID NO: 10) | 297 | -5,206187958 | -4,325522946 | -5,579932749 |
| NLLGRFELS (SEQ ID NO: 11) | 454 | >-3 | -4,559640805 | -5,175394643 |
| AQIHDLVLV (SEQ ID NO: 12) | 329 | >-3 | -6,147821579 | -6,44597639 |
| YAFNMKSAV (SEQ ID NO: 13) | 545 | >-3 | -5,09069 | -5,020701151 |
| NQPGVLIQV (SEQ ID NO: 14) | 434 | >-3 | -5,909585202 | -6,417158659 |
| SVTNAVITV (SEQ ID NO: 15) | 138 | -4,370281453 | -4,76157 | -5,594226356 |
[0060] Аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 1-15 получают из полноразмерной последовательности предопределенного геномного белка HSP70, описанной в SEQ ID NO: 16.
[0061] <Тестирование пептидов на способность индуцировать иммунитет>
(1) Получение пептид-стимулированной дендритной клетки
День 0-9 (индукция дендритной клетки)
Моноциты выделяют из периферической крови пациента, страдающего от печеночно-клеточного рака, методом лейкафереза. Выделенные моноциты культивируют в течение 6 дней в присутствии 800 ед/мл GM-CSF и 500 ед/мл IL-4. Кроме того, к культуральному раствору добавляют 300 ед/мл TNF-α и культивируют в течение 4 дней, чтобы индуцировать зрелые дендритные клетки. Затем методом электропорации вводят мРНК HSP70, получая дендритные клетки, презентирующие полученный из HSP70 антигенный пептид.
[0062] Дендритные клетки, стимулированные 1×107, 2×107 или 3×107 мРНК HSP70 (HSP70-дендритные клетки) вводят в бедро пациента с печеночно-клеточным раком путем подкожной инъекции (терапия с использованием HSP70-дендритных клеток). Подкожное введение HSP70-дендритных клеток, полученных с помощью такого же метода, повторяют каждые 3 недели. Из моноцитов периферической крови, полученных путем фереза от пациента с раком печени, получавшего 2 раза или более терапию дендритными клетками HSP70, получают клеточную фракцию, прилипшую к культуральной колбе, и культивируют ее в среде AIM-CM (торговое наименование "Gibco", от Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.) при 37°C в течение 10 дней. В процессе культивирования на 0 и 3 день добавляют 15 мкл IL-4 и 30 мкл гранулоцитарно-моноцитарного колониестимулирующего фактора (GM-CSF), а на 5 день добавляют 15 мкл IL-4, 30 мкл GM-CSF и 75 мкл фактора некроза опухоли (TNF)-α.
[0063]
День 10 (стимуляция пептидом и выделение дендритных клеток)
Дендритные клетки, индуцированные из моноцитов, извлекают из среды AIM-CM и добавляют каждый из пептидов настоящего изобретения (SEQ ID NO: 5, 6, 7, 9, 10 и 15) в концентрации 20 мкг/мл. Затем среду, содержащую дендритные клетки, культивируют при 37°C в течение 2 часов. Нижеследующие пептиды используют в качестве положительных и отрицательных контролей.
Положительный контроль для HLA-A24:02 (EBV LMP2, 419-427: TYGPVFMCL (SEQ ID NO: 17))
Отрицательный контроль для HLA-A24:02 (HIV env gp160, 584-592: RYLRDQQLL (SEQ ID NO: 18))
Положительный контроль для HLA-A02:01 (Flu A MP, 58-66: GILGFVFTL (SEQ ID NO: 19))
Отрицательный контроль для HLA-A02:01 (HIV gap p17, 77-85: SLYNTVATL (SEQ ID NO: 20))
Положительный контроль для HLA-A02:06 (EBV LMP2 453-461: LTAGFLIFL (SEQ ID NO: 21))
Отрицательный контроль для HLA-A02:06 (HIV gap p24 341-349: ATLEEMMTA (SEQ ID NO: 22))
[0064] Дендритные клетки извлекают, промывают 3 раза или более достаточным количеством среды AIM-CM и считают.
[0065] (2) Получение клеток CD8T
День 0-9
Из моноцитов периферической крови, полученных путем фереза от пациента с раком печени, получавшего 2 раза или более терапию дендритными клетками HSP70, получают плавающую клеточную фракцию (включающую в себя лимфоциты), не прилипающую к культуральной колбе, и культивируют ее в среде AIM-CM (от GIBCO Co., Ltd.) при 37°C в течение 10 дней. В процессе культивирования на 4 и 6 день к среде добавляют 40 мкл IL-2.
[0066]
День 10
С помощью набора для негативного отбора CD8 (от Miltenyi Biotec) клетки CD8T отделяют от среды и считают.
[0067] (3) Совместное культивирование
Дендритные клетки и клетки CD8T, полученные на описанных выше стадиях (1) и (2), совместно культивируют в среде AIM при 37°C в нижеследующих условиях.
Клетки CD8T: 5×105 клеток/лунку
Дендритные клетки: 2×105 клеток/лунку
[0068]
День 12 или 13
К вышеуказанной среде добавляют 0,4 мл/лунку среды AIM-CM, содержащей IL-2 в количестве 20 ед/мл.
[0069] (4) Анализ ELISPOT
День 17
Клетки CD8T добавляют в 96-луночный планшет для ELISPOT (Millipore), покрытый моноклональным антителом против IFN-γ (Mabtech AB), в количестве 2×104 клеток/лунку. Для каждого образца используют 3 или более лунок. В каждую лунку добавляют 100 мкл AIM-V (торговой наименование "Gibco" от Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.). 96-луночный планшет для ELISPOT культивируют при 37°C.
[0070]
День 18
В каждую лунку добавляют антитело против IFN-γ и затем подвергают его взаимодействию со вторичным антителом, меченным ферментом HRP, чтобы измерить число IFN-γ-продуцирующих клеток посредством цветной реакции. Типичные результаты анализа ELISPOT, полученные для пациентов, имеющих тип HLA 02:01/24:02, показаны на фигуре 1; полученные для пациентов 02:01/33:03, показаны на фигуре 2; полученные для пациентов 02:06/24:02, показаны на фигуре 3. На каждой фигуре показаны результаты, представляющие собой среднее значение от 5 анализов.
[0071] (5) Анализ ELISA
День 17
На 7 день культуральный супернатант, полученный путем совместного культивирования T-клеток и дендритных клеток, стимулированных каждым из вышеуказанных пептидов, разводят до 4 уровней, ×1, ×5, ×25 и ×125, чтобы определить уровень разведения, не обеспечивающий предел измерения при использовании набора для определения человеческого IFN-γ ELISA MAX Deluxe (BioLegend Inc.). Затем каждый образец измеряют 3 раза при при определенном уровне разведения. Типичные результаты анализа ELISA, полученные для пациентов, имеющих тип HLA 24:02/26:01, показаны на фигурах 4 и 5, а полученные для пациентов 24:02/24:02, показаны на фигуре 6.
[0072] Настоящее изобретение описано выше посредством примера. Данный пример является только иллюстративным и для специалистов в данной области должно быть очевидно, что можно осуществлять разные модификации, которые входят в объем настоящего изобретения.
Claims (22)
1. Индуктор иммунитета, представляющий собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности любой из SEQ ID NO: 9 и 15.
2. Индуктор иммунитета, представляющий собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.
3. Индуктор иммунитета, представляющий собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15.
4. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая, в качестве активного ингредиента, пептид, состоящий из аминокислотной последовательности любой из SEQ ID NO: 9 и 15.
5. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая, в качестве активного ингредиента, пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.
6. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая, в качестве активного ингредиента, пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15.
7. Фармацевтическая композиция по п.4, где композиция находится в виде вакцины.
8. Фармацевтическая композиция по п.4 или 7, где пептид способен связываться с молекулами HLA одного или более типов.
9. Индуктор иммунитета по п.1, где индуктор способен индуцировать цитотоксическую T-клетку.
10. Индуктор иммунитета по п.1 или 9, где пептид способен связываться с молекулами HLA одного или более типов.
11. Способ получения антиген-презентирующей клетки, обладающей CTL-индуцирующей активностью, включающий стадию приведения пептида, состоящего из аминокислотной последовательности любой из SEQ ID NO: 7, 9 и 15, в контакт с антиген-презентирующей клеткой in vitro.
12. Способ получения антиген-презентирующей клетки, обладающей CTL-индуцирующей активностью, включающий стадию приведения пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7, в контакт с антиген-презентирующей клеткой in vitro.
13. Способ получения антиген-презентирующей клетки, обладающей CTL-индуцирующей активностью, включающий стадию приведения пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9, в контакт с антиген-презентирующей клеткой in vitro.
14. Способ получения антиген-презентирующей клетки, обладающей CTL-индуцирующей активностью, включающий стадию приведения пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15, в контакт с антиген-презентирующей клеткой in vitro.
15. Пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.
16. Пептид, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15.
17. Применение пептида, состоящего из аминокислотной последовательности любой из SEQ ID NO: 7, 9 и 15, для производства фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака.
18. Применение пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 7, для производства фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака.
19. Применение пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9, для производства фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака.
20. Применение пептида, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15, для производства фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака.
21. Применение по любому из пп. 17-20, где указанная фармацевтическая композиция находится в виде вакцины.
22. Применение по любому из пп. 17-20, где пептид способен связываться с молекулами HLA одного или более типов.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2014206730 | 2014-10-07 | ||
| JP2014-206730 | 2014-10-07 | ||
| PCT/JP2015/078504 WO2016056596A1 (ja) | 2014-10-07 | 2015-10-07 | Ｈｓｐ７０由来のペプチド、これを用いた癌の治療又は予防のための医薬組成物、免疫誘導剤、及び抗原提示細胞の製造方法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017115719A3 RU2017115719A3 (ru) | 2018-11-14 |
| RU2017115719A RU2017115719A (ru) | 2018-11-14 |
| RU2684911C2 true RU2684911C2 (ru) | 2019-04-16 |
Family
ID=55653202
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017115719A RU2684911C2 (ru) | 2014-10-07 | 2015-10-07 | Пептид, полученный из hsp70, фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая такой пептид, индуктор иммунного ответа и способ получения антиген-презентирующей клетки |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10537626B2 (ru) |
| EP (2) | EP3925968A3 (ru) |
| JP (1) | JP6423889B2 (ru) |
| CN (1) | CN107001418A (ru) |
| AU (2) | AU2015329070B2 (ru) |
| BR (1) | BR112017006969A2 (ru) |
| CA (2) | CA3116265A1 (ru) |
| DK (1) | DK3205661T3 (ru) |
| ES (1) | ES2882827T3 (ru) |
| RU (1) | RU2684911C2 (ru) |
| TW (1) | TWI687434B (ru) |
| WO (1) | WO2016056596A1 (ru) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR112017006969A2 (pt) | 2014-10-07 | 2017-12-19 | Cytlimic Inc | peptídeo derivado de hsp70, composição farmacêutica para o tratamento ou a prevenção de câncer usando o mesmo, indutor de imunidade e método de produção de célula apresentadora de antígeno |
| CN107428815B (zh) | 2015-03-09 | 2021-07-09 | Cytlimic公司 | 源于gpc3的肽、使用其的用于治疗或预防癌症的医药组合物、免疫诱导剂、及抗原呈递细胞的制造方法 |
| ES2844049T3 (es) | 2015-04-07 | 2021-07-21 | Cytlimic Inc | Adyuvante para vacunas contra el cáncer |
| RU2759728C2 (ru) * | 2016-10-11 | 2021-11-17 | Ситлимик Инк. | Лекарственное средство |
| WO2023163094A1 (ja) * | 2022-02-25 | 2023-08-31 | 日本電気株式会社 | 成人ｔ細胞白血病の治療又は予防のための医薬組成物 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2333767C2 (ru) * | 2006-03-31 | 2008-09-20 | Автономная некоммерческая организация "Институт молекулярной диагностики" (АНО "ИнМоДи") | Вакцинные композиции, способы их применения для профилактики и лечения меланомы и генетические конструкции для получения действующих компонентов композиции |
Family Cites Families (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5196523A (en) | 1985-01-01 | 1993-03-23 | The University Of Southern California | Control of gene expression by glucose, calcium and temperature |
| JPH08151396A (ja) * | 1994-11-28 | 1996-06-11 | Teijin Ltd | Ｈｌａ結合性オリゴペプチド及びそれを含有する免疫調節剤 |
| EP0893507A1 (en) | 1997-07-25 | 1999-01-27 | Institut Gustave Roussy | Use of MHC class II ligands (CD4 and LAG-3) as adjuvant for vaccination and of LAG-3 in cancer treatment |
| WO2002022656A2 (en) * | 2000-09-13 | 2002-03-21 | Gabriele Multhoff | An hsp70 peptide stimulating natural killer (nk) cell activity and uses thereof |
| US20030171280A1 (en) * | 2001-07-31 | 2003-09-11 | Soderstrom Karl Petter | Compositions and methods for modulation of immune responses |
| AU2003254950A1 (en) | 2002-08-26 | 2004-03-11 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Peptides and drugs containing the same |
| EP2572715A1 (en) | 2002-12-30 | 2013-03-27 | 3M Innovative Properties Company | Immunostimulatory Combinations |
| FR2863890B1 (fr) | 2003-12-19 | 2006-03-24 | Aventis Pasteur | Composition immunostimulante |
| JPWO2006004182A1 (ja) | 2004-07-07 | 2008-04-24 | 日本電気株式会社 | 配列予測システム |
| WO2006123155A2 (en) | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine composition comprising b-subunit of e. coli heat toxin and an atigen and an adjuvant |
| CN101313063B (zh) | 2005-08-09 | 2013-04-03 | 肿瘤疗法·科学股份有限公司 | 用于hla-a2阳性人群的来自磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(gpc3)的癌症排斥抗原肽以及含有该肽的药物 |
| JPWO2007119515A1 (ja) | 2006-03-28 | 2009-08-27 | 昇志 佐藤 | 新規腫瘍抗原ペプチド |
| SG175566A1 (en) | 2006-10-17 | 2011-11-28 | Oncotherapy Science Inc | Peptide vaccines for cancers expressing mphosph1 or depdc1 polypeptides |
| WO2008106491A2 (en) * | 2007-02-27 | 2008-09-04 | University Of Utah Research Foundation | Peptides that interact with topoisomerase i and methods thereof |
| JP2010532785A (ja) * | 2007-07-06 | 2010-10-14 | ウニベルジテイト・ウトレヒト・ホールディング・ビー．ブイ． | 炎症性疾患および自己免疫疾患の治療および予防 |
| EP2195333A1 (en) | 2007-09-12 | 2010-06-16 | Anaphore, Inc. | Hsp70-based treatment for autoimmune diseases |
| KR100900837B1 (ko) | 2007-12-07 | 2009-06-04 | (주)두비엘 | 리포펩타이드와 폴리(ｉ:ｃ)를 아쥬반트로 포함하는 강력한백신 조성물 |
| US20120225090A1 (en) * | 2009-08-03 | 2012-09-06 | The Johns Hopkins University | Methods for enhancing antigen-specific immune responses |
| EP2486134B1 (en) | 2009-10-06 | 2014-01-08 | Panacela Labs, Inc. | Use of toll-like receptor and agonist for treating cancer |
| IN2014MN01513A (ru) * | 2012-02-07 | 2015-09-11 | Jolla Inst Allergy Immunolog | |
| US20130217122A1 (en) | 2012-02-21 | 2013-08-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Expansion of Interferon-Gamma-Producing T-Cells Using Glypican-3 Peptide Library |
| WO2013143026A1 (en) * | 2012-03-31 | 2013-10-03 | Abmart (Shanghai) Co., Ltd | Peptide and antibody libraries and uses thereof |
| TWI693073B (zh) | 2012-12-21 | 2020-05-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 對ｇｐｃ３標的治療劑療法為有效之患者投與的ｇｐｃ３標的治療劑 |
| CN103897047B (zh) * | 2012-12-27 | 2016-01-20 | 中国科学院植物研究所 | 蛋白BhHSP70-1及其编码基因与应用 |
| HUE044430T2 (hu) | 2013-03-01 | 2019-10-28 | Astex Pharmaceuticals Inc | Gyógyszerkombinációk |
| CN107073090A (zh) | 2014-04-30 | 2017-08-18 | 哈佛学院董事会 | 结合的疫苗装置和杀死癌细胞的方法 |
| BR112017006969A2 (pt) | 2014-10-07 | 2017-12-19 | Cytlimic Inc | peptídeo derivado de hsp70, composição farmacêutica para o tratamento ou a prevenção de câncer usando o mesmo, indutor de imunidade e método de produção de célula apresentadora de antígeno |
| CN107428815B (zh) | 2015-03-09 | 2021-07-09 | Cytlimic公司 | 源于gpc3的肽、使用其的用于治疗或预防癌症的医药组合物、免疫诱导剂、及抗原呈递细胞的制造方法 |
| ES2844049T3 (es) | 2015-04-07 | 2021-07-21 | Cytlimic Inc | Adyuvante para vacunas contra el cáncer |
-
2015
- 2015-10-07 BR BR112017006969A patent/BR112017006969A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2015-10-07 US US15/516,918 patent/US10537626B2/en active Active
- 2015-10-07 WO PCT/JP2015/078504 patent/WO2016056596A1/ja active Application Filing
- 2015-10-07 CN CN201580054234.7A patent/CN107001418A/zh active Pending
- 2015-10-07 EP EP21174944.5A patent/EP3925968A3/en active Pending
- 2015-10-07 EP EP15849707.3A patent/EP3205661B1/en active Active
- 2015-10-07 AU AU2015329070A patent/AU2015329070B2/en active Active
- 2015-10-07 CA CA3116265A patent/CA3116265A1/en not_active Abandoned
- 2015-10-07 JP JP2016553137A patent/JP6423889B2/ja active Active
- 2015-10-07 ES ES15849707T patent/ES2882827T3/es active Active
- 2015-10-07 TW TW104133022A patent/TWI687434B/zh not_active IP Right Cessation
- 2015-10-07 RU RU2017115719A patent/RU2684911C2/ru active
- 2015-10-07 CA CA2963909A patent/CA2963909C/en not_active Expired - Fee Related
- 2015-10-07 DK DK15849707.3T patent/DK3205661T3/da active
-
2018
- 2018-12-06 AU AU2018274976A patent/AU2018274976B2/en active Active
-
2019
- 2019-12-16 US US16/715,758 patent/US11304997B2/en active Active
-
2022
- 2022-03-11 US US17/693,046 patent/US20220193213A1/en active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2333767C2 (ru) * | 2006-03-31 | 2008-09-20 | Автономная некоммерческая организация "Институт молекулярной диагностики" (АНО "ИнМоДи") | Вакцинные композиции, способы их применения для профилактики и лечения меланомы и генетические конструкции для получения действующих компонентов композиции |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| FAURE O et al., "Inducible Hsp70 as target of anticancer immunotherapy: Identification of HLA-A*0201-restricted epitopes", INT. J. CANCER, 2004,vol. 108, no. 6, pages 863-870. * |
| OKOCHI M et al. "Identification of HLA-A24- restricted epitopes with high affinities to Hsp70 using peptide arrays", J. BIOSCI. BIOENG., 2008, vol. 105, no. 3, pages 198-203. * |
| OKOCHI M et al. "Identification of HLA-A24- restricted epitopes with high affinities to Hsp70 using peptide arrays", J. BIOSCI. BIOENG., 2008, vol. 105, no. 3, pages 198-203. FAURE O et al., "Inducible Hsp70 as target of anticancer immunotherapy: Identification of HLA-A*0201-restricted epitopes", INT. J. CANCER, 2004,vol. 108, no. 6, pages 863-870. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20200121772A1 (en) | 2020-04-23 |
| EP3925968A2 (en) | 2021-12-22 |
| CA2963909C (en) | 2021-06-15 |
| EP3205661A1 (en) | 2017-08-16 |
| EP3205661A4 (en) | 2018-08-08 |
| CA2963909A1 (en) | 2016-04-14 |
| AU2015329070A1 (en) | 2017-04-27 |
| CA3116265A1 (en) | 2016-04-14 |
| DK3205661T3 (da) | 2021-08-02 |
| RU2017115719A3 (ru) | 2018-11-14 |
| TW201619190A (zh) | 2016-06-01 |
| WO2016056596A1 (ja) | 2016-04-14 |
| JP6423889B2 (ja) | 2018-11-14 |
| AU2018274976A1 (en) | 2019-01-03 |
| BR112017006969A2 (pt) | 2017-12-19 |
| AU2018274976B2 (en) | 2019-05-02 |
| US20220193213A1 (en) | 2022-06-23 |
| EP3925968A3 (en) | 2022-03-02 |
| US20180169199A1 (en) | 2018-06-21 |
| AU2015329070B2 (en) | 2018-11-22 |
| ES2882827T3 (es) | 2021-12-02 |
| RU2017115719A (ru) | 2018-11-14 |
| US10537626B2 (en) | 2020-01-21 |
| JPWO2016056596A1 (ja) | 2017-08-17 |
| CN107001418A (zh) | 2017-08-01 |
| US11304997B2 (en) | 2022-04-19 |
| EP3205661B1 (en) | 2021-07-07 |
| TWI687434B (zh) | 2020-03-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8945578B2 (en) | Method of treating cancer with an HLA-A*3303-restricted WT1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same | |
| AU2018274976B2 (en) | Hsp70-derived peptide, pharmaceutical composition for treating or preventing cancer using same, immunity inducer, and method for producing antigen-presenting cell | |
| EP2228072A1 (en) | Cancer vaccine composition | |
| US10875900B2 (en) | Peptide derived from GPC3, pharmaceutical composition for treatment or prevention of cancer using same, immunity inducer, and method for producing antigen-presenting cells | |
| JP6481873B2 (ja) | Ｍｕｃ１由来のペプチド、これを用いた癌の治療又は予防のための医薬組成物、免疫誘導剤、及び抗原提示細胞の製造方法 |