RU2684616C2 - Стероидное соединение для применения в лечении печеночной энцефалопатии - Google Patents
Стероидное соединение для применения в лечении печеночной энцефалопатии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2684616C2 RU2684616C2 RU2016127558A RU2016127558A RU2684616C2 RU 2684616 C2 RU2684616 C2 RU 2684616C2 RU 2016127558 A RU2016127558 A RU 2016127558A RU 2016127558 A RU2016127558 A RU 2016127558A RU 2684616 C2 RU2684616 C2 RU 2684616C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hepatic encephalopathy
- hydroxyandrostan
- rats
- ethynyl
- oxime
- Prior art date
Links
- 208000007386 hepatic encephalopathy Diseases 0.000 title claims abstract description 140
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 49
- -1 Steroid compound Chemical class 0.000 title description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 80
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 40
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims description 23
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 21
- 208000007788 Acute Liver Failure Diseases 0.000 claims description 15
- 206010000804 Acute hepatic failure Diseases 0.000 claims description 15
- 231100000836 acute liver failure Toxicity 0.000 claims description 15
- NZCRJKRKKOLAOJ-XRCRFVBUSA-N rifaximin Chemical compound OC1=C(C(O)=C2C)C3=C4N=C5C=C(C)C=CN5C4=C1NC(=O)\C(C)=C/C=C/[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@@H](OC)\C=C\O[C@@]1(C)OC2=C3C1=O NZCRJKRKKOLAOJ-XRCRFVBUSA-N 0.000 claims description 13
- 229960003040 rifaximin Drugs 0.000 claims description 13
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 claims description 12
- 208000010334 End Stage Liver Disease Diseases 0.000 claims description 11
- 208000011444 chronic liver failure Diseases 0.000 claims description 11
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 claims description 10
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 claims description 10
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- LRSYFEZBIMVWRY-VWMHFEHESA-N (2s)-2,5-diaminopentanoic acid;2-phenylacetic acid Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)CC1=CC=CC=C1 LRSYFEZBIMVWRY-VWMHFEHESA-N 0.000 claims description 4
- 229960002815 glycerol phenylbutyrate Drugs 0.000 claims description 4
- ZSDBFLMJVAGKOU-UHFFFAOYSA-N glycerol phenylbutyrate Chemical compound C=1C=CC=CC=1CCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCC=1C=CC=CC=1)COC(=O)CCCC1=CC=CC=C1 ZSDBFLMJVAGKOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N acetic acid phenyl ester Natural products CC(=O)OC1=CC=CC=C1 IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims 1
- NTUPKIYBVWTEQT-UHFFFAOYSA-N phenyl butanoate;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.CCCC(=O)OC1=CC=CC=C1 NTUPKIYBVWTEQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940049953 phenylacetate Drugs 0.000 claims 1
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 27
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 abstract description 13
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 102000005915 GABA Receptors Human genes 0.000 abstract description 2
- 108010005551 GABA Receptors Proteins 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 227
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 92
- 206010020575 Hyperammonaemia Diseases 0.000 description 71
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 53
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 48
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 46
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 31
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 31
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 31
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- CYKYBWRSLLXBOW-GDYGHMJCSA-N 5-alpha-THDOC Chemical compound C1[C@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 CYKYBWRSLLXBOW-GDYGHMJCSA-N 0.000 description 20
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 18
- 238000012549 training Methods 0.000 description 18
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 17
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000031836 visual learning Effects 0.000 description 15
- 230000004973 motor coordination Effects 0.000 description 14
- 230000006886 spatial memory Effects 0.000 description 14
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 12
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 11
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000027288 circadian rhythm Effects 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 208000007232 portal hypertension Diseases 0.000 description 9
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 230000003872 anastomosis Effects 0.000 description 8
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 8
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 206010017577 Gait disturbance Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 4
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 3
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 3
- 206010039897 Sedation Diseases 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000036280 sedation Effects 0.000 description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 208000019430 Motor disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 102000004108 Neurotransmitter Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000590 Neurotransmitter Receptors Proteins 0.000 description 2
- 206010034719 Personality change Diseases 0.000 description 2
- 201000009454 Portal vein thrombosis Diseases 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical group [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 2
- 229910052722 tritium Chemical group 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 230000003936 working memory Effects 0.000 description 2
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 11-deoxycorticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 ZESRJSPZRDMNHY-YFWFAHHUSA-N 0.000 description 1
- AURFZBICLPNKBZ-FZCSVUEKSA-N 3beta-hydroxy-5alpha-pregnan-20-one Chemical compound C([C@@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-FZCSVUEKSA-N 0.000 description 1
- BHEYXIGGNVYACW-UHFFFAOYSA-N 4-aminobutanoyl chloride Chemical compound NCCCC(Cl)=O BHEYXIGGNVYACW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 241001643084 Cyrtanthus elatus virus A Species 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000000857 Hepatic Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 206010071323 Neuropsychiatric syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010033372 Pain and discomfort Diseases 0.000 description 1
- 229920005439 Perspex® Polymers 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- 229920005372 Plexiglas® Polymers 0.000 description 1
- 206010062519 Poor quality sleep Diseases 0.000 description 1
- AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N Pregnanolone Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(=O)C)C1(C)CC2 AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N Pregnenolone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC3)C[C@@H](O)CC4)CC2)CC1 ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N androst-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N 0.000 description 1
- 229960005471 androstenedione Drugs 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N androstenedione Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000019993 champagne Nutrition 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 208000004209 confusion Diseases 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- ZESRJSPZRDMNHY-UHFFFAOYSA-N de-oxy corticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 ZESRJSPZRDMNHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 229940119740 deoxycorticosterone Drugs 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 206010013395 disorientation Diseases 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000001667 episodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 206010016256 fatigue Diseases 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 1
- 210000002989 hepatic vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000006742 locomotor activity Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001055 magnesium Nutrition 0.000 description 1
- LROBJRRFCPYLIT-UHFFFAOYSA-M magnesium;ethyne;bromide Chemical compound [Mg+2].[Br-].[C-]#C LROBJRRFCPYLIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 229960000249 pregnenolone Drugs 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N pregnenolone Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 ORNBQBCIOKFOEO-QGVNFLHTSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- ZYHMJXZULPZUED-UHFFFAOYSA-N propargite Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1OC1C(OS(=O)OCC#C)CCCC1 ZYHMJXZULPZUED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 108091006084 receptor activators Proteins 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 238000007391 self-medication Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000008454 sleep-wake cycle Effects 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003515 testosterones Chemical class 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000001631 vena cava inferior Anatomy 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
- A61K31/568—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol substituted in positions 10 and 13 by a chain having at least one carbon atom, e.g. androstanes, e.g. testosterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7016—Disaccharides, e.g. lactose, lactulose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области медицины, в частности к применению соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим или его фармацевтически приемлемой соли, а также к способу лечения печеночной энцефалопатии. Группа изобретений относится к применению соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения печеночной энцефалопатии. Также описан способ лечения печеночной энцефалопатии, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении. Группа изобретений позволяет селективно ингибировать положительную модуляцию рецептора GABAэндогенными стероидами при введении 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима, а также 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим способен оказывать положительный эффект в отношении моторного и когнитивного нарушения при печеной энцефалопатии. 2 н. и 26 з.п. ф-лы, 14 ил., 1 табл., 13 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к соединению для применения в лечении печеночной энцефалопатии.
Предшествующий уровень техники
Печеночная энцефалопатия (НЕ) представляет собой серьезное нейропсихиатрическое и нейрокогнитивное осложнение при остром и хроническом заболевании печени. НЕ представляет собой важную и растущую проблему здравоохранения вследствие значительной и увеличивающейся распространенности хронического заболевания печени. НЕ характеризуется нарушениями цикла сна-бодрствования, познавательной способности, памяти, обучения, моторной координации, сознания, снижением энергичности и изменениями личности, и находится в диапазоне от минимальной НЕ (МНЕ) до клинически выраженной НЕ (ОНЕ). МНЕ проявляется когнитивным нарушением и обладает неблагоприятными эффектами в отношении связанного с состоянием здоровья качества жизни и способностью реализовывать сложные задачи, такие как вождение автотранспорта. Кроме того, ОНЕ клинически проявляется умственными и моторными расстройствами, и симптомы находятся в диапазоне от дезориентации до седативного действия и комы.
Природные стероиды подвергаются интенсивному метаболизму и, как правило, не подходят для перорального введения. Метаболиты эндогенных стероидных гормонов прегненолон, прогестерон, дезоксикортикостерон, кортизон и кортизол, известные как прегнанолоны, а также метаболиты тестостерона, андростендион и дегидроэпиандростерон, были подвергнуты различным исследованиям, по меньшей мере частично выявившим их роль в неврологической сигнальной системе у млекопитающих. Стероидные метаболиты вызывают симптомы в ЦНС (центральной нервной системе) и расстройства, и стероиды действуют в качестве положительных модуляторов в отношении комплекса рецептор гамма-аминомасляной кислоты-переносчик хлорид-ионов (GABAA-R) и, таким образом, называются стероидами, модулирующими рецептор GABAA (GAMS).
Было продемонстрировано, что некоторые стероиды представляют собой специфические усилители рецептора GABAA. Примеры этих стероидов также можно обнаружить в WO 2008/063128. Некоторые из этих стероидов являются сильными и, например, показано, что они обладают способностью вызывать амнезию, седативное действие и анестезию в фармакологической дозе. В WO 99/45931 и WO 03/059357 раскрыты антагонистические действия стероидов. Wang et al. 2000 (Acta Physiol Scand 169, 333-341) и Wang et al. 2002 (J Neurosci 22(9):3366-75) раскрыли антагонистические действия 3β-ОН-5α-прегнан-20-она и других 3β-ОН-5α/β прегнановых стероидов. В WO 2006/056794 и WO 2010/144498 раскрыто применение соединений для лечения декомпенсации печени, печеночной энцефалопатии и портальной гипертензии. Существует потребность в новых и эффективных способах терапевтического лечения печеночной энцефалопатии и связанных с ней расстройств.
Описание изобретения
В настоящем изобретении предложено соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении печеночной энцефалопатии.
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим относится к классу соединений, известных как стероидные антагонисты, модулирующие рецептор GABAA (GAMSA).
Авторы изобретения обнаружили, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим способен селективно ингибировать положительную модуляцию рецептора GABAA эндогенными стероидами, такими как аллопрегнанолон и тетрагидродезоксикортикостерон (THDOC). Эти стероиды, как известно, вызывают седативное действие, когнитивное нарушение и двигательные расстройства, и их концентрация в головном мозге увеличивается у пациентов, страдающих от вызванной заболеванием печени гипераммониемии и НЕ.
Тем не менее, авторы изобретения также обнаружили, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим не оказывает антагонистического действия в отношении действия гамма-аминомасляной кислоты (GABA) на рецепторы GABAA. Эта неожиданная избирательность благоприятна с точки зрения безопасности, поскольку ингибирование связывания GABA с рецепторами GABAA может привести к побочным действиям, включая конвульсии.
Кроме того, 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он действует в отношении подтипов рецептора GABAA как α1, так и α5, и, таким образом, способен оказывать положительный эффект как при моторном, так и когнитивном нарушении, и седативные эффекты, которые являются результатом сверхактивации рецепторов GABAA. Положительный эффект 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении моторного и когнитивного нарушения проиллюстрирован на двух животных моделях НЕ (гипераммониемия и анастомоз между воротной и полой веной у крыс, смотри ниже).
В отличие от существующих способов лечения НЕ, 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он не влияет на уровни аммиака in vivo. Таким образом, также существует явный потенциал к его комплементарному применению в терапии.
Соответственно, существует хорошая основа для того, чтобы предположить, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим особенно хорошо подходит для лечения НЕ и связанных расстройств.
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1 демонстрирует, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим не влияет на уровни аммиака в крови. Значения представляют собой среднее значение ± SEM (стандартная ошибка среднего) для 12 крыс на группу, где значения, значимо отличающиеся от контролей, обозначены звездочками; ***, р<0,001. CV = контрольные крысы, обработанные разбавителем; HAV = крысы с гипераммониемией, обработанные разбавителем; HA+GAM = крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом.
Фиг. 2 демонстрирует, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим восстанавливает пространственное обучение у крыс с гипераммониемией в радиальном лабиринте. На Фигуре продемонстрированы рабочие ошибки в радиальном тесте. Рабочие ошибки в блоке 1. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для 8 крыс на группу. # р<0,05 по сравнению с HAV. CV = контрольные крысы, обработанные разбавителем; HAV = крысы с гипераммониемией, обработанные разбавителем; HA+GAM = крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом.
Фиг. 3 демонстрирует, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим в тесте водного лабиринта Морриса восстанавливает специальную память у крыс с гипераммониемией. На Фигуре продемонстрировано время для нахождения платформы в первом испытании на 3 сутки. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для 8 крыс на группу. HAV по сравнению с CV р = 0,052. CV = контрольные крысы, обработанные разбавителем; HAV = крысы с гипераммониемией, обработанные разбавителем; HA+GAM = крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом.
Фиг. 4 демонстрирует, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим восстанавливает моторную координацию у крыс с гипераммониемией. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для 15 крыс на группу. Значения, значимо отличающиеся от CV, обозначены *, р<0,05, значения, значимо отличающиеся от HAV, обозначены ###, р<0,001. CV = контрольные крысы, обработанные разбавителем; HAV = крысы с гипераммониемией, обработанные разбавителем; HA+GAM = крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом.
Фиг. 5 демонстрирует общие концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в плазме крови. Общие концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в плазме крови у контрольных и крыс с гипераммониемией через 4 и 23 часа после подкожной инъекции 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима на пятые сутки и в течение последней недели обработки с суточными инъекциями. НА = гипераммониемические животные.
На Фиг. 6 представлены не связанные* концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в головном мозге контрольных и крыс с гипераммониемией через 1-2 часа после подкожной (s.c.) инъекции 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима после семи суток с суточными инъекциями 20 мг/кг.
Несвязанная концентрация в головном мозге = фракция 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в головном мозге, которая не связана с белком-носителем или тканью головного мозга.
На Фиг. 7 представлены репрезентативные электрофизиологические измерения, демонстрирующие усиленную тетрагидродезоксикортикостероном (THDOC) активацию рецепторов α1β2γ2L GABAA. Клетки HEK-293, экспрессирующие человеческие рецепторы α1β2γ2L GABAA, подвергали воздействию 30 мкМ GABA или 30 мкМ GABA с 100 нМ THDOC в течение 40 мс. Для THDOC производили предварительную инкубацию в течение 20 с до применения THDOC + GABA.
На Фиг. 8 представлены репрезентативные электрофизиологические измерения, демонстрирующие антагонистическое действие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (GAMSA) в отношении усиленной THDOC активации рецепторов α1β2γ2L и α5β3γ2L GABAA и отсутствие ингибирования GABA. А) антагонистическое действие 1 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении усиленной 100 нМ THDOC активации 30 мкМ GABA для рецептора α1β2γ2L GABAA, В) 1 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он не оказывает антагонистического действия в отношении активации 30 мкМ GABA рецептора α1β2γ2L GABAA, С) антагонистическое действие 1 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении усиленной 200 нМ THDOC активации 0,3 мкМ GABA для рецептора α5β3γ2L GABAA; свидетельствуя об антагонистическом действии THDOC, D) 1 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он не оказывает антагонистического действия в отношении активации 0,3 мкМ GABA рецептора α5β3γ2L GABAA.
Фиг. 9 иллюстрирует способность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она восстанавливать моторную координацию у крыс с гипераммониемией и крыс PCS. Моторную координацию оценивали с использованием теста прохождения по бревну. (А) демонстрирует данные для контрольных крыс (CV) или крыс с гипераммониемией (HAV), обработанных разбавителем, и для крыс с гипераммониемией, обработанных 3 (НА3), 10 (НА10) или 20 (НА20) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она. (В) демонстрирует данные для контрольных крыс с ложной операцией (SM) или крыс PCS, обработанных разбавителем, и для крыс PCS, обработанных 0,7 (PCS0.7) или 2,5 (PCS2.5) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она. Значения представляют собой среднее значение ± SEM количества крыс, указанное под каждым столбцом. Значения, значимо отличающиеся от контрольных крыс или крыс с ложной операцией, обозначены звездочками. Значения, значимо отличающиеся от крыс с гипераммониемией или крыс PCS, обработанных разбавителем, обозначены "а". * р<0,05; а р<0,05; аа р<0,01; ааа р<0,001.
Фиг. 10 иллюстрирует способность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она восстанавливать пространственную память в водном лабиринте Морриса у крыс с гипераммониемией и крыс PCS. Память пространственного обучения в водном лабиринте Морриса оценивали у контрольных (CV) крыс или крыс с гипераммониемией (HAV), обработанных разбавителем, и у крыс с гипераммониемией, обработанных 3 (НА3), 10 (НА10) или 20 (НА20) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (А, В) и у контрольных крыс с ложной операцией (SM) или крыс PCS, обработанных разбавителем, и у крыс PCS, обработанных 0,7 (PCS0.7) или 2,5 (PCS2.5) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (C, D). (А, С) Латентности спасения (в секундах) для достижения платформы во время различных раундов. (B, D) Время, проведенное (%) в правильном квадранте во время теста памяти. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для количества крыс, указанные под каждым столбцом. Значения, значимо отличающиеся от контрольных крыс или крыс с ложной операцией, обозначены звездочками. Значения, значимо отличающиеся от крыс с гипераммониемией или крыс PCS, обработанных разбавителем, обозначены "а". * р<0,05; а р<0,05.
Фиг. 11 иллюстрирует способность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она восстанавливать пространственное обучение в радиальном лабиринте у крыс с гипераммониемией и крыс PCS. Пространственное обучение в радиальном лабиринте оценивали у контрольных (CV) крыс или крыс с гипераммониемией (HAV), обработанных разбавителем, и у крыс с гипераммониемией, обработанных 3 (НА3), 10 (НА10) или 20 (НА20) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (А, В), и у контрольных крыс с ложной операцией (SM) или крыс PCS, обработанных разбавителем, и у крыс PCS, обработанных 0,7 (PCS0.7) или 2,5 (PCS2.5) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (C, D). (А, С) Рабочие ошибки во время различных раундов. (B, D) Рабочие ошибки в течение 1-2 суток. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для количества крыс, указанные под каждым столбцом. Значения, значимо отличающиеся от контрольных крыс или крыс с ложной операцией, обозначены звездочками. Значения, значимо отличающиеся от крыс с гипераммониемией или крыс PCS, обработанных разбавителем, обозначены "а". * р<0,05; а р<0,05; аа р<0,01.
Фиг. 12 иллюстрирует способность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она увеличивать спонтанную моторную активность в течение ночи и частично восстанавливать циркадный ритм у крыс PCS. Моторную активность оценивали у контрольных крыс с ложной операцией (SM) или крыс PCS, обработанных разбавителем или 0,7 (PCS0.7) или 2,5 (PCS2.5) мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она. Моторная активность в течение каждого часа представлена на А; отношение активности в течение ночи и в течение дня на В, и общая активность в течение дня или ночи на С. Свет выключали в 7:00 утра. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для 8 крыс на группу. Значения, значимо отличающиеся от крыс SM, обозначены звездочками; * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001. Значения, значимо отличающиеся от крыс PCS, обозначены а; а р<0,05.
Фиг. 13 иллюстрирует способность этинил-3β-гидроксиандростан-17-она нормализовать вертикальную активность в течение дня и частично восстанавливать циркадный ритм у крыс PCS. Эксперимент осуществляли как описано для Фиг. 12, но представлено число вертикальных отсчетов. Значения представляют собой среднее значение ± SEM для 8 крыс на группу. Значения, значимо отличающиеся от крыс SM, обозначены звездочками; * р<0,05; ** р<0,01; *** р<0,001. Значения, значимо отличающиеся от крыс PCS, обозначены а; а р<0,05; аа р<0,01.
Фиг. 14 демонстрирует концентрации этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в плазме крови и в головном мозге в момент тестирования поведения у крыс с гипераммониемией и крыс PCS. У А) крыс с гипераммониемией и В) крыс PCS общие концентрации в плазме крови этинил-3β-гидроксиандростан-17-она представлены в мкМ. У С) крыс с гипераммониемией и D) крыс PCS несвязанные концентрации в головном мозге этинил-3β-гидроксиандростан-17-она представлены в нмоль/кг. Следует отметить похожие концентрации в различных крысиных моделях с используемыми дозами у крыс с гипераммониемией 3, 10 и 20 мг/кг/сутки и у крыс PCS 0,7 и 2,5 мг/кг/сутки. Данные приведены для окончания исследования, т.е. после девяти недель ежесуточных обработок этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном в кунжутном масле, вводимых один раз в сутки подкожно (s.c).
Перед тем, как настоящего изобретения будет подробно описано, должно быть понятно, что используемая здесь терминология применяется исключительно для задачи описания конкретных воплощений и не предполагается, что она будет ограничивать объем изобретения.
Отмечается, что используемые в данном описании и формуле изобретения формы единственного числа также включают множественные формы, если в контексте ясно не указано иное.
Термин "фармацевтическая композиция" используется в своем самом широком смысле, охватывающем все фармацевтически применимые композиции, содержащие по меньшей мере одно активное вещество и возможные носители, адъюванты, растворители, составляющие и т.п.
Термины "введение" и "способ введения", а также "путь введения" также используются в своем самом широком смысле.
Соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим, используемое в соответствии с изобретением, может быть введено множеством путей в зависимости в основном от того, подходит ли локальный, местный или системный способ введения в наибольшей степени для состояния печеночной энцефалопатии, которое лечат. Эти различные способы введения представляют собой, например местный (например, на кожу), локальный (включающий офтальмологическое введение и на различные слизистые оболочки, например вагинальная и ректальная доставка), пероральный, парентеральный или легочный, включающий верхние и нижние дыхательные пути. Приготовление таких композиций и составов в общем известно специалистам в области фармацевтических препаратов и составов и может применяться к составлению композиции по настоящему изобретению.
Под термином "антагонист" понимают вещество, которое мешает другому веществу, агонисту, индуцировать свое действие. В данной заявке на изобретение термины антагонист и блокатор используются взаимозаменяемо.
Под термином "печеночная энцефалопатия тип А" обычно понимают печеночную энцефалопатию, связанную с острой печеночной недостаточностью, обычно связанную с отеком головного мозга.
Под термином "печеночная энцефалопатия тип В" обычно понимают печеночную энцефалопатию (обходной анастомоз), вызванную портосистемным шунтом, не связанную с истинным заболеванием печени.
Под термином "печеночная энцефалопатия тип С" обычно понимают печеночную энцефалопатию, возникающую у пациентов с циррозом - этот тип подразделяют на эпизодическую, хроническую и минимальную энцефалопатию.
Под термином "минимальная печеночная энцефалопатия" обычно понимают печеночную энцефалопатию, которая не приводит к клинически выраженной когнитивной дисфункции, но может быть продемонстрирована при помощи нейрофизиологических исследований.
Под термином "клинически выраженная печеночная энцефалопатия" обычно понимают клинически выраженную печеночную энцефалопатию, проявляющуюся как нейропсихиатрический синдром с широким спектром умственных и моторных расстройств. Клинически выраженная печеночная энцефалопатия может возникать эпизодически в течение периода нескольких часов или суток у пациентов, ранее стабильных, или пациенты могут быть с хроническими нейропсихиатрическими аномалиями.
Под термином "гипераммониемия" как правило понимают метаболическое расстройство, характеризующееся избытком аммиака в крови.
Под термином "пересадка печени" как правило понимают хирургическую процедуру для удаления больной печени вследствие, например острой печеночной недостаточности или цирроза, и замены ее на здоровую печень донора. В большинстве операций по пересадке печени используются печени умерших доноров, но печень может также быть получена у живого донора (часть печени здорового индивида). Пациенты, например, с циррозом обычно испытывают печеночную энцефалопатию, и предоперационная печеночная энцефалопатия представляет собой важный прогностический фактор посттрансплантационных неврологических осложнений.
Под термином "обострение хронической печеночной недостаточности" как правило понимают острую декомпенсацию цирроза, по меньшей мере поражение одного органа, или он относится к подгруппе с высокой степенью смертности в течение короткого периода времени.
Под термином "компенсированный цирроз" как правило понимают цирроз печени без какого-либо клинического проявления, но он может включать бессимптомные варикозные расширения вен пищевода или желудка и ранние симптомы, такие как утомление и упадок сил, потеря аппетита и потеря массы тела, тошнота или боль в животе.
Под термином "декомпенсированный цирроз" как правило понимают запущенный цирроз печени с диапазоном клинических проявлений, таких как желтуха, асцит, отек, печеночная энцефалопатия, желудочно-кишечное кровотечение, портальная гипертензия, бактериальные инфекции или любая их комбинация.
Под термином "портальная гипертензия" как правило понимают градиент давления в печеночной вене после цирроза печени с ассоциированным трансяремным внутрипеченочным портосистемным шунтом (TIPS) или без него.
Под термином "предупреждение" в данном описании изобретения как правило понимают предупреждение возникновения заболевания или расстройства печеночной энцефалопатии.
Под термином "уменьшение интенсивности" в данном описании изобретения как правило понимают уменьшение или избавление от заболевания или расстройства печеночной энцефалопатии.
Пациенты, страдающие печеночной энцефалопатией, могут демонстрировать симптомы, включающие нарушения цикла сна-бодрствования, когнитивной функции, памяти, обучения, моторной координации, сознания, снижение энергичности и изменения личности, когнитивное нарушение, дезориентацию и кому, но не ограничивающиеся ими.
Авторы настоящего изобретения неожиданно продемонстрировали, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим может быть полезен для лечения печеночной энцефалопатии.
В первом аспекте изобретения предложено соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении печеночной энцефалопатии.
В одном из воплощений изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип А.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип В.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип С.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой минимальную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой клинически выраженную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанное соединение предназначено для применения, когда указанную печеночную энцефалопатию лечат у пациента с острой печеночной недостаточностью.
В еще одном воплощении изобретения указанное соединение предназначено для применения, когда указанную печеночную энцефалопатию лечат у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном воплощении изобретения указанное соединение для применения предназначено для предупреждения или уменьшения интенсивности печеночной энцефалопатии, такой как печеночная энцефалопатия тип А, печеночная энцефалопатия тип В, печеночная энцефалопатия тип С, минимальная печеночная энцефалопатия, клинически выраженная печеночная энцефалопатия, у пациента с острой печеночной недостаточностью, или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном воплощении изобретения указанное соединение для применения предоставляют до, во время или после пересадки печени.
В еще одном воплощении изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в лечении печеночной энцефалопатии вместе с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом и/или растворителем.
В еще одном аспекте изобретения предложен способ лечения печеночной энцефалопатии, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении.
В одном из воплощений изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип А.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип В.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип С.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой минимальную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой клинически выраженную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанный пациент страдает острой печеночной недостаточностью.
В еще одном воплощении изобретения указанный пациент страдает хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном воплощении изобретения указанное соединение предоставляют до, во время или после пересадки печени.
В еще одном воплощении изобретения предложен способ предупреждения или уменьшения интенсивности печеночной энцефалопатии, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении. Указанная печеночная энцефалопатия может представлять собой печеночную энцефалопатию тип А, печеночную энцефалопатию тип В, печеночную энцефалопатию тип С, минимальную печеночную энцефалопатию или клинически выраженную печеночную энцефалопатию. Кроме того, указанное предупреждение могут осуществлять у пациента с острой печеночной недостаточностью или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном аспекте изобретения предложено соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении портальной гипертензии. Указанное применение может также представлять собой предупреждение или уменьшение интенсивности портальной гипертензии. Пациент с портальной гипертензией как правило страдает заболеванием печени, таким как хроническое заболевание печени, цирроз или острая печеночная недостаточность.
В еще одном аспекте изобретения предложен способ лечения портальной гипертензии, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении. Указанный способ может также представлять собой предупреждение или уменьшение интенсивности портальной гипертензии. Пациент с портальной гипертензией как правило страдает заболеванием печени, таким как хроническое заболевание печени, цирроз или острая печеночная недостаточность.
В еще одном аспекте изобретения предложено соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении декомпенсации печени. Указанное применение может также представлять собой предупреждение или уменьшение интенсивности декомпенсации печени. Пациент с декомпенсацией печени как правило страдает заболеванием печени, таким как хроническое заболевание печени, или может иметь подозрение на наличие провоцирующего события, такого как желудочно-кишечное кровотечение, инфекция, тромбоз портальной вены или обезвоживание.
В еще одном аспекте изобретения предложен способ лечения декомпенсациии печени, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении. Указанный способ может также применяться при предупреждении или уменьшении интенсивности декомпенсации печени. Пациент с декомпенсацией печени как правило страдает заболеванием печени, таким как хроническое заболевание печени, или может иметь подозрение на наличие провоцирующего события, такого как желудочно-кишечное кровотечение, инфекция, тромбоз портальной вены или обезвоживание.
В еще одном аспекте изобретения предложено применение соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения печеночной энцефалопатии.
В одном из воплощений изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип А.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип В.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию тип С.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой минимальную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанная печеночная энцефалопатия представляет собой клинически выраженную печеночную энцефалопатию.
В еще одном воплощении изобретения указанное применение осуществляют тогда, когда указанную печеночную энцефалопатию лечат у пациента с острой печеночной недостаточностью.
В еще одном воплощении изобретения указанное применение осуществляют тогда, когда указанную печеночную энцефалопатию лечат у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном воплощении изобретения указанное применение осуществляют до, во время или после пересадки печени.
В еще одном воплощении изобретения указанное применение соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства может предназначаться для предупреждения или уменьшения интенсивности печеночной энцефалопатии, такой как печеночная энцефалопатия тип А, печеночная энцефалопатия тип В, печеночная энцефалопатия тип С, минимальная печеночная энцефалопатия, клинически выраженная печеночная энцефалопатия, у пациента с острой печеночной недостаточностью или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
В еще одном воплощении этого аспекта предложена фармацевтическая композиция, содержащая 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в лечении печеночной энцефалопатии вместе с фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами и/или растворителями. Указанное применение может также осуществляться при предупреждении или уменьшении интенсивности печеночной энцефалопатии.
Еще один аспект изобретения представляет собой соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемая соль для применения в ингибировании или лечении симптомов, вызванных гипераммониемией.
Еще одно воплощение изобретения представляет собой соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим для применения в лечении или предупреждении печеночной энцефалопатии, такой как печеночная энцефалопатия тип А, печеночная энцефалопатия тип В, печеночная энцефалопатия тип С, минимальная печеночная энцефалопатия, клинически выраженная печеночная энцефалопатия, у пациента с острой печеночной недостаточностью или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него; где указанное лечение или предупреждение включает совместное введение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима или его фармацевтически приемлемой соли с соединением, понижающим уровень аммиака, таким как рифаксимин, лактулоза, орнитин фенилацетат и глицерин фенилбутират, предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин или лактулозу, и наиболее предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин.
Еще одно воплощение изобретения представляет собой способ лечения или предупреждения печеночной энцефалопатии, такой как печеночная энцефалопатия тип А, печеночная энцефалопатия тип В, печеночная энцефалопатия тип С, минимальная печеночная энцефалопатия, клинически выраженная печеночная энцефалопатия, у пациента с острой печеночной недостаточностью или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него; где указанное лечение или предупреждение включает совместное введение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима или его фармацевтически приемлемой соли с соединением, понижающим уровень аммиака, таким как рифаксимин, лактулоза, орнитин фенилацетат и глицерин фенилбутират, предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин или лактулозу, и наиболее предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин.
Еще одно воплощение изобретения представляет собой применение соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения печеночной энцефалопатии, такой как печеночная энцефалопатия тип А, печеночная энцефалопатия тип В, печеночная энцефалопатия тип С, минимальная печеночная энцефалопатия, клинически выраженная печеночная энцефалопатия, у пациента с острой печеночной недостаточностью, или у пациента с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него; где указанное лечение или предупреждение включает совместное введение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима или его фармацевтически приемлемой соли с соединением, понижающим уровень аммиака, таким как рифаксимин, лактулоза, орнитин фенилацетат и глицерин фенилбутират, предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин или лактулозу, и наиболее предпочтительно соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин.
Еще один аспект изобретения представляет собой соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим, где один или более чем один атом водорода в каждом возможном положении замещения может быть замещен дейтерием или тритием, для применения в лечении печеночной энцефалопатии, такой как минимальная печеночная энцефалопатия или клинически выраженная печеночная энцефалопатия.
Еще один аспект изобретения представляет собой соединение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим, где один или более чем один атом водорода в каждом возможном положении замещения может быть замещен дейтерием или тритием, для применения в анализах, которые включают определение концентрации соединения в ткани или жидкостях.
В соответствии с настоящим изобретением 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим может быть введен посредством одного из следующих путей введения: внутривенного, назального, ректального, трансбуккального, внутривагинального, чрескожного, внутримышечного и перорального. В соответствии с одним из воплощений 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим вводят внутривенно. В соответствии с другим воплощением 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим вводят назально. Чрескожное введение с использованием 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима, приготовленного в виде крема, геля и мази или в форме адгезивных медицинских пластырей с медленным высвобождением представляет собой еще одну возможную форму введения, подобным образом подходящую для самолечения.
Фармацевтическая композиция может быть адаптирована или скорректирована в соответствии с нормальными фармакологическими процедурами, включающими эффективный фармацевтический препарат в химической форме, подходящей для выбранного пути, вместе с подходящими адъювантами, носителями, растворителями и разбавителями, обычно используемыми и хорошо известными специалисту в данной области техники. Обычно используемые для перорального введения адъюванты и разбавители представляют собой, например, наполнители или суспендирующие агенты, такие как диоксид титана, ангидрид лактозы, диоксид кремния, коллоидный диоксид кремния, метилцеллюлоза, стерат магния, микрокристаллическая целлюлоза и т.п. Обычно используемые для внутривенного введения адъюванты и разбавители представляют собой, например стерильную воду для инъекций (WFI), стерильные буферы (например раствор, забуферивающий до рН 7,4) раствор альбумина, липидные растворы, циклодекстрины и т.п. Обычно используемые для трансдермального введения адъюванты и разбавители представляют собой, например вазелин, жидкий парафин, глицерин, воду, триглицеридное масло с цепочками средней длины (МСТ), кунжутное масло, растительные масла и т.п. Доза естественно варьирует в зависимости от способа введения, конкретного состояния, которое лечат, или желаемого действия, пола, возраста, массы и здоровья пациента, а также возможных других факторов, оцениваемых лечащим врачом.
Изобретение будет описано при помощи нескольких иллюстративных не ограничивающих объем изобретения примеров.
Пример 1.
Синтез 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
Стадия 1: Синтез 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она
3,17-Андростандион (5,0 ммоль) растворяли в 50 мл безводного THF (тетрагидрофуран) при комнатной температуре (к.т.) в атмосфере азота. Этинилмагния бромид (1,1 эквив.) добавляли по каплям при к.т. при перемешивании, и раствор оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. в потоке азота. Раствор затем гасили насыщенным NH4Cl(водн.), и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (3×30 мл). Собранные органические фазы упаривали при пониженном давлении, получающееся в результате желтое масло растворяли в дихлорметане, промывали рассолом и сушили над MgSO4. Раствор упаривали в вакууме, и остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на диоксиде кремния (1:4 диэтиловый эфир : дихлорметан), типичные выходы 65%. Возможные следовые количества побочных продуктов могут быть устранены путем дополнительной перекристаллизации из диэтилового эфира.
1Н ЯМР (ядерный магнитный резонанс) (400 МГц, CDCl3-d6): δ 2.43 (s, 1Н); 2.42 (m, 1Н); 2.10-2.04 (m, 2Н); 1.02 (m, 1Н); 0.86 (s, 3Н); 0.83 (s, 3Н).
Стадия 2: Синтез 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он (10 ммоль) растворяли при комнатной температуре и в атмосфере воздуха в 5 мл дихлорметана и 50 мл этанола в круглодонной колбе объемом 250 мл. 4 эквив. NH2OH хлоргидрата и 4 эквив. ацетата натрия растворяли в 5 мл H2O и затем добавляли к стероидному раствору. Добавляли 20 мл этанола, и смесь оставляли кипятиться с обратным холодильником в течение ночи. Смесь затем охлаждали, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Белый остаток обрабатывали 50 мл Н2О и 50 мл дихлорметана, водную фазу экстрагировали 3×30 мл дихлорметана. Собранные органические фазы затем сушили над MgSO4, фильтровали, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Конечный остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на диоксиде кремния, дихлорметан : диэтиловый эфир 4:1, типичные выходы 95-100% (количественные).
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3-d6): δ 2.51-2.47 (m, 2Н); 2.43 (s, 1Н); 1.00 (m, 1Н); 0.80 (m, 1Н); 0.90 (s, 3Н), 0.83 (s, 3Н).
Пример 2.
Терапевтический эффект 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в животной модели печеночной энцефалопатии
Обработка и схема тестирования
В этом исследовании использовали животную модель хронической гипераммониемии, которая воспроизводит множество из когнитивных и моторных изменений, присутствующих при печеночной энцефалопатии. Крысам вводили аммиак вместе с их кормом, и после двух недель кормления кормом, обогащенным аммиаком, у них развивались симптомы печеночной энцефалопатии. Тест прохождения по бревну осуществляли во время 3й и 4й недели обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом, тогда как тест водного лабиринта Морриса осуществляли во время 4й -5й недели обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом, и тест радиального лабиринта осуществляли во время 6й -7й недели обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом.
Исследование разделяли на две серии с животными (самцами крыс Wistar), где каждая из серий включала следующие группы: контроли, обработанные разбавителем (CV, n=8 на серии), контроли, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом (C+GAM, n=8 на серии), крысы с гипераммониемией, обработанные разбавителем (HAV, n=8 на серии), крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом (HA+GAM, n=8 на серии). Однократную суточную обработку 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом в дозе 20 мг/кг или разбавителем осуществляли при помощи подкожных инъекций 1 мл/кг в районе 9 часов утра. Обработку начинали через одну неделю после начала кормления кормом, содержащим аммоний, и продолжали в течение всего экспериментального периода.
Тестируемое изделие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим готовили в виде суспензии в кунжутном масле в концентрации 20 мг/кг. Пространственное обучение в радиальном лабиринте Радиальный лабиринт разработан как способ оценки пространственного обучения. Аппарат состоит из центральной зоны, которая обеспечивает доступ к восьми ответвлениям равного размера. Ответвления были длиной 70 см и шириной 10 см, и центральная зона в диаметре составляла 30 см. Лабиринт изготовлен из черного Perspex и поднимался на 80 см над полом. Каждое ответвление имело боковые стенки с высотой, большей со стороны, расположенной ближе к центральной зоне (30 см), чем с удаленной стороны (5 см). На удаленном крае каждого ответвления был установлен утопленный колпачок для размещения корма для поощрения (Hernandez-Rabaza V. et al 2010).
Для привыкания крыс к лабиринту последним давали возможность исследовать лабиринт в течение 10 минут в течение двух суток подряд в присутствии удаленных раздражителей (постеров и объектов различных размеров), которые оставались на месте во время тренировки.
Тренировка в радиальном лабиринте состояла из пяти блоков по три испытания в каждом, осуществляемых в течение десяти последовательных суток. Задание включало расположение четырех шариков, каждый из которых размещался в конце различных ответвлений в соответствии со случайной конфигурацией. Конфигурации были специфическими для каждой крысы и оставались постоянными в течение тренировки. Количество ошибок определения положения в пространстве и рабочую память рассчитывали и выражали как количество ошибок определения положения и рабочих ошибок на блок. Дополнительно, индекс обучения использовали для оценки обучения задаче и определяли как количество правильных выборов-ошибок определения положения (Hernandez-Rabaza et al. 2010).
Результаты
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим восстанавливал пространственное обучение у крыс с гипераммониемией в радиальном лабиринте. Крысы с гипераммониемией демонстрируют сниженное пространственное обучение и совершают больше рабочих ошибок в задании радиального лабиринта. Пространственная память полностью восстанавливалась при помощи 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима (Фиг. 2).
Пример 3.
Терапевтическое действие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в животной модели печеночной энцефалопатии
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 2.
Пространственная память в водном лабиринте Морриса
Лабиринт разработан как способ для оценки пространственного обучения (Morris R. 1984). Тест осуществляли с использованием черного круглого бассейна (диаметром 160 см, высотой 40 см), условно разделенного на четыре квадранта. Непрозрачности воды достигали путем добавления черного красителя. Прозрачную платформу из плексигласа диаметром 10 см погружали на 2 см под поверхность воды в центре одного квадранта во время раундов тренировки (Monfort et al., European Journal of Neuroscience, 2007, 25, 2103-211).
Тест осуществляли следующим образом; первые сутки представляли собой сутки до тренировки, крыс помещали в воду дважды на 30 с исключительно для адаптации к воде. Затем крыс тренировали запоминать фиксированное расположение невидимой платформы в течение 3 суток. Каждое тренировочное испытание включало размещение крысы в бассейне мордой к стенке в одном из трех квадрантов, не содержащих платформу. Различные исходные точки размещения произвольным образом использовали в каждом испытании. Тренировка состояла из пяти заплывов в сутки. Каждому животному давали максимум 120 с для нахождения платформы, и его оставляли на 15 с на платформе. Если крысе не удавалось обнаружить платформу в течение 120 с, тогда экспериментатор вручную направлял ее к платформе. Задача этого теста заключалась в том, чтобы крысы выучили расположение невидимой платформы и достигали ее в самое короткое возможное время. Время, скорость и путь, необходимые для нахождения спрятанной платформы, регистрировали при помощи системы записи видеоизображения, предоставленной Viewpoint Company (Viewpoint 2.5, Champagne au Mont D` Or, Франция), и использовали в качестве показателя обучения заданию. После 15 тренировочных испытаний платформы удаляли из бассейна, крысам давали возможность поплавать в течение 90 с в бассейне, и регистрировали время нахождения в квадранте, в котором располагалась платформа во время тренировки.
Результаты
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим полностью восстанавливал пространственную память у крыс с гипераммониемией в водном лабиринте Морриса. Крысы с гипераммониемией демонстрировали уменьшенную память и требовали для нахождения платформы больше времени, чем контрольные (Фиг. 3).
Пример 4.
Терапевтическое действие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в животной модели печеночной энцефалопатии
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 2.
Моторная координация в прохождении по бревну
В тесте прохождения по бревну крысы тренировались пересекать поднятое узкое бревно для достижения изолированной спасительной платформы. Бревно изготовлено из гладкого круглого дерева (20 мм в диаметре). Бревно поднято на 1 м над полом. Параметры измеряемой моторной координации: скольжения конечностей (или нарушения походки) и задержка в пересечении бревна. (Jover et al., 2006; Carter et al., 2010). Для привыкания крысы экспериментатор помещал ее в начало бревна и помогал крысе пересекать бревно трижды. После этого тест состоял из трех последовательных испытаний. Количество раз, когда левая или правая задняя лапа соскальзывала с бревна, регистрировали для каждого испытания.
Результаты
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим полностью восстанавливал моторную дискоординацию у крыс с гипераммониемией в тесте прохождения по бревну. Крысы с гипераммониемией демонстрировали моторную дискоординацию (увеличенное количество скольжений = нарушений походки) (Фиг. 4).
Пример 5.
Концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в плазме крови и ткани головного мозга после экзогенного введения
Получение плазмы крови
Кровь отбирали из хвоста крыс (в соответствии с примером 2) в конце второй недели обработки аммиаком и первой недели обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом, и также из шеи во время умерщвления животного. Для получения плазмы крови в нее добавляли 7,5 нМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота) и центрифугировали при 1500 об./мин в течение 5 минут.
Определение аммиака
Концентрацию аммиака в образцах крови измеряли с использованием анализатора аммиака Pocket chem ВА (Woodley Equipment Company Ltd, Великобритания). Устройство обеспечивает возможность для немедленного тестирования и выдает результаты в течение 3 минут и 20 с. Оно также устраняет необходимость в предварительных обработках, таких как центрифужное разделение.
Умерщвление
Крыс умерщвляли путем декапитации. Одну половину головного мозга, содержащую мозжечок, собирали и консервировали при -80°С для определения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима. Различные области головного мозга (мозжечок, кора головного мозга, гиппокамп и полосатое тело) иссекали и консервировали при -80°С для возможного определения GAMS.
Анализ ионцентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
Собранные образцы головного мозга и плазмы крови анализировали в отношении концентраций 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима. Образцы плазмы крови и головного мозга оттаивали при комнатной температуре. Белок плазмы крови осаждали при помощи 3-х объемов ацетонитрила, и ткань головного мозга гомогенизировали в отношении 1:4 ткань : PBS (физиологический раствор, забуференный фосфатом) (рН 7,4) и затем экстрагировали 2 объемами метанол : ацетонитрил (1:1) в течение 20 мин во время ультразвуковой обработки. После этого образцы встряхивали и центрифугировали в течение 10 мин при 10000 × g (центрифуга Heraeus Pico 17). Супернатант затем разбавляли равным объемом PBS и анализировали. Некоторые образцы повторно анализировали в виде 10-кратных разведений из-за слишком высокой концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима. Разведения готовили 37,5% раствором ацетонитрила в буфере PBS.
Стандарты готовили путем внесения контрольной плазмы крови/гомогената головного мозга в концентрации 0,5 - 5000 нг/мл, а в остальном обрабатывали как образцы. Определение осуществляли при помощи LC-MS (жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии).
Результаты
Определение аммиака: 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим не влиял на уровни аммиака в крови. Уровни аммиака в крови увеличивались у крыс, получающих аммониевую диету (167±17 мкМ), по сравнению с контрольными крысами (47±3 мкМ). 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим не влиял на уровни аммиака в крови контрольных крыс (55±7 мкМ) или у крыс с гипераммониемией (139±15 мкМ) (Фиг. 1). Эти результаты являются неожиданными, поскольку все более ранние исследования, показавшие действие в отношении симптомов печеночной энцефалопатии, демонстрировали уменьшенные уровни аммиака.
Определение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима после воздействия
В настоящем исследовании общую концентрацию 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в плазме крови анализировали на пятые сутки обработки и на последней неделе обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксимом через четыре часа и 23 часа после инъекции, соответственно. Концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в плазме крови представлены на Фиг. 5, а концентрации в головном мозге на Фиг. 6. На пятые сутки обработки концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима были ниже через 23 часа после инъекции, чем через 4 часа после инъекции, тогда как на последней неделе обработки похожие концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима были обнаружены как через 4 часа, так и через 23 часа в обеих группах, соответственно. В головном мозге похожие концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима были обнаружены у контрольных крыс (91±4,1 нмоль/кг несвязанный* 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим) и у крыс НА (106±15,4 нмоль/кг несвязанный* 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим) через 1-2 ч после последней обработки (Фиг. 6). Концентрации продемонстрировали неожиданно высокие уровни и стабильные концентрации в течение 24 часов.
Несвязанная концентрация в головном мозге = фракция 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима в головном мозге, которая не связана с белком-носителем или тканью головного мозга.
Пример 6.
Способность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима оказывать антагонистическую активность против действия THDOC, но не GABA в отношении рецептора GABAA
Электрофизиологическая фиксация напряжения на цельных клетках с рецепторами α1β2γ2L и α5β3γ2L GABAA
Для электрофизиологическмих измерений использовали систему Dynaflow® с чипом Resolve (Cellectricon, Goteborg, Швеция). Клетки HEK-293 постоянно трансфицировали векторами, включающими промотор человеческого CMV (цитомегаловируса) для конститутивной экспрессии субъединиц α5, β3, и γ2L человеческого рецептора GABAA (α5β3γ2L) или субъединиц α1, β2, и γ2L человеческого рецептора GABAA (α1β2γ2L). Используемые клеточные линии отбирали в отношении хорошей реактивности к GABA и к THDOC. Перед измерениями клетки инкубировали в течение 15 мин при 37°С в 95% воздухе + 5% CO2 во внеклеточном растворе (ЕС), содержащем следующие компоненты: 137 мМ NaCl, 5,0 мМ KCl, 1,0 мМ CaCl2, 1,2 мМ MgCl2, 10 мМ HEPES и 10 мМ глюкоза, 0,1% DMSO, рН 7,4. После этого отделенные клетки добавляли к раствору ЕС в ванночке для чипа Dynaflow.
Регистрации фиксации напряжения на цельных клетках осуществляли при комнатной температуре (21-23°С, -17 мВ для компенсации потенциала жидкостного соединения как у Haage et al., 2002; Neher, 1992). Генерировали управляющие импульсы, и данные собирали при помощи программного обеспечения PCIamp 9.0, конвертер DigiData 1322А и AxonPatch 200В (Axon Instruments, Foster City, CA). Контактные прижимные электроды (2-6 MQ) заполняли внутриклеточным раствором (IC), включающим: 140 мМ Cs-глюконат, 3,0 мМ NaCl, 1,2 мМ MgCl2, 10 мМ HEPES, 1,0 мМ EGTA (этиленгликольтетрауксусная кислота), 2 мМ Mg-АТР, 0,1% DMSO, рН 7,2.
THDOC и 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим растворяли в диметилсульфоксиде (DMSO) и затем разбавляли раствором ЕС, включающим 0,1% DMSO.
Для различных электрофизиологических измерений использовали разные протоколы. Поскольку рецепторы α1β2γ2L-GABAA in vivo находятся в синапсе, то для состояния, напоминающего эту ситуацию, использовали краткосрочное применение (40 мс) высокой концентрации GABA (30 мкМ). Наоборот, поскольку рецепторы α5β3γ2L- GABAA присутствуют вне синапсов, тогда используемые состояния представляли собой длительные воздействия (6 с) низких концентраций GABA (0,3 мкМ). В отношении THDOC использовали концентрацию ЕС75 (т.е. 75% эффективную концентрацию), т.е. 100 нМ для исследований α1β2γ2L и 200 нМ при оценке клеток, экпрессирующих α5β3γ2L Для обоих типов клеток предварительное воздействие THDOC или THDOC с 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном использовали до применения GABA.
Действия стероидов в присутствии GABA нормализовали к контролям для того чтобы избежать действия межклеточной и внутриклеточной вариации измеряемых параметров, где каждую клетку использовали в качестве своего собственного контроля, и анализировали площадь под кривой (AUC).
Результаты
Действия 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении рецептора GABAA исследовали при помощи электрофизиологических измерений на рекомбинантных клетках HEK293, экспрессирующих человеческие варианты рецептора. Усиленная 100 нМ THDOC активация рецептора α1β2γ2L GABAA в присутствии GABA представлена на Фиг. 7.
3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он (1 мкМ) частично оказывает антагонистическое действие против действия THDOC в отношении вариантов субъединицы α1β2γ2L и α5β3γ2L рецептора GABAA (Фиг. 8А и С). В отношении рецепторов α1β2γ2L 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он ингибирует 29±4,7% опосредованного THDOC усиления GABA (Р<0,001) и в отношении рецептора α5β3γ2L ингибирование составляло 49±4,7% (Р<0,001, таблица 1).
Наоборот, 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он (1 мкМ) не оказывает антагонистического действия против GABA-активации рецептора GABAA (Фиг. 8В и D). Отсутствует значимое действие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении рецептора α1β2γ2L GABAA (-3,1±1,7%, NS (не значимо)) или рецептора α5β3γ2L GABAA (-3,8±1,5%, NS), когда GABA представляет собой единственный активатор рецептора (Таблица 1).
Пример 7
Избирательность 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении других мишеней и рецепторов
Связывание 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она определяли для рецепторов, ионных каналов и ферментов, включающих все основные классы рецепторов нейромедиаторов. В общей сложности тестировали 113 мишеней в двух параллелях с 10 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она (Perkin Elmer, индивидуально адаптированный отбор). Активность связывания определяли как превышающую или равную 50% ингибированию связывания лиганда.
Результаты
В концентрации 10 мкМ 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он не демонстрировал связывающую активность в отношении любого из исследованных рецепторов нейромедиаторов, стероидных рецепторов или пептидных рецепторов.
Пример 8.
Терапевтическое действие 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она на моторную координацию у крыс с НЕ и анастомозом между воротной и полой веной
Обработка и схема тестирования
Хроническая гипераммониемия у крыс. У самцов крыс Wistar (140-160 г) вызывали гипераммониемию путем кормления их пищей, содержащей ацетат аммония (30% по массе) (Felipo et al, European Journal of Biochemistry, 1988, 176, 567-571).
Анастомоз между воротной и полой веной. Самцов крыс Wistar (220-240 г) анестезировали изофлураном, и терминолатеральный анастомоз между воротной и полой веной осуществляли, как описано Lee и Fisher (Surgery, 1961, 50, 668-672). Контрольные крысы подвергались ложной операции; у них на 10 мин пережимали воротную вену и нижнюю полую вену.
Крысы, которые подвергались процедуре анастомоза между воротной и полой веной, здесь обозначены как "крысы PCS".
Адекватные меры принимали для минимизации боли и дискомфорта у животных. Эксперименты были одобрены Comite de Experimentation у Bienestar Animal (СЕВА) в соответствии с Центром и осуществляли в соответствии с Указаниями Европейской Комиссии (Directive of the European Commission) (2010/63/EU) и испанским законодательством (R.D. 1201/2005 по уходу и обращению с экспериментальными животными).
Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном. 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он в кунжутном масле вводили путем подкожных инъекций в спину крыс один раз в сутки. Две различных серии экспериментов осуществляли у крыс с гипераммониемией. В первой серии использовали четыре группы крыс: 1) контрольные крысы, которым инъецировали разбавитель; 2) крысы с гипераммониемией, которым инъецировали разбавитель; 3) контрольные крысы, которым инъецировали 20 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она и 4) крысы с гипераммониемией, которым инъецировали 20 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она.
Контрольных крыс, которым инъецировали 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он, не включали далее, поскольку никакого релевантного действия у этих крыс не обнаружили.
Во второй серии экспериментов использовали пять групп крыс: 1) контрольные крысы, которым инъецировали разбавитель; 2) крысы с гипераммониемией, которым инъецировали разбавитель, и 3-5) крысы с гипераммониемией, которым инъецировали 3, 10 или 20 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она. В каждом эксперименте использовали 6-8 крыс на группу.
Для экспериментов с крысами PCS использовали следующие группы крыс: 1) крысы, подвергшиеся ложной операции, которым инъецировали разбавитель; 2) крысы PCS, которым инъецировали разбавитель; 3-4) крысы PCS, которым инъецировали 0,7 или 2,5 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она. Количество крыс, используемых в каждом эксперименте, представлено на соответствующей Фигуре или приведено в описании соответствующей Фигуры
Статистический анализ.
Приведенные данные представляют собой среднее значение±SEM (стандартная ошибка среднего значения) количества крыс, указанное на каждой из Фиг. Статистическую значимость оценивали при помощи двустороннего ANOVA (дисперсионного анализа) и послеэкспериментального теста Бонферрони, и при помощи t-теста Стьюдента, когда сравнивают только один параметр. Анализы осуществляли с использованием программного обеспечения GraphPad PRISM для Windows (GraphPad software Inc., La Jolla, CA, USA).
Моторная координация. Тест прохождения по бревну.
Моторную координацию тестировали, как описано Gonzalez-Usano et al (ACS Chemical Neuroscience, 2014, 19, 5(2), 100-105), с использованием деревянного бревна (диаметром 20 мм). Крыс заставляли пересекать деревянное бревно длиной один метр, расположенное на высоте приблизительно один метр над полом, и количество нарушений походки (скольжений) регистрировали два исследователя. Крыс тренировали для теста путем того, что их заставляли пересекать бревно до пяти раз перед регистрацией результатов измерений. Количество нарушений походки (скольжений) представляет собой показатель моторной дискоординации.
Результаты
Продемонстрировано, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он восстанавливал моторную координацию у крыс с гипераммониемией и крыс PCS.
Крысы с гипераммониемией демонстрируют моторную дискоординацию в тесте прохождения по бревну с большим (р<0,05) количеством скольжений (1,4±0,1) чем контрольные крысы (1,0±0,1). Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном восстанавливает моторную координацию у крыс с гипераммониемией (Фиг. 9А). Действия были статистически значимыми для доз 3 мг/кг (0,8±0,1 скольжений, р<0,05) и 20 мг/кг (0,78±0,07 скольжений, р<0,05).
Крысы PCS также демонстрируют моторную дискоординацию в тесте прохождения по бревну с большим (р<0,01) количеством скольжений (1,2±0,1) чем контрольные крысы, перенесшие ложную операцию (0,71±0,07). Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном также восстанавливает моторную координацию у крыс PCS (Фиг. 9В). Количество скольжений для дозы 0,7 мг/кг составляло 0,75±0,10 (р<0,05 по сравнению с крысами PCS). В дозе 2,5 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он также улучшал моторную координацию, возвращаясь к значениям, похожим на значения для крыс, перенесших ложную операцию (0,8±0,1 скольжений; р по сравнению с крысами PCS = 0,058) (Фиг. 9В).
Пример 9.
Терапевтический эффект 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении пространственной памяти и пространственного обучения у крыс с НЕ и анастомозом между воротной и полой веной
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 8. Пространственная память и обучение в тесте водного лабиринта Морриса
Тест осуществляли, как описано Monfort et al. (European Journal of Neuroscience, 2007, 25, 2103-2111) с использованием круглого бассейна (диаметром 160 см, высотой 40 см), условно разделенного на четыре квадранта. После предварительной тренировки крысы тренировались заучивать фиксированное расположение невидимой платформы в течение 3 суток. Тренировка включала размещение крысы в бассейне мордой к стенке в одном из трех квадрантов, не содержащих платформу. Различные исходные точки размещения произвольным образом использовали в каждом испытании. Тренировка состояла из трех заплывов в сутки. Каждому животному давали максимум 120 с для нахождения платформы, и его оставляли на 20 секунд на платформе. Если крысе не удавалось обнаружить платформу в течение 120 с, тогда экспериментатор вручную направлял ее к платформе. Время, необходимое для нахождения скрытой платформы, регистрировали вручную и использовали в качестве показателя обучения заданию.
Пространственную память оценивали через 24 часа путем извлечения платформы и измерения времени, проведенного крысой в квадранте, где была платформа.
Результаты.
Продемонстрировано, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он восстанавливает пространственную память в тесте водного лабиринта Морриса у крыс с гипераммониемией и крыс PCS.
Крысы с гипераммониемией демонстрировали ослабленную пространственную память в водном лабиринте Морриса. Все группы крыс обучались находить платформу, и задержка в ее достижении уменьшалась в течение трех суток тренировки (Фиг. 10А). Способность к обучению была несколько снижена у крыс с гипераммониемией, которым требовалось больше времени, чем контрольным крысам для достижения платформы.
Пространственная память значимо ухудшалась (р<0,05) у крыс с гипераммониемией. В тесте памяти крысы с гипераммониемией проводили меньше времени (30±2% времени) в правильном квадранте, чем контрольные крысы (39±2% времени). Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном восстанавливала пространственную память в водном лабиринте Морриса у крыс с гипераммониемией. Процентная доля времени, проведенного в правильном квадранте, составляла 41±4, 42±5 и 38±3, для доз 3, 10 и 20 мг/кг, соответственно (Фиг. 10В).
Крысы PCS также демонстрировали ослабленную пространственную память в водном лабиринте Морриса. Все группы крыс учились находить платформу, и задержка в ее достижении уменьшалась в течение трех суток тренировки (Фиг. 10С). Пространственная память значимо ухудшалась (р<0,05) у крыс PCS. В тесте памяти крысы PCS оставались меньше времени (31±3% времени) в правильном квадранте, чем контрольные крысы (41±2% времени). Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном восстанавливала пространственную память в водном лабиринте Морриса у крыс PCS. Процентная доля времени, проведенного в правильном квадранте, составляла 34±4 и 39±3 для доз 0,7 и 2,5 мг/кг, соответственно (Фиг. 10D).
Пример 10.
Терапевтический эффект 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении пространственного обучения у крыс с НЕ и анастомозом между воротной и полой веной
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 8.
Пространственное обучение в тесте радиального лабиринта.
Аппарат состоял из центральной зоны, обеспечивающей доступ к восьми ответвлениям равного размера. Ответвления имели длину 70 см и ширину 10 см, а центральная зона имела диаметр 30 см. На удаленном крае каждого ответвления имелся колпачок, содержащий корм для поощрения. Крысам давали возможность исследовать лабиринт в течение 10 минут в течение двух суток подряд в присутствии удаленных раздражителей для адаптации к лабиринту.
Тренировка в радиальном лабиринте состояла из трех испытаний в сутки в течение шести последовательных суток. Задание включало расположение четырех шариков, каждый из которых размещался в конце различных ответвлений в соответствии со случайной конфигурацией, как описано Hernandez-Rabaza et al. (Addiction Biology, 2010, 15, 413-423). Количество рабочих ошибок памяти (посещения ответвлений, уже посещенных в том же самом испытании), регистрировали и выражали как рабочие ошибки.
Результаты
Обнаружено, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он восстанавливает пространственное обучение в тесте радиального лабиринта.
Крысы с гипераммониемией демонстрируют ухудшенное пространственное обучение в радиальном лабиринте. Как представлено на Фиг. 11А, количество рабочих ошибок было выше у крыс с гипераммониемией, чем у контрольных крыс на 1-3 сутки. Все группы крыс обучались в течение суток тренировки, и различие между контрольными крысами и крысами с гипераммониемией было незначимым после 3 суток. (Фиг. 11А). Количество рабочих ошибок на 1-2 сутки было выше (р<0,05) у крыс с гипераммониемией (18±3 ошибок), чем у контрольных крыс (11±1,5 ошибок). Крысы с гипераммониемией, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном, вели себя как контрольные крысы. Количество ошибок (не значимо отличающееся от контролей) составляло 6,5±2,8, 8,8±1,9 и 12±2, для доз 3, 10 и 20 мг/кг дозы, соответственно (Фиг. 11В-С).
Крысы PCS также демонстрируют ухудшенное пространственное обучение в радиальном лабиринте. Как представлено на Фиг. 11С, количество рабочих ошибок было выше у крыс PCS чем у крыс, подвергнутых ложной операции, на 1 и 2 сутки. Все группы крыс обучались в течение всех дней тренировки, и различие между крысами, подвергнутыми ложной операции, и крысами PCS не было значимым после 3 суток (Фиг. 11С). Количество рабочих ошибок на 1-2 сутки (Фиг. 11D) было выше (р<0,01) у крыс PCS (22±2 ошибок) чем у крыс, подвергнутых ложной операции (10±2 ошибок). Обработка крыс PCS 0,7 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она не была достаточной для того, чтобы улучшить эффективность в радиальном лабиринте (23±2 ошибок). Обработка 2.5 мг/кг полностью приводила в норму эффективность у крыс PCS в радиальном лабиринте (11±1 ошибок, р<0,05 по сравнению с PCS).
Пример 11.
Терапевтический эффект 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в отношении циркадных ритмов и ночной моторной активности у крыс PCS
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 8.
Циркадные ритмы спонтанной локомоторной активности
Моторную активность измеряли с использованием актиметра (Med Associates, S t. Albans, VT). Крыс индивидуально размещали в камере для измерения активности типа "открытое поле" (43×43×31 см), и моторную активность регистрировали непрерывно в течение 14 суток в условиях свет-темнота (L.D), 12 ч : 12 ч. Данные регистрировали с интервалами 5 минут. Моторную активность обнаруживали при помощи массива инфракрасных датчиков движения, расположенных в трех направлениях х, y и z. Один отсчет двигательной активности регистрируют при помощи аппарата, когда крыса пересекает три последовательных инфракрасных датчика в позиции х или у. Вертикальный отсчет регистрируют, когда крыса пересекает инфракрасные датчики в позиции z. Программное обеспечение дает возможность для измерения различных параметров моторной активности, таких как отсчеты хождения или вертикальные отсчеты (Ahabrach et al. Journal of Neuroscience Research, 2010, 88, 1605-14).
Результаты.
Обнаружено, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он увеличивает спонтанную моторную активность в течение ночи и частично восстанавливает циркадный ритм у крыс PCS.
Крысы PCS демонстрируют пониженную моторную активность (отсчеты хождения) в течение ночи (активная фаза крыс), демонстрирующую 1849±176 отсчетов, что является значимо (р<0,05) меньшим чем у контрольных крыс (4546±584 отсчетов). 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он в дозе 0,7 мг/кг слегка увеличивал (р<0,05) активность у крыс PCS до 2652±275 отсчетов. 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он в дозе 2,5 мг/кг не влиял на отсчеты хождения (2235±170 отсчетов для 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она) (Фиг. 12А и 12С).
Отношение двигательной активности в течение ночи по сравнению с активностью в течение дня уменьшалось у крыс PCS, указывая на измененный циркадный ритм (Фиг. 12В). Для контрольных крыс это отношение составляло 3,3±0,4 и уменьшалось (р<0,001) у крыс PCS до 0,8±0,16. Крысы PCS, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном, демонстрировали частичное, но значимое улучшение (р<0,05) отношения активности ночь/день, достигая 1,7±0,2 и 1,6±0,3 для 0,7 и 2,5 мг/кг, соответственно (Фиг. 12В). Последнее указывает на частичное восстановление циркадного ритма активности.
Также обнаружено, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он нормализовал вертикальную активность в течение дня и частично восстанавливал циркадный ритм у крыс PCS.
Крысы PCS демонстрировали уменьшенную вертикальную активность в течение ночи (активная фаза крыс), демонстрируя 561±108 отсчетов, что было значимо (р<0,05) меньше чем у контрольных крыс (1228±138 отсчетов). 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он в дозе 0,7 мг/кг или 2,5 мг/кг не влиял на вертикальную активность в течение ночи (664±121 и 695±185 отсчетов, соответственно) (Фиг. 12А и 12С).
Наоборот, крысы PCS демонстрировали увеличенную вертикальную активность в течение дня, демонстрируя 682±114 отсчетов, что было значимо (р<0,05) выше, чем у контрольных крыс (391±64 отсчетов). 3α-Этинил-3β-гидроксиандростан-17-он в дозе 0,7 мг/кг или 2,5 мг/кг полностью нормализовал вертикальную активность в течение дня, достигая 339±47 и 424±44 отсчетов, соответственно. (Фиг. 12А и 12С).
Отношение вертикальной активности в течение ночи к активности в течение дня также уменьшалось у крыс PCS, указывая на измененный циркадный ритм (Фиг. 12В). Для контролей это отношение составляет 3,7±0,6 и уменьшалось (р<0,001) у крыс PCS до 0,8±0,01. Крысы PCS, обработанные 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном, демонстрировали частичное, но значимое улучшение (р<0,01) в отношении активности ночь/день, достигая 2,1±0,4 и 1,9±0,6 для 0,7 и 2,5 мг/кг, соответственно (Фиг. 12В). Последнее указывает на частичное восстановление циркадного ритма вертикальной активности.
Пример 12.
Эффект обработки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном на концентрацию аммиака в крови у крыс с гипераммониемией и крыс PCS
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 8.
Определение аммиака
Уровень аммиака в крови измеряли с использованием набора II Ammonia Arkray test (PocketChem BA, Arkray) с использованием 20 мкл свежей крови в соответствии с указаниями производителя.
Результаты
Обнаружено, что 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-он не влиял на уровни аммиака у крыс с гипераммониемией и крыс PCS.
Уровни аммиака в крови увеличивались (р<0,001) у крыс с гипераммониемией 167±16 мкМ по сравнению с контролями (47±3 мкМ). Обработка 20 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она не влияла на уровни аммиака у крыс с гипераммониемией (139±14 мкМ).
Аналогичные результаты были получены у крыс PCS. Уровни аммиака в крови увеличивались (р<0,001) у крыс PCS (348±27 мкМ) по сравнению с крысами, перенесшими ложную операцию (125±31 мкМ). Обработка 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-оном не влияла на уровень аммиака в крови, который оставался на уровне 302±30 и 294±37 мкМ у крыс PCS, обработанных 0,7 и 2,5 мг/кг 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она, соответственно.
Пример 13.
Концентрация 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в плазме крови и ткани головного мозга у крыс с гипераммониемией и крыс PCS после периода обработки
Обработка и схема тестирования
Обработка и схема тестирования были такими, как изложено в примере 8. Анализ концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она К концу периода обработки плазму крови собирали из хвостовой вены, и после умерщвления путем декапитации образцы головного мозга собирали и немедленно замораживали на сухом льду. Для анализа концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она ткань головного мозга гомогенизировали в отношении 1:4 ткань : PBS (рН 7.4) и затем экстрагировали 2 объемами метанол : ацетонитрил (1:1), тогда как белки плазмы крови осаждали 3 объемами ацетонитрила. Анализы осуществляли при помощи тройного квадрупольного масс-спектрометра Waters ACQUITY UPLC + Waters XEVO-TQS (Admescope Oy, Oulu, Финляндия). Для расчетов концентрации свободного 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в головном мозге не связанную фракцию (Fub) в гомогенатах головного мозга определяли путем диализа, Fub в НА = 0,70 и Fub в PCS = 1,43% (Admescope Oy, Oulu, Финляндия). Результаты
У крыс с гипераммониемиейы введение один раз в сутки 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в дозе 3, 10 и 20 мг/кг приводило в результате к зависимой от дозы концентрации в плазме крови и в ткани головного мозга. В момент тестирования поведения общие концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она в плазме крови составляли 0,34±0,03, 1,08±0,11, 1,95±0,61 мкМ, соответственно, и в ткани головного мозга не связанные концентрации 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она составляли 6,1±1,4, 11,6±1,4, 23±5 нмоль/кг, соответственно (Фиг. 14А).
Также у крыс PCS концентрации зависели от дозы, и при меньших дозах, используемых у этих крыс 0,7 и 2,5 мг/кг, концентрации были весьма близки к концентрациям у крыс с гипераммониемией. Общие концентрации в плазме крови составляли 0,48±0,09, и 1,64±0,30 мкМ, при 0,7 и 2,5 мг/кг/сутки соответственно, и не связанные концентрации в головном мозге составляли 6,18±0,97 и 17±2 нмоль/кг, соответственно, в момент тестирования поведения.
Claims (32)
1. Применение соединения 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксим
или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения печеночной энцефалопатии.
2. Применение по п. 1, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой минимальную печеночную энцефалопатию.
3. Применение по п. 1, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой клинически выраженную печеночную энцефалопатию.
4. Применение по п. 1, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа А.
5. Применение по п. 1, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа В.
6. Применение по п. 1, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа С.
7. Применение по любому из пп. 1-6, где лечение включает предупреждение печеночной энцефалопатии.
8. Применение по любому из пп. 1-6, где указанное соединение вводят пациенту с острой печеночной недостаточностью.
9. Применение по любому из пп. 1-6, где указанное соединение вводят пациенту с хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
10. Применение по п. 1, где указанное соединение вводят до, во время или после пересадки печени.
11. Применение по п. 1, где лечение включает совместное введение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима с соединением, понижающим уровень аммиака.
12. Применение по п. 11, где соединение, понижающее уровень аммиака, выбрано из группы, состоящей из рифаксимина, лактулозы, орнитина фенилацетата и глицерина фенилбутирата.
13. Применение по п. 11 или 12, где соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой лактулозу.
14. Применение по п. 11, где соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин.
15. Способ лечения печеночной энцефалопатии, включающий введение фармацевтически эффективного количества 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима
или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, нуждающемуся в таком введении.
16. Способ по п. 15, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой минимальную печеночную энцефалопатию.
17. Способ по п. 15, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой клинически выраженную печеночную энцефалопатию.
18. Способ по п. 15, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа А.
19. Способ по п. 15, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа В.
20. Способ по п. 15, где указанная печеночная энцефалопатия представляет собой печеночную энцефалопатию типа С.
21. Способ по любому из пп. 15-20, где способ лечения печеночной энцефалопатии включает предупреждение печеночной энцефалопатии.
22. Способ по любому из пп. 15-20, где указанный пациент страдает острой печеночной недостаточностью.
23. Способ по любому из пп. 15-20, где указанный пациент страдает хроническим заболеванием печени с обострением хронической печеночной недостаточности или без него.
24. Способ по любому из пп. 15-20, где указанное соединение вводят до, во время или после пересадки печени.
25. Способ по п. 15, где лечение включает совместное введение 3α-этинил-3β-гидроксиандростан-17-она оксима с соединением, понижающим уровень аммиака.
26. Способ по п. 25, где соединение, понижающее уровень аммиака, выбрано из группы, состоящей из рифаксимина, лактулозы, орнитина фенилацетата и глицерина фенилбутирата.
27. Способ по п. 26, где соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой лактулозу.
28. Способ по п. 26, где соединение, понижающее уровень аммиака, представляет собой рифаксимин.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE1450089-6 | 2014-01-29 | ||
| SE1450089 | 2014-01-29 | ||
| PCT/GB2015/050060 WO2015114308A1 (en) | 2014-01-29 | 2015-01-14 | Steroid compound for use in the treatment of hepatic encephalopathy |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016127558A RU2016127558A (ru) | 2018-03-05 |
| RU2016127558A3 RU2016127558A3 (ru) | 2018-09-27 |
| RU2684616C2 true RU2684616C2 (ru) | 2019-04-10 |
Family
ID=52544513
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016127558A RU2684616C2 (ru) | 2014-01-29 | 2015-01-14 | Стероидное соединение для применения в лечении печеночной энцефалопатии |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US20160339040A1 (ru) |
| EP (1) | EP3099306B1 (ru) |
| JP (1) | JP6543633B2 (ru) |
| KR (1) | KR102324667B1 (ru) |
| CN (2) | CN106163528A (ru) |
| AU (1) | AU2015212606B2 (ru) |
| BR (1) | BR112016017620A2 (ru) |
| CA (1) | CA2935015C (ru) |
| CY (1) | CY1121464T1 (ru) |
| DK (1) | DK3099306T3 (ru) |
| ES (1) | ES2714563T3 (ru) |
| HR (1) | HRP20190251T1 (ru) |
| HU (1) | HUE042242T2 (ru) |
| IL (1) | IL246496B (ru) |
| LT (1) | LT3099306T (ru) |
| ME (1) | ME03351B (ru) |
| MX (1) | MX2016008851A (ru) |
| PL (1) | PL3099306T3 (ru) |
| PT (1) | PT3099306T (ru) |
| RS (1) | RS58375B1 (ru) |
| RU (1) | RU2684616C2 (ru) |
| SI (1) | SI3099306T1 (ru) |
| TR (1) | TR201901687T4 (ru) |
| WO (1) | WO2015114308A1 (ru) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TR201901687T4 (tr) | 2014-01-29 | 2019-02-21 | Umecrine Cognition Ab | Hepatik ensefalopati tedavisinde kullanıma yönelik steroid bileşik. |
| TWI748936B (zh) | 2015-01-12 | 2021-12-11 | 瑞典商優鎂奎認知Ａｂ公司 | 新穎化合物 |
| US10278977B2 (en) | 2016-06-06 | 2019-05-07 | Umecrine Cognition Ab | Methods for treating hypersomnolence |
| DK3668927T3 (da) | 2017-09-12 | 2024-03-25 | Eth Zuerich | Transmembran ph-gradient polymersom til kvantificering af ammoniak i kropsvæsker |
| EP3716954A1 (en) * | 2017-11-27 | 2020-10-07 | Umecrine Cognition AB | Pharmaceutical formulation of 3 -ethynyl-3 -hydroxyandrostan-17-one oxime |
| EP4079307A1 (en) | 2021-04-20 | 2022-10-26 | Umecrine Cognition AB | New medical use |
| US20230134958A1 (en) * | 2021-10-29 | 2023-05-04 | Umecrine Cognition Ab | New medical treatment |
| EP4389129A1 (en) * | 2022-12-22 | 2024-06-26 | Umecrine Cognition AB | 3a-ethynyl-3beta hydroxyandrostan 17-one oxime for treating parkinson's disease and l-dopa-induced dyskinesia |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007103162A2 (en) * | 2006-03-01 | 2007-09-13 | Samaritan Pharmaceuticals, Inc. | Structure based drug design of steroidogenesis inhibitors |
| WO2008063128A1 (en) * | 2006-11-21 | 2008-05-29 | Umecrine Ab | The use of pregnane and androstane steroids for the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of cns disorders |
| RU2358733C2 (ru) * | 2001-12-06 | 2009-06-20 | ЭЙСАЙ Ар ЭНД Ди МЕНЕДЖМЕНТ КО.,ЛТД. | Фармацевтические композиции и их применения |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2713061A (en) | 1951-04-06 | 1955-07-12 | Schering Ag | 3-methyl androstanes |
| FR1463755A (fr) | 1960-01-26 | 1966-07-22 | Nouveaux stéroïdes de la série de l'androstane et leur procédé de préparation | |
| US3173932A (en) | 1962-11-02 | 1965-03-16 | American Cyanamid Co | 15-substituted estra-1, 3, 5(10)-trienes |
| FR2685332A1 (fr) | 1991-12-20 | 1993-06-25 | Roussel Uclaf | Nouveaux 19-nor sterouides ayant en position 11beta une chaine thiocarbonee, leur procede de preparation et les intermediaires et leur application a titre de medicaments. |
| EP0701444B1 (en) | 1993-05-24 | 2010-04-07 | Purdue Pharma Ltd. | Methods and compositions for inducing sleep |
| DE69927960T2 (de) | 1998-03-11 | 2006-07-20 | Torbjörn Backström | Epiallopregnanolon zur behandlung von krankheiten des cns |
| US6593321B2 (en) | 2001-06-11 | 2003-07-15 | Southwest Foundation For Biomedical Research | 2-alkoxyestradiol analogs with antiproliferative and antimitotic activity |
| SE0104423D0 (sv) * | 2001-12-27 | 2001-12-27 | Umecrine Ab | Pregnane steroids and their use in the treatment of CNS disorders |
| SI1824563T1 (sl) | 2004-11-26 | 2010-07-30 | Ucl Business Plc | Sestavki, ki obsegajo ornitin in fenilacetat ali fenilbutirat, za zdravljenje hepatične encefalopatije |
| GB0711948D0 (en) * | 2007-06-20 | 2007-08-01 | Bionature E A Ltd | Neurosteriod compounds |
| CN101585862B (zh) * | 2008-05-20 | 2014-12-17 | 梅克芳股份公司 | 甾族化合物 |
| FI3628319T3 (fi) * | 2008-10-02 | 2024-03-12 | Salix Pharmaceuticals Ltd | Hepaattisen enkefalopatian hoito rifaksimiinilla |
| NZ615091A (en) | 2009-06-08 | 2015-03-27 | Ucl Business Plc | Treatment of portal hypertension and restoration of liver function using l-ornithine phenylacetate |
| EP3019074B1 (en) | 2013-09-30 | 2018-08-29 | Horizon Therapeutics, LLC | Diagnosing, grading, monitoring, and treating hepatic encephalopathy |
| TR201901687T4 (tr) | 2014-01-29 | 2019-02-21 | Umecrine Cognition Ab | Hepatik ensefalopati tedavisinde kullanıma yönelik steroid bileşik. |
-
2015
- 2015-01-14 TR TR2019/01687T patent/TR201901687T4/tr unknown
- 2015-01-14 DK DK15705691.2T patent/DK3099306T3/en active
- 2015-01-14 MX MX2016008851A patent/MX2016008851A/es active IP Right Grant
- 2015-01-14 EP EP15705691.2A patent/EP3099306B1/en active Active
- 2015-01-14 WO PCT/GB2015/050060 patent/WO2015114308A1/en active Application Filing
- 2015-01-14 JP JP2016544557A patent/JP6543633B2/ja active Active
- 2015-01-14 LT LTEP15705691.2T patent/LT3099306T/lt unknown
- 2015-01-14 CN CN201580006600.1A patent/CN106163528A/zh active Pending
- 2015-01-14 ME MEP-2019-39A patent/ME03351B/me unknown
- 2015-01-14 CN CN202110480203.5A patent/CN113185566A/zh active Pending
- 2015-01-14 ES ES15705691T patent/ES2714563T3/es active Active
- 2015-01-14 CA CA2935015A patent/CA2935015C/en active Active
- 2015-01-14 KR KR1020167023426A patent/KR102324667B1/ko active IP Right Grant
- 2015-01-14 US US15/114,972 patent/US20160339040A1/en not_active Abandoned
- 2015-01-14 PT PT15705691T patent/PT3099306T/pt unknown
- 2015-01-14 HU HUE15705691A patent/HUE042242T2/hu unknown
- 2015-01-14 RU RU2016127558A patent/RU2684616C2/ru active
- 2015-01-14 SI SI201530591T patent/SI3099306T1/sl unknown
- 2015-01-14 AU AU2015212606A patent/AU2015212606B2/en active Active
- 2015-01-14 BR BR112016017620A patent/BR112016017620A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-01-14 RS RS20190234A patent/RS58375B1/sr unknown
- 2015-01-14 PL PL15705691T patent/PL3099306T3/pl unknown
-
2016
- 2016-06-28 IL IL246496A patent/IL246496B/en active IP Right Grant
- 2016-11-15 US US15/352,035 patent/US9801894B2/en active Active
-
2017
- 2017-09-27 US US15/716,838 patent/US10342804B2/en active Active
-
2019
- 2019-02-07 HR HRP20190251TT patent/HRP20190251T1/hr unknown
- 2019-03-12 CY CY20191100299T patent/CY1121464T1/el unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2358733C2 (ru) * | 2001-12-06 | 2009-06-20 | ЭЙСАЙ Ар ЭНД Ди МЕНЕДЖМЕНТ КО.,ЛТД. | Фармацевтические композиции и их применения |
| WO2007103162A2 (en) * | 2006-03-01 | 2007-09-13 | Samaritan Pharmaceuticals, Inc. | Structure based drug design of steroidogenesis inhibitors |
| WO2008063128A1 (en) * | 2006-11-21 | 2008-05-29 | Umecrine Ab | The use of pregnane and androstane steroids for the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of cns disorders |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2684616C2 (ru) | Стероидное соединение для применения в лечении печеночной энцефалопатии | |
| JP6876047B2 (ja) | ミトコンドリアの活性酸素種（ｒｏｓ）産生に関連する疾患の治療のための化合物 | |
| Erhardt et al. | Endogenous kynurenic acid disrupts prepulse inhibition | |
| JP2017507113A5 (ru) | ||
| KR101996245B1 (ko) | 선택적 s1p1 수용체 아고니스트를 포함하는 약학 조합물 | |
| JP2023504194A (ja) | インスリン耐性における使用方法のための治療化合物 | |
| WO2014090990A1 (en) | Leukotriene pathway antagonists for the treatment of dementia, cognitive deficits in parkinson's disease and/or learning and memory deficiencies in parkinson's disease | |
| Li et al. | Paraquat increases Interleukin-1β in hippocampal dentate gyrus to impair hippocampal neurogenesis in adult mice | |
| US8741299B2 (en) | Method for treating pathologies associated with hypoxia using MIF inhibitors | |
| BR112015001989B1 (pt) | Uso de butilidenoftalida (bp) | |
| US10653668B2 (en) | Compounds for the treatment of diseases linked to mitochondrial reactive oxygen species (ROS) production | |
| US20210308138A1 (en) | Tissue transglutaminase modulators for medicinal use | |
| NZ721622B2 (en) | Steroid compound for use in the treatment of hepatic encephalopathy | |
| US20210171553A1 (en) | Compositions useful in therapy of autophagy-related pathologies, and methods of making and using the same | |
| US11484608B2 (en) | Non-invasive assessment of hepatic mitochondrial metabolism by positional isotopomer NMR tracer analysis (PINTA) | |
| Strielkov et al. | Hypoxic Pulmonary Hypertension: Current Views on Pathogenesis and Pharmacological Treatment Options | |
| Schwieler | Endogenous Kynurenic Acid and Schizophrenia-Physiological and Pharmacological Aspects |